partie 2 du cours de biochimie : methodes d’etude et d’analyse des biomolecules bp préparateur...
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PARTIE 2 DU COURS DE BIOCHIMIE :
METHODES D’ETUDE ET
D’ANALYSE DES BIOMOLECULES
BP Préparateur en pharmacie - Lycée Liberté
Document 2 : Le broyeur à hélice (ultra turrax)
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Document 3 : Le phénomène de diffusion (ex :glucose)
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2 0 m m o l / l 0 m m o l / l 10 m m o l / l 10 m m o l / l
Flux net
A B A B A B
B a r r iè r e pe r mé a ble a u glucose M o lé cule de glucose
Flux net …………
Document 4 : principe de l’extraction solide – liquide par contre - courant
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Échantillon solide
SolvantSolvant saturé
Échantilon épuisé
Document 4 : principe de l’extraction solide – liquide par contre - courant
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Échantillon solide
SolvantSolvant saturé
Échantilon épuisé
Document 5 : principe de l’extraction liquide - liquide
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Document 5 : principe de l’extraction liquide - liquide
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Document 6 : centrifugation et ultracentrifugation
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Animation sur la centrifugation
Document 7 : principe de la dialyse
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Eau distillée
Membrane semi-
perméable
(boudin à dialyse)
protéine
Sels minéraux
Document 7 : principe de la dialyse
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Eau distillée
Membrane semi-
perméable
(boudin à dialyse)
protéine
Sels minéraux
Document 8 : chromatographie échangeuse d’ions
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+-
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+-
+-
+-
+-
aa chargé +
aa non chargé
aa fortement chargé -
Mélange d’acides aminés
colonne
Résine portant
des charges +
Séparation de l’acide aminé d’intérêt des autres acides
aminés
Elution : récupération de l’acide aminé d’intérêt
Liquide d’élution
Animation sur la chromato d’exclusion
Document 9 : chromatographie sur colonne
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Document 10 : chromatographie sur couche mince (CCM)
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Sens de migration du so lvant
cuve
Plaque chromatographique
dépôts
solvant
Animation sur la CCM
Document 11 : bilan sur les chromatographies
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NOM PRINCIPE
TYPEphase fixe /
phase mobile
MATERIEL
ADSORPTION
séparation grâce à des liaisons faibles qui se font entre les molécules et les différentes phases
solide/liquideColonne ou
CCM
ECHANGEUSE D'IONS
séparation grâce à des liens entre groupements de charges opposées
solide/liquideColonne ou
CCM
DE PARTAGE
séparation selon la solubilité des molécules entre les 2 phases
liquide/liquideou
liquide/gaz
Colonne ou CCM
EXCLUSION-DIFFUSION
séparation selon la taille des molécules (les plus petites sont retenues plus longtemps)
solide/liquide Colonne
AFFINITE
répartition grâce à une reconnaissance spécifique entre la phase fixe et la molécule à purifier (complémentaires)
solide/liquide Colonne
Document 12 : exemple d’électrophorèse d’acides aminés
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aa chargé –
aa non chargé
aa fortement chargé +
- +
Document 13 : principe des dosages volumétriques
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On utilise souvent la formule .......................
Il existe plusieurs types de dosage volumétriques en fonction du type de réaction
chimique utilisée : dosage acido-basique, dosage rédox,...
(cf. cours de chimie)
Ca Va = Cb Vb
Document 14 : principe de fonctionnement d’un spectrophotomètre
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