Rendement parasitaire

chez l’anophèle

Rakotoarivelo Rivonirina Andry

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EVALUATION

par les FACILITATEURS

Devenir des gamétocytes ingérés par l’anophèle au cours d'un repas sanguin dépend:Facteurs liés à l’anophèle

Facteurs externes

Rendement parasitaires chez l’anophèle

Introduction

Infectivité des gamétocytes pour les moustiques: Indice gamétocytaire; Infectivité des individus

Rendement du développement sporogonique: Rendement interstade; Rendement global

C Boudin, V Robert. Bull Soc Pathol Exot 2003.

Gamétocytes ? Sporozoites ?

Plasmodium chez l’anophèle

Cycle sporogonique

CK Moreira et al. International Journal for Parasitology 2004.

H3-5H0

Gamétocytes Zygotes

H18-30

Ookinètes Oocystes

H36-48

Sporozoites

J8-16

04/04/2002 3Atelier Paludisme 2008

Gouagna et al: P. falciparum – An. gambiae

Gamétocytes: Coloration au Giemsa

Microscope optique

Stade pré-oocyste (Zygotes H3, Ookinètes H24) et oocystes J2: Ac monoclonal anti-Pfs25+marqueur IF

Microscope avec lumière fluorescente

Stade oocystes J7: Coloration au mercurochrome

Microscope optiqueLC Gouagna et al. Tropical Medecine International Health 1998.

Mesure quantitative du cycle sporogonique

04/04/2002 4Atelier Paludisme 2008

2 RF � 1 OOK

LC Gouagna et al. Tropical Medecine International Health 1998.

OOK - OOC2: Rendement = 61.4 %

Gouagna et al: P. falciparum – An. gambiae

04/04/2002 5Atelier Paludisme 2008

Rendement global (RF - OOC7) = 25.7 %

Technique: Green fluorescent protein (GFP) / intégration de plasmide PbGFPCON dans le génome de P. berghei

Microscope

Siden et al: P. berghei – An. stephensi

Mesure quantitative du cycle sporogonique

B Franke-Fayard et al. Molecular & Biochemical Parasitology 2004.

RE Sinden et al. PloS Pathogens 2007.

D’après C Lavazec. 2008.04/04/2002 6

Ookinètes Oocystes SporozoitesGamète mâleGamétocytes femelle et mâle

Siden et al: P. berghei – An. stephensi

Mesure quantitative du cycle sporogonique

RE Sinden. Parassitologia 1999.

RE Sinden et al. PloS Pathogens 2007.

77 gamètes � 1 ookinète (OOK)35 - 72 OOK � 1 oocyste (OOC)1 OOC � 54 - 72 sporozoitesdans les glandes salivaires

Hypothèse: intervention visant chaque étape (ookinète, oocystes, sporozoites)

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Mécanismes de défense de l’anophèle contre les parasites:

Enzymes digestives de l’anophèle

Défense immunitaire de l’anophèle: nitric oxidesynthase (NOS)

Hemocytes: phagocytose, laminin, thioester-containing protein (TEP1)

Facteurs sanguins ingérés avec le repas sanguin: Ac, compléments, leucocytes,…

Facteurs interférents sur le cycle sporogonique

04/04/2002 8Atelier Paludisme 2008

S Blandin, EA Levashina. Current Opinion in Immunology 2004.

Mesure quantitative du cycle sporogonique permet l’identification:

Des stades parasitaires vulnérables à une action de lutte chez lez moustiques

Des cibles parasitaires de l’immunitébloquant la transmission

Du rôle épidémiologique de cette immunitépar rapport à l’ensemble des mécanismes non immunologiques qui dépendent du parasite et du vecteur.

Intérêts

Nombre des gamétocytes

Défenses immunitaires

Modifications génétiques

Facteurs externes

� ≈ ���� sporozoites

� Gamétocytes entraîne une

� transmission du paludisme

LC Gouagna et al.East Afr Med J 2003.

04/04/2002 10

Perspective

Moustique transgénique � ���� transmission du paludisme

AK Ghosh et al. Insect Bioch Molecul Biol 2002.

Cibles parasitaires de l’immunité bloquant la transmission: vaccin bloquant la transmission

C Lavazec et al. Infection and immunity 2007.

Gamétocytes Sporozoites

Rendement parasitaire

Diminuer la gametocytémie: antimalariques

Bloquer la transmission: vaccin bloquant la transmission

Mettre au point les moustiques transgéniques

Élimination du paludisme

� Lutte multifactorielle

� Participation active de tout le monde

���� « Si on veut, on peut »

04/04/2002 Atelier Paludisme 2008 11

Conclusion

04/04/2002 Atelier Paludisme 2008 12

1. C Boudin, V Robert. Plasmodium falciparum : Epidémiométrie de la transmission homme-moustique et de l’infection chez le vecteur. Bull Soc Pathol Exot 2003; 96: 335-340.

2. CK Moreira, MT Marrelli, M Jacobs-Lorena. Gene expression in Plasmodium: from gametocytes to sporozoites. International Journal for Parasitology 2004; 34: 1431–40.

3. LC Gouagna et al.The early sporogonic cycle of Plasmodium falciparum in laboratory infected-Anopheles gambiae: an estimation of parasite efficacy.Trop Med Inter Health 1998;3:21-28.

4. B Franke-Fayard et al. A Plasmodium berghei reference line that constitutively expresses GFP at a high level throughout the complete life cycle. Molecular & Biochemical Parasitology 2004; 137: 23–33.

5. RE Sinden et al. Progression of Plasmodium berghei through Anopheles stephensi Is Density-Dependent. Plos Pathogens 2007;3:e195.

6. RE Sinden. Plasmodium differentiation in the mosquito. Parassitologia 1999; 41:139-48.7. S Blandin, EA Levashina. Mosquito immune responses against malaria parasites. Current Opinion

in Immunology 2004; 16:16–20.8. LC Gouagna et al. Infectivity of Plasmodium falciparum gametocytes in patients attending rural

health centres in western Kenya. East Afr Med J 2003; 80:627-34.9. AK Ghosh, LA Moreira, M Jacobs-Lorena. Plasmodium–mosquito interactions, phage display

libraries and transgenic mosquitoes impaired for malaria transmission. Insect Biochemistry andMolecular Biology 2002; 32: 1325–31.

10. C Lavazec et al. Carboxypeptidases B of Anopheles gambiae as Targets for a Plasmodium falciparum Transmission-Blocking Vaccine. Infection and Immunity 2007;75: 1635–42.

Références

Misaotra tompoko!