PRACTICA 3. IDENTIFICACION DE CARBOHIDRATOS

CETIS 62

LABORATORIO CLINICO

“BIOQUIMICA”

MARTA GABRIELA ACEVES MORALES

6 – “E” EQUIPO: 4

INTEGRANTES:

MORENO GUTIERREZ ARIADNA LIZBETH

MORENO PEREZ ANA MARIELA

RODRIGUEZ BALBUENA MARIANA

VARGAS DAMIAN KARLA MAYTE

ZUÑIGA RAMIREZ MOISES EMMANUEL

OBJETIVO: Realizar diferentes experimentos, donde se identifiquen, las características de los carbohidratos.

NOMENCLATURA Y CLASIFICACION DE CARBOHIDRATOS

Los nombres de los carbohidratos se caracterizan por la terminación “osa”. Los principales grupos de carbohidratos se designan como monosacáridos. Los monosacáridos comprenden todos los carbohidratos sencillos que no se pueden hidrolizarse en sustancias de menor estructura molecular. Los disacáridos incluyen aquellos carbohidratos que pueden hidrolizarse en dos azucares simples.

REACCIÓN DE LA BENCIDINA

La bencidina es un producto manufacturado que no ocurre naturalmente en el medio ambiente. Es un sólido cristalino de color amarillo grisáceo, blanco o rojo grisáceo. En el medio ambiente, la bencidina se encuentra en estado libre, o como sal. La bencidina se usó para producir tinturas para telas, papel y cuero. 

La bencidina es una sustancia que cristaliza con una molécula de agua si se hace la cristalización por debajo de 60° C, y anhidrasis porque el sulfato de bencidina es insoluble. Se emplea también para investigar la adición de agua oxigenada a la leche y para identificar la sangre en líquidos biológicos, empleada también en la preparación de colorantes, para perfumar jabones baratos y en las cremas para el calzado. Su constante criocóspica (6.9; agua 1.8) lo hace útil, junto con su poder disolvente, en criometría

MATERIAL REACTIVOS

5 tubos de ensayo 1 gradilla 6 pipetas de1 ml 1 baño maría

Reactivo de bencidina Carbohidratos al 1%

CARBOHIDRATOS:

1. Galactosa 2. Xilosa3. Glucosa4. Maltosa5. Fructuosa 6. Sacarosa7. Dextrosa8. Miel9. L arabinose

TÉCNICA

1. En un tubo de ensayo colocar 0.5ml del reactivo de bencidina.2. Añadir 1 o 2 gotas de solución de carbohidrato.3. Calentar en agua hirviendo durante varios minutos, inmediatamente

después enfriar con agua.4. Si se forma un color rosa o rojo la prueba es positiva.

NOTA: Esta prueba parece muy satisfactoria para pentosas, las hexosas comunes no interfieren en esta prueba.

RESULTADOS

Carbohidrato Resultado

Galactosa Negativo

Xilosa Negativo

Glucosa Anhidra

Negativo

Maltosa Negativo

Fructosa Negativo

Sacarosa Negativo

Dextrosa Negativo

Miel Negativo

L-Arabinose Negativo

Observaciones

En esta primera práctica observamos que ningún carbohidrato reaccionó, el color de cada tubo estuvo igual que al principio no se observó ningún cambio al añadirle la bencidina.

La formación de color se toma como resultado positivo e indica la presencia del compuesto mientras que la no formación de color es indicativo de su ausencia, por lo tanto el resultado es negativo.

PRUEBA DE ANILINA

Esta prueba sirve para diferenciar las pentosas de los ácidos urónicos y de las hexosas que no dan la prueba.

Por deshidratación de las pentosas, se forman furfural, que reaccionan primero con una molécula de anilina dando un compuesto que es una base de Schiff, de poco color

Con otra molécula de anilina, se parte del ciclo del furano dando un compuesto que por tener doble enlace conjugador, tiene un color rojo intenso.

Dando también la prueba positiva los polisacáridos que por hidrólisis dan pentosas.

MATERIAL REACTIVOS

5 tubos de ensayo 1 gradilla 3 pipetas de 5ml 1 baño maría

Ácido acético glacial Anilina Carbohidratos al 1%

CARBOHIDRATOS:

1. Galactosa

2. Xilosa3. Glucosa 4. Maltosa5. Fructuosa 6. Sacarosa

7. Dextrosa8. Miel9. L arabinose

TECNICA

1. Colocar 1 ml de carbohidrato.2. Añadir 2 ml de ácido acético glacial y 3 gotas de anilina.3. Calentar a hervir durante 1 minuto la coloración roja es positiva

NOTA: Esta prueba la dan positiva las pentosas, puede servir para diferenciar las pentosas de ácidos urónicos.

Resultados

Carbohidrato Resultado

Galactosa Negativo

Xilosa Positivo

Glucosa Anhidra

Negativo

Maltosa Negativo

Fructosa Negativo

Sacarosa Negativo

Dextrosa Negativo

Miel Negativo

L-Arabinose Positivo

Observaciones

En esta práctica si hubo resultados positivos al realizar el procedimiento de manera adecuada y siguiendo cada uno de los pasos , la anilina reacciono con algunos carbohidratos como fue la xilosa y L- Arabinose ya que tomo uno color como rojizo tomando en cuenta que la formación de color se toma como resultado positivo e indica la presencia del compuesto.

“Azúcares Reductores”

(Tollens , Fehling , Benedict )

Los azúcares reductores son aquellos azúcares que poseen su grupo carbonilo (grupo funcional) intacto, y que a través del mismo pueden reaccionar como reductores con otras moléculas.

Todos los monosacáridos son azúcares reductores, ya que al menos tienen un -OH hemiacetálico libre, por lo que dan positivo a la reacción con reactivo de Fehling, a la reacción con reactivo de Tollens, a la Reacción de Maillard y la Reacción de Benedict. Otras formas de decir que son reductores es decir que presentan equilibrio con la forma abierta, presentan mutarrotación (cambio espontáneo entre las dos formas cicladas α (alfa) y β (beta)), o decir que forma osazonas

.REACCIÓN DE TOLLENS:

El reactivo se prepara por adición de hidróxido de amonio a una solución de nitrato de plata, hasta que el precipitado formado se redisuelva. La plata y el hidróxido de amonio forman un complejo (Ag(NH3)2OH, plata diamino), que reacciona con el aldehído.

REACCIÓN DE FELHING

El reactivo está formado por dos soluciones llamadas A y B. La primera es una solución de sulfato cúprico; la segunda , de hidróxido de sodio y una sal orgánica llamada tartrato de sodio y potasio (sal de Seignette).

Cuando se mezclan cantidades iguales de ambas soluciones, aparece un color azul intenso por la formación de un complejo formado entre el ion cúprico y el tartrato. Agregando un aldehído y calentando suavemente, el color azul desaparece y aparece un precipitado rojo de óxido cuproso (Cu2O).

REACCIÓN DE BENEDICT

La solución de Benedict es semejante a la de Fehling con la modificación de que se utiliza citrato de sodio en lugar del tartrato de sodio y potasio.

Las 3 soluciones mencionadas nos sirven para distinguir los aldehídos de las acetonas sencillas, porque las últimas no reaccionan. Pueden además indicarse que la reducción de las soluciones permite diferenciar un aldehído de un alcohol.

PRUEBA DE TOLLENS

Material: Reactivos

Tubos de ensayo Reactivo de Tollens Pipeta de 1ml. Carbohidratos en polvo. Mechero Baño María

Técnica

Colocar en un tubo de ensayo 1ml de carbohidrato. Añadir 1 ml de reactivo de Tollens Agitar perfectamente Calentar a baño maría durante 5 minutos máximo. Observar la forma de

espejo que se forma en los positivos.

Observaciones:

Lo que observe en esta prueba de tollens fue que al añadirle el mililitro de cada carbohidrato y después de introducirle el mililitro de reactivo de tollens lo agitamos y tomaron los carbohidratos un color obscuro y al introducirlo al baño maría fue

Cuando cada uno de los carbohidratos comenzó a tomar el color de forma de espejo (plateado).

PRUEBA DE FEHLING

MATERIAL.

9 tubos de ensaye. 2 pipetas de 1 ml. 1 mechero

REACTIVOS

Fehling “A” Fehling “B” Carbohidratos al 1 %

TECNICA.

1. Colocar en cada tubo de ensayo una pizca de los carbohidratos.2. Añadir 1ml de Fehling “A” y 1ml de Fehling “G”3. Mezclar bien y ponerlo a baño maría o en la flama del mechero

durante cierto tiempo.4. Sí mira a marrón o rojo la prueba es positiva.

OBSERVACIONES.

En esta práctica el procedimiento se siguió al pie de la letra, las observaciones fueron muy impactantes, la técnica como las demás era muy tardada puesto que, eran 9 carbohidratos, y después de eso teníamos que etiquetar los tubos de ensayo para identificarlos correctamente, para que los resultados fueran correctos lo que hicimos fue que después de etiquetar los tubos de ensayo los unimos y los apretamos con varias ligas, para después de eso ponerlos en baño maría y esperar el tiempo indicado para poder observas los resultados, al ver los resultados fueron muy notorios, puesto que observamos el cambio de coloración de los carbohidratos, en esta práctica la coloración para que el resultado fuera positivo tendría que ser de color marrón o rojo, así fue, solo un carbohidrato cambio de color, este carbohidrato fue la D-GLUCOSA ANHIDRA.

PRUEBA DE BENEDICT.

MATERIAL.

tubos de ensayo. Pipetas de 5 ml. Gradilla. 1 baño maría.

REACTIVOS

Reactivo de Benedict. Carbohidratos

PROCEDIMIENTO.

1 Colocar en los tubos de ensayo 1 ml de solución de Benedict.2 Añadir tres gotas de cada solución de carbohidratos en cada tubo.3 Agitar y colocar los tubos al mismo tiempo en agua hirviendo durante 3

minutos.4 Enfriar la solución y hacer comparaciones.5 Obsérvese el precipitado formado. Un cambio de color NO indica reacción

positiva, solo el precipitado.

OBSERVACIONES.

Lo que observamos en esta práctica fue que los carbohidratos no eran de forma sólida, si no que en este caso eran de forma líquida, por eso es que en dicha práctica medimos lo carbohidratos en mililitros.

Otra observación fue que añadimos primero la solución de Benedict y después las gotas de carbohidratos, después de esto agitamos perfectamente para que se mezclaran los carbohidratos y la solución indicada.

Ya después de realizado eso, pusimos los 9 tubos de ensayo en el agua hirviendo, a partir de esto estuvimos observando los cambios de coloración, pero eso no indica que será el resultado, para poder saber los resultados nos teníamos que dar cuenta de cual carbohidrato con la solución era el que presentaba precipitado, en este caso fue el carbohidrato, el resultado fue la MALTASA

RESULTADOS(Tollens, Fehling, Benedict)

Carbohidratos Tollens Fehling Benedict

Maltosa Positivo Negativo Positivo

Glucosa anhidra Positivo Positivo Negativo

Sacarosa Positivo Negativo Negativo

Xilosa Positivo Negativo Negativo

GL. Glactosa Positivo Negativo Negativo

Dextrosa Positivo Negativo Negativo

Fructosa Positivo Negativo Negativo

L- Arabinosa Positivo Negativo Negativo

Miel Positivo Negativo Negativo

PRUEBA DE ÁCIDO PICRICO

El ácido pícrico es un sólido cristalizado, amarillo pálido, un poco soluble en agua, con sabor amargo (picros-amarillo)Su descomposición explosiva, desencadena por un detonador (fulminante de mercurio) lo hace útil como explosivo (melenita), si bien tiene el inconveniente de corroer el alma del cañón por su carácter ácido, por lo que tiene más empleo en bombas de aviación. El ácido pícrico es un ácido relativamente fuerte que ataca los metales dando picratos metálicos muy inestables y explosivos, lo que requiere proteger el acero de abuses con un barniz o vidriados.Los picratos de amonio C6H2(NO2)3(ONH4) y de potasio, son pocos solubles en agua.El picrato de amonio se utiliza como explosivo. El ácido pícrico se emplea para teñir de amarillo la lana, como reactivo de alcaloides y proteínas (investigación de albúminas en líquidos biológicos: reactivo de Esboch).El ácido pícrico, como otros nitrofenoles, existe en dos formas: la normal que da cristales cuando se cristaliza la ligroína.

MATERIAL REACTIVOS 6 pipetas de 5 ml 1 pipeta de 1 ml 1 gradilla 1 baño maría 5 tubos de ensayo

Ácido pícrico saturado Carbonato de sodios al 10% Carbohidratos al 1%

CARBOHIDRATOS:

1. Galactosa 2. Xilosa3. Glucosa4. Maltosa5. Fructuosa 6. Sacarosa 7. Dextrosa8. Miel9. L arabinose

TÉCNICA1. A 3 ml de solución de carbohidratos añadir 1 ml de solución saturada de

ácido pícrico.2. Agregar 0.5 ml de solución de carbonato de sodio al 10%.3. Calentar en agua hirviendo durante 1.5 minutos.4. NOTA: Un color café denota prueba positiva.

Resultados

Carbohidrato Resultado

Galactosa Negativo

Xilosa Positivo

Glucosa Anhidra

Negativo

Maltosa Negativo

Fructosa Positivo

Sacarosa Negativo

Dextrosa Positivo

Miel Positivo

L-Arabinose Positivo

Observaciones

En esta siguiente práctica se observó que hubo varios carbohidratos que reaccionaron con el ácido pícrico como fue la xilosa, fructosa, dextrosa, miel y L-Arabinose ya que al realizar el procedimiento estos se volvieron algo turbios tomando un color tipo café y amarillento indicándonos la presencia del compuesto mientras que en los otros no hubo formación de color indicándonos la ausencia de este.

CUESTIONARIO

1.- Escribe las fórmulas de los carbohidratos utilizados en la práctica.

Galactosa C6H12O6

Maltosa C12H22O11

Glucosa anhidra C6H12O6

Xilosa C5H10O5

Sacarosa C12H22O11

Fructosa C6H12O6

Dextrosa C6H12O6

Miel C12H22O6

L. arabinose C5H10O5

2.- ¿Qué es un azúcar reductor?

Un azúcar reductor es un término químico para un azúcar que actúa como un agente reductor y puede donar electrones a otra molécula. Específicamente, un azúcar reductor es un tipo de carbohidrato o azúcar natural que contiene un grupo aldehído o cetona libre. Los azúcares reductores pueden reaccionar con otras partes de la comida, como aminoácidos, para cambiar el color o el sabor de la comida.

3.- ¿Qué usos tiene el reactivo de fehling?

Sirve para demostrar la presencia de glucosa, así como para detectar derivados de ésta tales como la sacarosa o la fructosa.

4.- Explica porque el yodo de coloración azul marino, con el almidon

Porque el yodo entra a la estructura helicoidal del almidón, y al unirse dentro de de estas cadenas provoca un efecto de color de los enlaces en el rango del espectro de la luz de tonos naranjas, que reflejados a nuestros ojos lo percibimos como color azul.

5.- ¿Qué importancia farmacológica, tiene el identificar los carbohidratos?

Si el 55% de nuestra dieta diaria está compuesta por carbohidratos nos aseguramos contar con una amplia fuente de energía para el funcionamiento de nuestro organismo. Esto toma aún más valor si se considera que la Organización Mundial de la Salud considera que es necesario divulgar los beneficios otorgados por los carbohidratos, principalmente el de ser un vital aporte al funcionamiento intestinal, al desarrollo muscular y de actividad física, además de apoyar la función cerebral.

CONCLUSIONES

-PRUEBA DE ANILINA

En esta prueba los carbohidratos eran en polvos o como los vemos nosotros, y al darnos positivo se formaba una capa plata, como una especie de espejo platinado, en todas nuestras muestras se formó ese espejo.

-REACCION DE LA BENCIDINA

Nos pareció una práctica interesante, ya que observamos que la reacción de la bencidina es utilizada para la identificación de pentosas como lo decía la práctica, se trata de un indicador analítico para determinación de oxidantes. En presencia de un oxidante se oxida por perdida de dos protones y dos electrones a lo que se llama su forma “meroquinoidea” que tiene color azul.

-AZUCARES REDUCTORES

PRUEBA DE FEHLING

En conclusión esta practicas nos pareció importante, ya que lo decía la practica la reacción de fehling es utilizada para la determinación de azucares reductores, este se oxida a un ácido carboxílico y reduce la sal de cobre o en medio alcalino a oxido de cobre pasando a un color rojo.

Un aspecto importante de esta reacción es que la forma del aldehído puede detectarse fácilmente aunque exista en muy pequeña cantidad.

El equipo trabajo de manera responsable y ordenada siguiendo las indicaciones dadas.

-PRUEBA DE BENEDICT

Las reacciones que se observaron con el reactivo de benedict nos dio positivo para los azúcares de glucosa, fructosa y sacarosa.

Dentro de los disacáridos se observó que la sacarosa nos dio una reacción negativa.

En la reacción de benedict se reduce de Cu2+ que tiene color azul a Cu+ , lo cual precipita de la solución como Cu2Ode color rojo-naranja lo cual nos dio los diferentes resultados.

-PRUEBA DE TOLLENS

Con el reactivo de Tollens es una reacción de oxidación, en la cual se identifica a las aldosas, ya que las cetosas no reaccionan. En la reacción el reactivo de Tollens se oxida totalmente, y genera el espejo de plata, ya que el ion de plata se reduce a plata elemental.

En conclusión nuestro resultado fue el esperado que era la forma de espejo que se formó en los positivos

-PRUEBA DEL ACIDO PICRICO

Nos dimos cuenta que el ácido pícrico es uno de los productos químicos más peligrosos en uso.

El ácido pícrico es toxico por todas las rutas de exposición, también es irritante a la piel y puede producir productos tóxicos cuando se descompone.

Es un reactivo con una amplia variedad de productos químicos y sumamente susceptibles a la formación de sales “picratos”

BIBLIOGRAFIA

https://www.google.com.mx/?gws_rd=cr&ei=ViGJUpvuH- aD2gWE_oGABg#q=formula+quimica+de+la+sacarosa

https://www.google.com.mx/?gws_rd=cr&ei=ViGJUpvuH- aD2gWE_oGABg#q=formula+quimica+de+la+galactosa

https://www.google.com.mx/?gws_rd=cr&ei=ViGJUpvuH- aD2gWE_oGABg#q=formula+quimica+de+la+dextrosa

https://www.google.com.mx/?gws_rd=cr&ei=ViGJUpvuH- aD2gWE_oGABg#q=formula+quimica+de+la+fructosa

http://www.ratser.com/la-definicion-de-azucares-reductores/

http://www.ecured.cu/Reactivo_de_Fehling

https://mx.answers.yahoo.com/question/index? qid=20070717231845AAwYRu8

http://www.miraflores.cl/nutricion/la-importancia-de-los-carbohidratos.html