Immunogénétique et Immunopathogénie des rhumatismes inflammatoires

Séminaire Inflammation IFR 133

Éric TOUSSIROT

Rhumatologie

Besançon

Facteurs hormonaux

Facteurs hormonaux

Facteurs psychologiques

Facteurs psychologiques

Facteurs environnement

Facteurs environnement

ModificationsImmunité:

Auto-Anticorps, Cytokines…

ModificationsImmunité:

Auto-Anticorps, Cytokines…

Marqueurs d’évolutivitéMarqueurs d’évolutivité

Facteurs génétiquesFacteurs

génétiques

Rhumatismes inflammatoires

Rhumatismes inflammatoires

Polyarthrite Rhumatoïde

HLA-DRB1 et PR

DR1 DRB1*01: *0101 à *0104 DR4 DRB1*04: *0401 à *0422 Épitope partagé:séquence commune

position 70-74 HVR3 chaîne DR1

QKRAA, QRRAA, RRRAA

DRB1*0101,*0102,

DRB1*0401,*0404,*0405,

DRB1*1001

Immunogenetique PREpitope partagé

Association PR- DRB1*0101,*0401, *0404 (J Rheumatol, 1999)

Relation sévérité maladie (DRB1*0401-vascularite, DDB)

Non expression en dh PR Relation PR-HLA DRB1* selon

charge électrique p4 (Xp4n protecteur) (Reviron, Arthritis Rheum, 2001)

Autres polymorphismes HLA DM: association PR et

DMA*0103 (Human Immunol, 2000) TAP: association PR et TAP2 Thr565

(Eur J Immunogenet, 2002) 010203040506070

8090

100

%

*0101 *0102 *0103 *0104

HLA DMA

TémoinsPR

p corr: 0,004

EBV et PR

RANA (EBNA-1, séquences Gly-Ala) EBV et transformation cell B: PR +++ Présence EBV et synoviale PR:

- hybridation in situ (ARN)- immunohistochimie- PCR (ADN)- cell T CD8+ synoviale et réactivité protéines

synoviale PR: lymphome (LNH), EBV

Liaison moléculaire EBV-PR Gp110 EBV: proteines

gB herpes viridae Cycle réplicatif,

expression RE, surf cell. B infectées

Réactivité croisée gp110 et HLA DRB1*0401

Roudier, PNAS, 1989

Réponse cellulaire gp110 et polymorphisme HLA-DR Influence génétique sur

réponse immune spécifique gp110

50 sujets sains, génotypage HLA DRB1*, épitope partagé ou non, homozygote, hétérozygote

Dilution limite Réponse opposée DR7 /

DRB1*0404

Réponse cellulaire gp110 et activité, sévérité PR

25 PR Réponse gp110 EBV

PR < Témoins Relation réponse

gp110 / VS, CRP PR avec atteinte extra-

articulaire réponse gp 110 basse

Ann Rheum Dis, 2000

Réponse cellulaire gp110 liquide synovial 9 PR / 10 rhumatismes

inflam. autres Réponse gp110 liquide

synovial Niveau réponse PR >

Témoins PR: Réponse liquide > sang

circulant

→ Ac anti gp 110 PR vs autres Rhum Inflam, relation activité/ sévérité maladie

Fréquence des précurseurs T spécifiques de la glycoprotéine gp110 du virus d'Epstein-Barr et de

l'extrait protéique total d'E.Coli dans le liquide articulairedes PR et Témoins

gp110 EBV E.ColiFré

qu

en

ce

de

s p

réc

urs

eu

rs T

(x 1

0-6; m

oye

nn

e ±

SD

)

0

1

2

3

4

5

6PRTémoins

p = 0,02 NS

Fréquence des précurseurs T spécifiques de la glycoprotéine gp110 du virus d'Epstein-Barr dans

le liquide articulaire et le sang circulant des PR

0 1 2 3Fré

qu

en

ce

de

s p

réc

urs

eu

rs T

(x 1

0-6; m

oye

nn

e ±

SD

)0

1

2

3

4

Liquide articulaire Sang circulant

NS

Réponse anti-TNF

Polymorphisme promoteur TNF308A/G

Association génotype 308 G/G et bonne réponse TNF

Autres pathologies: SpA ?

Mugnier, Arthritis Rheum, 2003

Spondylarthropathies

HLA Classe I soluble- SpA

HLA Classe I soluble: protéolyse, épissage alternatif

Rôle immuno-modulateur: greffe, VIH, HCV, SEP

HLA-Is ↑ PR, LED Résultats SpA: ↓ HLA-Is

Figure 1:Serum soluble HLA class I antigens in

Spondylarthropathies and Healthy Controls

SpA HC SpA B27 + HC B27 + SpA B27- HC B27 -sH

LA

-I (

mea

n ±

SD

) ( g

/ml)

0

1

2

sHLA-I

Voies de co-stimulation lymphocytaire et SpA CTLA4s SpA vs T Immunophénotypage CTLA4,CD25, CD45RO (FoxP3)

Lymphocyte TCellule présentatrice

d’antigènes

CD28 B7-1 (CD80)B7-2 (CD86)CTLA4

CD40 ligand

CD40

ICOSICOS ligand

PD-1 PDL 1-2

+

-

Visits in months

V1 V2 V3 V4 V5 V6 V end

mea

n ±

SE

M

35

40

45

50

55

60

BASDAI BASDAI over time

*

* V1 vs V4: p < 0.05

N = 25 N = 24 N = 20 N = 18 N = 17

Variation cytokines inflammatoires et Bisphosphonates

Pamidronate et SpA Autres bisphosphonates

et SpA: zolendronate, ibandronate

IL-1, IL-6, TNF,IFN,

IL-10, IL-4, IL-5, VEGF

Figure 2:Marquage intracellulaire des lymphocytes

T CD3+, T CD4+ et T CD8+ des Patients et Témoins

PR SA Gonarthrose Témoins

Val

eur

abso

lue

/ mm

3

0

100

200

300

400

500

600

700

TNF TCD3+ TNF TCD4+ TNF TCD8+

Toutes comparaisons NS

Figure 3:Taux circulants de TNF,

des récepteurs RI et RII au TNFdes Patients et Témoins

PR SA Gonarthrose Témoins

pg

/ml

0

5

10

15

20

25

30

35

40

TNFTNF-RI F R

p< 0,005

Taux circulants et réserve intracellulaire en TNF des cellules T et NK dans la PR, la SA, la gonarthrose.

Autres projets

Angiogénèse et SpA: ↑ VEGF SpA vs T (Clin Exp Immunol, 2003)

Tolérance orale extraits bactériens E.Coli (hsp 60) induction population cellulaire T reg (IL-10 )

Inflammation et os Rhum Inflam: marqueurs remodelage osseux (Rheumatology, 1998, 1999, 2001, 2005), leptine et adipocytokines, OPG / RANK ligand.

Système nerveux végétatif et inflammation: PR (J Rheumatol, 1993), SA (Ann Rheum Dis, 1999)

Collaborations

INSERM U645 UPRES EA2284, IFR 133, Besançon

INSERM EMI 9940, Marseille

Explorations Fonctionnelles Rénales et Métaboliques, Besançon