This article was downloaded by: [195.23.41.50]On: 27 March 2014, At: 10:24Publisher: Taylor & FrancisInforma Ltd Registered in England and Wales Registered Number: 1072954 Registeredoffice: Mortimer House, 37-41 Mortimer Street, London W1T 3JH, UK

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Les glycosides flavoniquesmarqueurs de cultivars algériens dupalmier—dattier Phoenix dactyliferaL.Saïda Ouafi a & Nicole Bounaga aa Laboratoire de recherches sur les zones arides, Facultéde biologie , Université scientifique et technique HouariBoumediene (USTHB) , BP 44, Alger , Algérie E-mail:Published online: 26 Apr 2013.

To cite this article: Saïda Ouafi & Nicole Bounaga (2008) Les glycosides flavoniques marqueursde cultivars algériens du palmier—dattier Phoenix dactylifera L., Acta Botanica Gallica, 155:2,307-315, DOI: 10.1080/12538078.2008.10516111

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Acta Bot. Gallica, 2008, 155 (2), 307-315.

Les glycosides flavoniques marqueurs de cultivars algériens dupalmier-dattier Phoenix dactylifera L.

par Saïda Ouafi et Nicole Bounaga

Laboratoire de recherches sur les zones arides, Faculté de biologie, Université scientifique et

technique Houari Boumediene (USTHB), BP 44, Alger, Algérie ; saida_ouafi@yahoo.fr

Résumé.- Pour contribuer à une meilleure connaissance infraspécifique dePhoenix dactylifera L., appel a été fait aux marqueurs biochimiques constituéspar les glycosides flavoniques de cinquante palmiers appartenant à neuf culti-vars algériens. L’analyse des profils chromatographiques des extraits hydro-alcooliques de pennes de palmes a mis en évidence un total de quinzeglycosides flavoniques natifs dérivant des cinq aglycones précédemment identi-fiés par nous-mêmes. Dans un second temps, ces molécules ont été utiliséespour une structuration des cultivars, chez lesquels deux groupes ont été distin-gués : dans le premier, les cultivars sont homogènes (Ahartane, Aghamu) alorsque ceux du second groupe (Deglet Nur, Takerbucht) le sont moins ; ils corres-pondent à des cultivars activement cultivés avec sélection phénotypique par lesphéniciculteurs.

Mots clés : palmier-dattier - glycosides flavoniques - marqueurs infraspéci-fiques.

Abstract.- With the objective of a better infraspecific knowledge of Phoenix

dactylifera L., flavonic glycosides considered as infraspecific markers were ana-lysed on fifty individuals belonging to nine Algerian cultivars. By chromatographicanalysis (HPLC) of the hydro-alcoolic extracts from the palms, fifteen genuineflavonic glycosides were observed, corresponding to the five aglycones we havepreviously identified. In the second time, these glycosides permitted to distingui-sh two sets of cultivated date palm: in the first, cultivars are well homogenous(Ahartane, Aghamu), in the second less or not (Deglet Nur, Takerbucht) ; thesecond set corresponds to cultivars submitted to active cultivation with phenoty-pical selection by date palm farmers.

Key words : date palm - flavonic glycosides - infraspecific markers.

arrivé le 1 juillet 2007, accepté le 13 novembre 2007

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I- INTRODUCTION

En raison de son utilité alimentaire et de son importance socio-économique, le palmier-dattier Phoenix dactylifera L. reste par excellence « l’arbre » fruitier le plus apprécié dansles régions pré-sahariennes. À partir de caractères du fruit et de sa graine, la descriptiond’un certain nombre de « formes » infraspécifiques a conduit à la reconnaissance de culti-vars, démarche empirique qui peut être considérée comme une approche d’évaluationgénétique. Mais dans ce contexte, le phéniciculteur ayant sélectionné, croisé et spécialiséles représentants de cette espèce dioïque, il en est résulté une diversité phénotypique quirend cette connaissance problématique, d’autant que certains caractères ne sont pas stables,dépendant notamment du stade phénologique, voire des conditions mésologiques et cultu-rales.

La reconnaissance de marqueurs biochimiques pourrait permettre de qualifier et d’iden-tifier plus sûrement les palmiers, indépendamment de l’âge et de la saison. Des essaisd’ordre macromoléculaire ont été réalisés sur divers organes de la plante, tels que lesgraines (Sekhar & De Mason, 1988), les fruits (Al-Helal, 1988) et les pennes des palmes(Baaziz & Saidi, 1988). Toutefois, aucune étude n’a mis en évidence un marqueur suscep-tible d’être utilisé avec certitude et/ou commodité comme critère d’identification des cul-tivars ou de sélection de plantes issues de croisements dirigés. Nos étudeschimiotaxinomiques ayant montré que les aglycones flavoniques (deux flavones et troisflavonols) obtenus par hydrolyse acide des palmes sont des marqueurs de l’espèce (Ouafiet al., 1988), l’analyse des extraits hydro-alcooliques a suggéré l’utilité des glycosides fla-voniques correspondants (O- et C-glycosides) au niveau infraspécifique (Ouafi et al.,1992), ceci d’autant que la biosynthèse flavonique est reconnue comme étant sous étroitedépendance génétique.

II. MATÉRIEL ET MÉTHODES

A Matériel végétalL’étude a porté sur cinquante individus (plants femelles adultes) de palmier-dattier

représentant neuf cultivars provenant de la station expérimentale de l’INRA à Adrar(27° 51’ N / 00°19’ W), Algérie. Les pennes (palmes externes de la couronne) collectées(au mois d’avril) et nettoyées ont été séchées à l’air libre à l’abri de la lumière vive et dela forte chaleur. Ce matériel végétal a été finement broyé à sec en vue des analyses bio-chimiques.

B. Obtention des extraitsDeux grammes de poudre végétale ont été soumis pendant vingt minutes à extraction

hydro-éthanolique (H2O/ EtOH : 7/3) à ébullition en présence de billes de verre dans unballon sous reflux réfrigéré. L’extrait filtré a été évaporé à sec sous vide puis repris parl’eau bouillante. De cette solution les hétérosides flavoniques ont été extraits par affronte-ment avec du n-butanol. Le résidu sec de ces extraits a été repris par du méthanol pour lesanalyses chromatographiques.

C. Analyse chromatographiqueLes analyses par chromatographie liquide haute pression (CLHP) ont été réalisées sur

un appareil Kontron équipé d’une colonne nucléosil-C18 (5 μm,taille des particules ;

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250 x 4,6 mm). Le système d’élution est un gradient d’acétonitrile/eau/acide acétique (sol-vant A : H2O-AcOH : 98 : 2 ; solvant B : ACN-H2O-AcOH 78 : 20 : 2), le débit est de0,8 ml/min. La détection spectrophotométrique a été réalisée à la longueur d’onde d’ab-sorption 328 nm correspondant aux glycosides de flavones. Ce système a permis d’indivi-dualiser au total quinze pics, chaque information chromatographique correspondant soit àune molécule (dans la plupart des cas), soit à la superposition de molécules de forte affi-nité structurale (voir ci-dessous composés L et L’).

D. Identification des glycosides flavoniquesLes glycosides flavoniques sont identifiés en CLHP par leur temps de rétention et leur

spectre d’absorption UV couplé, avec comparaison à des témoins. Confirmation est obte-nue par chromatographie sur couche mince (CCM) des fractions éluées, avec détermina-tion des Rf et de leur fluorescence UV, en présence ou non de révélateurs colorés despolyphénols. L’identification est complétée par hydrolyse acide (HCl 2 N, 100 °C pendant40 min) qui permet d’accéder d’une part aux aglycones flavoniques (spectres UV), d’autrepart aux sucres (CCM) mutuellement engagés dans les liaisons O-glycosidiques.

E. Dosage des glycosides flavoniquesChaque flavonoïde est quantifié par la hauteur de son pic en CLHP ; ces données de

base sont exprimées en pourcentage, en divisant la hauteur de chaque pic par la somme deshauteurs de l’ensemble des pics de chaque échantillon. Cette pondération fait ainsi abs-traction des teneurs absolues dans l’échantillon (qui peuvent connaître un biais phénoty-pique) et des possibles erreurs expérimentales liées à l’échantillonnage et aux extractions.De la sorte, les teneurs relatives obtenues optimisent la comparaison des divers échan-tillons.

III. RÉSULTATS ET DISCUSSION

Avec pas moins de quinze substances détectées et identifiées, nos analyses révèlent ladiversité de la classe des hétérosides flavoniques foliaires du palmier-dattier. De plus, lesneuf cultivars de la collection de palmier-dattier de l’INRA de Adrar se distinguent entreeux par leurs profils chromatographiques, tout en présentant généralement une dispersionintra-cultivar révélatrice d’un polymorphisme biochimique faible à notable.

A. Analyse qualitativeLes quinze pics chromatographiques (Fig. 1) correspondent à au moins autant de molé-

cules fondées sur deux aglycones de flavonols (la quercétine et son dérivé O-méthylé en3’, l’isorhamnétine) et sur trois aglycones de flavones (la lutéoline, homologue de la quer-cétine, et ses deux dérivés respectivement 3’ et 3’, 5’ O-méthylés, le chrysoériol et la tri-cine) ; les 7-O-glycosides hydrolysables de flavones peuvent être accompagnés deC-glycosides en position 6 et 8, non hydrolysables.

De façon plus détaillée, il s’agit de l’hypéroside (= galactosyl-3 quercétine, J) et de larutine (= rhamno-glucosyl-3 quercétine, L), de la glucosyl-3 et de la galactosyl-3 iso-rhamnétine (L’ et K), de la glucosyl-7 lutéoline et de la rhamno-glucosyl-7 lutéoline (M etN), de l’orientine (= C- glucosyl-8 lutéoline, D) et de son isomère l’homo-orientine (= C-glucosyl-6 lutéoline, H), glucosyl-7 et de la rhamno-glucosyl-7 tricine (R et P), auxquelss’ajoutent trois glycosides de l’homo-orientine et du chrysoériol : un O-pentoside et un O-

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hexoside de la première (S et T), unC-hexoside du second (V).

Huit de ces molécules (D, H, J,L, M, N, Q, R) ont un caractèrequalifiable de spécifique, puisqueprésentes dans tous les cultivars enteneur généralement élevée. Afind’éliminer leur « bruit de fond »,nous avons restreint notreapproche qualitative aux septautres flavonoïdes (mineurs : K, L’,O, P, S, T, V), susceptibles d’origi-nalité au niveau des cultivars(Tableau II). Cette premièredémarche laisse apparaître troissous-ensembles, avec une premièredichotomie basée sur la présencede flavonols (notamment le mono-side d’isorhamnétine K), uneseconde sur l’existenced’une flavone complexe (lecomposé S). On notera lecaractère extrême de cesdeux structures moléculaireset la pauvreté flavonique descultivars Ahartane etAghamu, opposée notam-ment à la richesse deTazarzait.

B. Analyses quantitativesUn degré de résolution

plus fin de la constitutiongénomique des cultivars estobtenu par la prise en comp-te quantitative (teneurs rela-tives) de l’ensemble desquinze flavonoïdes dans la totalité des cinquante palmiers étudiés (Tableau III). Un pre-mier traitement consiste en une analyse en composantes principales (ACP) de la matricede données 50 lignes x 13 colonnes, les flavonoïdes D et L’ ayant été éliminés, le premier– l’orientine – pour des teneurs du même ordre de grandeur dans tous les cultivars, lesecond – la glucosyl-3 isorhamnétine – pour sa présence chez le seul cultivar Deglet Nur.Il est à noter que ce cultivar, le plus réputé pour ses propriétés organoleptiques et nutri-tionnelles, et par là fréquemment cultivé, est également le plus sensible au « bayoud »,maladie cryptogamique des palmes due à une infection racinaire par le micromycèteFusarium oxysporum forme albedinis. Néanmoins, si la possession de ce flavonoïde peutêtre ainsi considérée comme un marqueur de ce cultivar, celui-ci n’est pas pour autanthomogène pour les autres molécules présentes dans les cinq échantillons analysés.

Fig. 1.- Profil flavonique du cultivar Degla Beida.Fig. 1.- Flavonic profile of cultivar Degla Beida.

Tableau I.- Structure des 15 glycosides flavoniques identi-fiés chez le palmier-dattier.

Table I.- Structure of the 15 flavonic glycosides identified inthe date palm.

D : orientine (lutéolin - 8 c-glucoside) J : quercétin - 3 galactoside c - glucosyl - 8 lutéoline galactosyl - 3 quercétine

L’ : isohamnétin - 3 glucoside M : lutéolin - 7 glucoside glucosyl - 3 isorhamnetine glucosyl - 7 lutéoline

O : chrysoeriol -7 rhamnoglucoside Q : chrysoeriol-7 glucoside7-0-rhamnoglucosyl - 7 chrysoeriol glucosyl - 7 chrysoeriol

S : homo-orientin - x pentoside V : chrysoeriol - x”-c-glucoside pentosyl - x homo-orientine c-glucosyl - x” chrysoeriol

H : homo-orientine (lutéolin - 6 c-glucoside) K : isorhamnétin - 3 galactoside c - glucosyl -6 lutéoline galactosyl - 3 isorhamnétine

L : quercetine - 3 rhamnoglucoside (rutine) N : lutéolin - 7 rhamnoglucosiderhamnoglucosyl - 3 quercétine (rutin) rhamnoglucosyl - 7 lutéoline

P : tricin - 7 rhamnoglucoside R : tricin -7 glucoside rhamnoglucosyl - 7 tricine glucosyl - 7 tricine

T : homo-orientin - x’’ hexosidehexosyl - x homo-orientine

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Les trois premiers axes de l’ACPextraient plus de la moitié (51%) del’information matricielle (TableauIV) et trois molécules différentesparticipent à la constitution de cha-cun d’eux. Le premier axe est déter-miné (positivement) par lesglycosides de flavones S, P et R(ordonnée 0,91 / 0,79 / 0,71), avecl'individu 32 (cultivar Ahartane)opposé à l'individu 37 (Aghamu) ;les flavonols (J, K, L) sont neutressur cet axe. Le deuxième axe estdéterminé par les flavonoïdes J, Net V (ordonnées respectives + 0,85 /+ 0,74 / - 0,77), soit deux O-glyco-sides de la quercétine et de la lutéo-line (sa flavone homologue),opposés à un C-glycoside du chry-soériol, dérivé méthylé de la mêmelutéoline. Les individus extrêmesportent les numéros 42 (Tazarzait) et 17(Deglet Nur). Le plan F1-F2 indique uneorganisation tripolaire des molécules, depart et d'autre de l'ordonnée + 0,35 du pre-mier axe (Fig. 2). Le troisième axe estdéterminé par les flavones M et T oppo-sées à Q (ordonnées respectives + 0,88 / +0,87 / - 0,77), soit deux O-glycosides desdeux isomères orientine et homo-orienti-ne, opposés à un O-monoside du chrysoé-riol.

Dans l'espace des trois premiers axes(Fig. 3), on notera la proximité des culti-vars Ahartane et Aghamu, par ailleursdotés d'une faible dispersion et déjà rap-prochés par les profils qualitatifs restreints; Tinaceur n'est pas très éloigné, du moins sur les deux premiers axes. Tilemsu et DeglaBeida sont proches dans l'espace flavonique, bien que leurs profils qualitatifs les aient éloi-gnés par l'absence de flavonols. Takerbucht et Ghars sont en position centrale sur les deuxpremiers axes, mais s'opposent sur le troisième ; enfin, déjà isolés dans le plan F1-F2,Deglet Nur et Tazarzait sont bien distincts sur F3.

Fondés sur les quatre dernières molécules, moins actives, les trois axes factoriels sui-vants extraient respectivement 10, 9 et 8% de la variance totale : le quatrième axe est déter-miné par les flavonoïdes L et O (rhamno-glucosides de flavonol et de flavone), lecinquième par K (O-monosyl-flavonol), le sixième par H (C-monosyl-flavone). Au total,plus des trois quarts (77%) de la variance matricielle sont ainsi exploités.

Tableau II.- Profil flavonique restreint des 9 cultivarsdu palmier-dattier.

Table II.- Restricted profile flavonic of the 9 cultivarsof date palm.

Flavonols F L A V O N E S

Heterosides K L’ P Q V S T(Aglycone) Irh Irh Tri Chr Chr Lut LutCultivars

Sous-ensemble A (presence de K=flavonol, presence de S+T = lutéoline)Degla Beida + - + + + + +Ghars + - + - + + +Tazarzait + - + + + + +Deglet Nur + + - - + + +Tinaceur + - + - - + +

Sous-ensemble B1 (absence de flavonols, presence de S+T = lutéoline)Takerbucht - - - + + + +Tilemsu - - + - + + +

Sous-ensemble B2 (absence de flavonols, absence de S)Ahartane - - - - - - +Aghamu - - - + - - -

Tableau IV.- Coordonnées factorielles (écartstypes moyens) sur les trois premiers axesde l’ACP formés par les flavonoides des 9cultivars étudiés de palmier-dattier.

Table IV.- Factorial coordinates (average andstandard deviations) on the first 3 axes ofthe ACP of the flavonoïdes of the 9 cultivarsstudied date palm.

Cultivar F1 (18,6 %) F2 (17,7 %) F3 (14,4 %)

Degla Beida + 0,37 (0,80) + 0,11 (0,72) - 0,73 (0,25)Ghars - 0,08 (1,04) - 0,23 (0,78) - 0,49 (0,72)Tazarzait + 0,98 (1,05) - 0,15 (1,33) + 1,53 (1,11)Deglet Nur - 0,25 (0,25) - 1,34 (1,68) - 0,59 (0,46)Tinaceur - 0,93 (0,02) - 0,10 (0,21) + 0,84 (0,03)Takerbucht - 0,04 (0,64) + 0,10 (0,79) + 1,00 (1,28)Tilemsu + 0,38 (1,20) + 0,24 (0,90) - 0,43 (0,61)Ahartane - 0,89 (0,24) + 1,06 (0,34) + 0,27 (0,42)Aghamu - 0,84 (0,63) + 0,16 (0,57) + 0,36 (0,37)

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Tableau III.- Matrice (en %) 50 individus x 13 variables flavoniques (de Takerbucht àTinaceur).

Table III.- Matrix (in %) 50 individuals x 13 flavonoïdes (from Takerbucht to Tinaceur).

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13H J K L M N O P Q R S V T

1 1,56 17,10 7,71 8,55 6,02 12,10 5,66 1,80 4,93 1,20 1,20 0,60 1,80 TK2 1,46 17,27 1,66 11,29 2,12 17,00 10,96 1,79 2,39 1,19 0,86 0,59 0,86 TK3 1,01 19,84 2,70 17,48 2,53 19,80 2,53 2,28 2,78 1,35 0,92 1,01 1,01 TK4 1,25 27,07 2,14 7,09 1,76 28,30 3,02 1,76 1,51 0,75 0,75 0,62 1,38 TK5 1,25 27,07 2,14 7,09 1,76 28,30 3,02 1,76 1,51 0,75 0,75 0,62 1,38 TK6 5,66 18,89 2,79 14,34 2,37 18,60 9,09 0,20 2,09 1,04 0,76 0,83 3,14 TK7 4,08 22,29 3,06 13,80 1,53 17,60 7,25 2,76 1,22 0,71 1,00 0,71 3,16 TK8 4,69 22,76 3,12 18,76 1,17 22,60 19,54 2,54 1,85 1,07 0,78 1,27 1,27 DB9 4,60 23,60 3,15 18,71 1,28 22,70 19,70 2,46 1,77 0,98 0,68 1,28 1,28 DB10 0,96 28,08 3,14 10,29 0,96 26,80 12,70 1,93 0,72 1,21 0,84 0,60 2,54 DB11 0,64 26,57 3,39 11,04 1,02 21,10 12,42 3,40 1,10 1,10 0,55 1,10 1,19 DB12 0,48 21,19 4,39 12,60 1,17 16,80 7,81 1,46 0,58 0,48 0,39 0,58 1,26 DB13 0,86 10,68 6,08 13,66 0,49 21,10 15,52 1,61 1,36 0,49 1,24 0,86 0,74 DB14 1,04 14,90 8,04 15,27 0,81 12,00 15,27 1,11 2,23 0,81 0,74 0,81 1,04 DB15 4,32 16,33 3,63 11,40 0,60 18,00 15,12 2,33 1,55 0,95 0,77 1,21 1,29 DB16 0,81 11,74 8,97 17,94 0,81 17,50 15,66 1,79 1,30 0,65 1,14 0,65 1,14 DB17 2,04 9,36 4,42 12,77 1,36 13,60 18,73 1,19 1,70 1,02 5,74 0,51 1,70 DN18 0,86 11,59 3,47 12,75 0,57 16,50 11,59 1,44 0,57 0,86 1,73 0,86 1,44 DN19 1,17 13,49 6,45 19,60 0,59 11,10 15,49 1,17 1,29 0,59 1,17 0,70 1,29 DN20 1,04 14,90 8,04 15,27 0,81 12,00 15,27 1,11 2,23 0,81 0,74 0,81 1,04 DN21 1,08 23,26 2,67 12,57 0,69 22,70 13,86 1,18 1,48 0,49 1,08 1,08 2,07 DN22 0,87 27,77 3,21 12,13 0,87 23,00 13,15 0,87 0,43 0,29 1,16 0,87 2,48 GH23 1,07 23,19 1,51 16,14 1,07 23,30 12,13 1,33 1,42 0,53 1,15 0,89 2,40 GH24 0,89 19,74 2,08 15,49 1,49 19,80 19,82 1,49 2,30 0,59 0,89 0,74 1,34 GH25 1,13 17,98 1,33 14,65 2,46 17,90 17,85 1,79 3,99 1,06 1,19 1,06 1,66 GH26 0,60 19,51 3,35 18,29 0,91 17,00 18,59 4,26 1,21 1,21 0,91 0,60 2,13 GH27 1,23 20,24 2,59 10,39 1,09 25,10 12,31 1,64 0,68 0,41 0,54 0,82 0,01 GH28 1,28 17,75 1,77 20,01 0,98 21,00 8,38 1,97 1,57 0,49 1,18 0,59 1,00 GH29 1,97 18,53 2,12 11,98 1,41 18,20 14,03 2,36 2,91 1,02 2,05 0,47 0,01 TL30 0,99 20,93 2,99 12,12 1,16 29,00 14,45 3,15 0,83 0,83 0,49 0,99 1,99 TL31 1,07 23,19 3,23 10,78 1,29 24,80 14,23 2,58 0,86 1,29 0,43 1,07 1,51 TL32 1,14 19,40 3,19 10,50 0,91 26,70 11,87 5,02 1,82 1,59 1,14 1,14 2,05 TL33 1,86 23,88 3,73 8,76 1,86 25,50 12,50 1,86 1,49 0,93 1,11 0,74 2,61 TL34 1,21 23,65 5,21 11,82 1,39 26,00 1,21 2,26 0,86 0,86 0,34 0,86 1,73 AG35 1,20 20,28 3,50 17,54 1,31 22,90 4,16 0,76 3,28 0,54 0,65 0,54 0,76 AG36 1,18 20,96 3,66 20,59 1,09 22,00 3,11 0,91 1,64 0,54 0,91 0,36 0,73 AG37 1,31 19,26 4,05 22,81 1,21 20,70 3,54 1,01 1,72 0,50 1,01 0,30 0,70 AG38 1,38 18,83 2,77 17,59 1,38 23,10 3,18 1,38 2,49 0,69 1,66 0,55 0,69 AG39 1,41 21,79 2,56 16,28 1,28 21,70 3,58 1,28 2,17 0,64 1,53 0,51 0,76 AG40 0,97 23,77 2,79 10,20 3,07 30,00 11,18 0,97 1,53 0,55 0,41 0,41 1,11 AH41 1,47 23,72 2,94 9,91 2,94 29,00 10,72 1,20 1,74 0,40 0,80 1,07 1,07 AH42 1,11 28,66 4,77 9,55 3,18 25,00 8,43 1,11 1,75 0,63 0,47 0,47 0,95 AH43 1,49 26,07 4,98 9,30 2,49 25,00 8,97 1,16 1,82 0,66 0,49 0,49 0,99 AH44 0,97 26,80 4,44 7,91 0,97 25,50 8,19 1,11 1,11 0,41 1,66 0,41 1,25 AH45 1,51 31,86 6,98 21,24 5,15 22,30 4,55 1,82 3,79 1,21 0,91 1,66 1,82 TZ46 0,91 19,73 3,81 15,24 2,24 13,40 2,24 3,36 3,81 0,91 2,24 1,12 1,12 TZ47 1,19 22,18 2,73 11,94 1,70 24,40 1,87 1,36 3,41 0,85 1,02 0,51 1,19 TZ48 1,10 15,89 1,98 12,80 1,32 22,00 1,98 3,75 1,76 0,88 3,09 1,54 0,88 TZ49 1,91 17,02 1,53 8,88 0,76 28,70 9,96 1,34 0,95 0,57 0,95 0,38 0,00 TN50 1,30 16,14 1,46 10,46 0,83 22,70 9,96 1,34 0,95 0,57 0,95 0,38 0,00 TN

AG = Aghamu, AH = Ahartane, DB = Degla Beida, DN = Deglet Nur, GH = Ghars, TL = Tilemsu, TK = Takerbucht, TN =

Tinaceur, TZ = Tazarzait

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À cette analyse générale a succédé une classification ascendante hiérarchique (CAH)sur la base des distances euclidiennes, prenant en compte l'ensemble des marqueurs flavo-niques ; les coupures sont déterminées par la méthode d'agrégation de Ward (Fig. 4). Deuxcultivars se caractérisent par la proximité de leurs individus ; il s'agit encore de Ahartaneet de Aghamu. Trois des quatre individus de Tazarzait sont groupés et les deux représen-tants de Tinaceur sont connexes (ce faible échantillonnage limite toutefois l'intérêt de laremarque). Quatre des cinq individus du cultivar Tilemsu encadrent le bloc Ahartane, cul-tivars déjà rapprochés par l'absence de flavonols (Tableau II). Inversement, les neuf repré-sentants de Degla Beida sont éclatés en deux sous-groupes éloignés, comptant cinq et troisindividus, tandis que Ghars regroupe trois de ses cinq représentants. Le cultivar Deglet Nur(doté d'un fort écart-type sur le deuxième axe de l'ACP) ne présente que deux individusconnexes sur cinq (cf. supra). La dispersion maximale est observée avec le cultivar

Fig. 2.- ACP condui-tesur la matrice50 x 13, positiondes molécules.

Fig. 2.- PCA on the50 x 13 matrix,molecules posi-tion.

Fig. 3.- ACP conduite sur lamatrice 50 x 13, position descultivars.

Fig. 3.- PCA on the 50 x 13matrix, cultivars position.

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Takerbucht, dont les sept représentants sont dispersés en quatre sous-ensembles de deux etun individus. L'ACP avait déjà dénoncé les particularités de ces deux cultivars, avec desmoyennes et écarts-types élevés sur F2 pour Deglet Nur, sur F3 pour Takerbucht.

Notre système de classification met donc en évidence des cultivars à faible variabilitéflavonique (Aghamu, Ahartane, Tinaceur, Tazarzait), plus élevée chez Degla Beida, Gharset Deglet Nur ; l'hérérogénéité est plus importante encore dans le groupe Takerbucht, dontil est ainsi permis de suspecter l'homogénéité génétique. Ce caractère du cultivarTakerbucht a d'ailleurs été déjà signalé sur la base de critères enzymatiques (Benaceur etal., 1991).

IV. CONCLUSIONS

La bonne homogénéité flavonique de cultivars comme Ahartane et Aghamu et, dans unemoindre mesure, de Tazarzait justifie en un sens le bien-fondé de notre méthode analy-tique. Mais il est tout aussi net que d'autres cultivars, comme Takerbucht et Degla Beida,sont flavoniquement hétérogènes, ce qui appelle quelques réflexions plus générales.Signalons aussi la difficulté inhérente à une typification génétique rigoureuse du palmier-dattier, puisque la fécondation des plants femelles est effectuée par pollinisation à partir depieds mâles pour lesquels on ne dispose même pas des critères morphologiques apportéspar le fruit.

Dans les palmeraies algériennes, il existe au moins cinq cultivars considérés commerelativement homogènes d'un point de vue morphologique (phénotypique) : TakerbuchtSefra, T.Beida, T.Hamra, T.Kahla, Akerbucht . Ce dernier cultivar, apprécié pour sa résis-tance au bayoud, est activement multiplié dans les palmeraies contaminées par cette fusa-riose. Les cultivateurs exercent donc une forte pression de sélection sur les palmiers issusde telles graines, ce qui peut conduire à la sélection d'entités génétiquement distinctesmême si elles présentent les caractères phénotypiques de Takerbucht. Le fait a été déjàrelevé pour d'autres espèces végétales, ce qui a fait dire à Pernès et Lourd (1984) :

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Fig. 4.- CAH sur la base des distances euclidiennes sur la matrice 50 x 13.Fig. 4.- HAC on the base of euclidian distances on the 50 x 13 matrix.

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« L'homme a souvent sélectionné et spécialisé les plantes, créant (ainsi) une diversité phé-notypique qui rend cette reconnaissance problématique ». Les palmiers ici analysés pour-raient donc appartenir à des clones distincts, expliquant l'hétérogénéité flavoniqueobservée. Ainsi la variabilité biochimique intra-cultivar se manifeste-t-elle chez les deuxentités présentant un intérêt agronomique : Deglet Nur, pour la qualité organoleptique desa datte (cf. III.B), Takerbucht pour sa résistance au bayoud.

En fin de compte, l'analyse chromatographique des flavonoïdes contenus dans lesextraits hydro-alcooliques de palmiers-dattiers présente un double intérêt : si elle confortela définition traditonnelle de plusieurs cultivars du palmier-dattier, elle peut égalementexpliquer la difficulté que les phéniciculteurs ont souvent à reconnaître la complexité géné-tique de cultivars d'intérêt économique, complexité que leurs méthodes et leurs pratiquesont sans doute contribué à accroître sensiblement.

Remerciements - Monsieur le professeur Ph. Lebreton nous a accordé son assistance scientifique et technique,particulièrement lors de nos stages de formation ou de travail dans le Laboratoire de biochimie végétale del'Université Lyon-1 (France).

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