techniques de clonage d’adn par restriction et par
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AXE 12 - Biologie moléculaire et biochimie
Techniques de clonage d’ADN par restriction et parrecombinaison homologue
OBJECTIFS
- Connaître les principales méthodes de clonage et les éventuelles difficultés pour leur mise en oeuvre- Actualiser ses connaissances sur les nouvelles stratégies de clonage : clonage rapide par restriction et parrecombinaison homologue (SLIC : Sequence and Ligation Independant Cloning, Seamless)- Maîtriser les méthodologies de clonage classique et par recombinaison homologue
PUBLIC
Techniciens, ingénieurs, chercheurs
PREREQUIS
Bonne connaissance de la PCR et des principes du clonage d'ADN. Avoir suivi les formations d'initiation à labiologie moléculaire (Réf. 19177 et 19178, ce catalogue) ou niveau équivalent
PROGRAMME
Cours (4 h)- Description et comparaison de différentes techniques de clonage : classique (enzymes de restrictionconventionnelles), rapide et optimisé (Anza - Invitrogen), recombinaison homologue (SLIC _ Li & Elledge,Nature Methods, 2007 ; Seamless _Thermo Fisher Scientific), gène chimérique- Problèmes potentiels rencontrés aux différentes étapes du clonage et solutions pour les résoudre
Travaux dirigés (3 h)- Conception d’oligos, utilisation du logiciel « Serial cloner »- En fin de stage, un moment sera consacré à l'examen de difficultés éventuellement rencontrées par lesstagiaires dans leur expérience professionnelle.
Travaux pratiques (9 h)Clonage d’un fragment d’ADN dans un vecteur plasmidique par différentes approches :- clonage rapide- recombinaison homologue SLIC- recombinaison homologue Seamless
EQUIPEMENT
Voir le site du plateau technique de biologie moléculaire de l'I2BC.
INTERVENANTS
V. Henriot (ingénieure d’études), C. Chaber et C. Leroy (Thermo Fisher Scientific)
Environnement scientifiqueet technique de la formation
Institut de biologie intégrative de lacellulehttp://www.i2bc.paris-saclay.fr
RESPONSABLEVéronique HENRIOTIngénieure d'étudesUMR 9198
LIEUGIF-SUR-YVETTE (91)
ORGANISATION2 joursDe 4 à 8 stagiairesTP encadrés par 2 intervenants
COÛT PÉDAGOGIQUE900 Euros
À L'ISSUE DE LA FORMATIONEvaluation de la formation par lesstagiairesEnvoi d’une attestation de formation
DATE DU STAGERéf. 19 183 : du jeudi 21/11/19 à 09:00au vendredi 22/11/19 à 17:30
Janvier Février Mars Avril
Mai Juin Juillet Août
Sept. Oct. Nov.19 183
Déc.
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