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Biolo. Introductio
I. La phase p
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2.2. Prélève
2.3. Traitem
2.4. Transp
II. La phase a
3.1. Biochim
3.2. Biochim
3.3 Numéra
V. La phase p
V. Le Contrôl
5.1. Contrôl
5.2. Evaluat
5.3. Change
5.4 Signalem
5.5 Consult
VI. Traçabilité
6.1 Traçabi
6.2 Traçabi
VII. Le recouv
VIII. Changemméthodes .....
8.1. Objectif
8. 2. Réalisa
8. 3. Analys
X. Le monito
X. Archivage
XI. Référence
XII. Annexes .
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I. Introduction et objectifs
Les laboratoires de biologie médicale (LBM) des Centres d’Examens de Santé (CES) et ceux travaillant pour leur compte participent à des missions de santé publique, à des études épidémiologiques et d’observation de la santé : à ce titre leurs résultats d’analyses doivent être homogènes dans la durée et entre eux.
L’objectif de l’équipe Constances est de fournir aux chercheurs en épidémiologie des données biologiques de bonne qualité. Pour cela, il est important, d’une part de standardiser la phase pré-analytique et la phase analytique, d’autre part d’assurer la traçabilité des actes effectués et enfin d’évaluer la variabilité analytique (intra, inter-laboratoires et au cours du temps).
Ce document anticipe la mise en place ultérieure (à partir de 2013) d’une biobanque dont le principe est de recueillir et de conserver des échantillons biologiques de toute nature (sang total, sérum, plasma, urine, cellules, ADN, ARN, etc..). Toutes ces opérations doivent répondre au suivi et au respect d’un protocole rigoureux. Ce document qui répond aux exigences de l’accréditation des laboratoires de biologie médicale permettra aux laboratoires participants de s’intégrer au processus de mise en place de la biobanque sans difficultés majeures.
Le présent document comprend les chapitres suivants :
1. La phase pré-analytique décrivant les procédures de prélèvement, de conservation et de transport des échantillons
2. La phase analytique décrivant les analyseurs ainsi que les analytes retenus pour la cohorte Constances
3. La phase post-analytique décrivant le transfert de données vers l’équipe Constances
4. Le Contrôle Qualité
5. La traçabilité
6. Le recouvrement
7. Le changement du système analytique
8. Le monitoring par des attachés de recherche épidémiologique (ARE)
9. L’archivage des documents
Les laboratoires participant à Constances (Annexe 1) ont accepté et signé la charte de confidentialité de Constances (Annexe 2) et s’engagent à suivre l’ensemble des points du protocole ci-dessous.
3
II. La phase pré-analytique 2.1 Avant-propos
La (les) personne(s) en charge des prélèvements sanguins et des recueils urinaires doit (doivent) :
Assurer la traçabilité du matériel de prélèvement (tubes) : références des tubes, fournisseurs, type d’anticoagulant, date de mise en service, date de fin du lot.
Remplir la fiche de correspondance journalière des prélèvements (Annexe 3) permettant le suivi des tubes, du prélèvement/recueil à l’analyse, pour l’ensemble des volontaires Constances d’une même journée. Cette fiche comprend :
o la date du jour
Et pour chaque volontaire :
o une étiquette N° SAGES (ou N° interne du système informatique du CES) avec Code à Barres
o une étiquette N° Constances avec Code à Barres
o une étiquette N° laboratoire avec Code à Barres (en fonction de l’organisation du laboratoire)
o l’heure du prélèvement sanguin
o l’heure de recueil des urines
o l’heure de centrifugation
o l’heure d’arrivée au laboratoire
o la conformité dans les délais et la température, selon les fiches constructeurs1
Il est impératif de vérifier l’identité de chaque volontaire (nom, prénom, date de naissance, numéro Constances) avant tout recueil.
Ces informations sont conservées au CES et sont vérifiées par les ARE (voir chapitre IX).
2.2. Prélèvement sanguin et recueil urinaire
2 .2 .1. Prélèvement sanguin
Le prélèvement sanguin doit être réalisé entre 8h et 10h du matin. Le volontaire Constances doit être à jeun depuis 12 heures2 et en position allongée (ou semi allongée). Les réponses aux deux questions suivantes :
- « A quelle heure avez-vous fini de prendre votre dernier repas (approximativement) ? »
- « Avez-vous mangé ce matin (exception faite d’eau et médicaments) ? »
doivent être renseignées dans le cahier paraclinique.
Remarque : Si le consultant n’est pas à jeun depuis 12 heures, le prélèvement est réalisé et l’information recueillie sur le cahier paraclinique.
1 Ces fiches seront vérifiées par les ARE : si les délais ou la température ne sont pas conformes au protocole, les numéros Constances concernés seront transmis à l’équipe Constances. Dans ce cas, les résultats ne seront pas conservés 2 A cette fin, le volontaire doit avoir été prévenu sur la convocation
4
Pour chaque volontaire, les informations complémentaires suivantes doivent être notées par le préleveur dans le cahier paraclinique :
- l’heure du prélèvement,
- les difficultés de prélèvement : un serrage modéré du garrot pendant le temps le plus court possible est recommandé. Toute difficulté rencontrée lors du prélèvement (recueil insuffisant, goutte à goutte, garrot trop long…) doit être signalée.
Les tubes utilisés pour le recueil, sont dans l’ordre3 :
1) un tube sec avec séparateur de gel, accélérateur de coagulation
2) un tube EDTA pour la numération formule sanguine
Chaque tube doit être identifié par une étiquette code à barres (SAGES ou du laboratoire) comportant :
- le numéro code à barres (CAB)
- nom, prénom, date de naissance, sexe
Cette étiquette est apposée à la fois sur chaque tube et sur tout document l’accompagnant (y compris la fiche de correspondance journalière, Annexes 3), dans la cabine de prélèvement, en présence du volontaire.
2 .2 .2 . Recueil urinaire
Le recueil urinaire doit se faire à jeun depuis 12 heures, au CES, dans un flacon avec bouchon. Le flacon est identifié par une étiquette code à barres (SAGES ou du laboratoire) (voir paragraphe 2.2.1, ci-dessus).
Remarque : Si le consultant n’est pas à jeun depuis 12 heures, le recueil est réalisé et l’information notée sur le cahier paraclinique.
L’échantillon destiné à l’analyse doit être recueilli de manière aseptique : après un lavage hygiénique des mains et une toilette à l’aide d’une lingette, pour l’ensemble des volontaires.
Pour chaque volontaire, les informations suivantes doivent être notées dans le cahier paraclinique :
- l’heure du recueil (l’heure du recueil est notée sur le pot, puis reportée sur le cahier)
- la prise d’un en-cas entre le prélèvement et le recueil des urines (recueil non à jeun)
- le motif d’absence de recueil
De plus, pour les femmes :
- la présence de règles
3 Le protocole recommande l’usage de tubes sérum pour les examens de biochimie. Il faut privilégier une harmonisation de cette pratique dans les LBM de Constances. Certains LBM utilisent le plasma, cela pose principalement le problème de la mesure du glucose. Les nouveaux tubes sérum à coagulation rapide proposés par les fabricants de tubes sont encore peu utilisés et plus onéreux.
5
2.3. Traitement pré-analytique
2 .3.1. Prélèvement sanguin
Les échantillons sanguins peuvent être conservés à température ambiante si celle-ci n’excède pas 20°C et de préférence à l’obscurité, avant d’être analysés. L’analyse doit être réalisée selon les recommandations fournisseur, et en l’absence de recommandations, dans les 8 heures après l’étape pré-analytique.
La centrifugation doit être réalisée entre 30 et 45 minutes après le prélèvement au moyen d’une centrifugeuse réfrigérée. L’opération de centrifugation doit être bien conduite afin de fournir au laboratoire un sérum clair, non hémolysé, sans débris cellulaires ou fibrine.
A titre d’exemple les recommandations habituelles dans les études épidémiologiques sont les suivantes :
- force centrifuge : 2 000 g
- durée 15 minutes
- température n’excédant pas 20°C
Après centrifugation, les tubes doivent être conservés au frais (4-8°C) et à l’obscurité.
Ces conditions sont celles préconisées par Becton Dickinson pour standardiser la phase préanalytique. On peut se rapprocher de son fournisseur afin de s’assurer de la compatibilité de ces préconisations. L’important étant d’atteindre l’objectif ci-dessus.
2 .3 .2 . Recueil urinaire
Les recueils urinaires sont analysés par bandelette urinaire selon les recommandations fournisseur et en l’absence de recommandations et au maximum dans les 2 heures suivant le recueil. Si un dosage est nécessaire (chapitre 3.2), les urines sont conservées jusqu’à ≤ 12 heures entre 4 et 25°C. Les urines sont recueillies sur tube sec, sans additif pour les analyses de biochimie urinaire4.
2.4. Transport
Après le traitement pré-analytique en local, le sérum après séparation et le sang total (hématologie) sont transférés dans des caissons isothermes à une température à 20°+/-5°C5. Les urines sont transportées à une température entre 4° et 25°C, tout en respectant les conditions au point 2.3.2. Si les urines sont transportées à < 15°C, l’échantillon urinaire sera ramené à température ambiante avant analyse.
La traçabilité de la chaîne du froid doit être assurée par un système de contrôle de température avec dispositif d’enregistrement. Les données recueillies par ce système doivent être archivées au laboratoire et traçables (ce point sera vérifié par les ARE).
La réglementation ADR doit être respectée par la personne ou le prestataire en charge du transport.
La fiche de correspondance journalière (Annexes 3) est jointe à l’ensemble des échantillons, elle est archivée au laboratoire. Une copie est conservée au CES pour les laboratoires à distance du CES.
4 Eventuellement sur tube avec conservateur si des analyses microbiologiques ou de cytologie sont à faire - hors cadre Constances 5 Des températures plus basses peuvent être acceptées pour des analyses réalisées par le laboratoire - hors cadre Constances.
6
PHASE PRE-ANALYTIQUE
vérifier l’identité de chaque volontaire assurer la traçabilité du matériel de prélèvement remplir la fiche de correspondance journalière des prélèvements et recueils remplir le cahier paraclinique pour chaque volontaire
Prélèvement sanguin réalisé entre 8h et 10h du matin, position allongée/semi-allongée volontaire à jeun depuis 12h ordre des tubes : 1) tube sec ; 2) EDTA veiller à l’étiquetage des documents et tubes
Recueil urinaire volontaire à jeun depuis 12 heures réalisé au CES toilette préalable flacon avec bouchon veiller à l’étiquetage des documents et tube
Traitement pré-analytique et transport Voir ci-dessus
7
III. La phase analytique Chaque biologiste applique les procédures opératoires conformes aux spécifications du fournisseur du DMDIV (directive européenne, marquage CE) ; il procède à la vérification de l’étalonnage dans les conditions décrites par le fournisseur. Il utilise pour ce faire les échantillons de contrôle conseillés par le fabriquant. Si un laboratoire possède plusieurs analyseurs, tous les échantillons Constances doivent être analysés sur le même analyseur. Il est fortement recommandé que les tubes primaires soient utilisés sur les automates du laboratoire. Dans le cas contraire, toutes les dispositions seront prises pour éviter des erreurs d’identification. Les volontaires Constances sont considérés comme des consultants habituels bénéficiant d’un examen périodique de santé. Les échantillons sont traités dans la chaîne analytique du jour, au sein d’une même série.
3.1. Biochimie sanguine En plus de l’aspect du sérum, les analytes suivants sont analysés pour la cohorte Constances (avec la/les méthode(s) acceptée(s) pour Constances, conforme(s) à celle(s) pratiquée(s) dans le cadre de l’EPS) :
- Glucose (en mmol/L) : hexokinase ; glucose oxydase - Créatinine (en μmol/L) pour la créatininémie (et en mmol/L pour la créatininurie) : Raccordée IDMS - ALAT (en U.I./L) : selon la méthode IFCC à 37° C avec phosphate de pyridoxal, privilégier l’étalonnage - Gamma-GT (en U.I./L) : selon la méthode IFCC avec substrat carboxylé, privilégier l’étalonnage - Triglycérides (en mmol/L) : lipase, glycérol kinase, glycérol phosphate oxydase, peroxydase
- Cholestérol total (en mmol/L) : cholestérol estérase, cholestérol oxydase / peroxydase. - C-HDL (en mmol/L) : techniques d’immuno-inhibition, techniques poly anions / accélérateur détergent, techniques à base d’enzymes modifiée par le PEG - C-LDL (en mmol/L) : calculé selon la formule de Friedewald, si TG < 3,75 mmol/L, sinon le C-LDL doit être mesuré par une technique directe
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3.2. Biochimie urinaire La recherche de l’hémoglobine, protéines, glucose, leucocytes et nitrites urinaires est effectuée à l’aide de bandelettes urinaires. La lecture des bandelettes urinaires peut être réalisée de façon manuelle ou à l’aide de lecteur de bandelettes semi-automatique ou automatique. En cas de :
- bandelette positive pour la glucosurie: dosage de glucose urinaire - bandelette positive pour la protéinurie (avec trace, 1+ ou plus) : dosage systématique de
l'albumine, des protéines6 et de la créatinine urinaire puis calcul du ratio (albumine/créatinine).
- Chez les volontaires diabétiques connus, hypertendus connus ou insuffisants rénaux (IR) ayant un débit de filtration glomérulaire < 60 mL/min connus ou diagnostiqués dans le cadre de Constances: dosage de l'albumine, des protéines et de la créatinine urinaire, calcul du ratio.
3.3 Numération Formule Sanguine Pour la Numération Formule Sanguine (NFS), les paramètres suivants sont recueillis : Hématies (en téra/l) Leucocytes (en giga/l) Hémoglobine (en g/l) Neutrophiles (en %) Hématocrite (en %) Eosinophiles (en %) VGM (en fl) Basophiles (en %) Lymphocytes (en %) Monocytes (en %) Plaquettes (en giga/l)
6 Le dosage des protéines urinaires préalable est utile pour connaître le niveau de dilution pour la mesure de
l'albuminurie, la concentration de celle-ci pouvant varier dans un rapport de 1 à 1000. La mesure des protéines est
peu coûteuse, celle de l'albumine plus.
9
PHASE ANALYTIQUE
analyser tous les échantillons Constances avec le même analyseur traiter les prélèvements Constances dans la même série de la chaîne analytique
du jour
Biochimie sanguine, analytes à mesurer glucose créatinine ALAT GGT triglycérides cholestérol total C-HDL C-LDL soit calculé, soit effectué Noter l’aspect du sérum
- Biochimie urinaire
à l’aide de bandelettes urinaires : sang, protéines, glucose, leucocytes et nitrites dosage :
- Glucose + à la BU : dosage de glucose - Protéines + à la BU : dosage d’albumine, protéines et créatinine - Diabète, HTA connus ou IR (même si résultats négatifs à la BU) ou
diagnostiqués à l’occasion de l’examen Constances : dosage d’albumine, protéines et créatinine
NFS, données à recueillir
hématies, Hb, VGM, Hte leucocytes, neutrophiles, éosinophiles, basophiles, lymphocytes, monocytes plaquettes
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IV. La phase post-analytique Pour les CES disposant du système de gestion SAGES, les paramètres biologiques sont extraits de la base SAGES et transmis avec les autres données de l’Examen Périodique de Santé (EPS) à l’équipe Constances.
Les autres CES transmettent les données biologiques selon le même format avec les autres données de l’EPS à l’équipe Constances.
Il faut veiller au respect des unités et au niveau de précision requis.
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V. Le Contrôle Qualité Toute étude épidémiologique nécessite un suivi rigoureux de la qualité et un enregistrement continu des données du Contrôle Qualité. Les procédures de Contrôle Qualité mises en place pour Constances s’intègrent aux procédures réglementaires et à celles exigées pour l’accréditation des Laboratoires de Biologie Médicale. Celles-ci sont placées sous la responsabilité professionnelle du biologiste.
Le Contrôle Qualité en biologie transmis à Constances est constitué du Contrôle interne de qualité (CIQ, autrefois dénommé Contrôle de Qualité permanent) et de l’Evaluation externe de la qualité (EEQ, autrefois dénommé Contrôle Qualité ponctuel).
Les organismes assurant le Contrôle Qualité garantissent un monitorage et une assistance scientifique et technique pour aider les biologistes à résoudre, autant que de besoin, les problèmes techniques.
5.1. Contrôle interne de qualité (CIQ)
Le CIQ permet d’évaluer, pour un laboratoire donné, la performance analytique, la fidélité intermédiaire (reproductibilité intralaboratoire au cours du temps, et la justesse.
Des limites d’acceptabilité ont été établies pour la cohorte Constances, différentes de celles utilisées par les organismes de contrôle qualité afin de répondre aux exigences des travaux de recherche, celles-ci sont présentées en Annexe 4.
5 .1 .1 . Biochimie sanguine et urinaire
Le CIQ en biochimie sanguine et urinaire est mis en œuvre par l’organisme de Contrôle Qualité conventionné avec la CNAMTS. Ce contrôle est effectué tous les jours, au moins une fois par jour, pour deux niveaux de concentration (niveaux 1 et 2) pour la biochimie sanguine et la biochimie urinaire.
Tous les mois, le biologiste envoie à l’organisme de Contrôle Qualité avant le 5 du mois suivant, via le serveur qu’il met à disposition, les résultats cumulés du mois sous forme de nombre de résultats, moyenne et CV. L’organisme de Contrôle Qualité communique au biologiste, le 15 du mois suivant par courriel, les résultats obtenus pour chaque analyte et niveau de concentration : justesse (biais %) et fidélité (coefficient de variation intra-laboratoire). Les traitements statistiques sont établis à partir de l’ensemble des adhérents de l’organisme de Contrôle Qualité et de l’ensemble des laboratoires participants à Constances.
Les valeurs cibles permettant d’évaluer la justesse de chaque laboratoire pour un analyte donné correspondent à la moyenne des résultats obtenus par les participants. Cette moyenne est périodiquement évaluée par rapport aux résultats obtenus par un laboratoire de référence si possible (lorsqu’il existe une méthode de référence).
Un exemple de compte-rendu des résultats est présenté en Annexe 5.
L’organisme de Contrôle Qualité transmet à l’équipe Constances, au plus tard le 20 du mois suivant, la synthèse des résultats transmis aux laboratoires Constances incrémentés chaque mois. Le transfert de ces données se fait via un fichier Excel (Annexes 6 et 7).
L’équipe Constances archive l’ensemble des résultats du Contrôle interne de qualité pour la biochimie sanguine et urinaire.
Ces tableaux sont également transmis aux participants qui recevront un code pour leur permettre d’identifier leur laboratoire.
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5 .1 .2 . Hématologie
Le CIQ en hématologie est mis en œuvre par l’organisme de Contrôle Qualité conventionné avec la CNAMTS. Ce contrôle est effectué tous les jours (au moins une fois par jour) sur 2 niveaux de concentration.
Tous les mois, le biologiste envoie à l’organisme de Contrôle Qualité, avant le 14ème jour du mois suivant, les résultats du CIQ pour chaque analyte et niveau de concentration. Cette saisie se fait par l’intermédiaire du logiciel de l’organisme de contrôle qualité.
L’organisme de Contrôle Qualité communique à chaque biologiste, au 15e jour du mois suivant les résultats pour chaque analyte et niveau de concentration : justesse (biais) et fidélité (coefficient de variation intra-laboratoire). Les valeurs cibles de chaque analyte sont déterminées par l’organisme de contrôle de qualité sur la base de la moyenne des résultats obtenus par les participants par groupes de pairs.
Le biologiste transmet à l’équipe Constances, le 20e jour du mois suivant le compte-rendu envoyé par l’organisme de Contrôle Qualité (Annexe 8) sous forme de fichier .pdf (comparaison par groupes de pairs et historique comparaison par groupes de pairs).
L’équipe Constances archive l’ensemble des résultats du Contrôle Qualité permanent pour l’hématologie après transmission du fichier .pdf par le biologiste.
5.2. Evaluation externe de la qualité (EEQ)
L’évaluation externe de la qualité (EEQ) permet d’évaluer, pour chaque analyte, l’exactitude des résultats de chaque laboratoire et la variabilité inter-laboratoire.
5 .2 .1 . Biochimie sanguine
L’EEQ pour la biochimie sanguine est mise en œuvre par l’organisme de Contrôle Qualité conventionné avec la CNAMTS. Ce contrôle est effectué une fois par mois (sauf au mois d’août) pour deux niveaux de concentration non connus des biologistes.
Les sérums de l’EEQ doivent être insérés dans une série d’analyses Constances.
Le biologiste transmet à l’organisme de Contrôle Qualité avant le 15 du mois les résultats de l’EEQ pour chaque analyte et pour les 2 échantillons.
L’organisme de Contrôle Qualité communique à chaque biologiste, avant le 30 du mois, les résultats de l’EEQ pour chaque analyte et échantillon de contrôle : l’exactitude du laboratoire et le coefficient de variation inter-laboratoire. Les traitements statistiques sont établis à partir des résultats de l’ensemble des participants. Les valeurs cibles de chaque analyte sont déterminées par l’organisme de contrôle de qualité. Un exemple de compte-rendu de résultats est présenté en Annexe 9.
Les limites données correspondent à celles qui ont été définies dans l’annexe 4.
L’organisme de Contrôle Qualité communique à l’équipe Constances chaque mois (avant le 5 du mois suivant), l’ensemble des résultats de l’EEQ envoyés aux biologistes (Annexe 10).
L’équipe Constances archive les résultats de l’EEQ pour la biochimie sanguine.
Ces tableaux sont également transmis aux participants qui recevront un code pour leur permettre d’identifier leur laboratoire.
5 .2 .2 . Biochimie urinaire
Pour l’EEQ, un Contrôle Qualité en biochimie urinaire doit être mis en place dans le courant de l’année 2012.
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5 .2 .3 . Hématologie
L’EEQ est mise en œuvre par l’organisme de Contrôle Qualité conventionné avec la CNAMTS. Ce contrôle est effectué six fois par an pour 2 niveaux de concentration inconnue.
Les sangs de contrôle de l’EEQ sont insérés dans une série d’analyses Constances.
Le biologiste transmet à L’organisme de Contrôle Qualité, avant le 15 du mois, les valeurs de l’EEQ, par analyte et niveau de concentration.
L’organisme de Contrôle Qualité communique à chaque biologiste, avant le 30 du mois, les résultats de l’EEQ pour chaque analyte et niveau de concentration : l’exactitude du laboratoire, le coefficient de variation inter-laboratoire (Annexe 11).
L’organisme de Contrôle Qualité communique à l’équipe Constances, chaque mois (avant le 5 du mois suivant), l’ensemble des résultats de l’EEQ envoyés aux biologistes (Annexe 12).
L’équipe Constances archive les résultats de l’EEQ pour l’hématologie.
5.3. Changement de lots des produits de contrôle qualité (CIQ)
Les lots de produits de contrôle de qualité ont une durée variable (environ 12 à 18 mois pour les sérums de contrôle, environ 3 mois pour les sangs de contrôle). Il revient au biologiste d’anticiper le changement de lot afin d’être en mesure de réaliser avant la mise en service du nouveau lot, la procédure habituelle de recouvrement. Celle-ci est placée sous son contrôle. Un exemple de procédure de recouvrement figure en Annexe 13.
Ces données sont transmises à l’équipe Constances.
5.4 Signalement d’anomalies et monitorage de la qualité
5.4.1 Principe
Il est assuré par le(s) organisme(s) de Contrôle Qualité. Il(s) adresse(nt) régulièrement aux laboratoires les comptes-rendus individuels et de synthèse avec la mention de résultats acceptables ou non, en tenant compte des critères d’acceptabilité définis pour Constances.
Le biologiste prend de sa propre initiative les mesures appropriées pour corriger toute anomalie signalée dans les comptes-rendus de(s) organisme(s) de Contrôle Qualité. Ce(s) dernier(s) assure(nt) une mission de conseil. Ces mesures doivent être conservées et traçables au niveau du laboratoire. Ce point sera contrôlé par les ARE lors de leur visite.
5.4.2 Indicateurs de qualité
Les organismes de Contrôle Qualité fournissent, 2 fois par an, des graphiques et des tableaux de synthèse glissant sur les 12 derniers mois pour les indicateurs suivants :
- justesse (CIQ) Annexe 14
- coefficient de variation intra-laboratoire (CIQ) Annexe 15
- exactitude (EEQ) Annexe 16
- coefficient de variation inter-laboratoire (EEQ) Annexe 17
Les tableaux regroupent les résultats de l’ensemble des laboratoires Constances pour chacun de ces indicateurs. Si l’un des indicateurs est hors des limites acceptables, il sera signalé sur le tableau (sous forme d’astérisque et/ou de surlignage en couleur). Les résultats mensuels de chaque analyte seront reportés, ainsi que les limites hautes et basses d’acceptabilité.
Ces graphiques et tableaux sont préparés pour chaque analyte et niveau de concentration.
14
Il est convenu qu’un résultat isolé hors contrôle constitue une simple alerte. Si le même résultat est hors contrôle deux mois successifs, un avertissement sera adressé par l’organisme de contrôle, si le même phénomène se reproduit trois mois d’affilée l’organisme de contrôle assistera le biologiste dans la mise en place de mesures correctives.
Les organismes de contrôle qualité repèrent les éventuelles anomalies sur ces graphiques et tableaux de synthèse. Ils se réunissent deux fois par an (en mars et septembre) pour en rendre compte à l’équipe Constances, en présence d’un représentant des biologistes.
Archivage des données : les organismes de contrôle de qualité transmettront par voie électronique la synthèse annuelle (graphiques et tableaux) des indicateurs de qualité à l’équipe Constances.
5.5 Consultation des résultats de contrôle de qualité (CR individuels)
Les résultats de chaque laboratoire sont adressés par les organismes de contrôle de qualité par courriel chaque mois aux dates indiquées précédemment. Ces données sont également consultables sur le site WEB de l’organisme.
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Organisme du contrôle qualité
is
ynthèses des résultat
t
le 15 du mois suivant
ochimie
)
re : 1 mois
é
ts
é
ts
16
Contrôle de qualité (2/2)
Evaluation externe de la qualité (EEQ) en Biochimie sanguine :
Effectué une fois par mois (sauf en août) Pour deux niveaux de concentration (non connus par les biologistes)
Circuit de l’information pour les données de l’EEQ en biochimie sanguine
Contrôle de l’EEQ en Hématologie :
Effectué six fois par an Sur deux niveaux de concentration (non connus par les biologistes)
Circuit de l’information pour les données de l’EEQ en hématologie
Laboratoire
Équipe Constances Organisme du contrôle qualité
Résultats du contrôle ponctuel
Résultats du contrôle ponctuel
L’ensemble des résultats des labos
Constances
le 15 du mois
Avant le 30 du mois
Chaque mois
Laboratoire
Équipe Constances Organisme du contrôle qualité
Résultats du contrôle ponctuel
Résultats du contrôle ponctuel
L’ensemble des résultats des labos
Constances
le 15 du mois
Avant le 30 du mois
Chaque mois
Laboratoire
Équipe Constances Organisme du contrôle qualité
Résultats du contrôle ponctuel
Résultats du contrôle ponctuel
L’ensemble des résultats des labos
Constances
le 15 du mois
Avant le 30 du mois
Chaque mois
Laboratoire
Équipe Constances Organisme du contrôle qualité
Résultats du contrôle ponctuel
Résultats du contrôle ponctuel
L’ensemble des résultats des labos
Constances
le 15 du mois
Avant le 30 du mois
Chaque mois
17
VI. Traçabilité 6.1 Traçabilité des lots de matériel de prélèvement/recueil
Tout changement de lot du matériel de prélèvement et de recueil est tracé pour Constances. Ces informations doivent être colligées au niveau du laboratoire. Leur recueil est contrôlé lors de la visite des ARE (Annexe 18).
Une façon de garantir une traçabilité de ce matériel est de changer de lot au démarrage d’une journée.
La commande de lots sur une période longue (garantie fournisseur de pourvoir le même lot sur un ou deux ans) permet également de mieux gérer la traçabilité.
6.2 Traçabilité du système analytique et du contrôle qualité
Pour Constances, une liste d’analytes est identifiée. Pour la traçabilité du système analytique, un seul analyseur par analyte est référencé par laboratoire.
Les informations pratiques sur le système analytique doivent être renseignées régulièrement sur le site Internet de Constances (www.constances.fr), avec un système sécurisé et personnalisé pour chaque laboratoire. Cela concerne l’analyseur, la méthode, l’étalonnage et les changements de lot de contrôle qualité.
Pour l’analyseur, en plus des informations à fournir sur le site Internet de Constances, les informations suivantes sont conservées au laboratoire (elles sont vérifiées par les ARE) :
- maintenance de l’analyseur
- entretien, selon les préconisations du constructeur
- cahier d’intervention consignant les réparations et actes SAV : date, symptômes, correction, exécutant, rapport joint, tous les évènements liés à des changements de matériels (câbles, etc.)
18
VII. Le recouvrement Le recouvrement doit être effectué à chaque changement de :
- lot de sérum/ sang de contrôle permanent (voir § 5.3)
- laboratoire prestataire de service (seuls les CES sous-traitant la biologie sont concernés)
Le recouvrement concernant le laboratoire prestataire de service doit être effectué avec les mêmes lots de préparation de contrôle qualité, pendant une période de 1 mois. Toutes ces informations doivent être transmises à l’équipe Constances.
19
VIII. Changement de système analytique : les procédures de comparaison de méthodes
8.1. Objectifs Les procédures de comparaison de méthodes concernent l’étude de la concordance entre des mesures répétées :
- entre deux analyseurs différents ou systèmes analytiques
- entre deux méthodes (techniques) sur le même analyseur
- entre deux lots d’étalonnage sur le même analyseur
Avant de débuter la comparaison de méthodes, il faut s’assurer que les deux systèmes analytiques fonctionnent correctement et familiariser les opérateurs avec le nouveau système analytique.
8. 2. Réalisation d’une procédure de comparaison de méthodes
Le biologiste sélectionne au moins 30 échantillons de patients couvrant de façon homogène l’étendue du domaine physiopathologique rencontré.
Ces échantillons sont analysés (si possible) simultanément sur les deux systèmes analytiques (analyseur et/ou méthode) ou lots d’étalonnage.
Tous les échantillons testés sont pris en compte dans l’analyse statistique. Toute anomalie de fonctionnement liée à l’opérateur ou à un échantillon doit être traçable au niveau du laboratoire.
8. 3. Analyse des résultats d’une procédure de comparaison de méthodes
Les résultats obtenus sur les deux analyseurs, méthodes ou lots d’étalonnage sont analysés de préférence à l’aide d’un logiciel spécialisé de traitement de comparaison de méthodes7.
Il est nécessaire que les valeurs mesurées soient exprimées dans la même unité. Le cas échéant, il faut opérer la conversion de l’une des deux séries de résultats.
Le principe de la procédure de comparaison de méthodes comprend les représentations graphiques suivantes :
1) Diagramme de dispersion et droite de régression : représentation graphique d’un nuage de points associé aux n couples de mesures observées. Les résultats de la nouvelle méthode (nouveau système analytique, technique ou mode de calibration) sont reportés en ordonnée (y) et ceux de l’ancienne méthode en abscisse (x). Chaque échantillon est représenté par un point.
2) Représentation graphique de la concordance entre les deux méthodes
Un guide d’utilisation et d’interprétation des résultats est fourni en Annexe 18.
L’ensemble des résultats de la comparaison de méthodes doit être transmis à l’équipe Constances. Ce document doit également comprendre des éléments de traçabilité dont le nom du laboratoire, le nom de l’opérateur, l’identification de l’ancien et du nouvel analyseur, la méthode, le lot d’étalonnage et la période de comparaison concernée (Annexe 19).
7 Un certain nombre de logiciels permettent de réaliser ces comparaisons de méthodes (ex : Statispro, Metcalc, …). Le logiciel Excel ne permet pas de réaliser les analyses statistiques appropriées (régression de Passing-Bablok).
20
CHANGEMENT DU SYSTEME ANALYTIQUE
Procédures de comparaison de méthodes
Réalisation d’une procédure de comparaison de méthodes
sélection d’au moins 30 échantillons de patients couvrant de façon homogène l’étendue du domaine physiopathologique
Analyse des résultats d’une procédure de comparaison de méthodes
principe de la procédure : Diagramme de dispersion, Graphique de Bland-Altman et calcul de la droite de régression de Passing-Bablock
utilisation de logiciel adapté pour ces analyses transmission des résultats à l’équipe Constances
21
IX. Le monitorage par les Attachés de Recherche Epidémiologiques
Le protocole biologie est monitoré par des Attachés de Recherche Epidémiologiques (ARE), comme l’est l’ensemble des examens pratiqués dans Constances. L’objectif est de vérifier l’adéquation entre la pratique dans le laboratoire de biologie médicale et le protocole actuel. La liste des points vérifiés se trouve en Annexe 18.
Leur rôle consiste :
- A pratiquer des points de contrôle lors de la réalisation du bilan biologique comprenant : le prélèvement sanguin, le recueil des urines, le traitement pré-analytique, le transport le cas échéant, la validation technique, le contrôle qualité et les procédures de recouvrement et de comparaison de systèmes analytiques.
- Pour chaque aspect, l’ARE vérifie la conformité de l’élément avec le protocole. Enfin si le point n’a pu être vérifié lors de sa visite, l’ARE précise les raisons de cette non vérification et à quelle date ce point doit être vérifié.
- A faire l’état des lieux du matériel dédié à la phase pré-analytique et analytique des examens biologiques : documentation, maintenance, traçabilité.
- A faire l’état des lieux de la documentation concernant la formation du personnel afin d’établir un statut de formation professionnelle du personnel et de formation relative à Constances.
L’équipe Constances adresse les comptes-rendus des visites des ARE aux laboratoires, ainsi qu’aux médecins chefs des CES.
22
X. Archivage des documents Les documents concernant Constances sont archivés pour toute la durée de la cohorte. Les documents suivants doivent être consultables au laboratoire :
- Annexes 3 : fiches de correspondance journalière des prélèvements et recueils pour constances
- documentation du système analytique (manuel utilisateur, fiches techniques, modes opératoires) : durée légale uniquement
Les documents à transmettre à l’équipe Constances pour archivage sont :
- l’ensemble des résultats du CIQ hématologie sous forme de fichier PDF. Les autres données de CIQ et EEQ seront transmises directement par l’organisme de contrôle qualité par voie électronique.
- l’ensemble des résultats des procédures de recouvrement
- les informations concernant la traçabilité (via le site Internet)
- les documents des comparaisons de méthode
- les extractions de résultats SAGES (ou système informatique similaire)
- les comptes-rendus des ARE
23
XI. Références 1. Sacks DB et al. Guidelines and recommendations for laboratory analysis in the diagnosis and management of diabetes mellitus Clin Chem 2011; 57: e1-e47 2. Protocole de validation de techniques, Ann Biol Clin 1986; 44 : 686-745 3. Analyses de biologie médicale : spécifications et normes d’acceptabilité à l’usage de la validation de techniques : Ann Biol Clin 1999 ; 57 : 685-95 4. Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples; 2nd Edition CLSI Document EP9-A2, Wayne, PA, 2002; 22 (19): 56 5. Recommandations pour l'accréditation des laboratoires de biologie médicale (Hors Série ABC volume 1). 2011. 6. Guide technique d’accréditation de vérification (portée A)/ validation (portée B) des méthodes en biologie médicale. SH-GTA 04. Révision 00 – avril 2011
Protocole Opératoire Standardisé, validé pour la généralisation (2012)
24
XII. Annexes
Annexe 1 : Liste des laboratoires Constances .................................................................................................................... I
Annexe 2 : Charte de confidentialité de Constances ...................................................................................................... II
Annexe 3.1 : Fiche de correspondance journalière des prélèvements et recueils pour Constances (avec transport) – recueil sanguin ........................................................................................................... IV
Annexe 3.2 : Fiche de correspondance journalière des prélèvements et recueils pour Constances (avec transport) – recueil urinaire ............................................................................................................ V
Annexe 3.3 : Fiche de correspondance journalière des prélèvements et recueils pour Constances (sans transport) – recueil sanguin ........................................................................................................... VI
Annexe 3.4 : Fiche de correspondance journalière des prélèvements et recueils pour Constances (sans transport) – recueil urinaire .......................................................................................................... VII
Annexe 4 : Critères d’acceptabilité de Constances ......................................................................................................VIII
Annexe 5 : Exemple de compte-rendu des résultats des CIQ en biochimie sanguine et urinaire ........................ IX
Annexe 6 : Liste des analytes des CIQ et EEQ adressés par l’organisme de Contrôle Qualité à l’équipe Constances .................................................................................................................................... X
Annexe 7 : Exemple de tableau de synthèse de la justesse .......................................................................................... XI
Annexe 8 : Exemple de compte-rendu Eurocell des résultats des CIQ en hématologie ........................................ XII
Annexe 9 : Exemple de compte-rendu des résultats des EEQ en biochimie sanguine .......................................... XIII
Annexe 10 : Exemple de tableau de synthèse ................................................................................................................ XIV
Annexe 11 : Exemple de compte-rendu des résultats des EEQ en hématologie ...................................................... XV
Annexe 12 : Exemple de tableau de synthèse ................................................................................................................ XVI
Annexe 13 : Protocole de recouvrement : changement de lot de sérum de contrôle ........................................... XVII
Annexe 14 : Exemple de tableau de synthèse et graphique pour la justesse (CIQ) .............................................. XVIII
Annexe 15 : Exemple de tableau de synthèse et graphique pour le CV intra-laboratoire (CIQ) ........................... XX
Annexe 16 : Exemple de tableau de synthèse et graphique pour l’exactitude (EEQ) ............................................. XXI
Annexe 17: Exemple de tableau de synthèse et graphique pour les CV interlaboratoires CONSTANCES (EEQ) ............................................................................................................................ XXIII
Annexe 18 : Monitoring par les ARE .............................................................................................................................. XXIV
Annexe 19 : Guide d’utilisation et d’interprétation des résultats de la comparaison de méthodes ................ XXVI
Annexe A : Modèle de feuille de résultats .................................................................................................................... XXX
I
Annexe 1 : Liste des laboratoires Constances
Liste des CES participants à Constances Listes des Laboratoires Bordeaux (avec l’antenne de Cenon) CES Bordeaux Lille CES Lille Marseille CES Marseille Vandœuvre-lès-Nancy (avec l’antenne de Longwy)
CES Vandœuvre-lès-Nancy
Orléans CES Orléans Paris CPAM Paris CPAM Paris IPC Paris IPC Pau CES Pau Poitiers CES Poitiers Rennes CES Rennes Saint-Brieuc CES Saint-Brieuc Saint-Nazaire CES Saint-Nazaire Toulouse CES Agen-Boe Tours CES La riche Lyon Labo de biologie et pathologie médicale
Saint-Chamond Nîmes Labo Chaperon-Tarbouriech
Avignon Angoulême CES Angoulême
II
Annexe 2 : Charte de confidentialité de Constances
ASSURANCE DE QUALITE DANS LE CADRE DU SUIVI BIOLOGIQUE DE LA COHORTE CONSTANCES
L’objet de cette charte de confidentialité est de veiller au respect de la confidentialité et de la déontologie liées à la mise en place d’un protocole d’assurance de la qualité, notamment à l’utilisation de données issues des contrôles de qualité d’analyses biologiques réalisées dans le cadre de la cohorte Constances. Elle s’applique également à l’ensemble du suivi des examens biologiques.
Chaque partie, le biologiste concerné et l’investigateur du projet Constances, s’engagent à respecter ou à faire respecter les points présentés ci-après et/ou à donner les autorisations voulues aux organismes compétents afin de concourir à la parfaite réussite du projet scientifique :
1. Le biologiste s’engage à respecter le protocole « Biologie dans Constances – protocole d’Assurance Qualité ».
2. Le biologiste participant au projet Constances accepte que les données de Contrôle Qualité de son LBM soient traitées et utilisées à des fins scientifiques dans le cadre de la cohorte Constances.
3. Le biologiste autorise les organismes de Contrôle Qualité à communiquer les résultats des contrôles de qualité de son laboratoire à l’équipe Constances.
4. Le biologiste accepte de communiquer les résultats de ses contrôles qualité permanents à l’équipe Constances.
5. L’équipe Constances s’engage à n’utiliser et/ou à publier ces données que dans le cadre d’étude de recherche sous une forme anonyme.
6. Le biologiste et l’équipe coordinatrice Constances conviennent d’un commun accord que les seules données issues des contrôles de qualité externes ou d’un traitement particulier de celles-ci ne sauraient conduire à porter un jugement de valeur sur les résultats des examens de biologie médicale produits au sein du laboratoire.
7. Le biologiste et l’équipe coordinatrice Constances conviennent que, dans le cas où une anomalie ou un résultat inexpliqué est mis en évidence au cours du traitement des données issues des contrôles de qualité externes ou de toute procédure par ladite équipe ou les organismes de contrôle qualité, l’équipe coordinatrice Constances ou les organismes de contrôle qualité avertiront directement le biologiste afin de procéder à une analyse de la situation pour en déterminer les causes avant d’en tirer des conclusions.
Les mesures correctives éventuelles sont placées sous la responsabilité du biologiste.
8. Le représentant du groupe Biologie et l’investigateur du projet Constances sont chargés de veiller au respect et à l’application de cette charte.
III
9. La présente charte contient tous les engagements des parties signataires, l’une à l’égard de l’autre.
Les parties signataires s’engagent à tenter de résoudre à l’amiable les différents pouvant naître d’une défaillance constatée par l’une ou l’autre partie.
A défaut d’accord amiable, le litige pourra être soumis par la partie la plus diligente à une procédure d’arbitrage.
Nom du LBM Unité INSERM
Adresse Adresse
Le biologiste L’investigateur Constances
Nom Nom
Prénom Prénom
A le A le
Document fait en 3 exemplaires : un pour le biologiste, un pour l’ organisme de Contrôle Qualité et un pour l’investigateur Constances.
IV
Annexe 3.1 : Fiche de correspondance journalière des prélèvements et recueils pour Constances (avec transport) – recueil sanguin
Date : Conformité de température (lors du recueil) : oui non Conformité de température (lors du transport) : oui non Conformité de température (au laboratoire) : oui non 2 tableaux sang et urines (exemple de document)
Etiquette n° SAGES ou SI* similaire
Etiquette n° Constances
Etiquette n° Labo Heure de prélèvement
Heure de centrifugation
Heure d’analyse au Labo
Conformité délai centrifugation
Conformité délai d’analyse
oui non
oui non
oui non
oui non
oui non
oui non
oui non
oui non
oui non
oui non
* SI = système informatique Document à conserver au laboratoire, en faire une copie au CES
V
Annexe 3.2 : Fiche de correspondance journalière des prélèvements et recueils pour Constances (avec transport) – recueil urinaire
Date : Conformité de température (lors du recueil) : oui non Conformité de température (lors du transport) : oui non Conformité de température (au laboratoire) : oui non
Etiquette n° SAGES ou SI* similaire
Etiquette n° Constances Etiquette n° Labo Heure de recueil des urines
Heure d’analyse au Labo Conformité délais d’analyse
oui non
oui non
oui non
* SI = système informatique
Document à conserver au laboratoire, en faire une copie au CES
VI
Annexe 3.3 : Fiche de correspondance journalière des prélèvements et recueils pour Constances (sans transport) – recueil sanguin
Date :
Conformité de température (lors du recueil et au laboratoire) : oui non
Etiquette n° SAGES ou SI* similaire
Etiquette n° Constances
Etiquette n° Labo Heure de prélèvement sanguin
Heure de centrifugation
Heure d’analyse au Labo
Conformité délais
oui non
oui non
oui non
oui non
* SI = système informatique
Document à conserver au laboratoire
VII
Annexe 3.4 : Fiche de correspondance journalière des prélèvements et recueils pour Constances (sans transport) – recueil urinaire
Date :
Conformité de température (lors du recueil et au laboratoire) : oui non
Etiquette n° SAGES ou SI* similaire
Etiquette n° Constances Etiquette n° Labo Heure de recueil des urines
Heure d’analyse au Labo Conformité délais
oui non
oui non
oui non
oui non
* SI = système informatique
Document à conserver au laboratoire
VIII
Annexe 4 : Critères d’acceptabilité de Constances (Valeurs physiologiques et pathologiques)
Analyte Coefficient de variation intra lab (%)
Justesse (%) Coefficient de variation inter lab (%)
Exactitude (%)
Biochimie sanguine ALAT 5.0 12.0 8.0 15.0C-HDL 5.0 12.0 8.0 15.0Cholestérol total 3.0 6.0 5.0 10.0C-LDL 5.0 12.0 8.0 15.0Créatinine 5.0 8.0 6.0 15.0Créatininurie 5.0 8.0 6.0 15.0GGT 5.0 12.0 8.0 15.0Glucosurie 4.0 8.0 6.0 15.0Glycémie 3.0 6.0 5.0 10.0Albuminurie 6.0 12.0 8.0 15.0Protéinurie 7.0 12.0 10.0 15.0Triglycérides 4.0 10.0 6.0 15.0
HémogrammeHématies 3.0 7.0 5.0 10.0Hématocrite 3.0 6.0 5.0 9.0Hémoglobine 3.0 6.0 5.0 9.0Leucocytes 5.0 8.0 7.0 13.0Plaquettes 4.0 9.0 8.0 13.0VGM 3.0 6.0 5.0 9.0
IX
Annexe
5 : Exempbiochim(docum
le de comie sangment Asq
mpte-reguine et qualab)
endu desurinaire
s résulta
ts des CCIQ en
X
Annexe 6 : Liste des analytes des CIQ et EEQ adressés par l’organisme de Contrôle Qualité à l’équipe Constances
(cette annexe a été établie en collaboration avec Asqualab)
I – Liste des analytes concernés par le CQ Pour la biochimie sanguine :
- Cholestérol total - Cholestérol HDL - Cholestérol LDL (calculé ou dosé) - Gamma G. T. - ALAT - Créatinine - Glucose - Triglycérides
Pour la biochimie urinaire :
- Glucose urinaire - Protéines totales urinaires - Créatininurie - Albuminurie
Pour l’hématologie : - Hématies - Hémoglobine - Hématocrite - CGMHb - TGMHb - VGM - Leucocytes - Plaquettes
II Définitions TTC (Toutes Techniques Confondues) : Il s’agit de l’ensemble des participants au Contrôle Qualité.. Par technique : Les résultats sont calculés par technique qui correspond soit à une technique (dans ce cas, le code technique est codé sur 2 caractères) soit à un appareil (dans ce cas, le code technique est codé sur 3 caractères). Justesse : La justesse correspond au biais. Elle se calcule comme le rapport entre la moyenne du laboratoire et la moyenne de tous les laboratoires participant au Contrôle Qualité (TTC) ou la moyenne des laboratoires utilisant une même technique ou un même appareil (par technique). Il s’agit d’un indicateur du Contrôle Qualité permanent. Coefficient de Variation intra-laboratoire : Le coefficient de variation intra-laboratoire est un indicateur de la reproductibilité dans le Contrôle Qualité permanent. Il se calcule comme le rapport entre l’écart-type du laboratoire et la moyenne du laboratoire. Exactitude : Elle se calcule comme le rapport entre la valeur du laboratoire et la moyenne de tous les laboratoires participant au Contrôle Qualité (TTC) ou la moyenne des laboratoires utilisant une même technique ou un même appareil (par technique). Il s’agit d’un indicateur du Contrôle Qualité ponctuel. Coefficient de Variation inter-laboratoire : Le coefficient de variation inter-laboratoire est un indicateur qui permet de voir la variabilité inter-laboratoire dans le contrôle de qualité ponctuel. Il se calcule comme le rapport entre l’écart-type inter-laboratoire et la moyenne inter-laboratoire.
XI
Annexe 7 : Exemple de tableau de synthèse de la justesse (récapitulatif mensuel du CIQ)
LA = 6%
Exa
men
Ech
antil
lon
Labo
Prin
cipe
te
chni
que
Fou
rnis
seur
te
chni
que
Mod
èle
appa
reil
Fou
rnis
seur
ap
pare
il
janv
-10
févr
-10
mar
s-10
Min
.
Max
.
Glucose OB labo 01 … … … … 105% 100% 102% 100% 105%
Glucose OB labo 02 … … … … 102% 103% 103% 102% 103%
Glucose OB labo 04 … … … … 102% 102% 103% 102% 103%
Glucose OB labo 05 … … … … 102% 102% 103% 102% 103%
Glucose OB labo 06 … … … … 103% 102% 103% 102% 103%
Glucose OB labo 08 … … … … 105% 105% 106% 105% 106%
Glucose OB labo 09 … … … … 102% 102% 102% 102% 102%
Glucose OB labo 10 … … … … 103% 105% 103% 103% 105%
Glucose OB labo 13 … … … … 105% 105% 103% 103% 105%
Glucose OB labo 16 … … … … 100% 103% 102% 100% 103%
Glucose OB labo 19 … … … … 102% 102% 103% 102% 103%
Glucose OB labo 20 … … … … 103% 102% 103% 102% 103%
Glucose OB labo 23 … … … … 105% 106% 104% 104% 106%
Glucose OB labo 24 … … … … 98% 98% 100% 98% 100%
Glucose OB labo 26 … … … … 98% 98% 98% 98% 98%
Glucose OB labo 30 … … … … 103% 103% 103% 103% 103%
Glucose OB labo 32 … … … … - - - 98% 106%
A
Annexe 88 : ExemplCIQ en (docum
e de comhémato
ment Euro
mpte-renlogie ocell)
ndu Euroocell dess résulta
X
ts des
XII
Ann
nexe 9 : Exebio(do
emple deochimie socument
e comptsanguinet Asquala
e-rendue ab)
des résuultats dees EEQ een
XIII
XIV
Annexe 10 : Exemple de tableau de synthèse (récapitulatif mensuel de l’EEQ en Biochimie)
LA = 7%
Exa
men
Labo
s
Prin
cipe
te
chni
que
Fou
rnis
seur
te
chni
que
Mod
èle
appa
reil
Fou
rnis
seur
ap
pare
il
1 (0
1-20
10)
2 (0
1-20
10)
3 (0
2-20
10)
4 (0
2-20
10)
5 (0
3-20
10)
6 (0
3-20
10)
Min
imu
m
Max
imu
m
Glucose Labo 01 … … … … 104 104 104 98 101 101 98 104 Glucose Labo 02 … … … … 100 99 97 101 100 105 97 105 Glucose Labo 04 … … … … 98 98 97 97 102 101 97 102 Glucose Labo 05 … … … … 100 97 105 98 103 101 97 105 Glucose Labo 06 … … … … 103 99 105 100 99 99 99 105 Glucose Labo 08 … … … … 102 102 106 100 85 107 85 107 Glucose Labo 09 … … … … 100 99 97 96 97 102 96 102 Glucose Labo 10 … … … … 98 101 107 104 102 104 98 107 Glucose Labo 14 … … … … 98 98 100 101 100 101 98 101 Glucose Labo 18 … … … … 100 101 100 99 99 101 Glucose Labo 22 … … … … 100 99 93 96 104 99 93 104 Glucose Labo 23 … … … … 100 100 103 103 102 106 100 106 Glucose Labo 27 … … … … 104 107 105 99 103 100 99 107 Glucose Labo 30 … … … … 100 102 90 97 100 103 90 103 Glucose Labo 33 … … … … 100 98 97 94 98 99 94 100 Glucose Labo 37 … … … … 102 100 100 100 102 102 100 102 Glucose Labo 40 … … … … 96 98 98 98 98 100 96 100
Les cases surlignées en jaune sont hors limite d’acceptabilité
Annexe
11 : Exemphémat
le de coologie
mpte-reendu dess résultats des E
XV
EQ en
V
XVI
Annexe 12 : Exemple de tableau de synthèse (récapitulatif mensuel de l’EEQ en Hématologie)
LA = 10%
Analyse
Code labo.
Code tech.
Principe tech.
Fournisseur tech.
Code app.
Nom app.
Fournisseur app.
HM1201
HM1202
HM1203
HM1204
Minim
um
Maxim
um
Hématies 601A AD … … NGD … … 99,3 100 … … 99,3 100
Hématies 602A SI … … NL3 … … 100 100,6 … … 100 100,6
Hématies 603A AB … … NA7 … … 103,3 103,6 … … 103,3 103,6
Hématies 606A BE … … NC9 … … 100,3 100,6 … … 100,3 100,6
Hématies 607A AD … … NGB … … 99 102 … … 99 102
Hématies 610A RO … … NK4 … … 104,9 102,2 … … 102,2 104,9
Hématies 611A AD … … NGD … … 99,3 101,2 … … 99,3 101,2
Hématies 614A RO … … NK4 … … 102,3 100,2 … … 100,2 102,3
Hématies 614B RO … … NK3 … … 100 99 … … 99 100
Hématies 618A BE … … NC6 … … 99,3 99,8 … … 99,3 99,8
Hématies 621A BE … … NC8 … … 97 98,4 … … 97 98,4
Hématies 629A BE … … NC8 … … 96,7 97,4 … … 96,7 97,4
Hématies 633A AD … … NGD … … 98,4 103,2 … … 98,4 103,2
Hématies 639A RO … … NK4 … … 101,6 101,6 … … 101,6 101,6
Hématies 643A AB … … XXX … … 103,3 106,6 … … 103,3 106,6
Hématies 664A AD … … NG7 … … 101,6 104,2 … … 101,6 104,2
Hématies 678a SY … … HK8 … … 102,6 100,4 … … 100,4 102,6
Hématies 678B SY … … HK7 … … 101 102,2 … … 101 102,2
Annexe
1. Procédséries dantérieu
2. A l’issuelimites d
- si les
- si les
- si les l’an
Et adresser
3. Dès réccelles dles mes
4. Par la spremier
13 :
Proc
er à la mesudifférentes, durement.
e de cette péde validité d
résultat son
résultat son
résultat sonntériorité
ces 20 prem
ception des cdes autres pasures correc
uite, les moyrs mois d’uti
RésuLimite
Protocsérum
Ccédure à su
ure des consdu nouveau l
ériode, calcues résultats
t compris da
t compris da
t compris en
mières valeur
comptes-renarticipants ettives corresp
yennes et leslisation du n
Fin de la période(validatio
ultats inférieurs aux es Acceptables
ole de rede cont
Contrôle duivre en cas
(Pério
tituants à colot d’échanti
uler la moyepropres au f
ans l’interval
ans l’interval
ntre +/- 2 ET
rs au centre
ndus fournist les écarts-tpondants so
s écarts-typenouveau lot d
LABORA
Analyser au m20 séries diff
nouvel éch
Message inDéterminer de
validation p(moyenne, é
e probatoireon)
ecouvrerôle
de Qualité s de changode proba
ontrôler, sur illons de con
nne et l’écarfonctionnem
lle m+/- 2 ET
lle m+/- 3 ET
T et +/- 3 ET
de calcul As
s par Asqualatypes compa
ont programm
es du laborad’échantillon
ATOIRE
moins dans férentes le hantillon
ndividuel:es limites de provisoireécart-type)
Actions co(remédier a
ment : c
Permanengement de toire)
une périodentrôle en par
rt type des vment du labo
T ----------
T ----------
T de la moye
squalab.
ab, les moyearés aux normées.
atoire sont acns de contrô
orrectives nécessaaux dysfonctionnem
Résultats supéLimites Accept
changem
t lot de con
e d’environ 1rallèle avec c
aleurs obtenoratoire en c
---------- v
---------- n
enne ----- é
ennes obtenumes en vigu
ctualisés chaôle pour ajus
iresments)
Centre de ASQUA
Traitement des-Par tech
- Toutes tec
érieurs aux tables
ment de l
ntrôle
1 mois, si poscelui utilisé
nues pour éthoisissant :
valider
ne pas valide
évaluer par ra
ues sont comueur. En cas
aque mois pster les limite
calcul ALAB
s dossiersnique
chniques
XVII
lot de
ssible 20
tablir les
er
apport à
mparées à d’anomalie,
pendant les es.
I
XVIII
Annexe 14 : Exemple de tableau de synthèse et graphique pour la justesse (CIQ)
LA = 6%
Ana
lyse
Sér
um
App
Lab
o
Prin
cipe
tech
.
Fou
rnis
seur
te
ch.
Mod
èle
app.
Fou
rnis
seur
ap
p.
janv
-10
févr
-10
mar
s-10
avr-
10
mai
-10
juin
-10
juil-
10
août
-10
sept
-10
oct-
10
nov-
10
déc-
10
Min
.
Max
.
Glu
cose
OB
Konelab 60
labo 01 ... … … …
105% 100% 102% 102% 102% 103% 100% 103% 103% 102% 102% - 100% 105%
Architect C8000
labo 02 ... … … …
102% 103% 103% 102% 103% 103% 100% - 93% 98% 98% 100% 93% 103%
AU 400 labo 04 ... … … … 102% 102% 103% 102% 100% 102% 100% 100% - 100% - - 100% 103%
Konelab 60
labo 05 ... … … …
102% 102% 103% 102% 102% 102% 100% - 100% 100% 100% 102% 100% 103%
Konelab 60
labo 06 ... … … …
103% 102% 103% 102% 101% 102% 100% 100% 100% 100% 100% 102% 100% 103%
Advia 1200
labo 08 ... … … …
105% 105% 106% 107% 107% 107% 110% 103% 100% 100% 102% 100% 100% 110%
AU 640 labo 09 ... … … … 102% 102% 102% 102% 102% 102% 103% 103% 103% 102% 100% 100% 100% 103%
Integra 400
labo 10 ... … … …
103% 105% 103% 100% 100% 100% - 98% - - - - 98% 105%
Konelab 30
labo 13 ... … … …
105% 105% 103% 102% 98% 98% 100% 100% - 100% - - 98% 105%
AU 640 labo 16 ... … … … 100% 103% 102% 102% 102% 102% 102% 102% 100% 100% 102% 102% 100% 103%
AU 640 labo 19 ... … … … 102% 102% 103% 102% 102% 98% 100% 102% 100% 98% 98% 98% 98% 103%
AU 480 labo 20 ... … … … 103% 102% 103% 103% 102% 105% 105% 103% 102% 102% 103% 103% 102% 105%
AU 400 labo 23 ... … … … 105% 106% 104% 106% 107% 105% 106% 106% 106% 104% 103% 105% 103% 107%
Architect C8000
labo 24 ... … … …
98% 98% 100% 98% 98% 102% 98% - 98% 100% 100% 103% 98% 103%
AU 400 labo 26 ... … … … 98% 98% 98% 100% 100% 98% 100% 100% 98% 100% 97% 93% 93% 100%
AU 400 labo 30 ... … … … 103% 103% 103% 102% 102% 102% 102% 102% 102% 100% 100% 100% 100% 103%
Integra 400
labo 32 ... … … …
- - - - - - - - - - - 98% 98% 98%
Les cases surlignées en jaune sont hors limite d’acceptabilité
XIX
X
Annexe
Ana
lyse
Labo
Glu
cose
601A 602A 603A 606A 607A 610A 611A 614A 618A 621A 629A 629A 633A 639A 643A 655A 664A 678A
15 :
Cod
e te
ch.
Prin
cipe
tech
.
HN … 27 … 26 … HN … HN … HU … 26 … 2B … HN … 26 … 26 … 27 … 26 … 26 … 27 … 26 … 26 … 2B …
ExempCV intr
Fou
rnis
seur
tech
.
Cod
e ap
p.
… DBM … DZH … DER … DBM … DBM … DTL … DES … DQP … DBL … DES … DES … DZG … DEP … DER … DZH … DER … DER … DQP Les cases su
le de tabra-labor
LA
Nom
app
.
Fou
rnis
seur
app
.
janv
10
… … 2,… … 0,… … 0,… … 1,… … 1,… … 1,… … 1,… … 1,… … 1,… … 2,… … 1,… … … … 1,… … 1,… … 3,… … 1,… … 1,… …
urlignées en j
bleau deratoire (C
A = 3%
janv
-10
févr
-10
mar
s-10
,1 1,4 2,4,8 1,7 2,7,9 0,9 0,9,3 1,4 1,5,0 1,8 1,1,9 2,1 1,7,9 1,8 1,9,8 0,9 2,7,8 0,9 0,9,2 1,0 1,1,1 2,0 1,6 ,8 2,0 0,9,3 3,0 1,8,1 1,9 1,7,7 2,9 2,2,0 1,4 1,3 jaune sont ho
e synthèCIQ)
%
avr-
10
mai
-10
juin
-10
2,1 2,2 1,82,4 0,8 1,00,9 0,9 1,91,0 1,8 1,01,0 1,0 0,51,4 0,9 1,42,5 1,7 1,50,9 0,9 0,91,8 0,9 0,90,8 1,6 1,01,0 1,3
1,1,9 1,1 1,31,6 1,1 1,31,5 0,9 3,31,2 1,4 1,91,1 1,0 1,0
ors limite d’a
se et gra
juin
10
juil-
10
août
-10
8 2,3 1,9 0 1,3 9 1,8 1,8 0 1,1 5 1,2 1,3 4 2,1 2,7 5 2,1 2,0 9 1,1 9 0,9 1,9 0 1,3 1,2 2
1 1,1 0,9 23 1,3 1,3 23 2,2 1,3 3 2,1 9 2,2 1,7 0 1,2 1,0
acceptabilité
aphique
sept
-10
oct-
10
nov-
10
1,9 1,8 1,51,8 1,7 2,2
2,8 1,6 1,4 1,01,4 1,0 2,11,6 1,8 1,61,3 1,8 1,5
0,0
2,8 1,6 1,5
2,2 2,0 1,32,4 1,1 1,3 0,11,0 2,2 2,31,4 1,9 2,61,6 1,4 0,8
XX
pour le
déc-
10
Min
imum
5 1,4 22 2,1 0,8 2
0,9 20 1,0 1,0 1
2,0 0,5 26 2,5 0,9 25 2,2 1,3 2
0,9 2 0,0 1
5 1,1 0,8 2 1,0 2
3 1,1 0,9 2 0,9 2
0,1 0,1 33 0,6 0,6 36 1,8 1,2 28 1,1 0,8 1
1,8 1,8 1
X
Max
imum
2,42,72,81,82,12,72,52,71,92,82,02,22,43,03,32,91,61,8
XXI
Annexe 16 : Exemple de tableau de synthèse et graphique pour l’exactitude (EEQ)
LA = 7%
Ana
lyse
Labos
Prin
cipe
tech
.
Fou
rnis
seur
tech
.
Mod
èle
app.
Fou
rnis
seur
app
.
1 (0
1-20
10)
2 (0
1-20
10)
3 (0
2-20
10)
4 (0
2-20
10)
5 (0
3-20
10)
6 (0
3-20
10)
7 (0
4-20
10)
8 (0
4-20
10)
9 (0
5-20
10)
10 (
05-2
010)
11 (
06-2
010)
12 (
06-2
010)
13 (
07-2
010)
14 (
07-2
010)
15 (
09-2
010)
16 (
09-2
010)
17 (
10-2
010)
18 (
10-2
010)
19 (
11-2
010)
20 (
11-2
010)
21 (
12-2
010)
22 (
12-2
010)
Min
imu
m
Max
imu
m
Glu
cose
Labo 01 … … … … 104 104 104 98 101 101 99 101 103 101 98 101 103 99 102 101 101 101 103 102 96 97 96 104
Labo 02 … … … … 100 99 97 101 100 105 103 104 100 102 100 101 103 102 100 102 104 101 93 101 98 94 93 105Labo 03 … … … … 102 100 97 101 100 98 97 102Labo 04 … … … … 98 98 97 97 102 101 114 103 102 100 98 99 97 98 103 103 98 95 97 101 100 98 95 114
Labo 05 … … … … 100 97 105 98 103 101 103 97 101 99 101 98 101 100 100 95 100 97 100 100 95 105Labo 06 … … … … 103 99 105 100 99 99 105 101 99 97 98 97 94 101 98 96 97 97 101 97 100 99 94 105Labo 08 … … … … 102 102 106 100 85 107 109 105 106 106 107 104 112 106 101 101 97 99 100 100 98 99 85 112
Labo 09 … … … … 100 99 97 96 97 102 103 99 104 104 99 98 100 100 103 102 100 98 98 100 96 104Labo 10 … … … … 98 101 107 104 102 104 100 99 102 99 98 99 103 100 97 98 98 103 103 100 102 102 97 107Labo 11 … … … … 100 100 103 102 98 101 100 101 100 98 98 98 98 103
Labo 14 … … … … 98 98 100 101 100 101 107 102 100 95 102 97 97 102 102 100 100 98 100 100 95 107Labo 18 … … … … 100 101 100 99 100 101 102 99 102 98 100 100 105 105 102 99 100 96 102 100 96 105Labo 22 … … … … 100 99 93 96 104 99 103 100 100 102 100 99 97 104 103 103 100 99 97 100 98 96 93 104
Labo 23 … … … … 100 100 103 103 102 106 103 105 103 101 104 104 110 106 105 103 102 101 107 104 105 102 100 110Labo 27 … … … … 104 107 105 99 103 100 113 107 102 102 104 105 108 102 104 106 107 108 103 104 102 104 99 113Labo 30 … … … … 100 102 90 97 100 103 90 99 95 97 98 103 93 98 100 103 96 98 103 105 102 100 90 105
Labo 33 … … … … 100 98 97 94 98 99 97 100 100 99 100 99 97 100 100 100 102 102 100 100 98 96 94 102Labo 37 … … … … 102 100 100 100 102 102 100 101 102 99 100 101 97 104 102 101 100 99 100 100 100 96 96 104Labo 40 … … … … 96 98 98 98 98 100 97 99 102 100 100 101 100 100 102 98 102 100 97 97 98 98 96 102
Les cases surlignées en jaune sont hors limite d’acceptabilité
XXIII
Annexe
1(0
12
010)
Glucose
21%
17:
1 (0
1-2
010)
2 (0
1-2
010)
3 (0
2-2
010)
2,1%
2,7%
5,1%
Exemples CV
4 (0
2-2
010)
5 (0
3-2
010)
6 (0
3-2
010)
2,5%
4,4%
2,6%
Les cases su
le de tabinterlab
L
7 (0
4-2
010)
8 (0
4-2
010)
9(0
52
010)
5,9%
2,5%
24%
urlignées en j
bleau deboratoire
A = 5%
9 (0
5-2
010)
10 (
05-2
010)
11 (
06-2
010)
2,4%
2,6%
2,6%
jaune sont ho
e synthèes CONS
%
12 (
06-2
010)
13 (
07-2
010)
14 (
07-2
010)
2,4%
5,3%
2,4%
ors limite d’a
se et graSTANCE
15 (
09-2
010)
16 (
09-2
010)
17(1
0-20
10)
2,4%
2,9%
2,7%
acceptabilité
aphique S (EEQ)
17 (
1020
10)
18 (
10-2
010)
19 (
11-2
010)
2,7%
2,9%
3,3%
XXIII
pour
20 (
11-2
010)
21 (
12-2
010)
22 (
12-2
010)
2,4%
2,1%
2,5%
I
Min
imum
Max
imum
2,1%
5,9%
XXIV
Annexe 18 : Monitoring par les ARE 1 Prélèvement sanguin/recueil des urines
remplissage de la fiche de correspondance journalière remplissage du cahier paraclinique, partie biologie pratique du prélèvement :
o respect de l’ordre des tubes : 1. tube sec avec séparateur de gel et accélérateur de coagulation ; 2. tube EDTA ;
o difficultés de prélèvements : temps de garrot trop long, piqué 2 fois, autre technique
toilette préalable, pour le recueil des urines modalités d’identification des tubes nature du tube de recueil des urines (tube ou pot avec bouchon de préférence)
2 Traitement préanalytique sanguin et urinaire
délai entre prélèvement sanguin et centrifugation o température centrifugation : réfrigéré ou non o respect des conditions du fournisseur
délai entre recueil et analyse des urines : o respect des conditions du fournisseur
3 Transport des échantillons sanguins et urinaires
transport dans des caissons isothermes (respect des conditions du fournisseur) traçabilité du contrôle de température en permanence
4 Phase analytique
utilisation d’un seul analyseur pour les échantillons Constances analyse des échantillons le même jour que le prélèvement/recueil. applications des recommandations fournisseurs O / N vérification de la concordance entre les analytes effectivement mesurés au laboratoire et la liste
pour Constances. vérification du respect par le laboratoire des techniques préconisées par Constances vérification du mode de transfert des informations : problème des arrondis (concerne les transferts
d’un middleware (concentrateur de données)vers un SIL, puis vers SAGES ou son équivalent, conversion entre systèmes d’unités,…)
5 Contrôle qualité
Participation effective au CQ selon convention CNAMTS – ORGANISME(s) DE CONTRÔLE
QUALITÉ o CIQ (2 niveaux pour la biochimie sanguine, urinaire et hématologie o EEQ (2 niveaux pour la biochimie et hématologie)
Procédures d’alerte
o Si critères d’acceptabilité non remplis : alerte du biologiste pour correction, quelles mesures ont été prises, traçabilité (voir chapt)
o Appréciation de la dérive sur le long terme – signalement de la dérive
S’assurer de l’archivage des documents mensuels des organismes de Contrôle Qualité dans chaque laboratoire.
XXV
6 Traçabilité
Traçabilité des lots Traçabilité des lots matériel prélèvement / recueil (références des tubes, fournisseur, type
d’anticoagulant, date de mise en service, date de fin de mise en service) Traçabilité de chaque modification assurée sur le site Internet de Constances
o Analyseur o Technique / réactif o Etalon o Gestion et archivage de la documentation afférente et transmission à Constances
(analyseur, réactif, calibrant, technique, sérums de contrôle) o Maintenance de chaque système analytique assurée O/N
Vérification de la conformité des systèmes analytiques utilisés o Marquage CE o Péremption (contrôle des dates limites d’utilisation)
Vérification de la traçabilité et de la conformité par sondage o Sur un échantillon de volontaires pris au hasard, vérifier toutes les données de traçabilité et
conformité (procédure saumon = chaînage des informations)
7 Recouvrement et de procédure de comparaison de méthodes
Recouvrement fait O/N
o A chaque changement de lot de sérum de contrôle o A chaque changement de laboratoire prestataire de service o A chaque changement d’organisme de contrôle qualité
Procédure de comparaison de méthodes fait O/N :
o A chaque changement d’analyseur o A chaque changement de méthode o A chaque changement de lot d’étalon
8 Recueil d’informations Recueil des non-conformités Recueil des résultats des périodes de recouvrement
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Annexe 19 : Guide d’utilisation et d’interprétation des résultats de la comparaison de méthodes
1. Objectifs
Etude de la concordance entre des mesures répétées :
Entre deux appareils différents ou systèmes analytiques
Entre deux techniques sur le même appareil
2. Principe
1) On teste l’hypothèse yi = xi, si l’hypothèse est vraie, les mesures xi, yi doivent se répartir de façon aléatoire et linéaire autour de la droite identité. On représente sur un graphique en coordonnées linéaires les points xi, yi en y faisant figurer la droite identité ainsi que le nuage de point associé aux n couples de mesures observées donnant le graphe d’une mesure (y) en fonction de l’autre (x). Cela permet de tester visuellement la linéarité du nuage de point.
2) Représenter la différence des mesures sous forme de graphique (plusieurs méthodes sont disponibles). On peut apprécier visuellement la concordance (ou non) entre les deux méthodes étudiées (par exemple une différence systématique.
3. Protocole
3.1 Prérequis
Définir les critères d’acceptabilité
Définir l’étendue de chaque classe
Familiariser les opérateurs avec les techniques et/ou les analyseurs
S’assurer que les deux systèmes analytiques (appareils, techniques) fonctionnent correctement (reproductibilité, répétabilité, linéarité)
3.2 Mode opératoire
3.2.1 Choix des échantillons à mesurer
On sélectionnera exclusivement des spécimens de patients de manière à couvrir l’ensemble du domaine de mesure du laboratoire. En pratique on répartira l’étendue des valeurs en cinq classes :
o Classe 1 10%
o Classe 2 25%
o Classe 3 30%
o Classe 4 25%
o Classe 5 10%
On peut aussi se baser sur les recommandations de la SFBC (2) pour déterminer la répartition des concentrations pour les spécimens de patients
Le nombre d’échantillons sera au minimum de 30. Un nombre plus élevé augmentera la confiance des calculs statistiques.
3.2.2 Collecte des données
On vérifiera préalablement que les conditions analytiques sont respectées
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On procédera à l’analyse des échantillons par les deux techniques, ou systèmes analytiques, ou modes de calibration.
Tous les spécimens testés seront pris en compte pour éviter des biais de sélection
On notera toutes les anomalies de fonctionnement liées à l’opérateur, liées au spécimen
On saisira les résultats dans un tableau EXCEL (annexe A)
3.2.3 Calcul des résultats (de préférence à l’aide d’un logiciel spécialisé)
Calcul de la droite de régression (pente, ordonnée à l’origine, leur incertitude). Il existe différentes manières de calculer la droite de régression :
o Droite de régression selon les moindres carrés
o Droite des moindres rectangles
o Droite de Deming
o Droite de Passing-Bablock
Les différences entre les différentes méthodes sont minimes. En revanche les trois premières méthodes supposent la normalité des variances résiduelles et sont donc sensiblement influencées par les points extrêmes ; C’est pour quoi l’on préfère habituellement l’emploi de méthodes robustes (non paramétriques) comme la méthode de passing-Bablock.
Représentation graphique des différences entre les méthodes. Il existe différentes façons de comparer graphiquement deux méthodes :
o Comparaison de la différence xi - yi (ordonnée) à xi valeur mesurée avec la méthode de comparaison (référence) (abscisse)
o Comparaison du rapport xi / yi x xi (ordonnée) à xi valeur mesurée avec la méthode de comparaison (abscisse)
o Comparaison des moyennes de mesure (xi + yi)/2 (ordonnée) à leur différence xi – yi (abscisse), (méthode de Bland-Altman)
Cette méthode est fréquemment employée dans la plupart des publications internationales
3.2.4 Interprétation des résultats
Inspection visuelle de la droite de régression
Vérification de la linéarité :
o si la droite n’est pas linéaire, examiner si une portion de droite est linéaire et si les portions non linéaires concernent les valeurs extrêmes (c’est un cas fréquent). Apprécier si la portion linéaire couvre l’intervalle des valeurs habituelles du laboratoire. Si oui, ajouter quelques valeurs supplémentaires pour remplacer les données exclues.
o Si la portion non linéaire est trop étroite : arrêter l’évaluation et en rechercher la cause. Si la source de non linéarité est identifiée et peut être corrigée, recommencer l’expérience. Si non, informer le fournisseur.
Rechercher s’il existe des outliers par inspection visuelle dans une première approche. Si le nombre d’outliers est supérieur à 2.5%, il faut en rechercher la cause (interférences, dysfonctionnement de l’analyseur ou de la technique, erreurs humaines,…).
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Interprétation de la droite de régression
o 1er cas :
la pente de la droite de régression est voisine de 1 (+/- x%)
l’ordonnée à l’origine (positive ou négative) est faible, inférieure aux critères définis
l’étendue du domaine de mesure est similaire
Il n’existe pas de différence systématique entre les deux systèmes
Les résultats obtenus avec l’un ou l’autre système sont compatibles.
o 2ème cas :
les données de comparaison sont homogènes
la pente de la droite de régression s’écarte de 1 de plus de +/- x %
l’ordonnée à l’origine (positive ou négative) est faible, inférieure aux critères définis
l’étendue du domaine de mesure est similaire
Il existe une différence systématique caractérisée entre les deux méthodes.
La comparaison de systèmes analytiques suppose que :
o le protocole de comparaison soit suivi de manière stricte, notamment la répartition des valeurs sur toute l’étendue du domaine de mesure
o si l’ordonnée à l’origine est trop importante, les méthodes ne sont pas comparables, donc non compatibles.
o la régression linéaire n’est pas toujours la meilleure méthode pour comparer deux groupes de valeurs. Par exemple, si l’étendue des valeurs est trop restreinte, l’évaluation des biais entre les moyennes des deux méthodes est certainement mieux adaptée.
Interprétation de la mesure du biais entre les méthodes :
On effectue les calculs mentionnés au paragraphe précédent, on reporte les valeurs trouvées sur un graphe ; il faut avoir au préalable défini des limites d’acceptabilité : on peut dans les deux premiers cas utiliser celles proposées par la SFBC (2), pour la méthode de Bland-Altman on peut utiliser les limites suivantes : limite supérieure d + 2s, limite inférieure d-2s (d= moyenne des différences, s=écart-type des différences). Si les valeurs reportées sont inférieures à ces limites on peut conclure à la bonne concordance entre les méthodes, entre les systèmes analytiques. On peut, de plus calculer l’intervalle de confiance à 95% des limites d’acceptabilité. L’examen du graphe permet de constater si l’une des méthodes montre une imprécision constante, si plusieurs échantillons s’écartent de la valeur moyenne, si un échantillon particulier est nettement discordant, etc...
3.2.5 Traçabilité
Il convient d’assurer une traçabilité totale : opérateur, lot calibrants, lots réactifs, lots sérums de contrôle, date de réalisation, bordereaux d’envoi,…
L’ensemble de ces informations sera transmis à l’équipe Constances sous forme de fichier Pdf.
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3.2.6 Document à transmettre à l’équipe Constances
Fichier Excel des valeurs xi, yi
Tableau mentionnant les caractéristiques de x et y, par exemple pour chacune d’elles au minimum les informations suivantes :
o Système analytique
o Méthodes de mesure
o Réactif utilisé
o Etalon utilisé
Une feuille de résultats qui comportera :
o Le tracé de la droite de régression
o L’équation de la droite de régression
o Le graphique de comparaison de méthode
o Le rapport SH-FORM 43 du COFRAC
o Les méthodes de calcul de la régression et de la représentation graphique seront mentionnées.
NOTE : des logiciels performants (StatisPro, Metcal, …) existent sur le marché permettant d’effectuer toutes ces opérations de manière simple et homogène. Ils proposent aussi des commentaires interprétatifs.
Références
1. Protocole de validation de techniques, Ann Biol Clin ; 44 : 686-745
2. Analyses de biologie médicale : spécifications et normes d’acceptabilité à l’usage de la validation de techniques : Ann Biol Clin 1999 ; 57 : 685-95
3. Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples ; 2nd Edition CLSI Document EP9-A2, Wayne, PA, 2002; 22 (19): 56
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Annexe A : Modèle de feuille de résultats (au format EXCEL) Feuillet N° de Date (s) I Analyte Système testé: Système de comparaison Echantillon Nr Système testé (Y) Système de comparaison (X) Echantillon N°1 Echantillon N°2 Echantillon N°3 … …. Echantillon N° « n »