Diagnostic différentiel des avortements chez les petits ruminants
Journée nationale technique du 11 janvier 2013Le protocole national de diagnostic différentiel
des avortements chez les bovins
Renée de Cremoux
Un groupe de travail pluridisciplinaire
Une démarche de diagnostic différentiel en cours d’élaboration
Animation : Institut de l'Elevage / ENV Toulouseau sein de l'UMT Santé des Petits Ruminants
GDS France
Partenariat régional et départemental :FRGDS Poitou‐Charentes et Midi‐Pyrénées, GDS 04, GDS 12, GDS 41, GDS 64, GDS LimousinFRGTV Midi‐PyrénéesLaboratoires d'analyses 05, 58, 79
Appui scientifique et technique :Anses Niort, Alfort, Sophia Antipolis et ENVT
Races de France SNGTV ADILVA
Caprins - Ovins
Seuils pour la brucellose Dès le 1er avortement(Révision envisagée à court terme : seuil avec avortements répétés)
Avortements répétés :Mise en œuvre d’un diagnostic différentiel
3 avortements minimum en 7 jours ou moins
Critères d’alerte
Un diagnostic de groupe
Des avortements répétés dans le temps
Dans le cadre de la surveillance clinique
Un socle commun de maladies à intégrer dans le diagnostic différentiel
Maladies de première intentionFièvre QChlamydioseToxoplasmose
Maladies fonction de l'espèceet/ou du contexte épidémiologique
Salmonellose abortive ovineBorder disease
Sur le plan infectieux : Critères de choix :
‐ Agent ayant un rôle abortif avéré‐ Agent fréquemment incriminé en cas d’avortements‐ Existence d’outils diagnostiques‐ Si possible : existence de mesures de maîtrise
Des résultats valorisables sur le plan opérationnel y compris par l’exclusion
de(s) l’agent(s) suspecté(s)
Maladies de seconde intention
Sur le plan infectieux :
Sur le plan non infectieux : alimentation / stress / accident …
A définir selon le contexte épidémiologique et clinique : origines bactériennes (Listeria, Campylobacter, Leptospira,…), mycosiques, virales, parasitaires,…
Alimentation, plantes toxiquesMédicamentsAccidents, traumatismesStress …
Sans négliger les autres étiologies abortives
Quels commémoratifs recueillirQuels animaux préleverQuels prélèvements réaliserQuelles analyses demanderComment interpréter
Définition d’une démarche diagnostique
Pour pouvoir proposer des mesures de lutte (médicales / sanitaires) adaptées
Une démarche de groupe qui nécessite des compromis pour valoriser au mieux le matériel biologique
disponible
Disposer d’emblée d’un ensemble d’échantillons
Photos S. Blain (SNGTV)Photo X. Nouvel (ENVT)
Prévoir les analyses nécessaires à la surveillance réglementaire de la brucellose,
Disposer du matériel biologique nécessaire au diagnostic différentiel (a minima de 1ière intention) – en principe, facteur non limitant en élevages de petits ruminants –Photos X. Berthelot (ENVT)
Placenta
Contenu stomacal
Encéphale Rate
Ecouvillon
Principe similaire à la boîte proposée pour les bovins mais contenu distinct :
‐ 9 écouvillons (écouvillons « coton » tels que demandés pour la brucellose),
‐ Des sachets étanches permettant de recevoir des houppes placentaires ou des organes d'avorton,
‐ Un pot hermétique permettant de recueillir ces sachets tout en évitant des intercontaminations entre prélèvements,
‐ Un tube sec (au moins) pour disposer de liquide stomacal d'avorton
‐ De la place pour une quinzaine de tubes en vue d'analyses sérologiques (en prévoyant de pouvoir rajouter des tubes EDTA – dépistage de la BD –),
Proposition d'une boîte qui réponde à la norme de transport pour le matériel biologique (prévoir de plus un dispositif d'envoi sous froid : plaque eutectique)
Disposer d’une boîte de prélèvements standardisée
PhotosP. Nicollet
(Laboratoire Vendée)
Recueil des commémoratifsDescription de l'épisode abortif
Début / période / Nombre au moment de l'intervention (à mettre en relation avec le nombre de femelles ayant mis bas)
Population affectée (âge, site, stade de gestation)Autres signes et/ou problèmes sanitaires observés au sein du cheptel
EpidémiologieRelation de contacts avec d'autres animaux/ cheptels, transhumance / introduction / mouvements
Contexte vaccinal. Le cas échéant : mesures appliquées
Antécédents vis‐à‐vis des avortementsEpisodes abortifs préalables : nbre d'avortements, population concernée, analyses réalisées, étiologie éventuelle
Point (et sensibilisation) sur les cas de mortinatalité observés antérieurementStatut des cheptels vis‐à‐vis de la BD (ou du BVD s'il y a un atelier bovin) s'il a été établi
GénéralitésDans l'ensemble : pas de signes pathognomoniques,Ampleur des épisodes abortifs : parfois importante en particulier en cas de première exposition à l'agent infectieux,
Pour la plupart des maladies abortives : mortinatalité accrue, nouveau‐nés chétifs, infertilité apparente et potentiellement, taux de mises bas inférieur à celui attendu.
Border diseaseExplosion des maladies intercurrentes chez les jeunes dont : diarrhée, ecthyma, problèmes respiratoires, trembleurs, faible croissance, … et absence de guérison malgré intervention.
Salmonellose abortive ovinePremiers avortements 6 à 8 semaines avant le terme prévu puis échelonnement pendant toute la saison de mise bas
Altération de l'état général de tout ou partie des femelles
Aspects cliniques complémentaires
Un diagnostic de groupeReposant sur un ensemble d'analyses conduites sur plusieurs animauxFondé sur l'interprétation d'une combinaison de résultats
Diagnostic direct : le plus souvent, à privilégierPCR : Pour certaines maladies (ex : fièvre Q), nécessité d'une quantification
Principes généraux
Seuil de détectionSeuil de quantification
Seuil de saturation
Interprétation
Seuil diagnostique
Concentrationen acide nucléique
Limitede détection
Limite de quantification
Intensité de la réaction
Pour un rendu quantitatif, nécessité de recourir à une
gamme étalon
Analyses sérologiques• Toujours délicates à interpréter en raison :
‐ de l’absence de concomitance de la réponse humorale (IgG) par rapport à la survenue de l'infection (délai à prendre en compte),
‐ de l’existence d’un délai variable et parfois long entre avortement et expulsion du fœtus (ex : fœtus momifiés),
‐ de l'impossibilité d'évaluer l'ancienneté de l'infection (de la circulation de l'agent) avec parfois des durées d'immunité importantes (ex : toxoplasmose),
‐ de l’existence de formes asymptomatiques des infections pouvant être présentes de manière enzootique (ex: fièvre Q, chlamydiose).
• Une interprétation à réaliser uniquement à l'échelle du lot / du troupeau : sérologie de groupe
• Une prise en compte possible des séroconversions ou a minima des augmentations de titre sérologique pour mettre en évidence la circulation récente des agents infectieux
Principes généraux
Diagnostic direct :Choix des matrices à analyser
Border disease
Analyse en mélange possible(N=3)Analyse quantitative indispensable(sauf sur avorton)
Contenustomacal > foie
Salmonelloseabortive ovine
Encéphale ‐ peau ‐ rein ‐ rate ‐ foie
Sang (agneaux)
Houppes cotyl.
Mucus vaginal
Fièvre Q
Houppes cotyl.
Organes avorton
Organes avorton
Chlamydiose
Houppes cotyl.
Mucus vaginal
Harmonisation envisageable par rapport à FQAnalyse en mélange non interprétable à ce jour, non retenue
Houppes cotyl.
Toxoplasmose
Encéphale > foie
Hétérogénéité de la distribution de T. gondiiAnalyse en mélange retenue(plusieurs organes et/ou animaux)
Distribution large du virusAnalyse en mélange retenue
Houppes cotyl.
Analyse en mélange non retenue
BactériologiesAmplification des acides nucléiques : recours aux PCR
Diagnostic indirect :en complément du diagnostic direct
Border diseaseSalmonelloseabortive ovine
Chlamydiose Toxoplasmose
Séroagglutinations (IgM) sur Ax ayant avortéAnalyse des titres Ac
Objectifs• Mettre en évidence une circulation récente de l'agent infectieux• Selon le contexte, apporter des précisions sur la séroprévalence de certaines populations en vue de proposer des mesures de maîtrise adaptées au statut du lot ou du troupeau
S'intéresser à la dynamique de la réponse humoraleChoisir les femelles à prélever
Séroprévalence sur animaux sentinelles
Augmentation significative du titre Ac ou séroconversion sur Ax ayant avorté
Séronégatifs :Diagnostic d’exclusion
Séronégatifs :Diagnostic d’exclusion
Nouvelle PCR
Diagnostic « Toxoplasmose »3 avortements en 7 jours ou moins
Réalisation d’une PCR (individuelle ou en mélange)
PCR ‐ PCR +
Implication de Toxoplasmadans tout ou partie des
avortementsToxoplasman’est pas responsablede la série d’avortements Toxoplasma est présent dans l’exploitation mais son implication dans la série
d’avortements n’est pas certaine (circulation pouvant être ancienne).Une évaluation de la séroprévalence chez les femelles de renouvellement (n=10) peut être intéressante pour préciser la conduite médicale et sanitaire à tenir
≥ 2 séroconversionsou sign de titre
Analyses séronégatives
+‐
Evolution des titres sérologiques
Sur 5 femelles ayant avorté récemment :2 PS de sang à 15 j d’intervalle
Implication de Toxoplasmapeu probable
ou
Analyse positivesà J0 et 15j.
Circulation récente
Prioritairement
Diagnostic « Border disease»
+
1 PCR sur le sang des agneaux vivantsmalades ou chétifs. Mélange de 10 max
1 PCR sur les avortons ou les houppesplacentaires. Mélange de 3 max
+ ‐
Circulation virale avéréeImplication du BDV dans tout ou partie
des avortements
Implication du BDVne peut être exclue
Animaux sentinelles :
‐ Jeunes mais âgés de plus de 4 mois, voire de plus de 6 mois,‐ Au contact des lots ayant avorté,‐ Non vaccinés avec un vaccin induisant un marquage sérologique
3 avortements en 7 jours ou moins
‐
Implication du BDVpeu probable
Nouvelle PCR
+‐
Analyse de la réponse sérologique
Sur 10 animaux sentinelles(A défaut sur des primipares du lot ayant avorté)
ouPrioritairement
Maxi 1 +> 1+
Implication du BDV peu probableProtection des animaux sains à envisagersi le statut troupeau est connu et positif
Circulation virale récenteImplication du BDV possible
Implication du BDV dans toutou partie des avortements
Circulation virale avéréeEpisode abortif à BDV probable
Conclusion
Des conclusions toujours subordonnées à la qualité des échantillons, à la nature et au nombre des résultats obtenusEn cas de circulation de plusieurs agents infectieux, une difficulté à les hiérarchiser par rapport à leur implication dans la survenue de l’épisode abortif