from news beijing issue i, 2016 · hello, 广州 ！ 充 足现货库存，满...
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NEBNEWS
纽英伦快讯
A scientific update from
New England BiolabsBeijing
Issue I, 2016
新春开学促销季我们，相逢如初见
化简呈纯：Monarch™ 核酸纯化系列产品
NEBNext® rRNA 去除试剂盒
YEARS IN CHINA
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客服电话：400 811 2220
目录 Issue I, 2016
卷首语
我们，相逢如初见
关于 NEB
携手十五载，感恩话未来
新品介绍
化简呈纯：Monarch™ 核酸纯化系列产品Monarch™ 试剂盒采用最新技术，可以从细菌培养液、琼脂糖凝胶及酶反应产物
中快速可靠地纯化出高质量 DNA。与普通纯化试剂盒相比，Monarch™ 试剂盒
纯化的 DNA 浓度更高、实验流程更快，也更加环保，是您的不二选择。
优惠促销
新春开学促销季 1. 140 余种 CutSmart® 省时内切酶 7.5 折促销
2. 金牌 T4 DNA 连接酶 7 折特惠
3. 购买 Q5® 系列产品，高品质 dNTP 免费送
4. Monarch™ 新品上市 6.5 折重磅推新
5. 购买 NEBNext® Ultra™ II DNA Library Prep Kit for Illumina®，接头引物试剂盒免费送
6. NEB 蛋白 Marker 产品 5 折长期特惠
活动时间：即日起至 2016 年 5 月 31 日
经典回顾
数字化诠释 NEB 限制性内切酶
1 张图，9 组数字，为您诠释无与伦比的 NEB 限制性内切酶
经典回顾
NEB DNA 连接酶NEB 提供种类齐全、品质超纯、表现更优的 DNA 连接酶，以及更方便的预
混液和试剂盒。它们为简化您的克隆实验奠定了基础。
特别推荐
NEBNext® rRNA 去除试剂盒（人/小鼠/大鼠）NEBNext® rRNA 去除试剂盒能够有效的从人、大鼠、小鼠的总 RNA 样本中去
除核糖体 RNA（rRNA）。该试剂盒不仅能从高质量、未降解的 RNA 中去除
rRNA，也可以从质量欠佳、有降解的 RNA 中（包括 FFPE 的 RNA）去除 rRNA。
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17活动时间：
即日起至 2016 年 5 月 31 日截止
更多优惠详情，请见 P9－P13
新春开学促销季
1 140 余种 CutSmart® 省时内切酶 7.5 折促销
2 金牌 T4 DNA 连接酶 7 折特惠
3 购买 Q5® 系列产品，高品质 dNTP 免费送
4 Monarch™ 新品上市 6.5 折重磅推新
5 购买 NEBNext® Ultra™ II DNA Library Prep Kit
for Illumina®，接头引物试剂盒免费送
6 NEB 蛋白 Marker 产品 5 折长期特惠
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www.neb-china.com
卷首语
我们，相逢如初见
有人说，在时光裹挟里最美好的事，就是你和我，终将成为“我们”。2001 年，
NEB 怀揣着“科学家服务科学家”的理念来到中国，用优质的产品和服务助力中国
生命科学研究者一起创新和改变，这便有了十五年里的美好的“我们”。
“NEB 完美品质，成就科学梦想”是十五年前 NEB（北京）成立之初设定的美好愿景，
自此开启寻梦之旅。在科学探索的路上 NEB 不断推陈出新，从经典内切酶到降低酶
切星号活性的 HF 高保真酶，从传统 Buffer 升级到统一兼容的 CutSmart® 缓冲液系统，
从 Phusion 到更快、更高效、错配更低的 Q5® 超保真聚合酶，从 Ultra™ 升级到更强
大的 Ultra™ II 二代测序建库试剂盒 —— 在彼此的激励下，梦一直在追寻，“我们”
一直在努力。
时值 NEB（北京）成立 15 周年之际，我们将推出为期一年的系列主题活动。本期
将与您分享十五年来 NEB 在中国的成长历程， 同时将带给您 NEB 近期重磅推出的
全新产品线——Monarch™ 核酸纯化系列的介绍，更有 140 多种 CutSmart® 省时内切
酶、Q5® 超保真聚合酶、金牌 T4 连接酶以及 Ultra™ II 二代测序建库试剂盒等产品
的火热促销。
回首十五年来的“我们”，相逢如初见。
NEB （北京）市场部
2016 年春
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客服电话：400 811 2220
十五年前，NEB 怀揣着 Scientists for Scientists 的理念远渡重洋，来到了中国
生命科学研究者的身边，成立了 NEB 在华的全资子公司 —— 纽英伦生物技
术（北京）有限公司，并用优质可靠的产品和服务赢得了中国用户的广泛青
睐。往事一幕幕地回响，岁月的年轮磨灭不掉过往的珍稀记忆，十五年后，
我们抱着一颗感恩和谦卑的心，真诚地对所有的中国用户说一声“感谢”！
您们长久以来的支持和信任，将化作继续前行的强大动力，促动我们着眼未
来，共同见证中国生命科学领域一个又一个新的飞跃。
携手十五载，感恩话未来
关于 NEB
2001 年NEB 北京成立
2003 年 NEB 第一本中文目录发行
2003 年 现货供应率首次达到 99%
2008 年成立上海办公室
2009 年设立 4008112220 免费客服电话
2010 年设立官方微博
为了使研究者们可以更好地了解 NEB 产品和分子生物学相关的技术信息，
从 2003 年起，NEB（北京）就开始了英文目录的全本翻译，并将这项工作
一直持续至今。第一本中文目录一经推出，便迅速成为广受欢迎的分子生物
学实验指南和实用的学习工具。
NEB 中国十五年
NEB不仅能为您提供完美品质的产品，提供完美品质的服务也是我们不懈努力的目标。为了
您能更方便与我们沟通，NEB(北京)开通了新的客服热线：400-811-2220。产品信息、技
术资料、订货方式、物流时间、实验咨询、疑难解答…… 您有任何的问题或需要，只需拨打
400-811-2220，NEB(北京)专业的客服人员都将为您一一解决。
NEB(北京) 一直致力于服务中国的生命科学研究者，让您使用高品质进口产品的同时，得到
悉心周到的中文服务。从产品说明书的中文化，到印刷精美的中文目录；从全面的现货库
存，到专业的技术支持；从方便使用的中文网站，到400热线电话的开通。为了您能得到更
贴心的服务，NEB(北京)会不断提高我们的服务质量。
拨打400-811-2220，体验NEB(北京)热忱、周到的服务，感受轻松的实验生活。
NEB完美品质 成就科学梦想NEB(北京) 100083 北京海淀区王庄路1号清华同方科技广场B座0612客服热线: 400-811-2220 电话: 010-82378265/6 传真: 010-82378262 网站: www.neb-china.com 邮箱: [email protected]官方微博：http://weibo.com/nebchina
400 811 2220
NEB(北京) 与您沟通无障碍服务品质再升级
为了保障科研工作者可以第一时间保质保量的拿到 NEB 的产品，我们建立
了充足的现货库存，常用产品的现货供应率持续多年达到 99%。
ORDERSTelephone 1-800-632-52279:00 am to 8:00 pm EST
fax: 1-800-632-7440e-mail: [email protected]: www.neb.com
TECHNICAL ASSISTANCETelephone 1-800-632-7799e-mail: [email protected]
USANEW ENGLAND BIOLABS, INC.240 County RoadIpswich, MA 01938-2723Telephone (978) 927-5054Toll Free (USA Orders) 1-800-632-5227Toll Free (USA Tech) 1-800-632-7799Fax (978) 921-1350e-mail: [email protected] www.neb.com
CANADANEW ENGLAND BIOLABS, LTD.Telephone (905) 665-4632Toll Free 1-800-387-1095Fax (905) 665-4635Fax Toll Free 1-800-563-3789e-mail: [email protected]
CHINA, PEOPLE’S REPUBLICNEW ENGLAND BIOLABS (BEIJING), LTD.Telephone 010-82378265/82378266Fax 010-82378262e-mail: [email protected]
FRANCE NEW ENGLAND BIOLABS FRANCE Free Call 0800 100 632 Free Fax 0800 100 610 e-mail: [email protected] www.neb-online.fr
GERMANY/AUSTRIANEW ENGLAND BIOLABS GMBHTelephone +49/(0)69/305 23140Free Call 0800/246 5227 (Germany) Free Call 00800/246 5227 (Austria)Fax +49/(0)69/305 23149Free Fax 0800/246 5229 (Germany) e-mail: [email protected]
JAPANNEW ENGLAND BIOLABS JAPAN, INC.Telephone +81 (0)3 5669 6191Fax +81 (0)3 5669 6192e-mail: [email protected]
SINGAPORENEW ENGLAND BIOLABS, PTE. LTD.Telephone +65 6776 0903Fax +65 6778 9228e-mail: [email protected]
UNITED KINGDOMNEW ENGLAND BIOLABS (UK) LTD.Telephone (01462) 420616Call Free 0800 318486Fax (01462) 421057Fax Free 0800 435682e-mail: [email protected]
2015 •16Catalog & Technical Reference
Catalog &
Technical ReferenceN
ew E
ngland Biolabs
2015 •16
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www.neb-china.com
为了让用户与我们之间的沟通更顺畅，我们先后建立了 4008112220 的免费
客户电话、官方微博（http://weibo.com/nebchina）和微信（NEBiolabs）等多
种互动平台，无论是新产品发布、实用产品资料还是火热的促销活动，都会
第一时间的让用户知晓；同时，无论您在使用 NEB 产品中遇到任何问题，
也同样可以通过互动渠道第一时间让我们了解并协助解决您的问题。
2012 年设立官方微信
2011 年第一届环保活动周活动开启
2013 年建立上海本地现货库存
2015 年 NEB 成立 40 周年 passion in science 全球科学家评奖
2015 年 成立广州办公室及现货库
2016 年 NEB 北京成立 15 周年
见证你的科学热忱NEB 40 周年庆“Passion in Science”全球科学家评选活动
说说你或 Ta 的故事，与 NEB 一同见证 — 科学的热忱！
请登录 NEBPassionInScience.com
站在美国麻省 Ipswich 的 NEB 实验大楼门前，你会发现科学与艺术的完美结合。设计者：Nicole Gordon。
四十周年庆 210X285.indd 1 14-9-2 上午11:02
为了更好地将 NEB的 环保理念分享给中国用户，2011 年，NEB（北京）开
创性地举办了第一届“世界环境日”特别活动，号召实验室的同学们将用过
的塑料空管回收起来交给我们，做彼此身边的环保卫士。自此之后，无论风
吹雨打，每一年我们都会来到您身边，力争从身边做起，将环境保护的理念
更广泛的传承下去。
HELLO, 广州 ！● 充足现货库存，满足您每一天的需求
● 渠道壮大，服务再升级
● 专业人员，支持更贴心
● 热力活动，面对面与您互动
NEB 广州办事处正式成立
020-38367113
广州市天河区珠江新城华夏路 16 号富丽盈凯大厦 1312 室
NEB 完美品质 成就科学梦想
NEB（北京） 100083 北京海淀区王庄路 1 号清华同方科技广场 B 座 0612
客服热线: 400-811-2220 电话: 010-82378265/6 传真: 010-82378262
网站: www.neb-china.com 邮箱: [email protected] NEB 官方微信 NEB 官方微博
要的a4大小hi 广州(选用).indd 1 15-8-24 下午2:34
NEB 完美品质，成就科学梦想——这是 NEB（北京）成立之初的美好愿景，作为一个热爱科学、注重环保和强调社
会责任的企业，十五年只是我们共同成长的时间轴上一小段旅程，看——远方的景色更迷人！
YEARS IN CHINA
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客服电话：400 811 2220
新品介绍
化简呈纯：Monarch™ 核酸纯化系列产品Monarch 试剂盒采用最新技术，可以从细菌培养液、琼脂糖凝胶及酶反应产
物中快速可靠地纯化出高质量 DNA。与普通纯化试剂盒相比，Monarch 独
特的柱设计提供更小的洗脱体积，从而获得更高浓度、更高质量的 DNA，
便于测序、限制性酶切和其它酶操作等下游实验。Monarch 离心柱的设计
消除了液体残留及其带来的污染风险，可以快速无忧地完成 DNA 纯化。
Monarch 产品在设计中坚持可持续发展的环保理念，使用了更少的塑料及来
源可溯的包装。
液体残留
独特的离心柱设计确保最佳的实验结果
● 提高了 DNA 的回收效率
● 更小的洗脱体积可以得到更高浓度的 DNA
● 无液体残留，消除污染风险
提升 DNA 纯化体验
● 快速，简便的实验流程
● 更容易标记和操作的离心柱设计
● 改进的缓冲液系统有更稳定的表现
环保之选 Monarch™
● 显著降低每个试剂盒中的塑料用量
● 定制设计的薄壁柱和收集管
● 来源可溯、可回收的包装
● 包装盒和产品卡片采用环保大豆油墨印刷
● 可重复使用的包装盒
Monarch™ 性价比更高
● 每种缓冲液组分和离心柱均可单独购买
● 没有额外的运费
● 无危险材料费用
● 具竞争力的价格
NEB Qiagen
为优质的性能而设计
为可持续发展而设计的 Monarch 试剂盒
减少了
44%的塑料用量
使用
可回收的包装材料
每年可以节约超过
140吨的塑料
包装盒为
100% 回收纸制成
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Monarch™ Plasmid Miniprep Kit 质粒小提试剂盒Monarch Plasmid Miniprep Kit 是质粒小提试剂盒，能快速可靠地提取高质量质粒 DNA。该方法除
了采用了标准的细胞重悬、碱性裂解及中和步骤外，还在特定步骤中加入了颜色指示，便于监
控实验的完成情况。独特的清洗缓冲液可以确保完全清除盐、蛋白、RNA 及其它细胞组分，从
而以较小的洗脱体积获得高浓度和高纯度的 DNA。操作流程快速简便，低至 30 μl 的洗脱体积
为限制性酶切、DNA 测序、PCR 及其它酶操作等下游实验应用提供高浓度的 DNA。
独特的 Monarch™ 离心柱设计
离心柱末端与真空抽滤系统兼容
标记区和磨砂的柱表面提供了更方便书写的空间
使用更少的塑料，降低对环境的污染
结合能力达到 20 μg
独特的锥形设计消除了液体残存，同时也保证了
低至 30 μl 的洗脱体积
优势● 更小的洗脱体积
● 独特的离心柱设计消除液体和盐的残留
● 更快的操作流程，更少的离心时间
● 有色缓冲液系统来监控特定步骤的完成
● 实验开始前无需加入 RNA 酶
● 加大的标记面及磨砂表面更容易标记
特性● 培养体积：1-5 ml
● 结合能力：高达 20 μg
● 质粒大小：最大到 25 kb
● 回收：高达 20 μg 。产量与质粒拷贝数、宿
主菌种类、培养体积及生长情况有关。
● 洗脱体积：≥30 μl
● 纯度：A260/280 和 A260/230 ≥ 1.8
● 操作时间：10.5 分钟的离心和孵育时间
● 下游应用：限制性酶切及其它酶学实
验、转化、稳定转染细胞株、DNA 测序、
PCR、标记、体外蛋白合成等。
Monarch™ 质粒小提试剂盒与市场一类厂商比较，产量、纯度和功能一致，但获得的质粒 DNA 浓度最高。
实验采用相同的 1.5 ml 过夜培养的菌液。根据各厂家提供的实验步骤操作，抽提结束后各取 1 μl 用 HindIII-HF (NEB #R3104) 线性化质粒，1% 的琼脂糖凝胶电泳。
N Q N Q N Q
2.7 kb 5.2 kb 10 kb
334.9 202.2 384.2 216.4 607.6 351.0
10.0 10.1 11.5 10.8 18.2 17.6
1.9 1.9 1.9 1.9 1.9 1.9
2.4 2.3 2.4 2.4 2.3 2.4
10.0
5.2
2.7
A260/280
A260/230
Conc. (ng/µl)
Total yield (µg)
N – NEB
Q – Qiagen
分别用 Monarch 质粒小提试剂盒和 Qiagen QIAprep® Spin Miniprep Kit抽提表达 GFP 的质粒（pEGFP-C2）。四个不同的细胞系（COS-7、HEK293、HeLa、Huh-7）在生长至 80-90% 时，用 100 ng 质粒，0.3 ul Lipofectamine 2000 和 10 μl Opti-MEM 进行转染。每个细胞系各做五个复孔，48 小时后用流式细胞仪各孔收集 2000 个细胞检测 GFP 的表达情况。GFP 的表达百分比用于衡量该细胞系的转染效率。
用 Monarch™ 质粒小提试剂盒抽提的 DNA，转染效率等于或优于 Qiagen QIAprep® Spin Miniprep Kit。
80
70
60
5040
30
2010
0Cos-7 HEK293 HeLa Huh-7
% G
FP-e
xpre
ssin
g ce
lls
NEBQiagen
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Monarch™ PCR & DNA Cleanup Kit (5 μg)Monarch PCR & DNA Cleanup Kit (5 μg) 可以用来从 PCR、酶切、连接和反转录等一系列酶促反应
中纯化 DNA。试剂盒提供的 DNA 清洗缓冲液可确保去除以下成分：酶、短小引物（≤25 nt）、
清洁剂和其它低分子量的反应组分（如核苷酸、DMSO、甜菜碱）。
Monarch™ DNA 纯化和胶回收试剂盒Monarch DNA 纯化试剂盒包括 DNA 胶回收试剂盒，以及 PCR 和 DNA 纯化试剂盒，可以快速可
靠地纯化得到高达 5 μg 高质量浓缩 DNA。该试剂盒用很少的孵育和离心时间完成结合、清洗、
洗脱流程。Monarch 离心柱的设计消除了液体的残留及其带来的污染风险，可以使洗脱体积低至
6 μl。Monarch 缓冲液经过优化，无需调节 pH 值。洗脱下来的 DNA 可以直接用于酶切、DNA 测序、
连接以及其它的酶操作实验。
Monarch™ DNA Gel Extraction KitMonarch DNA Gel Extraction Kit 是胶回收试剂盒，可以从琼脂糖凝胶中快速纯化 DNA。与其它厂
家试剂盒不同的是：融化的琼脂糖凝胶上柱前无需加入异丙醇，简化了操作步骤。
Monarch™ Gel Extraction 和 PCR & DNA Cleanup 试剂盒中改进的离心柱设计使洗脱体积可以低至 6 μl，同时消除了液体残留。
独特的锥形设计消除了液体残留，同时保证
洗脱体积低至 6 μl
使用更少的塑料，降低了对环境的污染
离心柱末端与真空抽滤设备兼容
实验准备了七种大小范围从 0.5 kb到 10 kb的 DNA 片段混合物。混合物的一半用 1% 的琼脂糖凝胶进行电泳，然后手工切下每个片段并分别使用 Monarch DNA Gel Extraction Kit 回收。每个片段全部的洗脱产物和剩下的 DNA 混合物重新进行琼脂糖凝胶电泳并比较结果。
Monarch™ DNA Gel Extraction Kit 可回收宽范围分子量 DNA
10 kb 6 kb 4 kb 3 kb
2 kb
1 kb
0.5 kb
Mixture
优势● 洗脱体积低至 6 μl
● 独特的离心柱设计消除液体和盐的残留
● 快速、方便的实验方案大大节省了时间
新品介绍
特性● 结合能力：高达 5 μg
● DNA 片段范围：50 bp 到 25 kb
● 回收效率：
DNA（50 bp – 10 kb）：70-90%
DNA（11 – 25 kb）：50-70%
● 洗脱体积：≥6 μl
● 纯度：A260/280 ≥ 1.8
● 操作时间：
胶回收：离心和孵育时间共 10 分钟
PCR 和 DNA 纯化：离心和孵育时间共
5 分钟
● 下游应用：连接、限制性酶切、标记和
其它的酶操作、文库构建及 DNA 测序
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www.neb-china.com
产品名称 货号 规格
Monarch DNA Gel Extraction Kit T1020S/L 50/250 preps
Monarch PCR & DNA Cleanup Kit T1030S/L 50/250 preps
Monarch Plasmid Miniprep Kit T1010S/L 50/250 preps
单独销售的离心柱
Monarch DNA Cleanup Columns T1034L 100 columns
Monarch Plasmid Miniprep Columns T1017L 100 columns
单独销售的 buffer
Monarch DNA Cleanup Binding Buffer T1031L 235 ml
Monarch DNA Wash Buffer T1032L 25 ml
Monarch DNA Elution Buffer T1016L 25 ml
Monarch Gel Dissolving Buffer T1021L 235 ml
Monarch Plasmid Lysis Buffer (B2) T1012L 54 ml (2 x 27ml)
Monarch Plasmid Neutralization Buffer (B3) T1013L 110 ml
Monarch Plasmid Resuspension Buffer (B1) T1011L 55 ml
Monarch Plasmid Wash Buffer 1 T1014L 54 ml (2 x 27ml)
Monarch Plasmid Wash Buffer 2 T1015L 30 ml
1 μg 的 3 kb 片段在 1% 的琼脂糖凝胶电泳后，用不同的试剂盒回收，采用试剂盒要求的最小体积洗脱。用 Nanodrop™ 测量洗脱得到的 DNA 浓度和纯度，最终根据该浓度和回收的体积计算出回收效率。
用 Monarch™ DNA Gel Extraction Kit 纯化的 DNA 跟市场一类厂商比较，纯度和效率一致，但浓度更高，更有利于下游实验的开展。
80
70
60
50
40
90
30
20
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0Monarch QIAquick MinElute
Ave
rage
% R
ecov
ery
200
175
150
125
100
75
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25
0Monarch QIAquick MinElute
Ave
rage
Con
cent
ratio
n (n
g/µl
)Monarch QIAquick® MinElute®
1.9+/-0.08 1.9+/-0.08 1.9+/-0.04
0.80+/-0.05 0.72+/-0.09 0.66+/-0.13
A260/280
Yield (µg)
Monarch QIAquick® MinElute®
144.9+/-9.6 25.7+/-3.1 73.8+/-14.2Conc. (ng/µl)
按照推荐的操作流程进行 DNA 纯化。用 1 μg 的 3 kb 片段做模板，加入 1 μM 引物，用 OneTaq® Quick-Load® 2X Master Mix (NEB #M0486) 进行扩增。DNA 分别用 20 μl （NEB）和 40 μl （Qiagen）洗脱液洗脱。洗脱产物总体积的一半用 5 个单位的 DraIII-HF (NEB#R3510) 酶切。酶切产物和剩余的洗脱产物，同未纯化的起始样品一起上样，1% 的琼脂糖凝胶电泳。
Monarch™ PCR & DNA Cleanup Kit (5 μg) 与市场一类厂商比较
A B C A B CA B C A B C
NEB Qiagen
A – Column loadB – Column elutionC – DraIII digest
Monarch™ 产品重磅上线，现推出有奖试用活动，详情见封底。
2016 年是 NEB（北京）服务中国客户的第十五个年头。新的一年，新的起点，不变的是 NEB 为您提供的优质产品和服务。值此新学期开始之际，
NEB 特别推出“NEB（北京）成立 15 周年系列特别活动”之新春开学促销季。
活动时间：即日起至 2016 年 5 月 31 日
本次促销精选的 140 余种内切酶，在随酶提供的 CutSmart® 统一缓冲液中具有 100% 活性，而且均可在 5~15 分钟完成省时酶切，即使过夜酶切也
能确保底物安全；在方便了双酶切反应的同时，又节省了实验时间，方便、高效、安全，一站式满足您的酶切实验需求。
AatII
R0117L 2,500 units ¥2,549 ¥1,912
R0117S 500 units ¥609 ¥457
R0117V 250 units ¥319 ¥239
AccI
R0161L 5,000 units ¥3,029 ¥2,272
R0161S 1,000 units ¥719 ¥539
R0161V 500 units ¥369 ¥277
AciI
R0551L 1,000 units ¥3,079 ¥2,309
R0551S 200 units ¥679 ¥509
R0551V 100 units ¥359 ¥269
AclI
R0598L 1,500 units ¥3,079 ¥2,309
R0598S 300 units ¥679 ¥509
R0598V 150 units ¥359 ¥269
AcuIR0641L 1,500 units ¥3,079 ¥2,309
R0641S 300 units ¥679 ¥509
AflII
R0520L 10,000 units ¥2,809 ¥2,107
R0520S 2,000 units ¥639 ¥479
R0520V 1,000 units ¥339 ¥254
AgeI-HFR3552L 1,500 units ¥3,079 ¥2,309
R3552S 300 units ¥709 ¥532
AhdI
R0584L 5,000 units ¥3,339 ¥2,504
R0584S 1,000 units ¥739 ¥554
R0584V 500 units ¥389 ¥292
AluI
R0137L 5,000 units ¥2,789 ¥2,092
R0137S 1,000 units ¥669 ¥502
R0137V 500 units ¥349 ¥262
AlwNI
R0514L 2,500 units ¥3,079 ¥2,309
R0514S 500 units ¥679 ¥509
R0514V 250 units ¥359 ¥269
ApaI
R0114L 25,000 units ¥3,029 ¥2,272
R0114S 5,000 units ¥689 ¥517
R0114V 2,500 units ¥359 ¥269
ApaLI
R0507L 12,500 units ¥3,079 ¥2,309
R0507M （高浓度 5X）12,500 units ¥3,079 ¥2,309
R0507S 2,500 units ¥679 ¥509
R0507V 1,250 units ¥359 ¥269
AscI
R0558L 2,500 units ¥3,079 ¥2,309
R0558S 500 units ¥679 ¥509
R0558V 250 units ¥359 ¥269
AvaI
R0152L 10,000 units ¥2,569 ¥1,927
R0152M （高浓度 5X）10,000 units ¥2,569 ¥1,927
R0152S 2,000 units ¥619 ¥464
R0152T （高浓度 5X）2,000 units ¥619 ¥464
R0152V 1,000 units ¥319 ¥239
AvaII
R0153L 10,000 units ¥2,569 ¥1,927
R0153M （高浓度 5X）10,000 units ¥2,569 ¥1,927
R0153S 2,000 units ¥619 ¥464
R0153V 1,000 units ¥319 ¥239
AvrII
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BaeIR0613L 1,250 units ¥3,079 ¥2,309
R0613S 250 units ¥679 ¥509
BamHI-HF
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R3136M （高浓度 5X）50,000 units ¥2,099 ¥1,574
R3136S 10,000 units ¥469 ¥352
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BbvI
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BlpI
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BpuEIR0633L 2,500 units ¥3,079 ¥2,309
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BsaAIR0531L 2,500 units ¥3,079 ¥2,309
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BsaHIR0556L 10,000 units ¥3,079 ¥2,309
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BsaXIR0609L 500 units ¥3,079 ¥2,309
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BseRI
R0581L 1,000 units ¥3,339 ¥2,504
R0581S 200 units ¥739 ¥554
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BsgIR0559L 250 units ¥3,079 ¥2,309
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BsiEIR0554L 5,000 units ¥3,079 ¥2,309
R0554S 1,000 units ¥679 ¥509
BslI
R0555L 5,000 units ¥3,079 ¥2,309
R0555S 1,000 units ¥679 ¥509
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产品名称 货号 规格 目录价（元） 促销价（元） 产品名称 货号 规格 目录价（元） 促销价（元）
优惠促销
新春开学促销季
9
BsmAI
R0529L 5,000 units ¥3,079 ¥2,309
R0529S 1,000 units ¥679 ¥509
R0529V 500 units ¥359 ¥269
BsmI
R0134L 2,500 units ¥2,789 ¥2,092
R0134S 500 units ¥669 ¥502
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BsoBIR0586L 50,000 units ¥3,079 ¥2,309
R0586S 10,000 units ¥679 ¥509
Bsp1286I
R0120L 2,500 units ¥2,789 ¥2,092
R0120S 500 units ¥639 ¥479
R0120V 250 units ¥339 ¥254
BspCNIR0624L 500 units ¥3,079 ¥2,309
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BspHI
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BsrBI
R0102L 5,000 units ¥2,789 ¥2,092
R0102S 1,000 units ¥669 ¥502
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BsrGI-HF
R3575L 5,000 units ¥3,079 ¥2,309
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BssHII
R0199L 2,500 units ¥2,789 ¥2,092
R0199M （高浓度 5X）2,500 units ¥2,789 ¥2,092
R0199S 500 units ¥669 ¥502
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BssKIR0592L 1,250 units ¥3,079 ¥2,309
R0592S 250 units ¥679 ¥509
BstBI
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BstEII-HF
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R3162M （高浓度 5X）10,000 units ¥2,549 ¥1,912
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BstUI
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R0518S 1,000 units ¥619 ¥464
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BstZ17IR0594L 5,000 units ¥3,079 ¥2,309
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Bsu36I
R0524L 5,000 units ¥3,079 ¥2,309
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BtgIR0608L 5,000 units ¥3,079 ¥2,309
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BtsCIR0647L 10,000 units ¥3,339 ¥2,504
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BtsαIR0667L 2,500 units ¥3,099 ¥2,324
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Cac8IR0579L 500 units ¥3,339 ¥2,504
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ClaI
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CspCIR0645L 2,500 units ¥3,339 ¥2,504
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CviAIIR0640L 1,000 units ¥3,079 ¥2,309
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DdeI
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DpnI
R0176L 5,000 units ¥2,789 ¥2,092
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DraI
R0129L 10,000 units ¥2,789 ¥2,092
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DraIII-HF
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DrdI
R0530L 1,500 units ¥3,079 ¥2,309
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R0530V 150 units ¥359 ¥269
EagI-HF
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R3505S 500 units ¥679 ¥509
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EarI
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R0528V 250 units ¥359 ¥269
Eco53kI
R0116L 5,000 units ¥2,549 ¥1,912
R0116S 1,000 units ¥589 ¥442
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EcoNI
R0521L 5,000 units ¥3,079 ¥2,309
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EcoO109IR0503L 10,000 units ¥3,079 ¥2,309
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EcoRI-HF
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R3101M （高浓度 5X）50,000 units ¥2,099 ¥1,574
R3101S 10,000 units ¥469 ¥352
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R3101V 5,000 units ¥239 ¥179
EcoRV-HF
R3195L 20,000 units ¥2,549 ¥1,912
R3195M （高浓度 5X）20,000 units ¥2,549 ¥1,912
R3195S 4,000 units ¥589 ¥442
R3195T （高浓度 5X）4,000 units ¥589 ¥442
R3195V 2,000 units ¥309 ¥232
Fnu4HI
R0178L 1,000 units ¥2,789 ¥2,092
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FseI
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R0588S 100 units ¥739 ¥554
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FspI
R0135L 2,500 units ¥2,789 ¥2,092
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HaeII
R0107L 10,000 units ¥2,549 ¥1,912
R0107S 2,000 units ¥609 ¥457
R0107V 1,000 units ¥319 ¥239
HaeIII
R0108L 15,000 units ¥2,549 ¥1,912
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R0108V 1,500 units ¥319 ¥239
10
产品名称 货号 规格 目录价（元） 促销价（元） 产品名称 货号 规格 目录价（元） 促销价（元）
优惠促销
新春开学促销季
HhaI
R0139L 10,000 units ¥2,549 ¥1,912
R0139S 2,000 units ¥589 ¥442
R0139V 1,000 units ¥309 ¥232
HindIII-HF
R3104L 50,000 units ¥2,099 ¥1,574
R3104M （高浓度 5X）50,000 units ¥2,099 ¥1,574
R3104S 10,000 units ¥469 ¥352
R3104T （高浓度 5X）10,000 units ¥469 ¥352
R3104V 5,000 units ¥239 ¥179
HinfI
R0155L 25,000 units ¥2,549 ¥1,912
R0155M （高浓度 5X）25,000 units ¥2,549 ¥1,912
R0155S 5,000 units ¥609 ¥457
R0155T （高浓度 5X）5,000 units ¥609 ¥457
R0155V 2,500 units ¥319 ¥239
HinP1I
R0124L 10,000 units ¥2,789 ¥2,092
R0124S 2,000 units ¥669 ¥502
R0124V 1,000 units ¥349 ¥262
HpaII
R0171L 10,000 units ¥2,569 ¥1,927
R0171M （高浓度 5X）10,000 units ¥2,569 ¥1,927
R0171S 2,000 units ¥619 ¥464
R0171V 1,000 units ¥319 ¥239
HphI
R0158L 5,000 units ¥2,569 ¥1,927
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Hpy166IIR0616L 5,000 units ¥3,079 ¥2,309
R0616S 1,000 units ¥689 ¥517
HpyAVR0621L 500 units ¥3,339 ¥2,504
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HpyCH4IVR0619L 2,500 units ¥3,079 ¥2,309
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HpyCH4VR0620L 500 units ¥3,079 ¥2,309
R0620S 100 units ¥679 ¥509
KpnI-HF
R3142L 20,000 units ¥2,569 ¥1,927
R3142M （高浓度 5X）20,000 units ¥2,569 ¥1,927
R3142S 4,000 units ¥619 ¥464
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MboI
R0147L 2,500 units ¥3,029 ¥2,272
R0147M （高浓度 5X）2,500 units ¥3,029 ¥2,272
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MnlI
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MseI
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MspI
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R0106S 5,000 units ¥619 ¥464
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MwoI
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NciI
R0196L 10,000 units ¥2,789 ¥2,092
R0196S 2,000 units ¥639 ¥479
R0196V 1,000 units ¥339 ¥254
NcoI-HF
R3193L 5,000 units ¥2,549 ¥1,912
R3193M （高浓度 5X）5,000 units ¥2,549 ¥1,912
R3193S 1,000 units ¥619 ¥464
R3193V 500 units ¥319 ¥239
NdeI
R0111L 20,000 units ¥2,789 ¥2,092
R0111S 4,000 units ¥699 ¥524
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NgoMIV
R0564L 5,000 units ¥3,079 ¥2,309
R0564S 1,000 units ¥679 ¥509
R0564V 500 units ¥359 ¥269
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R3131L 5,000 units ¥2,789 ¥2,092
R3131M （高浓度 5X）5,000 units ¥2,789 ¥2,092
R3131S 1,000 units ¥669 ¥502
R3131V 500 units ¥349 ¥262
NlaIII
R0125L 2,500 units ¥2,789 ¥2,092
R0125S 500 units ¥669 ¥502
R0125V 250 units ¥349 ¥262
NotI-HF
R3189L 2,500 units ¥3,029 ¥2,272
R3189M （高浓度 5X）2,500 units ¥3,029 ¥2,272
R3189S 500 units ¥719 ¥539
R3189V 250 units ¥369 ¥277
NruI-HF
R3192L 5,000 units ¥2,549 ¥1,912
R3192S 1,000 units ¥589 ¥442
R3192V 500 units ¥309 ¥232
NsiI-HF
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R3127V 500 units ¥349 ¥262
NspIR0602L 1,250 units ¥3,079 ¥2,309
R0602S 250 units ¥679 ¥509
PacI
R0547L 1,250 units ¥3,079 ¥2,309
R0547S 250 units ¥679 ¥509
R0547V 125 units ¥359 ¥269
PaeR7I
R0177L 10,000 units ¥2,549 ¥1,912
R0177S 2,000 units ¥589 ¥442
R0177V 1,000 units ¥309 ¥232
PflFIR0595L 10,000 units ¥3,079 ¥2,309
R0595S 2,000 units ¥679 ¥509
PmeI
R0560L 2,500 units ¥3,339 ¥2,504
R0560S 500 units ¥739 ¥554
R0560V 250 units ¥389 ¥292
PmlIR0532L 10,000 units ¥3,079 ¥2,309
R0532S 2,000 units ¥679 ¥509
11
产品名称 货号 规格 目录价（元） 促销价（元） 产品名称 货号 规格 目录价（元） 促销价（元）
PmlI R0532V 1,000 units ¥359 ¥269
PpuMIR0506L 2,500 units ¥3,079 ¥2,309
R0506S 500 units ¥679 ¥509
PshAI
R0593L 5,000 units ¥3,079 ¥2,309
R0593S 1,000 units ¥679 ¥509
R0593V 500 units ¥359 ¥269
PstI-HF
R3140L 50,000 units ¥2,789 ¥2,092
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R3140S 10,000 units ¥639 ¥479
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R3140V 5,000 units ¥339 ¥254
PvuI-HF
R3150L 2,500 units ¥3,029 ¥2,272
R3150S 500 units ¥709 ¥532
R3150V 250 units ¥369 ¥277
PvuII-HF
R3151L 25,000 units ¥2,549 ¥1,912
R3151M （高浓度 5X）25,000 units ¥2,549 ¥1,912
R3151S 5,000 units ¥589 ¥442
R3151V 2,500 units ¥309 ¥232
RsaI
R0167L 5,000 units ¥2,549 ¥1,912
R0167S 1,000 units ¥589 ¥442
R0167V 500 units ¥309 ¥232
SacI-HF
R3156L 10,000 units ¥2,549 ¥1,912
R3156M （高浓度 5X）10,000 units ¥2,549 ¥1,912
R3156S 2,000 units ¥589 ¥442
R3156V 1,000 units ¥309 ¥232
SacII
R0157L 10,000 units ¥2,549 ¥1,912
R0157S 2,000 units ¥619 ¥464
R0157V 1,000 units ¥319 ¥239
SalI-HF
R3138L 10,000 units ¥2,549 ¥1,912
R3138M （高浓度 5X）10,000 units ¥2,549 ¥1,912
R3138S 2,000 units ¥619 ¥464
R3138T （高浓度 5X）2,000 units ¥619 ¥464
R3138V 1,000 units ¥319 ¥239
SapIR0569L 1,250 units ¥3,019 ¥2,264
R0569S 250 units ¥749 ¥562
SbfIR0642L 2,500 units ¥3,339 ¥2,504
R0642S 500 units ¥739 ¥554
SbfI-HFR3642L 2,500 units ¥3,339 ¥2,504
R3642S 500 units ¥739 ¥554
ScaI-HF
R3122L 5,000 units ¥2,789 ¥2,092
R3122M （高浓度 5X）5,000 units ¥2,789 ¥2,092
R3122S 1,000 units ¥639 ¥479
R3122V 500 units ¥339 ¥254
SfiI
R0123L 15,000 units ¥2,789 ¥2,092
R0123S 3,000 units ¥689 ¥517
R0123V 1,500 units ¥349 ¥262
SfoIR0606L 2,500 units ¥3,079 ¥2,309
R0606S 500 units ¥679 ¥509
SmaI
R0141L 10,000 units ¥2,549 ¥1,912
R0141S 2,000 units ¥619 ¥464
R0141V 1,000 units ¥319 ¥239
SpeI
R0133L 2,500 units ¥2,789 ¥2,092
R0133M （高浓度 5X）2,500 units ¥2,789 ¥2,092
R0133S 500 units ¥669 ¥502
R0133V 250 units ¥349 ¥262
SpeI-HF
R3133L 2,500 units ¥2,789 ¥2,092
R3133M （高浓度 5X）2,500 units ¥2,789 ¥2,092
R3133S 500 units ¥669 ¥502
R3133V 250 units ¥349 ¥262
SphI-HF
R3182L 2,500 units ¥2,789 ¥2,092
R3182M （高浓度 5X）2,500 units ¥2,789 ¥2,092
R3182S 500 units ¥669 ¥502
R3182V 250 units ¥349 ¥262
SspI-HF
R3132L 5,000 units ¥2,789 ¥2,092
R3132M （高浓度 5X）5,000 units ¥2,789 ¥2,092
R3132S 1,000 units ¥689 ¥517
R3132V 500 units ¥349 ¥262
StuI
R0187L 5,000 units ¥2,549 ¥1,912
R0187M （高浓度 5X）5,000 units ¥2,549 ¥1,912
R0187S 1,000 units ¥619 ¥464
R0187V 500 units ¥319 ¥239
StyD4IR0638L 1,000 units ¥3,079 ¥2,309
R0638S 200 units ¥679 ¥509
StyI-HF
R3500L 15,000 units ¥3,339 ¥2,504
R3500S 3,000 units ¥739 ¥554
R3500V 1,500 units ¥389 ¥292
TaqαI
R0149L 20,000 units ¥2,549 ¥1,912
R0149M （高浓度 5X）20,000 units ¥2,549 ¥1,912
R0149S 4,000 units ¥609 ¥457
R0149T （高浓度 5X）4,000 units ¥609 ¥457
R0149V 2,000 units ¥319 ¥239
TfiIR0546L 2,500 units ¥3,079 ¥2,309
R0546S 500 units ¥679 ¥509
TseIR0591L 375 units ¥3,079 ¥2,309
R0591S 75 units ¥679 ¥509
TspMIR0709L 1,000 units ¥3,339 ¥2,504
R0709S 200 units ¥769 ¥577
TspRI
R0582L 5,000 units ¥3,339 ¥2,504
R0582S 1,000 units ¥739 ¥554
R0582V 500 units ¥389 ¥292
Tth111I
R0185L 2,000 units ¥2,549 ¥1,912
R0185S 400 units ¥589 ¥442
R0185V 200 units ¥309 ¥232
XbaI
R0145L 15,000 units ¥3,029 ¥2,272
R0145M （高浓度 5X）15,000 units ¥3,029 ¥2,272
R0145S 3,000 units ¥689 ¥517
R0145T （高浓度 5X）3,000 units ¥689 ¥517
R0145V 1,500 units ¥359 ¥269
XhoI
R0146L 25,000 units ¥3,029 ¥2,272
R0146M （高浓度 5X）25,000 units ¥3,029 ¥2,272
R0146S 5,000 units ¥689 ¥517
R0146V 2,500 units ¥359 ¥269
XmaI
R0180L 2,500 units ¥2,789 ¥2,092
R0180M （高浓度 5X）2,500 units ¥2,789 ¥2,092
R0180S 500 units ¥669 ¥502
R0180V 250 units ¥349 ¥262
XmnI
R0194L 5,000 units ¥2,549 ¥1,912
R0194S 1,000 units ¥619 ¥464
R0194V 500 units ¥319 ¥239
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2 金牌 T4 DNA 连接酶 7 折特惠
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T4 DNA Ligase
M0202L 100,000 units ¥3,029 ¥2,120 M0202M （高浓度 ）100,000 units ¥3,029 ¥2,120 M0202S 20,000 units ¥739 ¥517 M0202T （高浓度 ）20,000 units ¥739 ¥517 M0202V 10,000 units ¥389 ¥272
Quick Ligation™ KitM2200L 150 rxns ¥4,569 ¥3,198 M2200S 30 rxns ¥1,009 ¥706 M2200V 15 rxns ¥509 ¥356
Blunt/TA Ligase Master MixM0367L 250 rxns ¥4,569 ¥3,198 M0367S 50 rxns ¥1,149 ¥804
Instant Sticky-end Ligase Master MixM0370L 250 rxns ¥4,569 ¥3,198 M0370S 50 rxns ¥1,149 ¥804
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Q5® High-Fidelity DNA PolymeraseZ1611L*
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Q5® High-Fidelity PCR KitE0555L 200 rxns ￥2,119 ￥1,483 E0555S 50 rxns ￥629 ￥440
4 Monarch™ 新品上市 6.5 折重磅推新
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Monarch Plasmid Miniprep KitT1010S 50 preps ¥959 ¥623 T1010L 250 preps ¥4,099 ¥2,664
Monarch DNA Gel Extraction KitT1020S 50 preps ¥1,039 ¥675 T1020L 250 preps ¥4,859 ¥3,158
Monarch PCR & DNA Cleanup KitT1030S 50 preps ¥1,099 ¥714 T1030L 250 preps ¥5,149 ¥3,347
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NEBNext® Ultra™ II DNA Library Prep Kit for Illumina®
Z1612L* 96 reactions¥25,959
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Color Protein Standard, Broad Range (11-245 kDa)P7712L 500 gel lanes ¥5,699 ¥2,850 P7712S 100 gel lanes ¥1,199 ¥600
高效经典的 NEB 金牌 T4 DNA 连接酶系列产品，经过数十年全球各个实验室验证，广受信任和青睐，为连接实验的首选。
Q5® 超保真 DNA 聚合酶，以其无与伦比的扩增保真性（＞ Taq 酶的 100 倍）及其超低的错配率，配以 NEB 高品质 dNTP，建立了高保真聚合酶的新标准。
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为 4-、 5-、 6-bp 的酶切实验提供业内最宽泛、最高效的选择。
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底物 DNA，并且即使过夜酶切也不会产生星号活性。
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内切酶—能够切割基因组中稀有的识别
位点，因此在您的克隆实验中非常有用。
IIs 型内切酶在其识别序列以外进行切割，因此能
够在 Golden Gate 一类基因组装方法中独放异彩。
切刻内切酶在双链 DNA 中的一条链而非
两条链上产生“切刻”，它们通常应用
于 SDA 和绘制光学酶切图谱的实验中。
NEB 独有的高保真（HF®）内切酶，杜绝星号活性，并能
够在 CutSmart® 缓冲液中快速切割您的 DNA（5-15 分钟）。
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经典回顾经典回顾
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选择 NEB DNA 连接酶的 5 大理由● 快速连接节省时间
● 确保成功连接平末端，T/A 或粘性末端的底物
● 最大化转化效率
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在研究和生产分子生物学工具酶的领域中，NEB 具有超过 40 年的经验。目前 NEB 可以提供种类齐全、品质超纯、表现更优的 DNA 连接酶，以及
更方便的预混液形式和试剂盒。它们为简化您的克隆实验奠定了基础。
NEB DNA 连接酶系列产品
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粘性末端室温 10 分钟完成连接。
NEB 高纯度 T4 DNA 连接酶
107
/µg
106
105
104
103
0 5 10 15
NEB 快速连接™ 试剂盒
使用快速连接试剂盒，在室温（25 ℃）反应 5 分钟，即可完成 DNA 粘
性末端或平末端的连接反应。特别提供：
快速末端平齐化和快速连接盒（#E0542），构建克隆反应的效率更高，同时节省 15 %的开支；针对 NGS 建库流程，另有专用 NEBNext 超快速连接模块（#E7445）可选
NEB 瞬时粘性末端连接酶预混液
最快的连接反应就是瞬时连接！NEB 瞬时粘性末端连接酶预混液，由超
纯 T4 DNA 连接酶、连接增强剂和优化的反应缓冲液组成，无需孵育时
间即可瞬时完成连接。
NEB 平末端/TA 连接酶预混液确保成功连接平末端、粘性末端以及单碱基突出（T/A）末端。
NEB 电转连接酶电击转化时，可首选 NEB 专门配置的电转连接酶，平末端或 T/A 克隆
都可以在 60 分钟或者更短的时间内完成。
连接反应中包含 20 ng 经 SacI/SphI 消化的 pUC19 载体以及 3 倍摩尔过量的 1.6 kb 插入片段。该插入片段来源于不同质粒，其末端与载体末端互补。用瞬时粘性末端连接酶预混液建立反应体系。无需额外的孵育间，迅速取 2 μl 连接产物转化到50 μl NEB 10-beta 大肠杆菌感受态（NEB #C3019）中。从 1 ml 细胞培养液中取 50 μl 涂到选择性培养板上，37°C 孵育过夜。结果显示生长了数百个菌落。
快速连接进程曲线：LITMUS 28i 载体经 EcoRV 切割（平齐末端）或 HindIII 切割（粘性末端）后，用小牛肠碱性磷酸酶（CIP）处理，胶回收纯化。插入片段来自 HaeIII 消化的 φX174 DNA 产物（平齐末端）或 HindIII 消化的 λDNA 产物（粘性末端），插入片段和载体的比例为 3:1，使用快速连接试剂盒进行连接。连接产物转化入化学方法制备的大肠杆菌感受态细胞，在 LB-amp 平板上 37℃ 过夜培养。
等量的 T4 DNA 连接酶上样用银染法检测纯度。可见 NEB 的 T4 DNA 连接酶纯度最高，没有杂蛋白污染。Marker M 是 NEB 的 Broad Range Protein Marker（NEB #P7702）。
连接反应体系中含有等量的（20 ng 载体和 3 倍摩尔过量的插入片段）平末端（A）或者 T/A 克隆（B）或粘性末端（C）的载体/插入片段，用电转连接酶连接，连接时间如图所示。热失活连接酶之后，分别取 2μl 的连接反应产物并直接用 NEB 10-beta 电转级 E.coli 感受态（NEB #C3020）转化。取 50μl 等份产物（某些情况下需要稀释）涂在选择性培养板上，37℃ 培养过夜。计算克隆数，调整稀释度并绘图。
分别连接平末端或 T/A 末端的载体及插入片段。根据厂商建议建立预混反应体系。等量连接后的 DNA 转化到 NEB 10-beta 大肠杆菌感受态细胞（NEB #C3019）中，并且一式三份涂板培养观察。计算转化结果求平均值作图，用百分比显示连接效率。结果显示 NEB 的平末端 /TA 连接酶预混液连接效果最佳。
瞬时粘性末端连接酶预混液提供无需孵
育的高效连接酶
平末端 /TA 连接酶预混液比其他同类产
品效果更好
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经典回顾
订购信息
DNA 连接酶选择指南NEB 提供品种最全的 DNA 连接酶。对于一项实验，您可以有多个选择，下述表格标注出了各种连接酶的特性。
平末端/TA 连接酶预混液
瞬时粘性末端连接酶预
混液电转
连接酶™T4 DNA 连接酶
快速连接™ 试剂盒
T3 DNA 连接酶
T7 DNA 连接酶
E. coli DNA 连接酶
Taq DNA 连接酶
9oN™ DNA 连接酶
NEBNEXT® 快速连接
模块SPLINTR® 连接酶
DNA 应用
连接粘性末端 «« ««« «« «« ««« «« «« « « «
连接平末端 ««« « «« «« ««« ««
T/A 克隆 ««« « «« «« «« « «
电转化 ««« ««
仅连接粘性末端 «««
dsDNA 切刻修复 ««« ««« ««« ««« ««« ««« ««« ««« ««« «««
构建高丰度克隆文库 «« «« «« «««
连接酶检测反应和连接酶链式反应 ««« «««
连接杂交到 RNA 上的 DNA «««
DNA/RNA 应用
连接双链结构中 RNA 和 DNA «« ««
NGS 应用
在 NGS 文库制备中连接 dsDNA 和 dsDNA ▲ ▲ ▲ ▲
特性
盐离子耐受力（＞ 2X T4 DNA 连接酶） 4
15 分钟或更快速连接 4 4 4 4 4 4 4 4 4
预混液形式 4 4 4
热稳定 4 4
重组酶 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4
«««最佳选择，推荐该应用««效果良好 « 可以完成该实验，但不推荐使用 ▲ 根据 NGS 反应步骤，确定最佳用酶
产品名称 货号 规格
T4 DNA 连接酶 M0202V/S/T/L/M 10,000/20,000/100,000 units
平末端 /TA 连接酶预混液 M0367S/L 50/250 reactions
瞬时粘性末端连接酶预混液 M0370S/L 50/250 reactions
快速连接™ 试剂盒 M2200V/S/L 15/30/150 reactions
NEBNext® 超快速连接模块 E7445S/L 24/96 reactions
电转连接酶 M0369S 50 reactions
产品名称 货号 规格
T3 DNA 连接酶 M0317S/L 100,000/750,000 units
T7 DNA 连接酶 M0318S/L 100,000/750,000 units
E.coli DNA 连接酶 M0205S/L 200/1,000 units
Taq DNA 连接酶 M0208V/S/L 1,000/2,000/10,000 units
9°N™ DNA 连接酶 M0238S/L 2,500/12,500 units
SplintR® 连接酶 M0375S/L 1,250/6,250 units
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特别推荐
NEBNext rRNA 去除试剂盒（人/小鼠/大鼠）采用 RNaseH 的方法来去除人总 RNA 样品中的细
胞质（5S rRNA，5.8S rRNA，18S rRNA 和 28S rRNA）及线粒体核糖体 rRNA（12S rRNA 和 16S
rRNA）。本产品适用于无降解的 RNA 样品和有降解的 RNA 样品（e.g. FFPE RNA）。rRNA 去除
后的 RNA 适用于 RNA-Seq、随机引物 cDNA 合成或其它下游 RNA 分析应用。
NEBNext® rRNA 去除试剂盒（人/小鼠/大鼠）优势：
● 一种试剂盒适用于所有 RNA 样本：
FFPE RNA（有降解的）或高质量的
（未降解的）RNA总的起始量范围
在 10 ng 到 1 μg
● 高效去除 95% 的 rRNA，从而获得更
多的有效测序序列
● 通 过 保 留 非 编 码 的 和 不 完 整 的
R NA，获得更加全面的转录组数
据，避免了oligo d(T) poly(A) mRNA
富集方法而造成的损失
● 适用于人、小鼠和大鼠的样本
● 能够轻松的整合到下游随机引物介
导的 cDNA 合成应用中
● 全面超越原始自制流程：“RNase
H法”1,2去除 rRNA 是一种值得信赖
的、简易的并通过 NGS 验证的方法。
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在售的 NEBNext 试剂清单，包括各
种适用于 Illumina®、Ion Torrent™、
SOLiD™ 和 454™ 平台的 DNA、RNA
和 Small RNA 的试剂盒。
1. Adiconis, X. et al. (2013). Nature
Methods 10; 623-629.
2. Morlan, J.D. et al. (2012). PLoS One 7,
e42882.
rRNA 被核糖核酸酶 H (RNase H) 降解
探针被 DNase I 降解然后纯化
结合单链 DNA 探针
rRNA
总 RNA
rRNA 去除后的 RNA
核糖核酸酶 H （RNase H）
单链DNA 探针
DNase I
rRNA （红色）占总 RNA 80% 或更多
单链 DNA 探针特异性的和 rRNA 分子杂交结合
RNase H 降解 杂交的 RNA (rRNA).
DNase I 降解 DNA 探针
无 rRNA 的 RNA（蓝）被富集
图 1. NEBNext rRNA 去除试剂盒工作流程
图 2. NEBNext rRNA 去除试剂盒工作流程时间表
Kit
工作流程
时间起始量 时间
纯化DNase I 纯化RNase酶切
RNA ／探针杂交结合
手动操作 手动操作
共计 共计10 ng － 1 µg
2 min
22 min 32 min 27 min 1 hr.,53 min32 min
2 min 2 min 2 min 8 min
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图 3. NEBNext rRNA 去除试剂盒能够有效去除无降解及有降解的 RNA（FFPE）样品中
的 rRNA，并保留编码及非编码转录本。
图 5. rRNA 去除与未去除文库中转录本表达的相关性
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
4.55 3.77 0.67
91.00
UHR
78.07
12.37
8.65
0.91
UHR
48.22
17.77
33.02
1.00
UHR
31.71
18.96
48.22
1.11
20.59
17.54
61.15
0.72
Read
s的
百分
比
核糖体的
基因间区的
内含子的
外显子的
1 年 FFPE 10 年 FFPE 未去除 poly（A） mRNA 富集 rRNA 去除 rRNA 去除 rRNA 去除
RNA 文库以人通用参考总 RNA（UHR，Agilent） 或乳腺癌 FFPE RNA 样品（获取时间为 1 年和 10 年）为起始材料构建。RNA 样品用 NEBNext Poly(A) mRNA 磁性分离模块（NEB #E7490）或者 NEBNext rRNA 去除试剂盒处理。RNA 文库使用NEBNext Ultra 定向文库制备试剂盒（NEB #E7420）制备。Reads 比对到 hg19 基因组上，reads 的分布情况用 Picard RNA-seq Metrics 确定。用 rRNA 去除的方法制备的文库得到的 rRNA reads 与使用 poly（A） mRNA 富集方法得到的 rRNA reads 一样低，且能够保留更多的非编码 reads。即使是 FFPE RNA 样品，rRNA 去除的方法也能够有很好的效率。
以用 NEBNext rRNA 去除试剂盒处理或未处理的 UHR RNA（Agilent）及乳腺癌 FFPE RNA（获取时间为 1 年及 10 年）为起始样本制备文库。所有文库制备均使用 NEBNext Ultra 定向 RNA 文库制备试剂盒（NEB #E7420）。转录本的比对、组装及定量使用 TopHat2 及 Cufflinks 进行。FPKM （Fragments Per Kilobase of transcript per Million mapped reads）相关性分析显示 rRNA 去除和没有去除的文库中转录本表达的相关性很好（R>0.93）。NEBNext rRNA 去除试剂盒不会影响转录本表达水平的测定。
图 4. 对比无降解或有降解 RNA 样品使用 NEBNext rRNA 去除试剂盒的去除效率
分别使用以下三种 rRNA 去除试剂盒对无降解人通用参考总 RNA（UHR，Agilent，RIN>9）及有降解的 UHR 总 RNA（RIN<3）进行 rRNA 去除，三种试剂盒分别是 NEBNext rRNA 去除试剂盒、Ribo-Zero Magnetic Gold 试剂盒（人/小鼠/大鼠）（Epicentre）及 TruSeq Stranded Total RNA Kit with Ribo-Zero Gold (Illumina) 中提供的 Ribo-Zero Gold 试剂。rRNA 去除后的 RNA 文库使用 NEBNext Ultra 定向 RNA 文库制备试剂盒 (NEB #E7420 绿色及蓝色柱形图) 或者 TruSeq Stranded Total RNA Kit with Ribo-Zero Gold （Illumina, 红色柱形图）制备。总 rRNA 比对 reads 情况用 Bowtie 2.0 （local, sensitive） 确定。无论 RNA 样品的质量如何，NEBNext rRNA 去除的文库残留的 rRNA 比例均为最小。
0
2
4
6
8
10
12
14
16
18
20
NEBNextrRNA Depletion
Ribo-Zero Gold TruSeq Strandedwith Ribo-Zero Gold
rRN
A R
eads
(%)
未降解的 RNA有降解的 RNA
Non-depleted Log10 (FPKM)
Dep
lete
d Lo
g 10 (F
PKM
)
UHR RNAn=19,872R=0.96
Non-depleted Log10 (FPKM)
1-Year FFPE RNAn=19,000R=0.95
Dep
lete
d Lo
g 10 (F
PKM
)
10-Year FFPE RNAn=18,790R=0.93
Dep
lete
d Lo
g 10 (F
PKM
)
Non-depleted Log10 (FPKM)
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NEBNext rRNA Depletion Kit ( 人 / 小鼠 / 大鼠 ) E6310S/L/X 6/24/96 rxns
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