td n° 5 - algé...les points qui s’alignent dans le prolongement du réticulum endoplasmique...

Université Oran 1, Faculté de Médecine, Service d’Histologie-Embryologie

Travaux Pratiques et Dirigés de Cytologie des étudiants en première année de Médecine

Année Universitaire : 2019-2020

La Traduction

Considérons maintenant que l'ARNm a été exporté dans le cytoplasme. Il reste désormais à

passer d'une séquence de nucléotides portée par l'ARNm à une protéine, macromolécule qui

n'est autre qu'une séquence complexe d'acides aminés (ou en d'autres termes une chaîne

polypeptidique). C'est le processus dit de traduction dont nous allons maintenant préciser le

déroulement.

Retenons tout d'abord qu'à un acide aminé précis correspond un groupe de trois nucléotides

successifs portés par l'ARNm (appelé codon).

En effet, il existe 20 acides aminés différents ; avec les quatre bases (A, U, G et C), on peut

former 64 combinaisons de trois bases (4x4x4). Un acide aminé donné est donc désigné par

plusieurs codons ; de plus, certaines combinaisons ne désignent aucun acide aminé: on les

appelle "codons stop".

La correspondance entre un codon donné et un acide aminé porte le nom de code génétique.

On qualifie souvent ce dernier d'universel, de non chevauchant (dans une séquence, une base

donnée ne peut pas appartenir à deux codons successifs : les codons sont lus les uns à la suite

des autres sans qu'il y ait partage d'une base) et de redondant (deux codons distincts peuvent

coder un même acide aminé).

Deux sortes d'ARN vont intervenir dans la traduction, en plus de l'ARNm. L'ARNr

(ribosomal), d'une part, est constitutif des ribosomes. L'ARNt (ARN de transfert), d'autre part,

exerce la plus grande part de la traduction.

L'ARNt possède en effet un anti-codon formé de trois nucléotides complémentaires à ceux du

codon de l'ARNm. A l'intérieur d'un ribosome, L'ARNt s'apparie (grâce à son anti-codon) à un

codon de l'ARNm qui lui correspond.

L'acide aminé correspondant au codon de l'ARNm que l'on veut traduire se fixe alors à cet

ARNt. Peu à peu, par reconnaissances successives, la chaîne polypeptidique s'agglomère. Dès

la rencontre d'un codon stop, le processus cesse : la protéine est formée. Elle peut alors très

bien être exportée hors de la cellule par exocytose.

TD N° 5 :

Synthèse des protéines de sécrétion au niveau du REG




Le réticulum endoplasmique est un système de la membrane qui s’étend à travers tout le

cytoplasme. Ces membrane sont en continuité avec la membrane nucléaire et délimitent un

espace important à l’intérieur de la cellule. Le réticulum endoplasmique est impliqué dans la

synthèse et le transport des protéines membranaires et des lipides. Il participe aussi à la

signalisation cellulaire via les lipides à inositol du feuillet interne de la membrane plasmique.

Dans les cellules musculaires, le réticulum endoplasmique est appelé réticulum

sarcoplasmique.

Les ribosomes libres flottent librement dans le cytoplasme. Iles fabriquent les protéines

solubles dont l’activité se déroulera dans le cytosol ou dans certains organistes, comme celles

qui sont importés dans les mitochondries.

Les points qui s’alignent dans le prolongement du réticulum endoplasmique rugueux

(RER, REG) représentent les ribosomes, formation où se déroule la synthèse des protéines

destinées aux membranes cellulaires et aux lysosomes ou devant sortir de la cellule.

Les protéines membranaires néosynthétisées restent associées à la membrane des RER et

les protéines qui doivent être secrétées s’accumulent dans la lumière de l’organite.




Représentation schématique du réticulum endoplasmique rugueux et de réticulum

endoplasmique lisse

N-glycosylation dans le réticulum endoplasmique

La N-glycosylation débute par le branchement en-bloc d’un groupement riche en

mannoses sur les résidus d’asparagine (Asn) présents dans les séquences

spécifiques Asn-X-sérine ou thréonine.




La N-glycosylation s'effectue en deux étapes. Dans un premier temps, la chaine d’acide

aminés des protéines est modifié notamment par l’ajout de sucres, cette modification est

appelée glycosylation des protéines, il s’agit d’une modification majeur qui va modifier les

caractéristiques physicochimique et biologique des protéines

La plupart des protéines secrétées ou de la membrane plasmique qui empreinte donc la

voie du réticulum et de Golgi vont subir cette maturation, cette glycosylation servira

notamment de marqueur de repliement protéique elle permettre la validation ou encore la

dégradation des protéines

Cette glycosylation consiste en un transfert d’un bloc précurseur comportant 14 sucres sur

une fonction amine d’une chaine latéral on parlera d’une glycosylation N-lié ou asparagine

lié, ce transfert est réalisé dans le réticulum endoplasmique par l’enzyme oligosaccharyl

transférase, puis ce précurseur est alors modifié dans la voie de sécrétion notamment dans

l’appareil de golgi, il va y avoir des opérations de suppression de sucre et d’ajout de nouveau

sucres sur l’arborésence.

Le précurseur oligosaccharidique est synthétisé dans le réticulum endoplasmique cette

synthèse est construite sur une molécule enchâssé sur la membrane le dolichol une molécule

comportant une langue chaine aliphatique Un composé organique est aliphatique lorsqu'il




contient du carbone, dont la structure en chaîne est ouverte et linéaire, ; il est activé sous une

forme pyrophosphoryl , des réaction enzymatiques successive vont alors ajouter différents

sucres sur le dolichol , l’apport de N acétyl glycosamine puis de nombreuse molécules de

mannose et enfin du glucose

Ces sucres sont apportés sous une forme activé énergétiquement par la présence des

liaisons phosphate, en effet la synthèse débute sur la face externe de la membrane du

réticulum du coté cytosolique, les premiers sucres sont donc greffés par des enzymes

cytosoliques; les sucres étant présent dans le cytosol et n’ayant pas donc traversé la membrane

du réticulum endoplasmique

À l’étape 4 un mécanisme de flip flop vas faire basculer la ramification sucrée vers la

lumière du RE sur sa face interne, les ajouts suivant de sucres seront donc réalisés par les

enzymes présents dans le RE, par contre les substrat de mannose et de glucose seront apportés

par le même mécanisme de flip flop

Ils sont préalablement chargé sur le dolichol du coté cytosolique, la molécule bascule alors

vers la lumière du RE et permet le transfert du sucre sur la ramification sur de mannose déjà

présente sur la molécule de dolichol , ceci est illustré par les réaction 5 et 6 sur ce schéma , on

aboutit ainsi à la formation d’un précurseur complet du coté interne de la membrane du RE

Figure 5: N- glycosylation

,

Ce précurseur glucidique va pouvoir alors être transféré sur des protéines ce schéma

représente le réticulum avec un ribosome en cours de synthèse protéique en bas à gauche, la

chaine peptidique naissante est indiquée en bleu , l’arbre glucidique porté par le dolichol va




être transféré sur l’asparagine de la chaine peptidique par une oligosaccharyl transférase , il

subit alors quelques modifications , l’élimination des résidus glucidique et d’une molécule de

mannose, la protéine est alors prête à être transféré vers le cis golgi .

L’élimination des résidus de glucoses dans le RE joue un rôle très important dans le

contrôle de qualité des protéines avant leur sortie vers golgi , les protéines néosynthétisées

doivent adopter un repliement correcte leur glycosylation permet leur rétention dans le RE par

la calnexine (chaperon moléculaire) une protéine membranaire résidente du RE, cette

calnexine reconnait la présence d’un glucose dans l’extrémité de la ramification saccharidique

, une glycosidase va éliminer ce glucose et permet ainsi la sortie de la protéine vers une

vésicule toutefois une chaperon à activité glycosyl transférase veille à se que ces protéines

soient correctement replier si telle n’est pas le cas elle ajoute de nouveau un résidus glucose

en bout de chaine ce qui vas provoquer l’allongement de la rétention de cette protéine dans le

RE laissant ainsi le temps pour son repliement correcte ou l’action d’autres chaperons pour

l’aider à se replier.




Toute fois certaines des protéines qui n’arrive pas à se replier correctement elles sont alors renvoyer dans le cytosol où l’action d’autres chaperon pour l’aider à se replier par le port aqueux Sec61 qui peut fonctionner dans l’autres sens, ces protéines sont alors détruite par l’action des N-glycanase qui vont enlever les résidus de saccharidiques présent sur les asparagines puis par l’action d’une protéasome qui va dégrader la chaine peptidique en acides aminés après marquage par l’ubiquitine les protéines portant cette première glycosylation vont alors gagner l’appareil de golgi par l’intermédiaire de vésicules elles vont subir alors d’autres modifications post traductionnelles soit sur l’arborescence de sucres déjà présente soit sur d’autres acides aminés avec d’autres types de modifications.

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