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Produire des biocarburants à partir de micro- algues : quels enjeux pour la recherche ? Gilles Peltier Institut de Biologie Environnementale et Biotechnologie CEA, CNRS, Université Aix Marseille CEA Cadarache [email protected]

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Page 1: Produire des biocarburants àpartir de micro- algues : quels enjeux … · 2013-03-13 · Culture de microalgues pour la production de composés HVA D’après M. Tredici, EABA Meeting,

Produire des biocarburants à partir de micro-algues : quels enjeux pour la recherche ?

Gilles Peltier

Institut de Biologie Environnementale et BiotechnologieCEA, CNRS, Université Aix Marseille

CEA Cadarache

[email protected]

Page 2: Produire des biocarburants àpartir de micro- algues : quels enjeux … · 2013-03-13 · Culture de microalgues pour la production de composés HVA D’après M. Tredici, EABA Meeting,

hydrogène

biodiésel

hydrogène

Les biocarburants de 2ème et 3ème générations

Micro-organismes photosynthétiques

Un enjeu pour la société et pour la recherche

2GBiomasse

ligno-cellulosique

3GMicro-organismes photosynthétiques

Pilotes

Démonstrateurs

Recherche

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Les micro-algues et les cyanobactéries

… une biodiversité à peine explorée :30 000 espèces décrites200 000 à 1 million estimées

40 à 50% de la photosynthèse terrestreÀ l’origine de la formation du pétrole

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Biomasse plantes supérieures ν biomasse algale

CO2

H2O

O2

N, P, S,…

H2

amidon

lipides

hydrogène

CO2

H2O

O2

N, P, S,…

H2

amidon

lipides

hydrogène

Amidon

Lipides

Hydrogène

4-514-2212-1751-58Chlorella vulgaris

-211748Chlamydomonas rheinhardii

3-612-1410-1750-56Scenedesmusobliquus

ARN / ADN

LipidesCarbohydratesProtéinesAlgue (%, poids sec)

Lignine

Hémicellulose

Cellulose

Protéines

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Earthrise Algae Farm,

Calipatria, California,

USA, Culture en bassins

ouverts sur 22 ha

Culture en bassins ouverts

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Les différents systèmes de culture de microalgues

- Bassins (raceway ponds) ouverts ou fermés (sous serre)

- Photobioréacteurs tubulaires

- Sac plastiques

Vue futuriste d’une ferme de microalgues cultivées en photobioréacteurs (Solix biofuels Colorado, USA) Photobioréacteur tubulaire solaire

(Algatech , désert du Negev, Israël)Photobioréacteur plan pour la production de chlorelles (O.Pulz, Allemagne)

Parry Nutraceuticals Ltd., Spirulina Ponds, India

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Culture de microalgues pour la production de composés HVA

D’après M. Tredici, EABA Meeting, Florence, 2009

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Production de microalgues : avantages et inconvénients

10-1510-3050-70

Productivité observée (T.ha -1.an-1)PhotobioréacteursChamp

3060150-180Productivité maximale (T.ha -1.an-1)

Plantes C3Plantes C4

(sorgho, maïs,…)Microalgues

D’après « EPOBIO project » University of York – Sept 2007150 T.ha-1.an-1 = 40 g. m-2.s-1 (sur 365 jours)

- Recours aux conditions de carence pour induire l’accumulation de produits riches en énergie

- Pas d’amélioration génétique (adaptation aux systèmes de cultures)

- Systèmes de cultures et de récolte coûteux

- Productivité surfacique élevée- Composition de la biomasse flexible- Peu de compétition avec la production alimentaire - Peu de compétition avec les ressources en eau- Recyclage de déchets urbains (N, P, S,..) ou industriels (CO2)

InconvénientsAvantages

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Des microalgues pour la production de biocarburants ?

• Production d’hydrogène

• Production de lipides et de biodiesel

PQ

PcH2O

Cytb6/f

NADPH

PS II PS I

FNRQA

Fixation du CO2

O2

Rubisco

CO2

Amidon

Fd

H2ase

H+H2

H2/H+

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Les limites thermodynamiques

Cycle Photosynthétique de Réduction du Carbone

RuBP 1 CO2

3-PGA (2)

RuP

Triose-P

ATP (1)

ATP (2)

NADPH (2)

3 ATP2 NADPH

CO2ATP/NADPH ratio : 1,5

Rubisco

Calvin cycle PQ

Pc2 H2O

Cytb6/f

2 NADPH

PS II PS I

FNRQA

2H+ + O2

Fd

8 Photons

Photons PAR 217 KJ. mole-1 en moyenne

1 mole fixed CO2 est équivalent à 475 KJ (1/6 mole glucose)

Conversion théorique maximale du PAR en énergie chimique (biomasse) :

475 KJ / (217 x 8 KJ ) = 27%

PAR (Photosynthetic Active Radiation) : ~ 45% de l’énergie solaire

Conversion photosynthétique maximale : 27% x 45% = 12 %

ATP

H+

H+H+

H+

ADP+Pi

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2 4 6

DCMU

Temps (min)C

once

ntra

tion

(µM

)

0

1

2

3

4

H2

O2

Control

00

1

2

3

hνννν

hνννν

Deux stratégies de recherche :1. séparer dans le temps productions d’O2 et d’H2

2. rendre l’hydrogénase insensible à l’O2

Un verrou : la sensibilité de l’hydrogénase à l’O2

Production d’hydrogène: mécanismes et verrous biologiques

O2

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Carence en soufre

Activation hydrogénase

Phase 1 (0 to 40h)Aérobiose

Phase 2 (40 to 120h)Anaérobiose

Chute du PSII& accumulation d’amidon

Production d’H2 en réponse à une carence en soufre (Melis et al., 2000)

H2H+Temps (H)

0 24 48 72 96 120 144 168

Am

ido

n (

mg

.mL-1

)

0,00

0,04

0,08

0,12

0,16

Hy

dro

ne

(m

L.L-1

de

cu

ltu

re)

0

10

20

30

40

50

60

Ox

yg

èn

e (

%)

0

5

10

15

20

25AmidonH

2

O2

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Contrôler le stockage et le déstockage de l’amidon

S’affranchir de la carence et stimuler la voie indirecte de production d’H2

Contrôler l’activité du Photosystème II

2 4 6

DCMU

Temps (min)

Con

cent

ratio

n (µ

M)

0

1

2

3

4

H2

O2

Control

00

1

2

3

hνννν

hνννν

Identifier les voies métaboliques et leurs

étapes limitantes

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Quelle enzyme est impliquée dans la réduction des PQs ?

Starch

CO2fixation

?

A la différence des plantes supérieures, les chloroplastes de Chlamydomonas ne possèdent pas de complexe NAD(P)H déshydrogénase (NDH-1) de type I

6 NDH-2 dans le génome de Chlamydomonas

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Collaboration F. Franck & C. Remacle, Liège

Nda2: une déshydrogénase chloroplastique de type II NAD(P)H

Jans et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA (2008)

75

50

37

100T M C S

Desplats et al. J. Biol. Chem. (2009)

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Développement d’approches génétiques

Starch

CO2fixation

StarchStarch

CO2fixation

Photochemistry

Fluorescence

Thermal dissipation

Mise en place de deux cribles- Déstockage de l’amidon- Régulation de la photosynthèse

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AphVIII

Constitution d’une banque

de mutants d’insertion

(15,000 mutants)

Croissance photoautotrophe sur

milieu sélectif (paromomycine)

Actiniclight

F/Fo

Time (s)

Modulatedlight

ModulatedlightEnregistrement des transitoires de

fluorescence de la chlorophylle sur des

colonies isolées

Crible de mutants basé sur la fluorescence de la chlorophylle

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Actiniclight

F/Fo

Time (s)

Modulatedlight

Modulatedlight

Crible de mutants basé sur la fluorescence de la chlorophylle

3 mutants

204D1,216A3,125D1

Fluorescence induction (Kausky effect)(+/-)

III

Dark reduction of PQ (+/-)

High Fo

High steady state

Fluorescence

7 mutants

216E1,79H5, 119B1, 220C2, 133G6, 74G3, 228F1

IV

3 mutants

94E4, 113A3, 220B2

II

2 mutants

7A2, 9H4

I

time (s)

0 60 120 180 240 300 360

chlo

roph

yll f

luor

esce

nce

(r.u

.)

0.00

0.05

0.10

0.15

0.20 WT

204D1

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APHVIII

pgrl1WTpgrl1WTc

PGRL1

epgrl1WTd

Pgrl1

Actin1

exon 1 2 3

b

PGRL1

APHVIII

+842

Chr 7

APHVIII

pgrl1WTpgrl1WTc

PGRL1

epgrl1WTd

Pgrl1

Actin1

exon 1 2 3

b

PGRL1

APHVIII

+842

Chr 7

Isolement d’un mutant affecté dans le gène PGRL1

WT WT WTpgrL1 pgrL1 pgrL1

RT-PCRImmuno-détectionSouthern

AphVIII

- Insertion unique de la cassette de résistance à la paromomycine

- Co-ségrégation parfaite entre phénotype et résistance à la

paromomycine

DalCorso et al. (2008) Cell 132: 273-285

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22 +/- 2.0546 +/- 3.61Transfert cyclique/ anaérobiose (s-1)

18.8 +/- 1.3331.4 +/- 1.85Transfert cyclique/ aérobiose (s-1)

pgrL1WT

Activité réduite du transfert cyclique des électrons chez pgrL1

Tolleter et al. (2010) à soumettre

Light intensity (µE.m-2.s-1)

0 200 400 600 800 1000

ET

R

0

20

40

60

80

100a

pgrL1

WT

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PQ(H2)

NAD(P)H

PS II

QA

CO2

Starch

FNR

PS I

Fd

Nda2

Pc

Cyt b6

f

Rubisco

ADP + Pi

ATP

H+

2 H+O2+ 4 H+2 H2O

PGRL1

NAD(P)H

PhotosyntheticCO2

fixation

x

y

pgrL1 est affecté dans le transfert cyclique d’électrons

H2ase

2 H+H2

H+

PGR5

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time (min)

5 10 15

time (min)

0 5 10

H2

mol

.L-1

.µg-1

chl

orop

hylle

)

0.0

0.2

0.4

0.6

0.8

+ FCCP

a b

Forte stimulation de la production d’ H2 chez pgrL1

WT

pgrL1pgrL1

WT

+FCCPcontrol

initial speed

WT PGRL1

H2

prod

uctio

n (µ

mol

/L/m

in/µ

g ch

loro

phly

ll)

0.00

0.02

0.04

0.06

0.08

0.10

0.12

0.14

0.16

total production

WT PGRL1

cum

ulat

ive

H2

prod

uctio

n (µ

mol

/L/µ

g ch

loro

)

0.0

0.2

0.4

0.6

0.8

1.0BA

pgrL1 pgrL1WTWT

initial speed

WT PGRL1

H2

prod

uctio

n (µ

mol

/L/m

in/µ

g ch

loro

phly

ll)

0.00

0.02

0.04

0.06

0.08

0.10

0.12

0.14

0.16

total production

WT PGRL1

cum

ulat

ive

H2

prod

uctio

n (µ

mol

/L/µ

g ch

loro

)

0.0

0.2

0.4

0.6

0.8

1.0BA

pgrL1 pgrL1WTWT

Tolleter et al. (2010) à soumettre

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µm

ol H

2 / 1

09 ce

lls

0

5 0 0

1 0 0 0

1 5 0 0

2 0 0 0

2 5 0 0

µm

ol H

2/10

9 ce

lls

0

5 0

1 0 0

1 5 0

2 0 0

t im e (h )

0 2 5 5 0 7 5 1 0 0 1 2 5 1 5 0

star

ch (

µg/

106

cells

/mL)

0

1 0

2 0

3 0

4 0

5 0

6 0

7 0

8 0

t im e (h )

0 2 5 5 0 7 5 1 0 0 1 2 5 1 5 0 1 7 5

Sta

rch

(µg

/ 106

cel

ls/m

L)

0

1 0

2 0

3 0

4 0

5 0

6 0

7 0

8 0

b

a c

d

Stimulation de la production d’H2 en carence en soufre

WTWT

pgrL1pgrL1

pgrL1

WTWT

pgrL1

Tolleter et al. (2010) à soumettre

H2

pro

du

ctio

n (

µm

ol.

H2

10

-9ce

lls)

sta

rch

(µg

10

-6ce

lls)

Voie directe Voie indirecte

+ DCMU

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PQ(H2)

NAD(P)H

PS II

QA

CO2

Starch

FNR

PS I

Fd

Nda2

Pc

Cyt b6

f

Rubisco

ADP + Pi

ATP

H+

2 H+O2+ 4 H+2 H2O

PGRL1

NAD(P)H

PhotosyntheticCO2

fixation

x

y

En anaérobiose le gradient de protons limite le flux d’électrons

H2ase

2 H+H2

H+

PGR5

Chez le WT le flux d’électrons est limité par le gradient de protonsChez pgrL1 le flux d’électrons est dirigé vers l’hydrogénase

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� Transformation de C. reinhardtii par plasmide portant la cassette AphVIII, qui confère la résistance à la paromomycine

� Sélection et repiquage de 15,000 transformants

� Transfert sur filtre et criblage

Criblage d’une banque d’insertion

Chochois et al. (2010) Int J Hydrogen Energy

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Milieu Carencé + Lumière

Milieu Minimal non carencé +Obscurité

µg a

mid

on /

Cel

lule

120h 48h

WT

Mutants recherchés

Temps (h)

WT

Principe du crible

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PQ(H2)

NAD(P)H

PS II

QA

CO2

Amidon

FNR

PS I

Fd

Nda2

Pc

Cyt b6

f

Rubisco

ADP + Pi

ATP

H+

2 H+O2+ 4 H+2 H2O

PGR5?

NAD(P)H

Fixation de CO2

x

y

Vers un contrôle génétique de la production d’H2

Rôle du gradient de protons et la production d’H2

H2ase

2 H+H2

Mise en évidence d’une kinase contrôlant la dégradation de l’amidon

PGRL1

Régulation de l’activité du PSII via

des interrupteurs génétiques

Surzycki et al. (2007) Proc. Natl. Acad. Sci. USA

Caractérisation des voies d’entré sd’électrons dans la chaîne photosynthétique

Jans et al. (2008) Proc. Natl. Acad. Sci. USA

Desplats et al. (2009) J. Biol. Chem. Brevet international (2005)

Rôle de l’amidon dans la production d’H2

Dauvillée et al. (2006) Plant J.Chochois et al. (2009) Plant Physiol.

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2 4 6

DCMU

Temps (min)C

once

ntra

tion

(µM

)

0

1

2

3

4

H2

O2

Control

00

1

2

3

hνννν

hνννν

Deux stratégies de recherche :1. séparer dans le temps productions d’O2 et d’H2

2. rendre l’hydrogénase insensible à l’O2

Un verrou : la sensibilité de l’hydrogénase à l’O2

Production d’hydrogène: mécanismes et verrous biologiques

O2

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Mécanismes de résistance à l’O2 des hydrogénases à NiFe

e- e- e- e-

H+

H2

O2H2 O2

Site actif

à Fe ou

NiFe

CentresFe-S

H+e-

Canaux

hydrophobes

d’accès aux gaz

Baffert et al. (2008) Angewandte Chemie Int. Ed.

Leroux et al. (2008) Proc. Natl. Acad. Sci. USA

Dementin et al. (2009) JACS

Brevet 2007

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H2O2

H2

O2

Site Actifà Fe ou NiFe

ClustersFe-S

H+e-

Réduction de la sensibilité à l’O2 d’hydrogénases

Collaboration M. Rousset CNRS MarseilleANR HYLIOX, DIVHYDO, EngineeringH2Cyano

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Réduction de la sensibilité à l’O2 d’une hydrogénase à NiFe

V74

Tolérante à l’O 2

Activité catalytique

inactivée par l’O2

Canal hydrophobe

Brevet 2007Leroux et al. PNAS 2008Dementin et al. JACS 2009

M74

M122

Restriction du canal hydrophobe limitant l’accès de l’O2 au site actif

Introduction d’un résidu soufré facilitant la réactivation de l’enzyme

O2 10 µM

Time (min)

0 2 4 6 8 10 12

H/D

exc

hang

e ra

te (

rela

tive)

0

20

40

60

80

100

120

WTMMM

L122

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Spectrométrie de masse

Cristallographie

Purification et séquençage

TCAGTCACGTATTCTCCTCACCATCAGGTAGATGGCGCTCTCCTGATGAATATCGTGCAGCATGCTGAGCAGGGTTTTGCTCCACGCCTGCTGCTCGGGGGATTGCACAGCAAGTGCCGCATCAAACGCGTTTGCAAGCATCGCGATATGGTTACTGTCGATAACGATTTCGCCGTACTTCGGCACACCTTCCATCTTGCGCCGCGCGGTGCTCCCCGACTCCAGCGTGCCGATCCACGCCAGGTATTCTTGCCACGGGCAACTTAACGC …

Caractérisation

cinétique de

l’interaction avec l’O2

Détermination de la

structure 3D

time

0 500 1000 1500 2000 2500

curr

ent

0.0

1.0e-11

2.0e-11

2.0e-10

4.0e-10

6.0e-10

8.0e-10

H2HDD2O2

Echanges H2Chémochromie

Crible haut-débit d’H2ases issues de la biodiversité bactérienne

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Des microalgues pour la production de biocarburants ?

• Production d’hydrogène

• Production de lipides et de biodiesel

CO2

H2O

O2

N, P, S,…

H2

amidon

lipides

hydrogène

CO2

H2O

O2

N, P, S,…

H2

amidon

lipides

hydrogène

Amidon

Lipides

Hydrogène

Protéines

Une souche de C. reinhardtii accumule

jusqu’à 50% de lipides

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0 2 4 6 8 10

kCal/gm

Triacylglycérols

Protéines

Hydrates deCarbone

Contenu énergétique (kCal/gm)

Contenu énergétique des formes de Carbone organique

Glucose(CHOH)n

Acide oléiqueCH3(CH2)nCOOH

Les huiles produites par les microalgues représentent la forme la plus réduite de carbone disponible en quantité dans la nature

Réduction du carbone

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Neocholoris oleoabundans

Certaines microalgues accumulent jusqu’à 60% de leur

poids sec en lipides

10-1510-3050-70Productivité observée (T.ha -1.an-1)

PhotobioréacteursChamp

1.5315-20Productivité en lipides observée(T. ha-1.an-1)

75-90Productivité en lipides potentielle(T. ha-1.an-1)

0.040.040.4 - 40Coûts de production ($.kg -1)

30~1.25 %

60~2.5 %

150-180~6 - 7.5 %

Productivité maximale (T.ha -1.an-1)Rendement photosynthétique

Plantes C3Plantes C4Microalgues

Chlamydomonas reinhardtii

Potentiel pour la production de biodiesel et verrous

VerrousBiologigues

VerrousTechnologiques

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Domestiquer les microalgues pour nos besoins en énergie

Téosinte

HuileAmidon

Génomique, génétique

Biotechnologie

Maïs7,000 à 10,000 ans

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Phospholipides(PC, PE) (1-2%)

TAGs (98%)

Oléosines

Structure des corps lipidiques de plantes

Sunflower cotyledon oil bodies under TEM (PhD Thesis, Fred Beisson)

1 µm

Gouttelettes lipidiques de microalgues

Quelle structure pour les corps lipidiques de

microalgues ?Quelles protéines ?

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238 protéines identifiées

28 kDa protein

Acyl lipid metabolismLipases/hydrolasesSterol synthesisLipid trafficking

PhotosystemsRasGTPaseOthers

Analyse protéomique des gouttelettes lipidiques

Gra

die

nt

de

sucr

ose

Pro

téin

es t

ota

les

NaCl 2

M

Gra

die

nt

de

sucr

ose

Uré

e 6M

Hex

ane

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TAG

De novo FA synthesis

FFA

Acyl-CoA

G3P LPA PA DAGGPAT (9)

Lipase (24) DGTS

Betaine lipidsynthase (126)

PE LPELPEAT (33)

LACS (39)

Lipase (24)

Protéine structurale de 28 kDa ?

LPAAT (3)

Acyl-ACP

Fixed Carbon

Acetyl-CoA

Malonyl-CoA

Malonyl-ACP

ACCase

ACP, MCT

KASI, II, III

‘Prokaryotic’pathway: phospholipid and galactolipid

FATTraffic RE-

chloroplastesTGD1(1), TGD2 (1), TGD3 (9), ALA1 (23)

Désaturation des acides gras: FAD2 (1)

Biosynthèse des stérols/ergostérols : 4 protéines identifiées

Voie de biosynthèse des TAGs identifiées par protéomique

Hydrolases (9)

FASPLAM

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Elucider les mécanismes d’accumulation des TAG

Approche gène candidat : validation de gènes candidats identifiés par protéomique (protéine de structure candidate, voies de biosynthèse…)

Knock-down (miRNA) Activité enzymatique Sur-expression et/ou expression inductible (gènes régulateurs)

Approche génétique : criblage de mutants affectés dans le contenu en TAG

Mutants n’accumulant pas ou peu de TAGMutants accumulant des TAGs en l’absence de carenceMutants présentant des profils d’acides gras modifiés (désaturases)

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Criblage haut-débit de souches par cytométrie en flux

Souche non-accumulatrice

Spectre d’émission (exc. 480nm) :Lipides neutres (580nm)

Spectre d’émission (exc. 480nm) :Spectre d’émission (exc. 480nm) :Lipides neutres (580nm)Lipides neutres (580nm)

Acc

umul

atio

n de

TA

G

Fluo

roph

ore

Nile

red

Fluorescence chloro

phylle

Fluorescence chloro

phylle

Fluorescence Nile Fluorescence Nile redredFluorescence Nile Fluorescence Nile redred

Souche accumulatrice

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Emergence d’une approche intégrée: Biologie des systèmes

ANR ALGOMICS

Banque de mutants de microalguespour criblage

Stratégies d’optimisation (sur-expression,

inactivation de gènes, nouvelle mutagénèse dirigée,…)

Obtention de mutants-conversion photosynthétique-stockage de l’énergie (lipides, hydrates de carbone)

Identification des points de contrôle métaboliques

Caractérisation par des approches combinées -physiologie, transcriptomique, protéomique, métabolomique-modélisation

Cultures en chémostats

Modélisation de réseau métabolique

Transcriptome Protéome

Métabolome

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Mécanismes et verrous biologiques

Perception et signalisation

de la carence minérale

(N, P, S,…)

Grains d’amidon

Mécanismes de protection

contre les stress abiotiques

(stress oxydant)

CO2

H2O

O2

Oil bodies (RE)

Voies de biosynthèse et

dynamique des réserves

(amidon, lipides)

N, P, S,…

Thylacoïdes

Optimisation de la

photosynthèse pour le

stockage

Résistance des H2ases à l’O2

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Récolte

- Centrifugation

- Filtration

tangentielle

- Floculation

- Décantation

Sélection et

optimisation de

souches

- Optimisation de

la productivité de

composés d’intérêt

- Adaptation aux

contraintes des

systèmes de

culture

Fermentalg

Systèmes de culture

Salinalgue

Des verrous biologiques et technologiques

Extraction

composés

d’intérêt

- CO2

supercritique

- Solvants

- Techniques

séparatives

Valorisation

énergétique

biomasse

résiduelle

- Méthanisation

- Production

éthanol ou H2

R&D Biotechnologique Technologique

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Vol

u me

de m

arch

é(M

€ )

Produits HVA :

EPA/DHApigments,

protéines,…

Biodiesel(autotrophie)

Biohydrogène

Effort de recherche ( M€ x h. ans)

Des marchés existants aux biocarburants : les verrous

- Sensibilité des H 2ases à l’O 2- Collecte/Stockage H 2- Filière aval (PAC, etc)

- Performances souches- Performances, coûts des

photobioréacteurs- Gestion flux (lumière, T°,

…)

10

102

103

104

Biodiesel(hétérotrophie)

Sélection et performances des souches

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Laboratoire de Bioénergétique et Biotechnologie des Bactéries et Microalgues (LB3M)

Techniciens

ADRIANO Jean-Marc AUROY PascalineBEYLY AudreyCARDETTINI Véronique

Post-docs

TOLLETER Dimitri SCHULZ-RAFFELT Miriam

Thèses

CANO MélissaCHOCHOIS VincentNGUYEN Thi Hoa MaiVERDIER Gaëtan

HELIOBIOTEC CPER (2007-2013)DIVHYDO (2006-2009)

SHAMASH(2006-2009)HYLIOX (2008-2011) ALGOMICS (2009-2012)

FP7 SOLAR-H2

FP6 SOLAR-H

Chercheurs & ingénieurs

BEISSON FrédéricBILLON EmmanuelleCARRIER Patrick COURNAC Laurent CUINE StéphanGUEDENEY GenevièveLI YonghuaMIRABELLA BorisPELTIER GillesPUPPO RémyRICHAUD PierreSAHUT Claire

Collaborations

Steven BALL, Université de LilleFabrice FRANCK, Université de LiègeJean-David ROCHAIX, Université GenèveMarc ROUSSET CNRS, Marseille

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- parc de photo-bioréacteurs instrumentés,

- plateau technique de spectrométrie de masse (analyse des gaz et traçage isotopique),

- ensemble de techniques séparatives : GC-MS, HP-TLC, UPLC-MS-MS (lipidomique),

- méthodes biophysiques (fluorescence, changements d’absorption) pour la caractérisation de souches et le criblage haut débit,

- cytomètre en flux, lecteurs de microplaques pour le criblage haut débit,

- chambres climatiques en conditions contrôlées pour la culture de microalgues,

- plus de 500 souches cryo-conservées,

- robot de cristallisation, qPCR,…

HélioBiotecPLATE-FORME DE RECHERCHE PARTENARIALE BIOTECHNOLOGIES ET BIOENERGIES CPER 2007-2013

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Propriétés des huiles et composition en acides gras

Huile = triglycérides (TAGs)

glycérol

3 acides gras

0,0

10,0

20,0

30,0

40,0

16:0

16:1(

7)16

:1(9)

16:1(

3t)

16:2(

7,10

)

16:3(

7,10

,13)

16:4(

4,7,1

0,13)

18:0

18:1(

9)18

:1(11

)18

:2(9,

12)

18:3(

5,9,1

2)

18:3(

9,12

,15)

18:4(

5,9,1

2,15

)

Mol%

Application biodiesel :peu d’insaturations (résistance à l’oxydation)