Vaccination du lapin de Vaccination du lapin de garenne sans avoirgarenne sans avoir

à le capturerà le capturer

Etude de la puce Etude de la puce Xenopsylla Xenopsylla cuniculariscunicularis, vecteur potentiel d’un , vecteur potentiel d’un

vaccinvaccin

Dr. Anne DARRIES

Programme de Programme de Recherche de Bio Espace Recherche de Bio Espace

soutenu par la FNCsoutenu par la FNC

• Recherche de nouveaux sites Recherche de nouveaux sites naturels français de la puce naturels français de la puce Xenopsylla Xenopsylla cuniculariscunicularis

• Essais d’implantation de la puce à Essais d’implantation de la puce à l’extérieur de son aire de répartition l’extérieur de son aire de répartition (Parcs expérimentaux)(Parcs expérimentaux)

Aire de Répartition deAire de Répartition de Xenopsylla cunicularisXenopsylla cunicularis

- Maroc, Portugal et - Maroc, Portugal et EspagneEspagne- 2 stations connues - 2 stations connues dans le sud-ouest de la dans le sud-ouest de la France (sud de France (sud de Toulouse)Toulouse)

- Espèce autochtone- Espèce autochtone

Puce de terrierPuce de terrier Exigences écologiquesExigences écologiques poussées concernant le poussées concernant le climatclimat (chaud et régime de (chaud et régime de

pluie printanier < 600 mm) et la pluie printanier < 600 mm) et la nature du solnature du sol (léger et aéré) (léger et aéré) espèce peu abondanteespèce peu abondante

Beaucournu et Launay (1990)

11èreère partie partie

Recherche de nouveaux sites naturels Recherche de nouveaux sites naturels français de la pucefrançais de la puce

Xenopsylla cunicularisXenopsylla cunicularis

Préciser la limite nord de son aire de Préciser la limite nord de son aire de répartitionrépartition

Sites NaturelsSites NaturelsZones prospectéesZones prospectées Juillet 07 :

• L.-et-Garonne (Agen-Nérac-Marmande)• Tarn(Albi – Toulouse - Montauban)

Juillet 08 :- Gers (autour Auch)

Juillet 09 :- Gers (Nord)- Hte-Garonne (NO de Toulouse + P. s/ Garonne

Nouveaux sitesNouveaux sites

Gers : Gimont et Beaupuy / Tarn : St Gauzens / Hte-Garonne : Francarville

Toujours présente à Portet-sur-Garonne

Publication acceptée dans le Bulletin de Publication acceptée dans le Bulletin de la Société Entomologique de France la Société Entomologique de France

(juin 2010)(juin 2010)

Contribution à l'étude de l'aire de répartition de Contribution à l'étude de l'aire de répartition de Xenopsylla cunicularisXenopsylla cunicularis Smit 1957 (Siphonaptera: Smit 1957 (Siphonaptera:

Pulicidae), ectoparasite spécifique du lapin de Pulicidae), ectoparasite spécifique du lapin de garennegarenne Oryctolagus cuniculus Oryctolagus cuniculus L. 1758 L. 1758

(Lagomorpha): nouvelles stations dans le sud-(Lagomorpha): nouvelles stations dans le sud-ouest de la Franceouest de la France..

Anne Darries-Vallier et Jean-Claude BeaucournuAnne Darries-Vallier et Jean-Claude Beaucournu

22èmeème partie partie

Parcs expérimentauxParcs expérimentaux

Savoir si les puces lâchées en-Savoir si les puces lâchées en-dehors de leur aire de répartition dehors de leur aire de répartition peuvent s'installer et risquer de peuvent s'installer et risquer de

concurrencer les espèces concurrencer les espèces autochtonesautochtones

9 Sites expérimentaux9 Sites expérimentaux

* Nord (Soc. Ch. St Hubert + Anclatra 59)* Marne (Anclatra ADCPG)* Seine Maritime (FDC 76)* Loire-Atlantique (Anclatra 44)* Lot-et-Garonne (FDC 47)* Tarn (FDC / Anclatra 81)* Gard (FDC 30)* Hérault (FDC et Anclatra 34)* Bouches du Rhône (FDC 13)

Sites naturels X. cunicularis

Seine-MaritimeSeine-Maritime

Nord

Marne

TarnTarn

Loire-AtlantiqueLoire-Atlantique

Lot-et-GaronneLot-et-Garonne

Bouches-du-RhôneBouches-du-Rhône

HéraultHérault

GardGard

Principe général des expérimentationsPrincipe général des expérimentations

Lâcher de puces vierges de tout vaccin à l'intérieur Lâcher de puces vierges de tout vaccin à l'intérieur de parcs expérimentaux peuplés en lapinsde parcs expérimentaux peuplés en lapins

Laisser faire la natureLaisser faire la nature

voir si l'on retrouve une population de puces l'année voir si l'on retrouve une population de puces l'année suivante dans les parcssuivante dans les parcs

Par peignage des lapinsPar peignage des lapins

En récupérant le sol des garennes où se En récupérant le sol des garennes où se développent les pucesdéveloppent les puces

2 contrôles2 contrôles

3 mois: peignage 3 lapins + échantillon de 3 mois: peignage 3 lapins + échantillon de sol dans 2 galeriessol dans 2 galeries

18 mois: peignage de tous les lapins + 18 mois: peignage de tous les lapins + récupération du sol dans les 3 garennes récupération du sol dans les 3 garennes artificielles + trous naturelsartificielles + trous naturels

Données observéesDonnées observées

Paramètres biotiques (puces)Paramètres biotiques (puces)

– Nb et état des larves, nymphes et adultes de puces ds Nb et état des larves, nymphes et adultes de puces ds le sol et sur les lapinsle sol et sur les lapins

– Adultes : néonates (non alimenté), en maturation, Adultes : néonates (non alimenté), en maturation, ovigères, âgées ovigères, âgées DISSECTION DISSECTION

– Proportion des différents stades (adultes et immatures) Proportion des différents stades (adultes et immatures) renseigne sur l’état reproductif de la population de renseigne sur l’état reproductif de la population de pucespuces

Données observéesDonnées observées

Paramètres abiotiquesParamètres abiotiques : :– ClimatClimat : :

Int et ext des garennes (1 fois/sem)Int et ext des garennes (1 fois/sem) Données climatiques de la station la plus proche pdt la durée Données climatiques de la station la plus proche pdt la durée

de l’expérimentation (précision) – Météo Francede l’expérimentation (précision) – Météo France Données climatiques moyennes (Météo France)Données climatiques moyennes (Météo France)

– SolSol : : analyses pédologiques du sol des parcsanalyses pédologiques du sol des parcs site GisSol-INRA (nature + structure des sols ds dépt)site GisSol-INRA (nature + structure des sols ds dépt)

– 2 paramètres essentiels2 paramètres essentiels au développement de au développement de X. cunicularisX. cunicularis

Analyse des prélèvementsAnalyse des prélèvements

Puces récupéréesPuces récupéréessur les lapinssur les lapins

– Nettoyage poilsNettoyage poils– Différenciation des espècesDifférenciation des espèces– Dissection des adultes pourDissection des adultes pour connaître le stade reproductifconnaître le stade reproductif

Les prélèvements de solLes prélèvements de sol

• Ouverture des Ouverture des garennesgarennes

• Quadrillage du solQuadrillage du sol

• Récupération de la Récupération de la couche superficiellecouche superficielle

• Transport dans des Transport dans des sacs jusqu’au sacs jusqu’au laboratoire (papier laboratoire (papier humide) humide)

Puces récupérées dans lesPuces récupérées dans les

prélèvements de solprélèvements de sol

2 types d’analyses2 types d’analyses

* * in vivoin vivo

* dans l’alcool (Tarn, Bouches du * dans l’alcool (Tarn, Bouches du Rhône, Lot et Garonne)Rhône, Lot et Garonne)

Analyse des prélèvements Analyse des prélèvements in vivoin vivo

• 655 boites au total (330 kg)• Examen de chaque boite 2 fs/sem pendant 2 mois• Récupération puces adultes et autres insectes (ds tubes avec alcool)

• Pour chaque tube (~2.000): • détermination espèce puces, sexe• dissection des femelles• identification autres insectes

Analyse des prélèvements dans l’alcoolAnalyse des prélèvements dans l’alcool

• 135 boites135 boites (2-3 kg/bte – 140 kg ~)(2-3 kg/bte – 140 kg ~)

• 3030nene d’heure / boite d’heure / boite Échantillonnage 1/5Échantillonnage 1/5

Etapes de Etapes de l’échantillonnagel’échantillonnage

Dépouillement des échantillonsDépouillement des échantillons

Au total :Au total :

- - 876 boites (dt 135 ds 876 boites (dt 135 ds l’alcool)l’alcool)

- 519 kg de substrat- 519 kg de substrat

- 2475 tubes- 2475 tubes

- - Nb larves, nymphes, adultes de pucesNb larves, nymphes, adultes de puces

- paramètres climatiques (T°, HR, précipitations)- paramètres climatiques (T°, HR, précipitations)

- paramètres édaphiques (granulométrie, - paramètres édaphiques (granulométrie, éléments organo-minéraux, oligo éléments)éléments organo-minéraux, oligo éléments)

Analyses statistiquesAnalyses statistiques(3 mois-18 mois)(3 mois-18 mois)

RésultatsRésultats

Parc de Seine MaritimeJuillet 07 - Juillet 08

0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

100

J t A S O N D J t F M A M J J t

Int.

Int.

Ext.

Ext.

HRMesures ~17h

T°

ROUEN (Seine Maritime)Juillet 07 - Juillet 08

020406080

100120140160180

Jt A S O N D J F M A M J Jt

0102030405060708090100

ROUEN (Seine-Maritime)1961-1990

020406080

100120140160180

Jt A S O N D J F M A M J Jt

0102030405060708090100

ExempleExemple

de traitement des de traitement des

données données

climatiquesclimatiques

Le ClimatLe Climat

Le solLe sol

ExempleExemple

de Cartede Carte

des texturesdes textures

en Seineen Seine

MaritimeMaritime

Texture du sol des garennesTexture du sol des garennes

NordNord Limon sablo-argileuxLimon sablo-argileux MarneMarne Sable limono-argileuxSable limono-argileux Seine-MaritimeSeine-Maritime Limon sablo-argileuxLimon sablo-argileux Loire-AtlantiqueLoire-Atlantique Limon sablo-argileuxLimon sablo-argileux Lot-et-GaronneLot-et-Garonne SableSable TarnTarn Limon sablo-argileuxLimon sablo-argileux HéraultHérault Argile limono-sableuseArgile limono-sableuse GardGard Limon sablo-argileuxLimon sablo-argileux Bouches-du-RhôneBouches-du-Rhône Argile limono-sableuseArgile limono-sableuse

Prélèvement à 3 moisPrélèvement à 3 mois

• Facteur température est prépondérantFacteur température est prépondérant (sur l’ensemble des parcs)(sur l’ensemble des parcs)

* Nature du sol est secondaire* Nature du sol est secondaire

Prélèvement final (18 mois)Prélèvement final (18 mois)

* Nature du sol est prépondérante (en relation avec * Nature du sol est prépondérante (en relation avec T° + faibles et les précipitations)T° + faibles et les précipitations)

* Quantité de lapins* Quantité de lapins

(pas d’influence des autres paramètres physico-(pas d’influence des autres paramètres physico-chimiqueschimiques

Autres paramètresAutres paramètres

Etat reproducteur des populations de pucesEtat reproducteur des populations de pucesConforme aux observations en natureConforme aux observations en nature

* sex-ratio des adultes présents (70-80 % femelles)* sex-ratio des adultes présents (70-80 % femelles)* sex-ratio des naissances (52 % femelles) * sex-ratio des naissances (52 % femelles) * proportions des stades immatures en relation avec les températures* proportions des stades immatures en relation avec les températures

Répartition des puces dans les garennesRépartition des puces dans les garennesHétérogèneHétérogène

Fonction deFonction de * l’ensoleillement* l’ensoleillement* la pente* la pente* fréquentation par les lapins* fréquentation par les lapins

Faune du solFaune du sol* mise en place de toute une chaîne trophique* mise en place de toute une chaîne trophique* rôle important dans la dynamique des populations (prédateurs/détritiphages - * rôle important dans la dynamique des populations (prédateurs/détritiphages -

compétition)compétition)

Depts du NordDepts du Nord (Nord, Marne, Seine-Maritime et Loire-Atlantique) (Nord, Marne, Seine-Maritime et Loire-Atlantique)Puce a quasiment disparu ou est en voie de disparaître (tx <<1)Puce a quasiment disparu ou est en voie de disparaître (tx <<1)

Depts du SudDepts du SudSituations variables en fonction du climat et surtout du substratSituations variables en fonction du climat et surtout du substrat

Elément important : Elément important : aucun stade immature n’a été trouvé dans aucun stade immature n’a été trouvé dans les trous naturelsles trous naturels, y compris dans le Lot et Garonne., y compris dans le Lot et Garonne.

Pourquoi : garennes artificielles bien isolées de la pluie Pourquoi : garennes artificielles bien isolées de la pluie substrat substrat jamais mouillé, même avec de fortes précipitationsjamais mouillé, même avec de fortes précipitations

Idéal pour Idéal pour XenopsyllaXenopsylla

Quel que soit le parc, Quel que soit le parc, XenopsyllaXenopsylla n’a perduré que dans n’a perduré que dans les garennes artificielles. Si elle avait été capable de les garennes artificielles. Si elle avait été capable de vraiment s’installer, il y aurait eut un nombre vraiment s’installer, il y aurait eut un nombre conséquent de puces à l’extérieur, dans les trous conséquent de puces à l’extérieur, dans les trous naturels.naturels.

A la question :A la question :

XenopsyllaXenopsylla représente-t-elle un danger pour la représente-t-elle un danger pour la faune locale ?faune locale ?

NONNON

Les expérimentations ont montré que cette puce ne pourrait survivre que dans le sud, à l’état de micropopulations, dans des stations isolées, éparses, où les garennes seraient sableuses et très protégées.La survie de ces micropopulations serait par ailleurs à la merci de l’abandon des garennes par les lapins.

En aucun cas elle ne constitue un danger pour la faune locale et ne présente aucun risque d’invasion incontrôlable, dans le sens où sa propagation géographique est entravée par des besoins biologiques et écologiques très strictes.

PublicationsPublications Rapport FNC (+ complément)Rapport FNC (+ complément)

Revue Internationale « Journal of Vector Ecology »Revue Internationale « Journal of Vector Ecology »Vaccination de la faune sauvage à l'aide d'insectes-vecteurs : La puce Vaccination de la faune sauvage à l'aide d'insectes-vecteurs : La puce Xenopsylla cunicularis Xenopsylla cunicularis (Siphonaptera: Pulicidae) pourrait-elle s’installer (Siphonaptera: Pulicidae) pourrait-elle s’installer en dehors de son aire de répartition, si elle était utilisée pour vacciner en dehors de son aire de répartition, si elle était utilisée pour vacciner

contre la myxomatose son hôte spécifique, le lapin de garennecontre la myxomatose son hôte spécifique, le lapin de garenne Oryctolagus cuniculus Oryctolagus cuniculus ? Premiers résultats dans le nord de la France.? Premiers résultats dans le nord de la France.

A. Darries-Vallier, A. Ausset et P. BesrestA. Darries-Vallier, A. Ausset et P. Besrest

En préparationEn préparation* 2* 2èmeème partie sur l‘étude d’implantation de Xenopsylla partie sur l‘étude d’implantation de Xenopsylla

* L'alimentation, paramètre essentiel dans l'élevage des arthropodes * L'alimentation, paramètre essentiel dans l'élevage des arthropodes hématophages. Comportement et besoins nutritionnels.hématophages. Comportement et besoins nutritionnels.

Aurélien Ausset et Anne Darries-VallierAurélien Ausset et Anne Darries-Vallier

FINFIN