informe final - conicyt

Fecha: 14/3/2008

INFORME FINAL

CONICYT - RECIBIDO OFICINA DE PARTES

[13 MAR 2ÚG]

HORA:

GOBIERNO DE CHILE

NOMBRE:

CONICYT FONDECYT PROYECTO FONDECYT REGULAR

1050761 3 años 2007

NÚMERO PROYECTO DURACIÓN AÑO DE EJECUCIÓN

LUIS JQUÍN NUNEZ VERGARA

INVESTIGADOR(A) RESPONSABLE RUT

OLIVOS 1007

DIRECCION FONO

1nunezv(:ciq.uchiIe.cI 9782812

E-mail

PERÍODO QUE INFORMA 15 / 3 / 2007 14 / 3 / 2008 DESDE HASTA

CONTENIDO (MARQUE CON UNA X 11. CASILLERO QUE CORRESPONDA)

INCLUYE NO INCLUYE

Formulario de Informe FinalX

x Publicaciones

Resumen de Tesis Título/GradoX

X Información acerca de inventos y patentes

Otros (especificar)

Informe Incentivo Coop. Internacional (Si corresponde)X

Firma Coinvestigadores(as) Firma Investigador(a) Responsable

4 1

CONTENIDO DEL INFORME FINAL

I. CUMPLIMIENTO DE LOS OBJETIVOS PLANTEADOS EN EL PROYECTO. Marque con una X el casillero correspondiente.

Cumplimiento Fundamentar el cumplimiento Objetivos parcial o incumplimiento Total Parcial No

1 . Diseño de moléculas derivadas de 1 ,4-DHPs conteniendo un substituyente fenilo mono, bi o trihidroxisubstituido en la posición-4 de la DLIP. Se X sintetizará y caracterizará por RMN, IR-FE, análisis elemental, la serie 2,6-DIMETIL- 3.5-DIETOXICTARBONII. -4- [(MONO-, Dl-, TRI-HIDROXI)-FENIL)]-1 ,4-DIIIIDROPIRIDINAS

2 Caracterización de la oxidación electroquímica en medio prótico, mixto y aprótico de la serie de 1,4-DllPs propuesta, a través de técnicas electroquímicas (voltametria de pulso diferencial, voltametría cíclica, voltametría lineal con electrodo rotatorio, electrolisis a potencial controlado), espectroscópicas (UV-Vis, EPR) y cromatográficas (l-IPLC, GC-MS).

3 Caracterización sistemática de la reactividad de la serie con radicales libres (peroxilo, alquilo, anión superóxido), a través de la determinación de sus x reactividades relativas en Los medios descritos previamente. Se utilizará como molécula modelo de comparación de la reactividad. el NADH 4 Determinación de tos mecanismos de reacción entre las 1 ,4-Dl-lPs sintetizadas y los radicales propuestos en el estudio, en las condiciones experimentales x propuestas

Otro(s) aspecto(s) que Ud. considere importante(s) en la evaluación del cumplimiento de los objetivos planteados en la propuesta original o en las modificaciones autorizadas por los Consejos.

Creemos que es importante destacar que el contenido de la Tesis que está realizando el alumno David Galvis en el marco del Doctorado en Farmacología, se basa en estudios farmacológicos con los compuestos sintetizados en este Proyecto. Además, la base de sustentación de su hipótesis está soportada por los resultados obtenidos en este Proyecto, especialmente aquellos estudios sobre la reactividad con radicales libres de los compuestos sintetizados. Es interesante dejar establecido este aspecto, ya que estudios farmacológicos con estos compuestos no fueron considerados previamente y la posibilidad de realizarlos, surge de los resultados previos generados en el Proyecto que se informa. El compromiso con esta Tesis queda de manifiesto, ya que el Investigador Responsable de este Proyecto es uno de los Directores de esta Tesis, considerando además que también es Profesor Titular de Farmacología.

2. Del mismo modo, la Tesis de Doctorado del alumno Ricardo Salazar que está realizando dentro del marco del Doctorado en Química que trata sobre la síntesis de nuevas 1,4-dihidropiridinas 4-sustituidas contempla la síntesis y la caracterización electroquímica de derivados sintetizados que están formando parte de este Proyecto (4-vainillín-1,4-DHP y 4-isovainillín-DHP). De hecho, el alumno Ricardo Salazar (becario de CONACYT) ha sido además un importante colaborador del Proyecto y por ello aparece como autor en uno de los trabajos publicados.

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II. RESULTADOS OBTENIDOS Describa brevemente los resultados obtenidos en el proyecto en un máximo de cinco páginas, tamaño carta, espacio seguido. Para cada uno de los objetivos específicos, describa o resuma los resultados. Relacione las publicaciones y/o manuscritos enviados a publicación con los objetivos específicos. Incluya en anexos, la información de apoyo que estime pertinente y necesaria para la evaluación.

Este informe final se dividirá en dos partes para su mejor lectura, la primera parte resume los resultados en general, las publicaciones generadas y los relaciona con los objetivos planteados originalmente en el Proyecto (1) y a continuación se presentan los resultados generados en el año 2007 (2). (1) A. Síntesis de la serie de 2,6-dimetil-3,5-dietoxicarbonil-1,4-dihidropiridinas-4-substituidas (C-4-[mono-, dihidroxi-, trihidroxifenil]). Esta fue publicada en el Synthetic Communication (P.A. NAVARRETE-ENCINA, JA. SQUELLA, ). CARBA)O,B. CONDE, C. CAMARGO, LUIS 3. NUNEZ-VERGARA. SYNTHESIS OF C-3,4,5-SUBSTITUTED-2,6-DIMETHYL-1,4-DIHYDROPYRIDINES. 37, N° 12 (2007) 2051-2060). La síntesis de algunos de los compuestos no ofrecieron grandes dificultades experimentales, sin embargo en otros casos tuvimos dificultades, ya que tal como se describe en el trabajo sobre la identificación de los productos de la síntesis (LUIS 3. NUNEZ-VERGARA, P.A. NAVARRETE-ENCINA, SERGIO SALAS, B. CONDE, P. CARBAJO, LA. SQUELLA, C. CAMARGO. ANALYSIS BY GC-MS AND GC-MS/MS OF THE HANTSCH SYNTHESIS PRODUCTS USING HYDROXY- AND METHOXY-AROMATIC ALDEHYDES. 3. of Pharm. Biomed. Anal. 44 (2007) 236-242), al analizar los productos finales de síntesis obtenidos con los distintos tipos de aldehídos y sus patrones de fragmentación, nos encontramos con la sorpresa que, en todos los casos en que se utilizaron 2-hidroxi-benzaldehidos, esto es, el 2,3-,2,4- y 2,5-dihidroxi-benzaldehídos, los productos finales no correspondían a las respectivas 1,4-dihidropiridinas, dihidroxi-fenil 4-substituidas. En contraste, en las condiciones experimentales empleadas, los productos correspondieron a cromeno[3,4-c]piridinas. La explicación a este resultado se puede encontrar en un proceso de ciclación que se origina debido a la interacción entre el grupo OH de la posición-2 del anillo aromático y el grupo etoxicarbonil de la posición-3 del anillo dihidropiridina, seguido por una oxidación del anillo DHP, para dar la correspondiente [3,4-c]cromeno-piridina. Es importante destacar que a partir de la identificación de los productos de síntesis por GC/MS, nos permitió la posterior identificación de los productos de la oxidación electroquímica y la reactividad con los radicales libres. Otro aspecto positivo radica en que se sintetizaron 3 compuestos nuevos que no estaban contemplados dentro de los objetivos originales, estos fueron 4-vainillín-2,6-dimetil-3,5-dietOxicarboflil-1,4-dihidrOpiridina, 4-isovainillín-2,6-dimetil-3,5-dietoxicarbonil-1,4-dihidropiridina y la [3,4-c]cromeno-piridina. Los dos primeros compuestos fueron sintetizados con el objeto de enriquecer la discusión tanto sobre la oxidación electroquímica como la reactividad con los radicales libres, ya que estos hidroxi-metoxifenil aldehídos son reconocidos antioxidantes. Los resultados respaldaron esta suposición, ya que claramente las 1,4-dihidropiridinas substituidas con estos derivados resultaron ser más reactivas que el resto de los compuestos y la oxidación electroquímica de los derivados, permitió una mejor discusión del efecto de substituyente. En el caso de la cromeno-piridina lo consideramos necesario ya que se trata de un derivado que no posee substituyentes en las posiciones 7,8 9 a diferenciaq de las cromeno-piridinas obtenidas que sí poseen un grupo OH en esas posiciones indicadas anteriormente. B. Caracterización de la Oxidación Electroquímica en medio prótico. Considerando la baja solubilidad en medio acuoso, siempre se debió agregar hasta un 30% de etanol al tampón acuoso para poder realizar los estudios. En el caso de las hidroxifenil-1,4-DHP entre pH 1-6 se observó una señal de oxidación, la que correspondió al anillo 1,4-DHP. Sin embargo, a partir de pH 6, se evidenciaron dos señales de oxidación, las que correspondieron a ambos grupos electroactivos. En el caso de los compuestos con dos y tres grupos OH, la oxidación mostró en general dos señales para los derivados con dos grupos OH y tres señales para la galato-1,4-DHP. La señales de oxidación correspondientes, fueron de carácter irreversible y la corriente en general fue controlada por la difusión de la especie electroactiva. Se puede concluir que ambos centros redox presentes en las moléculas influyeron significativamente en los comportamientos individuales de la oxidación electroquímica. Así, la oxidación del anillo DHP ocurrió a valores de potencial más anódicos que el compuesto de referencia (4-fenil-DHP), es decir, la oxidación se "atrasó". En contraste, la oxidación de los grupos OH ocurrió a valores de potencial menos anódicos, es decir, el proceso se "adelantó", esto es, se favoreció la oxidación de estos grupos. Para una mejor asignación de las señales de oxidación también se estudiaron los fenoles, catecoles y galatos empleados en la síntesis de las 1,4-DHP. En cuanto a los mecanismos generales de oxidación se puede concluir que el grupo OH se oxida involucrando 1-electrón y presumiblemente el producto final es un derivado de tipo quinoide. Estos no pudieron ser identificados probablemente debido a procesos de polimerización, situación que está descrita en la literatura para este tipo de grupos electroactivos. En el caso del anilllo 1,4-DHP, su oxidación involucró 2H 4 y 2-electrones. Esto fue respaldado por la determinación del número de electrones por electrolisis a potencial controlado. El producto final de la oxidación fue la piridina, la cual fue identificada por GC/MS y

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espectroscopia U y-Visible (señal a 270-285 nm). Los estudios sobre la oxidación en medio mixto (tampón acuoso/solvente orgánico) siguieron el mismo mecanismo general, pero presentaron dificultad en la separación de las señales. Las cromeno-piridinas sintetizadas también fueron caracterizadas electroquímicamente en este medio y su mecanismo de oxidación fue relativamente sencillo, ya que correspondió a la oxidación del grupo OH de las posiciones 7,8 9-, involucrando 1-electrón. También se estudió la reducción de estos compuestos sobre carbón vítreo. Este proceso resultó bastante complejo, ya que se obtuvieron en algunos casos 4 o más señales, algunas de ellas muy cerca de la descarga del soporte. Hasta ahora podemos concluir que las señales podrían corresponder a la reducción electroquímica del grupo lactónico, la piridina y la cadena lateral (ester) de la posición-3. C. Caracterización de la Oxidación Electroquímica en medio aprótico. En este medio la oxidación mostró la misma tendencia que en medio acuoso, es decir, cambios en los potenciales de oxidación en comparación con los compuestos sin substituir. Las señales fueron de carácter irreversible y la corriente fue controlada por difusión. En este medio, empleamos atrapadores de espín (PBN) y a partir de los espectros por ESR en los casos en que fue posible, se determinaron las constantes hiperfinas de acoplamiento, lo cual reveló la formación de radicales intermediarios del tipo radical dihidropiridilo (centrado en el carbón) durante el proceso de oxidación. Además, a partir de las soluciones electrolizadas se identificó por GC/MS como producto final de la oxidación, el derivado piridina. Por otra parte, en este medio se realizaron estudios tanto electroquímicos como por espectroscopia U y-Visible con el propósito de estudiar el efecto de una base (TBA-OH) sobre la ionización de los grupos electroactivos (p.e. equilibrios fenolato-fenol y R-N-H y RN-). El mecanismo de oxidación en este medio involucró 2H+,2-electrones y la formación de un radical intermediario centrado en el carbono, el radical dihidropiridilo, y la piridina como producto final. Las cromeno-piridinas también fueron estudiadas en este medio y se comportaron del mismo modo que en medio prótico. D. Reactividad con Radicales Libres. 1. En consideración a que tanto el radical alquilo como el alquilperoxilo se formaron a partir de ABAP, estos estudios se condujeron en medio acuoso a pH 7.4, y 37 0 C, condiciones en las cuales se puede controlar muy bien cinéticamente la termo-descomposición de ABAP y en consecuencia, los radicales generados. Los experimentos cinéticos se realizaron en condiciones de seudo-primer orden (20-40 veces la concentración del radical por sobre los derivados) con el propósito de facilitar la caracterización cinética. Los resultados en todos los casos resultaron muy alentadores, los derivados sintetizados fueron claramente más reactivos que los compuestos que se usan clínicamente, sustentando que su potencial efecto antioxidante es mayor que tales fármacos. El mecanismo de la reactividad también fue estudiado y nos permite concluir que los radicales abstraen el hidrógeno de la amina secundaria del anillo DHP (formación del anión dihidropiridina y posterior oxidación) y se encontró como producto final, la piridina (GC/MS). Esta reacción fue seguida por espectroscopia UV-Visible 2. La reactividad con anión radical superóxido se condujo en medio aprótico, debido a que en este medio, es estable el radical en las condiciones empleadas. Al igual que en el caso anterior, los experimentos cinéticos se realizaron en condiciones de seudo-primer orden (20-40 veces la concentración del radical por sobre los derivados) con el propósito de facilitar la caracterización cinética. La reactividad de los derivados sintetizados con este radical fue significativamente mayor que con los compuestos comerciales y participa claramente el grupo amino secundario, ya que evidencias obtenidas por RMN sobre compuestos deuterados muestran que a tiempos cortos se pierde la señal del protón correspondiente a la amina después de agregar el radical (sal potásica del anión radical superóxido). (2) INFORME DE RESULTADOS CORRESPONDIENTES AL ANO 2007 Dado que los compuestos dihidroxilados (2,3-, 2,4- y 2,5-dihidroxi-DHP) tal como se informó el año 2006 dieron lugar a una nueva serie de compuestos, esto es, las [ 3 , 4 - c ] cromeno - piridinas , parte de los resultados fueron objeto de una Memoria de Título para la obtención del título de Químico ya terminada e informada en el período anterior (Christian Vega Retter), sin mebargo, el alumno siguió profundizando algunos aspectos tanto sobre la síntesis como en la caracterización electroquímica de estos compuestos y los resultados fueron presentados a las XXVII Jornadas Chilenas de Química realizadas en Termas de Chillán (Ch. Vega-Retter, , J.A. Sauella. P.A. Navarrete-Encina, Luis J. Núñez-Veruara Síntesis y caracterización física, electroquímica y reactividad de nuevas [3,4-c]cromenopiridinas). También en este período se reporta la caracterización electroquímica en medio acuoso, aprótico y la respectiva reactividad con radicales libres alquilo, alquilperoxilo ABAP-derivados y anión radical superóxido de tres nuevas 1,4-dihidropiridinas C4-substituidas (3,4,5-trihidroxifenil-DHP, 3,4-dihidroxifenil-DHP, 3,5-dihidroxifenil-DHP). Los resultados presentados a continuación forman parte de los trabajos defendidos en las XXVII Jornadas Chilenas de Química de Termas de Chillán (1) J.P. Morales., R. Salazar, J. A. Squella, P. Navarrete, L.J. Núñez-Vergara. Caracterización electroquímica y reactividad de nuevas 1,4 dihidropiridinas C-4 dihidroxifenil sustituidas; (2) Luis 3. Núñez-Vergara, J.P. Morales, R. Salazar, J. A. Squella, P. Navarrete. Caracterización electroquímica y reactividad con radicales libres de c-4 galato 1,4-dihidropiridina).

Voltamperometría de pulso diferencial en Medio Acuoso de 3,4- 3,5- y 3,4,5-1,4-DHP. La caracterización electroquímica fue realizada usando un electrodo de carbón vítreo en medio acuoso (Tampón 0.01 M Britton-Robinson) en todo el rango de pH (2-12). Figura. Voltamperog ramas de pulso diferencial para 3,4-0H-

DHP para el rango oH 2-7. Concentración: 100 uM. Medio: Tampón Britton Robinson/EtOH, 70/30. En la zona ácida (pH2-pH6) las 1,4-dihidropiridinas substituidas en la posición-4 con el grupo dihidroxifenil exhibieron dos señales anódicas bien definidas, las que corresponden a la oxidación de un grupo hidroxilo del anillo aromático y la segunda señal a la oxidación del anillo 1,4-dihidropiridina. En el caso del 3,4,5-trihidroxifenil-DHP se encontraron tres señales de oxidación, las que corresponden a la oxidación de dos grupos hidroxilo del anillo aromático y la tercera señal correspondería a la oxidación del anillo 1,4-dihidropiridina. A partir de los gráficos log Ip versus log y se puede concluir que los procesos de oxidación son controlados por difusión (pendiente < 0.5). A pH >8, las señales de oxidación comienzan a perder resolución y la intensidad de corriente disminuye paulatinamente con el incremento de pH, en todos los compuestos. En la figura se muestra que los compuestos 3,4- y 3,5-

OH-DHP presentan 2 picos bien definidos. En contraste, el compuesto 3,4,5- OH-DHP presentó 3 señales anódicas en las mismas condiciones experimentales. En el caso del compuesto 3,4-0H-DHP, la primera señal a + 524 mV correspondería a la oxidación de uno de los OH presentes en el fenilo de la posición-4. La segunda señal se debería a la oxidación del anillo 1,4-DHP a la piridina respectiva, la cual ocurre a +1014 mV. Figura. Voltamperogramas de pulso diferencial a pH3 para las DHP5 estudiadas. Concentración: 100 pM. Medio: Tampón Britton Robinson/ EtOH, 70/30.

Para el compuesto 3,5-0H-DHP la respuesta es similar, observándose un pico a + 848 mV y un segundo a + 1028 mV, los que corresponderían, a

340HDHP la oxidación de un grupo OH del anillo aromático y al anillo 1,4-dihidropiridiria, respectivamente. Por otra parte, el compuesto 3,4,5-OH-DHP mostró 3 picos anódicos, de los cuales dos corresponderían a oxidación de dos grupos OH presentes en el anillo aromático y el tercero

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correspondería a la oxidación de la 1,4-Dl-IP. Con el propósito de realizar una mejor asignación de los grupos OH que se están oxidando en cada una de las moléculas, se estudió por voltamperometría de pulso

3 4 5 0, DHP diferencial, la oxidación de los precursores que intervinieron en la síntesis de las 1,4 DHPs, esto es, los respectivos polifenoles los cuales carecen del anillo dihidropiridínico. El compuesto 3,5-dihidroxifenil- presentó un pico único a +450 mV correspondiente a la oxidación de uno de los

grupos OH presentes en el anillo aromático. En el caso del compuesto 3,5-dihidroxifenil, el pico asignado a la oxidación del grupo OH aparece a +823 mV. Por lo tanto, la presencia del anillo 1,4-dihidropiridínico en la molécula desplaza el potencial de oxidación del grupo OH hacia valores más positivos en aproximadamente +370 mV. Estos resultados confirman lo propuesto anteriormente para la asignación de señales. Así, el pico 1 corresponde efectivamente a la oxidación de uno de los grupos hidroxilo presentes en la molécula y el pico II a la oxidación del anillo dihidropiridínico. Voltametría cíclica. Estudios por voltamperometría cíclica a diferentes velocidades de barrido (01-10 V/seg) a pH3 demostraron que tanto para el compuesto 3,4,5-trihidroxifenil-DHP como para el 3,4-dihidroxifenil-DHP, la señal anódica registrada a valores de potencial menos positivos es de carácter cuasi-reversible. Sin embargo, para el compuesto 3,5-dihidroxifenil-DHP se encontró que en todo el rango de velocidades de barrido, esta señal era de carácter irreversible. Determinación del número de electrones A partir de los experimentos de electrolisis a potencial controlado

se determinaron el número de electrones y en la Tabla adjunta se muestran los resultados obtenidos. Tal como se observa en esta Tabla, el número total de electrones corresponde a 4-electrones, lo que podría dar cuenta de la oxidación a 1-electrón del grupo OH y 2-electrones del anillo DHP.

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Tabla. Número total de electrones transferidos a pH3 por Electrolisis a Potencial controlado a + 1200 mV.

N° electrones transferidos

Compuesto Medio acuoso pH3

3,4,OH DHP 4,1 ± 0,2

3,5 OH DHP 4,2 ± 0,1

3,4,5 OH DHP 4,5 ± 0,3

Reactividad con radicales alquilo y alquilperoxilo ABAP-derivados. Los tres compuestos mostraron una reactividad significativa con los radicales libres ensayados (alquilo y alquilperoxilo). 3,4,5-trihidroxifenil-DHP fue el derivado mas potente, incluso exhibiendo un potencia 16.5 mayor que nisoldipino, una conocida 1,4-dihidropiridina comercial. Un resumen de los resultados de reactividad se muestran en la siguiente Tabla.

Tabla. Resumen constantes cinéticas de seudo primer orden para la reactividad con radicales libres

9( -106/5' bK1O-5/s-1 CR/NADH dR/NADH

3,4-OH DHP 2,61±0,05 1,50±0,12 0,07 0,098

3,5-OH DHP 3,26±0,06 1,72±0,08 0,09 0,11

3,4,5-OH DHP 34,55±0,04 9,65±0,10 0,91 0,63

aconstantes cinéticas en presencia de radicales alquilperoxilo. b Constantes cinéticas en presencia de radicales alquilos. C Relación entre las constantes de la 1,4 DHP y NADH para la reacción con alquilperoxilos. d Relación entre las constantes de la 1,4 DHP y NADH para la reacción con alquilo

Caracterización en medio aprótico. Tal como se observa en la Figura adjunta, los tres derivados sintetizados exhiben dos

peak 11 señales de oxidación en medio aprótico sobre electrodo de

peaki carbón vítreo. Las señales que aparecen a potenciales menos anódicos corresponden a la oxidación de uno de los grupos

3,4-OH-DHP

peak 11 / hidroxilo presentes en el anillo aromático de la posición-4. La peaki otra señal corresponde a la oxidación del anillo 1,4-

peak fl dihidropiridínico. Parece posible que en el compuesto 3,4,5-

3,5-OH-DHP trihidrofenil-DHP la señal más anódica (que aparece bastante

peaki ancha) tenga dos señales que están solapadas (oxidación de un 5A grupo OH y oxidación del anillo DHP) y de esa manera la

3,4,5-OH-DHP oxidación sea de tres grupos electroactivos como se encontró en medio acuoso.

400 600 800 1000 1200 1400 Figura. Voltamperogramas de soluciones 1 mM de 3,4-01-1-E1mV(Ag1AgCI) DHP, 3,5-0H-DHP y 3,4,5-0H-DHP en DMSO + 0.1 M

TBAHFP.

Con el propósito de obtener mayores antecedentes sobre la oxidación del sustituyente de la posición-4, se muestran las señales de oxidación de los polifenoles. Se puede concluir que la señal más anódica corresponde al anillo DHP y que la inclusión de estos polifenoles desplaza significativamente el potencial de este grupo. Una situación análoga ocurre con la oxidación de grupos OH, se adelantan hacia valores menos anódicos, esto es, se oxidan más fácilmente. No obstante, hasta el momento no es posible desde el punto de vista experimental asignar la señal de oxidación del grupo OH y su posición en el anillo aromático. Reactividad con anión radical superóxido (02) de los compuestos polifenólicos. Estos estudios fueron conducidos en las mismas condiciones experimentales que los derivados monofenólicos. Se intentó primeramente, determinar las absorbilidades molares (c) de los compuestos y aquéllas correspondientes a los derivados en presencia de TBA-OH (aniones).

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Dado el solapamiento e inestabilidad de las señales U y-Visibles en presencia de la base y del anión radical, no fue posible determinar ni las absorbilidades molares ni las reactividades de estos compuestos en estas condiciones experimentales. No obstante, las absorbilidades molares (c) en ausencia de base, entregaron

valores que variaron entre 5.500 y 6.800, cifras levemente mayores que en tos derivados monofenólicos.

Figura. Voltamperogramas de soluciones 1 mM de 4-fenil-1,4-DHP, pirocatecol, resorcinol y pirogalol en DMSO + 0.1 M TBAHFP.

Finalmente, en este período fue aceptado y publicado un trabajo que condensa la caracterización en medio aprótico de tos derivados monohidroxilados (4-(3-hidroxifenil)-DHP, 4-(4-hidroxifenil)-DHP) y el compuesto de referencia sin substitución en el anillo aromático (4-fenil-DHP). Además aborda la caracterización del mecanismo de oxidación, identificando los intermediarios radicalarios a través de ESR y de los productos finales de la oxidación a través de GC/MS. También se caracterizaron los compuestos a través de espectroscopia Uy-Visible. Es importante este trabajo, ya que

& resto de la caracterización electroquímica de los compuestos [Luis 3. Núñez-Vergara, R. Salazar, C. Camargo, 3. Carbajo, B. Conde, P. A. Navarrete-Encina and 3. A. Squella. Oxidation of C4-hydroxypheny1 1,4-dihydropyridines in dimethylsulfoxide and its reactivity towards alkylperoxyl radicals in aqueous medium. Bioorganic & Medicinal Chemistry. 15 (2007) 4318-4326].

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III. PRODUCTOS GENERADOS POR EL PROYECTO

En esta sección debe incluir todo documento o material cuyo contenido corresponda substancialmente a los objetivos del proyecto que se informa y en los que se indique el N° del proyecto FONDECYT. Aténgase a los formatos que se incluyen para cada tipo de producto generado. Adjunte copia de los documentos no enviados previamente a FONDECYT. Utilice las hojas adicionales que sean necesarias.

Si Ud. tiene un proyecto de Incentivo a la Cooperación Internacional, destaque con (*) las publicaciones generadas como producto del mismo a continuación de las que corresponden al Regular

1. Artículos en revistas científicas nacionales o extranjeras con Comité Editorial. Marque con una 'X" lo que corresponda. Para trabajos En Prensa/ Aceptados/ Enviados adjunte copia de carta de aceptación o de envío.

Autor(a)(es/as) P.A. NAVARRETE-ENCINA, lA. SQUELLA, 3. CARBA30,B. CONDE, C. CAMARGO, LUIS 3. NÚÑEZ-VERGARA

Título (Idioma Original) SYNTHESIS OF C-3,4,5-SUBSTITUTED-2,6-DIMETHYL-1,4-DIHYDROPYRIDINES

Nombre Completo de la SYNTHETIC COMMUNICATIONS Revista.

Ref. bibliográfica Año: 2007 Vol. 37 N° 12 Pág. 2051-2060

Estado de la publicación a X Publicada E Aceptada O Enviada LI En preparación la fecha.* /En Prensa Otras fuentes de financiamiento, si las hay

Autor(a)(es/as) LUIS 3. NÚÑEZ-VERGARA, P.A. NAVARRETE-ENCINA, SERGIO SALAS, B. CONDE, P. CARBAJO, J.A. SQUELLA, C. CAMARGO

Título (Idioma Original) ANALYSIS BY GC-MS AND GC-MS/MS OF THE HANTSCH SYNTHESIS PRODUCTS USING HYDROXY- AND METHOXY-AROMATIC ALDEHYDES

Nombre Completo de la JOURNAL OF PHARMACEUTICAL AND BIOMEDICAL ANALYSIS Revista.

Ref. bibliográfica Año: 2007 Vol. 44 N° Pág. 236-242

Estado de la publicación a x Publicada E Aceptada LI Enviada E En preparación la fecha.* ¡En Prensa Otras fuentes de financiamiento, si las hay

Autor(a)(es/as) Luis J. Núñez-Vergara, R. Salazar, C. Camargo, 3. Carbajo, B. Conde, P. A. Navarrete-Encina and 3. A. Squella

Título (Idioma Original) Oxidation of C4-hydroxypheny1 1,4-dihydropyridines in dimethylsulfoxide and its reactivity towards alkylperoxyl radicals in aqueous medium

Nombre Completo de la BIOORGANIC AND MEDICINAL CHEMISTRY Revista.

Ref. bibliográfica Año: 2007 Vol. 15 N° Pág. 4318-4326

Estado de la publicación a x Publicada E Aceptada O Enviada E En preparación la fecha.* ¡En Prensa Otras fuentes de financiamiento, si las hay

2. Otras publicaciones/ productos.

Autor(a)(es/as)

Título (Idioma Original)

Tipo de publicación o EJ Monografía EJ Seminario ¡Taller ¡Curso producto EJ Libro EJ Informe Técnico

EJ Capítulo de Libro EJ Software Marque con una "X" lo que EJ Mapa EJ Patente corresponda EJ Exposición de Arte

Otro. Especificar:

Editor(es) (Libros o Capítulos de Libros)

Nombre de la Editorial/ Organización

Lugar y Fecha de Publicación País:

Fecha:

Autor(a)(es/as)


Tipo de publicación o LII Monografía EJ Seminario ¡Taller ¡Curso producto EJ Libro EJ Informe Técnico

EJ Capítulo de Libro [1] Software Marque con una "X" lo que EJ Mapa EJ Patente corresponda EJ Exposición de Arte

Otro, Especificar:

Editor(es) (Libros o Capítulos de Libros)

Nombre de la Editorial! Organización

Lugar y Fecha de Publicación País:

Fecha:

10

3. Presentaciones a Congresos Nacionales e Internacionales 2005-2006. Adjunte copia del resumen o texto de la ponencia y de la tapa de/libro de Resúmenes, si no la ha enviado previamente.

Autor(a)(es/as) LUIS J. NUÑEZ-VERGARA, S. BOLLO, R. SALAZAR, P.A. NAVARRETE, J.A. SQUELLA

Título (Idioma ELECTROCHEMICAL CHARACTERIZATION OF C4-1-lYDROXY(DIHYDROXY)-PHENY1- Original) 1,4-DIHYDROPYRIDINES AND REACTIVITY TOWARDS FREE RADICALS IN

AQUEOUS MEDIUM Nombre del Congreso 208th ELECTROCHEMICAL SOCIETY (ECS) MEETING

Lugar Fecha País: Ciudad: Fecha:

USA LOS ANGELES 16-21 OCTUBRE 2005

Autor(a)(es/as) LUIS J. NÚÑEZ-VERGARA, P.A. NAVARRETE, S. BOLLO, R. SALAZAR, J.A. SQUELLA

Título (Idioma CARACTERIZACIÓN ELECTROQUÍMICA Y REACTIVIDAD DE 4-FENIL-2,6-DIMETIL-Original) 3,5-DIETOXICARBONIL-1,4-DIHIDROPIRIDINA Y DE 4(3-HIDROXIFENIL)-2,6-

DIMETIL-3,5-DIETOXICARBONIL- 1,4-DIHIDROPIRIDINA EN MEDIO ACUOSO Nombre del Congreso XXVI JORNADAS CHILENAS DE QUIMICA

Lugar y Fecha País: Ciudad: Fecha:

CHILE CONCEPCIÓN 10-13 ENERO 2006

Autor(a)(es/as) LUIS J. NÚÑEZ-VERGARA, P.A. NAVARRETE, C. CAMRGO, R. SALAZAR, S. BOLLO, J.A. SQUELLA

Título (Idioma CARACTERIZACIÓN ELECTROQUÍMICA DE C4-(HIDROXIFENIL)-2,6-DIMETIL-3,5-Original) DIETOXICARBONIL- 1,4-DIHIDROPIRIDINAS

Nombre del Congreso XVII CONGRESO DE LA SOCIEDAD IBEROAMERICANA DE ELECTROQUÍMICA


ARGENTINA LA PLATA 3-7 ABRIL 2006

Autor(a)(es/as) R. SALAZAR, M. LÓPEZ, P.A. NAVARRETE, J.A. SQUELLA, LUIS J. NÚÑEZ-VERGARA

Título (Idioma CARACTERIZACIÓN ELECTROQUÍMICA Y REACTIVIDAD DE 4-(4-HIDROXI-3-Original) METOXIFENIL) Y 4-(3-HIDROXI-4-METOXIFENIL)-2,6-DIMETIL-3,5-

DIETOXICARBONIL- 1,4-DIHIDROPIRIDINA Nombre del Congreso XVII CONGRESO DE LA SOCIEDAD IBEROAMERICANA DE ELECTROQUIMICA


ARGENTINA LA PLATA 3-7 ABRIL 2006

Autor(a)(es/as) LUIS J. NÚÑEZ-VERGARA, M. LÓPEZ, R. SALAZAR, P.A. NAVARRETE, J.A. SQUELLA


ELECTROCHEMICAL OXIDATION AND REACTIVITY WITH SUPEROXIDE ANION OF SOME NEW C4-HYDROXYPHENYL1,4DIHYDROPYRIDINES IN DIMETHYLSULFOXIDE

Nombre del Congreso 2101h MEETING OF THE ELECTROCHEMICAL SOCIETY

Lugar y Fecha País: MÉXICO Ciudad: CANCUN Fecha:29 OCTUBRE-3 NOVIEMBRE 2006

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3A. Presentaciones a Congresos Nacionales e Internacionales 2007. Adjunte copia del resumen o texto de la ponencia y de la tapa de/libro de Resúmenes, si no la ha enviado previamente.

Autor(a)(es/as) J.P. Morales, R. Salazar, J. A. Squella, P. Navarrete, Li. Núñez-Vergara

Título (Idioma CARACTERIZACIÓN ELECTROQUÍMICA Y REACTIVIDAD DE NUEVAS 1,4 Original) DIHIDROPIRIDINAS C-4 DIHIDROXIFENIL SUSTITUIDAS

Nombre del Congreso XXVII JORNADAS CHILENAS DE QUÍMICA


CHILE TERMAS DE CHILLÁN NOVIEMBRE 2007

Autor(a)(es/as) Luis .3. Núñez-Vergara, J.P. Morales, R. Salazar, 3. A. Squella, P. Navarrete

Título (Idioma CARACTERIZACIÓN ELECTROQUÍMICA Y REACTIVIDAD CON RADICALES LIBRES Original) DE C-4 GALATO 1,4-DIHIDROPIRIDINA


Lugar y Fecha País: Ciudad: Fecha:

CHILE TERMAS DE CHILLÁN NOVIEMBRE 2007

Autor(a)(es/as) Luis 3. Núñez-Vergara, P.A. Navarrete, C. Camargo, R. Salazar, C. Vega and J.A. Squella

Título (Idioma Electrochernical Characterization of sorne new chrorneno[3,4-c]pyridines in aprotic Original) mediurn

Nombre del Congreso 208 T Annual MEETING OF THE ELECTROCHEMICAL SOCIETY (ISE)


CANADÁ BANFF 1-6 SEPTIEMBRE 2007

Autor(a)(es/as) C. Vega-Retter, JA. Squella, L.J. Nuñez-Vergara, P.A. Navarrete-Encina


CARACTERIZACIÓN ELECTROQUÍMICA DE NUEVAS CROMENOPIRIDINAS


Lugar y Fecha País:

CHILE

Ciudad:

TERMAS DE CHILLÁN

Fecha:

NOVIEMBRE 2007

Autor(a) (es/as)


Nombre del Congreso


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4. Tesis y lo Memorias en ejecución y fo terminadas en el marco de! proyecto. Adjunte copia del resumen no informado anteriormente y certificación de aprobación, si corresponde.

Título de la Tesis CARACTERIZACION ELECTROQUÍMICA Y REACTIVIDAD CON RADICALES LIBRES DE C-4 DIHIDROXIFENIL 1,4-DIHIDROPIRIDINAS

Nombre y Apellidos CHRISTIAN VEGA RETTER, 3.A. SQUELLA, P.A. NAVARRETE-ENCINA, LUIS 3. del(de la)/de los(las) NUNEZ-VERGARA Alumno(a)(os/as) y Tutor(a) Título! Grado

QUÍMICO Institución, Facultad,

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y FARMACÉUTICAS. U DE CHILE Departamento

Lugar País: CHILE Ciudad: SANTIAGO

Estado de Tesis En Ejecución: Terminada: X

Fecha de Inicio: Abril 2006 Fecha de Término: Enero 2007

Título de la Tesis CARACTERIZACIÓN ELECTROQUÍMICA Y REACTIVI DAD CON RADICALES DE 3,4 DIHIDROXIFENIL, 3,5 DIHIDROXIFENIL Y C-4 GALATO 1,4 DIHIDROPIRIDINAS

Nombre y Apellidos JUAN PABLO MORALES MONTECINOS, J.A. SQUELLA, RICARDO SALAZAR, P.A. del(de la)/de los(las) NAVARRETE-ENCINA, LUIS 3. NÚÑEZ-VERGARA Alumno(a) (os/as) y Tutor(a) Título! Grado

QUÍMICO-FARMACÉUTICO Institución, Facultad,

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y FARMACÉUTICAS. U DE CHILE Departamento Lugar País: CHILE Ciudad: SANTIAGO


Fecha de Inicio: ABRIL 2007 Fecha de Término: ENERO 2008

Título de la Tesis CARACTERIZACIÓN ELECTROQUÍMICA Y REACTIVIDAD CON ANIÓN SUPEROXIDO DE C4- HIDROXIFENIL 1,4-DIHIDROPIRIDINAS

Nombre y Apellidos MARCELO LÓPEZ MENADIER, S. BOLLO, P.A. NAVARRETE-ENCINA, J.A. del(de la)/de los(las) SQUELLA, LUIS 3. NUNEZ-VERGARA Alumno(a) (os/as) y Tutor(a) Título! Grado

QUÍMICO-FARMACÉTICO Institución, Facultad, FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y FARMACÉUTICAS. U DE CHILE Departamento



Fecha de Inicio: 1 AGOSTO 2005 Fecha de Término: 10 Septiembre 2006

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4. Tesis y /0 Memorias en ejecución y ¡o terminadas en el marco del proyecto. Adjunte copia del resumen no informado anteriormente y certificación de aprobación, si corresponde.

Título de la Tesis BIOCHEMICAL PHARMACOLGY EVALUATION OF NEW 1,4-DIHYDROPYRIDINES IN CULTURED CARDIAC MYOCITES

Nombre y Apellidos DAVID GALVIS PAREJA, SERGIO LAVANDERO GONZÁLEZ, LUIS J. NÚÑEZ-del(de la)/de los(las) VERGARA Alumno(a) (os/as) y Tutor(a) Título! Grado

DOCTOR_EN_FARMACOLOGIA Institución, Facultad, Departamento

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y FARMACÉUTICAS. U DE CHILE


Estado de Tesis En Ejecución: ENERO 2007 Terminada:

Fecha de Inicio: Fecha de Término:

Título de la Tesis PREPARACIÓN, CARACTERIZACIÓN ELECTROQUÍMICA Y REACTIVIDAD DE NUEVAS 1,4-DIHIDROPIRIDINAS-4-INDOLIL-SUSTITUIDAS

Nombre y Apellidos RICARDO SALAZAR GONZÁLEZ, J.A. SQUELLA SERRANO, LUIS J. NÚÑEZ del(de la)/de los(las) VERGARA Alumno(a) (os/as) y Tutor(a) Título! Grado

DOCTOR EN QUÍMICA Institución, Facultad, Departamento FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y FARMACÉUTICAS. U DE CHILE


Estado de Tesis En Ejecución: X Terminada:

Fecha de Inicio: Fecha de Término: AGOSTO 2008

Título de la Tesis

Nombre y Apellidos del(de la)/de los(las) Alumno(a)(os/as) y Tutor(a) Título! Grado

Institución, Facultad, Departamento

Lugar País: Ciudad:

Estado de Tesis En Ejecución: Terminada:

Fecha de Inicio: Fecha de Término:

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IV. DESTAQUE OTROS LOGROS DEL PROYECTO TALES COMO: • Estadías de investigación. • Formación de recursos humanos exceptuando tesistas ya informados. • Actividades de difusión y/o extensión en la temática del proyecto. • Cualquier otro logro no contemplado en los ítem anteriores y que Ud. quiera destacar.

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V. RESUMEN

Describa en forma precisa y breve el tópico general del proyecto, sus metas y objetivos y los resultados alcanzados. Utilice un lenguaje apropiado para la comprensión del público no especialista en el tema. Esta información podrá ser difundida. (No debe exceder este espacio en fuente Verdana 9)

En este proyecto se abordó la síntesis de una nueva serie de compuestos derivados de 2,6-dimetil-3,5-dietoxicarbonil-4-[(mono-,di,-trihidroxi)-fenil)]-1,4-dihidropiridina (Figura), su caracterización de la oxidación electroquímica y su reactividad con radicales libres (alquilperoxilo, alquilo, anión su peróxido).

(H, OH) R3 R (FI, OH)

(11, OH,-OCI-11)

Y

Para la caracterización electroquímica se emplearon los métodos voltamétricos de barrido lineal con electrodo rotatorio, pulso diferencial, cíclica y electrólisis a potencial controlado. También, el empleo de técnicas espectroscó picas (espectroscopía UV-Visible, Resonancia de Espín Electrónico) y cromatográficas (HPLC, GC-MS) fueron empleadas para caracterizar los intermediarios y los productos finales generados durante el proceso de oxidación. Para estudiar la reactividad se utilizaron técnicas electroquímicas, espectroscopia UV-Vis y cromatográficas. En suma, de los resultados obtenidos en el presente proyecto, es posible concluir la factibilidad de sintetizar 1,4-dihidropiridinas con cambios estructurales en la posición-4 del anillo que comprenden fenoles, catecoles y galatos, a través de una variante del método clásico de Hantzsch. Tanto los estudios sobre la oxidación electroquímica sobre electrodo de carbón vítreo como los de reactividad con radicales libres, mostraron claramente la mutua interacción entre los dos centros redox presentes en las moléculas (fenoles, catecoles, galatos) y el anillo dihidropiridínico, los cuales coexisten en la molécula de 1,4-DHP. Dicha interacción se tradujo en cambios significativos tanto sobre el proceso de oxidación electroquímico los que se manifiestan en la facilidad de oxidación de los grupos OH presentes y en la mayor dificultad de oxidación del anillo 1,4-dohidropiridínico en comparación con las moléculas de referencia. En el caso de la reactividad de estos compuestos con los radicales libres propuestos (alquilo, alquilperoxilo y anión radical superóxido), se encontró claramente una sinergia en el efecto atrapador sobre los radicales libres (efecto antioxidante), resultando compuestos más reactivos que los actualmente en uso en la clínica.

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VI.- INFORME DE PROYECTO DE INCENTIVO A LA COOPERACION INTERNACIONAL

NÚMERO DE PROYECTO DE INCENTIVO A LA COOPERACION INTERNACIONAL

NÚMERO DE PROYECTO FONDECYT REGULAR

INVESTIGADOR(A) RESPONSABLE FIRMA FECHA PRESENTACIÓN

PERÍODO QUE SE INFORMA _________

DESDE HASTA

NOMBRE COLABORADOR(A) EXTRANJERO(A) AFILIACIÓN INSTITUCIONAL ACTUAL

FECHAS DE ESTADÍA ________

DESDE HASTA

Describa las actividades realizadas y resultados obtenidos. Destaque su contribución al logro de los objetivos del proyecto Regular. Si es pertinente, indique las publicaciones conjuntas generadas, haciendo referencia a lo informado en el punto III del informe de avance/ final. Agregue los anexos necesarios.

informe final - conicyt

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