Milieu Urée Tryptophane

BUT

Milieu d’identification et de recherche de la tryptophanase ( par production d’indole), de l’uréase et de la TDA (Tryptophane Désaminase)

Composition

Urée

Substrat de l’uréase

Composition

Tryptophane Ethanol

Substrat de la TDA Solubilise le Tryptophane

Composition

Rouge de Phénol Chlorure de Sodium

Indicateur coloré Isotonicité du milieuRouge (basique) et jaune (acide)

KH2PO4 K2HPO4

Composition

Rôle tampon

Principe

Mise en évidence de l’uréase

Urée + H20 CO2 + 2 NH3

Alcalinisation du milieu visible grâce au rouge de phénol

Principe

Après ajout de Chlorure de Fer III, on obtient un produit marron foncé en présence d’acide indole pyruvique

Recherche de la TDA

Tryptophane Acide indole pyruvique NH3 2 H+ 2 e-+ + +Tryptophane désaminase

Principe

Recherche de la tryptophanase

Après ajout du réactif de Kovacs, on observe un anneau rose se former en présence d’indole

Tryptophane NH3+ ++ H2O IndoleAcide pyruviqueTryptophanase

Lecture & interprétation

Après lecture du résultat de l’uréase, on effectue 2 tests:

Réactif de Kovacks pour rechercher la production d’indole

Ajout de FeCl3 pour rechercher la présence d’acide indole pyruvique

Lecture & interprétation

Mise en évidence de l’uréase

Résultat positif: rouge Résultat négatif: jaune

Recherche de la TDA

Résultat positif: marron Résultat négatif: jaune

Recherche de la tryptophanase

Résultat positif: jaune Résultat négatif: rose