Modèle d’allergie alimentaire et respiratoire chez la souris
222
R
A
E
L
Grégory BOUCHAUD, PhD, Département ALIM H, INRA
Philippe AUBERT, IE, IMAD, INSERM U913
Prévalence : 3,34 % de la population (khalfaoui et al., 2003)
Aliments impliqués : 90 % des allergies alimentaires chez l'enfant : lait, oeuf, blé, soja, arachide et poisson (Burks et al., 2011)
Allergies alimentaires (AA)
Symptômes : la peau (dermatite atopique), appareil respiratoire (asthme), douleurs abdominales, anaphylaxie.
Prévalence : 10 % de la population mondiale
Allergènes: acariens, pollens, poils d’animaux
Symptômes : Uniquement respiratoire (asthme, rhinite)
Allergies respiratoires (AR)
Uniquement respiratoire (asthme, rhinite)
- Hyperactivité bronchique
- Inflammation
- Bronchoconstriction.
Marche atopique (MA)
Marche atopique : Transfert de symptômes d’origine alimentaire(dermatite, AA) à des symptômes d’origine respiratoires
(asthme, rhinite)
Effet d’une allergie alimentaire sur la survenue et le développement de l’asthme allergique
Projet
Mise au point d’un modèle d’allergie successive mimant la marche Mise au point d’un modèle d’allergie successive mimant la marche atopique : Recherche de biomarqueurs de prédisposition et étude des
mécanismes immunologiques.
modèle : Oeuf et acarien
Résultats: Physiologie pulmonaire
Mesure de l’hyper-réactivité bronchique (pléthysmographie)
Résultats: Physiologie pulmonaire
Mesure de l’hyper-réactivité bronchique (plethysmographie)
L’allergie alimentaire augmente l’hyper-réactivité bronchique dans l’asthme allergique aux acariens au cours de la marche atopique.
Bihouée T, Bouchaud G and Chesné J et al Resp. Research 2014
Résultats: Physiologie pulmonaire
Mesure de l’hyper-réactivité bronchique (flexivent)
6
8
10 CTL
RAFA+RA
FA**
L’allergie alimentaire augmente l’hyper-réactivité bronchique dans l’asthme allergique aux acariens au cours de la marche atopique.
Bihouée T, Bouchaud G and Chesné J et al Resp. Research 2014
0 5 10 15 200
2
4
métacholine (mg/ml)
Résultats: Inflammation
Mesure de l’infiltrat cellulaire dans les lavages broncho-alvéolaires et les poumons.
L’allergie alimentaire augmente l’infiltrat cellulaire et en particulier l’éosinophilie dans l’asthme allergique aux acariens au cours de la
marche atopique. Bihouée T, Bouchaud G and Chesné J et al Resp. Research 2014
double allergies et fonctions digestives:
� motricité intestinale
Résultats: Physiologie intestinale
� perméabilité intestinale
Gavage rouge carmin (T0)
Résultats: Physiologie intestinale
Caractérisation de la motricité intestinale in vivo
� Temps de transit total (oro-anal):
Emission 1ère fèces rouge (T1)
Temps de transit total
Gavage rouge carmin (T0)
Résultats: Physiologie intestinale
Caractérisation de la motricité intestinale in vivo
� Temps de transit total (oro-anal):
Emission 1ère fèces rouge (T1)
Temps de transit total
Temps de transit total est semblable dans les 4 groupes
� Évaluation du transit colique
Animal
Relevé des fecesCage
Nombre fèces émises
Résultats: Physiologie intestinale
Caractérisation de la motricité intestinale in vivo
Relevé des feces(2Heures)
Cage individuelle
Caractérisation des fèces
Poidsfrais
Poidssec
% humidité
Nombre feces émises
20
CTLFARA
Résultats: Physiologie intestinale
� Évaluation du transit colique
Caractérisation de la motricité intestinale in vivo
0 15 30 45 60 75 90 105 1200
5
10
15
RAFA+RA
time (min)
**
Nombre feces émises % humidité
20
CTLFARA
Résultats: Physiologie intestinale
� Évaluation du transit colique
Caractérisation de la motricité intestinale in vivo
Le transit colique et le % d’humidité dans les fèces est semblable dans les 2 groupes (FA et RA+FA)
0 15 30 45 60 75 90 105 1200
5
10
15
RAFA+RA
time (min)
**
la motricité intestinale : conclusion
� Le transit intestinal global n’est pas modifié
Résultats: Physiologie intestinale
� Le transit colique est:
- chez les FA et FA+RA / aux CT et au RA.
- semblable entre FA et FA+RA
� Le % d’humidité dans les feces est semblable
Résultats: Physiologie intestinale
Caractérisation de la perméabilité intestinale in vivo et ex vivo
� Évaluation de la perméabilité in vivo
- Transcellulaire (HRP, 40 KDa)
- Paracellulaire (acide sulfonique-FITC, 400 Da)
Résultats: Physiologie intestinale
Caractérisation de la perméabilité intestinale in vivo et ex vivo
gavage
� Évaluation de la perméabilité in vivo
- Transcellulaire (HRP, 40 KDa)
- Paracellulaire (acide sulfonique-FITC, 400 Da)
Prélèvement sanguinMesure de la fluorescence
(Acide sulfonique)Et
Mesure de l’activité enzymatique(HRP)
Perméabilité in vivo
gavage
1 heure
Perméabilité paracellulaire
� Évaluation de la perméabilité in vivo
Résultats: Physiologie intestinale
Caractérisation de la perméabilité intestinale in vivo et ex vivo
la perméabilité paracell. est supérieure chez les FA et les FA+RA / au CT et RA
la perméabilité paracell. est semblable chez les souris FA et FA+RA
Perméabilité paracellulaire
Perméabilité transcellulaire
� Évaluation de la perméabilité in vivo
Résultats: Physiologie intestinale
Caractérisation de la perméabilité intestinale in vivo et ex vivo
la perméabilité transcell. est semblable entre les 4 groupes
- Transcellulaire (HRP, 40 KDa)
- Paracellulaire (acide sulfonique-FITC, 400 Da)
Chambre de Ussing
� Évaluation de la perméabilité ex vivo : jéjunum et colon proximal
Résultats: Physiologie intestinale
Caractérisation de la perméabilité intestinale in vivo et ex vivo
Pôle apical(lum. Intest.)
Pôle basolatéral(compart. sang.)
Chambre de Ussing
Muqueuse intestinale
Perméabilité paracellulaire
� Évaluation de la perméabilité ex vivo : jéjunum
Résultats: Physiologie intestinale
Caractérisation de la perméabilité intestinale in vivo et ex vivo
la perméabilité paracellulaire est supérieure chez les souris FA+RA / au souris RA au niveau du jéjunum
Perméabilité paracellulaire Perméabilité transcellulaire
� Évaluation de la perméabilité ex vivo : jéjunum
Résultats: Physiologie intestinale
Caractérisation de la perméabilité intestinale in vivo et ex vivo
la perméabilité transcellulaire est semblable entre les 4 groupes
la perméabilité paracellulaire est supérieure chez les souris FA+RA / au souris RA au niveau du jéjunum
la perméabilité intestinale : conclusion
� La perméabilité paracellulaire in vivo est:
- chez les FA et FA+RA / au CT et RA.
Résultats: Physiologie intestinale
- significativement chez les FA+RA / aux RA.
� La perméabilité transcellulaire n’est pas modifiée in et ex vivo
- significativement chez les FA+RA / aux RA.
� La perméabilité paracellulaire du jéjunum est:
- significativement chez les FA+RA / aux RA.
- est semblable chez les FA et les FA+RA
Conclusion
L’allergie alimentaire influe sur le développement de l’asthme allergique
Au niveau physiologique:- Augmentation de l’hyper-réactivité bronchique
- Perturbation de la physiologie intestinale
Au niveau cellulaire- Augmentation de l’infiltrat cellulaire pulmonaire
- Augmentation des marqueurs de l’allergie (IgE, IgG, Histamine)
Remerciement
Equipe Allergie
Sandra Denery
Marie Bodinier
IMAD, INSERM U913
Michel Neunlist
INSERM U1087
Antoine Magnan
David Lair
Tiphaine Bihouée-Roussey
Marie-Aude Cheminant