liste et description des méthodes d'analyses visées à l

II

(Communications)

COMMUNICATIONS PROVENANT DES INSTITUTIONS ORGANES ET ORGANISMES DE LUNION EUROPEacuteENNE

COMMISSION EUROPEacuteENNE

Liste et description des meacutethodes danalyses viseacutees agrave larticle 120 octies premier alineacutea du regraveglement (CE) n o 12342007 du Conseil ( 1 )

[publieacutees conformeacutement agrave lrsquoarticle 15 paragraphe 2 du regraveglement (CE) n o 6062009 de la Commission du 10 juillet 2009 ( 2 )]

(2010C 4301)

Le tableau ci-apregraves regroupe la liste des meacutethodes danalyses qui sont applicables pour le controcircle des limites et des exigences fixeacutees dans la reacuteglementation communautaires pour la production des produits vitivinicoles Dans la troisiegraveme colonne on trouvera pour chaque paramegravetre concerneacute la reacutefeacuterence de la meacutethode danalyse correspondante deacutecrite dans le laquoRecueil des meacutethodes internationales danalyse des vins et des moucirctsraquo de lOIV dans la derniegravere eacutedition (2009) disponible agrave la date de cette publication Pour chaque paramegravetre seules les meacutethodes de reacutefeacuterence (laquoType Iraquo ou laquoType IIraquo dans la classification OIV) sont deacutecrites agrave lexception des paramegravetres pour lesquelles il ny a actuellement pas de meacutethode de type I ou II valideacutee La description des meacutethodes figure agrave lAnnexe de la communication

Rappel

Le Recueil de lOIV eacutetablit dans son annexe A section I la deacutefinition des diffeacuterents types de meacutethodes danalyse et notamment le type I (Meacutethode de reacutefeacuterence critegravere) le type II (Meacutethode de reacutefeacuterence) et le type IV (Meacutethode provisoire)

Les meacutethodes danalyse pour le plomb et le cadmium sont maintenant deacutecrites dans le regraveglement (CE) n o 3332007 de la Commission du 28 mars 2007 (annexe C-3) ( 3 ) Par ailleurs le regraveglement (CE) n o 4012006 du 23 feacutevrier 2006 ( 4 )eacutetablit des critegraveres geacuteneacuteraux pour les meacutethodes danalyse pour lochrashytoxine A dans son annexe II4 et il nest donc pas neacutecessaire de deacutecrire pour cette substance une meacutethode speacutecifique aux produits vitivinicoles

LISTE DES METHODES DANALYSE

N o Paramegravetre Meacutethode du Recueil de lOIV Type

1 Masse volumique densiteacute AS-2-01-MASVOL I

2 Indice reacutefractomeacutetrique AS-2-02-SUCREF I

3 Extrait sec total AS-2-03-EXTSEC I

4 Rapport isotopique 18 O 16 O de leau du vin AS-2-09-MOUO18 II

FR 1922010 Journal officiel de lrsquoUnion europeacuteenne C 431

( 1 ) JO L 299 du 16112007 ( 2 ) JO L193 du 24072009 p1 ( 3 ) JO L 88 du 2932007 p 29 ( 4 ) JO L 70 du 932006 p 12


5 Indice de Folin AS-2-10-INDFOL IV

6 Teneur en sucre (= glucose+fructose) AS-311-02-GLUFRU II

7 Teneur en saccharose (mesure HPLC) AS-311-03-SUCRES II

8 Reacutesonance Magneacutetique Nucleacuteaire - Deuteacuterium de leacutethanol du vin

AS-311-O5-ENRRMN (en reacutevision) I

9 Titre Alcoomeacutetrique Volumique en (TAV) AS-312-01-TALVOL I

10 Rapport isotopique 13 C 12 C de leacutethanol du vin

AS-312-06-ETHANO II

11 Aciditeacute totale AS-313-01-ACITOT I

12 Aciditeacute volatile AS-313-02-ACIVOL I

13 Acide citrique AS-313-09-ACIENZ II

14 Acide sorbique AS-313-14-ACISOR IV

15 pH moucircts AS-313-15-PH I

16 Acide ascorbique AS- 313-22 ACASCO II

17 CO 2 en gl AS-314-01-DIOCAR II

18 CO 2 en gl (manomeacutetrie) AS-314-04-CO2MAN II

19 Surpression CO 2 AS-314-02-SURPRES I

20 Lysozyme AS-315-14-LYSOZY IV

21 Sulfate de potassium AS-321-05-SULFAT II

22 Fer AS-322-05-FER IV

23 Cuivre AS-322-06-CUIVRE IV

24 Sulfites (SO 2 ) ou Dioxyde de soufre total

AS-323-04-DIOSU II

La description de quelques meacutethodes drsquoanalyse fait lrsquoobjet drsquoune mise agrave jour par les instances de lrsquoOIV Ces descriptions seront publieacutees dans une prochaine Communication de la Commission degraves qursquoun texte mis agrave jour sera publieacute par lrsquoOIV dans leacutedition 2010 du Recueil des Meacutethode Internationales danalyse de lOIV

FR C 432 Journal officiel de lrsquoUnion europeacuteenne 1922010

ANNEXE

TABLE DES MATIEgraveRES

1 MASSE VOLUMIQUE Agrave 20 degC ET DENSITEacute RELATIVE Agrave 20 degC (OIV - AS2 - 01- MASVOL) mdash Meacutethode Type I 4

2 EacuteVALUATION DE LA TENEUR EN SUCRES DES MOUcircTS DES MOUcircTS CONCENTREacuteS ET DES MOUcircTS CONCENTREacuteS RECTIFIEacuteS PAR REacuteFRACTOMEacuteTRIE (OIV - AS2 - 02- SUCREF) mdash Meacutethode Type I 8

3 EXTRAIT SEC TOTAL (OIV-AS-2-03-EXTSEC) Matiegraveres segraveches totales mdash Meacutethode Type I 10

4 DEacuteTERMINATION DU RAPPORT ISOTOPIQUE 18 O 16 O DE LEAU DES VINS (OIV-AS-2-09-MOUO18) mdash Meacutethode Type II 11

5 INDICE DE FOLIN-CIOCALTEU (OIV-AS-2-10-INDFOL) mdash Meacutethode Type IV 12

6 GLUCOSE ET FRUCTOSE (OIV-AS-311-02-GLUFRU) mdash Meacutethode Type II 14

7 DOSAGE DES SUCRES PAR HPLC (SACCHAROSE) (OIV-AS-311-03-SUCRES) mdash Meacutethode Type II 17

8 DEacuteTECTION DE LENRICHISSEMENT DES MOUcircTS DE RAISINS DES MOUcircTS DE RAISINS CONCENTREacuteS DES MOUcircTS DE RAISINS CONCENTREacuteS RECTIFIEacuteS ET DES VINS PAR APPLICATION DE LA REacuteSONANCE MAGNEacuteTIQUE NUCLEacuteAIRE DU DEUTEacuteRIUM (OIV-AS-311-05-ENRRMN) mdash Meacutethode Type I 18

9 TITRE ALCOOMEacuteTRIQUE VOLUMIQUE (OIV-AS-312-01-TALVOL) mdash Meacutethode Type I 19

10 DEacuteTERMINATION DU RAPPORT ISOTOPIQUE 13 C 12 C PAR SPECTROMEacuteTRIE DE MASSE ISOTOPIQUE DE LEacuteTHANOL DU VIN OU DE LEacuteTHANOL OBTENU PAR FERMENTATION DES MOUcircTS DES MOUcircTS CONCENTREacuteS OU DES MOUcircTS CONCENTREacuteS RECTIFIEacuteS (OIV-AS-312-06-ETHANO) mdash Meacutethode Type II 20

11 ACIDITEacute TOTALE (OIV - AS-313-01-ACITOT) mdash Meacutethode Type I 27

12 ACIDITEacute VOLATILE (OIV - AS-313-02-ACIVOL) mdash Meacutethode Type I 30

13 ACIDE CITRIQUE (OIV -AS-313-09-ACIENZ) mdash Meacutethode Type II 33

14 ACIDE SORBIQUE (OIV - AS-313-14-ACISOR) mdash Meacutethode Type IV 36

15 pH (OIV - AS-313-15-PH) mdash Meacutethode Type I 39

16 DOSAGE SIMULTANE DE LACIDE L-ASCORBIQUE ET DE LACIDE D-ISO-ASCORBIQUE PAR HPLC ET DEacuteTECTION UV (OIV-AS-313-22-ACASCO) mdash Meacutethode Type II 41

17 DIOXYDE DE CARBONE (OIV - AS-314-01-DIOCAR) mdash Meacutethode Type II 45

18 DOSAGE DU DIOXYDE DE CARBONE DANS LE VIN PAR METHODE MANOMETRIQUE (OIV ndash AS314-04- CO2MAN) mdash Meacutethode Type II 47

19 MESURE DE LA SURPRESSION DES VINS MOUSSEUX ET PETILLANTS (OIV - AS-314-02-SURPRES) mdash Meacutethode Type I 48

20 Dosage du lysozyme dans le vin par HPLC (OIV-AS-315-14) mdash Meacutethode Type IV 51

21 SULFATES (OIV- AS-321-05-SULFAT) mdash Meacutethode Type II 54

22 FER (OIV - AS-322-05-FER) mdash Meacutethode Type IV 55

23 CUIVRE (OIV ndash AS 322-06) mdash Meacutethode Type IV 56

24 DIOXYDE DE SOUFRE (OIV - AS-323-04-DIOSU) mdash Meacutethode Type II 58


1 MASSE VOLUMIQUE Agrave 20 degC ET DENSITEacute RELATIVE Agrave 20 degC (OIV - AS2 - 01- MASVOL) mdash METHODE TYPE I

1 DEacuteFINITIONS

La masse volumique est le quotient de la masse dun certain volume de vin ou de moucirct agrave 20 degC par ce volume Elle sexprime en grammes par millilitre et son symbole est ρ 20 degC

La densiteacute relative agrave 20 degC ou densiteacute 20 degC20 degC est le rapport exprimeacute en nombre deacutecimal de la masse dun certain volume de vin ou de moucirct agrave 20 degC agrave la masse du mecircme volume deau agrave la mecircme tempeacuterature Son symbole estd 20 degC

20 degC

2 PRINCIPE DES MEacuteTHODES

La masse volumique et la densiteacute relative agrave 20 degC sont deacutetermineacutees sur leacutechantillon pour essai

soit par pycnomeacutetrie meacutethode de reacutefeacuterence

soit par densimeacutetrie par la balance hydrostatique ou par densimeacutetrie eacutelectronique

Remarque

Pour les deacuteterminations tregraves preacutecises la masse volumique doit ecirctre corrigeacutee de laction du dioxyde de soufre

ρ 20 degC = ρprime 20 degC ndash 00006 times S

ρ 20 degC = masse volumique corrigeacutee

ρprime 20 degC = masse volumique observeacutee

S = dioxyde de soufre total en gl

3 TRAITEMENT PREacuteALABLE DE LEacuteCHANTILLON

Si le vin ou le moucirct contient des quantiteacutes notables de dioxyde de carbone en chasser la plus grande quantiteacute par agitation de 250 ml de vin dans un flacon de 1 000 ml ou par filtration sous pression reacuteduite sur 2 g de coton placeacute dans une allonge

4 MEacuteTHODE DE REacuteFEacuteRENCE

41 Appareillage

Mateacuteriel courant de laboratoire et notamment

411 Pycnomegravetre ( 1 ) en verre pyrex de 100 ml de capaciteacute environ avec un thermomegravetre mobile agrave rodage eacutemeri gradueacute par dixiegraveme de degreacute de 10 agrave 30 degC Ce thermomegravetre doit ecirctre controcircleacute (figure 1)

Figure 1

Pycnomegravetre et son flacon tare

Ce pycnomegravetre comporte un tube lateacuteral de 25 mm de longueur de 1 mm au plus de diamegravetre inteacuterieur termineacute par une partie conique rodeacutee Ce tube lateacuteral peut ecirctre coiffeacute par un laquobouchon reacutecepteurraquo constitueacute par un tube conique rodeacute termineacute par une partie effileacutee Ce bouchon sert de chambre de dilatation


( 1 ) Tout pycnomegravetre de caracteacuteristiques eacutequivalentes peut ecirctre employeacute

Les deux rodages de lappareil doivent ecirctre faits avec un tregraves grand soin

412 Flacon tare de mecircme volume exteacuterieur (agrave moins de 1 ml pregraves) que le pycnomegravetre et de masse eacutegale agrave la masse du pycnomegravetre plein dun liquide de densiteacute 101 [solution agrave 2 pour 100 (mv) de chlorure de sodium]

Enceinte calorifugeacutee sadaptant exactement au corps du pycnomegravetre

413 Balance agrave deux plateaux de porteacutee 300 g au moins sensible au dixiegraveme de milligramme

ou

balance monoplateau de porteacutee 200 g au moins sensible au dixiegraveme de milligramme

42 Eacutetalonnage du pycnomegravetre

Leacutetalonnage du pycnomegravetre comporte la deacutetermination des caracteacuteristiques suivantes

mdash tare agrave vide

mdash volume agrave 20 degC

mdash masse en eau agrave 20 degC

421 Utilisation dune balance agrave deux plateaux

Le flacon tare eacutetant placeacute sur le plateau de gauche de la balance et le pycnomegravetre propre et sec muni de son laquobouchon reacutecepteurraquo sur le plateau droit reacutealiser leacutequilibre en placcedilant agrave cocircteacute du pycnomegravetre des masses marqueacutees soit p grammes

Remplir avec soin le pycnomegravetre avec de leau distilleacutee agrave la tempeacuterature ambiante mettre en place le thermoshymegravetre essuyer soigneusement le pycnomegravetre et le placer dans lenceinte calorifugeacutee agiter par retournement jusquagrave ce que la tempeacuterature lue sur le thermomegravetre soit constante Affleurer exactement au bord supeacuterieur du tube lateacuteral Essuyer ce tube lateacuteral placer le bouchon reacutecepteur lire la tempeacuterature t degC avec soin et la corriger eacuteventuellement de linexactitude de leacutechelle du thermomegravetre Peser le pycnomegravetre plein deau soit pprime la masse en grammes qui reacutealise leacutequilibre

Calculs

Tare du pycnomegravetre vide

Tare agrave vide= p + m

m = masse dair contenue dans le pycnomegravetre

m = 00012 (p ndash pprime)

Volume agrave 20 degC

V 20 degC = (p + m ndash pprime) times F t

F t = facteur releveacute dans la table I pour la tempeacuterature t degC

V 20 degC doit ecirctre connu agrave plusmn 0001 ml pregraves

Masse en eau agrave 20 degC

M 20 degC = V 20 degC times 0998203

0998203 = masse volumique de leau agrave 20 degC

422 Utilisation dune balance monoplateau

Deacuteterminer

mdash la masse du pycnomegravetre propre et sec P

mdash la masse du pycnomegravetre plein deau agrave t degC P 1 en suivant les indications deacutecrites au point 421

mdash la masse du flacon tare T 0


Calculs


Tare agrave vide= P ndash m

m= masse dair contenue dans le pycnomegravetre

m= 00012 (P 1 ndash P)


V 20 degC = [P 1 ndash (P ndash m)] times F t


Le volume agrave 20 degC doit ecirctre connu agrave plusmn 0001 ml pregraves



0998203= masse volumique de leau agrave 20 degC

43 Technique dune mesure


Peser le pycnomegravetre plein de leacutechantillon preacutepareacute pour essais (point 3) en suivant les indications deacutecrites au point 421

Soit pPrime la masse en grammes qui reacutealise leacutequilibre agrave t degC

Masse du liquide contenu dans le pycnomegravetre = p + m ndash pPrime

Masse volumique apparente agrave t degC

ρ t degC = (p + m ndash pPrime)(V 20 degC )

Calculer la masse volumique agrave 20 degC agrave laide dune des tables de correction ci-apregraves suivant la nature du liquide eacutetudieacute vin sec (table II) moucirct naturel ou concentreacute (table III) vin doux (table IV)

On exprime la densiteacute 20 degC20 degC du vin en divisant la masse volumique agrave 20 degC par 0998203


Peser le flacon tare soit T 1 sa masse

Calculer dT = T 1 ndash T 0

Masse du pycnomegravetre vide au moment de la mesure = P ndash m + dT

Peser le pycnomegravetre plein de leacutechantillon preacutepareacute pour essais (point 3) en suivant les indications deacutecrites au point 421 Soit P 2 sa masse agrave t degC

Masse du liquide contenu dans le pycnomegravetre agrave t degC = P 2 ndash (P ndash m + dT)


ρ t degC = (P 2 ndash (P ndash m + dT))(V 20 degC )

Calculer la masse volumique agrave 20 degC du liquide eacutetudieacute vin sec moucirct naturel et concentreacute vin doux comme il est indiqueacute au point 431

La densiteacute 20 degC20 degC est obtenue en divisant la masse volumique agrave 20 degC par 0998203

433 Reacutepeacutetabiliteacute sur la masse volumique

pour les vins secs et moelleux r = 000010

pour les vins doux r = 000018

434 Reproductibiliteacute sur la masse volumique

pour les vins secs et moelleux R = 000037

pour les vins doux R = 000045


TABLE I

Facteurs F

par lesquels il faut multiplier la masse de leau contenue dans le pycnomegravetre en pyrex agrave t degC pour calculer le volume du pycnomegravetre agrave 20 degC

[Se reacutefeacuterer agrave la table I de lrsquoannexe II de la meacutethode AS2 - 01 deacutecrite dans le Recueil International des meacutethodes drsquoanalyse de lrsquoOIV]

TABLE II

Corrections c de tempeacuterature sur la masse volumique des vins secs et des vins secs deacutebarrasseacutes dalcool mesureacutee dans un pycnomegravetre en verre pyrex agrave t degC pour la ramener agrave 20 degC

[Se reacutefeacuterer agrave la table II de lrsquoannexe II de la meacutethode AS2 - 01 deacutecrite dans le Recueil International des meacutethodes drsquoanalyse de lrsquoOIV]

ρ 20 = ρ t plusmn (c1 000) ndash si t degC est infeacuterieur agrave 20 degC + si t degC est supeacuterieur agrave 20 degC

TABLE III

Corrections c de tempeacuterature sur la masse volumique des moucircts naturels et des moucircts concentreacutes mesureacutee agrave t degC agrave laide dun pycnomegravetre en verre pyrex pour ramener le reacutesultat agrave 20 degC

[Se reacutefeacuterer agrave la table III de lrsquoannexe II de la meacutethode AS2 - 01 deacutecrite dans le Recueil International des meacutethodes drsquoanalyse de lrsquoOIV]


TABLE IV

Corrections c de tempeacuterature sur la masse volumique des vins de 13 vol et plus contenant du sucre reacutesiduel mesureacutee agrave laide dun pycnomegravetre en verre pyrex agrave t degC pour la ramener agrave 20 degC

[Se reacutefeacuterer agrave la table IV de lrsquoannexe II de la meacutethode AS2 - 01 deacutecrite dans le Recueil International des meacutethodes drsquoanalyse de lrsquoOIV]



2 EacuteVALUATION DE LA TENEUR EN SUCRES DES MOUcircTS DES MOUcircTS CONCENTREacuteS ET DES MOUcircTS CONCENTREacuteS RECTIFIEacuteS PAR REacuteFRACTOMEacuteTRIE (OIV - AS2 - 02- SUCREF) mdash MEacuteTHODE TYPE I

1 PRINCIPE DE LA MEacuteTHODE

Lindice de reacutefraction agrave 20 degC exprimeacute en indice absolu ou en pourcentage en masse de saccharose est reporteacute dans la table correspondante pour obtenir la teneur en sucres en grammes par litre et en grammes par kilogramme des moucircts des moucircts concentreacutes et du moucirct concentreacute rectifieacute

2 APPAREILLAGE

21 Reacutefractomegravetre du type Abbeacute

Le reacutefractomegravetre utiliseacute doit ecirctre pourvu dune eacutechelle indiquant

mdash soit les pourcentages en masse de saccharose agrave 01

mdash soit les indices de reacutefraction avec quatre deacutecimales

Le reacutefractomegravetre doit ecirctre pourvu dun thermomegravetre dont leacutechelle seacutetendra au moins de + 15 degC agrave + 25 degC et dun dispositif de circulation deau permettant de faire les mesures agrave une tempeacuterature de 20 degC plusmn 5 degC

Les instructions opeacuteratoires de cet instrument doivent ecirctre strictement suivies notamment en ce qui concerne leacutetalonnage et la source lumineuse

3 PREacutePARATION DE LEacuteCHANTILLON

31 Moucircts et moucircts concentreacutes

Passer les moucircts eacuteventuellement agrave travers une gaze segraveche plieacutee en quatre et apregraves avoir eacutelimineacute les premiegraveres gouttes de filtrat faire la deacutetermination sur le produit filtreacute

32 Moucircts concentreacutes rectifieacutes

Utiliser selon sa concentration soit le moucirct concentreacute rectifieacute soit la solution obtenue en portant agrave 500 g avec de leau 200 g de moucirct concentreacute rectifieacute exactement peseacutes

4 MODE OPEacuteRATOIRE

Amener leacutechantillon agrave une tempeacuterature voisine de 20 degC Deacuteposer une petite prise dessai sur le prisme infeacuterieur du reacutefractomegravetre en veillant agrave ce que les prismes eacutetant presseacutes lun contre lautre la prise dessai couvre uniformeacutement la surface du verre et effectuer la mesure conformeacutement aux instructions opeacuteratoires de lappareil utiliseacute

Lire le pourcentage en masse de saccharose agrave 01 pregraves ou relever lindice de reacutefraction avec quatre deacutecimales

Effectuer au moins deux deacuteterminations sur le mecircme eacutechantillon preacutepareacute Relever la tempeacuterature t degC

5 CALCULS

51 Correction de tempeacuterature

511 Appareils gradueacutes en en masse de saccharose utiliser la table I pour la correction de tempeacuterature

512 Appareils gradueacutes en indices de reacutefraction reporter lindice mesureacute agrave t degC dans la table II pour obtenir (colonne 1) la valeur correspondante du pourcentage en masse de saccharose agrave t degC Cette valeur est corrigeacutee de la tempeacuterature et exprimeacutee agrave 20 degC au moyen de la table I

52 Teneur en sucres des moucircts et des moucircts concentreacutes

Reporter le pourcentage en masse de saccharose agrave 20 degC dans la table II pour obtenir la teneur en sucres en grammes par litre et en grammes par kilogramme La teneur en sucres est exprimeacutee en sucre interverti avec une deacutecimale

53 Teneur en sucres du moucirct concentreacute rectifieacute

Reporter le pourcentage en masse de saccharose agrave 20 degC dans la table III pour obtenir la teneur en sucres en grammes par litre et en grammes par kilogramme La teneur en sucres est exprimeacutee en sucre interverti avec une deacutecimale

Si la mesure a eacuteteacute effectueacutee sur le moucirct concentreacute rectifieacute dilueacute multiplier le reacutesultat par le facteur de dilution

54 Indice de reacutefraction des moucircts des moucircts concentreacutes et des moucircts concentreacutes rectifieacutes

Reporter le pourcentage en masse de saccharose agrave 20 degC dans la table II pour obtenir lindice de reacutefraction agrave 20 degC Cet indice est exprimeacute avec quatre deacutecimales

Note Le titre alcoomeacutetrique en puissance des moucircts des moucircts concentreacutes et des moucircts concentreacutes rectifieacutes peut ecirctre deacutetermineacute en utilisant le tableau de correspondance figurant agrave lrsquoannexe I du regraveglement (CE) n o 16232000 de la Commission du 25 Juillet 2000 (JOCE L 194 du 31 juillet 2000)


TABLE I

Correction agrave apporter dans le cas ougrave le pourcentage en masse de saccharose a eacuteteacute deacutetermineacute agrave une tempeacuterature diffeacuterente de 20 degC

[se reacutefeacuterer agrave la table I de lrsquoannexe de la meacutethode AS2 - 02 deacutecrite dans le Recueil International des meacutethodes drsquoanalyse de lrsquoOIV]

TABLE II

Table donnant la teneur en sucres des moucircts et des moucircts concentreacutes en grammes par litre et en grammes par kilogramme deacutetermineacutee au moyen dun reacutefractomegravetre gradueacute soit en pourcentage en masse de saccharose agrave

20 degC soit en indice de reacutefraction agrave 20 degC La masse volumique agrave 20 degC est eacutegalement donneacutee

[se reacutefeacuterer agrave la table II de lrsquoannexe de la meacutethode AS2 - 02 deacutecrite dans le Recueil International des meacutethodes drsquoanalyse de lrsquoOIV]

TABLE III

Table donnant la teneur en sucre des moucircts concentreacutes rectifieacutes en grammes par litre et en grammes par kilogramme deacutetermineacutee au moyen dun reacutefractomegravetre gradueacute soit en pourcentage en masse de saccharose agrave


[se reacutefeacuterer agrave la table III de lrsquoannexe de la meacutethode AS2 - 02 deacutecrite dans le Recueil International des meacutethodes drsquoanalyse de lrsquoOIV]


3 EXTRAIT SEC TOTAL (OIV-AS-2-03-EXTSEC) MATIEgraveRES SEgraveCHES TOTALES mdash MEacuteTHODE TYPE I

1 DEacuteFINITION

Lextrait sec total ou matiegraveres segraveches totales est lensemble de toutes les substances qui dans des conditions physiques deacutetermineacutees ne se volatilisent pas Ces conditions physiques doivent ecirctre fixeacutees de telle maniegravere que les substances composant cet extrait subissent le minimum dalteacuteration

Lextrait non reacuteducteur est lextrait sec total diminueacute des sucres totaux

Lextrait reacuteduit est lextrait sec total diminueacute des sucres totaux exceacutedant 1 gl du sulfate de potassium exceacutedant 1 gl du mannitol sil y en a et de toutes les substances chimiques eacuteventuellement ajouteacutees au vin

Le reste dextrait est lextrait non reacuteducteur diminueacute de laciditeacute fixe exprimeacutee en acide tartrique

Lextrait est exprimeacute en grammes par litre et il doit ecirctre deacutetermineacute agrave 05 g pregraves


[La description de cette meacutethode drsquoanalyse fait lrsquoobjet drsquoune mise agrave jour par les instances de lrsquoOIV Elle sera publieacutee dans une prochaine Communication de la Commission degraves qursquoun texte mis agrave jour sera publieacute par lrsquoOIV dans leacutedition 2010 du Recueil des Meacutethode Internationales danalyse de lOIV A titre indicatif dans lrsquoattente de cette publication on peut se reacutefeacuterer au chapitre 4 de lannexe du Regraveglement (CEE) n o 267690 de la Commission]


4 DEacuteTERMINATION DU RAPPORT ISOTOPIQUE 18 O 16 O DE LEAU DES VINS (OIV-AS-2-09-MOUO18) mdash MEacuteTHODE TYPE II

(pm)



5 INDICE DE FOLIN-CIOCALTEU (OIV-AS-2-10-INDFOL) mdash MEacuteTHODE TYPE IV

1 DEacuteFINITION

Lindice de Folin-Ciocalteu est le reacutesultat obtenu par lapplication de la meacutethode deacutecrite ci-apregraves

2 PRINCIPE

Lensemble des composeacutes pheacutenoliques du vin est oxydeacute par le reacuteactif de Folin-Ciocalteu Ce dernier est constitueacute par un meacutelange dacide phosphotungstique (H 3 PW 12 O 40 ) et dacide phosphomolybdique (H 3 PMo 12 O 40 ) qui est reacuteduit lors de loxydation des pheacutenols en meacutelange doxydes bleus de tungstegravene (W 8 O 23 ) et de molybdegravene (Mo 8 O 23 )

La coloration bleue produite possegravede une absorption maximum aux environs de 750 nm Elle est proportionshynelle au taux de composeacutes pheacutenoliques

3 REacuteACTIFS

Les reacuteactifs doivent ecirctre de qualiteacute analytique Leau utiliseacutee doit ecirctre de leau distilleacutee ou de leau de pureteacute eacutequivalente

31 Reacuteactif de Folin-Ciocalteu

Ce reacuteactif est disponible dans le commerce precirct agrave lemploi Il peut ecirctre preacutepareacute de la faccedilon suivante 100 g de tungstate de sodium (Na 2 WO 4 2H 2 O) et 25 g de molybdate de sodium (Na 2 MoO 4 2H 2 O) sont dissous dans 700 ml deau distilleacutee ajouter 50 ml dacide phosphorique agrave 85 (ρ 20 = 171 gml) 100 ml dacide chlorhyshydrique concentreacute (ρ 20 = 119 gml) Porter agrave leacutebullition sous reflux durant 10 heures ajouter ensuite 150 g de sulfate de lithium (Li 2 SO 4 H 2 O) quelques gouttes de brome et porter agrave nouveau agrave leacutebullition durant 15 minutes Refroidir et compleacuteter agrave 1 litre avec de leau distilleacutee

32 Carbonate de sodium (Na 2 CO 3 ) anhydre en solution agrave 20 (mv)

4 APPAREILLAGE


41 Fioles jaugeacutees de 100 ml

42 Spectrophotomegravetre permettant de travailler agrave 750 nm


51 Cas des vins rouges

Dans une fiole jaugeacutee de 100 ml (point 41) introduire en respectant lordre suivant

1 ml de vin dilueacute au 15 e

50 ml deau distilleacutee

5 ml de reacuteactif de Folin-Ciocalteu (31)

20 ml de solution de carbonate de sodium (32)

Porter agrave 100 ml avec de leau distilleacutee

Agiter pour homogeacuteneacuteiser Attendre 30 minutes pour avoir une stabilisation de la reacuteaction Deacuteterminer labsorbance agrave 750 nm sous 1 cm par rapport agrave un teacutemoin preacutepareacute avec de leau distilleacutee agrave la place du vin

Si labsorbance lue nest pas voisine de 03 il convient de modifier la dilution du vin

52 Cas des vins blancs

Opeacuterer dans les mecircmes conditions sur 1 ml de vin non dilueacute

53 Cas des moucircts concentreacutes rectifieacutes

531 Preacuteparation de leacutechantillon

Utiliser la solution dont la teneur en sucres est de 25 pour 100 (mm) (25 o Brix) preacutepareacutee comme il est indiqueacute au chapitre laquopHraquo au point 412


532 Mesure

Opeacuterer comme il est deacutecrit dans le cas des vins rouges (point 51) sur 5 ml deacutechantillon preacutepareacute selon le point 531 en mesurant labsorbance par rapport agrave un teacutemoin preacutepareacute avec 5 ml dune solution de sucre interverti agrave 25 pour 100 (mm)

6 EXPRESSION DES REacuteSULTATS

61 Mode de calcul

Le reacutesultat est exprimeacute sous forme dun indice obtenu en multipliant labsorbance par 100 dans le cas des vins rouges dilueacutes au 15 e (ou par le facteur correspondant agrave la dilution employeacutee) et par 20 dans le cas des vins blancs Dans le cas des moucircts concentreacutes rectifieacutes labsorbance est multiplieacutee par 16

62 Reacutepeacutetabiliteacute

La diffeacuterence entre les reacutesultats de 2 deacuteterminations effectueacutees simultaneacutement ou rapidement lune apregraves lautre par le mecircme analyste ne doit pas ecirctre supeacuterieure agrave 1

Une bonne reacutepeacutetabiliteacute des reacutesultats est lieacutee agrave lutilisation dun appareillage (fioles jaugeacutees et cuves du specshytrophotomegravetre) rigoureusement propre


6 GLUCOSE ET FRUCTOSE (OIV-AS-311-02-GLUFRU) mdash MEacuteTHODE TYPE II

1 DEacuteFINITION

Le glucose et le fructose peuvent ecirctre doseacutes individuellement par une meacutethode enzymatique en vue seulement du calcul du rapport glucosefructose

2 PRINCIPE

Le glucose et le fructose sont phosphoryleacutes par ladeacutenosine-triphosphate (ATP) au cours dune reacuteaction enzyshymatique catalyseacutee par lhexokinase (HK) et donnent du glucose-6-phosphate (G6P) et du fructose-6-phosphate (F6P)

glucose + ATPlarrrarrG6P + ADP

fructose + ATPlarrrarrF6P + ADP

Dans un premier temps le glucose-6-phosphate est oxydeacute en gluconate-6-phosphate par le nicotinamide- adeacutenine-dinucleacuteotide-phosphate (NADP) en preacutesence de lenzyme glucose-6-phosphate-deacuteshydrogeacutenase (G6PDH) La quantiteacute de nicotinamide-adeacutenine-dinucleacuteotide-phosphate reacuteduite (NADPH) qui prend naissance correspond agrave la quantiteacute de glucose-6-phosphate et donc agrave celle de glucose

G6P + NADP + larrrarrGluconate-6-phosphate + NADPH + H +

Cest le nicotinamide-adeacutenine-dinucleacuteotide-phosphate reacuteduit qui est doseacute dapregraves son absorption agrave 340 nm

Lorsque cette reacuteaction est termineacutee le fructose-6-phosphate est transformeacute sous laction de la phosphoglucose- isomeacuterase (PGI) en glucose-6-phosphate

F6PlarrrarrG6P

Le glucose-6-phosphate reacuteagit agrave nouveau avec le nicotinamide-adeacutenine-dinucleacuteotide-phosphate pour donner du gluconate-6-phosphate et du nicotinamide-adeacutenine-dinucleacuteotide-phosphate reacuteduit celui-ci sera doseacute

3 APPAREILLAGE

mdash Spectrophotomegravetre permettant deffectuer la mesure agrave 340 nm maximum dabsorption du NADPH Sagisshysant de mesures absolues (pas de gamme deacutetalonnage mais reacutefeacuterence au coefficient dextinction du NADPH) les eacutechelles des longueurs donde et des absorbances de lappareil doivent ecirctre controcircleacutees

Agrave deacutefaut utiliser un spectrophotomegravetre agrave spectre discontinu permettant deffectuer les mesures agrave 334 nm ou agrave 365 nm

mdash Cuves de verre de 1 cm de trajet optique ou cuves agrave usage unique

mdash Pipettes pour test enzymatique de 002 mdash 005 mdash 01 mdash 02 ml

4 REacuteACTIFS

41 Solution 1 tampon (trieacutethanolamine 03 M pH = 76 4times10 -3 M en Mg 2+ ) 112 g de chlorhydrate de trieacutethanolamine (C 2 H 5 ) 3 NHCl) et 02 g de Mg SO 4 7 H 2 O sont dissous dans 150 ml deau bidistilleacutee ajouter environ 4 ml de solution 5 M dhydroxyde de sodium (NaOH) pour obtenir un pH eacutegal agrave 76 et porter agrave 200 ml

Cette solution tampon se conserve 4 semaines agrave + 4 degC

42 Solution 2 solution de nicotinamide-adeacutenine-dinucleacuteotide-phosphate (environ 115x10 -3 M) 50 mg de nicotishynamide-adeacutenine-dinucleacuteotide-phosphate disodique sont dissous dans 5 ml deau bidistilleacutee

Cette solution se conserve 4 semaines agrave + 4 degC

43 Solution 3 solution dadeacutenosine-5prime-triphosphate (environ 81times10 -3 M) 250 mg dadeacutenosine-5prime-triphosphate disodique et 250 mg dhydrogeacutenocarbonate de sodium Na H CO 3 sont dissous dans 5 ml deau bidistilleacutee


44 Solution 4 Hexokinaseglucose-6-phosphate-deacuteshydrogeacutenase meacutelanger 05 ml dhexokinase (2 mg de proteacuteineml soit 280 Uml) et 05 ml de glucose-6-phosphate-deacuteshydrogeacutenase (1 mg de proteacuteine par ml)

Cette solution se conserve un an agrave + 4 degC


45 Solution 5 Phosphoglucose-isomeacuterase (2 mg de proteacuteine par ml soit 700 Uml) La suspension est utiliseacutee sans dilution


Remarque

Lensemble des reacuteactifs neacutecessaires pour ce dosage est commercialiseacute



En fonction de la quantiteacute estimeacutee de glucose + fructose par litre effectuer les dilutions suivantes

Mesure agrave 340 et 334 nm Mesure agrave 365 nm Dilution avec leau Facteur F de dilution

Jusquagrave 04 gl Jusquagrave 08 gl mdash mdash

Jusquagrave 40 gl Jusquagrave 80 gl 1 + 9 10




Au-dessus de 400 gl Au-dessus de 800 gl 1 + 999 1 000

52 Dosage

Le spectrophotomegravetre eacutetant reacutegleacute sur la longueur donde 340 nm effectuer les mesures par rapport agrave lair (pas de cuve dans le trajet optique) ou par rapport agrave leau

Tempeacuterature 20 agrave 25 degC

Dans 2 cuves de 1 cm de trajet optique introduire

Teacutemoin Dosage

Solution 1 (41) (rameneacutee agrave 20 degC)

250 ml 250 ml

Solution 2 (42) 010 ml 010 ml


Eacutechantillon agrave doser 020 ml

Eau bidistilleacutee 020 ml

Meacutelanger et apregraves environ 3 minutes lire labsorbance des solutions (A 1 ) Deacuteclencher la reacuteaction en ajoutant


Meacutelanger attendre 15 minutes effectuer la mesure de labsorbance et veacuterifier larrecirct de la reacuteaction apregraves 2 minutes (A 2 )

Ajouter immeacutediatement


Meacutelanger effectuer la lecture au bout de 10 minutes veacuterifier larrecirct de la reacuteaction apregraves 2 minutes (A 3 )

Deacuteterminer les diffeacuterences dabsorbance

A2 mdash A1 correspondant au glucose

A3 mdash A2 correspondant au fructose

pour le teacutemoin et le dosage


Deacuteduire la diffeacuterence dabsorbance du teacutemoin (ΔA T ) de celle du dosage (ΔA D ) et eacutetablir

pour le glucose ΔA G = ΔA D ndash ΔA T

pour le fructose ΔA F = ΔA D ndash ΔA T

Remarque

Le temps neacutecessaire agrave laction des enzymes peut varier dun lot agrave lautre Il nest donneacute ci-dessus quagrave titre indicatif Il est recommandeacute de le deacuteterminer pour chaque lot

53 Expression des reacutesultats

531 Calcul

La formule geacuteneacuterale pour le calcul des concentrations est la suivante

C = ((V times PM)(ε times d times v times 1 000))timesΔA (gl)

V = volume du test (ml)

v = volume de leacutechantillon (ml)

PM = masse moleacuteculaire de la substance agrave doser

d = trajet optique de la cuve (cm)

ε = coefficient dabsorption du NADPH agrave 340 nm = 63 (mmole -1 x l x cm -1 )

V = 292 ml pour le dosage du glucose

V = 294 ml pour le dosage du fructose

v = 020 ml

PM = 180

d = 1

On obtient

pour le glucose C(gl) = 0417 x ΔA G

pour le fructose C(gl) = 0420 x ΔA F

Si une dilution a eacuteteacute effectueacutee lors de la preacuteparation de leacutechantillon multiplier le reacutesultat par le facteur F

Remarque

Si les mesures ont eacuteteacute faites aux longueurs donde 334 ou 365 nm on obtient

mdash mesure agrave 334 nm ε = 62 (mmole -1 x l x cm -1 )

pour le glucose C (gl) = 0425 x ΔA G

pour le fructose C (gl) = 0428 x ΔA F




532 Reacutepeacutetabiliteacute (r)

r = 0056 x i

533 Reproductibiliteacute (R)

R = 012 + 0076 x i

x i = teneur en glucose ou fructose en grammes par litre


7 DOSAGE DES SUCRES PAR HPLC (SACCHAROSE) (OIV-AS-311-03-SUCRES) mdash MEacuteTHODE TYPE II

(pm)

[La description de cette meacutethode drsquoanalyse fait lrsquoobjet drsquoune mise agrave jour par les instances de lrsquoOIV Elle sera publieacutee dans une prochaine Communication de la Commission degraves qursquoun texte mis agrave jour sera publieacute par lrsquoOIV dans leacutedition 2010 du Recueil des Meacutethode Internationales danalyse de lOIV A titre indicatif dans lrsquoattente de cette publication on peut se reacutefeacuterer au chapitre 6 paragraphe 3 de lannexe du Regraveglement (CEE) n o 267690 de la Commission]


8 DEacuteTECTION DE LENRICHISSEMENT DES MOUcircTS DE RAISINS DES MOUcircTS DE RAISINS CONCENTREacuteS DES MOUcircTS DE RAISINS CONCENTREacuteS RECTIFIEacuteS ET DES VINS PAR APPLICATION DE LA REacuteSONANCE

MAGNEacuteTIQUE NUCLEacuteAIRE DU DEUTEacuteRIUM (OIV-AS-311-05-ENRRMN) mdash MEacuteTHODE TYPE I

(pm)

[La description de cette meacutethode drsquoanalyse fait lrsquoobjet drsquoun reacuteexamen par les instances scientifiques de lrsquoOIV Elle sera publieacutee dans une Communication de la Commission degraves qursquoun texte deacutefinitif sera adopteacute par lrsquoAssembleacutee Geacuteneacuterale de lrsquoOIV A titre indicatif dans lrsquoattente de cette deacutecision de lrsquoOIV on peut se reacutefeacuterer au chapitre 8 de lannexe du Regraveglement (CEE) n o 267690 de la Commission]


9 TITRE ALCOOMEacuteTRIQUE VOLUMIQUE (OIV-AS-312-01-TALVOL) mdash MEacuteTHODES TYPE I

(pm)

[La description de ces meacutethodes drsquoanalyse font lrsquoobjet drsquoune mise agrave jour par les instances de lrsquoOIV Elles seront publieacutees dans une prochaine Communication de la Commission degraves qursquoun texte mis agrave jour sera publieacute par lrsquoOIV dans leacutedition 2010 du Recueil des Meacutethode Internationales danalyse de lOIV A titre indicatif dans lrsquoattente de cette publication de lrsquoOIV on peut se reacutefeacuterer au chapitre 3 de lannexe du Regraveglement (CEE) n o 267690 de la Commission]


10 DEacuteTERMINATION DU RAPPORT ISOTOPIQUE 13 C 12 C PAR SPECTROMEacuteTRIE DE MASSE ISOTOPIQUE DE LEacuteTHANOL DU VIN OU DE LEacuteTHANOL OBTENU PAR FERMENTATION DES MOUcircTS DES MOUcircTS CONCENTREacuteS OU DES MOUcircTS CONCENTREacuteS RECTIFIEacuteS (OIV-AS-312-06-ETHANO) mdash MEacuteTHODE TYPE II

1 CHAMP DAPPLICATION

La meacutethode permet la mesure du rapport isotopique 13 C 12 C de leacutethanol du vin et de celui de leacutethanol obtenu apregraves fermentation des produits deacuteriveacutes de la vigne (moucirct moucirct concentreacute moucirct concentreacute rectifieacute)

2 REacuteFEacuteRENCES NORMATIVES

ISO 57251994 laquoFideacuteliteacute des meacutethodes dessai mdash Deacutetermination de la reacutepeacutetashybiliteacute et de la reproductibiliteacute dune meacutethode dessai normaliseacutee par essais interlaboratoiresraquo

V-PDB Vienna-Pee-Dee Belemnite (R PDB = 00112372)

Meacutethode OIV AS-311-O5-ENRRMN laquoDeacutetection de lenrichissement des moucircts des moucircts concentreacutes des moucircts concentreacutes rectifieacutes et des vins par application de la reacutesonance magneacutetique nucleacuteaire du deuteacuterium (RMN-FINS)raquo

3 TERMES ET DEacuteFINITIONS

13 C 12 C Rapport des isotopes du carbone 13 ( 13 C) et du carbone 12 ( 12 C) pour un eacutechantillon donneacute

δ 13 C teneur en carbone 13 ( 13 C) exprimeacutee en parties pour mille (permil)

RMN-FINS Fractionnement isotopique naturel speacutecifique eacutetudieacute par reacutesonance magneacutetique nucleacuteaire

V-PDB Vienna-Pee-Dee Belemnite Le PDB reacutefeacuterence primaire pour la mesure des variations naturelles des teneurs isotopiques en carbone 13 eacutetait un carbonate de calcium provenant dun rostre de beacutelemnite du Creacutetaceacute de la formation Pee-Dee de la Caroline du sud (Etats-Unis dAmeacuterique) Son rapport isotopique 13 C 12 C ou R PDB est R PDB = 00112372 Le PDB est eacutepuiseacute depuis longtemps mais est resteacute la reacutefeacuterence primaire pour exprimer les variations naturelles des teneurs isotopiques en carbone 13 contre laquelle sont calibreacutes les mateacuteriaux de reacutefeacuterence disponibles agrave lAgence internationale de leacutenergie atomique (IAEA) agrave Vienne (Autriche) Les deacuteterminations isotopiques des abondances naturelles en carbone 13 sont alors exprimeacutees par convention par rapport au V-PDB

mz Rapport masse sur charge

4 PRINCIPE

Lors de la photosynthegravese lassimilation du gaz carbonique par les veacutegeacutetaux seffectue selon deux principaux types de meacutetabolismes qui sont les meacutetabolismes C 3 (cycle de Calvin) et C 4 (Hatch et Slack) Ces deux meacutecanismes de photosynthegravese preacutesentent un fractionnement isotopique diffeacuterent Ainsi les produits issus des plantes C 4 tel que les sucres et lalcool deacuteriveacute par fermentation preacutesentent des teneurs en carbone 13 plus eacuteleveacutees que celles de leurs homologues provenant des plantes C 3 La plupart des veacutegeacutetaux tels que la vigne et la betterave appartiennent au groupe C 3 La canne agrave sucre et le maiumls appartiennent au groupe C 4 La mesure de la teneur en carbone 13 permet donc la deacutetection et leacutevaluation du sucre dorigine C 4 (sucre de canne ou isoglucose de maiumls) ajouteacute aux produits deacuteriveacutes du raisin (moucircts de raisins vins etc) Les informations combineacutees de la teneur en carbone 13 avec celles obtenues par RMN-FINS permettent eacutegalement la quantishyfication de laddition de meacutelanges de sucres ou dalcools dorigine des plantes C 3 et C 4

La teneur en carbone 13 est deacutetermineacutee sur le gaz carbonique reacutesultant de la combustion complegravete de leacutechantillon Les abondances des principaux isotopomegraveres de masses 44 ( 12 C 16 O 2 ) 45 ( 13 C 16 O 2 et 12 C 17 O 16 O) et 46 ( 12 C 16 O 18 O) reacutesultant des diffeacuterentes combinaisons possibles des isotopes 18 O 17 O 16 O 13 C et 12 C sont deacutetermineacutees agrave partir des courants ioniques mesureacutes sur trois collecteurs diffeacuterents dun spectromegravetre de masse isotopique Les contributions des isotopomegraveres 13 C 17 O 16 O et 12 C 17 O 2 peuvent ecirctre


neacutegligeacutees en raison de leur tregraves faible abondance Le courant ionique pour mz = 45 est corrigeacute de la contribution de 12 C 17 O 16 O qui est calculeacutee en fonction de lintensiteacute du courant mesureacute pour mz = 46 en consideacuterant les abondances relatives de 18 O et 17 O (correction de Craig) La comparaison avec une reacutefeacuterence calibreacutee contre la reacutefeacuterence internationale V-PDB permet le calcul de la teneur en carbone 13 sur leacutechelle relative δ 13 C

5 REacuteACTIFS

Les mateacuteriaux et les consommables deacutependent de lappareillage (6) utiliseacute par le laboratoire Les systegravemes geacuteneacuteralement utiliseacutes sont ceux fondeacutes sur lanalyseur eacuteleacutementaire Celui-ci peut ecirctre eacutequipeacute pour lintroduction deacutechantillons placeacutes dans des capsules meacutetalliques scelleacutees ou pour linjection deacutechantillons liquides agrave travers un septum au moyen dune seringue

Selon le type dinstrumentation utiliseacute les mateacuteriaux de reacutefeacuterence reacuteactifs et consommables suivants peuvent ecirctre utiliseacutes

mdash mateacuteriaux de reacutefeacuterence

mdash disponibles aupregraves de lIAEA

Nom Mateacuteriel δ 13 C versus V-PDB (9)

mdash IAEA-CH-6 saccharose ndash 104 permil

mdash IAEA-CH-7 polyeacutethylegravene ndash 318 permil

mdash NBS22 huile ndash 297 permil

mdash USGS24 graphite ndash 161 permil

mdash disponibles aupregraves de lInstitut des mateacuteriaux et mesures de reacutefeacuterence (IRMM) de Geel (BE)


mdash CRMBCR 656 alcool de vin ndash 2693 permil

mdash CRMBCR 657 glucose ndash 1075 permil

mdash CRMBCR 660 solution hydroalcoolique (TAV 12 )

ndash 2672 permil

mdash Eacutechantillon standard de travail ayant un rapport 13 C 12 C connu calibreacute contre les mateacuteriaux de reacutefeacuterence internationaux

mdash La liste indicative de consommables ci-dessous est eacutetablie pour les systegravemes agrave flux continu

mdash heacutelium pour analyse (CAS 07440-59-7)

mdash oxygegravene pour analyse (CAS 07782-44-7)

mdash dioxyde de carbone pour analyse utiliseacute comme gaz de reacutefeacuterence secondaire pour la teneur en carbone 13 (CAS 00124-38-9)

mdash reacuteactif doxydation pour le four du systegraveme de combustion par exemple oxyde de cuivre (ΙΙ) pour analyse eacuteleacutementaire (CAS 1317-38-0)

mdash desseacutechant pour eacuteliminer de leau produite par la combustion par exemple anhydrone pour analyse eacuteleacutementaire (perchlorate de magneacutesium) (CAS 10034-81-8) (non neacutecessaire pour les appareillages eacutequipeacutes avec un systegraveme deacutelimination de leau par cryopieacutegeage ou au moyen dun capillaire seacutelectishyvement permeacuteable)

6 APPAREILLAGE ET MATEacuteRIEL

61 Spectromegravetre de masse de rapport isotopique (SMRI)

Spectromegravetre de masse de rapport isotopique (SMRI) permettant de deacuteterminer la teneur relative de 13 C du gaz CO 2 en abondance naturelle avec une preacutecision interne de 005 permil ou mieux exprimeacutee en valeur relative (point 9) La preacutecision interne est ici deacutefinie comme la diffeacuterence entre deux mesures du mecircme eacutechantillon de CO 2 Le spectromegravetre de masse destineacute agrave la mesure des rapports isotopiques est geacuteneacuteralement eacutequipeacute dun collecteur triple pour mesurer simultaneacutement les intensiteacutes pour mz = 44 45 et 46 Le spectromegravetre de masse de rapport isotopique doit soit ecirctre eacutequipeacute dun systegraveme dintroduction double pour mesurer en alternance leacutechantillon inconnu et un eacutechantillon de reacutefeacuterence soit utiliser un systegraveme inteacutegreacute qui effectue la combustion quantitative des eacutechantillons et seacutepare le dioxyde de carbone des autres produits de combustion preacutealablement agrave la mesure dans le spectromegravetre de masse


62 Appareillage de combustion

Appareillage de combustion capable de convertir quantitativement leacutethanol en dioxyde de carbone et deacuteliminer tous les autres produits de combustion y compris leau sans aucun fractionnement isotopique Lappareillage peut ecirctre soit un systegraveme agrave flux continu inteacutegreacute agrave linstrumentation de spectromeacutetrie de masse (point 621) soit un systegraveme de combustion autonome (point 622) Lappareillage doit permettre dobtenir une preacutecision au moins eacutequivalente agrave celle indiqueacutee au point 11

621 Systegravemes agrave flux continu

Ceux-ci sont constitueacutes soit par un analyseur eacuteleacutementaire soit par un chromatographe en phase gazeuse eacutequipeacute dun systegraveme de combustion en ligne

Pour les systegravemes eacutequipeacutes pour lintroduction des eacutechantillons contenus dans des capsules meacutetalliques le mateacuteriel de laboratoire suivant est utiliseacute

mdash microseringue ou micropipette volumeacutetrique avec cocircnes approprieacutes

mdash balance agrave eacutechelon de lecture agrave 1 μg ou mieux

mdash pince pour encapsulage

mdash capsules deacutetain pour eacutechantillons liquides

mdash capsules deacutetain pour eacutechantillons solides

Note

pour limiter les risques deacutevaporation des eacutechantillons deacutethanol il est possible de placer dans les capsules un mateacuteriau absorbant (par exemple chromosorb W 45-60 mesh) dont on aura veacuterifieacute preacutealablement par une mesure agrave blanc quil ne comporte pas de quantiteacute significative de carbone susceptible dalteacuterer les mesures

Lors de lutilisation dun analyseur eacuteleacutementaire eacutequipeacute dun injecteur pour liquides ou dans le cas dun systegraveme de preacuteparation par chromatographie-combustion le mateacuteriel de laboratoire suivant est utiliseacute

mdash seringue pour liquides

mdash flacons eacutequipeacutes dun systegraveme de fermeture eacutetanche et de septa inertes

Les mateacuteriels de laboratoire indiqueacutes dans les listes ci-dessus constituent des exemples et sont susceptibles decirctre remplaceacutes par dautres mateacuteriels de performances eacutequivalentes selon le type dappareillage de combustion et de spectromeacutetrie de masse utiliseacute par le laboratoire

622 Systegravemes autonomes de preacuteparation

Dans ce cas les eacutechantillons de dioxyde de carbone reacutesultant de la combustion des eacutechantillons agrave analyser et de la reacutefeacuterence sont collecteacutes dans des ampoules qui sont ensuite installeacutees au double systegraveme dentreacutee du spectromegravetre pour reacutealiser lanalyse isotopique Plusieurs types dappareillages de combustion deacutecrits dans la litteacuterature sont utilisables

mdash systegraveme clos de combustion rempli avec du gaz oxygegravene circulant

mdash analyseur eacuteleacutementaire avec flux dheacutelium et doxygegravene

mdash ampoule scelleacutee en verre remplie avec de loxyde de cuivre (ΙΙ) comme agent doxydation

7 PREacutePARATION DES EacuteCHANTILLONS POUR ESSAI

Leacutethanol doit ecirctre extrait agrave partir du vin avant deacutetermination isotopique Cette extraction est effectueacutee par la distillation du vin comme deacutecrit au point 31 de la meacutethode RMN-FINS (OIV - MA-E-AS311-05-ENRRMN)

Dans le cas du moucirct de raisins du moucirct de raisins concentreacute et du moucirct de raisins concentreacute rectifieacute les sucres doivent ecirctre fermenteacutes en eacutethanol dabord comme deacutecrit au point 32 de la meacutethode RMN-FINS (OIV - MA-E- AS311-05-ENRRMN)


Toutes les eacutetapes preacuteparatoires doivent ecirctre effectueacutees sans aucune perte significative deacutethanol par eacutevaporation qui changerait la composition isotopique de leacutechantillon


La description qui suit fait reacutefeacuterence aux proceacutedures geacuteneacuteralement utiliseacutees pour la combustion des eacutechantillons deacutethanol au moyen des systegravemes automatiseacutes de combustion commerciaux Toute autre meacutethode assurant que leacutechantillon deacutethanol est quantitativement converti en dioxyde de carbone sans aucune perte par eacutevaporation deacutethanol peut convenir pour la preacuteparation du dioxyde de carbone pour lanalyse isotopique

Proceacutedure expeacuterimentale fondeacutee sur lutilisation dun analyseur eacuteleacutementaire

a) mise en capsule des eacutechantillons

mdash utiliser des capsules une pince et un plateau de preacuteparation propres

mdash prendre une capsule de la dimension approprieacutee agrave laide de la pince

mdash introduire le volume neacutecessaire de liquide dans la capsule agrave laide de la micropipette

mdash Note

384 mg deacutethanol absolu ou 417 mg de distillat ayant un titre alcoolique de 92 mm sont neacutecesshysaires pour obtenir 2 mg de carbone La quantiteacute approprieacutee de distillat doit ecirctre calculeacutee de la mecircme maniegravere selon la quantiteacute de carbone neacutecessaire en fonction de la sensibiliteacute de linstrumentation de spectromeacutetrie de masse

mdash refermer la capsule agrave laide des pinces

mdash chaque capsule doit ecirctre fermeacutee de faccedilon absolument eacutetanche Dans le cas contraire elle doit ecirctre rejeteacutee et une nouvelle capsule doit ecirctre repreacutepareacutee

mdash pour chaque eacutechantillon preacuteparer deux capsules

mdash placer les capsules agrave lendroit approprieacute sur le plateau du passeur automatique deacutechantillon de lanalyshyseur eacuteleacutementaire Chaque capsule doit ecirctre soigneusement identifieacutee par un numeacutero dordre

mdash placer systeacutematiquement des capsules contenant les reacutefeacuterences de travail au deacutebut et agrave la fin de la seacuterie deacutechantillons

mdash inseacuterer reacuteguliegraverement des eacutechantillons de controcircle dans la seacuterie deacutechantillons

b) controcircle et ajustement de linstrumentation danalyse eacuteleacutementaire et de spectromeacutetrie de masse

mdash ajuster la tempeacuterature des fours de lanalyseur eacuteleacutementaire et les flux de gaz dheacutelium et doxygegravene pour une combustion optimale de leacutechantillon

mdash veacuterifier labsence de fuite dans le systegraveme danalyse eacuteleacutementaire et de spectromeacutetrie de masse (par exemple en controcirclant le courant ionique pour mz = 28 correspondant agrave N 2 )

mdash ajuster le spectromegravetre de masse pour mesurer les intensiteacutes des courants ioniques pour mz = 44 45 et 46

mdash veacuterifier le systegraveme agrave laide deacutechantillons de controcircle connus avant de commencer les mesures sur les eacutechantillons

c) deacuteroulement dune seacuterie de mesures

Les eacutechantillons placeacutes sur le passeur automatique deacutechantillons de lanalyseur eacuteleacutementaire (ou du chroshymatographe) sont introduits successivement Le dioxyde de carbone de chaque combustion deacutechantillon est eacutelueacute vers le spectromegravetre de masse qui mesure les courants ioniques Lordinateur interfaceacute agrave linstrumenshytation enregistre les intensiteacutes des courants ioniques et calcule les valeurs δ pour chaque eacutechantillon (point 9)

9 CALCUL

Lobjectif de la meacutethode est de mesurer le rapport isotopique 13 C 12 C de leacutethanol extrait agrave partir du vin ou agrave partir des produits deacuteriveacutes du raisin apregraves fermentation Le rapport isotopique 13 C 12 C peut ecirctre exprimeacute par sa deacuteviation par rapport agrave une reacutefeacuterence de travail La deacuteviation isotopique carbone 13 (δ 13 C) est alors calculeacutee sur une eacutechelle delta pour mille (δ1 000) par comparaison des reacutesultats obtenus pour leacutechantillon agrave mesurer contre ceux de la reacutefeacuterence de travail preacuteceacutedemment calibreacutee par rapport agrave la reacutefeacuterence primaire internationale (V-PDB) Les valeurs δ 13 C sont exprimeacutees par rapport agrave la reacutefeacuterence de travail selon

δ 13 C echref permil = 1 000 times (R ech ndashR ref )R ref

ougrave R ech et R ref sont respectivement les rapports isotopiques 13 C 12 C de leacutechantillon et ceux du dioxyde de carbone utiliseacute comme gaz de reacutefeacuterence


Les valeurs δ 13 C sont alors exprimeacutees par rapport au V-PDB selon

δ 13 C echV-PDB permil = δ 13 C echref + δ 13 C refV-PDB + (δ 13 C echref times δ 13 C refV-PDB )1 000

ougrave δ 13 C refV-PDB est la deacuteviation isotopique preacutealablement deacutetermineacutee pour la reacutefeacuterence de travail contre le V- PDB

Pendant la mesure en ligne des petites deacuterives dues agrave la variation des conditions instrumentales peuvent ecirctre observeacutees Dans ce cas les δ 13 C des eacutechantillons doivent ecirctre corrigeacutes en fonction de la diffeacuterence entre la valeur δ 13 C mesureacutee pour la reacutefeacuterence de travail et sa valeur vraie preacuteceacutedemment calibreacutee contre le V-PDB par comparaison avec lun des mateacuteriaux de reacutefeacuterence international Entre deux mesures de la reacutefeacuterence de travail la deacuterive et donc la correction agrave appliquer aux reacutesultats des eacutechantillons peuvent ecirctre assumeacutees lineacuteaires La reacutefeacuterence de travail doit ecirctre mesureacute en deacutebut et en fin de toute seacuterie deacutechantillons Une correction peut ensuite ecirctre calculeacutee pour chaque eacutechantillon au moyen dune interpolation lineacuteaire

10 ASSURANCE QUALITEacute ET CONTROcircLE

Controcircler que la valeur 13 C pour la reacutefeacuterence de travail ne diffegravere pas de plus de 05 permil de la valeur admise En cas contraire les reacuteglages de linstrumentation du spectromegravetre devront ecirctre controcircleacutes et eacuteventuellement reacuteajusteacutes

Pour chaque eacutechantillon veacuterifier que la diffeacuterence de reacutesultat entre les deux capsules mesureacutees successivement est infeacuterieure agrave 03 permil Le reacutesultat final pour un eacutechantillon donneacute est alors la valeur moyenne des deux capsules Si la deacuteviation est plus eacuteleveacutee que 03 permil la mesure doit ecirctre reacutepeacuteteacutee

Un controcircle du fonctionnement correct de la mesure peut ecirctre fondeacute sur lintensiteacute du courant ionique pour mz = 44 qui est proportionnel agrave la quantiteacute de carbone injecteacutee dans lanalyseur eacuteleacutementaire Dans les conditions type lintensiteacute de ce courant ionique devrait ecirctre pratiquement constante pour les eacutechantillons en analyse Une deacuteviation significative doit conduire agrave soupccedilonner une eacutevaporation deacutethanol (par exemple une capsule imparfaitement scelleacutee) ou bien une instabiliteacute de lanalyseur eacuteleacutementaire ou du spectromegravetre de masse

11 CARACTEacuteRISTIQUES DE PERFORMANCE DE LA MEacuteTHODE (PREacuteCISION)

Une premiegravere eacutetude collaborative (point 111) a eacuteteacute reacutealiseacutee sur des distillats comportant des alcools dorigine vinique et des alcools de canne et de betterave ainsi que diffeacuterents meacutelanges de ces trois origines Cette eacutetude nayant pas pris en compte leacutetape de distillation des informations compleacutementaires provenant dautres essais interlaboratoires reacutealiseacutes sur des vins (point 112) et notamment des circuits de tests daptitudes (point 113) pour les mesures isotopiques ont eacutegalement eacuteteacute consideacutereacutees Les reacutesultats deacutemontrent que les diffeacuterents systegravemes de distillation utiliseacutes dans des conditions satisfaisantes et en particulier ceux applicables pour les mesures RMN-FINS napportent pas de variabiliteacute significative pour les deacuteterminations δ 13 C de leacutethanol du vin Les paramegravetres de fideacuteliteacute observeacutes pour les vins sont quasiment identiques agrave ceux obtenus lors de leacutetude collaborative (point 111) sur les distillats

111 Eacutetude collaborative sur les distillats

Anneacutee de lessai interlaboratoires 1996

Nombre de laboratoires 20

Nombre deacutechantillons 6 eacutechantillons en double aveugle

Analyte δ 13 C de leacutethanol

Code des eacutechantillons Alcool dorigine vinique Alcool de betterave Alcool de canne

A amp G 80 10 10

B amp C 90 10 0

D amp F 0 100 0

E amp I 90 0 10

H amp K 100 0 0

J amp L 0 0 100


Echantillons AG BC DF EI HK JL

Nombre de laboratoires retenus apregraves eacutelimination des reacutesultats aberrants

19 18 17 19 19 19

Nombre de reacutesultats accepteacutes 38 36 34 38 38 38

Valeur moyenne (δ 13 C) ndash 2532 ndash 2675 ndash 2779 ndash 2526 ndash 2663 ndash 1254

S r 2 00064 00077 00031 00127 00069 00041

Eacutecart-type de reacutepeacutetabiliteacute (S r ) permil 008 009 006 011 008 006

Limite de reacutepeacutetabiliteacute r (28 times S r ) permil 022 025 016 032 023 018

S R2 00389 00309 00382 00459 00316 00584

Eacutecart-type de reproductibiliteacute (S R ) permil 020 018 020 021 018 024

Limite de reproductibiliteacute R (28 times S R ) permil 055 049 055 060 050 068

112 Eacutetude interlaboratoires sur deux vins et un alcool


Nombre de laboratoires 14 pour la distillation des vins dont 7 pour eacutegalement la mesure δ 13 C de leacutethanol des vins 8 pour la mesure δ 13 C de leacutechantillon dalcool

Nombre deacutechantillons 3 (vin blanc TAV 93 vol vin blanc de TAV 96 vol et alcool de titre alcoomeacutetrique 93 mm)


Echantillons Vin rouge Vin blanc Alcool

Nombre de laboratoires 7 7 8

Nombre de reacutesultats accepteacutes 7 7 8

Valeur moyenne (δ 13 C) permil ndash 2620 ndash 2620 ndash 2508

Variance de reproductibiliteacute S R 2 00525 00740 00962

Eacutecart-type de reproductibiliteacute (S R ) permil 023 027 031

Limite de reproductibiliteacute R (28 times S R ) permil 064 076 087

Diffeacuterents systegravemes de distillation ont eacuteteacute utiliseacutes par les laboratoires participants Les deacuteterminations isotoshypiques δ 13 C reacutealiseacutees dans un seul laboratoire sur lensemble des distillats retourneacutes par les participants ne montrent ni valeur aberrante ni valeur significativement distincte des valeurs moyennes La variance des reacutesultats (S 2 = 00059) est comparable aux variances de reacutepeacutetabiliteacute S r

2 de leacutetude collaborative sur les distillats (point 111)

113 Reacutesultats des exercices des circuits daptitude aux essais isotopiques

Depuis deacutecembre 1994 des exercices daptitude internationaux pour les deacuteterminations isotopiques sur les vins et alcools (distillats de TAV 96 vol) sont organiseacutes reacuteguliegraverement Les reacutesultats permettent aux laboratoires participants de controcircler la qualiteacute de leurs analyses Lexploitation statistique des reacutesultats permet dappreacutecier la variabiliteacute des deacuteterminations dans des conditions de reproductibiliteacute et donc destimer les paramegravetres de variance et de limite de reproductibiliteacute Les reacutesultats obtenus pour les deacuteterminations δ 13 C de leacutethanol des vins et distillats sont reacutesumeacutes dans le tableau suivant


Date Vins Distillats

N S R S R 2 R N S R S R

2 R

Deacutecembre 1994 6 0210 0044 059 6 0151 0023 042

Juin 1995 8 0133 0018 037 8 0147 0021 041

Deacutecembre 1995 7 0075 0006 021 8 0115 0013 032

Mars 1996 9 0249 0062 070 11 0278 0077 078

Juin 1996 8 0127 0016 036 8 0189 0036 053

Septembre 1996 10 0147 0022 041 11 0224 0050 063

Deacutecembre 1996 10 0330 0109 092 9 0057 0003 016

Mars 1997 10 0069 0005 019 8 0059 0003 016

Juin 1997 11 0280 0079 078 11 0175 0031 049

Septembre 1997 12 0237 0056 066 11 0203 0041 057

Deacutecembre 1997 11 0127 0016 036 12 0156 0024 044

Mars 1998 12 0285 0081 080 13 0245 0060 069

Juin 1998 12 0182 0033 051 12 0263 0069 074

Septembre 1998 11 0264 0070 074 12 0327 0107 091

Moyenne pondeacutereacutee 0215 0046 060 0209 0044 059

N nombre de laboratoires participants

114 Limites de reacutepeacutetabiliteacute et de reproductibiliteacute

Les donneacutees des diffeacuterents exercices interlaboratoires preacutesenteacutees dans les tableaux preacuteceacutedents permettent donc deacutetablir pour la preacutesente meacutethode en incluant eacutegalement leacutetape de distillation les limites de reacutepeacutetabiliteacute et de reproductibiliteacute suivantes

Limite de reacutepeacutetabiliteacute r 024

Limite de reproductibiliteacute R 06


11 ACIDITEacute TOTALE (OIV - AS-313-01-ACITOT) mdash MEacuteTHODE TYPE I

1 DEacuteFINITION

Laciditeacute totale est la somme des aciditeacutes titrables lorsquon amegravene le pH agrave 7 par addition dune solution alcaline titreacutee

Le dioxyde de carbone nest pas compris dans laciditeacute totale


Titrage potentiomeacutetrique ou titrage en preacutesence de bleu de bromothymol comme indicateur de fin de reacuteaction par comparaison agrave un eacutetalon de coloration

3 REacuteACTIFS

31 Solution tampon pH 70

Phosphate monopotassique KH 2 PO 4 1073 g

Solution M dhydroxyde de sodium (NaOH) 500 ml

Eau qsp 1 000 ml

Les solutions tampons de reacutefeacuterence du commerce peuvent eacutegalement ecirctre utiliseacutees

32 Solution 01 M dhydroxyde de sodium (NaOH)

33 Solution de bleu de bromothymol agrave 4 gl

Bleu de bromothymol (C 27 H 28 Br 2 O 5 S) 4 g

Alcool neutre 96 vol 200 ml

Apregraves solubilisation ajouter

Eau sans CO 2 200 ml

Solution M dhydroxyde de sodium

qsp coloration bleu-vert (pH 7) 75 ml

Eau qsp 1 000 ml

4 APPAREILLAGE

41 Trompe agrave vide agrave eau

42 Fiole agrave vide de 500 ml

43 Potentiomegravetre agrave eacutechelle eacutetalonneacutee en uniteacutes pH et eacutelectrodes Leacutelectrode de verre doit ecirctre conserveacutee dans leau distilleacutee Leacutelectrode au calomel-chlorure de potassium satureacute doit ecirctre conserveacutee dans une solution satureacutee de chlorure de potassium Une eacutelectrode combineacutee est le plus souvent employeacutee la conserver dans leau distilleacutee

44 Vases cylindriques de 50 ml de capaciteacute (cas des vins) et de 100 ml de capaciteacute (cas des moucircts concentreacutes rectifieacutes)



511 Cas des vins

Eacutelimination du dioxyde de carbone Placer environ 50 ml de vin dans une fiole agrave vide agiter et en mecircme temps faire le vide au moyen de la trompe agrave vide agrave eau Lagitation doit durer 1 agrave 2 minutes


Introduire 200 g de moucirct concentreacute rectifieacute exactement peseacute dans un ballon jaugeacute de 500 ml Compleacuteter au trait avec de leau Homogeacuteneacuteiser


52 Titrage potentiomeacutetrique

521 Eacutetalonnage du pH megravetre

Leacutetalonnage du pH megravetre seffectue agrave 20 degC en suivant les indications donneacutees pour lappareil utiliseacute avec la solution tampon de pH 700 agrave 20 degC


Dans un vase cylindrique (point 44) placer un volume deacutechantillon preacutepareacute comme indiqueacute au point 51 eacutegal agrave 10 ml dans le cas du vin et agrave 50 ml dans le cas du moucirct concentreacute rectifieacute Ajouter 10 ml environ deau distilleacutee et verser agrave la burette la solution 01 M dhydroxyde de sodium (point 32) jusquagrave ce que le pH soit eacutegal agrave 7 agrave 20 degC Laddition de liqueur alcaline doit ecirctre faite lentement et la solution constamment agiteacutee Soit n le nombre de millilitres de NaOH 01 M verseacutes

53 Titrage avec indicateur (bleu de bromothymol)

531 Essai preacutealable eacutetablissement de leacutetalon de coloration

Dans un vase cylindrique (point 44) placer 25 ml deau distilleacutee bouillie 1 ml de solution de bleu de bromothymol (point 33) et un volume preacutepareacute comme indiqueacute au point 51 eacutegal agrave 10 ml dans le cas du vin et agrave 50 ml dans le cas du moucirct concentreacute rectifieacute Ajouter la solution 01 M dhydroxyde de sodium (point 32) jusquagrave obtention dune coloration bleu-vert Ajouter 5 ml de la solution tampon pH 7 (31)

532 Dosage

Dans un vase cylindrique (point 44) placer 30 ml deau distilleacutee bouillie 1 ml de solution de bleu de bromothymol (point 33) un volume deacutechantillon preacutepareacute comme indiqueacute au point 51 eacutegal agrave 10 ml dans le cas du vin et agrave 50 ml dans le cas du moucirct concentreacute rectifieacute Ajouter la solution 01 M dhydroxyde de sodium (point32) jusquagrave obtention dune coloration identique agrave celle obtenue agrave lessai preacutealable (point 531) Soit n le nombre de millilitres de solution dhydroxyde de sodium 01 M verseacutes


61 Mode de calcul

611 Cas des vins

Laciditeacute totale exprimeacutee en millieacutequivalents par litre sera

A = 10 n

Elle est donneacutee avec 1 deacutecimale

Laciditeacute totale exprimeacutee en grammes dacide tartrique par litre sera

Aprime = 0075 times A



mdash Aciditeacute totale exprimeacutee en millieacutequivalents par kilogramme de moucirct concentreacute rectifieacute a = 5 times n

mdash Aciditeacute totale exprimeacutee en millieacutequivalents par kilogramme de sucres totaux

A = (500 times n)P

P = teneur pour 100 (mm) en sucres totaux

Elle est exprimeacutee avec 1 deacutecimale

62 Reacutepeacutetabiliteacute (r) pour le titrage avec indicateur(53)

r = 09 mel

r = 007 g dacide tartriquel

pour les vins blancs roseacutes et rouges


63 Reproductibiliteacute (R) pour le titrage avec indicateur (53)

Pour les vins blancs et roseacutes

R = 36 mel

R = 03 g dacide tartriquel

Pour les vins rouges

R = 51 mel



12 ACIDITEacute VOLATILE (OIV - AS-313-02-ACIVOL) mdash MEacuteTHODE TYPE I

1 DEacuteFINITION

Laciditeacute volatile est constitueacutee par les acides appartenant agrave la seacuterie aceacutetique qui se trouvent dans le vin agrave leacutetat libre et agrave leacutetat salifieacute


Titrage des acides volatiles seacutepareacutes du vin par entraicircnement agrave la vapeur deau et rectification des vapeurs

Le vin est au preacutealable deacutebarrasseacute du dioxyde de carbone

Laciditeacute du dioxyde de soufre libre et du dioxyde de soufre combineacute distilleacutes dans ces conditions doit ecirctre retrancheacutee de laciditeacute du distillat

Laciditeacute de lacide sorbique eacuteventuellement ajouteacute au vin doit eacutegalement ecirctre retrancheacutee

Remarque

Lacide salicylique utiliseacute dans certains pays pour stabiliser les vins preacutealablement agrave lanalyse se retrouve en partie dans le distillat Il est neacutecessaire de le doser et de le deacutefalquer de laciditeacute La meacutethode de dosage est donneacutee au paragraphe 7 de ce chapitre

3 REacuteACTIFS

31 Acide tartrique cristalliseacute (C 4 H 6 O 6 )


33 Solution de pheacutenolphtaleacuteine agrave 1 pour 100 dans lalcool agrave 96 vol neutre

34 Acide chlorhydrique (ρ 20 = 118 agrave 119 gml) dilueacute 14 (vv)

35 Solution 0005 M diode (I 2 )

36 Iodure de potassium cristalliseacute (Kl)

37 Empois damidon agrave 5 gl

Deacutelayer 5 g damidon dans 500 ml deau environ Porter agrave eacutebullition en agitant et maintenir leacutebullition pendant 10 minutes ajouter 200 g de chlorure de sodium Porter au litre apregraves refroidissement

38 Solution satureacutee de borate de sodium (Na 2 B 4 O 7 10 H 2 O) soit environ 55 gl agrave 20 o C

4 APPAREILLAGE

41 Appareil agrave entraicircnement agrave la vapeur deau composeacute

1) dun geacuteneacuterateur de vapeur deau la vapeur deau produite doit ecirctre exempte de dioxyde de carbone

2) dun barboteur

3) dune colonne rectificatrice

4) dun reacutefrigeacuterant

Cet appareil doit reacutepondre aux trois essais suivants

a) placer dans le barboteur 20 ml deau bouillie recueillir 250 ml de distillat et les additionner de 01 ml de solution 01 M dhydroxyde de sodium (point 32) et II gouttes de la solution de pheacutenolphtaleacuteine (point 33) la coloration rose doit ecirctre stable pendant au moins 10 secondes (vapeur deau exempte de dioxyde de carbone)

b) Placer dans le barboteur 20 ml dune solution 01 M dacide aceacutetique Recueillir 250 ml de distillat Titrer avec la solution 01 M dhydroxyde de sodium (point 32) Le volume verseacute doit ecirctre au moins eacutegal agrave 199 ml (Acide aceacutetique entraicircneacute ge 995 )


c) Placer dans le barboteur 20 ml dune solution M dacide lactique Recueillir 250 ml de distillat et titrer laciditeacute avec la solution 01 M dhydroxyde de sodium (point 32)

Le volume verseacute doit ecirctre infeacuterieur ou eacutegal agrave 10 ml (Acide lactique distilleacute le 05 )

Tout appareil ou toute technique qui satisfait agrave ces essais constitue un appareil ou une technique officielle internationale

42 Trompe agrave vide deau

43 Fiole agrave vide


51 Preacuteparation de leacutechantillon eacutelimination du dioxyde de carbone

Placer environ 50 ml de vin dans une fiole agrave vide agiter et en mecircme temps faire le vide au moyen de la trompe agrave vide deau Lagitation doit durer 1 agrave 2 minutes

52 Entraicircnement agrave la vapeur deau

Placer 20 ml de vin deacutecarboniqueacute comme indiqueacute au point 51 dans le barboteur Ajouter 05 g environ dacide tartrique (point 31) Recueillir au moins 250 ml de distillat

53 Titrage

Titrer par la solution 01 M dhydroxyde (point 32) de sodium en preacutesence de II gouttes de solution de pheacutenolphtaleacuteine (point 33) soit n ml le volume verseacute

Ajouter IV gouttes dacide chlorhydrique dilueacute 14 (34) 2 ml dempois damidon (point 37) et quelques cristaux diodure de potassium (point 36) Titrer le dioxyde de soufre libre par la solution 0005 M diode (point 35) Soit nprime ml le volume verseacute

Ajouter la solution satureacutee de borate de sodium (point 38) jusquagrave reacuteapparition de la coloration rose Titrer le dioxyde de soufre combineacute par la solution 0005 M diode (point 35) Soit laquonraquo ml le volume verseacute


61 Mode de calcul

Laciditeacute volatile exprimeacutee en millieacutequivalents par litre avec 1 deacutecimale sera

A = 5 (n ndash 01 nprime ndash 005 nPrime)

Laciditeacute volatile exprimeacutee en grammes dacide aceacutetique par litre avec 2 deacutecimales sera

0300 (n ndash 01 nprime ndash 005 nPrime)


r = 07 mel

r = 004 g dacide aceacutetiquel


R = 13 mel

R = 008 g dacide aceacutetiquel

64 Cas dun vin additionneacute dacide sorbique

Lacide sorbique eacutetant entraicircnable agrave la vapeur deau agrave 96 pour un volume de distillat de 250 ml son aciditeacute doit ecirctre retrancheacutee de laciditeacute volatile sachant que 100 mg dacide sorbique correspondent agrave une aciditeacute de 089 millieacutequivalent ou de 0053 g dacide aceacutetique et connaissant la teneur en acide sorbique (mgl) deacutetershymineacutee par ailleurs

7 DOSAGE DE LACIDE SALICYLIQUE ENTRAIcircNEacute DANS LE DISTILLAT DE LACIDITEacute VOLATILE

71 Principe

Apregraves le dosage de laciditeacute volatile et la correction du dioxyde de soufre la preacutesence dacide salicylique est caracteacuteriseacutee apregraves acidification par la coloration violette qui apparaicirct apregraves addition dun sel de fer III


Le dosage de lacide salicylique entraicircneacute dans le distillat avec laciditeacute volatile est effectueacute sur un deuxiegraveme distillat de volume eacutegal agrave celui sur lequel a eacuteteacute effectueacute le dosage de laciditeacute volatile Dans ce distillat lacide salicylique est doseacute par une meacutethode colorimeacutetrique de comparaison Il est deacutefalqueacute de laciditeacute du distillat de laciditeacute volatile

72 Reacuteactifs

721 Acide chlorhydrique (HCl) (ρ 20 = 118 agrave 119 gml)

722 Thiosulfate de sodium (Na 2 S 2 O 3 times 5 H 2 O) 01 M

723 Solution de sulfate de fer III et dammonium [Fe 2 (SO 4 ) 3 times (NH 4 ) 2 SO 4 times 24 H 2 O] agrave 10 p 100 (mv)

724 Solution de salicylate de sodium 001 M Solution contenant 160 gl de salicylate de sodium (Na C 7 H 5 O 3 )

73 Mode opeacuteratoire

731 Caracteacuterisation de lacide salicylique dans le distillat de laciditeacute volatile

Immeacutediatement apregraves le dosage de laciditeacute volatile et la correction du dioxyde de soufre libre et combineacute ajouter dans la fiole conique 05 ml dacide chlorhydrique (point 721) 3 ml de la solution 01 M de thiosulfate de sodium (point 722) et 1 ml de la solution de sulfate de fer III et dammonium (point 723)

En preacutesence dacide salicylique une coloration violette apparaicirct

732 Dosage de lacide salicylique

Sur la fiole conique preacuteceacutedente indiquer par un trait repegravere le volume du distillat Vider et rincer la fiole

Soumettre agrave lentraicircnement agrave la vapeur deau une nouvelle prise dessai de 20 ml de vin et recueillir le distillat dans la fiole conique jusquau trait repegravere Ajouter 03 ml dacide chlorhydrique pur (point 721) et 1 ml de la solution de sulfate de fer III et dammonium (point 723) Le contenu de la fiole conique se colore en violet

Dans une fiole conique identique agrave celle portant le trait repegravere placer de leau distilleacutee jusquau mecircme niveau que celui du distillat Ajouter 03 ml dacide chlorhydrique pur (point 721) 1 ml de solution de sulfate de fer III et dammonium (point 723) Verser agrave la burette la solution de salicylate de sodium 001 M (point 724) jusquagrave obtention dune coloration violette de mecircme intensiteacute que celle de la fiole conique contenant le distillat de vin

soit nprimeprimeprime le nombre de millilitres verseacutes

74 Correction de laciditeacute volatile

Retrancher le volume 01 nprimeprimeprime du volume n ml de solution dhydroxyde de sodium 01 M utiliseacute pour titrer laciditeacute du distillat lors du dosage de laciditeacute volatile


13 ACIDE CITRIQUE (OIV -AS-313-09-ACIENZ) mdash MEacuteTHODE TYPE II


Lacide citrique est transformeacute en oxaloaceacutetate et aceacutetate dans une reacuteaction catalyseacutee par la citrate-lyase (CL)

Citrate larrrarr oxaloaceacutetate + aceacutetate

En preacutesence de la malate-deshydrogeacutenase (MDH) et de la lactate-deshydrogeacutenase (LDH) loxaloaceacutetate et son deacuteriveacute de deacutecarboxylation le pyruvate sont reacuteduits en L-malate et en L-lactate par le nicotinamide-adeacutenine- dinucleacuteotide reacuteduit (NADH)

Oxaloaceacutetate + NADH + H + larrrarr L-malate + NAD +

Pyruvate + NADH + H + larrrarr L-lactate + NAD +

La quantiteacute de NADH oxydeacute en NAD + dans ces reacuteactions est proportionnelle au citrate preacutesent Loxydation du NADH est mesureacutee par la diminution de son absorbance agrave la longueur donde 340 nm

2 REacuteACTIFS

21 Tampon pH 78 (glycylglycine 051 M pH = 78 Zn 2+ 06 times 10 ndash 3 M)

Dissoudre 713 g de glycylglycine dans environ 70 ml deau bidistilleacutee

Ajuster le pH agrave 78 avec environ 13 ml de solution dhydroxyde de sodium 5 M ajouter 10 ml de solution de chlorure de zinc ZnCl 2 agrave 80 mg dans 100 ml et porter agrave 100 ml avec de leau bidistilleacutee

La solution reste stable pendant au moins 4 semaines agrave + 4 degC

22 Solution de nicotinamide-adeacutenine-dinucleacuteotide reacuteduit (NADH) environ 610 - 3 M Dissoudre 30 mg de NADH et 60 mg de NaHCO 3 avec 6 ml deau bidistilleacutee

23 Solution de malate deshydrogeacutenaselactate deshydrogeacutenase (MDHLDH) (05 mg MDHml 25 mg LDHml)

On fait un meacutelange de 01 ml MDH (5 mg MDHml) 04 ml de solution de sulfate dammonium (32 M) et 05 ml LDH (5 mgml) Cette suspension est stable pendant au moins un an agrave + 4 degC

24 Citrate-lyase CL (5 mg de proteacuteineml)

Dissoudre 168 mg de lyophilisat dans 1 ml deau glaceacutee La solution est stable pendant au moins une semaine agrave + 4 degC et pendant au moins 4 semaines sous forme congeleacutee

Il est recommandeacute de proceacuteder preacutealablement au dosage agrave la veacuterification de lactiviteacute de lenzyme

25 Polyvinylpolypyrolidone (PVPP)

Remarque Lensemble des reacuteactifs neacutecessaires pour ce dosage est commercialiseacute

3 APPAREILLAGE

31 Spectrophotomegravetre permettant deffectuer les mesures agrave 340 nm maximum dabsorption du NADH

Agrave deacutefaut photomegravetre agrave spectre discontinu permettant deffectuer les mesures agrave 334 nm ou agrave 365 nm Sagisshysant de mesures absolues dabsorbance (pas de gamme deacutetalonnage mais reacutefeacuterence au coefficient dextinction du NADH) les eacutechelles des longueurs donde et des absorbances de lappareil doivent ecirctre controcircleacutees

32 Cuves de verre de 1 cm de trajet optique ou cuves agrave usage unique

33 Micropipettes permettant de preacutelever des volumes allant de 002 agrave 2 ml


Le dosage du citrate seffectue geacuteneacuteralement directement sur le vin sans deacutecoloration preacutealable et sans dilution agrave condition que la teneur en acide citrique soit infeacuterieure agrave 400 mgl Sinon proceacuteder agrave la dilution du vin de maniegravere que la concentration en citrate se situe entre 20 et 400 mgl (quantiteacute de citrate dans la prise dessai comprise entre 5 μg et 80 μg)


Dans le case de vin rouge riche en composeacutes pheacutenoliques il est recommandeacute de le traiter au preacutealable par la PVPP

mettre en suspension dans leau 02 g environ de PVPP laisser reposer 15 minutes Filtrer sur filtre plisseacute

Agrave 10 ml de vin placeacute dans une fiole conique de 50 ml ajouter la PVPP humide preacuteleveacutee agrave la spatule sur le filtre Agiter pendant 2 agrave 3 minutes Filtrer


Le spectrophotomegravetre eacutetant reacutegleacute sur la longueur donde 340 nm les mesures dabsorbance se font dans les cuves de 1 cm labsorbance zeacutero eacutetant reacutegleacutee par rapport agrave lair (pas de cuve sur le trajet optique) Dans les cuves de 1 cm deacutepaisseur introduire

Teacutemoin Dosage

Solution 21 100 ml 100 ml


Eacutechantillon mdash 020 ml

Eau bidistilleacutee 200 ml 180 ml


Meacutelanger apregraves environ 5 minutes lire les absorbances des solutions teacutemoin et dosage (A 1 )

Ajouter


Meacutelanger attendre la fin de la reacuteaction (environ 5 minutes) et lire les absorbances des solutions teacutemoin et dosage (A 2 )

Deacuteterminer les diffeacuterences dabsorbances (A 1 ndashA 2 ) du teacutemoin et du dosage

Deacuteduire la diffeacuterence dabsorbances du teacutemoin de la diffeacuterence dabsorbances du dosage

ΔA = ΔA D ndash ΔA T

Remarque Le temps neacutecessaire agrave laction des enzymes peut varier dun lot agrave lautre Il nest donneacute ci-dessus quagrave titre indicatif Il est recommandeacute de le deacuteterminer pour chaque lot


La teneur en acide citrique est donneacutee en milligrammes par litre (mgl) sans deacutecimale

61 Mode de calcul

La concentration en milligrammes par litre est donneacutee par la formule geacuteneacuterale

C = ((V times PM)(ε times d times v)) times ΔA

V = volume du test en millilitres (ici 314 ml)

v = volume de leacutechantillon en millilitres (ici 02 ml)

PM = masse moleacuteculaire de la substance agrave doser (ici acide citrique anhydre = 1921)

d = trajet optique de la cuve en centimegravetres (ici 1 cm)

ε = coefficient dabsorption du NADH agrave 340 nm

ε = 63 mmole ndash 1 times l times cm ndash 1

On obtient

C = 479 times ΔA

Si une dilution a eacuteteacute effectueacutee lors de la preacuteparation de leacutechantillon multiplier le reacutesultat par le facteur de dilution

Remarque agrave 334 nm C = 488 times ΔA (ε = 62 mmole ndash 1 times l times cm ndash 1 )

agrave 365 nm C = 887 times ΔA (ε = 34 mmole ndash 1 times l times cm ndash 1 )



Teneur en acide citrique infeacuterieure agrave 400 mgl r = 14 mgl

Teneur en acide citrique supeacuterieure agrave 400 mgl r = 28 mgl


Teneur en acide citrique infeacuterieure agrave 400 mgl R = 39 mgl

Teneur en acide citrique supeacuterieure agrave 400 mgl R = 65 mgl


14 ACIDE SORBIQUE (OIV - AS-313-14-ACISOR) mdash MEacuteTHODE TYPE IV


11 Meacutethode de dosage par spectrophotomeacutetrie dabsorption dans lultra-violet

Lacide sorbique (acide hexadiegravene mdash 24 oiumlque trans trans) extrait par entraicircnement agrave la vapeur deau est doseacute dans le distillat du vin par spectrophotomeacutetrie dabsorption dans lultra-violet Les substances interfeacuterant sur la mesure dabsorption dans lultraviolet sont eacutelimineacutees par eacutevaporation agrave sec de la prise dessai du distillat leacutegegraverement alcaliniseacutee par une solution dhydroxyde de calcium Les teneurs infeacuterieures agrave 20 mgl doivent ecirctre confirmeacutees par la caracteacuterisation par chromatographie en couche mince (sensibiliteacute 1 mgl)

12 Meacutethode de dosage par chromatographie gazeuse

Lacide sorbique extrait dans leacutether eacutethylique est doseacute par chromatographie en phase gazeuse en preacutesence dun eacutetalon interne

13 Meacutethode de recherche de traces par chromatographie sur couche mince

Lacide sorbique extrait dans leacutether eacutethylique est seacutepareacute par chromatographie sur couche mince et sa concenshytration est eacutevalueacutee semi-quantitativement

2 MEacuteTHODE DE DOSAGE PAR SPECTROPHOTOMEacuteTRIE DABSORPTION DANS LULTRA-VIOLET

21 Reacuteactifs

211 Acide tartrique (C 4 H 6 O 6) cristalliseacute

212 Solution dhydroxyde de calcium Ca (OH) 2 environ 002 M

213 Solution de reacutefeacuterence dacide sorbique agrave 20 mg par litre

Dissoudre 20 mg dacide sorbique C 6 H 8 O 2 dans 2 ml environ de solution 01 M dhydroxyde de sodium Verser dans une fiole jaugeacutee de 1 000 ml ajuster au trait repegravere avec de leau On peut eacutegalement dissoudre 268 mg de sorbate de potassium C 6 H 7 KO 2 dans leau et compleacuteter agrave 1 000 ml avec de leau

22 Appareillage

221 Appareil dentraicircnement par la vapeur deau (voir laquoAciditeacute volatileraquo)

222 Bain deau agrave 100 degC

223 Spectrophotomegravetre permettant des mesures agrave la longueur donde de 256 nm avec cuves en quartz de 1 cm de trajet optique


231 Distillation

Placer dans le barboteur de lappareil dentraicircnement par la vapeur deau 10 ml de vin ajouter 1 agrave 2 g dacide tartrique (211) Recueillir 250 ml de distillat

232 Courbe deacutetalonnage

Preacuteparer par dilutions avec leau agrave partir de la solution de reacutefeacuterence (point 213) quatre solutions de reacutefeacuterence dilueacutees titrant respectivement 05 - 1 - 25 et 5 mg dacide sorbique par litre mesurer agrave laide du spectroshyphotomegravetre leurs absorbances respectives agrave 256 nm par rapport agrave leau distilleacutee Tracer la courbe des variations de labsorbance en fonction des concentrations des solutions La variation est lineacuteaire

233 Dosage

Dans une capsule de 55 mm de diamegravetre placer 5 ml de distillat ajouter 1 ml de solution dhydroxyde de calcium (point 212) Eacutevaporer agrave sec sur bain deau bouillante

Reprendre le reacutesidu par quelques millilitres deau distilleacutee entraicircner quantitativement dans une fiole jaugeacutee de 20 ml et ajuster au trait repegravere avec les eaux de rinccedilage Mesurer labsorbance agrave 256 nm agrave laide du specshytrophotomegravetre comparativement agrave une solution teacutemoin obtenue par dilution agrave 20 ml avec de leau de 1 ml de solution dhydroxyde de calcium (point 212)

Porter la valeur de labsorbance mesureacutee sur la droite deacutetalonnage en deacuteduire la concentration C de la solution en acide sorbique

Remarque Dans la pratique courante cette eacutevaporation agrave sec peut ecirctre neacutegligeacutee Opeacuterer directement la mesure dabsorbance sur le distillat dilueacute au 14 par rapport agrave leau distilleacutee



241 Mode de calcul

La concentration en acide sorbique du vin exprimeacutee en milligrammes par litre est eacutegale agrave

100 times C

C = concentration en acide sorbique de la solution analyseacutee par spectrophotomeacutetrie exprimeacutee en milligrammes par litre

3 MEacuteTHODE DE DOSAGE PAR CHROMATOGRAPHIE EN PHASE GAZEUSE

31 Reacuteactifs

311 Eacutether eacutethylique (C 2 H 5 ) 2 O distilleacute au moment de lutilisation

312 Solution de leacutetalon interne solution dacide undeacutecanoiumlque C 11 H 22 O 2 dans leacutethanol agrave 95 pour 100 (vol) titrant 1 g par litre

313 Solution aqueuse dacide sulfurique H 2 SO 4 (ρ 20 = 184 gml) dilueacute 13 (vv)

32 Appareillage

321 Chromatographe en phase gazeuse eacutequipeacute dun deacutetecteur agrave ionisation de flamme et dune colonne en acier inoxydable (4 m times 18 de pouce) preacutealablement traiteacutee par le dimeacutethyldichlorosilane et garnie de phase stationshynaire constitueacutee par un meacutelange de dieacutethylegraveneglycol succinate (5 ) et dacide phosphorique (1 ) (DEGS- H 3 PO 4 ) ou par un meacutelange de dieacutethylegraveneglycol adipate (7 ) et dacide phosphorique (1 ) (DEGA mdash H 3 PO 4 ) fixeacute sur Gaschrom Q 80 mdash 100 mesh

Pour le traitement au dimeacutethyldichlorosilane (DMDCS) faire passer dans la colonne une solution titrant 2 agrave 3 g de DMDCS dans le toluegravene Laver immeacutediatement la colonne avec du meacutethanol faire passer un courant dazote puis de lhexane et agrave nouveau un courant dazote La remplir ensuite

Conditions opeacuteratoires

Tempeacuterature du four 175 degC

Tempeacuterature de linjecteur et du deacutetecteur 230 degC

Gaz vecteur azote (deacutebit 20 mlmin)

322 Microseringue de 10 microlitres de capaciteacute gradueacutee par 01 microlitre

Remarque Dautres types de colonnes peuvent eacutegalement permettre une bonne seacuteparation notamment la colonne capillaire (par exemple FFAP)

Le mode opeacuteratoire deacutecrit ci-dessous est donneacute agrave titre dexemple


331 Preacuteparation de leacutechantillon agrave analyser

Dans un tube de verre de 40 ml environ de capaciteacute et muni dun bouchon rodeacute introduire 20 ml de vin ajouter 2 ml de solution de leacutetalon interne ( point 312) et 1 ml de solution dilueacutee dacide sulfurique (point 313)

Apregraves agitation par retournements successifs ajouter au contenu du tube 10 ml deacutether eacutethylique (point 311) Extraire lacide sorbique dans la phase organique par agitation du tube durant 5 minutes Laisser deacutecanter

332 Preacuteparation de la solution de reacutefeacuterence

Seacutelectionner un vin dont le chromatogramme de lextrait agrave leacutether ne preacutesente aucun pic au niveau de leacutelution de lacide sorbique surcharger ce vin en acide sorbique agrave la concentration de 100 mg par litre Traiter 20 ml de leacutechantillon ainsi preacutepareacute selon le mode opeacuteratoire deacutecrit au point 331

333 Chromatographie

Injecter successivement dans le chromatographe agrave laide dune microseringue 2 μl de la phase eacutetheacutereacutee obtenue comme indiqueacute au point 332 et 2 μl de la phase eacutetheacutereacutee obtenue comme indiqueacute au point 331

Enregistrer les chromatogrammes respectifs veacuterifier lidentiteacute des temps de reacutetention respectifs de lacide sorbique et de leacutetalon interne Mesurer la hauteur (ou la surface) de chacun des pics enregistreacutes



341 Mode de calcul

La concentration en acide sorbique du vin analyseacute exprimeacutee en milligrammes par litre est eacutegale agrave

100 times (hH) times (li)

H = hauteur du pic de lacide sorbique dans la solution de reacutefeacuterence

h = hauteur du pic de lacide sorbique dans leacutechantillon agrave analyser

l = hauteur du pic de leacutetalon interne dans la solution de reacutefeacuterence

i = hauteur du pic de leacutetalon interne dans leacutechantillon agrave analyser

Note La concentration en acide sorbique peut ecirctre deacutetermineacutee de la mecircme maniegravere agrave partir des mesures de la surface des pics respectifs


15 PH (OIV - AS-313-15-PH) mdash MEacuteTHODE TYPE I

1 PRINCIPE

Mesure de la diffeacuterence de potentiel entre deux eacutelectrodes plongeacutees dans le liquide eacutetudieacute Lune des eacutelectrodes a un potentiel qui est une fonction deacutefinie du pH du liquide lautre a un potentiel fixe et connu et constitue leacutelectrode de reacutefeacuterence

2 APPAREILS

21 pH megravetre eacutetalonneacute en uniteacutes pH permettant des mesures agrave 005 uniteacute pregraves au moins

22 Eacutelectrodes

221 Eacutelectrode de verre agrave conserver dans leau distilleacutee

222 Eacutelectrode de reacutefeacuterence au calomel-chlorure de potassium satureacute agrave conserver dans une solution satureacutee de chlorure de potassium

223 Ou eacutelectrode combineacutee agrave conserver dans leau distilleacutee

3 REacuteACTIFS

31 Solutions tampons

311 Solution satureacutee de tartrate acide de potassium Solution contenant au moins 57 gl de tartrate acide de potassium (C 4 H 5 KO 6 ) agrave 20 degC Cette solution peut se conserver 2 mois en preacutesence de 01 g de thymol pour 200 ml

pH

357 agrave 20 degC

356 agrave 25 degC

355 agrave 30 degC

8 gt gt gt gt lt gt gt gt gt

312 Solution 005 M de phtalate acide de potassium Solution contenant 10211 gl de phtalate acide de potassium (C 8 H 5 KO 4 ) agrave 20 degC (Dureacutee maximale de conservation 2 mois)

pH

3999 agrave 15 degC

4003 agrave 20 degC

4008 agrave 25 degC

4015 agrave 30 degC

8 gtgt gt gt gt gt gt gt gt lt gtgt gt gt gt gt gt gt gt

313 Solution contenant


Phosphate dipotassique K 2 H PO 4 4354 g

Eau qsp 1 l

(Dureacutee maximale de conservation 2 mois)

pH

690 agrave 15 degC

688 agrave 20 degC

686 agrave 25 degC

685 agrave 30 degC


Remarque Les solutions tampons de reacutefeacuterence du commerce peuvent eacutegalement ecirctre utiliseacutees




411 Cas du moucirct et du vin

Opeacuterer directement sur le moucirct ou le vin

412 Cas du moucirct concentreacute rectifieacute

Diluer le moucirct concentreacute rectifieacute avec de leau pour obtenir une concentration de 25 plusmn 05 pour 100 (mm) en sucres totaux (25 o Brix)

Si P est la teneur pour 100 (mm) en sucres totaux du moucirct concentreacute rectifieacute peser une masse eacutegale agrave 2 500P

et compleacuteter agrave 100 g avec de leau Leau utiliseacutee doit avoir une conductiviteacute infeacuterieure agrave 2 microsiemens par centimegravetre

42 Mise au zeacutero de lappareil

La mise au zeacutero seffectue avant toute mesure en suivant les indications donneacutees pour lappareil utiliseacute


Leacutetalonnage seffectue agrave 20 degC en suivant les indications donneacutees pour lappareil utiliseacute avec les solutions tampons de pH 688 et 357 agrave 20 degC

Utiliser la solution tampon de pH 400 agrave 20 degC pour controcircler le calibrage de leacutechelle

44 Mesure

Plonger leacutelectrode dans leacutechantillon analyseacute dont la tempeacuterature doit ecirctre comprise entre 20 et 25 degC et aussi proche que possible de 20 degC Lire directement sur leacutechelle la valeur du pH

Effectuer au moins deux deacuteterminations sur le mecircme eacutechantillon

Prendre comme reacutesultat la moyenne arithmeacutetique des deacuteterminations


Le pH du moucirct du vin ou de la solution agrave 25 pour 100 (mm) (25 o Brix) du moucirct concentreacute rectifieacute est exprimeacute avec 2 deacutecimales


16 DOSAGE SIMULTANE DE LACIDE L-ASCORBIQUE ET DE LACIDE D-ISO-ASCORBIQUE PAR HPLC ET DEacuteTECTION UV (OIV-AS-313-22-ACASCO) mdash MEacuteTHODE TYPE II

1 INTRODUCTION

Lacide ascorbique est un antioxydant preacutesent naturellement dans toute une seacuterie de denreacutees alimentaires La quantiteacute normale dacide ascorbique dans le raisin diminue lors de lrsquoeacutelaboration des moucircts et au cours de la vinification Il peut ecirctre ajouteacute aux moucircts et aux vins dans certaines limites

La meacutethode deacutecrite a eacuteteacute valideacutee dans le cadre dessais interlaboratoires par des analyses deacutechantillons de vin avec des quantiteacutes ajouteacutees dacide L-ascorbique et dacide D-isoascorbique respectivement de 30 mgl agrave 150 mgl et de 10 mgl agrave 100 mgl

2 DOMAINE DAPPLICATION

Cette meacutethode convient au dosage simultaneacute de lacide L-ascorbique et de lacide D-isoascorbique (acide eacuterythorbique) dans le vin par chromatographie liquide haute performance et deacutetection UV dans une plage de 3 agrave 150 mgl

Pour des teneurs supeacuterieures agrave 150 mgl une dilution de lrsquoeacutechantillon est neacutecessaire

3 PRINCIPE

Les eacutechantillons sont directement injecteacutes dans le systegraveme HLPC apregraves filtration sur membrane Les analytes sont seacutepareacutes sur une colonne agrave phase inverseacutee et sont soumis agrave une deacutetection UV agrave 266 nm La quantification de lacide L-ascorbique et de lacide D-isoascorbique est effectueacutee par rapport agrave un eacutetalon externe

Remarque Les colonnes et les conditions de fonctionnement sont donneacutees agrave titre dexemple Dautres types de colonnes peuvent eacutegalement assurer une bonne seacuteparation

4 REACTIFS ET PRODUITS

41 Reacuteactifs

411 n-octylamine pureteacute ge 990

412 Aceacutetate de sodium x 3 H 2 O pureteacute ge 990

413 Acide aceacutetique pur 100

414 Acide phosphorique approx agrave 25

415 Acide oxalique pureteacute ge 990

416 Ascorbate oxydase

417 Acide L-ascorbique ultra ge 995

418 Acide D-isoascorbique pureteacute ge 990

419 Eau bidistilleacutee

4110 Meacutethanol pA 998

42 Preacuteparation de la phase mobile

421 Solutions pour la phase mobile

Preacuteparer les solutions suivantes pour la phase mobile

4211 1293 g de n-octylamine dans 100 ml de meacutethanol

4212 6805 g daceacutetate de sodium times 3 H 2 O dans 500 ml deau bidistilleacutee

4213 1201 g dacide aceacutetique pur dans 200 ml deau bidistilleacutee

4214 Solution tampon (pH 54) 430 ml de solution daceacutetate de sodium (4212) et 70 ml de solution dacide aceacutetique (4213)



Ajouter 5 ml de solution de n-octylamine (4211) agrave environ 400 ml deau bidistilleacutee dans un beacutecher Ajuster cette solution agrave un pH de 54 agrave 56 en ajoutant goutte agrave goutte de lacide phosphorique agrave 25 (414) Ajouter 50 ml de la solution tampon (4214) et transfeacuterer le composeacute dans une fiole jaugeacutee de 1 000 ml puis compleacuteter avec de leau bidistilleacutee Avant utilisation la phase mobile doit ecirctre filtreacutee agrave laide dune membrane (cellulose reacutegeacuteneacutereacutee de 02 μm) et si possible deacutegazeacutee avec de lheacutelium (pendant environ 10 minutes) selon les besoins du systegraveme HLPC utiliseacute

43 Preacuteparation de la solution eacutetalon

Remarque

Toutes les solutions eacutetalons (solution megravere 431 et solutions de travail 432) doivent ecirctre preacutepareacutees chaque jour et de preacutefeacuterence stockeacutees dans un reacutefrigeacuterateur avant injection

431 Preacuteparation de la solution megravere (1 mgml)

Preacuteparer une solution aqueuse dacide oxalique agrave 2 et eacuteliminer lrsquooxygegravene dissout par barbotage agrave lrsquoazote

Peser exactement 100 mg dacide L-ascorbique et 100 mg dacide D-isoascorbique dans une fiole jaugeacutee de 100 ml et la remplir de solution aqueuse dacide oxalique agrave 2

432 Preacuteparation des solutions de travail

Pour les solutions de travail diluer la solution megravere (431) aux concentrations deacutesireacutees avec la solution dacide oxalique agrave 2 Des concentrations entre 10 mgl et 120 mgl sont recommandeacutees Par exemple 100 μl 200 μl 400 μl 800 μl 1 200 μl agrave 10 ml correspondant agrave 10 20 40 80 et 120 mgl

5 APPAREILLAGE

Mateacuteriel courant de laboratoire en particulier les eacutequipements suivants

51 Pompe HLPC

52 Injecteur agrave boucle de 20 μl

53 Deacutetecteur UV

6 ECHANTILLONNAGE

Des eacutechantillons de vin sont filtreacutes sur une membrane dun diamegravetre de pore de 02 μm avant injection


7 MODE OPERATOIRE

71 Conditions dutilisation du systegraveme HLPC

Injecter dans lappareil chromatographique 20 μl de leacutechantillon filtreacute sur membrane

Preacutecolonne par exemple Nucleacuteosil 120 C18 (4 cm times 4 mm times 7 μm)

Colonne par exemple Nucleacuteosil 120 C18 (25 cm times 4 mm times 7 μm)

Volume dinjection 20 μl

Phase mobile voir 422 isocratique

Deacutebit 1 mlmin

Deacutetection UV 266 nm

Cycle de rinccedilage au moins 30 ml deau bidistilleacutee suivis de 30 ml de meacutethanol et de 30 ml daceacutetonishytrile


72 IdentificationConfirmation

Lidentification des pics seffectue par comparaison des temps de reacutetention des eacutetalons et des eacutechantillons Avec le systegraveme chromatographique deacutecrit en exemple les temps de reacutetention sont respectivement de 77 min pour lacide L-ascorbique et 83 min pour lacide D-isoascorbique (voir figure 1 chromatogramme A)

Pour confirmer des reacutesultats positifs ces eacutechantillons doivent ecirctre traiteacutes avec une spatule dascorbate oxydase et mesureacutes de nouveau (voir figure 1 chromatogramme B)

En raison de la deacutegradation de lacide L-ascorbique et de lacide D-isoascorbique provoqueacutee par lascorbate oxydase aucun signal ne devrait ecirctre trouveacute au temps de reacutetention de lacide L-ascorbique et de lacide D- isoascorbique En cas de deacutetection de pics parasites leur surface doit ecirctre prise en compte dans le calcul de la concentration des analytes

Figure 1

Exemple de chromatogramme drsquoun vin blanc A avant le traitement agrave lrsquoascorbate oxydase B apregraves traitement

Remarque Il est recommandeacute danalyser les eacutechantillons traiteacutes agrave lascorbate oxydase agrave la fin dune seacutequence suivie du cycle de rinccedilage pour eacuteliminer les restes dascorbate oxydase de la colonne faute de quoi lacide L-ascorbique et lacide D-isoascorbique pourraient ecirctre convertis par les restes dascorbate oxydase lors de la mesure HPLC et le reacutesultat pourrait sen trouver affecteacute

8 CALCULS

Preacuteparer une courbe deacutetalonnage agrave partir des solutions de travail (432) Selon la meacutethode de leacutetalon externe la quantification de lacide L-ascorbique et de lacide D-isoascorbique est reacutealiseacutee en mesurant les surfaces des pics et en les comparant agrave la concentration correspondante sur la courbe deacutetalonnage

Expression des reacutesultats

Les reacutesultats sont exprimeacutes agrave une deacutecimale en mgL dacide L-ascorbique et dacide D-isoascorbique respectishyvement (par exemple 513 mgl)

Pour des teneurs supeacuterieures agrave 150 mgl prendre en compte la dilution

9 FIDEacuteLITEacute

La meacutethode a eacuteteacute testeacutee dans le cadre dun essai interlaboratoire organiseacute en 1994 par lancien Office feacutedeacuteral dhygiegravene publique (Bundesgesundheitsamt Allemagne) auquel ont participeacute 27 laboratoires Le programme de lessai interlaboratoire a suivi le sect 35 de la loi allemande relative aux denreacutees alimentaires qui a eacuteteacute accepteacute par lOIV jusquagrave lintroduction du nouveau protocole (OENO 62000)


Leacutetude a porteacute sur quatre eacutechantillons diffeacuterents de vin - deux vins blancs et deux vins rouges ndash avec cinq reacutepeacutetitions de chaque eacutechantillon demandeacutees Eacutetant donneacute quil neacutetait pas possible de preacuteparer des eacutechantillons avec une stabiliteacute suffisante des analytes (vitesses de deacutegradation diffeacuterentes) il a eacuteteacute deacutecideacute denvoyer aux participants des quantiteacutes deacutefinies de substances eacutetalons pures ainsi que les eacutechantillons de vin Les laboratoires ont reccedilu pour consigne de transfeacuterer les eacutetalons quantitativement dans les eacutechantillons de vin et de les analyser immeacutediatement Des volumes de 30 agrave 150 mgl pour lacide L-ascorbique et de 10 agrave 100 mgl pour lacide D- isoascorbique ont eacuteteacute analyseacutes Les reacutesultats deacutetailleacutes de leacutetude sont preacutesenteacutes dans lANNEXE publieacutee par lOIV Leacutevaluation a eacuteteacute reacutealiseacutee selon DINISO 5725 (version 1988)

Les eacutecarts-types de reacutepeacutetabiliteacute (s r ) et de reproductibiliteacute (s R ) eacutetaient en adeacutequation avec les concentrations dacide L-ascorbiques et dacide D-isoascorbique Le paramegravetre de preacutecision reacuteelle peut ecirctre calculeacute agrave laide des eacutequations suivantes

Acide L-ascorbique

s r = 0011 x + 031

s R = 0064 x + 139

x concentration dacide L-ascorbique (mgL)

Acide D-isoascorbique

s r = 0014 x + 031

s R = 0079 x + 129

x concentration dacide D-isoascorbique (mgL)

Exemple

50 mgl dacide D-isoascorbique s r = 10 mgl

s R = 52 mgL

10 AUTRES CARACTEacuteRISTIQUES DE LrsquoANALYSE

101 Limite de deacutetection

La limite de deacutetection de cette meacutethode a eacuteteacute estimeacutee agrave 3 mgl pour lacide L-ascorbique et lacide D- isoascorbique

102 Justesse

La reacutecupeacuteration moyenne calculeacutee agrave partir de lessai interlaboratoire meneacute sur quatre eacutechantillons (voir lANNEXE publieacutee dans le Recueil de lOIV) a eacuteteacute de

mdash 1006 pour lacide L-ascorbique

mdash 1033 pour lacide D-isoascorbique


17 DIOXYDE DE CARBONE (OIV - AS-314-01-DIOCAR) mdash MEacuteTHODE TYPE II


11 Cas des vins tranquilles (surpression de CO 2 le 05 times 10 5 Pa) ( 1 )

Le volume de vin preacuteleveacute sur leacutechantillon ameneacute au voisinage de 0 degC est verseacute dans un excegraves suffisant de solution titreacutee dhydroxyde de sodium pour avoir un pH de 10-11 On titre avec une solution acide en preacutesence danhydrase carbonique La teneur en dioxyde de carbone est deacuteduite du volume verseacute pour passer de pH 86 (forme carbonate acide) agrave 40 (acide carbonique) Un titrage teacutemoin effectueacute dans les mecircmes conditions sur le vin deacutecarboniqueacute permet de tenir compte du volume de solution dhydroxyde de sodium consommeacute par les acides du vin

12 Cas des vins peacutetillants et des vins mousseux

Leacutechantillon de vin agrave analyser est ameneacute au voisinage de son point de congeacutelation Apregraves soutirage dun certain volume destineacute agrave servir de teacutemoin apregraves deacutecarbonication on alcalinise le reste de la bouteille pour fixer tout le CO 2 sous forme de Na 2 CO 3 On titre avec une solution acide en preacutesence danhydrase carbonique La teneur en dioxyde de carbone est deacuteduite du volume de solution acide verseacutee pour passer de pH 86 (forme carbonate acide) agrave pH 40 (acide carbonique) Un titrage teacutemoin effectueacute dans les mecircmes conditions sur le vin deacutecarboshyniqueacute permet de tenir compte du volume de solution dhydroxyde de sodium consommeacute par les acides du vin

2 DESCRIPTION DE LA MEacuteTHODE

21 Cas des vins tranquilles (surpression de dioxyde de carbone le 05 times 10 5 Pa)

211 Appareillage

2111 Agitateur magneacutetique

2112 pH megravetre

212 Reacuteactifs

2121 Solution dhydroxyde de sodium (NaOH) 01 M

2122 Solution dacide sulfurique (H 2 SO 4 ) 005 M

2123 Solution danhydrase carbonique agrave 1 gramme par litre


Refroidir leacutechantillon de vin aux environs de 0 degC ainsi que la pipette de 10 ml servant agrave son preacutelegravevement

Preacutelever dans un vase cylindrique de 100 ml 25 ml de solution dhydroxyde de sodium (point 2121) ajouter 2 gouttes de solution aqueuse danhydrase carbonique (point 2123) Y introduire 10 ml de vin au moyen de la pipette refroidie agrave 0 degC

Placer le vase cylindrique sur lagitateur magneacutetique mettre en place leacutelectrode et le barreau magneacutetique et proceacuteder agrave une agitation modeacutereacutee

Lorsque le liquide est revenu agrave la tempeacuterature ambiante verser par affusion lente la solution dacide sulfurique (point 2122) jusquagrave pH 86

Continuer les affusions dacide sulfurique (point 2122) jusquagrave pH 40 Soit n ml le volume utiliseacute entre pH 86 et 40

Proceacuteder par ailleurs agrave leacutelimination du CO 2 sur 50 ml environ de leacutechantillon de vin par agitation sous vide pendant 3 minutes en reacutechauffant la fiole dans un bain deau agrave 25 degC environ

Appliquer sur 10 ml de vin deacutecarboniqueacute le mode opeacuteratoire ci-dessus soit nprime ml le volume utiliseacute


1 ml de solution titreacutee dacide sulfurique 005 M correspond agrave 44 mg de CO 2

La quantiteacute de CO 2 en grammes par litre de vin est donneacutee par

044 (n ndash nprime)

Elle est exprimeacutee avec 2 deacutecimales

Remarque Dans le cas des vins peu chargeacutes en CO 2 (CO 2 lt 1 gl) laddition danhydrase carbonique pour catalyser lhydratation du CO 2 nest pas neacutecessaire


( 1 ) 10 5 pascal (Pa) = 1 bar


221 Appareillage


2212 pH megravetre

222 Reacuteactifs

2221 Solution dhydroxyde de sodium (NaOH) agrave 50 pour 100 (mm)




Sur la bouteille de vin agrave analyser tracer un repegravere au niveau du remplissage et la refroidir jusquagrave deacutebut de congeacutelation

Laisser la bouteille se reacutechauffer leacutegegraverement tout en lagitant jusquagrave disparition des cristaux de glace

Deacuteboucher rapidement et mettre de cocircteacute dans une eacuteprouvette gradueacutee 45 agrave 50 ml de vin qui serviront au dosage teacutemoin Le volume exact de ce preacutelegravevement v ml sera deacutetermineacute par lecture sur leacuteprouvette apregraves son retour agrave la tempeacuterature ambiante

Ajouter sitocirct le preacutelegravevement effectueacute 20 ml de solution dhydroxyde de sodium (point 2221) dans la bouteille pour une contenance de 750 ml

Attendre que le vin soit revenu agrave la tempeacuterature ambiante

Placer dans un vase cylindrique de 100 ml 30 ml deau distilleacutee bouillie et 2 gouttes de la solution danhydrase carbonique (point 2223) Y ajouter 10 ml de vin alcaliniseacute

Placer le vase sur lagitation magneacutetique mettre en place leacutelectrode et le barreau magneacutetique et proceacuteder agrave une agitation modeacutereacutee

Verser par affusion lente la solution dacide sulfurique (point 2222) jusquagrave pH 86


Proceacuteder par ailleurs agrave leacutelimination du CO 2 sur les v ml de vin mis agrave cocircteacute pour le dosage teacutemoin par agitation sous vide pendant 3 minutes en reacutechauffant la fiole dans un bain deau agrave 25 degC environ Preacutelever 10 ml de vin deacutecarboniqueacute dans 30 ml deau distilleacutee bouillie ajouter 2 agrave 3 gouttes de solution dhydroxyde de sodium (point 2221) pour amener le pH agrave 10-11 Appliquer ensuite le mode opeacuteratoire ci-dessus Soit nprime ml le volume dacide sulfurique 005 M verseacute


1 ml de solution dacide sulfurique 005 M correspond agrave 44 mg de CO 2

Vider la bouteille de son vin alcaliniseacute et deacuteterminer agrave 1 ml pregraves le volume initial du vin en la remplissant avec de leau jusquau trait de repegravere soit V ml


044(n ndash nprime) times ((V ndash v + 20)(V ndash v))


23 Calcul de la surpression theacuteorique

La surpression agrave 20 degC Paph 20 exprimeacutee en pascals est donneacutee par la formule

Paph 20 = ((Q)(1951 times 10 -5 (086 ndash 001 A)(1 ndash 000144 S))) - Patm

avec

Q teneur en grammes de CO 2 par litre de vin

A titre alcoomeacutetrique du vin agrave 20 degC

S teneur en sucres du vin en grammes par litre

Patm pression atmospheacuterique exprimeacutee en pascals


18 DOSAGE DU DIOXYDE DE CARBONE DANS LE VIN PAR METHODE MANOMETRIQUE (OIV ndash AS314- 04-CO2MAN) mdash MEacuteTHODE TYPE II

(pm)

[La description de cette meacutethode drsquoanalyse fait lrsquoobjet drsquoune mise agrave jour par les instances de lrsquoOIV Elle sera publieacutee dans une prochaine Communication de la Commission degraves qursquoun texte mis agrave jour sera publieacute par lrsquoOIV dans leacutedition 2010 du Recueil des Meacutethode Internationales danalyse de lOIV]


19 MESURE DE LA SURPRESSION DES VINS MOUSSEUX ET PETILLANTS (OIV - AS-314-02-SURPRES) mdash MEacuteTHODE TYPE I

1 PRINCIPE

Apregraves stabilisation thermique et agitation de la bouteille la surpression est mesureacutee agrave lrsquoaide drsquoun aphromegravetre (jauge de pression) Elle est exprimeacutee en Pascals (Pa) (meacutethode de type I) La meacutethode est eacutegalement applicable aux vins mousseux gazeacuteifieacutes et aux vins peacutetillants gazeacuteifieacutes

2 APPAREILLAGE

Lrsquoappareil permettant la mesure de la surpression dans les bouteilles de vins mousseux et peacutetillants srsquoappelle un aphromegravetre Il se preacutesente diffeacuteremment suivant le bouchage de la bouteille (capsule meacutetallique capsule couronne bouchon liegravege ou plastique)

21 Pour les bouteilles munies drsquoune capsule

Il est constitueacute de trois parties (figure 1)

mdash la partie supeacuterieure (ou vis porte-aiguille) est composeacutee du manomegravetre drsquoune bague de serrage manuel drsquoune vis sans fin qui coulisse dans la partie moyenne et drsquoune aiguille qui traverse la capsule Lrsquoaiguille possegravede un trou lateacuteral qui communique la pression au manomegravetre Un joint assure lrsquoeacutetancheacuteiteacute de lrsquoensemble sur la capsule de la bouteille

mdash la partie moyenne (ou eacutecrou) sert agrave centrer la partie supeacuterieure Elle se visse dans la partie infeacuterieure de maniegravere agrave maintenir fortement lrsquoensemble sur la bouteille

mdash la partie infeacuterieure (ou eacutetrier) est munie drsquoun ergot qui se glisse sous la bague de la bouteille de maniegravere agrave retenir lrsquoensemble Il existe des bagues adapteacutees agrave chaque type de bouteille

22 Pour les bouteilles munies drsquoun bouchon

Il est constitueacute de deux parties (figure 2)

mdash La partie supeacuterieure est identique agrave lrsquoappareil preacuteceacutedent toutefois lrsquoaiguille est plus longue Cette derniegravere est formeacutee drsquoun long tube creux au bout duquel est placeacutee une pointe qui aidera agrave traverser le bouchon Cette pointe est amovible elle tombe dans le vin une fois le bouchon traverseacute

mdash la partie infeacuterieure est formeacutee par lrsquoeacutecrou et drsquoune base venant reposer sur le bouchon Celle-ci est munie de quatre vis de serrage servant agrave maintenir lrsquoensemble sur le bouchon

Figure 2 Aphromegravetre pour bouchons figure 1 Aphromegravetre pour capsules


Remarques concernant les manomegravetres eacutequipant ces deux types drsquoappareil

mdash ils peuvent ecirctre soit meacutecaniques agrave tube de Bourdon soit numeacuteriques agrave capteur pieacutezoeacutelectrique Dans le premier cas le tube de Bourdon sera obligatoirement en acier inoxydable

mdash ils sont gradueacutes en pascals (abreacuteviation Pa) Pour les vins mousseux il est plus pratique drsquoutiliser le 10 5 pascals (10 5 Pa) ou le kilopascal (kPa) comme uniteacute

mdash ils peuvent ecirctre de diffeacuterentes classes La classe dun manomegravetre est la preacutecision de la lecture par rapport agrave la pleine eacutechelle exprimeacutee en pourcentage (ex manomegravetre 1 000 kPa classe 1 signifie pression dutilisation maximale 1 000 kPa lecture agrave plusmn 10 kPa) La classe 1 est recommandeacutee pour des mesures preacutecises

3 MODE OPERATOIRE

La mesure doit srsquoeffectuer sur des bouteilles dont la tempeacuterature est stabiliseacutee depuis au moins 24 heures Apregraves avoir perceacute la couronne le bouchon de liegravege ou de plastique la bouteille doit alors ecirctre fortement agiteacutee jusquagrave pression constante pour effectuer la lecture

31 Cas des bouteilles capsuleacutees

Glisser lrsquoergot de lrsquoeacutetrier sous la bague de la bouteille Visser lrsquoeacutecrou jusqursquoagrave ce que lrsquoensemble soit serreacute sur la bouteille La partie supeacuterieure est alors visseacutee dans lrsquoeacutecrou Pour eacuteviter des pertes de gaz le percement de la capsule doit srsquoeffectuer le plus rapidement possible pour amener le joint au contact de la capsule La bouteille doit ecirctre ensuite fortement agiteacutee jusqursquoagrave pression constante pour effectuer la lecture

32 Cas des bouteilles boucheacutees

Mettre une pointe en place au bout de lrsquoaiguille Positionner lrsquoensemble du montage sur le bouchon Serrer les quatre vis sur le bouchon Visser la partie supeacuterieure (lrsquoaiguille traverse alors le bouchon) La pointe doit tomber dans la bouteille pour que la pression puisse se transmettre au manomegravetre Effectuer la lecture apregraves agitation de la bouteille jusqursquoagrave pression constante Reacutecupeacuterer la pointe apregraves lecture

4 EXPRESSION DES RESULTATS

La surpression agrave 20 degC (Paph 20 ) est exprimeacutee en pascals (Pa) ou en kilopascals (kPa) Elle doit ecirctre en concordance avec la preacutecision du manomegravetre (par exemple 63 times 10 5 Pa ou 630 kPa et non 633 times 10 5 Pa ou 633 kPa pour un manomegravetre 1 000 kPa pleine eacutechelle de classe 1)

Quand la tempeacuterature de mesure est diffeacuterente de 20 degC il convient dapporter une correction en multipliant la pression mesureacutee par le coefficient approprieacute (voir tableau 1)

Tableau 1

Rapport de la surpression Paph 20 dun vin peacutetillant ou mousseux agrave 20 degC agrave la surpression Paph t agrave une tempeacuterature t

degC

0 185

1 180

2 174

3 168

4 164

5 159

6 154

7 150

8 145

9 140

10 136

11 132

12 128

degC

13 124

14 120

15 116

16 113

17 109

18 106

19 103

20 100

21 097

22 095

23 093

24 091

25 088


5 CONTROcircLE DES RESULTATS

Meacutethode de deacutetermination directe de paramegravetres physiques (meacutethode critegravere de type I)

Veacuterification des aphromegravetres

Les aphromegravetres doivent ecirctre veacuterifieacutes reacuteguliegraverement (au moins une fois par an)

La veacuterification se fait agrave laide dun banc deacutetalonnage Il permet de comparer le manomegravetre agrave tester agrave un manomegravetre de reacutefeacuterence de classe supeacuterieure raccordeacute aux eacutetalons nationaux monteacute en parallegravele Le controcircle est utiliseacute pour confronter les valeurs indiqueacutees par les deux appareils pour des pressions croissantes puis deacutecroissantes Sil y a une diffeacuterence entre les deux une vis de reacuteglage permet deffectuer les corrections neacutecessaires

Les laboratoires et les organismes autoriseacutes sont tous eacutequipeacutes de tels bancs deacutetalonnage ils sont eacutegalement disponibles aupregraves des constructeurs de manomegravetres


20 DOSAGE DU LYSOZYME DANS LE VIN PAR HPLC (OIV-AS-315-14) mdash MEacuteTHODE TYPE IV

1 INTRODUCTION

Il est preacutefeacuterable drsquoutiliser pour le lysozyme une meacutethode analytique non baseacutee sur lrsquoactiviteacute enzymatique

2 CHAMP DrsquoAPPLICATION

Cette meacutethode permet la quantification du lysozyme (mg de proteacuteinel) preacutesent dans les vins blancs et rouges indeacutependamment de lrsquoactiviteacute enzymatique (qui pourrait ecirctre compromise par une deacutenaturation partielle ou par des pheacutenomegravenes de complexation et de copreacutecipitations) de la matrice

3 DEacuteFINITION

La chromatographie liquide agrave haute performance (CLHP) offre une approche analytique baseacutee sur lrsquointeraction de type steacuterique polaire ou drsquoadsorption entre la phase stationnaire et lrsquoanalyte et par conseacutequent non lieacutee agrave lrsquoactiviteacute enzymatique reacuteelle de la proteacuteine

4 PRINCIPE

Lrsquoanalyse srsquoeffectue par chromatographie liquide agrave haute performance (CLHP) en associant un deacutetecteur specshytrophotomeacutetrique et un deacutetecteur spectrofluorimeacutetrique Le contenu inconnu de lrsquoeacutechantillon de vin est calculeacute en fonction de la surface du pic chromatographique en utilisant la meacutethodologie de leacutetalonnage externe

5 REacuteACTIFS

51 Solvants et solutions

Aceacutetonitrile (CH 3 CN) pour analyse CLHP

Acide trifluoroaceacutetique (TFA) pur

Eau deacutesioniseacutee pour analyse CLHP

Solution standard acide tartrique 1 gl Alcool eacutethylique 10 vv ajusteacute agrave pH 32 avec du tartrate de potassium neutre

52 Eacuteluants

A CH 3 CN 1 TFA 02 H 2 O= 988

B CH 3 CN 70 TFA 02 H 2 O= 298

53 Solutions de reacutefeacuterence

De 1 agrave 250 mgL de lysozyme standard dissous dans la solution modegravele par agitation continue durant un minimum de 12 heures

6 MATEacuteRIEL

61 Appareil HPLC avec systegraveme de pompage preacutevu pour effectuer un gradient deacutelution

62 Logement pour colonne thermostateacutee (four)

63 Deacutetecteur spectrophotomeacutetrique associeacute agrave un deacutetecteur spectrofluorimeacutetrique

64 Boucle dinjection 20 μL

65 Colonne polymegravere agrave phase inverse avec des groupes fonctionnels pheacutenyl (diamegravetre des pores = 1 000 Aring limite drsquoexclusion = 1 000 000 Da) Tosoh Bioscience TSK-gel Pheacutenyl 5PW RP 75 cm times 46 mm ID agrave titre drsquoexemple

66 Preacutecolonne dans le mecircme mateacuteriau que la colonne Tosoh Bioscience TSK-gel Pheacutenyl 5PW RP Guardgel 15 cm x 32mm ID agrave titre drsquoexemple

7 PREacutePARATION DE LrsquoEacuteCHANTILLON

Les eacutechantillons de vin sont acidifieacutes avec du HCl (10 M) dilueacute au 110egraveme et filtreacutes avec un filtre en polyamide dont les pores ont un diamegravetre de 022 μm 5 minutes apregraves lrsquoajout Lrsquoanalyse chromatographique est effectueacutee immeacutediatement apregraves la filtration

8 CONDITIONS OPEacuteRATOIRES

81 Deacutebit drsquoeacuteluant 1 mlmin

82 Tempeacuterature de la colonne 30 degC


83 Deacutetection spectrophotomeacutetrique 280 nm

84 Deacutetection spectrofluorimeacutetrique λ ex = 276 nm λ em = 345 nm Gain = 10

85 Programme du gradient deacutelution

Temps (min) Sol A Sol B gradient

0 100 0

isocratique

3 100 0

lineacuteaire

10 65 35

isocratique

15 65 35

lineacuteaire

27 405 595

lineacuteaire

29 0 100

isocratique

34 0 100

lineacuteaire

36 100 0

isocratique

40 100 0

86 Temps de reacutetention moyen du lysozyme 2550 minutes

9 CALCUL

Les solutions de reacutefeacuterence contenant les concentrations suivantes de lysozyme sont analyseacutees en triple 1 5 10 50 100 200 250 mgl Sur chaque chromatogramme les aires du pic correspondant au lysozyme sont reporteacutees sur un diagramme en fonction de leurs concentrations respectives afin dobtenir les droites de reacutegression lineacuteaire exprimeacutees par la formule Y = ax + b Le coefficient de deacutetermination r 2 devra ecirctre gt 0999

10 CARACTEacuteRISTIQUES DE LA MEacuteTHODE

Dans lrsquoobjectif drsquoeacutevaluer lrsquoaptitude de la meacutethode pour lrsquoobjectif formuleacute une eacutetude de validation a eacuteteacute reacutealiseacutee en tenant compte de la lineacuteariteacute des limites de deacutetection et de quantification et de la preacutecision de la meacutethode Ce dernier paramegravetre a eacuteteacute deacutetermineacute en deacutefinissant le niveau de preacutecision et drsquoexactitude de la meacutethode

Plage de lineacuteariteacute (mgL)

Pente de la droite

Coefficient de deacutetermination

(r 2 ) LD (mgL) LQ (mgL)

Reacutepeacutetabiliteacute (n = 5)RSD Reproductibishy

liteacute (n = 5) RSD

Std 1 VR 2 VB 3 Std 1

UV 5-250 3786 09993 186 620 467 554 062 193

FLD 1-250 52037 09990 018 059 261 237 068 230

Tableau 1 Donneacutees relatives aux caracteacuteristiques de la meacutethode Std 1 solution standard VR 2 vin rouge VB 3 vin blanc


101 Lineacuteariteacute de la meacutethode

Sur la base des reacutesultats obtenus gracircce agrave lrsquoanalyse de reacutegression lineacuteaire la meacutethode srsquoest reacuteveacuteleacutee lineacuteaire pour les plages indiqueacutees dans le tableau 1

102 Limite de deacutetection et de quantification

La limite de deacutetection (LD) et la limite de quantification (LQ) ont eacuteteacute calculeacutees comme le signal eacutequivalant agrave respectivement 3 fois et 10 fois le bruit de fond chromatographique en conditions de travail sur matrice reacuteelle (tableau 1)

103 Preacutecision de la meacutethode

Les paramegravetres pris en consideacuteration sont la reacutepeacutetabiliteacute et la reproductibiliteacute Le tableau 1 indique les valeurs de ces paramegravetres (exprimeacutees comme drsquoeacutecart standard de mesures reacutepeacuteteacutees avec diffeacuterentes concentrations) releveacutees sur la solution standard sur vin blanc et sur vin rouge

104 Exactitude de la meacutethode

Le pourcentage de reacutecupeacuteration a eacuteteacute calculeacute sur les solutions standard contenant 5 et 50 mgL de lysozyme additionneacutees drsquoune quantiteacute donneacutee de lysozyme comme indiqueacute dans le tableau suivant

[C] initial nominal (mgL) Ajout (mgL) [C] theacuteorique

(mgL) [C] trouveacutee

(mgL) Eacutecart standard Reacutecupeacuteration

UV 280 nm 50 131 631 623 386 99

FD 50 131 631 645 536 102

UV 280 nm 5 144 194 179 149 921

FD 5 144 194 190 161 977

Fig1 Chromatogramme de vin rouge contenant du Lysozyme pur (une solution standard contenant 1 000 mgl de Lysozyme a eacuteteacute ajouteacute au vin pour obtenir une concentration finale de 125 mgl de Lysozyme) A deacutetecteur UV agrave 280 nm B deacutetecteur UV agrave 225 nm C deacutetecteur FLD (λ ex 276 nm λ em 345 nm)


21 SULFATES (OIV- AS-321-05-SULFAT) mdash MEacuteTHODE TYPE II


11 Meacutethode de reacutefeacuterence

Preacutecipitation du sulfate de baryum et peseacutee Le phosphate de baryum preacutecipiteacute dans les mecircmes conditions est eacutelimineacute par un lavage du preacutecipiteacute agrave lacide chlorhydrique

Dans le cas des moucircts ou des vins riches en dioxyde de soufre un deacutesulfitage preacutealable par eacutebullition agrave labri de lair est prescrit

12 Meacutethode rapide dessai

Classement des vins en plusieurs cateacutegories par une meacutethode dite des limites baseacutee sur la preacutecipitation du sulfate de baryum agrave laide dune solution titreacutee dion baryum


21 Reacuteactifs

211 Acide chlorhydrique en solution 2 M

212 Chlorure de baryum en solution agrave 200 gl de BaCl 2 2H 2 O


221 Cas geacuteneacuteral

Introduire dans un tube agrave centrifugation de 50 ml 40 ml deacutechantillon agrave analyser ajouter 2 ml dacide chlorhydrique 2 M et 2 ml de solution de chlorure de baryum agrave 200 gl agiter avec une baguette de verre rincer la baguette avec un peu deau distilleacutee et abandonner au repos pendant 5 minutes Centrifuger pendant 5 minutes puis deacutecanter avec preacutecaution le liquide surnageant

Laver ensuite le preacutecipiteacute de sulfate de baryum en proceacutedant de la faccedilon suivante ajouter 10 ml dacide chlorhydrique 2 M mettre le preacutecipiteacute en suspension et centrifuger pendant 5 minutes Seacuteparer avec preacutecaution le liquide surnageant Reacutepeacuteter deux fois le lavage du preacutecipiteacute dans les mecircmes conditions avec 15 ml deau distilleacutee chaque fois

Transvaser quantitativement en rinccedilant avec de leau distilleacutee le preacutecipiteacute dans une capsule de platine tareacutee et la placer sur un bain deau agrave 100 degC jusquagrave eacutevaporation agrave sec Le preacutecipiteacute desseacutecheacute est calcineacute plusieurs fois briegravevement sur flamme jusquagrave obtention dun reacutesidu blanc Laisser refroidir dans un dessicateur et peser

Soit m la masse en milligrammes de sulfate de baryum obtenue

222 Cas particulier moucircts sulfiteacutes et vin agrave teneur eacuteleveacutee en dioxyde de soufre

Proceacuteder au preacutealable agrave leacutelimination du dioxyde de soufre

Dans une fiole conique de 500 ml munie dune ampoule agrave robinet et dun tube de deacutegagement introduire 25 ml deau et 1 ml dacide chlorhydrique pur (ρ 20 = 115 mdash 118 gml) Faire bouillir cette solution pour chasser lair et introduire 100 ml de vin par lampoule agrave robinet tout en maintenant leacutebullition Poursuivre leacutebullition jusquagrave ce que le volume de liquide contenu dans la fiole conique soit reacuteduit agrave environ 75 ml et le transvaser quantitativement apregraves refroidissement dans une fiole jaugeacutee de 100 ml Compleacuteter au trait de jauge avec de leau Proceacuteder au dosage des sulfates sur une prise dessai de 40 ml comme il est indiqueacute au point 221


231 Calculs

La teneur en sulfates exprimeacutee en milligrammes par litre de sulfate de potassium K 2 SO 4 est

1867 times m

La teneur du moucirct ou du vin en sulfates est exprimeacutee en milligrammes par litre de sulfate de potassium sans deacutecimale


jusquagrave 1 000 mgl r = 27 mgl

environ 1 500 mgl r = 41 mgl

233 Reproductibiliteacute

jusquagrave 1 000 mgl R = 51 mgl

environ 1 500 mgl R = 81 mgl


22 FER (OIV - AS-322-05-FER) mdash MEacuteTHODE TYPE IV


MEacuteTHODE DE REacuteFEacuteRENCE

Apregraves dilution convenable du vin et eacutelimination de lalcool le fer est doseacute directement par spectrophotomeacutetrie dabsorption atomique

MEacuteTHODE USUELLE

Apregraves mineacuteralisation du vin par le perhydrol le fer qui se trouve agrave leacutetat de fer III est reacuteduit agrave leacutetat de fer II et est doseacute gracircce agrave la coloration rouge quil donne avec lorthopheacutenanthroline


21 Reacuteactifs

211 Solution eacutetalon concentreacutee de fer III titrant 1 g par litre

Utiliser une solution standard du commerce agrave 1 gl Cette solution peut ecirctre preacutepareacutee en dissolvant 86341 g de sulfate de fer III et dammonium (FeNH 4 (SO 4 ) 2 12H 2 O) dans de leau distilleacutee leacutegegraverement acidifieacutee par de lacide chlorhydrique M et en ajustant le volume agrave 1 litre

212 Solution eacutetalon dilueacutee de fer titrant 100 milligrammes par litre

22 Appareillage

221 Eacutevaporateur rotatif avec bain deau thermostateacute

222 Spectrophotomegravetre dabsorption atomique eacutequipeacute dun brucircleur alimenteacute par de lair et de laceacutetylegravene

223 Lampe agrave cathode creuse en fer



Eacuteliminer lalcool du vin par concentration du volume de leacutechantillon au demi agrave laide dun eacutevaporateur rotatif (50-60 degC) Ramener au volume initial avec de leau distilleacutee

Effectuer si neacutecessaire une dilution preacutealablement au dosage

232 Eacutetalonnage

Dans cinq fioles jaugeacutees de 100 ml placer 1 - 2 - 3 - 4 - 5 ml de la solution de fer agrave 100 milligrammes par litre (point 212) et compleacuteter agrave 100 ml avec de leau distilleacutee Les solutions preacutepareacutees titrent respectivement 1 - 2 - 3 - 4 - 5 mg de fer par litre

Ces solutions seront conserveacutees dans des flacons en polyeacutethylegravene

233 Dosage

Seacutelectionner la longueur donde 2483 nm Reacutegler le zeacutero de leacutechelle des absorbances avec de leau distilleacutee Aspirer directement leacutechantillon dilueacute dans le brucircleur du spectrophotomegravetre puis successivement les solutions- eacutetalons preacutepareacutees comme indiqueacute au point 232 Relever les absorbances Effectuer les deacuteterminations en double


241 Mode de calcul

Tracer la courbe de variation de labsorbance en fonction de la concentration en fer des solutions-eacutetalons Reporter la valeur moyenne de labsorbance obtenue pour leacutechantillon de vin dilueacute sur cette courbe et deacuteterminer la concentration en fer C

La concentration en fer exprimeacutee en milligrammes par litre de vin avec 1 deacutecimale sera

C times F

F = facteur de dilution


23 CUIVRE (OIV ndash AS 322-06) mdash MEacuteTHODE TYPE IV


Emploi de la spectrophotomeacutetrie dabsorption atomique

2 APPAREILS

21 Capsule de platine

22 Spectrophotomegravetre dabsorption atomique

23 Lampe agrave cathode creuse au cuivre

24 Gaz dalimentation airaceacutetylegravene ou protoxyde dazoteaceacutetylegravene

3 REacuteACTIFS

31 Cuivre meacutetal

32 Acide nitrique concentreacute 65 (HNO 3 ρ 20 = 138 gml)

33 Acide nitrique dilueacute 12 (vv)

34 Solution de cuivre agrave 1 gl

Utiliser une solution standard de cuivre du commerce a 1 gl Cette solution peut ecirctre preacutepareacutee en pesant 1 000 g de cuivre meacutetal et en transfeacuterant quantitativement dans une fiole jaugeacutee de 1 000 ml Ajouter de lacide nitrique dilueacute 12 (33) en quantiteacute strictement suffisante pour dissoudre le meacutetal ajouter 10 ml dacide nitrique concentreacute (32) porter au trait repegravere avec de leau bidistilleacutee

35 Solution de cuivre agrave 100 mgl

Preacutelever 10 ml de la solution 34 et les placer dans une fiole jaugeacutee de 100 ml en compleacutetant le volume avec de leau bidistilleacutee


41 Preacuteparation de leacutechantillon et dosage du cuivre

Preacutelever 20 ml de lrsquoeacutechantillon les placer dans une fiole jaugeacutee de 100 ml et amener au trait repegravere avec de lrsquoeau bidistilleacutee Modifier la dilution si neacutecessaire

Lire au spectrophotomegravetre drsquoabsorption atomique lrsquoabsorbance de lrsquoeacutechantillon dilueacute agrave la longueur drsquoonde de 3248 nm apregraves avoir reacutegleacute le zeacutero de lrsquoeacutechelle des absorbances avec de lrsquoeau distilleacutee Si neacutecessaire preacuteparer une dilution approprieacutee avec de leau bidistilleacutee

42 Eacutetablissement de la courbe deacutetalonnage

Preacutelever 05 - 1 - 2 ml de solution (point 35) (100 mg de cuivre par litre) les placer dans des fioles jaugeacutees de 100 ml en compleacutetant le volume avec de leau bidistilleacutee les solutions obtenues contiennent respectivement 05 - 1 - 2 mgl de cuivre Avec les valeurs des absorbances de ces solutions mesureacutees comme il est deacutecrit au point 41 construire la courbe drsquoeacutetalonnage


Reporter labsorbance lue pour leacutechantillon du vin dilueacute sur la courbe deacutetalonnage et relever la concentration C en mgl

Si F est le facteur de dilution la teneur du vin en cuivre en milligrammes par litre est F x C

Elle est donneacutee avec 2 deacutecimales

Remarques

a) Les solutions pour leacutetablissement de la courbe deacutetalonnage et les dilutions de leacutechantillon doivent touteshyfois ecirctre choisies en fonction de la sensibiliteacute de lappareil utiliseacute et de la concentration en cuivre preacutesente dans leacutechantillon


b) Pour des concentrations tregraves faibles en cuivre dans leacutechantillon le mode opeacuteratoire est le suivant placer 100 ml deacutechantillon dans une capsule de platine eacutevaporer au bain deau agrave 100 degC jusquagrave consistance sirupeuse ajouter goutte agrave goutte 25 ml dacide nitrique concentreacute (point 32) en cherchant agrave recouvrir tout le fond de la capsule Proceacuteder avec preacutecaution agrave lincineacuteration du reacutesidu sur une plaque chauffante eacutelectrique ou bien sur une petite flamme introduire ensuite la capsule dans un four agrave moufle reacutegleacute agrave 500 degC plusmn 25 degC la laisser pendant environ une heure Apregraves refroidissement humecter les cendres avec 1 ml dacide nitrique concentreacute (point 32) en les eacutecrasant avec une petite baguette de verre eacutevaporer et incineacuterer agrave nouveau comme preacuteceacutedemment Porter agrave nouveau la capsule dans le four pendant 15 minutes reacutepeacuteter au moins trois fois ce traitement avec lacide nitrique concentreacute Solubiliser les cendres en ajoutant dans la capsule 1 ml dacide nitrique concentreacute (point 32) et 2 ml deau bidistilleacutee transvaser dans une fiole jaugeacutee de 10 ml Laver la capsule trois fois avec 2 ml chaque fois deau bidistilleacutee compleacuteter au trait repegravere avec de leau bidistilleacutee Proceacuteder au dosage comme il est indiqueacute en 41 en utilisant les 10 ml de solution tenir compte du facteur de concentration pour lrsquoexpression des reacutesultats


24 DIOXYDE DE SOUFRE (OIV - AS-323-04-DIOSU) mdash MEacuteTHODE TYPE II

1 DEacuteFINITIONS

On appelle dioxyde de soufre le dioxyde de soufre preacutesent dans le moucirct ou le vin sous les formes suivantes H 2 SO 3 H SO 3- dont leacutequilibre est fonction du pH et de la tempeacuterature

H 2 SO 3 larrrarr H + + HSO 3 ndash

H 2 SO 3 repreacutesente le dioxyde de soufre moleacuteculaire

On appelle dioxyde de soufre total lensemble des diffeacuterentes formes de dioxyde de soufre preacutesentes dans le vin agrave leacutetat libre ou combineacute agrave ses constituants

2 DIOXYDE DE SOUFRE LIBRE ET TOTAL

21 Principe des meacutethodes


2111 C a s d e s v i n s e t d e s m o ucirc t s

Le dioxyde de soufre est entraicircneacute par un courant dair ou dazote il est fixeacute et oxydeacute par barbotage dans une solution dilueacutee et neutre de peroxyde dhydrogegravene Lacide sulfurique formeacute est doseacute par une solution titreacutee dhydroxyde de sodium Le dioxyde de soufre libre est extrait du vin par entraicircnement agrave froid (10 degC)

Le dioxyde de soufre total est extrait du vin par entraicircnement agrave chaud (100 degC environ)

2112 C a s d e s m o ucirc t s c o n c e n t r eacute s r e c t i f i eacute s

Le dioxyde de soufre total est extrait par entraicircnement agrave chaud (100 degC environ) du moucirct concentreacute rectifieacute preacutealablement dilueacute

212 Meacutethode rapide dessai (cas des vins et des moucircts)

Le dioxyde de soufre libre est doseacute par titrage iodomeacutetrique direct

Le dioxyde de soufre combineacute est doseacute agrave la suite par titrage iodomeacutetrique apregraves hydrolyse alcaline Ajouteacute au dioxyde de soufre libre il permet dobtenir le dioxyde de soufre total


221 Appareillage

2211 Lappareil utiliseacute doit ecirctre conforme au scheacutema ci-dessous principalement en ce qui concerne le reacutefrigeacuterant

Figure 1

Les dimensions sont indiqueacutees en millimegravetres Les diamegravetres internes des 4 tubes concentriques qui constituent le reacutefrigeacuterant sont 45 34 27 et 10 mm


Le tube dameneacutee des gaz dans le barboteur B est termineacute par une petite sphegravere de 1 cm de diamegravetre comportant sur son grand cercle horizontal 20 trous de 02 mm de diamegravetre On peut eacutegalement le terminer par une plaque de verre fritteacute assurant la formation dun grand nombre de tregraves petites bulles reacutealisant un bon contact des phases gazeuse et liquide

Le deacutebit gazeux qui doit parcourir lappareil doit ecirctre de 40 lh environ Le flacon placeacute agrave la droite de lappareil est destineacute agrave limiter de 20 agrave 30 cm deau la deacutepression produite par la trompe agrave eau Pour pouvoir reacutegler cette deacutepression de maniegravere que le deacutebit soit correct il y a avantage agrave placer un deacutebitmegravetre agrave tube semi-capillaire entre le barboteur et le flacon

2212 Microburette

222 Reacuteactifs

2221 Acide phosphorique agrave 85 pour 100 (H 3 PO 4 ) (ρ 20 = 171 gml)

2222 Solution de peroxyde dhydrogegravene agrave 91 g dH 2 O 2 l (3 volumes)

2223 Reacuteactif indicateur

rouge de meacutethyle 100 mg

bleu de meacutethylegravene 50 mg

alcool agrave 50 vol 100 ml


223 Dosage du dioxyde de soufre libre

2231 M o d e o p eacute r a t o i r e

Le vin doit ecirctre maintenu agrave 20 degC en flacon plein et boucheacute pendant 2 jours avant le dosage

mdash Dans le barboteur B placer 2 agrave 3 ml de solution de peroxyde dhydrogegravene (point 2222) 2 gouttes de reacuteactif indicateur et neutraliser la solution de peroxyde dhydrogegravene par la solution 001 M dhydroxyde de sodium (point 2224) Adapter ce barboteur agrave lappareil

mdash Dans le ballon A de 250 ml de lappareil agrave entraicircnement introduire 50 ml deacutechantillon et 15 ml dacide phosphorique (point 2221) Mettre en place le ballon

mdash Faire ensuite barboter lair (ou lazote) pendant 15 minutes Le dioxyde de soufre libre entraicircneacute est oxydeacute en acide sulfurique Retirer le barboteur de lappareil et titrer lacide formeacute par la solution dhydroxyde de sodium 001 M (point 2224) Soit n le nombre de millilitres verseacutes

2232 E x p r e s s i o n d e s r eacute s u l t a t s

Le dioxyde de soufre libre est exprimeacute en milligrammes par litre (mgl) sans deacutecimale

22321 Calcul

Dioxyde de soufre libre en milligrammes par litre 64 n

224 Dosage du dioxyde de soufre total


22411 Dans le cas des moucircts concentreacutes rectifieacutes utiliser la solution obtenue en diluant leacutechantillon agrave analyser agrave 40 pour 100 (mv) comme il est indiqueacute au chapitre laquoAciditeacute totaleraquo au point 512 Dans le ballon A de 250 ml de lappareil agrave entraicircnement introduire 50 ml de cette solution et 5 ml dacide phosphorique (point 2221) Mettre en place le ballon

22412 Cas des vins et des moucircts

Teneur preacutesumeacutee de leacutechantillon le 50 mgl SO 2 total Dans le ballon A de 250 ml de lappareil agrave entraicircnement introduire 50 ml deacutechantillon et 15 ml dacide phosphorique (point 2221) Mettre en place le ballon

Teneur preacutesumeacutee de leacutechantillon ge 50 mgl de SO 2 total Dans le ballon A de 100 ml de lappareil agrave entraicircshynement introduire 20 ml deacutechantillon et 5 ml dacide phosphorique (point 2221) Mettre en place le ballon


Placer dans le barboteur B 2 agrave 3 ml de solution de peroxyde dhydrogegravene (point 2222) la neutraliser comme preacuteceacutedemment porter le vin contenu dans le ballon A agrave leacutebullition au moyen dune petite flamme de 4 agrave 5 cm de haut qui doit leacutecher directement le fond du ballon Ne pas placer sous le ballon une toile meacutetallique mais le poser sur un disque perceacute dun trou de 30 mm de diamegravetre On eacutevite ainsi la pyrogeacutenation des matiegraveres extractives du vin sur les parois du ballon

Maintenir leacutebullition pendant le passage du courant dair (ou dazote) En 15 minutes le dioxyde de soufre total a eacuteteacute entraicircneacute et oxydeacute Doser lacide sulfurique formeacute par la solution 001 M dhydroxyde de sodium (point 2224)

Soit n le nombre de millilitres verseacutes


Le dioxyde de soufre total est exprimeacute en milligrammes par litre (mgl) respectivement en milligrammes par kilogramme (mgkg) de sucres totaux sans deacutecimale

22421 Calcul

mdash Cas des vins et des moucircts

Dioxyde de soufre total en milligrammes par litre

mdash Eacutechantillons pauvres en dioxyde de soufre (prise dessai 50 ml)

64 times n

mdash Autres eacutechantillons (prise dessai 20 ml)

16 times n

mdash Cas des moucircts concentreacutes rectifieacutes

Dioxyde de soufre en milligrammes par kilo de sucres totaux (prise dessai 50 ml deacutechantillon preacutepareacute) (point 22411)

(1600 times n)(P)



Teneur lt 50 mgl (prise dessai de 50 ml) r = 1 mgl

Teneur gt 50 mgl (prise dessai de 20 ml) r = 6 mgl


Teneur lt 50 mgl (prise dessai de 50 ml) R = 9 mgl

Teneur gt 50 mgl (prise dessai de 20 ml) R = 15 mgl



5 Indice de Folin AS-2-10-INDFOL IV

6 Teneur en sucre (= glucose+fructose) AS-311-02-GLUFRU II

7 Teneur en saccharose (mesure HPLC) AS-311-03-SUCRES II

8 Reacutesonance Magneacutetique Nucleacuteaire - Deuteacuterium de leacutethanol du vin

AS-311-O5-ENRRMN (en reacutevision) I

9 Titre Alcoomeacutetrique Volumique en (TAV) AS-312-01-TALVOL I

10 Rapport isotopique 13 C 12 C de leacutethanol du vin

AS-312-06-ETHANO II

11 Aciditeacute totale AS-313-01-ACITOT I

12 Aciditeacute volatile AS-313-02-ACIVOL I

13 Acide citrique AS-313-09-ACIENZ II

14 Acide sorbique AS-313-14-ACISOR IV

15 pH moucircts AS-313-15-PH I

16 Acide ascorbique AS- 313-22 ACASCO II

17 CO 2 en gl AS-314-01-DIOCAR II

18 CO 2 en gl (manomeacutetrie) AS-314-04-CO2MAN II

19 Surpression CO 2 AS-314-02-SURPRES I

20 Lysozyme AS-315-14-LYSOZY IV

21 Sulfate de potassium AS-321-05-SULFAT II

22 Fer AS-322-05-FER IV

23 Cuivre AS-322-06-CUIVRE IV

24 Sulfites (SO 2 ) ou Dioxyde de soufre total

AS-323-04-DIOSU II

La description de quelques meacutethodes drsquoanalyse fait lrsquoobjet drsquoune mise agrave jour par les instances de lrsquoOIV Ces descriptions seront publieacutees dans une prochaine Communication de la Commission degraves qursquoun texte mis agrave jour sera publieacute par lrsquoOIV dans leacutedition 2010 du Recueil des Meacutethode Internationales danalyse de lOIV


ANNEXE




























1 DEacuteFINITIONS



20 degC





Remarque









41 Appareillage



Figure 1









ou










Calculs













Deacuteterminer





Calculs




m= 00012 (P 1 ndash P)


































TABLE I

Facteurs F



TABLE II




TABLE III




TABLE IV








2 APPAREILLAGE
















5 CALCULS













TABLE I



TABLE II




TABLE III






1 DEacuteFINITION










(pm)




1 DEacuteFINITION


2 PRINCIPE



3 REacuteACTIFS





4 APPAREILLAGE




















532 Mesure



61 Mode de calcul







1 DEacuteFINITION


2 PRINCIPE








F6PlarrrarrG6P


3 APPAREILLAGE





4 REacuteACTIFS












Remarque












52 Dosage




Teacutemoin Dosage


250 ml 250 ml



















Remarque



531 Calcul










v = 020 ml

PM = 180

d = 1

On obtient




Remarque









r = 0056 x i


R = 012 + 0076 x i




(pm)





(pm)




(pm)
















4 PRINCIPE





5 REacuteACTIFS















ndash 2672 permil






















Note























mdash Note















9 CALCUL





















A amp G 80 10 10

B amp C 90 10 0

D amp F 0 100 0

E amp I 90 0 10

H amp K 100 0 0

J amp L 0 0 100




19 18 17 19 19 19



S r 2 00064 00077 00031 00127 00069 00041



S R2 00389 00309 00382 00459 00316 00584






















2 R

Deacutecembre 1994 6 0210 0044 059 6 0151 0023 042

Juin 1995 8 0133 0018 037 8 0147 0021 041

Deacutecembre 1995 7 0075 0006 021 8 0115 0013 032

Mars 1996 9 0249 0062 070 11 0278 0077 078

Juin 1996 8 0127 0016 036 8 0189 0036 053

Septembre 1996 10 0147 0022 041 11 0224 0050 063

Deacutecembre 1996 10 0330 0109 092 9 0057 0003 016

Mars 1997 10 0069 0005 019 8 0059 0003 016

Juin 1997 11 0280 0079 078 11 0175 0031 049

Septembre 1997 12 0237 0056 066 11 0203 0041 057

Deacutecembre 1997 11 0127 0016 036 12 0156 0024 044

Mars 1998 12 0285 0081 080 13 0245 0060 069

Juin 1998 12 0182 0033 051 12 0263 0069 074

Septembre 1998 11 0264 0070 074 12 0327 0107 091









1 DEacuteFINITION





3 REacuteACTIFS




Eau qsp 1 000 ml










Eau qsp 1 000 ml

4 APPAREILLAGE







511 Cas des vins













532 Dosage



61 Mode de calcul

611 Cas des vins


A = 10 n








A = (500 times n)P




r = 09 mel






R = 36 mel



R = 51 mel




1 DEacuteFINITION







Remarque


3 REacuteACTIFS










4 APPAREILLAGE



2) dun barboteur

















53 Titrage





61 Mode de calcul






r = 07 mel



R = 13 mel





71 Principe




72 Reacuteactifs

























2 REacuteACTIFS













3 APPAREILLAGE













Teacutemoin Dosage







Ajouter









61 Mode de calcul









On obtient

C = 479 times ΔA





















21 Reacuteactifs





22 Appareillage





231 Distillation




233 Dosage







241 Mode de calcul


100 times C



31 Reacuteactifs




32 Appareillage
















333 Chromatographie





341 Mode de calcul










1 PRINCIPE


2 APPAREILS


22 Eacutelectrodes




3 REacuteACTIFS



pH

357 agrave 20 degC

356 agrave 25 degC

355 agrave 30 degC



pH

3999 agrave 15 degC

4003 agrave 20 degC

4008 agrave 25 degC

4015 agrave 30 degC





Eau qsp 1 l


pH

690 agrave 15 degC

688 agrave 20 degC

686 agrave 25 degC

685 agrave 30 degC

















44 Mesure








1 INTRODUCTION






3 PRINCIPE




41 Reacuteactifs






















Remarque







5 APPAREILLAGE


51 Pompe HLPC



6 ECHANTILLONNAGE



7 MODE OPERATOIRE







Deacutebit 1 mlmin








Figure 1



8 CALCULS










Acide L-ascorbique

s r = 0011 x + 031

s R = 0064 x + 139



s r = 0014 x + 031

s R = 0079 x + 129


Exemple


s R = 52 mgL




102 Justesse













211 Appareillage


2112 pH megravetre

212 Reacuteactifs



















( 1 ) 10 5 pascal (Pa) = 1 bar


221 Appareillage


2212 pH megravetre

222 Reacuteactifs
























avec







(pm)




1 PRINCIPE


2 APPAREILLAGE

















3 MODE OPERATOIRE









Tableau 1


degC

0 185

1 180

2 174

3 168

4 164

5 159

6 154

7 150

8 145

9 140

10 136

11 132

12 128

degC

13 124

14 120

15 116

16 113

17 109

18 106

19 103

20 100

21 097

22 095

23 093

24 091

25 088










1 INTRODUCTION




3 DEacuteFINITION


4 PRINCIPE


5 REacuteACTIFS






52 Eacuteluants

A CH 3 CN 1 TFA 02 H 2 O= 988

B CH 3 CN 70 TFA 02 H 2 O= 298



6 MATEacuteRIEL

















0 100 0

isocratique

3 100 0

lineacuteaire

10 65 35

isocratique

15 65 35

lineacuteaire

27 405 595

lineacuteaire

29 0 100

isocratique

34 0 100

lineacuteaire

36 100 0

isocratique

40 100 0


9 CALCUL





Pente de la droite






UV 5-250 3786 09993 186 620 467 554 062 193

FLD 1-250 52037 09990 018 059 261 237 068 230














UV 280 nm 50 131 631 623 386 99

FD 50 131 631 645 536 102

UV 280 nm 5 144 194 179 149 921

FD 5 144 194 190 161 977











21 Reacuteactifs













231 Calculs


1867 times m
















21 Reacuteactifs




22 Appareillage








232 Eacutetalonnage



233 Dosage



241 Mode de calcul



C times F






2 APPAREILS





3 REacuteACTIFS


















Remarques






1 DEacuteFINITIONS

















221 Appareillage


Figure 1





2212 Microburette

222 Reacuteactifs
















22321 Calcul














22421 Calcul




64 times n


16 times n



(1600 times n)(P)









ANNEXE




























1 DEacuteFINITIONS



20 degC





Remarque









41 Appareillage



Figure 1









ou










Calculs













Deacuteterminer





Calculs




m= 00012 (P 1 ndash P)


































TABLE I

Facteurs F



TABLE II




TABLE III




TABLE IV








2 APPAREILLAGE
















5 CALCULS













TABLE I



TABLE II




TABLE III






1 DEacuteFINITION










(pm)




1 DEacuteFINITION


2 PRINCIPE



3 REacuteACTIFS





4 APPAREILLAGE




















532 Mesure



61 Mode de calcul







1 DEacuteFINITION


2 PRINCIPE








F6PlarrrarrG6P


3 APPAREILLAGE





4 REacuteACTIFS












Remarque












52 Dosage




Teacutemoin Dosage


250 ml 250 ml



















Remarque



531 Calcul










v = 020 ml

PM = 180

d = 1

On obtient




Remarque









r = 0056 x i


R = 012 + 0076 x i




(pm)





(pm)




(pm)
















4 PRINCIPE





5 REacuteACTIFS















ndash 2672 permil






















Note























mdash Note















9 CALCUL





















A amp G 80 10 10

B amp C 90 10 0

D amp F 0 100 0

E amp I 90 0 10

H amp K 100 0 0

J amp L 0 0 100




19 18 17 19 19 19



S r 2 00064 00077 00031 00127 00069 00041



S R2 00389 00309 00382 00459 00316 00584






















2 R

Deacutecembre 1994 6 0210 0044 059 6 0151 0023 042

Juin 1995 8 0133 0018 037 8 0147 0021 041

Deacutecembre 1995 7 0075 0006 021 8 0115 0013 032

Mars 1996 9 0249 0062 070 11 0278 0077 078

Juin 1996 8 0127 0016 036 8 0189 0036 053

Septembre 1996 10 0147 0022 041 11 0224 0050 063

Deacutecembre 1996 10 0330 0109 092 9 0057 0003 016

Mars 1997 10 0069 0005 019 8 0059 0003 016

Juin 1997 11 0280 0079 078 11 0175 0031 049

Septembre 1997 12 0237 0056 066 11 0203 0041 057

Deacutecembre 1997 11 0127 0016 036 12 0156 0024 044

Mars 1998 12 0285 0081 080 13 0245 0060 069

Juin 1998 12 0182 0033 051 12 0263 0069 074

Septembre 1998 11 0264 0070 074 12 0327 0107 091









1 DEacuteFINITION





3 REacuteACTIFS




Eau qsp 1 000 ml










Eau qsp 1 000 ml

4 APPAREILLAGE







511 Cas des vins













532 Dosage



61 Mode de calcul

611 Cas des vins


A = 10 n








A = (500 times n)P




r = 09 mel






R = 36 mel



R = 51 mel




1 DEacuteFINITION







Remarque


3 REacuteACTIFS










4 APPAREILLAGE



2) dun barboteur

















53 Titrage





61 Mode de calcul






r = 07 mel



R = 13 mel





71 Principe




72 Reacuteactifs

























2 REacuteACTIFS













3 APPAREILLAGE













Teacutemoin Dosage







Ajouter









61 Mode de calcul









On obtient

C = 479 times ΔA





















21 Reacuteactifs





22 Appareillage





231 Distillation




233 Dosage







241 Mode de calcul


100 times C



31 Reacuteactifs




32 Appareillage
















333 Chromatographie





341 Mode de calcul










1 PRINCIPE


2 APPAREILS


22 Eacutelectrodes




3 REacuteACTIFS



pH

357 agrave 20 degC

356 agrave 25 degC

355 agrave 30 degC



pH

3999 agrave 15 degC

4003 agrave 20 degC

4008 agrave 25 degC

4015 agrave 30 degC





Eau qsp 1 l


pH

690 agrave 15 degC

688 agrave 20 degC

686 agrave 25 degC

685 agrave 30 degC

















44 Mesure








1 INTRODUCTION






3 PRINCIPE




41 Reacuteactifs






















Remarque







5 APPAREILLAGE


51 Pompe HLPC



6 ECHANTILLONNAGE



7 MODE OPERATOIRE







Deacutebit 1 mlmin








Figure 1



8 CALCULS










Acide L-ascorbique

s r = 0011 x + 031

s R = 0064 x + 139



s r = 0014 x + 031

s R = 0079 x + 129


Exemple


s R = 52 mgL




102 Justesse













211 Appareillage


2112 pH megravetre

212 Reacuteactifs



















( 1 ) 10 5 pascal (Pa) = 1 bar


221 Appareillage


2212 pH megravetre

222 Reacuteactifs
























avec







(pm)




1 PRINCIPE


2 APPAREILLAGE

















3 MODE OPERATOIRE









Tableau 1


degC

0 185

1 180

2 174

3 168

4 164

5 159

6 154

7 150

8 145

9 140

10 136

11 132

12 128

degC

13 124

14 120

15 116

16 113

17 109

18 106

19 103

20 100

21 097

22 095

23 093

24 091

25 088










1 INTRODUCTION




3 DEacuteFINITION


4 PRINCIPE


5 REacuteACTIFS






52 Eacuteluants

A CH 3 CN 1 TFA 02 H 2 O= 988

B CH 3 CN 70 TFA 02 H 2 O= 298



6 MATEacuteRIEL

















0 100 0

isocratique

3 100 0

lineacuteaire

10 65 35

isocratique

15 65 35

lineacuteaire

27 405 595

lineacuteaire

29 0 100

isocratique

34 0 100

lineacuteaire

36 100 0

isocratique

40 100 0


9 CALCUL





Pente de la droite






UV 5-250 3786 09993 186 620 467 554 062 193

FLD 1-250 52037 09990 018 059 261 237 068 230














UV 280 nm 50 131 631 623 386 99

FD 50 131 631 645 536 102

UV 280 nm 5 144 194 179 149 921

FD 5 144 194 190 161 977











21 Reacuteactifs













231 Calculs


1867 times m
















21 Reacuteactifs




22 Appareillage








232 Eacutetalonnage



233 Dosage



241 Mode de calcul



C times F






2 APPAREILS





3 REacuteACTIFS


















Remarques






1 DEacuteFINITIONS

















221 Appareillage


Figure 1





2212 Microburette

222 Reacuteactifs
















22321 Calcul














22421 Calcul




64 times n


16 times n



(1600 times n)(P)










1 DEacuteFINITIONS



20 degC





Remarque









41 Appareillage



Figure 1









ou










Calculs













Deacuteterminer





Calculs




m= 00012 (P 1 ndash P)


































TABLE I

Facteurs F



TABLE II




TABLE III




TABLE IV








2 APPAREILLAGE
















5 CALCULS













TABLE I



TABLE II




TABLE III






1 DEacuteFINITION










(pm)




1 DEacuteFINITION


2 PRINCIPE



3 REacuteACTIFS





4 APPAREILLAGE




















532 Mesure



61 Mode de calcul







1 DEacuteFINITION


2 PRINCIPE








F6PlarrrarrG6P


3 APPAREILLAGE





4 REacuteACTIFS












Remarque












52 Dosage




Teacutemoin Dosage


250 ml 250 ml



















Remarque



531 Calcul










v = 020 ml

PM = 180

d = 1

On obtient




Remarque









r = 0056 x i


R = 012 + 0076 x i




(pm)





(pm)




(pm)
















4 PRINCIPE





5 REacuteACTIFS















ndash 2672 permil






















Note























mdash Note















9 CALCUL





















A amp G 80 10 10

B amp C 90 10 0

D amp F 0 100 0

E amp I 90 0 10

H amp K 100 0 0

J amp L 0 0 100




19 18 17 19 19 19



S r 2 00064 00077 00031 00127 00069 00041



S R2 00389 00309 00382 00459 00316 00584






















2 R

Deacutecembre 1994 6 0210 0044 059 6 0151 0023 042

Juin 1995 8 0133 0018 037 8 0147 0021 041

Deacutecembre 1995 7 0075 0006 021 8 0115 0013 032

Mars 1996 9 0249 0062 070 11 0278 0077 078

Juin 1996 8 0127 0016 036 8 0189 0036 053

Septembre 1996 10 0147 0022 041 11 0224 0050 063

Deacutecembre 1996 10 0330 0109 092 9 0057 0003 016

Mars 1997 10 0069 0005 019 8 0059 0003 016

Juin 1997 11 0280 0079 078 11 0175 0031 049

Septembre 1997 12 0237 0056 066 11 0203 0041 057

Deacutecembre 1997 11 0127 0016 036 12 0156 0024 044

Mars 1998 12 0285 0081 080 13 0245 0060 069

Juin 1998 12 0182 0033 051 12 0263 0069 074

Septembre 1998 11 0264 0070 074 12 0327 0107 091









1 DEacuteFINITION





3 REacuteACTIFS




Eau qsp 1 000 ml










Eau qsp 1 000 ml

4 APPAREILLAGE







511 Cas des vins













532 Dosage



61 Mode de calcul

611 Cas des vins


A = 10 n








A = (500 times n)P




r = 09 mel






R = 36 mel



R = 51 mel




1 DEacuteFINITION







Remarque


3 REacuteACTIFS










4 APPAREILLAGE



2) dun barboteur

















53 Titrage





61 Mode de calcul






r = 07 mel



R = 13 mel





71 Principe




72 Reacuteactifs

























2 REacuteACTIFS













3 APPAREILLAGE













Teacutemoin Dosage







Ajouter









61 Mode de calcul









On obtient

C = 479 times ΔA





















21 Reacuteactifs





22 Appareillage





231 Distillation




233 Dosage







241 Mode de calcul


100 times C



31 Reacuteactifs




32 Appareillage
















333 Chromatographie





341 Mode de calcul










1 PRINCIPE


2 APPAREILS


22 Eacutelectrodes




3 REacuteACTIFS



pH

357 agrave 20 degC

356 agrave 25 degC

355 agrave 30 degC



pH

3999 agrave 15 degC

4003 agrave 20 degC

4008 agrave 25 degC

4015 agrave 30 degC





Eau qsp 1 l


pH

690 agrave 15 degC

688 agrave 20 degC

686 agrave 25 degC

685 agrave 30 degC

















44 Mesure








1 INTRODUCTION






3 PRINCIPE




41 Reacuteactifs






















Remarque







5 APPAREILLAGE


51 Pompe HLPC



6 ECHANTILLONNAGE



7 MODE OPERATOIRE







Deacutebit 1 mlmin








Figure 1



8 CALCULS










Acide L-ascorbique

s r = 0011 x + 031

s R = 0064 x + 139



s r = 0014 x + 031

s R = 0079 x + 129


Exemple


s R = 52 mgL




102 Justesse













211 Appareillage


2112 pH megravetre

212 Reacuteactifs



















( 1 ) 10 5 pascal (Pa) = 1 bar


221 Appareillage


2212 pH megravetre

222 Reacuteactifs
























avec







(pm)




1 PRINCIPE


2 APPAREILLAGE

















3 MODE OPERATOIRE









Tableau 1


degC

0 185

1 180

2 174

3 168

4 164

5 159

6 154

7 150

8 145

9 140

10 136

11 132

12 128

degC

13 124

14 120

15 116

16 113

17 109

18 106

19 103

20 100

21 097

22 095

23 093

24 091

25 088










1 INTRODUCTION




3 DEacuteFINITION


4 PRINCIPE


5 REacuteACTIFS






52 Eacuteluants

A CH 3 CN 1 TFA 02 H 2 O= 988

B CH 3 CN 70 TFA 02 H 2 O= 298



6 MATEacuteRIEL

















0 100 0

isocratique

3 100 0

lineacuteaire

10 65 35

isocratique

15 65 35

lineacuteaire

27 405 595

lineacuteaire

29 0 100

isocratique

34 0 100

lineacuteaire

36 100 0

isocratique

40 100 0


9 CALCUL





Pente de la droite






UV 5-250 3786 09993 186 620 467 554 062 193

FLD 1-250 52037 09990 018 059 261 237 068 230














UV 280 nm 50 131 631 623 386 99

FD 50 131 631 645 536 102

UV 280 nm 5 144 194 179 149 921

FD 5 144 194 190 161 977











21 Reacuteactifs













231 Calculs


1867 times m
















21 Reacuteactifs




22 Appareillage








232 Eacutetalonnage



233 Dosage



241 Mode de calcul



C times F






2 APPAREILS





3 REacuteACTIFS


















Remarques






1 DEacuteFINITIONS

















221 Appareillage


Figure 1





2212 Microburette

222 Reacuteactifs
















22321 Calcul














22421 Calcul




64 times n


16 times n



(1600 times n)(P)













ou










Calculs













Deacuteterminer





Calculs




m= 00012 (P 1 ndash P)


































TABLE I

Facteurs F



TABLE II




TABLE III




TABLE IV








2 APPAREILLAGE
















5 CALCULS













TABLE I



TABLE II




TABLE III






1 DEacuteFINITION










(pm)




1 DEacuteFINITION


2 PRINCIPE



3 REacuteACTIFS





4 APPAREILLAGE




















532 Mesure



61 Mode de calcul







1 DEacuteFINITION


2 PRINCIPE








F6PlarrrarrG6P


3 APPAREILLAGE





4 REacuteACTIFS












Remarque












52 Dosage




Teacutemoin Dosage


250 ml 250 ml



















Remarque



531 Calcul










v = 020 ml

PM = 180

d = 1

On obtient




Remarque









r = 0056 x i


R = 012 + 0076 x i




(pm)





(pm)




(pm)
















4 PRINCIPE





5 REacuteACTIFS















ndash 2672 permil






















Note























mdash Note















9 CALCUL





















A amp G 80 10 10

B amp C 90 10 0

D amp F 0 100 0

E amp I 90 0 10

H amp K 100 0 0

J amp L 0 0 100




19 18 17 19 19 19



S r 2 00064 00077 00031 00127 00069 00041



S R2 00389 00309 00382 00459 00316 00584






















2 R

Deacutecembre 1994 6 0210 0044 059 6 0151 0023 042

Juin 1995 8 0133 0018 037 8 0147 0021 041

Deacutecembre 1995 7 0075 0006 021 8 0115 0013 032

Mars 1996 9 0249 0062 070 11 0278 0077 078

Juin 1996 8 0127 0016 036 8 0189 0036 053

Septembre 1996 10 0147 0022 041 11 0224 0050 063

Deacutecembre 1996 10 0330 0109 092 9 0057 0003 016

Mars 1997 10 0069 0005 019 8 0059 0003 016

Juin 1997 11 0280 0079 078 11 0175 0031 049

Septembre 1997 12 0237 0056 066 11 0203 0041 057

Deacutecembre 1997 11 0127 0016 036 12 0156 0024 044

Mars 1998 12 0285 0081 080 13 0245 0060 069

Juin 1998 12 0182 0033 051 12 0263 0069 074

Septembre 1998 11 0264 0070 074 12 0327 0107 091









1 DEacuteFINITION





3 REacuteACTIFS




Eau qsp 1 000 ml










Eau qsp 1 000 ml

4 APPAREILLAGE







511 Cas des vins













532 Dosage



61 Mode de calcul

611 Cas des vins


A = 10 n








A = (500 times n)P




r = 09 mel






R = 36 mel



R = 51 mel




1 DEacuteFINITION







Remarque


3 REacuteACTIFS










4 APPAREILLAGE



2) dun barboteur

















53 Titrage





61 Mode de calcul






r = 07 mel



R = 13 mel





71 Principe




72 Reacuteactifs

























2 REacuteACTIFS













3 APPAREILLAGE













Teacutemoin Dosage







Ajouter









61 Mode de calcul









On obtient

C = 479 times ΔA





















21 Reacuteactifs





22 Appareillage





231 Distillation




233 Dosage







241 Mode de calcul


100 times C



31 Reacuteactifs




32 Appareillage
















333 Chromatographie





341 Mode de calcul










1 PRINCIPE


2 APPAREILS


22 Eacutelectrodes




3 REacuteACTIFS



pH

357 agrave 20 degC

356 agrave 25 degC

355 agrave 30 degC



pH

3999 agrave 15 degC

4003 agrave 20 degC

4008 agrave 25 degC

4015 agrave 30 degC





Eau qsp 1 l


pH

690 agrave 15 degC

688 agrave 20 degC

686 agrave 25 degC

685 agrave 30 degC

















44 Mesure








1 INTRODUCTION






3 PRINCIPE




41 Reacuteactifs






















Remarque







5 APPAREILLAGE


51 Pompe HLPC



6 ECHANTILLONNAGE



7 MODE OPERATOIRE







Deacutebit 1 mlmin








Figure 1



8 CALCULS










Acide L-ascorbique

s r = 0011 x + 031

s R = 0064 x + 139



s r = 0014 x + 031

s R = 0079 x + 129


Exemple


s R = 52 mgL




102 Justesse













211 Appareillage


2112 pH megravetre

212 Reacuteactifs



















( 1 ) 10 5 pascal (Pa) = 1 bar


221 Appareillage


2212 pH megravetre

222 Reacuteactifs
























avec







(pm)




1 PRINCIPE


2 APPAREILLAGE

















3 MODE OPERATOIRE









Tableau 1


degC

0 185

1 180

2 174

3 168

4 164

5 159

6 154

7 150

8 145

9 140

10 136

11 132

12 128

degC

13 124

14 120

15 116

16 113

17 109

18 106

19 103

20 100

21 097

22 095

23 093

24 091

25 088










1 INTRODUCTION




3 DEacuteFINITION


4 PRINCIPE


5 REacuteACTIFS






52 Eacuteluants

A CH 3 CN 1 TFA 02 H 2 O= 988

B CH 3 CN 70 TFA 02 H 2 O= 298



6 MATEacuteRIEL

















0 100 0

isocratique

3 100 0

lineacuteaire

10 65 35

isocratique

15 65 35

lineacuteaire

27 405 595

lineacuteaire

29 0 100

isocratique

34 0 100

lineacuteaire

36 100 0

isocratique

40 100 0


9 CALCUL





Pente de la droite






UV 5-250 3786 09993 186 620 467 554 062 193

FLD 1-250 52037 09990 018 059 261 237 068 230














UV 280 nm 50 131 631 623 386 99

FD 50 131 631 645 536 102

UV 280 nm 5 144 194 179 149 921

FD 5 144 194 190 161 977











21 Reacuteactifs













231 Calculs


1867 times m
















21 Reacuteactifs




22 Appareillage








232 Eacutetalonnage



233 Dosage



241 Mode de calcul



C times F






2 APPAREILS





3 REacuteACTIFS


















Remarques






1 DEacuteFINITIONS

















221 Appareillage


Figure 1





2212 Microburette

222 Reacuteactifs
















22321 Calcul














22421 Calcul




64 times n


16 times n



(1600 times n)(P)









Calculs




m= 00012 (P 1 ndash P)


































TABLE I

Facteurs F



TABLE II




TABLE III




TABLE IV








2 APPAREILLAGE
















5 CALCULS













TABLE I



TABLE II




TABLE III






1 DEacuteFINITION










(pm)




1 DEacuteFINITION


2 PRINCIPE



3 REacuteACTIFS





4 APPAREILLAGE




















532 Mesure



61 Mode de calcul







1 DEacuteFINITION


2 PRINCIPE








F6PlarrrarrG6P


3 APPAREILLAGE





4 REacuteACTIFS












Remarque












52 Dosage




Teacutemoin Dosage


250 ml 250 ml



















Remarque



531 Calcul










v = 020 ml

PM = 180

d = 1

On obtient




Remarque









r = 0056 x i


R = 012 + 0076 x i




(pm)





(pm)




(pm)
















4 PRINCIPE





5 REacuteACTIFS















ndash 2672 permil






















Note























mdash Note















9 CALCUL





















A amp G 80 10 10

B amp C 90 10 0

D amp F 0 100 0

E amp I 90 0 10

H amp K 100 0 0

J amp L 0 0 100




19 18 17 19 19 19



S r 2 00064 00077 00031 00127 00069 00041



S R2 00389 00309 00382 00459 00316 00584






















2 R

Deacutecembre 1994 6 0210 0044 059 6 0151 0023 042

Juin 1995 8 0133 0018 037 8 0147 0021 041

Deacutecembre 1995 7 0075 0006 021 8 0115 0013 032

Mars 1996 9 0249 0062 070 11 0278 0077 078

Juin 1996 8 0127 0016 036 8 0189 0036 053

Septembre 1996 10 0147 0022 041 11 0224 0050 063

Deacutecembre 1996 10 0330 0109 092 9 0057 0003 016

Mars 1997 10 0069 0005 019 8 0059 0003 016

Juin 1997 11 0280 0079 078 11 0175 0031 049

Septembre 1997 12 0237 0056 066 11 0203 0041 057

Deacutecembre 1997 11 0127 0016 036 12 0156 0024 044

Mars 1998 12 0285 0081 080 13 0245 0060 069

Juin 1998 12 0182 0033 051 12 0263 0069 074

Septembre 1998 11 0264 0070 074 12 0327 0107 091









1 DEacuteFINITION





3 REacuteACTIFS




Eau qsp 1 000 ml










Eau qsp 1 000 ml

4 APPAREILLAGE







511 Cas des vins













532 Dosage



61 Mode de calcul

611 Cas des vins


A = 10 n








A = (500 times n)P




r = 09 mel






R = 36 mel



R = 51 mel




1 DEacuteFINITION







Remarque


3 REacuteACTIFS










4 APPAREILLAGE



2) dun barboteur

















53 Titrage





61 Mode de calcul






r = 07 mel



R = 13 mel





71 Principe




72 Reacuteactifs

























2 REacuteACTIFS













3 APPAREILLAGE













Teacutemoin Dosage







Ajouter









61 Mode de calcul









On obtient

C = 479 times ΔA





















21 Reacuteactifs





22 Appareillage





231 Distillation




233 Dosage







241 Mode de calcul


100 times C



31 Reacuteactifs




32 Appareillage
















333 Chromatographie





341 Mode de calcul










1 PRINCIPE


2 APPAREILS


22 Eacutelectrodes




3 REacuteACTIFS



pH

357 agrave 20 degC

356 agrave 25 degC

355 agrave 30 degC



pH

3999 agrave 15 degC

4003 agrave 20 degC

4008 agrave 25 degC

4015 agrave 30 degC





Eau qsp 1 l


pH

690 agrave 15 degC

688 agrave 20 degC

686 agrave 25 degC

685 agrave 30 degC

















44 Mesure








1 INTRODUCTION






3 PRINCIPE




41 Reacuteactifs






















Remarque







5 APPAREILLAGE


51 Pompe HLPC



6 ECHANTILLONNAGE



7 MODE OPERATOIRE







Deacutebit 1 mlmin








Figure 1



8 CALCULS










Acide L-ascorbique

s r = 0011 x + 031

s R = 0064 x + 139



s r = 0014 x + 031

s R = 0079 x + 129


Exemple


s R = 52 mgL




102 Justesse













211 Appareillage


2112 pH megravetre

212 Reacuteactifs



















( 1 ) 10 5 pascal (Pa) = 1 bar


221 Appareillage


2212 pH megravetre

222 Reacuteactifs
























avec







(pm)




1 PRINCIPE


2 APPAREILLAGE

















3 MODE OPERATOIRE









Tableau 1


degC

0 185

1 180

2 174

3 168

4 164

5 159

6 154

7 150

8 145

9 140

10 136

11 132

12 128

degC

13 124

14 120

15 116

16 113

17 109

18 106

19 103

20 100

21 097

22 095

23 093

24 091

25 088










1 INTRODUCTION




3 DEacuteFINITION


4 PRINCIPE


5 REacuteACTIFS






52 Eacuteluants

A CH 3 CN 1 TFA 02 H 2 O= 988

B CH 3 CN 70 TFA 02 H 2 O= 298



6 MATEacuteRIEL

















0 100 0

isocratique

3 100 0

lineacuteaire

10 65 35

isocratique

15 65 35

lineacuteaire

27 405 595

lineacuteaire

29 0 100

isocratique

34 0 100

lineacuteaire

36 100 0

isocratique

40 100 0


9 CALCUL





Pente de la droite






UV 5-250 3786 09993 186 620 467 554 062 193

FLD 1-250 52037 09990 018 059 261 237 068 230














UV 280 nm 50 131 631 623 386 99

FD 50 131 631 645 536 102

UV 280 nm 5 144 194 179 149 921

FD 5 144 194 190 161 977











21 Reacuteactifs













231 Calculs


1867 times m
















21 Reacuteactifs




22 Appareillage








232 Eacutetalonnage



233 Dosage



241 Mode de calcul



C times F






2 APPAREILS





3 REacuteACTIFS


















Remarques






1 DEacuteFINITIONS

















221 Appareillage


Figure 1





2212 Microburette

222 Reacuteactifs
















22321 Calcul














22421 Calcul




64 times n


16 times n



(1600 times n)(P)









TABLE I

Facteurs F



TABLE II




TABLE III




TABLE IV








2 APPAREILLAGE
















5 CALCULS













TABLE I



TABLE II




TABLE III






1 DEacuteFINITION










(pm)




1 DEacuteFINITION


2 PRINCIPE



3 REacuteACTIFS





4 APPAREILLAGE




















532 Mesure



61 Mode de calcul







1 DEacuteFINITION


2 PRINCIPE








F6PlarrrarrG6P


3 APPAREILLAGE





4 REacuteACTIFS












Remarque












52 Dosage




Teacutemoin Dosage


250 ml 250 ml



















Remarque



531 Calcul










v = 020 ml

PM = 180

d = 1

On obtient




Remarque









r = 0056 x i


R = 012 + 0076 x i




(pm)





(pm)




(pm)
















4 PRINCIPE





5 REacuteACTIFS















ndash 2672 permil






















Note























mdash Note















9 CALCUL





















A amp G 80 10 10

B amp C 90 10 0

D amp F 0 100 0

E amp I 90 0 10

H amp K 100 0 0

J amp L 0 0 100




19 18 17 19 19 19



S r 2 00064 00077 00031 00127 00069 00041



S R2 00389 00309 00382 00459 00316 00584






















2 R

Deacutecembre 1994 6 0210 0044 059 6 0151 0023 042

Juin 1995 8 0133 0018 037 8 0147 0021 041

Deacutecembre 1995 7 0075 0006 021 8 0115 0013 032

Mars 1996 9 0249 0062 070 11 0278 0077 078

Juin 1996 8 0127 0016 036 8 0189 0036 053

Septembre 1996 10 0147 0022 041 11 0224 0050 063

Deacutecembre 1996 10 0330 0109 092 9 0057 0003 016

Mars 1997 10 0069 0005 019 8 0059 0003 016

Juin 1997 11 0280 0079 078 11 0175 0031 049

Septembre 1997 12 0237 0056 066 11 0203 0041 057

Deacutecembre 1997 11 0127 0016 036 12 0156 0024 044

Mars 1998 12 0285 0081 080 13 0245 0060 069

Juin 1998 12 0182 0033 051 12 0263 0069 074

Septembre 1998 11 0264 0070 074 12 0327 0107 091









1 DEacuteFINITION





3 REacuteACTIFS




Eau qsp 1 000 ml










Eau qsp 1 000 ml

4 APPAREILLAGE







511 Cas des vins













532 Dosage



61 Mode de calcul

611 Cas des vins


A = 10 n








A = (500 times n)P




r = 09 mel






R = 36 mel



R = 51 mel




1 DEacuteFINITION







Remarque


3 REacuteACTIFS










4 APPAREILLAGE



2) dun barboteur

















53 Titrage





61 Mode de calcul






r = 07 mel



R = 13 mel





71 Principe




72 Reacuteactifs

























2 REacuteACTIFS













3 APPAREILLAGE













Teacutemoin Dosage







Ajouter









61 Mode de calcul









On obtient

C = 479 times ΔA





















21 Reacuteactifs





22 Appareillage





231 Distillation




233 Dosage







241 Mode de calcul


100 times C



31 Reacuteactifs




32 Appareillage
















333 Chromatographie





341 Mode de calcul










1 PRINCIPE


2 APPAREILS


22 Eacutelectrodes




3 REacuteACTIFS



pH

357 agrave 20 degC

356 agrave 25 degC

355 agrave 30 degC



pH

3999 agrave 15 degC

4003 agrave 20 degC

4008 agrave 25 degC

4015 agrave 30 degC





Eau qsp 1 l


pH

690 agrave 15 degC

688 agrave 20 degC

686 agrave 25 degC

685 agrave 30 degC

















44 Mesure








1 INTRODUCTION






3 PRINCIPE




41 Reacuteactifs






















Remarque







5 APPAREILLAGE


51 Pompe HLPC



6 ECHANTILLONNAGE



7 MODE OPERATOIRE







Deacutebit 1 mlmin








Figure 1



8 CALCULS










Acide L-ascorbique

s r = 0011 x + 031

s R = 0064 x + 139



s r = 0014 x + 031

s R = 0079 x + 129


Exemple


s R = 52 mgL




102 Justesse













211 Appareillage


2112 pH megravetre

212 Reacuteactifs



















( 1 ) 10 5 pascal (Pa) = 1 bar


221 Appareillage


2212 pH megravetre

222 Reacuteactifs
























avec







(pm)




1 PRINCIPE


2 APPAREILLAGE

















3 MODE OPERATOIRE









Tableau 1


degC

0 185

1 180

2 174

3 168

4 164

5 159

6 154

7 150

8 145

9 140

10 136

11 132

12 128

degC

13 124

14 120

15 116

16 113

17 109

18 106

19 103

20 100

21 097

22 095

23 093

24 091

25 088










1 INTRODUCTION




3 DEacuteFINITION


4 PRINCIPE


5 REacuteACTIFS






52 Eacuteluants

A CH 3 CN 1 TFA 02 H 2 O= 988

B CH 3 CN 70 TFA 02 H 2 O= 298



6 MATEacuteRIEL

















0 100 0

isocratique

3 100 0

lineacuteaire

10 65 35

isocratique

15 65 35

lineacuteaire

27 405 595

lineacuteaire

29 0 100

isocratique

34 0 100

lineacuteaire

36 100 0

isocratique

40 100 0


9 CALCUL





Pente de la droite






UV 5-250 3786 09993 186 620 467 554 062 193

FLD 1-250 52037 09990 018 059 261 237 068 230














UV 280 nm 50 131 631 623 386 99

FD 50 131 631 645 536 102

UV 280 nm 5 144 194 179 149 921

FD 5 144 194 190 161 977











21 Reacuteactifs













231 Calculs


1867 times m
















21 Reacuteactifs




22 Appareillage








232 Eacutetalonnage



233 Dosage



241 Mode de calcul



C times F






2 APPAREILS





3 REacuteACTIFS


















Remarques






1 DEacuteFINITIONS

















221 Appareillage


Figure 1





2212 Microburette

222 Reacuteactifs
















22321 Calcul














22421 Calcul




64 times n


16 times n



(1600 times n)(P)












2 APPAREILLAGE
















5 CALCULS













TABLE I



TABLE II




TABLE III






1 DEacuteFINITION










(pm)




1 DEacuteFINITION


2 PRINCIPE



3 REacuteACTIFS





4 APPAREILLAGE




















532 Mesure



61 Mode de calcul







1 DEacuteFINITION


2 PRINCIPE








F6PlarrrarrG6P


3 APPAREILLAGE





4 REacuteACTIFS












Remarque












52 Dosage




Teacutemoin Dosage


250 ml 250 ml



















Remarque



531 Calcul










v = 020 ml

PM = 180

d = 1

On obtient




Remarque









r = 0056 x i


R = 012 + 0076 x i




(pm)





(pm)




(pm)
















4 PRINCIPE





5 REacuteACTIFS















ndash 2672 permil






















Note























mdash Note















9 CALCUL





















A amp G 80 10 10

B amp C 90 10 0

D amp F 0 100 0

E amp I 90 0 10

H amp K 100 0 0

J amp L 0 0 100




19 18 17 19 19 19



S r 2 00064 00077 00031 00127 00069 00041



S R2 00389 00309 00382 00459 00316 00584






















2 R

Deacutecembre 1994 6 0210 0044 059 6 0151 0023 042

Juin 1995 8 0133 0018 037 8 0147 0021 041

Deacutecembre 1995 7 0075 0006 021 8 0115 0013 032

Mars 1996 9 0249 0062 070 11 0278 0077 078

Juin 1996 8 0127 0016 036 8 0189 0036 053

Septembre 1996 10 0147 0022 041 11 0224 0050 063

Deacutecembre 1996 10 0330 0109 092 9 0057 0003 016

Mars 1997 10 0069 0005 019 8 0059 0003 016

Juin 1997 11 0280 0079 078 11 0175 0031 049

Septembre 1997 12 0237 0056 066 11 0203 0041 057

Deacutecembre 1997 11 0127 0016 036 12 0156 0024 044

Mars 1998 12 0285 0081 080 13 0245 0060 069

Juin 1998 12 0182 0033 051 12 0263 0069 074

Septembre 1998 11 0264 0070 074 12 0327 0107 091









1 DEacuteFINITION





3 REacuteACTIFS




Eau qsp 1 000 ml










Eau qsp 1 000 ml

4 APPAREILLAGE







511 Cas des vins













532 Dosage



61 Mode de calcul

611 Cas des vins


A = 10 n








A = (500 times n)P




r = 09 mel






R = 36 mel



R = 51 mel




1 DEacuteFINITION







Remarque


3 REacuteACTIFS










4 APPAREILLAGE



2) dun barboteur

















53 Titrage





61 Mode de calcul






r = 07 mel



R = 13 mel





71 Principe




72 Reacuteactifs

























2 REacuteACTIFS













3 APPAREILLAGE













Teacutemoin Dosage







Ajouter









61 Mode de calcul









On obtient

C = 479 times ΔA





















21 Reacuteactifs





22 Appareillage





231 Distillation




233 Dosage







241 Mode de calcul


100 times C



31 Reacuteactifs




32 Appareillage
















333 Chromatographie





341 Mode de calcul










1 PRINCIPE


2 APPAREILS


22 Eacutelectrodes




3 REacuteACTIFS



pH

357 agrave 20 degC

356 agrave 25 degC

355 agrave 30 degC



pH

3999 agrave 15 degC

4003 agrave 20 degC

4008 agrave 25 degC

4015 agrave 30 degC





Eau qsp 1 l


pH

690 agrave 15 degC

688 agrave 20 degC

686 agrave 25 degC

685 agrave 30 degC

















44 Mesure








1 INTRODUCTION






3 PRINCIPE




41 Reacuteactifs






















Remarque







5 APPAREILLAGE


51 Pompe HLPC



6 ECHANTILLONNAGE



7 MODE OPERATOIRE







Deacutebit 1 mlmin








Figure 1



8 CALCULS










Acide L-ascorbique

s r = 0011 x + 031

s R = 0064 x + 139



s r = 0014 x + 031

s R = 0079 x + 129


Exemple


s R = 52 mgL




102 Justesse













211 Appareillage


2112 pH megravetre

212 Reacuteactifs



















( 1 ) 10 5 pascal (Pa) = 1 bar


221 Appareillage


2212 pH megravetre

222 Reacuteactifs
























avec







(pm)




1 PRINCIPE


2 APPAREILLAGE

















3 MODE OPERATOIRE









Tableau 1


degC

0 185

1 180

2 174

3 168

4 164

5 159

6 154

7 150

8 145

9 140

10 136

11 132

12 128

degC

13 124

14 120

15 116

16 113

17 109

18 106

19 103

20 100

21 097

22 095

23 093

24 091

25 088










1 INTRODUCTION




3 DEacuteFINITION


4 PRINCIPE


5 REacuteACTIFS






52 Eacuteluants

A CH 3 CN 1 TFA 02 H 2 O= 988

B CH 3 CN 70 TFA 02 H 2 O= 298



6 MATEacuteRIEL

















0 100 0

isocratique

3 100 0

lineacuteaire

10 65 35

isocratique

15 65 35

lineacuteaire

27 405 595

lineacuteaire

29 0 100

isocratique

34 0 100

lineacuteaire

36 100 0

isocratique

40 100 0


9 CALCUL





Pente de la droite






UV 5-250 3786 09993 186 620 467 554 062 193

FLD 1-250 52037 09990 018 059 261 237 068 230














UV 280 nm 50 131 631 623 386 99

FD 50 131 631 645 536 102

UV 280 nm 5 144 194 179 149 921

FD 5 144 194 190 161 977











21 Reacuteactifs













231 Calculs


1867 times m
















21 Reacuteactifs




22 Appareillage








232 Eacutetalonnage



233 Dosage



241 Mode de calcul



C times F






2 APPAREILS





3 REacuteACTIFS


















Remarques






1 DEacuteFINITIONS

















221 Appareillage


Figure 1





2212 Microburette

222 Reacuteactifs
















22321 Calcul














22421 Calcul




64 times n


16 times n



(1600 times n)(P)









TABLE I



TABLE II




TABLE III






1 DEacuteFINITION










(pm)




1 DEacuteFINITION


2 PRINCIPE



3 REacuteACTIFS





4 APPAREILLAGE




















532 Mesure



61 Mode de calcul







1 DEacuteFINITION


2 PRINCIPE








F6PlarrrarrG6P


3 APPAREILLAGE





4 REacuteACTIFS












Remarque












52 Dosage




Teacutemoin Dosage


250 ml 250 ml



















Remarque



531 Calcul










v = 020 ml

PM = 180

d = 1

On obtient




Remarque









r = 0056 x i


R = 012 + 0076 x i




(pm)





(pm)




(pm)
















4 PRINCIPE





5 REacuteACTIFS















ndash 2672 permil






















Note























mdash Note















9 CALCUL





















A amp G 80 10 10

B amp C 90 10 0

D amp F 0 100 0

E amp I 90 0 10

H amp K 100 0 0

J amp L 0 0 100




19 18 17 19 19 19



S r 2 00064 00077 00031 00127 00069 00041



S R2 00389 00309 00382 00459 00316 00584






















2 R

Deacutecembre 1994 6 0210 0044 059 6 0151 0023 042

Juin 1995 8 0133 0018 037 8 0147 0021 041

Deacutecembre 1995 7 0075 0006 021 8 0115 0013 032

Mars 1996 9 0249 0062 070 11 0278 0077 078

Juin 1996 8 0127 0016 036 8 0189 0036 053

Septembre 1996 10 0147 0022 041 11 0224 0050 063

Deacutecembre 1996 10 0330 0109 092 9 0057 0003 016

Mars 1997 10 0069 0005 019 8 0059 0003 016

Juin 1997 11 0280 0079 078 11 0175 0031 049

Septembre 1997 12 0237 0056 066 11 0203 0041 057

Deacutecembre 1997 11 0127 0016 036 12 0156 0024 044

Mars 1998 12 0285 0081 080 13 0245 0060 069

Juin 1998 12 0182 0033 051 12 0263 0069 074

Septembre 1998 11 0264 0070 074 12 0327 0107 091









1 DEacuteFINITION





3 REacuteACTIFS




Eau qsp 1 000 ml










Eau qsp 1 000 ml

4 APPAREILLAGE







511 Cas des vins













532 Dosage



61 Mode de calcul

611 Cas des vins


A = 10 n








A = (500 times n)P




r = 09 mel






R = 36 mel



R = 51 mel




1 DEacuteFINITION







Remarque


3 REacuteACTIFS










4 APPAREILLAGE



2) dun barboteur

















53 Titrage





61 Mode de calcul






r = 07 mel



R = 13 mel





71 Principe




72 Reacuteactifs

























2 REacuteACTIFS













3 APPAREILLAGE













Teacutemoin Dosage







Ajouter









61 Mode de calcul









On obtient

C = 479 times ΔA





















21 Reacuteactifs





22 Appareillage





231 Distillation




233 Dosage







241 Mode de calcul


100 times C



31 Reacuteactifs




32 Appareillage
















333 Chromatographie





341 Mode de calcul










1 PRINCIPE


2 APPAREILS


22 Eacutelectrodes




3 REacuteACTIFS



pH

357 agrave 20 degC

356 agrave 25 degC

355 agrave 30 degC



pH

3999 agrave 15 degC

4003 agrave 20 degC

4008 agrave 25 degC

4015 agrave 30 degC





Eau qsp 1 l


pH

690 agrave 15 degC

688 agrave 20 degC

686 agrave 25 degC

685 agrave 30 degC

















44 Mesure








1 INTRODUCTION






3 PRINCIPE




41 Reacuteactifs






















Remarque







5 APPAREILLAGE


51 Pompe HLPC



6 ECHANTILLONNAGE



7 MODE OPERATOIRE







Deacutebit 1 mlmin








Figure 1



8 CALCULS










Acide L-ascorbique

s r = 0011 x + 031

s R = 0064 x + 139



s r = 0014 x + 031

s R = 0079 x + 129


Exemple


s R = 52 mgL




102 Justesse













211 Appareillage


2112 pH megravetre

212 Reacuteactifs



















( 1 ) 10 5 pascal (Pa) = 1 bar


221 Appareillage


2212 pH megravetre

222 Reacuteactifs
























avec







(pm)




1 PRINCIPE


2 APPAREILLAGE

















3 MODE OPERATOIRE









Tableau 1


degC

0 185

1 180

2 174

3 168

4 164

5 159

6 154

7 150

8 145

9 140

10 136

11 132

12 128

degC

13 124

14 120

15 116

16 113

17 109

18 106

19 103

20 100

21 097

22 095

23 093

24 091

25 088










1 INTRODUCTION




3 DEacuteFINITION


4 PRINCIPE


5 REacuteACTIFS






52 Eacuteluants

A CH 3 CN 1 TFA 02 H 2 O= 988

B CH 3 CN 70 TFA 02 H 2 O= 298



6 MATEacuteRIEL

















0 100 0

isocratique

3 100 0

lineacuteaire

10 65 35

isocratique

15 65 35

lineacuteaire

27 405 595

lineacuteaire

29 0 100

isocratique

34 0 100

lineacuteaire

36 100 0

isocratique

40 100 0


9 CALCUL





Pente de la droite






UV 5-250 3786 09993 186 620 467 554 062 193

FLD 1-250 52037 09990 018 059 261 237 068 230














UV 280 nm 50 131 631 623 386 99

FD 50 131 631 645 536 102

UV 280 nm 5 144 194 179 149 921

FD 5 144 194 190 161 977











21 Reacuteactifs













231 Calculs


1867 times m
















21 Reacuteactifs




22 Appareillage








232 Eacutetalonnage



233 Dosage



241 Mode de calcul



C times F






2 APPAREILS





3 REacuteACTIFS


















Remarques






1 DEacuteFINITIONS

















221 Appareillage


Figure 1





2212 Microburette

222 Reacuteactifs
















22321 Calcul














22421 Calcul




64 times n


16 times n



(1600 times n)(P)










1 DEacuteFINITION










(pm)




1 DEacuteFINITION


2 PRINCIPE



3 REacuteACTIFS





4 APPAREILLAGE




















532 Mesure



61 Mode de calcul







1 DEacuteFINITION


2 PRINCIPE








F6PlarrrarrG6P


3 APPAREILLAGE





4 REacuteACTIFS












Remarque












52 Dosage




Teacutemoin Dosage


250 ml 250 ml



















Remarque



531 Calcul










v = 020 ml

PM = 180

d = 1

On obtient




Remarque









r = 0056 x i


R = 012 + 0076 x i




(pm)





(pm)




(pm)
















4 PRINCIPE





5 REacuteACTIFS















ndash 2672 permil






















Note























mdash Note















9 CALCUL





















A amp G 80 10 10

B amp C 90 10 0

D amp F 0 100 0

E amp I 90 0 10

H amp K 100 0 0

J amp L 0 0 100




19 18 17 19 19 19



S r 2 00064 00077 00031 00127 00069 00041



S R2 00389 00309 00382 00459 00316 00584






















2 R

Deacutecembre 1994 6 0210 0044 059 6 0151 0023 042

Juin 1995 8 0133 0018 037 8 0147 0021 041

Deacutecembre 1995 7 0075 0006 021 8 0115 0013 032

Mars 1996 9 0249 0062 070 11 0278 0077 078

Juin 1996 8 0127 0016 036 8 0189 0036 053

Septembre 1996 10 0147 0022 041 11 0224 0050 063

Deacutecembre 1996 10 0330 0109 092 9 0057 0003 016

Mars 1997 10 0069 0005 019 8 0059 0003 016

Juin 1997 11 0280 0079 078 11 0175 0031 049

Septembre 1997 12 0237 0056 066 11 0203 0041 057

Deacutecembre 1997 11 0127 0016 036 12 0156 0024 044

Mars 1998 12 0285 0081 080 13 0245 0060 069

Juin 1998 12 0182 0033 051 12 0263 0069 074

Septembre 1998 11 0264 0070 074 12 0327 0107 091









1 DEacuteFINITION





3 REacuteACTIFS




Eau qsp 1 000 ml










Eau qsp 1 000 ml

4 APPAREILLAGE







511 Cas des vins













532 Dosage



61 Mode de calcul

611 Cas des vins


A = 10 n








A = (500 times n)P




r = 09 mel






R = 36 mel



R = 51 mel




1 DEacuteFINITION







Remarque


3 REacuteACTIFS










4 APPAREILLAGE



2) dun barboteur

















53 Titrage





61 Mode de calcul






r = 07 mel



R = 13 mel





71 Principe




72 Reacuteactifs

























2 REacuteACTIFS













3 APPAREILLAGE













Teacutemoin Dosage







Ajouter









61 Mode de calcul









On obtient

C = 479 times ΔA





















21 Reacuteactifs





22 Appareillage





231 Distillation




233 Dosage







241 Mode de calcul


100 times C



31 Reacuteactifs




32 Appareillage
















333 Chromatographie





341 Mode de calcul










1 PRINCIPE


2 APPAREILS


22 Eacutelectrodes




3 REacuteACTIFS



pH

357 agrave 20 degC

356 agrave 25 degC

355 agrave 30 degC



pH

3999 agrave 15 degC

4003 agrave 20 degC

4008 agrave 25 degC

4015 agrave 30 degC





Eau qsp 1 l


pH

690 agrave 15 degC

688 agrave 20 degC

686 agrave 25 degC

685 agrave 30 degC

















44 Mesure








1 INTRODUCTION






3 PRINCIPE




41 Reacuteactifs






















Remarque







5 APPAREILLAGE


51 Pompe HLPC



6 ECHANTILLONNAGE



7 MODE OPERATOIRE







Deacutebit 1 mlmin








Figure 1



8 CALCULS










Acide L-ascorbique

s r = 0011 x + 031

s R = 0064 x + 139



s r = 0014 x + 031

s R = 0079 x + 129


Exemple


s R = 52 mgL




102 Justesse













211 Appareillage


2112 pH megravetre

212 Reacuteactifs



















( 1 ) 10 5 pascal (Pa) = 1 bar


221 Appareillage


2212 pH megravetre

222 Reacuteactifs
























avec







(pm)




1 PRINCIPE


2 APPAREILLAGE

















3 MODE OPERATOIRE









Tableau 1


degC

0 185

1 180

2 174

3 168

4 164

5 159

6 154

7 150

8 145

9 140

10 136

11 132

12 128

degC

13 124

14 120

15 116

16 113

17 109

18 106

19 103

20 100

21 097

22 095

23 093

24 091

25 088










1 INTRODUCTION




3 DEacuteFINITION


4 PRINCIPE


5 REacuteACTIFS






52 Eacuteluants

A CH 3 CN 1 TFA 02 H 2 O= 988

B CH 3 CN 70 TFA 02 H 2 O= 298



6 MATEacuteRIEL

















0 100 0

isocratique

3 100 0

lineacuteaire

10 65 35

isocratique

15 65 35

lineacuteaire

27 405 595

lineacuteaire

29 0 100

isocratique

34 0 100

lineacuteaire

36 100 0

isocratique

40 100 0


9 CALCUL





Pente de la droite






UV 5-250 3786 09993 186 620 467 554 062 193

FLD 1-250 52037 09990 018 059 261 237 068 230














UV 280 nm 50 131 631 623 386 99

FD 50 131 631 645 536 102

UV 280 nm 5 144 194 179 149 921

FD 5 144 194 190 161 977











21 Reacuteactifs













231 Calculs


1867 times m
















21 Reacuteactifs




22 Appareillage








232 Eacutetalonnage



233 Dosage



241 Mode de calcul



C times F






2 APPAREILS





3 REacuteACTIFS


















Remarques






1 DEacuteFINITIONS

















221 Appareillage


Figure 1





2212 Microburette

222 Reacuteactifs
















22321 Calcul














22421 Calcul




64 times n


16 times n



(1600 times n)(P)










(pm)




1 DEacuteFINITION


2 PRINCIPE



3 REacuteACTIFS





4 APPAREILLAGE




















532 Mesure



61 Mode de calcul







1 DEacuteFINITION


2 PRINCIPE








F6PlarrrarrG6P


3 APPAREILLAGE





4 REacuteACTIFS












Remarque












52 Dosage




Teacutemoin Dosage


250 ml 250 ml



















Remarque



531 Calcul










v = 020 ml

PM = 180

d = 1

On obtient




Remarque









r = 0056 x i


R = 012 + 0076 x i




(pm)





(pm)




(pm)
















4 PRINCIPE





5 REacuteACTIFS















ndash 2672 permil






















Note























mdash Note















9 CALCUL





















A amp G 80 10 10

B amp C 90 10 0

D amp F 0 100 0

E amp I 90 0 10

H amp K 100 0 0

J amp L 0 0 100




19 18 17 19 19 19



S r 2 00064 00077 00031 00127 00069 00041



S R2 00389 00309 00382 00459 00316 00584






















2 R

Deacutecembre 1994 6 0210 0044 059 6 0151 0023 042

Juin 1995 8 0133 0018 037 8 0147 0021 041

Deacutecembre 1995 7 0075 0006 021 8 0115 0013 032

Mars 1996 9 0249 0062 070 11 0278 0077 078

Juin 1996 8 0127 0016 036 8 0189 0036 053

Septembre 1996 10 0147 0022 041 11 0224 0050 063

Deacutecembre 1996 10 0330 0109 092 9 0057 0003 016

Mars 1997 10 0069 0005 019 8 0059 0003 016

Juin 1997 11 0280 0079 078 11 0175 0031 049

Septembre 1997 12 0237 0056 066 11 0203 0041 057

Deacutecembre 1997 11 0127 0016 036 12 0156 0024 044

Mars 1998 12 0285 0081 080 13 0245 0060 069

Juin 1998 12 0182 0033 051 12 0263 0069 074

Septembre 1998 11 0264 0070 074 12 0327 0107 091









1 DEacuteFINITION





3 REacuteACTIFS




Eau qsp 1 000 ml










Eau qsp 1 000 ml

4 APPAREILLAGE







511 Cas des vins













532 Dosage



61 Mode de calcul

611 Cas des vins


A = 10 n








A = (500 times n)P




r = 09 mel






R = 36 mel



R = 51 mel




1 DEacuteFINITION







Remarque


3 REacuteACTIFS










4 APPAREILLAGE



2) dun barboteur

















53 Titrage





61 Mode de calcul






r = 07 mel



R = 13 mel





71 Principe




72 Reacuteactifs

























2 REacuteACTIFS













3 APPAREILLAGE













Teacutemoin Dosage







Ajouter









61 Mode de calcul









On obtient

C = 479 times ΔA





















21 Reacuteactifs





22 Appareillage





231 Distillation




233 Dosage







241 Mode de calcul


100 times C



31 Reacuteactifs




32 Appareillage
















333 Chromatographie





341 Mode de calcul










1 PRINCIPE


2 APPAREILS


22 Eacutelectrodes




3 REacuteACTIFS



pH

357 agrave 20 degC

356 agrave 25 degC

355 agrave 30 degC



pH

3999 agrave 15 degC

4003 agrave 20 degC

4008 agrave 25 degC

4015 agrave 30 degC





Eau qsp 1 l


pH

690 agrave 15 degC

688 agrave 20 degC

686 agrave 25 degC

685 agrave 30 degC

















44 Mesure








1 INTRODUCTION






3 PRINCIPE




41 Reacuteactifs






















Remarque







5 APPAREILLAGE


51 Pompe HLPC



6 ECHANTILLONNAGE



7 MODE OPERATOIRE







Deacutebit 1 mlmin








Figure 1



8 CALCULS










Acide L-ascorbique

s r = 0011 x + 031

s R = 0064 x + 139



s r = 0014 x + 031

s R = 0079 x + 129


Exemple


s R = 52 mgL




102 Justesse













211 Appareillage


2112 pH megravetre

212 Reacuteactifs



















( 1 ) 10 5 pascal (Pa) = 1 bar


221 Appareillage


2212 pH megravetre

222 Reacuteactifs
























avec







(pm)




1 PRINCIPE


2 APPAREILLAGE

















3 MODE OPERATOIRE









Tableau 1


degC

0 185

1 180

2 174

3 168

4 164

5 159

6 154

7 150

8 145

9 140

10 136

11 132

12 128

degC

13 124

14 120

15 116

16 113

17 109

18 106

19 103

20 100

21 097

22 095

23 093

24 091

25 088










1 INTRODUCTION




3 DEacuteFINITION


4 PRINCIPE


5 REacuteACTIFS






52 Eacuteluants

A CH 3 CN 1 TFA 02 H 2 O= 988

B CH 3 CN 70 TFA 02 H 2 O= 298



6 MATEacuteRIEL

















0 100 0

isocratique

3 100 0

lineacuteaire

10 65 35

isocratique

15 65 35

lineacuteaire

27 405 595

lineacuteaire

29 0 100

isocratique

34 0 100

lineacuteaire

36 100 0

isocratique

40 100 0


9 CALCUL





Pente de la droite






UV 5-250 3786 09993 186 620 467 554 062 193

FLD 1-250 52037 09990 018 059 261 237 068 230














UV 280 nm 50 131 631 623 386 99

FD 50 131 631 645 536 102

UV 280 nm 5 144 194 179 149 921

FD 5 144 194 190 161 977











21 Reacuteactifs













231 Calculs


1867 times m
















21 Reacuteactifs




22 Appareillage








232 Eacutetalonnage



233 Dosage



241 Mode de calcul



C times F






2 APPAREILS





3 REacuteACTIFS


















Remarques






1 DEacuteFINITIONS

















221 Appareillage


Figure 1





2212 Microburette

222 Reacuteactifs
















22321 Calcul














22421 Calcul




64 times n


16 times n



(1600 times n)(P)










1 DEacuteFINITION


2 PRINCIPE



3 REacuteACTIFS





4 APPAREILLAGE




















532 Mesure



61 Mode de calcul







1 DEacuteFINITION


2 PRINCIPE








F6PlarrrarrG6P


3 APPAREILLAGE





4 REacuteACTIFS












Remarque












52 Dosage




Teacutemoin Dosage


250 ml 250 ml



















Remarque



531 Calcul










v = 020 ml

PM = 180

d = 1

On obtient




Remarque









r = 0056 x i


R = 012 + 0076 x i




(pm)





(pm)




(pm)
















4 PRINCIPE





5 REacuteACTIFS















ndash 2672 permil






















Note























mdash Note















9 CALCUL





















A amp G 80 10 10

B amp C 90 10 0

D amp F 0 100 0

E amp I 90 0 10

H amp K 100 0 0

J amp L 0 0 100




19 18 17 19 19 19



S r 2 00064 00077 00031 00127 00069 00041



S R2 00389 00309 00382 00459 00316 00584






















2 R

Deacutecembre 1994 6 0210 0044 059 6 0151 0023 042

Juin 1995 8 0133 0018 037 8 0147 0021 041

Deacutecembre 1995 7 0075 0006 021 8 0115 0013 032

Mars 1996 9 0249 0062 070 11 0278 0077 078

Juin 1996 8 0127 0016 036 8 0189 0036 053

Septembre 1996 10 0147 0022 041 11 0224 0050 063

Deacutecembre 1996 10 0330 0109 092 9 0057 0003 016

Mars 1997 10 0069 0005 019 8 0059 0003 016

Juin 1997 11 0280 0079 078 11 0175 0031 049

Septembre 1997 12 0237 0056 066 11 0203 0041 057

Deacutecembre 1997 11 0127 0016 036 12 0156 0024 044

Mars 1998 12 0285 0081 080 13 0245 0060 069

Juin 1998 12 0182 0033 051 12 0263 0069 074

Septembre 1998 11 0264 0070 074 12 0327 0107 091









1 DEacuteFINITION





3 REacuteACTIFS




Eau qsp 1 000 ml










Eau qsp 1 000 ml

4 APPAREILLAGE







511 Cas des vins













532 Dosage



61 Mode de calcul

611 Cas des vins


A = 10 n








A = (500 times n)P




r = 09 mel






R = 36 mel



R = 51 mel




1 DEacuteFINITION







Remarque


3 REacuteACTIFS










4 APPAREILLAGE



2) dun barboteur

















53 Titrage





61 Mode de calcul






r = 07 mel



R = 13 mel





71 Principe




72 Reacuteactifs

























2 REacuteACTIFS













3 APPAREILLAGE













Teacutemoin Dosage







Ajouter









61 Mode de calcul









On obtient

C = 479 times ΔA





















21 Reacuteactifs





22 Appareillage





231 Distillation




233 Dosage







241 Mode de calcul


100 times C



31 Reacuteactifs




32 Appareillage
















333 Chromatographie





341 Mode de calcul










1 PRINCIPE


2 APPAREILS


22 Eacutelectrodes




3 REacuteACTIFS



pH

357 agrave 20 degC

356 agrave 25 degC

355 agrave 30 degC



pH

3999 agrave 15 degC

4003 agrave 20 degC

4008 agrave 25 degC

4015 agrave 30 degC





Eau qsp 1 l


pH

690 agrave 15 degC

688 agrave 20 degC

686 agrave 25 degC

685 agrave 30 degC

















44 Mesure








1 INTRODUCTION






3 PRINCIPE




41 Reacuteactifs






















Remarque







5 APPAREILLAGE


51 Pompe HLPC



6 ECHANTILLONNAGE



7 MODE OPERATOIRE







Deacutebit 1 mlmin








Figure 1



8 CALCULS










Acide L-ascorbique

s r = 0011 x + 031

s R = 0064 x + 139



s r = 0014 x + 031

s R = 0079 x + 129


Exemple


s R = 52 mgL




102 Justesse













211 Appareillage


2112 pH megravetre

212 Reacuteactifs



















( 1 ) 10 5 pascal (Pa) = 1 bar


221 Appareillage


2212 pH megravetre

222 Reacuteactifs
























avec







(pm)




1 PRINCIPE


2 APPAREILLAGE

















3 MODE OPERATOIRE









Tableau 1


degC

0 185

1 180

2 174

3 168

4 164

5 159

6 154

7 150

8 145

9 140

10 136

11 132

12 128

degC

13 124

14 120

15 116

16 113

17 109

18 106

19 103

20 100

21 097

22 095

23 093

24 091

25 088










1 INTRODUCTION




3 DEacuteFINITION


4 PRINCIPE


5 REacuteACTIFS






52 Eacuteluants

A CH 3 CN 1 TFA 02 H 2 O= 988

B CH 3 CN 70 TFA 02 H 2 O= 298



6 MATEacuteRIEL

















0 100 0

isocratique

3 100 0

lineacuteaire

10 65 35

isocratique

15 65 35

lineacuteaire

27 405 595

lineacuteaire

29 0 100

isocratique

34 0 100

lineacuteaire

36 100 0

isocratique

40 100 0


9 CALCUL





Pente de la droite






UV 5-250 3786 09993 186 620 467 554 062 193

FLD 1-250 52037 09990 018 059 261 237 068 230














UV 280 nm 50 131 631 623 386 99

FD 50 131 631 645 536 102

UV 280 nm 5 144 194 179 149 921

FD 5 144 194 190 161 977











21 Reacuteactifs













231 Calculs


1867 times m
















21 Reacuteactifs




22 Appareillage








232 Eacutetalonnage



233 Dosage



241 Mode de calcul



C times F






2 APPAREILS





3 REacuteACTIFS


















Remarques






1 DEacuteFINITIONS

















221 Appareillage


Figure 1





2212 Microburette

222 Reacuteactifs
















22321 Calcul














22421 Calcul




64 times n


16 times n



(1600 times n)(P)









532 Mesure



61 Mode de calcul







1 DEacuteFINITION


2 PRINCIPE








F6PlarrrarrG6P


3 APPAREILLAGE





4 REacuteACTIFS












Remarque












52 Dosage




Teacutemoin Dosage


250 ml 250 ml



















Remarque



531 Calcul










v = 020 ml

PM = 180

d = 1

On obtient




Remarque









r = 0056 x i


R = 012 + 0076 x i




(pm)





(pm)




(pm)
















4 PRINCIPE





5 REacuteACTIFS















ndash 2672 permil






















Note























mdash Note















9 CALCUL





















A amp G 80 10 10

B amp C 90 10 0

D amp F 0 100 0

E amp I 90 0 10

H amp K 100 0 0

J amp L 0 0 100




19 18 17 19 19 19



S r 2 00064 00077 00031 00127 00069 00041



S R2 00389 00309 00382 00459 00316 00584






















2 R

Deacutecembre 1994 6 0210 0044 059 6 0151 0023 042

Juin 1995 8 0133 0018 037 8 0147 0021 041

Deacutecembre 1995 7 0075 0006 021 8 0115 0013 032

Mars 1996 9 0249 0062 070 11 0278 0077 078

Juin 1996 8 0127 0016 036 8 0189 0036 053

Septembre 1996 10 0147 0022 041 11 0224 0050 063

Deacutecembre 1996 10 0330 0109 092 9 0057 0003 016

Mars 1997 10 0069 0005 019 8 0059 0003 016

Juin 1997 11 0280 0079 078 11 0175 0031 049

Septembre 1997 12 0237 0056 066 11 0203 0041 057

Deacutecembre 1997 11 0127 0016 036 12 0156 0024 044

Mars 1998 12 0285 0081 080 13 0245 0060 069

Juin 1998 12 0182 0033 051 12 0263 0069 074

Septembre 1998 11 0264 0070 074 12 0327 0107 091









1 DEacuteFINITION





3 REacuteACTIFS




Eau qsp 1 000 ml










Eau qsp 1 000 ml

4 APPAREILLAGE







511 Cas des vins













532 Dosage



61 Mode de calcul

611 Cas des vins


A = 10 n








A = (500 times n)P




r = 09 mel






R = 36 mel



R = 51 mel




1 DEacuteFINITION







Remarque


3 REacuteACTIFS










4 APPAREILLAGE



2) dun barboteur

















53 Titrage





61 Mode de calcul






r = 07 mel



R = 13 mel





71 Principe




72 Reacuteactifs

























2 REacuteACTIFS













3 APPAREILLAGE













Teacutemoin Dosage







Ajouter









61 Mode de calcul









On obtient

C = 479 times ΔA





















21 Reacuteactifs





22 Appareillage





231 Distillation




233 Dosage







241 Mode de calcul


100 times C



31 Reacuteactifs




32 Appareillage
















333 Chromatographie





341 Mode de calcul










1 PRINCIPE


2 APPAREILS


22 Eacutelectrodes




3 REacuteACTIFS



pH

357 agrave 20 degC

356 agrave 25 degC

355 agrave 30 degC



pH

3999 agrave 15 degC

4003 agrave 20 degC

4008 agrave 25 degC

4015 agrave 30 degC





Eau qsp 1 l


pH

690 agrave 15 degC

688 agrave 20 degC

686 agrave 25 degC

685 agrave 30 degC

















44 Mesure








1 INTRODUCTION






3 PRINCIPE




41 Reacuteactifs






















Remarque







5 APPAREILLAGE


51 Pompe HLPC



6 ECHANTILLONNAGE



7 MODE OPERATOIRE







Deacutebit 1 mlmin








Figure 1



8 CALCULS










Acide L-ascorbique

s r = 0011 x + 031

s R = 0064 x + 139



s r = 0014 x + 031

s R = 0079 x + 129


Exemple


s R = 52 mgL




102 Justesse













211 Appareillage


2112 pH megravetre

212 Reacuteactifs



















( 1 ) 10 5 pascal (Pa) = 1 bar


221 Appareillage


2212 pH megravetre

222 Reacuteactifs
























avec







(pm)




1 PRINCIPE


2 APPAREILLAGE

















3 MODE OPERATOIRE









Tableau 1


degC

0 185

1 180

2 174

3 168

4 164

5 159

6 154

7 150

8 145

9 140

10 136

11 132

12 128

degC

13 124

14 120

15 116

16 113

17 109

18 106

19 103

20 100

21 097

22 095

23 093

24 091

25 088










1 INTRODUCTION




3 DEacuteFINITION


4 PRINCIPE


5 REacuteACTIFS






52 Eacuteluants

A CH 3 CN 1 TFA 02 H 2 O= 988

B CH 3 CN 70 TFA 02 H 2 O= 298



6 MATEacuteRIEL

















0 100 0

isocratique

3 100 0

lineacuteaire

10 65 35

isocratique

15 65 35

lineacuteaire

27 405 595

lineacuteaire

29 0 100

isocratique

34 0 100

lineacuteaire

36 100 0

isocratique

40 100 0


9 CALCUL





Pente de la droite






UV 5-250 3786 09993 186 620 467 554 062 193

FLD 1-250 52037 09990 018 059 261 237 068 230














UV 280 nm 50 131 631 623 386 99

FD 50 131 631 645 536 102

UV 280 nm 5 144 194 179 149 921

FD 5 144 194 190 161 977











21 Reacuteactifs













231 Calculs


1867 times m
















21 Reacuteactifs




22 Appareillage








232 Eacutetalonnage



233 Dosage



241 Mode de calcul



C times F






2 APPAREILS





3 REacuteACTIFS


















Remarques






1 DEacuteFINITIONS

















221 Appareillage


Figure 1





2212 Microburette

222 Reacuteactifs
















22321 Calcul














22421 Calcul




64 times n


16 times n



(1600 times n)(P)










1 DEacuteFINITION


2 PRINCIPE








F6PlarrrarrG6P


3 APPAREILLAGE





4 REacuteACTIFS












Remarque












52 Dosage




Teacutemoin Dosage


250 ml 250 ml



















Remarque



531 Calcul










v = 020 ml

PM = 180

d = 1

On obtient




Remarque









r = 0056 x i


R = 012 + 0076 x i




(pm)





(pm)




(pm)
















4 PRINCIPE





5 REacuteACTIFS















ndash 2672 permil






















Note























mdash Note















9 CALCUL





















A amp G 80 10 10

B amp C 90 10 0

D amp F 0 100 0

E amp I 90 0 10

H amp K 100 0 0

J amp L 0 0 100




19 18 17 19 19 19



S r 2 00064 00077 00031 00127 00069 00041



S R2 00389 00309 00382 00459 00316 00584






















2 R

Deacutecembre 1994 6 0210 0044 059 6 0151 0023 042

Juin 1995 8 0133 0018 037 8 0147 0021 041

Deacutecembre 1995 7 0075 0006 021 8 0115 0013 032

Mars 1996 9 0249 0062 070 11 0278 0077 078

Juin 1996 8 0127 0016 036 8 0189 0036 053

Septembre 1996 10 0147 0022 041 11 0224 0050 063

Deacutecembre 1996 10 0330 0109 092 9 0057 0003 016

Mars 1997 10 0069 0005 019 8 0059 0003 016

Juin 1997 11 0280 0079 078 11 0175 0031 049

Septembre 1997 12 0237 0056 066 11 0203 0041 057

Deacutecembre 1997 11 0127 0016 036 12 0156 0024 044

Mars 1998 12 0285 0081 080 13 0245 0060 069

Juin 1998 12 0182 0033 051 12 0263 0069 074

Septembre 1998 11 0264 0070 074 12 0327 0107 091









1 DEacuteFINITION





3 REacuteACTIFS




Eau qsp 1 000 ml










Eau qsp 1 000 ml

4 APPAREILLAGE







511 Cas des vins













532 Dosage



61 Mode de calcul

611 Cas des vins


A = 10 n








A = (500 times n)P




r = 09 mel






R = 36 mel



R = 51 mel




1 DEacuteFINITION







Remarque


3 REacuteACTIFS










4 APPAREILLAGE



2) dun barboteur

















53 Titrage





61 Mode de calcul






r = 07 mel



R = 13 mel





71 Principe




72 Reacuteactifs

























2 REacuteACTIFS













3 APPAREILLAGE













Teacutemoin Dosage







Ajouter









61 Mode de calcul









On obtient

C = 479 times ΔA





















21 Reacuteactifs





22 Appareillage





231 Distillation




233 Dosage







241 Mode de calcul


100 times C



31 Reacuteactifs




32 Appareillage
















333 Chromatographie





341 Mode de calcul










1 PRINCIPE


2 APPAREILS


22 Eacutelectrodes




3 REacuteACTIFS



pH

357 agrave 20 degC

356 agrave 25 degC

355 agrave 30 degC



pH

3999 agrave 15 degC

4003 agrave 20 degC

4008 agrave 25 degC

4015 agrave 30 degC





Eau qsp 1 l


pH

690 agrave 15 degC

688 agrave 20 degC

686 agrave 25 degC

685 agrave 30 degC

















44 Mesure








1 INTRODUCTION






3 PRINCIPE




41 Reacuteactifs






















Remarque







5 APPAREILLAGE


51 Pompe HLPC



6 ECHANTILLONNAGE



7 MODE OPERATOIRE







Deacutebit 1 mlmin








Figure 1



8 CALCULS










Acide L-ascorbique

s r = 0011 x + 031

s R = 0064 x + 139



s r = 0014 x + 031

s R = 0079 x + 129


Exemple


s R = 52 mgL




102 Justesse













211 Appareillage


2112 pH megravetre

212 Reacuteactifs



















( 1 ) 10 5 pascal (Pa) = 1 bar


221 Appareillage


2212 pH megravetre

222 Reacuteactifs
























avec







(pm)




1 PRINCIPE


2 APPAREILLAGE

















3 MODE OPERATOIRE









Tableau 1


degC

0 185

1 180

2 174

3 168

4 164

5 159

6 154

7 150

8 145

9 140

10 136

11 132

12 128

degC

13 124

14 120

15 116

16 113

17 109

18 106

19 103

20 100

21 097

22 095

23 093

24 091

25 088










1 INTRODUCTION




3 DEacuteFINITION


4 PRINCIPE


5 REacuteACTIFS






52 Eacuteluants

A CH 3 CN 1 TFA 02 H 2 O= 988

B CH 3 CN 70 TFA 02 H 2 O= 298



6 MATEacuteRIEL

















0 100 0

isocratique

3 100 0

lineacuteaire

10 65 35

isocratique

15 65 35

lineacuteaire

27 405 595

lineacuteaire

29 0 100

isocratique

34 0 100

lineacuteaire

36 100 0

isocratique

40 100 0


9 CALCUL





Pente de la droite






UV 5-250 3786 09993 186 620 467 554 062 193

FLD 1-250 52037 09990 018 059 261 237 068 230














UV 280 nm 50 131 631 623 386 99

FD 50 131 631 645 536 102

UV 280 nm 5 144 194 179 149 921

FD 5 144 194 190 161 977











21 Reacuteactifs













231 Calculs


1867 times m
















21 Reacuteactifs




22 Appareillage








232 Eacutetalonnage



233 Dosage



241 Mode de calcul



C times F






2 APPAREILS





3 REacuteACTIFS


















Remarques






1 DEacuteFINITIONS

















221 Appareillage


Figure 1





2212 Microburette

222 Reacuteactifs
















22321 Calcul














22421 Calcul




64 times n


16 times n



(1600 times n)(P)











Remarque












52 Dosage




Teacutemoin Dosage


250 ml 250 ml



















Remarque



531 Calcul










v = 020 ml

PM = 180

d = 1

On obtient




Remarque









r = 0056 x i


R = 012 + 0076 x i




(pm)





(pm)




(pm)
















4 PRINCIPE





5 REacuteACTIFS















ndash 2672 permil






















Note























mdash Note















9 CALCUL





















A amp G 80 10 10

B amp C 90 10 0

D amp F 0 100 0

E amp I 90 0 10

H amp K 100 0 0

J amp L 0 0 100




19 18 17 19 19 19



S r 2 00064 00077 00031 00127 00069 00041



S R2 00389 00309 00382 00459 00316 00584






















2 R

Deacutecembre 1994 6 0210 0044 059 6 0151 0023 042

Juin 1995 8 0133 0018 037 8 0147 0021 041

Deacutecembre 1995 7 0075 0006 021 8 0115 0013 032

Mars 1996 9 0249 0062 070 11 0278 0077 078

Juin 1996 8 0127 0016 036 8 0189 0036 053

Septembre 1996 10 0147 0022 041 11 0224 0050 063

Deacutecembre 1996 10 0330 0109 092 9 0057 0003 016

Mars 1997 10 0069 0005 019 8 0059 0003 016

Juin 1997 11 0280 0079 078 11 0175 0031 049

Septembre 1997 12 0237 0056 066 11 0203 0041 057

Deacutecembre 1997 11 0127 0016 036 12 0156 0024 044

Mars 1998 12 0285 0081 080 13 0245 0060 069

Juin 1998 12 0182 0033 051 12 0263 0069 074

Septembre 1998 11 0264 0070 074 12 0327 0107 091









1 DEacuteFINITION





3 REacuteACTIFS




Eau qsp 1 000 ml










Eau qsp 1 000 ml

4 APPAREILLAGE







511 Cas des vins













532 Dosage



61 Mode de calcul

611 Cas des vins


A = 10 n








A = (500 times n)P




r = 09 mel






R = 36 mel



R = 51 mel




1 DEacuteFINITION







Remarque


3 REacuteACTIFS










4 APPAREILLAGE



2) dun barboteur

















53 Titrage





61 Mode de calcul






r = 07 mel



R = 13 mel





71 Principe




72 Reacuteactifs

























2 REacuteACTIFS













3 APPAREILLAGE













Teacutemoin Dosage







Ajouter









61 Mode de calcul









On obtient

C = 479 times ΔA





















21 Reacuteactifs





22 Appareillage





231 Distillation




233 Dosage







241 Mode de calcul


100 times C



31 Reacuteactifs




32 Appareillage
















333 Chromatographie





341 Mode de calcul










1 PRINCIPE


2 APPAREILS


22 Eacutelectrodes




3 REacuteACTIFS



pH

357 agrave 20 degC

356 agrave 25 degC

355 agrave 30 degC



pH

3999 agrave 15 degC

4003 agrave 20 degC

4008 agrave 25 degC

4015 agrave 30 degC





Eau qsp 1 l


pH

690 agrave 15 degC

688 agrave 20 degC

686 agrave 25 degC

685 agrave 30 degC

















44 Mesure








1 INTRODUCTION






3 PRINCIPE




41 Reacuteactifs






















Remarque







5 APPAREILLAGE


51 Pompe HLPC



6 ECHANTILLONNAGE



7 MODE OPERATOIRE







Deacutebit 1 mlmin








Figure 1



8 CALCULS










Acide L-ascorbique

s r = 0011 x + 031

s R = 0064 x + 139



s r = 0014 x + 031

s R = 0079 x + 129


Exemple


s R = 52 mgL




102 Justesse













211 Appareillage


2112 pH megravetre

212 Reacuteactifs



















( 1 ) 10 5 pascal (Pa) = 1 bar


221 Appareillage


2212 pH megravetre

222 Reacuteactifs
























avec







(pm)




1 PRINCIPE


2 APPAREILLAGE

















3 MODE OPERATOIRE









Tableau 1


degC

0 185

1 180

2 174

3 168

4 164

5 159

6 154

7 150

8 145

9 140

10 136

11 132

12 128

degC

13 124

14 120

15 116

16 113

17 109

18 106

19 103

20 100

21 097

22 095

23 093

24 091

25 088










1 INTRODUCTION




3 DEacuteFINITION


4 PRINCIPE


5 REacuteACTIFS






52 Eacuteluants

A CH 3 CN 1 TFA 02 H 2 O= 988

B CH 3 CN 70 TFA 02 H 2 O= 298



6 MATEacuteRIEL

















0 100 0

isocratique

3 100 0

lineacuteaire

10 65 35

isocratique

15 65 35

lineacuteaire

27 405 595

lineacuteaire

29 0 100

isocratique

34 0 100

lineacuteaire

36 100 0

isocratique

40 100 0


9 CALCUL





Pente de la droite






UV 5-250 3786 09993 186 620 467 554 062 193

FLD 1-250 52037 09990 018 059 261 237 068 230














UV 280 nm 50 131 631 623 386 99

FD 50 131 631 645 536 102

UV 280 nm 5 144 194 179 149 921

FD 5 144 194 190 161 977











21 Reacuteactifs













231 Calculs


1867 times m
















21 Reacuteactifs




22 Appareillage








232 Eacutetalonnage



233 Dosage



241 Mode de calcul



C times F






2 APPAREILS





3 REacuteACTIFS


















Remarques






1 DEacuteFINITIONS

















221 Appareillage


Figure 1





2212 Microburette

222 Reacuteactifs
















22321 Calcul














22421 Calcul




64 times n


16 times n



(1600 times n)(P)









liste et description des méthodes d'analyses visées à l

Documents