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Mesures de pH plus rapides et constantes Outils et techniques pour améliorer votre travail
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vos expériences et établissons des normes dans le domaine de la mesure de précision depuis plus de 65 ans. Grand nombre d'échantillons, micro volumes, réactions chimiques déli cates ou conformité réglementaire, avec un appareil de mesure de qua lité, le capteur adapté et la
Optimiser votre recherche Le contrôle de la variation est essentiel
Le contrôle du pH de vos échantillons et réactifs est essentiel pour obtenir des résultats précis et reproductibles.
Les systèmes biologiques sont si sensibles que même des change ments apparemment sans importance de leur environnement peuvent modifier considérablement leur comportement et leurs résultats. Chez METTLER TOLEDO, nous sommes conscients de l'importance de contrôler toute variation dans
Visite virtuelle des sciences de la vieDes opérations de R&D à la livraison du produit, c'est la précision qui comptePage 4
Fiabilité et reproductibilitéDes mesures précises exigent préparation et prévoyance
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La clé de la réussitePour chaque application, il existe une solution de mesure spécifique
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Le calibrage est essentielVotre appareil de mesure correspond-il à vos besoins ?
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En interne
Sélection de l'appareil de mesure
Sélection du capteur
Capteur Calibrage
bonne technique, votre système de mesure peut offrir une fiabilité et une précision exceptionnelles. METTLER TOLEDO propose une large gamme d'appareils de me sure du pH de qualité et des capteurs de haute technologie. Nous disposons du matériel adapté à vos besoins quelle que soit votre application.
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Mesure du pHLa température est un paramètre primordial
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Solutions pH METTLER TOLEDO –Fiables, tout simplement
Mesure de petits échantillonsLes capteurs de pH Micro répondent à vos besoins
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Capteurs Semi-Micro efficaces Petits, solides et polyvalents
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Contrôle de la contaminationPour des résultats fiables
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Exigences pH requisesFiabilité et précision Simplicité d'emploiSolution haut débitAmélioration de la productivité
Risques et coût d'un disfonctionnementRésultats faux positifs/négatifs
– Opportunités manquées– Échec des candidats dans les études cliniques
Équipements complexes :– faible efficacité– formation du personnel longue– risque d'erreurs
Mesures du pH non satisfaisantes– Perte d'échantillons
À chaque étape du processus de développement d'un médicament, les risques relatifs au mesures peuvent affecter de manière négative le délai de mise sur le marché ou la qualité en général. Des tampons pour la chromatographie, l'électrophorèse et l'enzymologie, à la composition du milieu de culture tout doit être absolument correct.
Reconnu pour sa fiabilité et sa précision, METTLER TOLEDO propose une large gamme d'instruments pour réduire le risque lié à la mesure à chaque étape de votre processus de production.
R&D 1 million de composés ID cibles, validation des cibles, découvertes de leads, optimisation des leads
Visite virtuelle des sciences de la vie
Développement clinique
Contrôle de la qualité et des procédés
ProductionR&D
Développement préclinique
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ces
de la
vie Qualité sur l'ensemble du cycle de vie
Précision de la R&D à la production
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Exigences pH requisesFiabilité et précisionCompétence et efficacitéTraçabilité et répétabilitéSimplicité d'emploi
Risques et coût d'un disfonctionnementRésultats faux positifs/négatifs
– Essais cliniques compromis– Perte d'efficacité – Perte de temps pour la détection des défaillances
Gestion et documentation sur le pH insuffisantes
– Non-conformité aux règlementations
Développement préclinique100 composésPharmacie et toxicologie
Exigences pH requises :Fiabilité et précisionTraçabilité et répétabilitéCompétence de l'utilisateurConformité aux réglementations
Risques et coût d'un disfonctionnement :Effets secondaires non détectés
– Report de la commercialisation– Répétition de l'ensemble de la série de tests
Preuve statistique manquante– Report de la commercialisation– Médicament non approuvé– Examen minutieux de l'ensemble du procédé
Développement clinique3 composésPhase I-III : Études sur l'efficacité d'un médicament
Exigences pH requises :Fiabilité et précision optimalesContrôle strict de la qualitéConformité aux réglementationsAucune interruption
Risques et coût d'un disfonctionnement :Erreurs de production non détectées
– Rappels de lots du marchéRésultats de test non fiables du contrôle qualité
– Interruption de la production ou rappels de lots– Dégradation de l'image
Production1 composéContrôle de la qualité et des procédés
Qualité sur l'ensemble du cycle de viePrécision de la R&D à la production
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Fiabilité et reproductibilitéUne bonne préparation est indispensable
Fiab
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Manipulation et technique appropriéeLes difficultés des mesures électrochimiques résultent généralement d'une mauvaise utilisation du capteur lors du calibrage, du stockage, de la maintenance ou des opérations quotidiennes. l'état de validité des tampons, la température de l'échantillon et les techniques de remplissage/stockage peuvent également affecter les résultats.
Capteur appropriéChoisir, parmi tous les capteurs disponibles, celui correspondant le mieux à votre application permet d'accélérer le délai de réponse et de fournir des résultats plus précis. Utiliser un capteur adapté minimise également le temps consacré à la maintenance, réduit les coûts d'exploitation et améliore l'ergonomie.
Appareil de mesure de qualitéLa qualité de votre appareil de mesure électrochimique affecte directement la reproductibilité de vos résultats. Au moment de choisir un appareil de mesure, vous devez considérer sa précision et sa facilité de réglage, sa simplicité d'utilisation, son étanchéité, son niveau d'automatisation et sa capacité à gérer les données.
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En utilisant l'équipement adapté à votre application et en suivant quelques règles de base pour la manipulation et le calibrage du capteur, votre système de mesure électrochimique offre une fiabilité et une précision optimales.
Un calibrage et un entretien appropriés améliorent la cohérence
et la fiabilité.
Calibrage
Choisir le capteur adapté à vos applications facilite
l'automatisation simplifie le flux de travail et la mise en corformité
Sélection du capteur
Choisir l'appareil de mesure qui correspond le mieux à
l'ensemble du flux de travail.
Sélection de l'appareil de mesure
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• Ces tampons présentent-ils une valeur de pH correcte ? • Ce milieu de culture contient-il la composition adaptée ?• Ces zones de fonctionnement sont-elles adaptées au flux de travail ?
Pour répondre à ce genre de question, une mesure précise des paramètres électrochimiques est nécessaire.
La clé de la réussiteDes solutions pour chaque application
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Défi Paramètres Solution
Précision de calibrage pH, conductivité, ISE, oxydo-réduction
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Supprimer ou compenser les effets de la température
pH, conductivité, ISE Page 12
Récipients de microvolume, tels que les plaques à 96 puits ou les tubes RMN
pH, conductivité Page 14
Récipients de grande taille, tels que les tubes à essai et les tubes centrifuges
pH, conductivité, oxydo-réduction
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Éviter la contamination de l'échantillon
pH Page 18
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Petits échantillonsLa plupart des électrodes sont volumineuses ce qui entraîne des difficultés de mesure dans de petits volumes : l'électrode peut déplacer une quantité de volume relativement importante ou simplement ne pas s'insérer dans le tube. METTLER TOLEDO propose une gamme de capteurs micro et semimicro qui évite ces problèmes (voir pages 14–17).Quelques applications sur des petits volumes :• Analyse d'échantillon ARN à
l'aide de micropuces • Analyse d'échantillons d'ADN à
l'aide de réactions PCR • Analyse d'échantillon de protéine
à l'aide de l'immunoprécipitation
Grandes volumesLes volumes supérieurs à 50 mL sont généralement les plus faciles à mesurer, tandis que les volumes très importants, 1 L ou plus, exi-gent une bonne homogénisation lors du réglage du pH. Mélanger un liquide trop rapidement à l'aide d'une tige d'agitation peut entraîner la fluctuation des valeurs de pH. Mélangez à un rythme lent mais régulier. Exemples d'échantillons de volume important : • Tampon de citrate en immunohistochimie • Tampon phosphate salin PBS en
biologie cellulaire • Tampon Tris HCl pH8.8 pour gels
d'acrylamide • Tampon TBE pour l'électropho
rèse
L'analyse d'échantillons peut également être affectée par le pH de l'échantillon. Par exemple, de nombreux échantillons de protéine sont préparés à un pH très bas et un tampon de neutralisation est ajouté pour amener le pH à 7 avant analyse. Les volumes de ces échantillons sont souvent < 500 μL. Lors de la vérification du pH après une expérimentation, il peut ne rester que 20 à 100 μL ou moins.
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Pour les laboratoires réglementés et ceux nécessitant une automa tisation plus avancée
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Idéal pour le travail quotidien en laboratoire
L'appareil de mesure adapté Optimisez la précision et la fiabilité en choisissant un appareil de mesure qui : … présente les limites d'erreur et la
plage de mesure correspondant à vos applications
… offre un nombre de points de calibrage suffisant et un algorithme adapté
Les erreurs de calibrage peuvent survenir facilement. Mais les quelques règles simples suivantes, et évidemment avec l'équipement adapté, vous pouvez obtenir des résultats très fiables.
Le calibrage est essentielSélectionner le bon appareil de mesure
Mes
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Les solutions de service adaptées Un entretien régulier augmentera la précision de votre appareil de mesure et allongera sa durée de vie. METTLER TOLEDO offre de nombreuses options de service sur mesure pour garantir la fiabilité de votre instrument.
… offre le niveau de sécurité : gestion des utilisateurs, protection par mot de passe, etc.
… répond à vos besoins de conformité et d'automatisation
Trouvez l'appareil de mesure correspondant à vos besoins sur www.mt.com/pH
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Pour des résultats de calibrage parfaits • Utilisez des tampons frais • Appliquez les mêmes conditions
d'agitation que pour la mesure• Choisissez les normes de ca
librage englobant la fourchettes de mesure attendue
• Effectuez le calibrage et la mesure à la même température
Pour la conductivité • Utilisez rapidement les
standards 10 ou 84 µS/cm: ils réagissent avec le CO2.
• Évitez les charges électrostatiques du récipient de mesure
• Évitez les bulles sur le capteur
Pour les ISE (électrodes sélectives ioniques)• Utilisez toujours la solution
d'ajusteur de force ionique adaptée, dans la bonne concentration
• Préparez les électrodes ISE conformément au manuel d'utilisation
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Compensation manuelle de la température
La compensation manuelle de la température est extrêmement précise mais peut être longue. • Si vous connaissez la tempéra
ture de votre échantillon (vous travaillez dans un environnement à température contrôlée ou les échantillons sortent juste du réfrigérateur), entrez cette température dans les paramètres de mesure de l'instrument pour corriger le signal du pH (ou la conductivité).
• Lors de la mesure d'échantillons de différentes températures, la compensation manuelle peut s'avérer longue, ce paramètre devant être modifié à chaque fois.
Compensation automatique de la température
La compensation automatique de température fonctionne de façon optimale avec des échantillons d'un volume supérieur à 10 mL.• Utilisez un capteur avec sonde de
température intégrée et attendez un signal stable. L'appareil de mesure corrige automatiquement le signal du pH.
• Tous les capteurs InLab® « pro », InLab® Micro Pro, Science Pro, Expert Pro, intègrent une sonde de température, supprimant ainsi les problèmes liés à un mauvais réglage de la température ou à la non-détection de la température.
• Pour les capteurs sans sonde de température, utilisez une sonde séparée.
Une mesure de pH n'est valable que si elle tient compte de la température de l'échantillon. En respectant ces règles simples mais efficaces pour supprimer les effets négatifs de la température, vous pouvez obtenir facile-ment des résultats précis et reproductibles.
Mesure du pHTempérature – un élément essentiel
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Mesurez l'échantillon, et non le capteur.Avec les microéchantillons, le capteur met si longtemps à atteindre l'équilibre que la température du capteur est faussement interprétée comme la température de l'échantillon. La masse de l'échantillon est négligeable comparée à la masse du capteur : attendez un temps suffisant pour stabiliser la température.
Technologie de capteur METTLER TOLEDO –Toujours avec votre application à l'esprit
Conservez le capteur avec l'échantillon.Garantissez la bonne température en conservant le capteur avec les échantillons dans le réfrigérateur ou l'incubateur, ou à température ambiante. Vous obtiendrez ainsi ainsi la meilleure précision : la membrane de verre, le système de référence et l'échantillon étant à la même température.
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Petites merveilles technologiques Tandis que l’électrode InLab® 7514mm est équipée d’une sonde de température, les microcapteurs de pH sont quant à eux trop petits pour en intégrer une.
Plus l'échantillon est précieux plus la quantité à utiliser pour la mesure est petite: les électrodes pH micro METTLER TOLEDO répondent parfaitement à la mesure dans de petits volumes.
Mesure de petits échantillonsCapteurs micro pour vos besoins
Solu
tions
Mic
ro
Pour vous assurer que les effets possibles de la température sont compensés de manière adaptée, suivez les conseils et astuces décrits aux pages 12 et 13.
InLab® Micro – le classique éprouvé et fiable
L’InLab® Micro est idéal pour mesurer le pH dans des tubes profonds et centrifuges grâce à sa tige de 60 mm. Essayé et testé avec rigueur, il répond de manière fiable à la plupart des microapplications. Il est devenu un véritable classique dans la famille des InLab® Micro.
L’InLab® Nano mesure le pH dans des volumes aussi réduits que 5 µL. Son aiguille en acier ne casse pas facilement, malgré son diamètre très petit de 1,7 mm. Sa pointe inclinée protège la membrane pH contre tout dommage mécanique tout en permettant le perçage des septums.
InLab® Nano – technologie pH de pointe
InLab® Ultra-Micro – un micro-capteur abouti
A la différence de l’InLab® Micro, cette électrode présente une tige de sonde plus courte (40 mm) pour une manipulation plus facile et moins de casse. La jonction céramique est placée plus bas de manière à pouvoir effectuer des mesures dans des échantillons de volume très réduits jusqu’à 15 µL.
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Avec un diamètre de 4 mm seulement, l’InLab® 7514 mm dispose tout de même d’une sonde de température et d'adapter les relevés de conductivité à une température de référence définie. Pour obtenir des résultats exacts, immergez la sonde jusqu’au niveau minimum indiqué sur la tige de la sonde.
InLab® 751-4mm – la micro-conductivité simplifiée
Quantité d'échantillon minimum dans ce type de récipient spécifique
pH Conductivité
diamètre de1,7 mm
diamètre de3,0 mm
diamètre de3,0 mm
diamètre de4,0 mm
Type de récipient InLab®
NanoInLab®
Ultra-MicroInLab®
MicroInLab®
751-4mm
Petits tubes à essai> 2 mL
50 μL 100 μL 200 μL 500 μL
Flacons à réaction LiteTouch1,5 – 1,7 mL
20 μL 25 μL 65 μL 300 μL
Tubes échantillon0,5 mL
20 μL 25 μL 65 μL 300 μL
Plaques de 96 puits200 – 300 µL
10 μL 20 μL 45 μL 150 μL
Plaques de 384 puits5 – 100 µL
5 μL 15 μL – –
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Solu
tions
sem
iMic
ro
Pour une utilisation dans des tubes à essais ou d'autres petits récipients, les capteurs pH semi-micro sont d'un emploi plus facile. Le volume d'échantillon est encore relativement faible et les électrodes d'un diamètre de 5 à 6 mm permettent un travail efficace.
Petits, solides et polyvalentsCapteurs semimicro efficaces
InLab® Redox Micro –Mesure aisée du potentiel d'oxydoréduction
L'ORP (potentiel d'oxydoréduction), également connu sous le nom de potentiel redox, est important en biologie et est facilement mesuré avec l'électrode InLab® Redox Micro. Ce produit INGOLD classique utilise un anneau de platine.
L'électrode lnLab® Micro Pro avec capteur de température intégré prend en charge la compensation automatique de la température (voir page 12). Avec un diamètre de seulement 5 mm, c'est une prouesse tecnologique !
InLab® Micro Pro –pH corrigé en température
InLab® Semi-Micro – Mesures de pH sans mainte-nance ni contamination
L'électrode InLab® SemiMicro est remplie avec la dernière géné ration d'électrolyte gélifié : XEROLYT® EXTRA. La jonction, de type ouverte, ne nécessite aucun entretien.
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Cette électrode pH se pliera avant de casser évitant ainsi les dommages sur les microélectrodes. Soyez serein sachant qu'en cas de faux mouvement, vous n'aurez pas à remplacer l'électrode.
Avec une gamme de mesures allant de 1 μS/cm à 200 mS/cm, ce capteur de conductivité semimicro unique est véritablement généraliste, idéal pour les mesures directes dans des tubes à essai ou des titrages micro. Son diamètre de 6 mm permet une profondeur d'immersion minimum de seulement 17 mm.
InLab® Flex-Micro – Précision du pH souple
InLab® 752-6 mm –Conductivité semi-micro généraliste
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Les électrodes InLab® de METTLER TOLEDO sont spécialement conçues pour être compatibles avec les tampons TRIS, garantissant des résultats fiables et des valeurs de tampons précises. L'électrolyte dans les électrodes InLab® est garanti sans ions d'argent, supprimant ainsi le risque de contamination de la jonction dans les tampons TRIS ou contenant des protéines.
Éviter la contamination du capteur avec des tampons TRISLa précision de la mesure du pH est essentielle à la qualité du tampon. Les tampons TRIS, largement utilisés dans la recherche biologique allant de la biologie moléculaire à l'histologie, peuvent endommager les équipements de mesure du pH standard.
Lors de la mesure d'échantillons, il existe toujours un risque de contamination, qu'elle soit de nature chimique, microbiologique ou génétique. La nature du pont électrolytique des électrodes traditionnelles ne conviennent pas aux mesures dans les milieux protéinés ou les tampons TRIS. Avec les électrodes InLab pas de souci ! Ce risque n'existe pas avec les électrodes InLab® !
Contrôle de la contamination Pour des résultats fiables
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Comment le tampon TRIS agit-il ? L'électrolyte de remplissage des électrodes classiques contient des ions argent qui réagissent avec le tampon TRIS. Cette réaction peut également se produire en cas de présence de protéines, comme l'ASB, dans le tampon. Il en résulte des valeurs lentes ou fluctuantes, voire des résultats totalement erronés.
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Nettoyer à l'aide des produits RNase et DNase et passer à l'autoclave pour supprimer le risque biologiqueLes modèles d'électrode pH InLab® Power, Power Pro, Viscous et Viscous Pro peuvent être stérilisés par autoclavage. En nettoyant d'abord le capteur à l'aide des solutions de décontamination RNase et DNase, le risque de contamination biologique est considérablement réduit.
Eviter toute contamination en effectuant la mesure sur une goutte de votre échantillonAfin d'éviter la contamination des échantillons (telle du KCl dans un échantillon), prélevez une goutte d'échantillon à l'aide d'une pipette (10 μL minimum) et mesurez le pH à l'aide d'une électrode à membrane plate. Une lamelle de microscope et 10 µL d'échantillon suffisent !
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Certificat de qualité. Développement, production et tests selon ISO 9001.
Système de gestion de l’environnement selon ISO 14001.
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Mettler-Toledo AG, AnalyticalCH8603 Schwerzenbach, SuisseTél. +41 22 567 53 22Fax +41 22 567 53 23
Sous réserve de modifications techniques© 07/2013 MettlerToledo AG, 51725346AMarketing pH Lab / MarCom Analytical
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