lecture interprétative de l’antibiogramme

Lecture interprétative de l’antibiogramme

43ème Colloque national des Biologistes des Hôpitaux

5 au 7 novembre 2014Marseille

N. Brieu H. Chardon Centre Hospitalier du Pays d’Aix

Aix en Provence

ACNBH

ODPC N°1495

DECLARATION D’INTERET

DANS LE CADRE DE MISSIONS DE FORMATION

REALISEES POUR L’ACNBH

43ème Colloque National

des Biologistes des Hôpitaux

Marseille, 5-7 novembre 2014

Mme Natalie BRIEU

Exerçant au CH Aix en Provence

déclare sur l’honneur déclare sur l’honneur

ne pas avoir d'intérêt, direct ou indirect (financier) avec les entreprises

pharmaceutiques, du diagnostic ou d’édition de logiciels susceptible de modifier

mon jugement ou mes propos, concernant le DMDIV et/ou le sujet présenté.

ACNBH

ODPC N°1495

DECLARATION D’INTERET

DANS LE CADRE DE MISSIONS DE FORMATION

REALISEES POUR L’ACNBH

43ème Colloque National

des Biologistes des Hôpitaux

Marseille, 5-7 novembre 2014

Mr. Hubert Chardon

Exerçant au CH Aix en Provence

déclare sur l’honneur déclare sur l’honneur

ne pas avoir d'intérêt, direct ou indirect (financier) avec les entreprises

pharmaceutiques, du diagnostic ou d’édition de logiciels susceptible de modifier

mon jugement ou mes propos, concernant le DMDIV et/ou le sujet présenté.

E. coli

Cette souche :1 – Produit une BLSE2 – Ne produit pas

une BLSEune BLSE3 – Autres tests

nécessaires4 – Ne sait pas

1 réponse possible

Entrer le texte de la question...

100%1 – Produit une BLSE

2 – Ne produit pas une BLSE

1. 2. 3. 4.

0%0%0%

une BLSE3 – Autres tests

nécessaires4 – Ne sait pas

Bacilles à Gram négatif

Proteus mirabilis

Imipénème : 21 mm : Intermédiaire

P. mirabilis E-test Imipénème

Imipénème : CMI : 3 à 4 mg/L : intermédiaire

Vous faites ?

1. Un test de Hodge carbapénèmes2. Un antibiogramme sur

cloxacilline3. Un test Imipénème + EDTA

QUESTION

4. Vous testez le méropénème5. Vous testez l’ertapénème6. Je ne sais pas

1 seule réponse attendue

Imipénème : 21 mm :Intermédiaire

REPONSE

52%

1. Un test de Hodge carbapénèmes

2. Un antibiogramme sur cloxacilline

3. Un test Imipénème + EDTA

1. 2. 3. 4. 5. 6.

10%

17%

4%

10%7%

3. Un test Imipénème + EDTA4. Vous testez le méropénème5. Vous testez l’ertapénème6. Je ne sais pas

IMIPENEME22 mm : I

ERTAPENEME

DORIPENEME19 mm : I

P. mirabilis

ERTAPENEME32 mm : S

MEROPENEME6 mm : R

Morganella morganii

Erta : 28 mm : S

Imi : 21 mm : I

CMI (mg/L)Proteus – Morganella - Providencia

Extrèmes CMI.50 CMI.90

Doripénème 0,03-0,5 0,125 0,25

Ertapénème ≤ 0,015-0,25 ≤0,0015 0,25

Imipénème 0,06-4 0,5 4

Méropénème ≤0,015-0,25 0,06 0,125

E.J.C. Goldstein AAC 2008

Proteus mirabilis

ATM

IMI CTX

AMC

QUESTION1 - Ce Proteus mirabilis produit une

BLSE 2 – Ce Proteus mirabilis produit

une céphalosporinase3 – Ce Proteus mirabilis produit

une carbapénémase

ATM

AMCune carbapénémase

4 - Ce Proteus mirabilis produit une pénicillinase

5 – Aucune conclusion : autre test(s) nécessaire(s)

6 – Ne sait pas

1 réponse attendue

IMI CTX

REPONSE1. Ce Proteus mirabilis produit

une BLSE 2. Ce Proteus mirabilis produit

une céphalosporinase3. Ce Proteus mirabilis produit

une carbapénémase4. Ce Proteus mirabilis produit

1. 2. 3. 4. 5. 6.

16%13%

8%

32%30%

0%

4. Ce Proteus mirabilis produit une pénicillinase

5. Aucune conclusion : autre test(s) nécessaire(s)

6. Ne sait pas

Synergie Acide clavulanique - Ceftazidime

E. Colitransconjuguanttransconjuguant

BLSE : TEM 24

CASFM 2013

Méthode qualitative pour rechercher les BLSE :Synergie entre acide clavulanique• Et céfotaxime• Et céfotaxime• Et ceftazidime• Et céfépime

CASFM-EUCAST 2014

La méthode qualitative peut consisteren l’utilisation de la méthode de la synergieentre deux disques sur l’antibiogrammestandard c’est à dire un disque destandard c’est à dire un disque de

céfotaxime, ceftazidime ou (?) céfépime etun disque contenant de l’acide clavulanique(ex. amoxicilline + ac. clavulanique : AMC)distants de 30 mm des disques decéphalosporine.

EUCAST 2014

Proteus mirabilisProteus mirabilis

AX TIC GT TOB

AX : AmoxicillineTIC : TicarcillineGT : GentamicineTOB : TobramycinePRL : PipéracillineAMC : AugmentinKF : Céfalotine

P. mirabilis

PRL AMC KF NET

TET CTX AK C

CT SXT NA OFX

KF : CéfalotineNET : NétilmicineTET : TétracyclineCTX : CéfotaximeAK : AmikacineC : ChloramphénicolCT : ColimycineSXT : CotrimoxazoleNA : Ac. NalidixiqueOFX : Ofloxacine

FOX IPM MOX FEP

FF CFM ATM TIM

FOX : CéfoxitineIPM : ImipénèmeMOX : MoxalactamFEP : CéfépimeFF : FosfomycineCFM : CéfiximeATM : AztréonamTIM : Claventin

P. mirabilis

FF CFM ATM TIM

CPO AMC CXM CAZ

CIP ETP CTT PPT

TIM : ClaventinCPO : CefpiromeAMC : AugmentinCXM : Céfuroxime CAZ : CeftazidimeCIP : CiprofloxacineETP : ErtapénèmeCTT : CéfotétanPPT : Pipéracilline-

tazobactam

P. mirabilisCette souche :1 – Produit une pénicillinase plasmidique2 – Produit probablement une BLSE3 – Produit probablement une

céphalosporinase plasmidique4 – Produit probablement une

carbapénémasecarbapénémase5 – Ne sait pas

Plusieurs réponses attendues

REPONSE

1 – Produit une pénicillinase plasmidique

2 – Produit probablement une BLSE

3 – Produit probablement une céphalosporinase

1. 2. 3. 4. 5.

23%27%

2%6%

42%

céphalosporinase plasmidique

4 – Produit probablement une carbapénémase

5 – Ne sait pas

REPONSE1 – Rapprochement des disques

(< 3 cm)2 – Eloignement des disques (<

3 cm)3 – Regarder le céfépime4 – Faire l’antibiogramme sur

1. 2. 3. 4. 5.

17%13%

2%

42%

26%

4 – Faire l’antibiogramme sur cloxacilline (250 mg/L)

5 – Ne sait pas

CQ 5 : P. mirabilis

• La présence d’unepénicillinase plasmidique estmontrée par la synergie entre lesdisques ticarclline, pipéracillineet augmentin et par la différencede diamètre entre Ticarcilline etTicarcilline-ac. ClavulaniqueTicarcilline-ac. Clavulanique

• Les CIIIG sont touchées.Aucune image de synergievisible sur l’antibiogramme. Letest avec les disques combinésne montre aucune synergie entreles CIIIG et CIIIG + Ac.clavulanique.

P. mirabilis• Le test de synergie avec la cloxacilline

montre qu’il s’agit d’une céphalosporinase(plasmidique chez Proteus mirabilis)

Céfotaxime + cloxacilline

Ceftazidime

P.mirabilis

FEPFEP

CLOXA

CF

CTX

CAZ CAZCF

CTX

AMC

Conjugaison de P. mirabilis avec E. coliE. coli

Sensible Après conjugaison

FEP FEP

CF

CTX

CAZ

CTX

CAZCF

AMC AMC

CQ COLBVH 2014

Nb laboratoires Céphalosporinase plasmidique (%)

Présence Absence Ne sait pas

Kpne 65 60 (92,31) 1 (1,54) 4 (6,15) Kpne 65 60 (92,31) 1 (1,54) 4 (6,15)

Ecol 64 21 (32,81) 27 (42,19) 16 (25,00)

Pmir 65 43 (66,15) 12 (18,46) 10 (15,39)

Importance en cliniqueImportance en clinique

AmpC plamidiques :

Espèces : P. mirabilis, K. pneumoniae, E.coli, Salmonella

Plasmides conjugatifs Plasmides conjugatifs

(Co-résistance : aminosides, C, Su, Te, Tmp)

Prévalence inconnue en France

Large dissémination en Afrique du Nord

Epidémies nosocomiales

P. mirabiliset céphalosporinase plasmidique

Patient X : P. mirabilis producteur de céphalosporinase plasmidique,R : Genta, Tobra, Tétra, Choram, Su, TmpTmp

Urines (et portage rectal) de :• novembre 2003• juin 2004• mars 2005

• juin 2005• août 2005• janvier 2006

S.Camiade, H. Chardon, Ricai 2005 395/67P

En France, il n’existe pas de recommandations de la part des hygiènistes concernant les céphalosporinases plasmidiques.Pour l’EUCAST (ci-après), les BLSE et les céphalosporinases plasmidiques sont mises sur le même niveau.

• Enterobacter group (MIR, ACT)• C. freundii group (CMY-2-like , LAT, CFE)• M. morganii group (DHA)• Hafnia alvei group (ACC)• Hafnia alvei group (ACC)• Aeromonas group (CMY-1-like, FOX,

MOX)• Acinetobacter baumannii group (ABA).

Détection• A cefoxitin MIC >8 mg/L combined with a

ceftazidime and/or cefotaxime MIC >1mg/L may be used as phenotypic criteria for investigation of AmpC production in group 1 Enterobacteriaceae, although this strategy will not detect ACC-1, a plasmid-mediated AmpC that does not hydrolyze cefoxitincefoxitin

• Phenotypic AmpC confirmation tests are generally based on inhibition of AmpC by either cloxacillin or boronic acid derivatives. However, boronic acid derivatives also inhibit class A carbapenemase

Eucast 2013

Confirmation : biologie moléculaire

Haemophilus influenzae

Inspiré de Philippe Weber BIO-VSM LAB Laboratoire multi-sites Paris-Est

Marne La Vallée

Atelier FMCRICAI 2013

Haemophilus Haemophilus Haemophilus Haemophilus influenzaeinfluenzaeinfluenzaeinfluenzae

NAL

CASFM 2013Diamètres (mm)

Gélose chocolatAtmosphère ordinaireDépistage Ampi < 20 mm

mm

AMP2

TET

PTN

SXT

CHL

RAMmm

Ampicilline 2 13Rifampicine 23Cotrimoxazole 6Chloramphénicol 33Tétracycline 24Acide nalidixique 6Pénicillinase négative

Bonnes réponses de mon résultat d’antibiogramme :

1 - R Amoxicilline2 - S Tétracycline3 - S Rifampicine4 - S Chloramphénicol5 - R Ciprofloxacine

NAL

5 - R Ciprofloxacine6 - R Cotrimoxazole7 - Ne sait pas

3 réponses attenduesAMP2

TET

PTN

SXT

CHL

RAM

REPONSE

1 - R Amoxicilline2 - S Tétracycline3 - S Rifampicine4 - S Chloramphénicol5 - R Ciprofloxacine

1. 2. 3. 4. 5. 6. 7.

9%

27% 27%

0%

5%

10%

21%

6 - R Cotrimoxazole7 - Ne sait pas

Résultat de mon antibiogramme :1 - R Amoxicilline2 - S Tétracycline3 - S Rifampicine4 - S Chloramphénicol5 - R Ciprofloxacine6 - R Cotrimoxazole7 - Ne sait pas

3 réponses attendues

Haemophilus et CotrimoxazoleCASFM 2013

Haemophilus et Fluoroquinolones

• CASFM 2013Si acide nalidixique < 21 mm � Faire CMI

ciprofloxacine(Pas de diamètres critiques ciprofloxacine)(Pas de diamètres critiques ciprofloxacine)• EUCAST 2014 (Erreurs CASFM 2014)Si acide nalidixique < 23 mm � Tester la

ciprofloxacine….…. Mais on a des diamètres critiques à la

ciprofloxacine !

Haemophilus influenzae Haemophilus influenzae Haemophilus influenzae Haemophilus influenzae :

13 mm

19 mm

Milieu HTM

1. 4 mg/L ?2. 0,50 mg/L ?3. 0,38 mg/L ?

Gélose chocolat : CMI d’amoxicilline de cette souche ?

3. 0,38 mg/L ?

Haemophilus Haemophilus Haemophilus Haemophilus influenzaeinfluenzaeinfluenzaeinfluenzae

CASFM - EUCAST 2014Milieu MHF• Test de dépistage Péni

G 1U : 14 mm �� souche sensible aux

β-lactamines ( ≥ 12 mm)Ampi

Amox -clav

• Ampi 2 17 mm (S)(13 mm sur chocolat)

• Amox-clav 17 mm (S)

Plus de problème avec le

milieu MHF

Céfixime 5

Ampi 2

Amox -clav (2-1)

Tétra

Péni G 1U

SXT

CASFM – EUCAST 2014

Mesurer la CMI

Haemophilus infuenzae

CASFM 2014Diamètres critiques :Pénicilline : 12 mmAmpicilline: 16 mm

Cette souche résiste à l’ampicilline :

1 – Par production de pénicillinase

2 – Par modification des

Peni G 1 UI SXT 1.2/

23.75µg

NAL 30µg2 – Par modification des

PLP3 – Les 2 mécanismes

associés4 – Autres tests nécessaires

5 – Ne sait pas

Une seule réponse attendue

AMP 2µg

TE 30 µg

NAL 30µg

MilieuMHF

REPONSE

62%

Cette souche est résistante à l’ampicilline : 1 – Par production de pénicillinase2 – Par modification des PLP3 – Les 2 mécanismes

1. 2. 3. 4. 5.

16%

9% 8%6%

3 – Les 2 mécanismes associés4 – Autres tests nécessaires5 – Ne sait pas

Haemophilus infuenzae

Souche sensible à Augmentin, mais céfinase négative :

1 – Mauvais disque céfinase

2 – Problème de disque

Peni G 1 UI SXT 1.2/

23.75µg

2 – Problème de disque d’Augmentin

3 – Nouvelle pénicillinase chez Haemophilus

4 – Ne SAIT PAS Une seule réponse

attendue

AMP 2µg

TE 30 µg

NAL 30µg

AMC 20/10µg

REPONSE

46%

1 – Mauvais disque de céfinase2 – Problème de disque

d’Augmentin3 – Nouvelle pénicillinase

chez Haemophilus4 – Ne SAIT PAS

1. 2. 3. 4.

46%

24%

9%

21%

4 – Ne SAIT PAS

AM2

AMC30

Erreur dedisque

d’Augmentin

Amoxicilline 20 µg+Acide clavulanique 10 µg

Amoxicilline 2 µg+Acide clavulanique 1 µg AM

2

AMC2

Haemophilus influenzae

CA-SFM - EUCAST 2014 : Disques• Ampicilline

- Entérocoque : 2 µg- Entérobactéries : 10 µg

• Augmentin - Entérobactéries : 10 / 2 µg- Haemophilus : 2 / 1 µg

• Pipéracilline- Entérobactéries : 30 µg- Entérobactéries : 30 µg- Acinetobacter : 100 µg

• Céfotaxime - Entérobactéries : 5 µg- Dépistage BLSE : 30 µg

• Gentamicine Haut niveau Résistance : - 30 µg pour entérocoque (comme EUCAST)- 30 et 500 µg pour streptocoques

(Charge du disque CLSI : 120 µg)

K. pneumoniae

AX TIC GT TOB

PRL KF NET

FOX IPM MOX FEP

ATM TIMPRL AMC KF NET

TET CTX AK C

CT SXT NA OFX

FF CFM ATM TIM

CPO AMC CXM CAZ

CIP ETP CTT TZP

K. pneumoniae

Sur cette souche :

1 – Vous recherchez une carbapénémase

2- Vu la sensibilité aux CIIG, CIIIG etimipénème, vous ne recherchez pas une carbapénémaseune carbapénémase

3 – Vous recherchez une céphalosporinase4 - Ne sait pas

1 réponse possible

REPONSE

80%

1 – Vous recherchez une carbapénémase2- Vu la sensibilité aux CIIG, CIIIG et imipénème, vous ne recherchez pas une carbapénémase

Sur cette souche

1. 2. 3. 4.

0%6%

15%

carbapénémase3 – Vous recherchez une céphalosporinase4 - Ne sait pas

OXA-48CQ3 COLBVH

2010

D’après P. Nordmann

Imipénème : S ≤ 2 mg/L

Imipénème : S ≤ 2 mg/L

Vous catégorisez cette souche productrice de carbapénémase :

1 – Sensible à l’imipénème

2 – Intermédiaire à l’imipénème

3 – Résistante à l’imipénème

4 – Ne sait pas

une réponse possible

REPONSE

1 – Sensible à l’imipénème2 – Intermédiaire à l’imipénème3 – Résistante à l’imipénème4 – Ne sait pas

1. 2. 3. 4.

33%

2%

43%

22%

Résultats RICAI

1 – Sensible à l’imipénème

2 – Intermédiaire à l’imipénème

3 – Résistante à l’imipénème

AX TIC GN TOB

PRL AMC KFNET

Enterobacter asburiae

TECTX

AK C

CT SXT NA OFX

FOX IMP MOX FEP

FFCFM ATM TIM

Enterobacter asburiae

CFM ATM

CPO AMCCXM CAZ

CIP ETP CTT PPT

Cette entérobactérie :1 – Produit une céphalosporinase

2 – Produit une pénicillinase

3 – Produit probablement une Carbapénémase : EPC

Si EPC +, cette carbapénémase appartient

4 – à la classe A de Ambler4 – à la classe A de Ambler

5 – à la classe B de Ambler

6 – à la classe D de Ambler

7 – Ne sait pas

Plusieurs réponses possibles

Entrer le texte de la question...

1 – Produit une céphalosporinase2 – Produit une pénicillinase3 – Produit probablement une

Carbapénémase : EPC Si EPC +, cette carbapénémase appartient

1. 2. 3. 4. 5. 6. 7.

26%

9%

33%

1%

18%

5%7%

carbapénémase appartient 4 – à la classe A de Ambler5 – à la classe B de Ambler6 – à la classe D de Ambler7 - Ne sait pas

Enterobacter asburiae•Produisant une carbapénémase

de type IMI* Classe A de Ambler

Enterobacter asburiae IMI +

Aubron…. Nordmann Emerging Inf. Dis. 2005

Episodes d’EPC, France, 2004 – 2014, par mécanismeBilan au 14 mars 2014 (N= 913 épisodes)

* 2 mécanismes de résistance associés dans 21 épisodes

** Total supérieur à 100% car deux mécanismes de résistance associés dans 21 épisodes

Eucast : Dépistage

E. cloacae (Ertapénème touché)

E. cloacae T.+T.+

Aix :Hodge complet

+ EDTA à J1

E. cloacae T.+T.+

T.neg T.neg

+ cloxacillineHodge ERTAreste positif

avec cloxacilline :

Biologie moléculairenécessaire

1.3.2 Test biochimique de détection de la productio n d’une carbapénèmase

Deux techniques, répondant bien aux besoins actuels, ont été mises au point récemment :

• * La première correspond à la recherche d’une modification du spectre d’un carbapénème sous l’effet d’une carbapénèmase. Il s’agit d’une application de la technique de spectrométrie de masse (MALDI-TOF). Cette technique de la technique de spectrométrie de masse (MALDI-TOF). Cette technique nécessite une mise au point fine, du personnel particulièrement entraîné et un spectromètre de masse (système ouvert). Cette technique est basée sur la détection par spectrométrie de masse, après mise en contact pendant quelques heures (en général 2-3h) de la souche à tester avec une solution de carbapénème, de la disparition du pic correspondant au carbapénème testé et de l’apparition d’un pic correspondant au(x) produit(s) d’hydrolyse de ce même carbapénème. Cette technique n'a pas été évaluée en pratique courante au CNR (5, 6).

La seconde technique de diagnostic rapide est le Carba NP test (Carba Nordmann-Poirel test). Le principe de ce test repos e sur la mise en évidence d’une acidification du milieu lors de l’hydrolyse de l’imipénème par une carbapénèmase. L’indicateur de pH change de couleur (du rouge au jaune) lorsque le milieu devient acide, traduisant la présence d’une carbapénèmase. Ce test a été largement évalué au sein du CNR (> 4000 souches d'entérobactéries de sensibilité diminuée aux carbapénèmes). Il souches d'entérobactéries de sensibilité diminuée aux carbapénèmes). Il possède une excellente spécificité et une excellente sensibilté (7-9). Le protocole du Carba NP test est disponible sur le site du CNR (http://www.cnrresistance-antibiotiques.fr/expertise-des-souches-1.html)

Avantages :- Peu couteux- Peut être réalisé sur les souches isolées voir directement à partir des

hémocultures positives- Facile à mettre en place dans n'importe quel laboratoire (nécessite peu de

moyens : matériels et réactifs)- Sensible et spécifique (100%)- Rapide (< 2h) sur souches isolées- Excellence sensibilité et spécificité de détection de TOUTES les

carbapénèmasescarbapénèmases

Inconvénients :- nécessité de mettre au point la technique au laboratoire. Un kit Carba NP test

sera disponible en 2014 et validé par le CNR.NB: un kit diagnostic s'inspirant du Carba NP test a été mis sur le marché

(Rapid Carba Screen Rosco, distibué par Eurobio) Il n'a pas été validé par le CNR et nos premiers résultats montrent un défaut de sensibilité important notamment pour les souches productrice d’OXA-48 (1ère carbapénèmase en France).

TEST CARBA -NP

Evaluation of the Carba NP test for carbapenemase d etection

Monica ÖsterbladAAC in press 100 % spécificité , mais 88 % sensibilité

1.3 Méthodes moléculaires de détection des gènes EPC Ces techniques reposent sur l’utilisation de la PCR, complétée ou non parune technique de séquençage de l’ADN amplifié (utile uniquement à des finsépidémiologiques). Les données épidémiologiques actuelles des EPC enFrance impliquent la nécessité d’utiliser des techniques moléculairescapables de détecter au moins les gènes codant pour les carbapénèmasesde type OXA-48 (76%), NDM (11%), KPC (6%) et VIM (4%) couvrant ainsi97% des EPC. Les 3% restant correspondant à des carbapénèmases detype IMP et IMI. Avantages : - Excellente spécificité et sensibilité - Excellente spécificité et sensibilité - Permet de déterminer le type de carbapénèmaseInconvénients : - Coût élevé - Ne détecte que les gènes recherchés; à utiliser en seconde- intention après identification de l'activité carbapénèmaseDes kits de détection des gènes de carbapénèmasesbasés sur l’utilisation de puces à ADN (ex : Check-MDRCT103 kit, Check-Points) sont également disponibles sur le marché.Ces derniers sont encore plus onéreux, nécessitent un appareil dédié, et demandent une certaine expertise (12).

Il importe également defavoriser le développement de testsde diagnostic rapide et de renforcerles capacités de tous les laboratoiresde microbiologie dans la détectionphénotypique de certainesrésistances

GeneXpert

Directement sur portage rectal : résultat en 1 heure

Patient de retour d’Inde Repéré aux urgencesTest GeneXpert négatif :1 – Vous libérez l’isolement sans faire

d’autres tests2 – Vous libérez l’isolement en effectuant une

recherche de BHRe classique3 – Vous ne libérez pas l’isolement et vous

faites une recherche de BHRe classique4- NE SAIT PAS

Simple sondage 1 réponse possible

REPONSE

57%

1 – Vous libérez l’isolement sans faire d’autres tests

2 – Vous libérez l’isolement en effectuant une recherche de BHRe classique

3 – Vous ne libérez pas l’isolement

1. 2. 3. 4.

12%

1%

57%

30%

3 – Vous ne libérez pas l’isolement et vous faites une recherche de BHRe classique

4- NE SAIT PAS

Maisla recherche

classique nous donne

l’antibiogramme suivant

Klebsiellapneumoniae

CTX

IPMKlebsiellapneumoniae

FEP

ETP

CAZ

Test carba NP négatifTest Biologie Moléculaire maison : PositifCarbapénémase :

OXA 181 (OXA-48 variant)Même activité hydrolytique / OXA-484 Acides aminés de différence dans la 4 Acides aminés de différence dans la

séquence

Faux négatif GenExpert : Decousser …, Normann JAC in press

… détecte OXA-181

Présence de BLSE dans cette souche (résistance CIII G)

Patient de retour d’Inde Repéré aux urgencesTest GeneXpert positif :1 – Vous confirmez l’isolement sans faire

d’autres tests2 – Vous confirmez l’isolement en effectuant une

recherche de BHRe classique3 – Vu mon expérience dans le ca précédent, je

téléphone à Cepheid pour connaître la spécificté du GeneExpert

4 – Ne sait pas

Simple sondage 1 réponse possible

REPONSE

72%

1 – Vous confirmez l’isolement sans faire d’autres tests

2 – Vous confirmez l’isolement en effectuant une recherche de BHRe classique

3 – Vu mon expérience dans le ca

1. 2. 3. 4.

13%

2%

13%

3 – Vu mon expérience dans le ca précédent, je téléphone à Cepheid pour connaître la spécificté du GeneExpert

4 – Ne sait pas

Maisla recherche classique nous donne l’antibiogramme suivant

SerratiaSerratiamarcescens

CTX

Serratiamarcescens IPM

FEP

CAZ

ETP

CPO

• Carba NP négatif• Test biologie moléculaire maison négatif• Variant de OXA-48

OXA 48 like : OXA 405� OXA 48 like : OXA 405• Perte de l’activité carbapénémase… mais activité sur les CIIIG

L. Dortet, S. Oueslati, K. Jeannot, D. Tandé, F. Deschamps, T. Naas,P. Nordmann ICAAC 2014

OXA 405


OXA-48 OXA-405


OXA-405Mutation au niveau du site actif


Typage phénotypique de la carbapénémase

TEST CARBA -NP

K. pneumoniaeCQ. NEQAS

2014

CTX

K. pneumoniaeCQ. NEQAS 2014

IMI FEP

ATM

ETP

CAZ

K. pneumoniaeCQ. NEQAS 2014

Cette souche produit une carbapénémase appartenant à la classe :

1 – A de Ambler

2 – B de Ambler

3 – C de Ambler

4 – D de Ambler

5 - Ne sait pas

1 seule réponse possible

REPONSE

1 – A de Ambler2 – B de Ambler3 – C de Ambler4 – D de Ambler5 - Ne sait pas

1. 2. 3. 4. 5.

25%

47%

17%

6%5%

Le GENXPERT donne les résultats suivants :

+ MBL+ OXA 48+ OXA 48

…. possible….. Mais test OXA-48 maison négatif……. ET…..

+ EDTAEDTA

+ EDTA

Proteusvulgaris AMX

TIC

GNTOB

PRL AMC NETPRL AMC NET

TE CTX AK C

SXT NA OFX

Devant cet antibiogramme de Proteus vulgaris :

1 – Vous ne faites aucune interprétation

2 – Vous lancez des tests complémentaires

3 – Vous faites une interprétation

sans tests complémentaires

4 – Ne sait pas

1 réponse attendue1 réponse attendue

Amoxicilline R Tétracycline RTicarcilline S Céfotaxime SGentamicine S Amikacine STobramycine S Chloramphénicol SPipéracilline S Cotrimoxazole RAmoxicilline/ Ac. nalidixique Sac. clavulanique I Ciprofloxacine SNetilmicine S


63%

1 – Vous ne faites aucune interprétation

2 – Vous lancez des tests complémentaires

3 – Vous faites une interprétation sans tests complémentaires

1. 2. 3. 4.

13%

2%

22%

63%sans tests complémentaires4 – Ne sait pas


Vous interprétez :1 – Ticarcilline2 – Gentamicine3 – Pipéracilline4 – Céfotaxime5 – Ciprofloxacine6 – Ne sait pas

Plusieurs réponses attendues

Amoxicilline R Tétracycline RTicarcilline S Céfotaxime SGentamicine S Amikacine STobramycine S Chloramphénicol SPipéracilline S Cotrimoxazole RAmoxicilline/ Ac. nalidixique Sac. clavulanique I Ciprofloxacine SNetilmicine S

REPONSE

1 – Ticarcilline2 – Gentamicine3 – Pipéracilline4 – Céfotaxime

Vous interprétez :

1. 2. 3. 4. 5. 6.

28%

7%10%9%

16%

30%

5 – Ciprofloxacine6 – Ne sait pas

Synergie Ticarcilline –acide clavulanique

�Production de pénicillinase.

Comme chez P. mirabilis, l’activité dela pénicillinase s’exprime mal chez P. vulgaris.

Règle CASFM :

« Interpréter I un résultat S aux carboxy et/ou uréido-pénicillinesChez P. mirabilis R amoxicilline. »

Cette souche avait un phénotype "céfuroximase" (céphalosporinasede classe A inductible), naturel chez P.vulgaris et P.penneri, associéà une pénicillinase.Dans l'ensemble, les résultats de l'antibiogramme ont été très bons(plus de 95% de réponses exactes),(plus de 95% de réponses exactes),excepté pour la ticarcilline (79% de réponses exactes).-Ticarcilline: 79% de réponses exactes (résistant ou inter médiaire).Pour les 21% de réponses "sensible",les milieux solides donnent 48% de réponses erronées,les milieux liquides et automates 8,5%.En raison de la faible expression de la pénicillinase chez Proteus vulgaris,quand cette production est suspectée, il est conseillé d'interpréter tousles résultats "sensibles" en "intermédiaires" pour toutes lespénicillines.

FINFIN

Scores des participants

41 Participant 12DA39

41 Participant E67A7

40 Participant 138132

39 Participant 790CA9

38 Participant 3C5026

37 Participant 3C4FF9

36 Participant 139948

36 Participant A721F

35 Participant 3C500E

35 Participant 18E316

lecture interprétative de l’antibiogramme

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