pseudomonas aeruginosa
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Pseudomonas Pseudomonas aeruginosaaeruginosa
La bactérie ,
sa sensibilité aux antibiotiques ,
son antibiogramme.
INTRODUCTION
• Bactérie de l’environnement• Pathogène opportuniste• Infections graves• Résistance aux antibiotiques
La bactérieLa bactérie
1882 Charles GESSARD
En latin : puons =pus cyaneus = bleu foncé
Espèce – type du genre PSEUDOMONAS
Bactérie ubiquitaire Saprophyte environnement humide : eau et sol Pathogène opportuniste chez les malades immunodéficients
Facteurs de pathogénicité+++ Résistance +++ (ATB et ATS)
Infections nosocomiales (8 à 10% selon ACAR) et communautaires
Habitat Réservoirs EAUX : Rivière , eaux usées , boues activées , eau de piscine,
eaux minérales , eaux thermales, eaux de boisson .
VEGETAUX : Légumes , Salades , fruits , fleurs et aliments
ENVIRONNEMENT HOSPITALIER : Matériel chirurgical ( humidificateur , barbotteur , KT , endoscopes…) ,
Solutions antiseptiques (Eosine aqueuse)
Solutions de nettoyage des lentilles de contact
Médicaments et produits cosmétiques
Lieux humides , lavabos , baignoires , cuvettes , éponges , porte-savon…
HOMME : Expectorations, urines , pus ORL , pus articulaires , PV , liquide pleural , selles ,
zones humides (périné , creux axillaire ) : Colonisation
Pouvoir pathogène : Infections :• Infections oculaires: kératites, abcès de cornée, endophtalmies
• Infections cutanées bénignes ou graves : Ectyma Gangrenosum, infections de plaies chirurgicales, infections chez les brûlés
• Infections respiratoires (mucoviscidose)
• Otites– externes aiguës ou malignes– moyennes chroniques
Colonisation• Origine endogène ++– muqueuses pharyngées et intestinales colonisées• adhésion et multiplication• Transmission– croisée manuportée– solution aqueuse ou équipement contaminé
Mortalité des IN : Très élevée
– jusqu’à 50-70 % au cours des pneumopathies
– jusqu’à 30-50 % au cours des septicémies
P. aeruginosa : CARACTERES BACTERIOLOGIQUES
MORPHOLOGIE :
petit bacille fin
1.5-3µ x 0.5-0.8 µ
Gram – très mobile (vol de moucheron) en AEROBIOSE
asporulé ,
SLIME : Couche mucoïde donnant un aspect muqueux à la
culture et une plus grande virulence ( s’oppose à la phagocytose)
Caractères morphologiques
Caractères culturaux
Colonies ‘la ’
Colonies ‘M’
Colonies ‘sm’
Culture facile sur milieu nutritif simple
Bactérie aérobie stricte
Culture entre 8°C et 41°C
Production de pyocyanine et de Pyoverdine
Dégage une odeur arome de Jasmin par production
d’orthoamino-acétophénone
Caractères biochimiques
Oxydase + , Catalase + , réduction des nitrates jusqu’au stade N2Métabolisme respiratoire (MEVAG :Oxydatif)TSI : Lactose - , Saccharose - , H2S –, Gaz- (pente gris métallisée)Citrate +, ADH + , Acetamide +
Sa sensibilité aux Sa sensibilité aux antibiotiquesantibiotiques
Résistances Naturelles :
• Pénicillines G, A et M• C1G, C2G et certaines C3G• Cotrimoxazole• Macrolides, Cyclines• Chloramphénicol• Quinolones de première génération• Kanamycine• Rifampicine, glycopeptides, ac. fusidique
Molécules actives :• Carboxypenicillines : ticarcilline• Ureidopenicillines : Piperacilline• Ticarcilline+Acide clavulanique• piperacilline +Tazobactam• Monobactames : Aztreonam• Carbapénèmes : Imipénème , Méropénème• ceftazidime, cefsulodine, céfépime, cefpirome
• Aminosides : gentamicine, tobramycine, amikacine, nétilmicine,isépamicine
• Fluoroquinolones : Ciprofloxacine
• colimycine • fosfomycine
Résistance naturelle
1. imperméabilité2. Systèmes d’efflux actifs3. Hydrolyse enzymatique( ex:céphalosporinase chromosomique bas niveau)
Mécanismes de résistance de P. aeruginosa
Résistance acquise
1. Modification de la perméabilité2. Hyper expression efflux actif3. modification de la cible4. Hydrolyse enzymatique
ATB
++++
Inactivation enzymatique (naturelle ou acquise)
Efflux actifs (naturels)hyper expression (acquise)
Imperméabilité(naturelle ou acquise)
Modification de la cible (acquise)
Cellule bactérienne
Mécanismes de R. acquise Mécanismes de R. acquise aux aux β-Lactaminesβ-Lactamines
ENZYMATIQUES:
-Penicillinases transférables (PSE , OXA ,TEM)
-Cephalosporinases déreprimées
-BLSE (PER-1 , OXA , TEM, SHV)
-Imipénèmase (IMP-1)
NON ENZYMATIQUES :
- perte de la porine D2 (modification de la perméabilité)
- Hyper expression d’efflux actif
- modification structurale du LPS (modification de perméabilité)
- modification d’affinité des PLP (modification de cible)
Résistance aux AminosidesRésistance aux Aminosides RESISTANCE
NATURELLE ACQUISE
Kanamycine - Non enzymatique
- Enzymatique
Résistance non enzymatique : • Inhibition du transport actif (perméabilité) ++• Efflux (Mex XY-OprM) +++• Mutation ribosomale (cible) +
Résistance enzymatique +++ (AAT , ANT , autres enzymes )
Associations fréquentes
Mécanismes de résistance acquise
• Diminution d’affinité de la cible – DNA gyrase- topoisomérase II, sous-unités A (gyrA) – topo-isomérase IV (parC)
• Imperméabilité – porines (oprF) , LPS
• Hyper expression de divers systèmes d’efflux
• Associations fréquentes
Résistance aux FluoroquinolonesRésistance aux Fluoroquinolones
Son antibiogrammeSon antibiogramme
Technique : Méthode de diffusion en géloseFiche technique n°1 : Bactéries non exigeantes (fascicule: Standardisation
de l’antibiogramme en Médecine humaine à l’échelle nationale selon les recommandations de l’OMS 4ème édition 2005)
Inoculum : 0,5 MF
Ensemencement de 2 boîtes rondes (90mm ø) de milieu Mueller-Hinton
CIP
GM
AN
FOS
TOBCAZ
IMP
PIPTIC
ATM
TCC24mm
Liste des antibiotiques à tester
Ticarcilline (TIC)Ticarcilline + Acide Clavulanique (TCC)Pipéracilline (PIP)Ceftazidime (CAZ)Aztreonam (AZM)Imipeneme (IMP)Gentamicine (GM)Tobramycine (TOB)Amikacine (AN)Ciprofloxacine (CIP)Fosfomycine (FOS)
Contrôle de qualité : souche Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853
Lecture : Mesurer avec précision à l’aide d’un pied à coulisse , les diamètres des zones d’inhibition , à l’extérieur de la boîte fermée. Comparer ces diamètres aux valeurs critiques de la table de lecture n°10 page 100 du fascicule de Standardisation . Classer la bactérie dans l’une des catégories S , I , R
Lecture interprétative : nécessite de connaître les mécanismes de résistances de Pseudomonas aeruginosa .
Lecture et interprétation
Molécules à tester
BêtalactaminesBêtalactamines
PhénotypeSauvage TIC S PIP S TCC S CAZ S ATM S IPM S
Phénotype sauvage
Présence d’une céphalosporinase chromosomique inductible Amp C(Antagonisme entre TIC : substrat et l’inducteur IPM)antagonis
me
Phénotype sauvage :Céphalosporinase chromosomique inductible :Substrats : TIC , CAZInducteur : IMP
Expression d’une pénicillinaseHaut niveau
Résistance à la TIC et à la PIPRestauration par l’Acide Clavulanique de l’activité de la TIC
Pseudomonas aeruginosa PSE-1
Pseudomonas aeruginosa PSE-3
Expression d’une Pénicillinase bas niveau:
•Résistance à la TIC et sensibilité à la PIP•Restauration de l’activité de la TIC par l’acide clavulanique
Pseudomonas aeruginosa OXA-4
Expression d’une autre Pénicillinase bas niveau:
•Résistance à la TIC et à la PIP•Restauration faible de l’activité de la TIC par l’acide clavulanique
Phénotype : Céphalosporinase déréprimée
Phénotype Céphalosporinase déréprimée :Hyperproduction de la Céphalosporinase chromosomique (mutation)
Phénotype BLSE
BLSE : Image de Synergie entre TCC (Ticarcilline+Acide Clavulanique) et Aztreonam (ou Ceftazidime)
Phénotype BLSE
Altération Porine D2
Altération Porine D2
Phénotype : Carbapénèmase VIM-2
Phénotype hyper expression d’efflux actif
Autres moléculesAutres molécules
Phénotype SauvageGM STOB SAMK S
Antibiotiques 2005 (n=2228)
Ticarcilline 17%
Pipéracilline 17,2%
Ceftazidime 13,2%
Imipenem 10,7%
Gentamicine 20,3%
Tobramycine 17%
Amikacine 9,2%
Pefloxacine 31,7%
Ofloxacine 21,6%
Ciprofloxacine 15%
Données de résistance (R+I) aux antibiotiques de P.aeruginosa pour l’année 2005 -Réseau AARN
CONCLUSIONBactérie saprophyte donc
naturellement multi résistante
Nombreux mécanismes de résistance acquise avec fréquente
intrication de plusieurs mécanismes
Difficultés thérapeutiques car Multi résistance+terrain
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