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TRANSCRIPT
• Varia0on de la quan0té d’ADN au cours du temps Avec A = Phase G1 B = Phase S, C = phase G2
Durant la phase S la quantité d’ADN est doublée ; elle est ensuite divisée par 2 lors de la mitose. Pb : comment se réalise la duplication du matériel génétique lors de la phase S ?
TP1 – La duplica1on de l’ADN
Objec0fs de la séance : raisonner pour comprendre les mécanismes qui permeVent la réplica1on de l’ADN précédent la division cellulaire et communiquer ses résultats par un schéma. Consigne : À par1r des documents proposés, retrouver la démarche historique et les résultats obtenus par Meselson et Stahl. Schéma0ser les résultats de la réplica1on de l’ADN durant deux généra1ons chez les levures. Documents :
-‐ livre p 22 document 1 et 2 -‐ site interac1f : hVp://pedagogie.ac-‐toulouse.fr/svt/serveur/lycee/gueraut/stahl/
Démarche historique
Meselson et Stahl partent d’un constat : Durant la phase S (B sur le doc ci-‐dessus), la molécule d’ADN est recopié, les 2 brins formés doivent porter la même informa1on géné1que.
Protocole expérimental
L’azote est un constituant des nucléotides, il a pour formule chimique N, il existe 2 isotopes (nombre de neutrons différents) 14N et 15N. Ces 2 isotopes se distinguent par leurs poids moléculaires 15N>14N. Si on cultive des bactéries en présence d’azote 14, l’ADN synthétise sera un ADN de densité légère ; les bactéries cultivées en présence 15N synthétiseront un ADN lourd. Les différences de densités sont mises en évidence par centrifugation.
Témoins
Expériences
Les résultats
Témoins Résultats sur 3 généra1ons
Comment à partir de ces résultats valider une des 3 hypothèse émise ?
Dans cette hypothèse on devrait obtenir dans les tubes une bande d’ADN lourd et une bande d’ADN léger. Ce n’est pas ce qui est obtenu expérimentalement => l’hypothèse est réfutée
Pour les 3 générations ce modèle de duplication est concordant avec les résultats expérimentaux. C’est hypothèse est validée
Dans ce cas : 1er génération les résultats sont concordants et ne permettent
pas de réfuter cette hypothèse. 2ième et 3ième génération : modèle de réplication non conforme aux résultats
expérimentaux (une seule bande de densité comprise entre 1,710 et 1,717)