TUTORAT CYTOLOGIE Année 2006-2007

Séance n°1 Séance du 9/10/2006 Méthodes d'étude de la cellule - Pr. H. Vannereau

QCM n° 1

Concernant l'examen de cellules fixées en coupe au MO, quelles sont les propositions vraies: a) La première étape est la fixation, elle peut se faire à l'aide d'aldéhyde (ex: le glutaraldéhyde), d'alcool (ex: le formol), ou de sels de métaux lourds. b) La fixation permet de conserver la cellule vivante, comme dans son milieu naturel.

c) L'inclusion n'est possible que si la déshydratation est faite au préalable. d) Pour faire la déshydratation, on trempe directement l'objet dans un bain d'alcool à 100°. e) La coupe se fait à l'aide d'un ultramicrotome.

QCM n° 2

Concernant les colorants, quelles sont les propositions vraies:

a) L'éosine est un colorant signalétique qui permet de voir le cytoplasme en bleu violacé. b) Il ne faut jamais oublier de faire la réhydratation, pour un examen de frottis, avant de faire la coloration. c) Certains colorants comme le vert Janus B permettent de voir les cellules vivantes; ce colorant est un colorant vital. d) Le Bleu de Trypan, toxique pour les cellules, est refoulé des cellules vivantes et ne pénètre que dans les cellules mortes. e) Le MGG : May Grümwald Giemsa est un trichrome, c'est le plus utilisé en hématologie.

QCM n° 3

Concernant le frottis, quelles sont les propositions fausses:

a) Il ne nécessite pas de fixation, les cellules étudiées sont donc vivantes. b) Il est possible pour tous les liquides biologiques. c) C'est une technique transposable au ME. d) C'est une technique très rapide car nécessite moins d'opérations que pour les cellules fixées en coupe.

QCM n° 4

Concernant les différents types de MO, quelles sont les propositions fausses:

a) Le microscope à contraste de phase permet de faire des décalages de phases visibles pour l'oeil humain. b) Le microscope à contraste interférentiel permet d'observer en couleur et en relief (illusoire) des cellules vivantes. c) On ne peut observer des cellules vivantes qu'avec le stéréomicroscope et le microscope inversé. d) Le stéréomicroscope permet de voir la surface des objets mais avec un grossissement moyen utile de 80. On l'utilise donc

peu au bloc opératoire. e) Le microscope confocal permet de voir des coupes optiques d'un objet en faisant un balayage de l'objet dans les trois

dimensions de l'espace.

2006-2007 Tutorat Cyto-Histo - Séance n°1 1 /4

QCM n° 5 Concernant le ME, quelles sont les propositions vraies:

a) Le ME utilise des électrons, ce qui nécessite que l'objet observé soit placé dans le vide. b) Comme le MO, le ME nécessite une simple fixation au glutaraldéhyde. c) L'enrobage au ME se fait après déshydratation et utilise la paraffine. d) L'enrobage permet à l'ultramicrotome de débiter des coupes de 50 nm environ. e) Après la coupe, on peut placer l'objet sur une lame porte objet.

QCM n° 6

Concernant le ME, quelles sont les propositions vraies: a) La coloration nécessite une réhydratation. b) Il n'y a pas réellement de "couleur" au ME, mais plutôt un contraste selon si les électrons sont arrêtés ou non. c) L'acétate d'uranyl et l'acide osmique arrêtent les électrons et augmentent le contraste. d) Le ME permet l'étude de cellules vivantes et est souvent utilisé pour cette indication. e) Le MET ne permet pas l'observation d'objet en relief à l'oculaire.

QCM n° 7

Concernant le ME, quelles sont les propositions vraies: a) La fixation du MET est similaire à celle du MEB. b) Le MEB permet l'observation de la surface des objets grâce à un balayage de l'objet. c) L'étude du MEB nécessite un ombrage métallique réalisé avec des sels de métaux lourd. d) Le MEB permet l'étude de cellules vivantes car il ne nécessite pas de coupe. e) Le grossissement moyen du MET est supérieur à celui du MEB; ce dernier apporte donc moins de renseignements que le

MET et on préfère utiliser le MET autant que possible.

QCM n°8 Concernant les cryotechniques, quelles sont les propositions vraies:

a) Les cryotechniques n'utilisent pas de fixateur chimique. b) La cryofracture utilise un cryoprotecteur, contrairement au cryodécapage. c) Le cryodécapage permet de visualiser les organites en 3 dimensions d) Il n'y a pas de fixation dans les cryotechniques. e) Après froid, à la cryofracture, l'objet se coupe selon ses lignes de plus faible résistance et on peut l'observer au MEB après

ombrage métallique.

QCM n° 9 Concernant les méthodes cytochimiques, quelles sont les propositions vraies:

a) Le PAS est une méthode immunohistochimique qui permet de détecter la présence de polysaccharides. b) Si après réaction au PAS, la préparation est rouge, il y a présence de polysaccharides, c) Suite à la réaction précédence, la disparition de la coloration rouge après action de l'amylase conclut à la présence de

glycogène. d) La cytoenzymologie permet une étude plus spécifique que la cytochimie. e) Le réactif de Schiff colore en rouge la solution s'il y a présence de fonctions aldéhyde. f) Il faut au préalable traiter la préparation avec de l' HCl à chaud, pour que le réactif de schiff puisse reconnaître les

fonctions aldéhyde.

QCM n° 10 Concernant les méthodes cytochimiques, quelles sont les propositions vraies:

a) L 'immunohistochimie est accessible au MO et au ME. b) L'immunohistochimie utilise des anticorps préalablement marqués. c) L'immunohistochimie permet de détecter des substances spécifiques grâce à l'association antigène-anticorps (marqué). d) L'anticorps peut être visible au ME si on le marque avec billes d'or, du fluorochrome, ou de la ferritine. e) Les billes d'or peuvent être de différents calibres, ce qui augmente la spécificité.

2006-2007 Tutorat Cyto-Histo - Séance n°1 2 /4

QCM n° 11 Concernant l'immunohistochimie, quelles sont les propositions vraies:

a) La peroxydase de Raifort est dense aux électrons. b) La méthode indirecte permet d'augmenter la sensibilité en utilisant des anticorps anti-anticorps. c) Pour la méthode directe, comme pour la méthode indirecte, les anticorps doivent être marqués. d) La méthode indirecte augmente la sensibilité mais diminue la spécificité donc est complémentaire de la méthode directe.

QCM n°12

Concernant l'histophotométrie, quelles sont les propositions fausses:

a) En histophotométrie, le microscope est associé à une cellule photoélectrique. b) Le réactif de Feulgen induit la coloration rouge de l'ADN. c) (Après Feulgen) Une cellule, juste avant mitose (phase S) sera moins rouge qu'une cellule après division car elle a moins

d'ADN. d) L'histophotomètre compte le nombre de cellule avec 2 n ADN et le nombre de cellule avec 4 n ADN. e) L'hydrolyse acide à chaud suivi du réactif de Schiff permet de colorer l'ADN en rouge.

QCM n° 13

Concernant l'autoradiographie, quelles sont les propositions vraies:

a) Elle utilise des enzymes radioactives. b) Elle permet de déterminer le site de synthèse d'une substance. c) On administre un précurseur chaud pendant un temps court (pulse) puis le même précurseur froid pendant un temps très

long (chase) pour voir le lieu de synthèse. d) On peut augmenter le temps de pulse pour rendre la méthode dynamique. e) Les cellules observées au microscope sont vivantes, sinon la méthode ne pourrait pas être rendue dynamique.

QCM n° 14

Concernant l'autoradiographie, quelles sont les propositions vraies:

a) L'observation après l'autoradiographie peut être faite au MO ou au ME. b) Au ME, l'autoradiographie ne peut pas être dynamique car on ne peut pas observer de cellules vivantes. c) La méthode dynamique rend compte du transit cellulaire de la substance. d) L'autoradiographie est une technique très rapide (le pulse et le chase étant rapide) e) L'émulsion photographique contient des sels d'argent qui s'oxydent.

QCM n° 15

Concernant les extemporanées, quelles sont les propositions vraies: a) Elles permettent de faire un diagnostic rapide. b) Elles n'utilisent que le froid comme fixateur. c) Le cryostat est en fait un microtome placé dans une enceinte à moins 20°C. d) On peut procéder à la coloration immédiatement après la coupe. e) Les cryostats peuvent aussi être utilisés en laboratoire pour faire de l'enzymologie.

QCM n° 16

Concernant les méthodes d'étude de la cellule, quelles sont les propositions vraies:

a) La cytométrie en flux peut être utile pour séparer deux types de cellules (chargées différemment) d'un bloc de tissu. b) La cytométrie en flux trie des cellules de charge différentes, les cellules non chargées ne sont pas triées. c) La cytométrie utilise un champ électrique. d) L'hybridation in situ permet de voir si une sonde est complémentaire d'un brin d'ADN ou d'ARN. e) L'hybridation in situ permet de détecter la présence d'une protéine par complémentarité.

2006-2007 Tutorat Cyto-Histo - Séance n°1 3 /4

QCM n° 17 Concernant les fixateurs, quelles sont les propositions vraies:

a) Les fixateurs chimiques sont riches en oxygène. b) Ils peuvent être responsables d'artéfacts, notamment dans l'observation de la membrane plasmique. c) Le séchage d'un frottis ne permet pas de le fixer. d) L'échantillon (ou objet) observé au microscope confocal ne nécessite pas de fixation. e) La fixation au ME est toujours double, au MET comme au MEB. f) Les fixateurs ne tuent pas obligatoirement les cellules.

QCM n° 18

Remettez les légendes correspondantes aux chiffres sur le schéma. Le microscope optique :

4

7

6

3

2

5

1

a) objectifs b) condenseur c) oculaire d) platine e) sortie photo, vidéo f) lumière

2006-2007 Tutorat Cyto-Histo - Séance n°1 4 /4