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Minralisation par voie humidePremire tape avant le dosage de lazote total par la mthode de KjeldalhJohan Gustav Christoffer Thorsager Kjeldahl (1849 1900) Chimiste danois

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Les deux types de minralisation

Par voie sche

Par voie humide

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But, principe et intrtsMinralisation Par voie sche Par voie humide

But

Transformer les matires organiques en matires minrales Par utilisation doxydant en milieu acide concentr (H2SO4), chaud, en prsence de catalyseurs Dterminer lazote total dun compos organique

Principe

Par une incinration

Intrt

Dterminer le pourcentage de matire minrale (cendre) un compos organique

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Minralisation par voie humide :quation de la raction

Oxydant, catalyseurs, Temprature

(C, H, O, N) + H2SO4 excs matires organiques

CO2 + H2O + (NH4)2SO4 sulfate dammonium

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Minralisation par voie humide :

Matriel, risque et scurit

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Risques et scuritH2SO4 concentr : Corrosif

Chauffage : Risque de brlure thermique et dexplosion Attention : lacide sulfurique, au cours de la minralisation se dcompose partiellement en vapeurs toxiques trs irritantes.

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Travail obligatoire sous hotte ventile

1re STL BGB Minralisateur (digesteur) Matras minralisation

TP Biochimie Verrerie et produitsMatriel : - Pierre ponce (3-4) - Pipette gradue de 5 mL (1) - Gants thermique (1) - Entonnoir (1) - Eprouvette de 10 mL (1) - Fiole jauge de 10 mL (1) - Bcher de 100 mL (1) -Parafilm (1) Solution : - Lait (5 mL) - H2SO4 concentr (5 mL) - Catalyseur : * Oxyde de mercure (10g) * CuSO4, 5H2O (10g) * K2SO4 (100g)

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Minralisation par voie humide :Rles et composition du catalyseurOn utilise un mlange de catalyseurs, dit catalyseur de Dumazert :

- Qui augmentent la temprature dbullition de H2SO4 (ex : K2SO4) ; - Qui facilitent la raction de minralisation (ex : sels de cuivre, de slnium) ; - Qui facilitent la raction doxydation (ex : oxyde de mercure)

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Minralisation par voie humide :

Le mode opratoire

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Introduire dans un matras : - 5,00 mL de produit biologique homognis tudier (ici lait) ; - 5 mL de H2SO4 concentr (verser lentement) ; - 1 pince de catalyseur (bien au fond du matras) ; - 4 5 pierres ponce ; - Mlanger.

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- Placer sur la rampe de minralisation et commencer chauffer doucement. - Agiter de temps en temps par rotation et tout au long de la minralisation. Trs rapidement le lait va noircir, signe des ractions de minralisation.

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- Quand les vapeurs commencent se former, mettre un entonnoir sur le col du matras (pour rcuprer les produits de dcomposition partielle qui svaporent)

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- Maintenir bullition jusqu ce que le liquide se dcolore et poursuivre encore 30 minutes.

- Laisser refroidir sous la hotte.

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- Diluer progressivement le minralisat avec 50,00 mL leau distille ( la pipette jauge) sous un courant deau froide tout en agitant doucement.

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- Transvaser le contenu du matras dans une fiole jauge de 100,00 mL. - Ajouter les eaux de rinage du matras, puis ajuster au trait de jauge avec de leau distille.

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-Boucher la fiole avec un bouchon et du Parafilm pour stockage. - Noter d=1/20(5,00 mL de lait dans 100,00 mL).

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Dosage de lazote total par la mthode Kjeldahl :Le matriel

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Ampoule de rserve(lessive de soude*)

Pige vapeurs lourdes

Sortie deau Rfrigrant Arrive deau Allonge boule Bcher :- Acide borique (directe) - ou Acide fort (indirecte)

Raccord tulipe

Ballon distillation : - minralist ;- eau distille ; - pierre ponce ; - lessive de soude *

SupportChauffe ballon

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