l’effet de l’extrait d’ ocimum basilicum sur quelques
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République Algérienne Démocratique et populaire
Ministère de l’Enseignement Supérieur de la Recherche Scientifique
Université Larbi Ben Mhidi Oum El Bouaghi
Faculté Des Sciences Exactes et sciences de La Nature et de la Vie
Département des Sciences de la Nature et de la vie
N 0 d’ordre …. N 0 de série ….
Mémoire
Présenté pour l’obtention du diplôme de
MASTER
Filière : Science Biologique
OPTION : Biologie et Physiologie de la Reproduction
Thème
Présenté par :
Khoualdi imen et Boughrara naïla
Devant le jury :
Président : Mm Boulehbel Souad Professeur Université Oum El Bouaghi
Rapporteur : Mm Hamadouch Nadira MAA Université Oum El Bouaghi
Examinateur : Mr Mechri Adem MAA Université Oum El Bouaghi
Année universitaire : 2017-2018
L’effet de l’extrait d’Ocimum basilicum sur quelques paramètres biochimiques et reproductifs chez les rats
intoxiqués par le mercure.
Je dédie ce modeste travail et ma profonde gratitude :
A celle qui m’a étreint de tendresse et d’affection, et qui je dois la réussite, pour l’éducation qu’elle m’a prodigué ; avec tous les moyens ext au prix de toutes les sacrifices qu’elle a consentis à mon égard, pour le sens du devoir qu’elle m’a enseigné depuis mon enfance.
Ma très précieuse, chaleureuse et aimable mère
Nadia
Que dieu la garde
A la mémoire de mon père disparu trop tôt. J’espère que, du monde qui est sein maintenant, il apprécie cet humble geste comme preuve de reconnaissance de la part d’une fille qui a toujours prié pour le salut de son âme
Mon cher père :
Brahim
Puisse dieu le tout puissant, l’avoir en sa sainte misécorde !
semblaient infranchissable. A mon cher frère et ma chère sœur
Abed el Rahman et Rahma.
A mon mari : Zakaria.
A mes beaux parents : Lazhar, Fatiha.
A ma chouchoute. Balsem.
A ma très chère amie et sœur : imen, Mofida, hadjer Symbole de tendresse et
de fidélité.
Pour leurs encouragement et je leurs souhaite tout le bonheur et la réussite
Que dieu vous garde
Je leurs offre ce travail par grand amour et attachement
A toutes la famille
A mon binôme Imene avec qui j’ai partagé les bons et les durs moment.
Que ce travail soit l’expression de ma grande affection et un témoignage de
mon attachement et de mon grand profond amour. Naila
Je dédie ce travail à :
Ma mère qui m’a entouré d’amour, d’effection et qui fait tout pour ma réussite, que dieu la garde ; Salima
Mon père qui m’a aidé à devenir ce que je suis aujourd’hui, que dieu le garde et le protège ; Hamid
Mes frères : Soufiane et Haithem.
A mon marie : Walid ; qui a eu beaucoup de mérite pour mettre fin à ce travail.
A mes beaux parents : Yamouna et Brahim.
A mes grands parents Merzouk et Hafsia et kheemissa
et toute ma famille.
Mes très chère amies et sœurs ; Bessma, Rania, Souad. Symbole de tendresse et de fidélité.
A tous ceux qui m’ont encouragé et m’ont
Apporté leur soutien.
Imen
Notre premier remerciement revient au bon Dieu de nous avoir donné le courage et la patience pour réaliser ce modeste travail.
Nous aimerion remercier notre directeur de recherche Hamadouch nadira d’avoir supervisé notre humble travail et de nous avoir fourni beaucoup de conseils.
Nous offrons également nos remerciments au les enseignants : Mosbah kamilia et Moumen yasmina,et n’oubliez pas merci de l’animalerie dans l’université du Constantine et merci beaucoup docteur vétérinaire de l’unniversité l’Arbi Ben Mhidi Mofida lounis util pour nous aider et n’oublier pas remercier les ingénieures du l’laboratoire kawter Mahreb et Semia Chibani pour fournir toutes les possibilités pour compléter le travail.
Nous offrons nos remerciements et notre respect aux membres du jury, au professeur principal, Boulahbel Souad,et au enseignant examinateur Mechri Adem ,pour leur appréciation de la présentation de cette modeste note.
Ne pas oublier de remercier nos collègues Mohamed, soheib, Yassine, Abd El Mouaize, Hadjer et Imen.
Remercier tous ceux qui nous ont apporté une aide morale.
Sommaire
Introduction
chapitreI : Généralités sur la plante Ocimum basilicum
1-Présentation d’Ocimum basilicum………………………………...01
2-Noms et synonymes d’Ocimum basilicum…………………...….. 02
3-Historique d’Ocimum basilicum………………………………………………..…….03
4-Répartition géographique d’Ocimum basilicum …………………….03
5-Discription d’Ocimum basilicum (appareiL végétatif) ……………...03
6-Classification d’Ocimum basilicum …………………………………04
7-Les compositions chimiques d’Ocimum basilicum…………………..04
8-Les valeurs nutritives d’Ocimum basilicum…………………………..04
9-Utilisation traditionnelle d’Ocimum basilicum……………………….05
10-Les effets biologiques d’Ocimum basilicum………………………..05
10-1- Effet sur la reproduction chez la femelle…………………....05
10-2-Effet sur la reproduction chez le mal…………………………05
10-3- Activité antioxydant …………………………………………06
10-4- Activité antibactérienne ………………………………………06
10-5- Activité anti toxique……………………………………….......06
10-6- Activité hypolépimiant …………………………………..…...06
10-7-Activité antiviral…………………… ………………………….06
ChapitreII : le mercure
1-Définition…………………………………………………………07
2-Les propriétés physico-chimiques …………………………….…07
3-Sources et émission de mercure …………………………………08
4-Utilisation du mercure ……………………………………………08
5-Métabolisme du mercure …………………………………………09
5-1-Absorpsion ………………………………………………….09
5-2-Distribution …………………………………………………09
5-3-Excretion…………………………………………………….10
6-L’intoxication par le mercure métallique et ses dérivés inorganique...10
6-1Intoxication aigue…………………………………………..10
6-2-Intoxication chronique ……………………………………10
7-Les effets du mercure…………………………………...…………11
7-1-Effets sur la reproduction……………………………………11
7-2-Effet mutagènes ……………………………..………………11
7-3-Les effets du mercure sur le système immunitaire….……….11
7-4- Les effets du mercure sur les reins………………………….12
7-5-Les effets du mercure sur le foie ............................................12
Partie pratique
I-Matériel et méthode………………………………………………..…..13
II-Résultats…………………………………………………………..…...21
III-Discussions…………………………………………………………...31
*Conclusion.
* Résumé.
Liste des tableaux
Numéro de tableau
Le titre La page
I Les noms et les synonymes d’ocimum basilicum
02
II Classification d’ocimum basilicum 04
III Les valeurs nutritives d’ocimum basilicum 04
IV Variation des poids relatifs des testicules et l’épididyme
22
V Variation des poids relatifs des foies 23
VI Variation des poids relatifs des reins 24
VII Variation de La concentration, mobilité et la vitesse du sperme dans chaque groupe
25
VIII Variation de taux plasmatique du la Testestérone 26
IX Variation de taux plasmatique des paramètres biochimique 27
Liste des figures :
Numéro de figure
Titre de figure La page
01 Poids corporel(g) des rats témoins et traités durant 30 jours. 21 02 les effets du l’extrait de l’Ocimum basilicum ou/et le mercure sur les
poids relatifs des testicules et l’épididyme. 22
03 Les effets de l’extrait de l’Ocimum basilicum ou/et de mercure sur les poids relatifs des foies.
23
04 Les effets de l’extrait de l’Ocimum basilicum ou/et le mercure sur les poids relatifs des reins.
24
05 Variation de la concentration des spermatozoïdes chez les quatre groupes des rats.
25
06 Variation des nombres des spermatozoïdes mobiles (%) chez le témoin et le groupe traité.
25
07 Variation de la vitesse des spermatozoïdes chez le témoin et le groupe traité.
26
08 Les effets de l’extrait de l’Ocimum basilicum et/ou le mercure sur la concentration du Testestérone.
27
09 Effet de l’extrait et/ou le mercure sur le taux de cholestérol. 28 10 Effet de l’extrait et/ou le mercure sur le taux de triglycéride. 28 11 Effet des l’extrait et/ou le mercure sur TGO. 29 12 Effet des l’extrait et/ou le mercure sur TGP. 29 13 Les effets de l’extrait et/ou le mercure sur le taux de glucose. 30 14 Les effets de l’extrait et/ou le mercure sur le taux de L’ Urée. 30
Liste des photos
Numéro des photos
Titre La page
01 Photo d’Ocimum basilicum( original) 01 02 Les rats Wister (photo original) 13 03 Cage pour l’élevage du rat 14 04 la laitière des rats 14 05 La nutrition des rats 14 06 Biberon pour l’eau des rats 14 07 Stylo permanant pour identifie les rats 14 08 La sonde de cavage 15 09 Rotavapeure 16 10 Bicher 16 11 Boite de pétrie 16 12 Agitateurs 16 13 Entonnoirs 16 14 Poudre d’Osmium basilicum 16 15 Ethanol et l’eau distillée 16 16 Trouce pour la dissection 16 17 Malassez 16 18 Microscope 16 19 L’eau physiologie 16 20 Chloroforme 16 21 L’extrait sur l’agitateur 17 22 L’extrait sur rotavapeur 17 23 La dilution des l’extrait 17 24 Les étapes pour le gavage 18 25 L’anesthésié du rat 19 26 La dissection de rat 19
Liste des abrévaitions :
Hg : Mercure
Hg° : Mercure métallique
Hg++ : Ions mercurique
SNC :systéme nerveus central
T : groupe Témoin
O : groupe traité par l’extrait Ocimum basilicum
M : groupe traité par mercure
O M : groupe traité par l’extrait Ocimum basilicum +Mercure
ROS : Espèces réactives oxygénées (Reactive Oxygen Species)
CAT :Catalase
SOD :Superoxyde dismutase
Introduction
De tout temps et à travers les diverses civilisation : grec, romaine, égyptienne, et arabe,
l’homme a eu recours aux plantes non seulement pour se nourrir, se vêtir, se chauffer, se
loger, se parfumer, mais aussi pour entre tenir son équilibre, prévenir et guérir les
maladies qui nuisent à sa santé.
Les plantes aromatiques et médicinales représentent une source inépuisable de remèdes
traditionnelles et efficaces grâce aux principes actifs qu’elles contiennent ; alcaloïdes,
flavonoïdes ; vitamines ; saponosides ……….etc.
Parmi les familles qui appartiennent à cette catégorie des plantes aromatiques et
médicinales, la famille de Lamiacée représente une grande importance aussi bien pour son
utilisation en industrie alimentaire et en parfumerie qu’en thérapeutique. Elle est l’une
des familles les plus utilisées comme source mondiale d’épices et d’extraits à fort
pouvoir antibactérien, antifongique, anti-inflammatoire et antioxydant. Le genre le plus
cité dans la littérature est : Ocimum basilicum.
Les Ocimum basilicum sont des plantes à croissance rapide, et utilisé dans la médecine
traditionnelle pour le traitement de crampe d’estomac, de diarrhées, d’angine …etc.
Le basilic a un effet sur la reproduction, il présente une activité antioxydant,
antibactérienne, antitoxique, hypolépimiante .Cette plante joue un rôle importante dans la
prévention de la toxicité des métaux, y compris le mercure.
L’objectif de notre étude consiste à tester
� Leffet de l’extrait d’ ocimum basilicum sur quelques paramètres biochimiques des
rats.
� L’effet de l’extrait d’ocimum basilicum sur le système reproducteur des rats.
� l’effet de l’extrait d’ ocimum basilicum sur des rats intoxiques par le mercure.
Partie théorique
Chapitre 1 :
Généralités sur la plante Ocimum basilicum
1-Présentation d’Ocimum basilicum
L’Ocimum basilicum a pour nom commun « le basilic », le mot basilic à l’origine
vient de grec basilikom qui signifie plante royale (Mohammed, Chenni ., 2016).
Les Ocimum basilicum sont des plantes à croissance rapide ( Métali ,Mouna et all.,
2016) c’est une plante de la famille lamiacée largement utilisé comme plante
condimentaire pour ces propriétés culinaires, par ailleurs cette plante est utilisée en
médecine traditionnelle. (Mohammed, Chenni., 2016)
Photo 01 : Ocimum basilicum
-1-
2-Noms et synonymes d’Ocimum basilicum :
Tableau I : les noms et les synonymes d’Ocimum basilicum (Belkamel, A et al., 2008)
Nom scientifiques Ocimum basilicum. L
Synonymes -Ocimum basilicum var.
-Glabratum benth, Ocimum basilicum var.
-Majus benth.
Noms vernaculaires - Lahbeq.
- Habeq.
- hamahim.
Autres noms -Basilic.
-Basilic commun.
-Basilic officinal.
-Basilic de jardin.
-herbe aux sauces.
-Pisto ou pesto (en Italie).
-Reyhan (en Turquie).
-2-
3- Historique d’Ocimum basilicum
Le basilic est originaire d’Asie, l’Amérique et l’Inde .Au début des années 1600, les
anglais utilisent basilic dans leur nourriture (Mueen, Ahmed. et al., 2015) . Le basilic à
une longue histoire de légende et utiliser à échelle mondiale .Il est aussi référé comme
sacré dans l’Inde, car il est utilisé pour désinfecter la maison contaminée par Paludisme
lequel tue les moustiques.(Rajamanickam , Karthika. et al., 2017)
L’Ocimum basilicum a été cultivé et vendu dans l’Etat de New York depuis la fin de
17 eme siècle. (Mueen, Ahmed. et al., 2015)
4- Répartition géographique d’Ocimum basilicum
L’Ocimum basilicum est une plante herbacée annuelle originaire de l’Inde et de l’Asie
tropicale qui s’acclimatée en Europe tout au début des temps historiques.
Actuellement, elle pousse à l’état sauvage dans les régions tropicales et subtropicales
incluant l’Afrique centrale et le sud-est d’Asie, il est commercialisée dans nombreux pays
à travers le monde : la France, la Hongrie, la Grèce , l’Egypte , le Maroc , l’Algérie et
l’Indonésie et dans plusieurs Etas Américains . (Mohammed, Chenni., 2016 )
5-Discription d’Ocimum basilicum (Appareil végétatif) :
Le basilic est une plante herbacée pouvant atteindre 30 à 60 cm de hauteur, son odeur et
sa saveur sont fortement aromatiques. Sa culture exige un climat chaud et ensoleillé, un
sol irrigable, riche en matières organiques. ( Dupont, F. et al., 2012 )
*les tiges : anguleuses et ramifiées portent des feuilles opposées de forme ovale à
oblongue et couleur généralement verte à l’aspect brillant.
*Les feuilles : sont nombreuses, opposées pétiolées de forme ovale, lancéolée et ailées.
Elles sont longues de 2 à 5 cm, entières ou dentées et ciliées sur les bords, de couleur verte
pale à verte foncée. (Belkamel, A et al., 2008)
-3-
6- Classification d’Ocimum basilicum
Tableau II: Classification d 'Ocimum basilicum. (Mohammed, Chenni., 2016).
7- Les compositions chimiques d’Ocimum basilicum :
Les feuilles de basilic contiennent également environ 5% de tanins, d'acide oléanolique
(0,17%) et d'une petite quantité d'acide ursolique, protéines (14%), de glucides (61%),
ainsi et des concentrations relativement élevées de vitamine (A, B1, B2, C et E)et l'acide
rosmarinique (Ouibrahim, Amira., 2015)
En outre, elles renferment des flavonoïdes (0,6 à 1,1%) dont flavonoïdes aglycones
(Viorica H., 1987)
8-Valeurs nutritives d’Ocimum basilicum :
Poids /volume
Feuilles fraiches
2.5 g /15 ml
Feuilles sèches
2 g /15 ml
Calories 0.5 5.0
Proteines 0.7 g 0.3 g
Glucides 0.1 g 1.3 g
Lipides 0.0 g 0.1 g
Fibres alimentaires 0.1 g 0.9 g
Tableau III : présentation de valeur nutritive de feuilles d’ Ocimum basilicum fraiche et sèches. (Khamouli Okba et al. ; 2007)
-4-
Règne Plantae.
Division Magnoliophta.
Classe Magnoliopsida.
Ordre Lamiales.
Famille Lamiaceae.
Genre Ocimum.
Espèce Ocimum basilicum.
9- L’utilisation traditionnelle d’Ocimum basilicum
L’Ocimum basilicum est utilisé dans la médecine traditionnelle pour le traitement
des crampes d’estomac, de diarrhées et d’angine… (Saliou ,Ngom. Et al., 2012)
Les feuilles et les fleurs de l’Ocimum basilicum sont utilisées dans la médecine populaire
comme tonique et vermifuge, en outre, le thé de cette plante est également décrit comme
un traitement contre la dysenterie, la nausée et la flatulence.
Les huiles de cette plante est bénéfique pour le soulagement des spasmes rhinite, la
fatigue mentale, ainsi, comme un traitement de premiers soins pour les piqures de guêpes
et morsures de serpent.(Mueen ,Ahmed. et al., 2015)
10- Les effets biologiques d’Ocimum basilicum
10-1 -Effet sur la reproduction chez la femelle
Selon les études l’étude « d’Alia Bilal. et al., 2013 »qui a été réalisé chez les
femelles adultes des rats Wistar, l'extrait de l’Ocimum basilicum a un rôle de contraceptif.
En effet, les résultats de cette étude ont montré : une augmentation significative de la durée
du cycle de l’œstrus et une diminution de poids des ovaires, et d’utérus. Le rapport
histologique montre la présence de gros corps jaunes dans le parenchyme ovarien.
Par conséquence de cette étude, l’extrait d’Ocimum basilicum perturbe l’ovulation normale
en perturbant le cycle d’œstrus et en prolongeant ainsi la phase de diestrus. Il a donc le
potentiel de devenir un contraceptif féminin.
10-2- Effet sur la reproduction chez le mal
Selon l’étude d’Arash Khaki et al., 2011 l'administration de l’extrait d’Ocimum
basilicum permet une augmentation significative du pourcentage de spermatozoïdes, la
viabilité , la mobilité et la testostérone sérique totale. Dù à l’activité antioxydante de la
plante par la présence des enzymes catalase(CAT) et superoxyde dismutase(SOD) donc
l’extrait d’Ocimum basilicum peut être un traitement prometteur pour améliorer les
paramètres sains du sperme.
-5-
10-3- Activité antioxydant
L’extrait des feuilles de basilic fraiches provoque l’élévation de la réponse enzymatique
antioxydant par l’augmentation de façon importante de l’activité du glutathion hépatique
réductase et du SOD.
L'activité antioxydant a été également expliquée par le niveau de teneurs en composés
phénoliques et flavonoïdes dans l’extrait. (T, Dasgupta et al., 2004)
10-4 Activité antibacterienne
L’étude de « Rajamanickam Karthika et al.,2017 » a montré que l’extrait de basilic à
différentes concentrations allant de 100, 200 et 300 μg / mL ,inhibe la croissance de
différentes souches bactérienne à savoir :Escherichia coli, Staphylococcus aureus,
Pseudomonas aeruginosa et Bacillus subtilis .
10-5 Activité antitoxique
D’après l’étude de « Saber ,A et al., 2012 » , les rats (albinos) traités par l’extrait de basilic
et intoxiqués parla suite par la deltaméthrine, ont connus une amélioration corporel contre
les affections histopathologiques, et une augmentation de la Catalase et le superoxide
dismutase, avec une normalisation du niveau de la créatinine et d’urée.
10-6 Activité hypolépimiant :
Des études montrent que l’extrait de basilic diminue significativement le taux de Cholestérol et Triglycéride, Viala restauration de métabolisme bolique des VLDL qui pourrait être du à stimulation de l’activité lipolytique de la lipoprotéine plasmatique lipase (LPL). La réduction du cholestérol total plasmatique et de son LDL par l’extrait Ocimum
basilicum était associé avec une augmentation du HDL-cholestérol plasmatique qui joue un rôle dans l'élimination du cholestérol une amélioration de l’indice de risque athérosclérotique, cette activité est due principalement à la présence des flavonoïdes (Souliman ,Amrani. et al.,2006).
10-7-Activité antiviral :
Les parties aériennes de la plante Ocimum basilicum ont une action inhibitrice de la substance exterminée contre le cytopathogène induit par le VIH -1 (Yamasaki ,K. et al.,1998). En outre, l'extrait aqueux de cette plante joue un rôle dans l’inhibition de la formation des cellules géantes en culture avec infection par le VIH, ainsi que la transcriptase inverse du VIH1. (Saima , Rubab. et al.,2017) .
- 6 -
Chapitre 2
le mercure
1-Définition
Le mercure (Hg) est le seul métal qui demeure sous forme liquide à la température
ambiante. Il peut facilement passer à l’état gazeux ou de vapeur ce qui lui permet de
pénétrer dans l’organisme préférentiellement par les voies respiratoire « biodisponibilité
pulmonaire de l’ordre de 80% ».causant des dommages aux poumons branchites chronique
et bronchiolites avec pneumonies de type interstitielle (Loubna Elidrissi, 2009).
2-Les propriétés physico-chimiques
Le mercure (Hg) est élément de transition du groupe IIB dans la classification
périodique des éléments de Mendelev, avec un numéro atomique de 80 et une masse
molaire de 200,59g/mol, il se situe entre l’or et le thallium dans cette classification. Sous sa
forme pure, le mercure se présente comme un métal brillant de couleur blanc gris, ayant
une densité de 13,58g/cm3.sous des conditions normales de pression et de température, il
se trouve à l’état liquide, ce qui lui confère un caractère mobile et pratiquement insoluble
dans l’eau ;une forte tension superficielle, une faible résistance électrique, un coefficient de
dilatation élevé ainsi que la capacité à s’amalgamer à des métaux nobile comme l’or, font
que le mercure a des propriétés physiques et chimiques uniques.il existe sous la forme de
sept isotopes stables et quatre isotopes instable, l’abondance relative naturelle des ces sept
isotope stables(Marusczak Nicolas, 2010)
-7-
3-Sources et émission de mercure
La présence du mercure comme contaminant dans l’envirennement, provient de
sources naturelles et anthropiques le dégazage naturelle de l’écorce terrestre constitue la
principale source naturelle de mercure dans l’environnement, le mercure émis dans
l’atmosphère par les sources naturelles se présente principalement sous la forme de vapeurs
de mercure, mais il peut à plus faible proportion se retrouver lié aux particules de l’air prés
de 80%des sources anthropique du mercure dans l’atmosphère sont des émission de
mercure gazeux provenant essentiellement des combustibles fossiles « surtout le charbon »,
des mines de la purification des minerais et de l’incinération des déchets solides, alors que
15%sont constitués par des apportes directs aux sols sous la forme de fertilisants et de
fongicides et 5%par des enfutents industriels ou miniers. En outre il existe une grande
variété de sources diffuses : les piles usagées les lamps fluorexentes aux vapeurs de
mercure, les thermomètres certaines peintures et d’anciens déchets et matériaux industriel
(Silmara Sousa, 2006).
4-Utilisation du mercure
L’écorce terrestre contient en moyenne environ 0.02 ppm de cet élément.
Le cinabre(Hgs)est le minérale mercuriel le plus largement répandu et exploité, connu
depuis l’antiquité en tente que pigment, le sulfure de mercure est encore employé comme
tel pour certains plastique, le papier et la cire outre cette utilisation, le mercure possède
trois grands domaines en tant que constituant de piles, de lamps de contacteur et de tubes
fluorexent ;dans l’industrie chimique comme cathode liquide dans les cellules d’électrolyse
du chlorure du sodium(production de soude et chlore),dans la fabrication d’instruments de
mesure et de laboratoire (baromètre, thermomètre, …….).( Fabrice Marliere, et al, 2001. ).
-8-
5-Métabolisme du mercure
5-1- Absorption
l’absorption du mercure métallique (Hgo) est très faibles par voie digestives (<1%) mais
très élevée par les voies respiratoires(80%).Au niveau du poumon, une partie du mercure
métal peut être oxydé en ions mercuriques (Hg++) ; eux-mêmes absorbés.noton que la
réaction inverse est possible, ce qui fait de la voie pulmonaire une voie d’élimination
mineure ;les dérivés inorganiques sont faiblement absorbés par voie digestive(<10%).les
composés organiques à chaine couve(méthyle et éthylmercure)sont bien absorbés par le
poumon mais aussi par le tractus digestif et la peau.les autres Dérivés organique sont
moins bien absorbés (Bensafa-Colas, et al, 2011)
5-2- Distrubition
Dans le sang et notamment dans les globules rouges, Hgo est rapidement oxydé en
mercure mercurique par des catalases ;en raison de sa lipophile, une fraction du mercure
métal diffuse rapidement au travers de certaines barrières tissulaires (hémato-
encéphalique,placentaire).ce qui explique sa distribution dans le cerveau, le placenta ou le
lait maternel, au sein de ces tissus, Hgo est transformé en Hg++ sous l’action de catalases,
les ions mercuriques hydrophiles ne peuvent retraverser ces barrière et sont donc pièges
entrainant ainsi une accumulation locale dans les lysosomes. Ce phénomène explique la
toxicité du mercure au niveau du cerveau ainsi que sa longue demi-vie dans cet organes de
même une partie du mercure métallique peut passer la barrière placentaire et être oxydé en
mercure mercurique, les ions Hg++ diffusent mal au travers des membranes cellulaire le
rapport plasma érythrocytes est voisin de 1.Hg+ est localisé à 50-90%dans les rein,organ
cible de la toxicité du mercure les dérivés organiques sont très majoritairement intra-
érythrocytaires.lipophile ils passent facilement les barrières hémato-encéphalique et
placentaire .une petite partie du méthylmercure est désalkylé en composés
inorganique(Ask K., et al 2002)(Counter S.A., et al 2004).
-9-
5-3- Excrétion
La fraction non métabolisée des dérivés organiques subit une excrétion biliaire .les
dérivés minéraux sont excrétés principalement par le rein :les fèces la sueur et le poumon
représentant des voies mineures. les composés organique se concentrent dans le lait, la
demi-vie sanguine des dérivés inorganique est biphasique (2-4j et 15-45j) tandis que celle
du méthylmercure est comprise entre 35 et 189j.les demi-vie tissulaire sont très variable :2j
pour le poumon ;60j pour le rein et biphasique pour le cerveau(20j pour la première demi-
vie mais la seconde très longue est malconnue)(Joёl Poupon ; 2007).
6-L’intoxication par le mercure métallique et ses dérivés inorganique
6-1-Intoxication aigue
Devenue exceptionnelle en milieu de travail, l’intoxication aigue par le mercure
métallique peut être observée suite à l’inhalation de fortes concentrations de vapeur de
mercure produites de façon accidentelle dans une zone confinée. Le tableau est dominé par
l’atteinte pulmonaire.les premiers symptômes apparaissent quelques heures après
l’exposition associant une asthénie, une fièvre, des céphalées et une myalgie suivie de
signes d’irritation des voies respiratoires, avec un taux et une dyspnée. En cas d’exposition
plus sévère, le plus souvent suite au chauffage et à la l’inhalation du métal (quelques
heures à des concentrations atmosphérique auteur 2-3 mg/m3 le tableau évolue vers
l’œdème aigue du poumon avec une atteinte alvéolo-interstitielle pouvant s’accompagner
de coliques et de diarrhées.une atteinte systémique peut compliquer le tableau avec
certaines observations, une atteinte tubulaire rénale et une cytolyse modérées par toxicité
direct (L. Bensafa-Colas, et al, 2011).
6-2-Intoxication chronique
L’intoxication chronique mercurielle, ou hydragyrisme,est classiquement liée à une
exposition chronique aux vapeur de mercure, la plupart des données liées à l’intoxications
chronique au mercure métal proviennent d’études épidémiologiques réalisées auprès de
salariés d’usines de fabrications du chlore l’organe cible chez l’homme lors de l’inhalation
de vapeurs de mercure est le SNC, le rein est l’organe critque,la sévérités et la réversibilité
des lésions dépendent de l’intensité et de la durée de l’exposition ( L.Bensafa-Colas, et
al ;2011). -10-
*Atteinte rénale
Le mercure ionisé Hg+2 (inorganique) va s’accumuler au niveau des tubules
proximaux du rein et la zone superficielle de la médullaire externe. Lors de fortes
expositions au mercure élémentaires ou inorganiques des tubulopathies dose-dépendantes
et des glomérulonéphrites à dépôts extramembraneux de mécanisme immunotorique sont
observées (Cavalleri A, et al, 1998).
7-Les effets du mercure
7-1-Effets sur la reproduction
Une augmentation de l’incidence des avortements spontanées a été signales chez des
femmes exposées à des vapeurs de mercure.des anomalies du cycle menstruel et baisse de
la fécondité ont été constatées.des cas d’oligospermie et de stérilité ont été observés. Chez
des travailleurs exposés à l’oxyde mercurique dans une fabrique des battries.les enfants nés
de mères consommant. Du poisson contenant du méthlmercure pendant leur grossesse à
Minamata présentaient de graves lésions neurologiques irréversibles (Lauwerys RR, et al,
2007).
7-2- Effet mutagènes
Un nombre anormalement élevé d’aberrations chromosomiques a été observé chez des
travailleurs professionnellement exposés au mercure .
Le mercure sous forme decation divalent (Hg++) a une action mutagène et aggrave les
effets génotoxiques du rayonnement ionisant, en inhibant les mécanismes de réparation de
l’ADN dans les cellules (Chem.et Engin. ,1994)
7-3-Effets du mercure sur le système immunitaire
Il stimule l’immunité humorale et la production d’anticorps, anti-ADN.ces perturbations
du système immunitaire pourraient expliquer le rôle du mercure dans les atteintes rénales
glomérulaires (maladie auto immune) observée chez le rat Brown-Nonvay (Nakazawa et
coll ;1975)
-11-
7-4-Les effets du mercure sur les reins
Le mercure ionisé Hg+ va s’accumuler au niveau des tubules proximaux du rein et la
zone superficielle de la médullaire externe. Lors de fortes expositions au mercure
élémentaire ou inorganique, des tubulopathies dose-dépendantes et des glomérulonéphrites
à dépôts extramembraneux de mécanisme immun -toxique sont observées. (Testud ; 2005).
7-5-Les effets du mercure sur le foie
La cytolyse hépatique est un signe d’intoxication aigue par le mercure. Elle ne s’observé
qu’après des contaminations massives, le mercure inhibe la synthèse des hémoprotienes,et
en particulier celle du cytochrome P450,ce qui être à l’origine d’interactions
médicamenteuses et d’effet toxiques l’autres substances (Necib et al ; 2013).
-12-
Partie pratique
I-Matériels et méthodes :
I-1-Matériels biolgiques :
Pour réaliser notre expérience nous avons utilisé 20 rats males de la souche Wister , agés de
4 mois ,d’un poid moyen de 280 g , provenant de l’animalerie de faculté de science de la
nature et la vie de l’université de constantine .
Photo 02 : Les rats Wistar
Ils ont été élevés à l’animalerie du département de la nature et la vie de l’Université
l’Arbi Ben M’hidi Oum El Bouaghi.
La durée d’élevage est 42 jours ; alors que la durée de traitement est 30 jours selon les
circonstances appropriées (température , humidité , lumières ,..) .
Les rats expérimentaux ont été élevés à température ambiante (23-25°C) dans des cages en
vitre à fond tapissé d’une litière sèche (la laitière est changée chaque jour).
Leur alimentation était basée sur un mélange de maïs, de soja, Issues de meunerie ,Calcaire
,.Phosphates, Sel ,Acide aminés, Vitamines (la nutrition de Groupe Avicole de l’Est unité
Ouled Hamla). Le milieu d’élevage était éclairé 12 heures sur 24 à la lumière du jour.
-13-
Photo 03 :Cage pour l’élevage des rats . Photo04 : La laitière des rats
photo 05 : L’alimentation des rats photo 06 : Biberon pour l’eau des rats
* Matériel de nettoyages :
-Eau.
-Eau de javel.
- Eponge.
- Savon liquide.
- Vinaigre (pour désinfecter les cages )
* Matériel de symbolisation :
Photo 07 :Stylos permanant pour identifier les rats
-14 -
*Matériel pour le gavage :
Photo 09 :La sonde pour le gavage.
*Matériel pour prélèvement du sang :
On utilise les tubes capillaires pour le prélèvement du sang chez les rats.
Les tubes héparines.
*Matériels et produits pour préparer l’extrait de la plante ( Ocimum basilicum ) :
La plante Ocimum basilicum à été achetée de Bir rogaa, Oum El Bouaghi.
Photo10 :Rotavapeur photo11 : Bicher photo12 : Boite pétrie photo13 : Agitateur
Photo 14 : Poudre d’Ocimum basilicum.
-15-
*Matériels pour la dissection et spermogramme :
Photo15 :Trousse de dissection photo16 : cellule Malassez photo 17 : Microscope.
Photo18 : Eau physiologie(NaCl 0.9%) photo19 :Chloroforme
I-2 -Méthode :
Préparation d’extrait d’Ocimum basilicum : Les feuilles de la plante sont sechées en obscurité (khaki et al., 2011)) et broyées pour
préparer une poudre.
L’extrait a préparé avec l’addition d’un mélange d’éthanol et l’eau distillé (80% éthanol et
20% eau distillé) à la poudre des feuilles d’Ocimum basilicum.
Ce mélange est met dans un bécher sur l’agitateur pendant 24 heures, ce mélange a été
macéré avec l’entonnoir et papier filtre.
La solution a été macérée et placé dans Rota vapeur pour éliminer l’éthanol (80 oC) l’eau
distillé (100 oC) .laisser séché bien dans la boite de pétrie pendant 2 jours.
enfin l’extrait et par la suite dilué dans l’eau distillé.(Saber .A et al.2012)
Photo20 : L’extrait sur photo21 : L’extrait dans rotavapeur photo22 : La dilution de
l’agitateur l’extrait
-16-
Le rendement de la plante :
Le rendement est déterminé par le rapport du poids de l’extrait sec après évaporation
sur le poids de la matière végétale sèche utilisée pour l’extraction multiplié par
100%
r= (m1×100)/ m2
m1: la masse de l’extrait sec après évaporation
m2: la masse de la matière végétale sèche ( Bekhechi -Benhabib, 2001)
le rendement d’Ocimim basilicum = (17.24×100)/250
r= 6.89 %
• Préparation de mercure :
Mercure a été acquis du laboratoire de faculté de science de la nature et la vie université d’Oum El Bouaghi.
La solution de mercure a été préparé avec la dose de 0.5 mg / Kg /jour
Le protocole expérimental :
Les rats sont divisés en quatre groupes, chaque groupe est composé de cinq (5) rats :
• Groupe1 constitue le lot de témoins ( 5 ) (T) .
• Groupe 2 reçoit l’extrait d’Ocimum basilicum (30mg/Kg/jour) (O).(Saber, A.2012)
• Groupe 3 reçoit le mercure (0,5mg/Kg/jour) (M).
• Groupe 4 reçoit l’extrait de la plante d’Ocimum basilicum et le mercure (OM).
La méthode de gavage :
L'animal doit être retenu avec précaution (saisir l'animal par la peau du cou et du dos) pour
immobiliser la tête, mais pas de manière à ce que l'animal exprime ou montre d'autres signes
de détresse. Maintenez l'animal dans une position verticale (verticale) et passez l'aiguille de
gavage le long du côté de la bouche. En suivant le toit de la bouche, avancez l'aiguille dans
l'œsophage et vers l'estomac.
Photo 23 : Les étapes pour le gavage.
-17-
L’extrait d’Ocimum basilicum et la solution de mercure ont été donné pendant 30 jours
consécutifs toute la période d’expérience.
Prélèvement du sang des rats :
2 ml de sang sont prélevés au besoin à l’aide d’une pipette pasteur à travers le sinus rétro-
orbital au niveau de l’œil des rats. Le sang récupéré est immédiatement centrifugé à
3000t/min pendant 15 minutes à 10°C . Le sérum obtenu est divisé dans des tubes Eppendorf
puis conservé à -20°C .
Prélèvement des organes
Au 30 ème jour de l’essai, chaque animal a été pesé, puis sacrifié. Certains organes ont été
récupérés dont les testicules avec leurs épididymes, le foie et les reins. Ces deux derniers sont
prélevés et débarrassés de leurs tissus adipeux, rincés dans une solution de NaCl à 0,9 % puis
pesés à l aide d une balance.
Photo24 :L’anesthésie du rat . photo25 : La dissection de rat.
Etudes de quelques paramètres de la reproduction
Immédiatement après ouverture de l’abdomen, Le liquide séminal de rat a été obtenu à partir
de l’épididyme et dilué avec 3 ml solution de NaCl à 0,9%. Cette solution obtenue est utilisée
pour étudier quelques paramètres de la reproduction:
Concentration
Vitesse
Mobilité
Etude de la concentration
-La concentration des spermatozoïdes est mesurée en utilisant une cellule de Malassez.
-Une goutte du sperme dilué est introduite dans la cellule de Malassez puis recouverte par une
lamelle.
-Cette mesure repose sur le comptage des spermatozoïdes dans 05 cellules à un grossissement
X40. -18-
- La concentration des spermatozoïdes est calculée selon la méthode suivante :
Concentration (SPZ. 106/ml) = D x V x n /N
D : coefficient de dilution
V : volume de Malassez
n : nombre de sperme dans cinq cellules
N : nombre de petite cellules. (20)
Mobilité des spermatozoïdes
La préparation est examinée sous microscope optique à un grossissement X400.
Le champ d’observation est divisé en 03 champs pour classer 100 spermatozoïdes, après
on calcule le pourcentage des spermatozoïdes mobiles.
Vitesse des spermatozoïdes
Le principe de cette étude est de calculer le temps de déplacement d un spermatozoïde
entre02 lignes à l aide d un chronomètre. La vitesse des spermatozoïdes est calculée par
l’application du la relation suivante : V= d / t
-V : Vitesse de spermatozoïdes (μm/sec)
-d : La distance entre 2 lignes (0.5 μm)
-t : Le temps de déplacement (sec)
-on avait calculé la vitesse de 10 spermatozoïdes, puis on calcule la vitesse moyenne.
-19-
II-Résultats
Le poids corporel
Figure 01 : Poids corporel (g) des rats témoins et traités durant 30 jours
Les résultats montrent que chez le groupe traité par l’extrait de l’Ocimum basilicum, le poids
corporel a été diminue par rapport aux rats témoins .Cependant, une diminution de la
croissance a été remarquée chez les rats traitées au mercure en comparaison aux témoins. De
plus, une stabilisation du poids corporel chez les rats traités avec l’extrait et le mercure par
rapport aux témoins.
-20-
270
280
290
300
310
320
330
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30
les
po
ids
corp
oe
lle
s d
es
rats
en
gr
jours
T
O
OM
M
Poids relatifs des testicules et l’épididyme
Tableau IV : variation des poids relatifs des testicules et l’épididyme.
Les groupes Poids des testicules + l’épididyme
Témoin (T) 1.34 %
Groupe traité par Ocimum basilicum (O)
(30mg/kg/j)
1.64%
Groupe traité par Ocimum basilicum et
mercure (OM)
1. 35%
Groupe traité par mercure (M) (0.5mg/kg/j) 1.2%
En comparaison avec le témoin (T), les résultats montrent une augmentation du poids relatifs
des testicules et l’épididyme chez les rats traité avec l’extrait d’Ocimum basilicum. En outre,
une augmentation de poids relatifs de testicules et l’épididyme a été observée chez les rats
traités par l’extrait d’Ocimum basilicum et le mercure. Cependant, une diminution du poids
des testicules et l’épididyme a été marquée chez le groupe traité par le mercure.
Figure 02 : L’effet de l’extrait de l’ ocimum basilicum ou/et le mercure sur les poids relatifs
des testicules et épididyme
-21-
0
0,5
1
1,5
2
2,5
T O OM M
po
id d
es
test
icu
les
et
l'é
pid
idy
me
en
%
les groupes
T
O
OM
M
2-2 Poids relatif du foie :
Tableau V : variation des poids relatifs du foie
les groupes Poids du foie (%)
T 3.4 %
O 3.35 %
OM 3.4 %
M 3.46 %
En comparaison avec le lot témoin, les résultats montrent que le poids relatif du foie chez les
rats traité avec l’extrait d’Ocimum basilicuma été diminué
Tandis que les rats traités par l’extrait d’Ocimum basilicum et le mercure, avaient presque
même poids relatif du foie que les rats témoins. En revanche, une augmentation du poids
relatif de foie chez les rats intoxiqués a été enregistrée.
Figure 03 : effet de l’extrait de l’ Ocimum basilicum ou/et le mercure sur les poids relatifs
de foie
-22-
3
3,1
3,2
3,3
3,4
3,5
3,6
3,7
3,8
3,9
4
T O OM M
poi
ds
rela
tif
du
foi
e
T
O
OM
M
2-3 Poids relatifs de reins :
Tableau VI: variation des poids relatifs des reins
Les groupes Poids des reins
T 0.68%
O 0.67 %
OM 0.67%
M 0.72 %
En comparaison avec le lot témoin, aucune différence n’a été observée chez les deux
groupes traités au cours des 4 semaines expérimentales. Cependant, une augmentation du
poids relatifs des reins a été enregistrée chez le groupe traité au mercure par rapport au
groupe témoin .
Figure 04 :Effet de l’extrait de l’ocimum basilicum ou/et le mercure sur les poids relatifs des
reins
-23-
0,6
0,62
0,64
0,66
0,68
0,7
0,72
0,74
0,76
0,78
0,8
T O OM M
le p
oid
rel
atif
des
ren
s
T
O
OM
M
Résultats de spermogramme
La concentration, la mobilité et la vitesse
Tableau VII: variation de la concentration, la mobilité et la vitesse du sperme dans chaque
groupe.
Les groupes La concentration
(x106/ml)
La mobilité (%) La vitesse (mm/s)
T 65.15 86.29 36×10-3
O 78.82 89 38×10-3
OM 64.31 86.45 36×10-3
M 31.31 28.29 17×10-3
Les résultats montrent une augmentation de la concentration, la mobilité et la vitesse des
spermatozoïdes chez les rats traités par l’extrait d’Ocimum basilicumpar rapport aux rats
témoins. En revanche, la concentration, la mobilité et la vitesse des spermatozoïdes ont été
diminué chez les rats traités par le mercure.
Figure 5: variation de la concentration Figure 6: Variations de nombre de des spermatozoïdes chez les 4 groupes des rats spermatozoïdes mobiles(%) chez le témoin
témoin et les groupes traités
-24-
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
T O OM M
la c
once
ntr
atio
n d
u
sper
mat
ozoi
des
T
O
O
M
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
T O OM M
la m
obil
ité
des
sp
erm
atoz
oid
es
T
O
OM
M
Figure 7 : Variations de la vitesse des spermatozoïdes chez le témoin et les groupes traités
Taux plasmatique de la testostérone
Les résultats du dosage des concentrations plasmatiques total de testostérone des rats après 4
semaines sont présentés dans le tableau 08
Tableau VIII : Variation du taux plasmatique de la testostérone
Les groupes T O OM M
Dosage de
Testostérone (ng/ml)
0.9 1.19 0.56 0.29
Les résultats obtenus, montrent qu’il ya une augmentation de l’hormone testostérone chez
les rats traités au l’extrait d’Ocimum basilicum par apport au groupe témoins.
Cependant, les résultats révèlent une diminution de la concentration d’hormone
testostérone chez les rats traités au mercure.
-25-
0
0,005
0,01
0,015
0,02
0,025
0,03
0,035
0,04
0,045
T O OM M
la v
ites
se d
e sp
erm
atoz
oid
e (m
m/s
)
T
O
OM
M
Figure 08 :Effet de l’extrait d’ocimum basilicum et /ou mercure sur la concentration de
testostérone
Effet du traitement sur les paramètres biochimiques :
Tableau IX :variation de taux plasmatique des paramètres biochimique.
Les groupes T O OM M
Cholestérol (mg/dl) 0.6 0.53 0.64 0.66
Triglycéride(mg/dl) 0.73 0.46 0.74 0.98
TGO 130 127 130 142.5
TGP 122 121 132 132.5
Glucose (g/l) 1.1 0.8 1.34 1.71
Ureé (g/l) 0.75 0.7 0.57 0.93
-26-
0
0,2
0,4
0,6
0,8
1
1,2
1,4
T O OM M
Dosage de
Testestérone
(ng /ml) T
O
OM
M
Taux plasmatique des triglycérides et de Cholestérol :
Le traitement des rats avec des extraits aqueux d'Ocimum Basilicum entraîne une diminution
de taux de cholestérol et de triglycéride par rapport aux rats témoins.Cependant, le mercure
provoque une augmentation de ces deux paramètres.
Figure 09: effet de l’extrait et/ou le mercure Figure 10 : effet de l’extrait et/ou le sur le taux de cholestérol. mercure sur le taux de triglycéride.
-27-
0
0,1
0,2
0,3
0,4
0,5
0,6
0,7
0,8
T O OM M
cho
lest
éro
l en
mg
/d
l
T
O
OM
M
0
0,2
0,4
0,6
0,8
1
1,2
T O OM M
try
gly
ceri
de
en
mg
/d
l
T
O
OM
M
Taux plasmatique de TGO et TGP :
Les résultats montrent que l'administration de mercure aprovoqué une augmentation
du taux d'enzymes sériques TGO,TGP avec une augmentation du taux de cholestérol
par rapport au groupe témoin.
Figure 11:l’effet de l’extrait et/ou le mercure Figure12 :l’effet de l’extrait et :ou sur le taux de TGO le mercure sur le taux de TGP
Taux plasmatique du glucose :
Dans la présente étude et en comparaison avec le témoin, les résultats montrent que la
concentration de glucose a été diminuée chez les rats traités par l’extrait. Par contre
,une augmentation de taux de glucose chez les rats intoxiqués par mercure a été
registrée. De même, le traitement des rats par l’extrait avec le mercure montre une
simple augmentation de taux de glucose.
-28-
0
20
40
60
80
100
120
140
160
180
T O OM M
TG
O
T
O
OM
M
110
115
120
125
130
135
140
T O OM MT
GP
T
O
OM
M
Figure 13:l’effet d’extrait et /ou mercure sur le taux de Glucose
Taux plasmatique de l’urée :
Les résultats montrent que le taux plasmatique de l’urée a été diminue chez les rats
traités par l’extrait .On note aussi, une augmentation du taux d’urée chez les rats
traités au mercure par rapport aux témoins.Tandis que, les rats traités par l’extrait et le
mercure n’ont montré aucun changement du taux d’urée par rapport au témoins.
Figure 14 : l’effet de l’extrait et/ou le mercure sur le taux plasmatique de l’urée .
-29-
0
0,5
1
1,5
2
2,5
3
T O OM M
Glu
cose
(g/
l)
T
O
OM
M
0
0,1
0,2
0,3
0,4
0,5
0,6
0,7
0,8
0,9
1
T O OM M
L'U
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g/l
)
T
O
OM
M
III-La discussion
Poids corporel
Les résultats montrent une diminution de la croissance des rats traités au mercure
comparativement aux témoins, ce résultats est en accord avec les résultats de Necib et
al.,(2013). Cet effet peut être explique par l’action du mercure sur le transport des éléments
nutritifs (les acides aminées, le glucose et les minéraux essentiels comme le sélénium, le zinc,
le magnésium et le fer…) par le sang et par conséquence, ils peuvent induire une mauvaise
assimilation des aliments par le corps. La diminution du poids corporel chez les rats traités par
l’extrait de la plante peut être explique par l’activité hypolipimiantde l’Ocimum basilicum. En
outre, les flavonoïdes présents dans l’extrait de cette plante présente une variété logique y
compris l’effet hypocholéstéroolémiant et une amélioration de l’indice de risque
athérosclérotique (Souliman ,2006)
Effet du traitement par Ocimum basilicum et/ou mercure sur les organes et les
paramètres de reproduction
Nos résultats est en accord avec ceux de Khaki et al., (2011), qui ont montré que l'extrait
d’Ocimum basilicum protégeait les rats contre les dommages testiculaires et réduisait
l'apoptose après exposition à un champ électromagnétique. Asuquo et al., (2010) ont trouvé
également que l'extrait d’O. gratissimum améliore les altérations histopathologiques
testiculaires chez les rats diabétiques. Les résultats de la présente étude indiquent que l'effet
bénéfique d’O. basilicum sur la toxicité testiculaire du mercure peut être attribué à ses
propriétés antioxydantes. En raison de la présence des flavonoïdes les phénylpropanoïdes et
l'acide rosmarinique dans les parties aériennes de la plante, ces molécules peut réduire les
radicaux libres actifs, et donc pourraient réduire l'oxydation et les dommages des testicules, et
améliore les activités de les enzymes antioxydants comme SOD et CAT, protégeant le
testicules de l'intoxication ((Bors et al., 1977, Peluso, 2006 ; Saber A. Sakr et al ;2015)
En comparaison avec le groupe témoin, les résultats obtenus montrent une diminution de
poids relatif de testicule et l’épididyme chez le groupe traités par le mercure, ceci est en
accord avec les résultats de ; Institoris et al., (2001); Orisakwe et al., (2001) qui ont montré
que l’administration de mercure induit une réduction significative du poids relatif du testicule.
Cette diminution confirme l'effet dégénératif de chlorure de mercure sur les tissus et qui
conduire à la dégénérescence des cellules testiculaire et atrophie de cellules de leydig
-30-
(Ramalingam et Vimaladevi, 2002).La toxicité du mercure peut également affecter le
processus de spermatogénèse, elle provoque une dégénérescence
cellulaire de lignée germinatives et de cellules de Sertoli, et bloquer quelques étapes de la
spermatogénèse notamment les phases de maturation ou spermiogénèse, ce qui explique la
diminution du poids relatif du testicule (Boujbiha et al ; 2009)
Il est devenu clair que plusieurs conditions peuvent interférer avec la spermatogenèse et
réduire la qualité et la production du sperme. Plusieurs facteurs tels que traitement
médicamenteux, chimiothérapie, toxines, les métaux lourds et apport insuffisant en vitamines
ont des effets néfastes sur la spermatogenèse et le sperme. cette réduction peut être expliquer
par une inhibition de la spermatogénèse provoquée par le mercure ce qui entraine une stérilité
ou oligospermie (Boujbiha et al ;2009)
L’ augmentation de la peroxydation lipidique dans les testicules est due aux effets toxiques de
Hg ; cette augmentation est accompagnée par une réduction significative de l’activité des
enzymes antioxydantes dans le testicule ; superoxyde dismutase, catalase et glutathion
peroxydase (Boujbiha et al ;2010)
Les composées inorganiques diminuent le pourcentage de spermatozoïdes mobiles, ils
augmentent le temps nécessaire pour que les spermatozoïdes arrivent jusqu’à l‘épididyme.
(Ernst et al ;1991)
Cela montre que cette plante a une activité antioxidante, contient des enzymes de la catalase
et superoxyde dismutase pour la spermatogénèse et l’amélioration de paramètres sains du
sperme (Arash Khaki et al ;2011 )
La protection de l’extrait d’O.B des dommages des testicules induites par le mercure assure
l’égalité de la concentration du sperme chez les rats traité au l’extrait d’O.B avec le mercure
par rapport aux rats témoins ; ce résultat explique l’activité antitoxique de l’extrait
Ocimum basilicum . (Saber et al ;2015)
-31-
Effet du traitement par Ocimum basilicum et/ou mercure sur les paramètres lipidiques
Les résultat montre que le basilic contient des composés améliorant l’activité de récepteur
LDL effectuée par le régime hyperlipémiant ; ainsi le catabolisme rapide de LDL via son
récepteur représente l’une des principales voies de clairance du cholestérol plasmatique.
Donc ; les substances bioactifs (flavonoides et acides phénoliques) du basilic possèdent un
caractère polaire du fait qu’elles sont plus solubles dans l’eau et sont capables d'abaisser les
concentrations plasmatiques de lipides et pourrait être bénéfique dans la prévention de
l'hyperlipidémie et des maladies cardiovasculaires associées (Harnafi et al 2009).
D'autre part, l'extrait des feuilles aqueuses d'O. Basilicum a provoqué une diminution du
taux de cholestérol, ce qui concorde avec les études antérieures (Amrani et al., 2006, Harnafi
et al., 2009). L'effet hypocholestérolémiant est attribué aux produits polaires. D'autres
mécanismes possibles de l'hypolipidémie peuvent être médiés par la réduction de la synthèse
du cholestérol et la modulation de l'activité des récepteurs piégeurs de surface .
Nous avons remarqué également l’augmentation des concentrations sériques du cholestérol
et des triglycérides chez les lots traités par le mercure par rapport aux témoins. Cette
augmentation est due principalement à la dégradation des tissus adipeux qui mène à la
réduction du poids corporel à cause de la toxicité du mercure (Cempel et Janicka, 2002).
L’augmentation du taux de cholestérol et les triglycérides peut être expliqué par
l’augmentation de la peroxidation lipidique sous l’action du mercure et ce par la
production des radicaux libres qui agit sur les lipides plasmatique et membranaire
(Hallivell et Gutteridge, 2007). un taux élevé de cholestérol et triglycéride est un signe de
dommages hépato-rénal (Joshi et al, 2014).
Effet de traitement par Ocimum basilicum et/ou mercure sur le poids relatif et les
enzymes de foie
Les résultats ont montré une augmentation de poids relative de foie. Cette augmentation est
due à l’accumulation dans les tissus qui induit la synthèse de méthallothionine qui est une
protéine cytoplasmique riche en souffre et peut fixer fortement le mercure. Elle joue un rôle
dans la détoxification en empêchant le mercure de se lier aux composants cellulaires(hung et
lin ,1997).
Nos résultats est en accord avec ceux de Makwana et Rathore (2011) qui ont rapporté que
l'extrait des feuilles d'ocimum supprime les altérations histopathologiques induites par
-32-
le paracétamol dans le foie des rats, et restaure les valeurs normales des enzymes de la
fonction hépatique .Yamamoto et al., (2005) ont prouvé que l'ocimum capable de supprimer la
fibrose hépatique et protégeait le foie.
En effet l'ocimum supprime la fibrose hépatique et protège le foie contre les lésions parenchymateuses induites par CCl4. Des effets hépatoprotecteurs significatifs ont été obtenus par l'extrait éthanolique de feuilles de O. basilicum contre les lésions hépatiques induites par H2O2 et CCl4. L'extrait a également montré des effets peroxydants anti-lipides significatifs in
vitro, en plus de présenter une activité significative dans le radical superoxyde et le piégeage des radicaux d'oxyde nitrique, indiquant leurs puissants effets antioxydants ont trouvé que O.basilicum augmente l'activité des enzymes de phase I et de phase II métabolisant les xénobiotiques, augmentant la réponse antioxydante-enzyme en augmentant significativement les activités hépatiques glutathion réductase, superoxyde dismutase et catalase, augmentant la teneur en glutathion et diminution de la peroxydation des lipides et de l'activité de la lactate déshydrogénase dans le foie des souris. Les feuilles de O.basilicum sont riches en flavonoïdes dont il a été démontré qu'elles possèdent diverses propriétés biologiques liées aux mécanismes antioxydants. les principaux composants de O. basilicum étaient: linalol (29,68%), ester méthylique d'acide (Z) - cinnamique (21,49%), cyclohexène (4,41%), alpha- cadinol (3,99%). ), Le 2,4-disopropényl-1-méthyl-1- vinylcyclohexane (2,27%), l'acide 3,5-pyridine-dicarboxylique, l'ester 2,6-diméthyl -diéthylique (2,01%), le béta-cubebène (1,97%), guaia-1 (10), 11-diène (1,58%), cadinène (1,41%), ester méthylique d'acide (E) -cinnamique (1,36%) et bêta-guaïne (1,30%). (Dasgupta et al., 2007)
L'analyse phytochimique de la plante révèle que la plante est une source riche en polyphénols. Les composés polyphénoliques sont les antioxydants naturels les plus abondants dans leur alimentation et leurs capacités de piégeage des radicaux jouent un rôle important dans la prévention de nombreuses maladies chroniques (Rathee et al., 2009).
Les principaux groupes de polyphénols sont: les flavonoïdes, les acides phénoliques, les alcools phénoliques, les stilbènes et les lignanes (D'Archivio et al., 2007). L'activité antioxydante de la plante peut être due à des flavonoïdes, l'acide caféique (CA), l’acide p-coumarique (pCA) sont des autres contenu dans la feuille de l'O. Basilicum qui ont des activités antioxydantes, anti-inflammatoires, et de chimioprévention du cancer (Neradil et al., 2003 ; Burns et al., 2000 ; Yeh et Yen, 2003).
Tous les mécanismes ci-dessus peuvent accélérer la régénération des cellules hépatiques et
réduire la fuite des enzymes TGO, TGP dans le sang.
-33-
Le présent travail a montré une augmentation de l’activité des transaminases (TGO et
TGP) dans le sérum des rats traités au mercure. L’augmentation de ces enzymes indique
une lésion hépatique et s’explique par la fuite des enzymes du tissu vers le plasma dû à
l’altération de la perméabilité membranaire causé par le mercure. Les résultats de
Deepmalaet al (2013) montre une augmentation significative (P ≤ 0,05) des activités de
l'AST, de l'ALT, de la phosphatase alcaline, de lactate déshydrogénase dans le sérum après
l'administration du mercure toxique. Accompagnépar des observations histopathologiques.
Effet du traitement par Ocimum basilicum et/ou mercure sur le poids relatif et les
paramètres de fonction rénale
Les résultats ont montré une augmentation du poids relatif des reins chez le groupe traité par
le mercure en comparaison avec le groupe témoin. Les reins reçoivent la plus grande quantité
de mercure inorganique, les ions mercuriques se fixent sur les protéines plasmatiques du a
leur grande affinité pour les groupements thiol (-SH). Ces molécules endogènes pour être
ensuite capté par les cellules épithéliales des tubules proximaux et des anses de Henlè mais
peu par les glomérules( Bensefa-Colas ;2011).Le mercure favorise l'oxydation de cellules
rénales et perturbe la fonction mitochondriale, et l'accumulation du mercure dans le rein induit
la synthèse de la métallothionine qui joue un rôle dans la détoxification en empêchant le
mercure de se lier au composants cellulaires (Huang et Lin, 1997). Cependant, cette
détoxification est temporaire, lorsque ce protéine est saturé par le mercure, la toxicité devient
intense, elle entraine la nécrose cellulaire de rein, le dysfonctionnement glomérulaire et des
dommages aux tubules proximaux
Plusieurs études ont rapporté que Ocimum .basilicum a un effet néphroprotecteur contre la
toxicité du mercure et du plomb (Sharma et al, 2005 ; Karamala et al, 2011). Le traitement
diététique d'Ocimum basilicum a normalisé un taux élevé de créatinine sérique chez des rats
diabétiques, indiquant son effet protecteur sur la capacité de filtration glomérulaire rénale,
l'extrait de feuilles d'ocimum supprime les altérations histopathologiques induites par le
paracétamol dans les reins des rats et rétablisse la créatinine et l'urée à leurs valeurs
normales. D’autre résultat montre que la peroxydation des lipides est inhibée et que les
activités des enzymes SOD et CAT étaient augmentées après traitement avec O.basilicum,
suggérant le rôle de l'extrait de O.basilicum dans l'extinction des ROS formés.
-34-
Tendis que l’intoxication par le mercure provoque une augmentation de taux d’urée dans le
sang. Cette augmentation de taux d’urée est considérée comme un biomarqueur de la
dysfonction rénale et les dommages rénaux provoquée par le mercure ; l’urée est un paramètre
essentiel pour évaluer la fonction rénale et la filtration glomérulaire. Autrement, le taux élevé
de l’urée peut être un indicateur de défense de l’organisme contre les effets délétères des
radicaux libres.
Sakr et al., (2011) ont rapporté que le traitement des animaux avec CCl4 et des extraits aqueux
de feuilles d Ocimum basilicum a conduit à une amélioration des altérations
histopathologiques et biochimiques induites par CCl4. ont rapporté que Ocimumbasilicum a
un effet néphroprotecteur contre la toxicité du mercure
Effet de traitement par Ocimum basilicum et/ou mercure sur la concentration du glucose
Les résultats ont montré une baisse de la concentration de glucose dans le sang de rats traités
par la plante d’Ocimum basilicum. L’activité hypoglycémiante d’Ocimum basilicum est
probablement due à ses propriétés antioxydants intracellulaire qui assure le bon
fonctionnement de la machinerie enzymatique responsable du captage de glucose
intracellulaire et son stockage sous forme de glycogène ou son conversion en acide gras au
niveau hépatique.D’autres mécanismes hypoglycémiants sont aussi possible pour l’action
d’Ocimum basilicum mettant en jeu le rôle de ses composés phénoliques notamment les
polyphénols,les flavonoïdes influencent les cellules pancréatiques et stimulent la sécrétion de
l’insuline (sarkhali,et al ;2007 , Shimizu, et al ;2000)
Cette hyperglycémie est causée par la toxicité du mercure qui agit par l’inhibition de la
production de l’Insuline par les ilots de Lengerhans, ou il bloque l’utilisation du glucose par
les cellules et même à la présence d’une concentration élevée d’insuline
-35-
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Conclusion
Après avoir étudie l’effet de la plante Ocimum bsilicum sur la fertilité,
les paramètres biochimiques et les paramètres reproductives chez les
rats ; nous avons obtenu un ensemble de résultats positifs sur cette plante
Les résultats ont montré des changements du poids corporel et du poids
relatifs des organes ainsi que sur les paramètres biochimiques et
reproductifs et sa protection contre l’intoxicité du mercure.
Alors que cette plante est moins utilisé en Algérie par rapport aux
autres pays du monde à cause du manque d’information sur son large
spectre d’utilisation dans le dommaine médical par ces activités
antioxydant , antibacterienne ,antitoxique, hypolipémiante , antiviral.
Abstract
In this study, the effect of Ocimum basilicum is determined on the fertility of adult male rats, as well as the biochemical criteria and protection of mercury toxicity
Where the rats divided into four groups according to treatment (control group,
group treated with extract of Ocimum basilicum 30 mg /kg /day , group treated with mercury 0.5 mg /kg / day , group treated with extract with mercury ).
It has been treated orally for 30 days.
The study to the effectiveness of the Ocimum basilicum as an antioxidant, with positive results in weight and reproductive characteristics (increase in testosterone, concentration, mobility, and speed of the sperm), biochemical concentration ( plasmatic rate of Glucose, cholesterol, triglyceride, TGO and TGP, urea).
The results show that treatment with mercury leads to imbalances in reproductive characteristics and biochemical parameters.
Key words
Rats, extract of Ocimum basilicum, mercury, fertility, biochemical parameters
تلخیص
على الخصوبة لدى ذكور الجرذان البالغین وكذا تحتوي ھذه الدراسة على تحدید ومعرفة مدى تأثیر نبات الحبق المعاییر البیوكیمیائیة والحمایة من سمیة الزئبق حیث قسمت الجرذان المخبریة إلى أربع مجموعات على حسب العلاج
0.5مجموعة معالجة بالزئبق ˓الیوم /كغ /مغ 30مجموعة شاھدة ة مجموعة معالجة بمستخلص نبات الحبق ( ) مجموعة معالجة بمستخلص الحبق و الزئبق ˓الیوم /كغ/مغ
یوم 30تمت المعالجة فمویا لمدة
خصائص التكاثر ˓بظھور نتائج ایجابیة في الوزن ˓بینت الدراسة مدى فعالیة نبات الحبق كنبات مضاد للأكسدة
تركیز ( و المعاییر البیوكیمیائیة ) ة حركة و سرعة الحیوانات المنوی ˓تركیز ˓ارتفاع ھرمون التستسترون ( )و الیوریا TGP˓TGP ˓الدھون الثلاثیة ˓الكولسترول ˓الغلوكوز
.كما تبین النتائج أن المعاملة بالزئبق أدت إلى حدوث اختلال في خصائص التكاثر و المعاییر البیوكیمیائیة
الكلمات المفتاحیة
.المعاییر البیوكیمیائیة ˓الخصوبة ˓الزئبق ˓مستخلص نبات الحبق ˓الجرذان
Résumé
Cette étude comprend la détermination de l’effet d’Ocimum basilicum sur la fertilité des
rats sur adultes males , ainsi que les critères biochimiques et la protection de toxicité du
mercure , où les rats laboratoires ont été divisés en quatre groupes selon le traitement (
groupe témoin, groupe traité par l’extrait d’Ocimum basilicum 30 mg / kg / jour , groupe
traité par le mercure 0.5 mg/ kg/jour ,et groupe traité par l’extrait et le mercure ) .
Ils ont traité par gavage pendant 30 jours .
L’étude a monté l’efficacité de la plante Ocimum basilicum , en tant qu’antioxydant , avec
des résultats positifs en poids et les caractéristiques de la reproduction ( augmentation de
testestérone , la concentration ,mobilité et la vitesse des spermes ) , ainsi que les normes
biochimiques ( le taux plasmatique du glucose , cholestérol , triglycéride TGO et TGP ,
l’Urée )
Tandis que, les résultats montrent que le traitement avec le mercure a conduit à des
équilibres dans les caractéristiques de la reproduction et les paramètres biochimiques.
Mots clés
Les rats , l’Ocimum basilicum, le mercure, la fertilité, les paramètres biochimiques.