le dépistage néonatal de la drépanocytose rolande ducrocq département de génétique laboratoire...
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Le dépistage néonatalLe dépistage néonatalde la drépanocytosede la drépanocytose
Rolande DUCROCQ Rolande DUCROCQ
Département de GénétiqueDépartement de GénétiqueLaboratoire de dépistage des hémoglobinopathies / INSERM Laboratoire de dépistage des hémoglobinopathies / INSERM U763U763Hôpital Robert Debré, ParisHôpital Robert Debré, Paris
- Maladie génétique autosomique récessive
- à révélation précoce : premiers mois de vie
- grave : espérance de vie <15 ans en 1970
- et fréquente (près de 300 cas/an en France)
La drépanocytose
Steinberg M.H., N Engl J Med 1999; 340:1021-1030Globules rouges normaux Globules rouges drépanocytaires
Mortalité dans les SDM
• Énorme en l’absence de mesures préventives 15-30% avant 5 ans
• PrécocePic de fréquence entre 6 et 18 mois
• Évitable – Prophylaxie précoce à l’Oracilline – Vaccinations précoces (anti-pneumococcique)– Éducation parentale précoce
• Ramenée à 2-5% avant l’âge de 5 ans grâce au dépistage néonatal
Dépistage néonatal de la drépanocytose en France
métropolitaine • National (ministère santé; CNAM; AFDPHE )
• Début en 1995
• Réalisé à j3 en même temps que les autres tests:
• Phénylcétonurie
• Hypothyroïdie
• Hyperplasie congénitale des surrénales
• Mucoviscidose• 4 laboratoires de dépistage en métropole
• 1 à Marseille, 1 à Lille• 2 en Ile de France (88.000 tests/an;170.000 naissances)
Organisation : ensemble des acteurs
Maternités Associations régionales
Laboratoires spécialisés
Pédiatres de suivi
Pédiatres référents
PMI
Dépistage néonatal « ciblé »« ciblé »
Origine géographique des populations concernées par la Drépanocytose
Pays d’Afrique Sub-SaharienneAntilles-Guyane
Pays d’Afrique du nordAfro-américainsBrésilItalie sud SicileGrèceTurquieMoyent-OrientÎles de l’Océan IndienPéninsule arabiqueInde
11%
10%
7.4%
2.2%
6%
7%
8.3%
8%
10%
11%
12%
11%
24%23%
19%
17%22%
46.2% 52%
Métropole
variations régionales des populations à risque/nombre de naissances
Prélèvement de sang capillaire sur papier Güthrie
Comment dépiste-t-on ?
Méthodes :
1. Isoélectrofocalisation en 1ere
intention
2. CLHP en 2eme intention
(Wheathehall; 2001)
Hémoglobine normaleHémoglobine normale
FŒTUS et NOUVEAU-NE ADULTEHbF Fraction majeure HbA Fraction majeure
HbA et HbF1 mineure HbF et HbA2 mineure
Profils d’ Isoélectrofocalisation
–
+
F (fraction majeure)
Formes dégradées
C, E, Oarab
S, D
A
SC SS AS AA Témoin
FASC
F1
F FF
Profil normal hétérozygote AS homozygote SS
Identification des fractions Hb par CLHP
Programme spécifique « dépistage néonatal »
Le dépistage identifie les enfants atteints ET les porteurs sains
Sensibilité et spécificité
Ile de France
Guadeloupe
88.000
7.600
1.652
275
200
25
1/460(1/1.050)
(1/304)
170.000
Nombre de bébés
testés/an(780.000
naissances/an)
2.040
Nombre total de SDM dépistés
(1995-2005)
1/734(1/3.390)
fréquence SDM
/testés
/naissances
260Métropole
Nombre de SDM
dépistés/an
(2005)
Nombres de cas dépistés
0
20
40
60
80
100
120
1995 1997 1999 2001 2003 2005
SDM
SS
SC
Sbthal
915 SDM dépistés en 12 ans 1/460 dépistés 1/1060 naissances
En France métropolitaine 1/3400 naissances
Nombre de SDM dépistés/an dans Nord-Francilien
(427 246 tests en 12 ans)
Risque et profil épidémiologique des Risque et profil épidémiologique des SDM SDM variables selon les variables selon les régionsrégions
Ces différences sont :
quantitatives : importance du risque
qualitatives : variabilité des génotypes
Elles résultent de la disparité des populations à risque :
• en Ile de France originaires d'Afrique sub-saharienne
• en région Sud populations méditerranéennes
fréquence plus faible du gène S mais plus élevée des gènes -thal
non pathologiques : pathologiques :
Association régionale Médecin spécialisé Maternités Association régionale
Médecin référent
Rendu des Rendu des résultatsrésultats
Annonce de la Annonce de la maladiemaladie
• 1er contact capital• Différences culturelles et religieuses • Problèmes linguistiques
médiateur culturelmédiateur culturel
• Aide aux parents construire un avenir pour le bébé atteint
• Transmission génétique expliquer sans culpabiliser
nécessité d’un personnel nécessité d’un personnel spécialiséspécialisé
Prise en charge précoce Prise en charge précoce mortalité, mortalité, morbiditémorbidité
Prévention des risques infectieux et anémiques :
• Antibio-prophylaxie• Vaccination anti-pneumococcique
• Education parentale
Suivi régulier :
• Infections• Anémie• AVC • CVO
Efficacité du dépistage et difficultés rencontrées
• Ciblage : Décision politiquePlus la population est mélangée, plus le
ciblage est difficileFormation permanente du personnel de
maternitéRisque de faux-négatifs dans les populations
brassées• Méthodologie : spécificité et sensibilité éviter les faux-négatifs
et faux- positifs• Prise en charge : - Centre hospitalier (centre de la Drépanocytose)
- Nécessité d’un personnel soignant spécialisé - Nécessité d’organiser des réseaux de soins
- Harmonisation des protocoles de soins• Difficultés inhérentes :- à la précarité socio-économique des familles immigrées et à leur mouvance (perdus de vue)
- à la faiblesse des moyens alloués
En terme de santé publique
• Disparité du poids de la prise en charge selon les différentes régions du territoire national
• Redéfinition des stratégies de dépistage
- dépistage systématique ou ciblé ?- dépistage systématique ou ciblé ?
ConclusionConclusion
Optimal strategy for sickle cell newborn screening
IEF
R. Ducrocq, R. Debré, Paris
Normal profiles abnormal or illegible profiles
Results (90%) CE-HPLC, Sickle cell short
program
AA, AS, AC, AE, AD, AO arab SS-like profiles S>A; SD; SX profiles profiles
Results CE-HPLC, HbA1c program
SS or S thal profiles
Results
SHopeRP-HPLC or reverse dot blot
Results
Les anomalies de l’hémoglobine
Anomalies quantitatives
Thalassémies (type α ou β)
Anomalies qualitatives Production d’une Hb anormale
Mutants de l'hémoglobine
HbC, HbD, HbE, HbOarab…
HbS le plus fréquent Drépanocytose
– +
S/C like
FASC
IEF HPLC (prog. Sickle cell)
S Oarab
F
Diagnosis of a compound heterozygous S/Oarab
R. Ducrocq, R. Debré, Paris
thal major ou preterm baby ?
+ –
FASC
F
absence of HbA
Diagnosis of a -thalassaemia major IEF HPLC (prog. Sickle cell)
R. Ducrocq, R. Debré, Paris
Syndromes drépanocytaires majeurs (SDM) Homozygotes S/S (β6 Glu Val)
Hétérozygotes composites
S/C (β6 Glu Lys) S/β°thal ou S/ β
+thal S/D Punjab (β121 Glu Gln) S/O Arab (β121 Glu Lys) S/E (β26 Glu Lys)
Quand l’Hb S entraîne-t-elle une pathologie ?
Remarques :
• Hétérozygote A/S = porteur sain du trait drépanocytaireA/S Antilles ou A/S Oman = SDM • Faux positifs asymptomatiques ex : S/D Korle Bu, S/Hope
Symptômes et Conséquences
• Douleur
• Anémie hémolytique chronique
• Crises Vaso-occlusives
• Syndrome Thoracique Aïgu
• Séquestration splénique
• Infections (Rate) Pneumopathie,Ostéomyélite, Méningites et septicémies • Sévérité variable
Réglage du plan avant coulage du gel
Méthode de première intention : IEF
Coulage du gel
Méthode de première intention : IEF
Dépôt des échantillons