Hémogramme

PlanIntroduction

Définition

Technique d’examen

Méthodes d’analyse

Indications de l’hémogramme

Interprétation de l’hémogramme

Globule rouges

leucocytes

Plaquettes

Conclusion

- Examen biologique le plus prescrit

- Indications sont très nombreuses

- Examen simple, peu coûteux, automatisé et

standardisé

- Pour exploiter correctement les résultats il faut

donc:

- connaître les valeurs normales

- savoir reconnaître et définir les anomalies

Définition (1)

- Principal examen d’étude des cellules sanguines

- Examen destinée à évaluer la qualité de l’hématopoïèse: examen de base du bilan hématologique

- L’hémogramme = numération formule sanguine

Le premier terme est le plus approprié à l’analyse réalisée car les deux versants quantitatifs et qualitatifs de l’étude sont inclus dans la terminologie « hémogramme »

- Taux des éléments figurés du sang par unité de volume(mm³ ou Giga/l)

constitue l’expression du résultat:

- Numération des Hématies (GR) du sang circulant

accompagné de paramètres permettant de caractériser la

population érythrocytaire (constantes érythrocytaires)

- Numération et la formule leucocytaire :

détermination de la proportion des différents types de

leucocytes (polynucléaires neutrophiles, éosinophiles,

basophiles, lymphocytes, monocytes)

- Numération des plaquettes(Pq), constantes Pq

- La détection d’autres cellules (anormalement

rencontrées dans le sang)

Définition (2)

Technique d’examen

- Prélèvement sur sang veineux

- Garrot: temps de pose < 60s

- Matériel de prélèvement: système sous vide+++

- Tube contenant anticoagulant : (EDTA)

- lors de prélèvement le tube doit être agité pour éviter

la formation de micro caillots

-Tubes sont calibrés pour des prélèvements de 5ml

- En cas de prélèvement en micro méthodes , les tubes

sont de 1ml

- l’examen doit être réalisé rapidement (<2h) après le

prélèvement

Méthodes d’analyse

Méthode Classique: Hémogramme en Hématometrie

- Lente et fastidieuse

- La détermination GR, GB et des Pq: Cellules fermées

(Malassez, Thomas…) lues au microscope

- Le dosage Hb par spectrophotométrie

- Le dosage Ht: Centrifugation d’un microhématocrite à 8000t/minute

4 minutes (tube de wintrobe)

- Le calcul des constantes GR: concentration corpusculaire ou globulaire moyenne (CCMH ou CGMH), la teneur corpusculaire ou globulaire moyenne (TCMH ou TGMH) et le volume globulaire moyen (VGM)

Méthode automatique:

- Rapide et reproductible

- 10000 cellules+++

- <200 µl

- Le dénombrement des cellules se base sur le nombre d’impulsions

électriques induites par le passage de la cellule entre deux électrodes

ou par détection de particules par faisceau laser

- la réalisation de la formule leucocytaire : volume, conductivité et

diffraction cellulaire

- Nouveaux indices : l’indice de distribution érythrocytaire(IDE), le

volume moyen plaquettaire (VMP) , Indice de Distribution

Plaquettaire (IDP)

Messages et alarmes++

Frottis sanguin:

- Indispensable, anomalie quantitative ou qualitative détectée

par l’automate

- Etalement d’une goutte de sang sur une lame de verre et

colorée au May Grünewald Giemsa (MGG)

- L’analyse microscopique :

- morphologie des cellules normales et pathologiques

( Blastes, myélémie, cellules lymphomateuses)

- d’apprécier d’éventuels agrégats plaquettaires

Indications de l’hémogramme (1)

- Syndrome infectieux

– Fièvre prolongée

– Infections récidivantes, résistantes à l’antibiothérapie

– Formes graves d’emblée : choc septique, angine ulcéro-nécrotique, infection des

parties molles.

– Infection dans les suites d’une chimiothérapie hématotoxique, de

l’administration d’un médicament pourvoyeur d’agranulocytose

- Syndrome anémique

– Pâleur cutanéo-muqueuse, asthénie

– Conséquences cardiaques et respiratoires : essoufflement, angor, signes

d’insuffisance cardiaque

– Conséquences neurologiques : lipothymies, vertiges, acouphènes…

- Syndrome hémorragique

– Purpura, ecchymoses , hémorragie des muqueuses

– Syndrome hémorragique grave : hémorragies neuroméningées, digestives,

hématomes profonds

Indications de l’hémogramme (2)

- Syndrome tumoral

– Principalement : adénopathies isolées ou multiples, splénomégalie, hépatomégalie

– Autre : adénopathies profondes, élargissement du médiastin, hypertrophie gingivale, lésion cutanée infiltrée (hématodermie, érythrodermie)

- Thrombose artérielle ou veineuse

– Infarctus du myocarde, accident vasculaire cérébral, thrombose artérielle périphérique.

– Thrombophlébites

– Signes d’hyperviscosité : céphalées, acouphènes, baisse d’acuité visuelle

- Situations systématiques

– Grossesse

– Médecine de travail

– Bilan préopératoire

– Bilan pré thérapeutique

– Suivi thérapeutique

Interprétation de l’hémogramme

Globules Rouges

Cellules anucléées dont le constituant principal est

l’Hémoglobine

Rôle dans le transport de l’oxygène et du dioxyde de carbone

entre les alvéoles pulmonaires et les tissus

• Numération érythrocytaire: Nombre de GR: nombre de GR circulant dans un volume de sang ( millions/mm³)(Tera/l)

Chez l’homme : 5 - 5,5

Chez la femme: 4 - 4,5

Chez l’enfant: 4 - 5,2

Chez le nouveau-né : 4,5 - 7

Une polyglobulie: GR > 5,5 chez l’homme

Une érythropénie : GR< 5 chez l’homme

• Taux d’hémoglobine (Hb): la quantité d’Hb contenue dans les hématies/ unité de volume sanguin( g/dl)(g/100ml)

Chez l’homme: 13 - 18Chez la femme: 12 -16

Chez l’enfant: 11,5 -15Chez le nouveau-né: 14 – 20

Une anémie : Hb < 13 chez l’homme

Une polyglobulie: Hb > 18 chez l’homme

Taux d’Hématocrite(Ht): volume globulaire contenu

dans 1 mm³de sang(%)

Chez l’homme: 40 - 54

Chez la femme: 37 - 47

Chez l’enfant: 37 - 45

Chez le nouveau-né: 50 – 60

Une polyglobulie: Ht >50 % chez l’homme

L'hématocrite et le taux d'hémoglobine sont les deux

éléments les plus importants pour faire le diagnostic

d'anémie

• Volume globulaire moyen (VGM): Volume moyen d'un GR

- Rapport du taux de d’Ht sur le nombre de GR [femtolitres (fl) ou µ³]

VGM: 80-98 fl = normocytose globulaire

Chez le nouveau- né , VGM: 90 – 120 fl

< 80 fl: microcytose> 98 fl : macrocytose

• Taux corpusculaire moyen en hémoglobine (TCMH ou TGMH): Poids d'hémoglobine contenu dans chaque GR

- Rapport Hb/le nombre de GR [ Picogrammes (pg)]TCMH : 27 - 32 = normochromie

< 27 : hypochromie

• Concentration corpusculaire moyenne en hémoglobine (CCMH): Volume occupé par l’Hb dans un GR

- Rapport Hb/ hématocriteCCMH: 32 – 36 = normochromie< 32: hypochromie

La CCMH ne peut pas augmenter ( Erreur technique)

Indice de distribution des globules rouges (IDR):RDW (Red Distribution Width)

Coefficient de variation calculé à partir de la courbe érythrocytaire

VGM

- RDW : 11,5 -14,5%

- Hétérogénéité des hématies

- > 15%: une anisocytose (taille variable)

coefficient d’anisocytose

50 100 200 100 20050 50 100 200

IDR très Elevé 35 % IDR Elevé 18 %IDR Normal < 15%

Numération des réticulocytes: reflète le taux de

production médullaire de l’érythropoïèse

- Caractérisés par la persistance de résidus chromatiniens

intra cytoplasmiques

- Ne fait pas partie de l’hémogramme systématique

- Permet de différencier l’origine centrale ou périphérique

d’une anémie

- Taux de réticulocytes: 0,2 à 2% soit 25 – 75 10³/mm³ ou

giga/l

< 120 giga/l: anémie peu regenerative

> 120 giga/l: anémie régénérative

Coloration vitale au bleu de crésyl brillant

Le colorant pénètre spontanément dans les hématies et se fixe

sur l'ARN

L'observation se fait au microscope

L'appréciation se fait sur 1000 globules rouges

Cytométrie de Flux

L'ARN ribosomal peut être marqué par des produits auto

fluorescents qui sont détectés en cytométrie de flux. Cette

méthode automatisée est plus fiable

résidus chromatiniensintracytoplasmiques

L'étude morphologique:

La population érythrocytaire normale est homogène, ce qui peut

s'apprécier d'après 3 critères:

* La forme : disque biconcave se présentant sur les frottis sur leur face

arrondie

* La taille : 7,2 microns

* La coloration : liée au contenu en hémoglobine

Toute population érythrocytaire qui ne correspond pas à ces 3 critères est

pathologique et les anomalies seront classées selon ces critères

Anomalies de forme

- Sphérocytes: GR de petit diamètre, très colorés, sans centre clair

- Drépanocytes : hématies falciformes

- Schizocytes :

Hématies fragmentées

- Ovalocytes ou élliptocytes : hématies allongées

- Cellules cibles: centre foncé du GR

- Dacryocytes: GR en forme de larme

- Poikylocytes : mélange d’hématies de formes variables

Anomalies de taille

- Anisocytose : mélange de tailles différentes

Anomalies de coloration

- Hypochromie : GR clairs, pauvres en hémoglobine,

souvent microcytaires

- Polychromatophilie : lorsque des hématies sont

bleutés: hyper réticulocytose

- Anisochromie: GR de coloration différente

Les inclusions

- Hématies à granulations basophiles (ou hématies ponctuées)

- Corps de Jolly : résidus nucléaires

- Anneau de Cabot:

- Les corps de Heinz : hémoglobine dénaturée / coloration

spéciale

Variations physiologiques (1)

- Age:

Taux d’hémoglobine:

Plus élevé chez le nouveau-né

Décroît avec l’âge jusqu’à 5 ans

Augmente ensuite jusqu’au taux observés chez l’adulte

VGM: macrocytose physiologique chez le nouveau – né

- Sexe

Le taux d’hémoglobine doit être interprété selon le sexe à partir de 12ans

- Ethnie

Taux d’hémoglobine :

Chez les sujets de race noire est inférieur de 0,8 à 1 g/dL. Cela conduit à un diagnostic d’anémie par excès dans cette population

- Grossesse

Taux d’hémoglobine :

Il est physiologiquement abaissé en raison, en partie, de

l’hémodilution

[Un seuil de 11g/dL est admis, bien que ce taux diminue

nettement du 1er au 3ème trimestre (perte d’environ 1 g/dL)]

Une carence martiale ne doit cependant pas être méconnue

- Autres facteurs

L’alcool entraîne essentiellement des variations modérées du

VGM

Variations physiologiques (2)

Globules Blancs

La numération leucocytaire: Globules blancs circulants

dans un volume de sang

Valeur normale: 4 – 10 Giga/l

G.B > 10 Giga/l : hyperleucocytose

G.B < 4 Giga/l : leucopénie

- La formule leucocytaire:

Polynucléaires neutrophiles (PNN), éosinophiles ( PNE) et

basophiles (PNB), Lymphocyte, Monocytes

- Le résultat est exprimé en (%)

- les valeurs de référence pour apprécier les anomalies

pathologiques doivent être en valeur absolue de cellules

circulantes / unité de volume

Ils se calculent en multipliant le pourcentage de chaque

catégorie leucocytaire par la numération leucocytaire

Les polynucléaires neutrophiles (PNN)

65 à 70% des GB

1,8 - 7 Giga/l

PNN <1,5 Giga/l: une neutropénie

PNN < 0,2 Giga/l: une agranulocytose

PNN > 7 Giga/l: une polynucléose neutrophile

La lignée granuleuse

Répartition des PNN:

Les polynucléaires éosinophiles (PNE)

1-3 % GB

Taux normal < 0,4 Giga/l

PNE > 0,4 Giga/l: une éosinophilie

Les polynucléaires basophiles (PNB)

< 1% GB

PNB < 0,1 Giga/l

PNB > 0,1 Giga/l: une basophilie

La lignée monocytaire

2 - 8% GB

Le nombre de monocytes est de 0,2 à 0,8 Giga/l

Taux de monocyte > 0,8 Giga/l: une monocytose

Taux de monocytes < 0,2 Giga/l: une monocytopénie

La lignée lymphoïde

Le taux normal: 1,5 à 4 Giga/l

Un taux > 4,0 Giga/l: hyper lymphocytose

Un taux < 1,5 Giga/l: lymphopénie

variations physiologiques- Age

Au cours du premier mois de vie jusqu’à l’âge de 5-6 ans: taux de Lc

est de 8 Giga/l

- Démargination des PNN

Une cause importante de variation physiologique du taux des PNN aux

environ de 1,2 Giga/l ; s’observe chez des sujets noirs africains et la

femme en période péri ménopausique

- Grossesse

Polynucléose neutrophile dont les valeurs maximums surviennent entre

la 30ème et 34ème semaine (9-15 Giga/l)

- Tabac

Polynucléose neutrophile de 20% proportionnelle au nombre de

cigarettes fumées / Jour

Hyperlymphocytose qui se majore avec l’ancienneté du tabagisme

- Effort physique:

Augmentation du taux de PNN et de Lc

Retour à des valeurs de base obtenu après un repos de 20mn

Frottis sanguin:

- 100 à 200 cellules

- Anomalies morphologiques:

- PN à noyau non segmentés ou hypersegmentés

- Anomalies de granulations des PN

- Lymphocytes à noyau hyperbasophile

- Cellules anormales: leucoblastes leucémique

Plaquettes

La numération plaquettaire: Examen essentiel

C'est le décompte des plaquettes dans le sang circulant

- Taux normal : 150 - 400 Giga/l

- Taux < 150 x Giga/l : thrombopénie ou thrombocytopénie

- Taux > 500 x Giga/l : thrombocytose, ou hyperplaquettose

En pratique:

Il faut savoir renouveler l'examen lors d'un résultat anormal

- fausses thrombopénies

- hyperplaquettose

Volume moyen plaquettaire(VMP):

Valeur normale: 8 - 12 fl

Indice de distribution du Volume Plaquettaire (IDP ou

PDW): Coefficient d’anisocytose plaquettaire

Normes : 10 à 15 %

VMP

L'étude morphologique sur frottis montre:

- Agrégats plaquettaires

- Elle peut détecter des anomalies plaquettaires, rares:

anisoplaquettose , macrothrombocytes.

En pratique, ce sont les anomalies quantitatives des plaquettes

qui sont de loin les plus fréquentes

Variations physiologiques

- Grossesse:

- diminution très modérée de la numération des Pq

- doit être considérée comme pathologique et faire proposer

au minimum une enquête clinique, un contrôle de

l’hémogramme, une analyse du frottis sanguin et une

évaluation du VMP, voir des exploration plus poussés

- Altitude:

thrombocytose (3000-4000m)

Le compte rendu d’un hémogramme doit comprendre

au minimum les valeurs :

- de l’hémoglobine

- de l’hématocrite

- de la numération des érythrocytes ; des principales constantes

érythrocytaires : VG M , CCMH et TCMH

- de la numération des leucocytes avec établissement

de la formule.( Les valeurs de la numération des différents types de

leucocytes doivent être fournies sous forme de valeurs absolues)

- de la numération des plaquettes

Les constantes érythrocytaires les plus utiles au praticien sont le VGM et

la CCMH. Ces constantes sont utilisées en clinique pour classifier

une anémie

Les réticulocytes ne font pas partie de l’hémogramme systématique.

( résultat en valeur absolue). Cette valeur ne peut être appréciée

qu’en tenant compte du taux d’hémoglobine