TRANSFUSION
Groupes sanguins érythrocytaires
(système ABO, système RH et système KELL
Les examens en immuno-hématologie
� 1900 Landsteiner découvre le 1er système des groupes sanguins : le système ABO
� 1940 valide le système Rhésus
� 1952 Dausset met en évidence le système HLA des GB
Les groupes sanguins érythrocytaires
� Les groupes sanguins érythrocytaires sont déterminés pas des antigènes présents (ou non) à la surface des globules rouges
� Certains antigènes sont situés dans la Mb lipidique (Rhésus), d’autres dans les glycolipides sur la face externe de la Mb du GR (ABO)
Les groupes sanguins érythrocytaires
� Génétiquement induits et déterminés
indépendants les uns des autres
� Antigènes allotypiques cad caractères propres à un groupe d’individus dans une espèce donnée
� 29 systèmes de groupes sanguins liés au globule rouge
� Le plus connu et le plus ancien : le système ABO,
le plus important du fait de son implication en transfusion sanguine et pour la transplantation d’organe
--RHAG030RHAG
--GIL029GIL
--P028GLOB
--I027I
--JMH026JMH
11p15.5MER2MER2025RAPH
19p13.3CD147OK024OK
11p13CD44IN023Indian
1q32CR1KN022Knops
1q32DAFCROM021Cromer
2q14-q21GYPCGE020Gerbich
Xp21.1XKXK019Kx
19q13.3FUT1H018H
6p21.3C4A, C4BCH/RG017Chido Rodger
19p13.3LWLW016Landsteiner Wiener
7p14AQP1CO015Colton
12p12.3DODO014Dombrock
1p34SCSC013Scianna
Xp22.32XGXG012Xg
7q22.1ACHEYT011Yt
17q21-q22SLC4A1DI010Diego
18q11-q12SLC14A1JK009Kidd
1q22-q23DARCFY008Duffy
19q13.3FUT3LE007Lewis
7q33KELKEL006Kell
19q13.2LULU005Lutheran
1q36.13-q34.3RHD, RHCERH004Rh
22q11.2-qterP1P003P
4q28.2-q31.1GYPA, GYPB, GYPEMNS002MNS
9q34.2ABOABO001ABO
Localisation du gèneGène(s)SymboleNuméroSystème
Jk3JkbJkaJK09
Fy3FybFyaFY08
LebLeaLE07
KpbKpakKKEL06
LubLuaLU05
CwCeceecECDRH04
P1P103
UsSNMMNS02
A1A,BBAABO01
87654321N°
Antigènes
Tableau de concordance entre nomenclature internationale (ISBT) Tableau de concordance entre nomenclature internationale (ISBT) et et
nomenclature utilisée en France (Fischer et Race)nomenclature utilisée en France (Fischer et Race)
Le système ABO
� Le système ABO présente deux caractéristiques qui sont à l’origine des méthodes de groupage et expliquent son rôle important en transfusion et lors des transplantations :
� La présence ou l’absence des antigènes A et/ou B à la surface des GR
� La présence ou l’absence des anticorps naturels anti-A et/ou anti-B dans le plasma correspondants aux antigènes absents sur les GR
Les antigènes du système ABO
Les antigènes du système ABO
3%aucunA et BAB
43%anti-A et anti-BHO
9%anti-ABB
45%anti-BAA
Fréquence
en France
Anticorps
sériques
Antigènes
membranaires
Groupe
sanguin
Répartition des Ag ABH dans l’organisme
� à la surface des GR, PN, lymphocytes, monocytes et des plaquettes
� présents sur de nombreuses cellules de l’organisme (cellules épithéliales, endothélium vasculaire, secrétions salivaires, cellules rénales) à l’exception de l’os, des neurones et de la cornée
Les anticorps naturels,réguliers
� Naturels : Présents dans le plasma d’un sujet en dehors de toute stimulation antigénique reconnue (transfusion ou grossesse)
� Sont dirigés contre les antigènes que le sujet ne possèdent pas sur leur GR
� Réguliers : existent constamment chez les individus ne possédant pas l’antigène correspondant
� Apparaissent chez l’enfant entre 0 et 6 mois (suite à l’hétéro immunisation par les bactéries de la flore intestinale)
� Intérêt primordial en transfusion sanguine en raison du risque d’incident dès la 1ère transfusion incompatible
Les anticorps immuns, irréguliers
� N’existent pas à l’état naturel
� Apparaissent à la suite d’une immunisation préalable : grossesse ABO incompatible
Détermination du groupe ABO
Le groupage ABO repose sur deux épreuves qui doivent être concordantes :
Epreuve globulaire dite de Beth-Vincent
consiste à rechercher par une technique d’agglutination les antigènes présents sur les hématies
GR à tester (antigènes à déterminer) + sérums tests connus (anticorps monoclonaux anti-A et anti-B)
Réaction d’agglutination
Formation d’un réseau
Agglutination
Absence d’agglutination
Agglutination
Interprétation difficile :
Double population avec le sérum test anti-A
- Patient A transfusé en O
- Patient ayant subi une allogreffe de moelle (A/O ou O/A)
Détermination du groupe ABO
Epreuve sérique dite de Simonin
Consiste à identifier les anticorps naturels réguliers dirigés contre les antigènes absents
Plasma à tester (anticorps naturels) + GR tests connus
Le groupe ne sera définitif qu’à la suite de 2 déterminations réalisées à partir de 2 prélèvements sanguins différents
Groupage ABO
__++++++AB
_++++++_B
+++__+++A
++++++__O
BETH VINCENT
anti-A anti-B
SIMONIN
GR A GR B
Règles de compatibilité ABO
POUR LES GLOBULES ROUGES
� SYSTEME ABO
Ac anti-AAc anti-B
Ac anti-B
Ac anti-A pas d'Ac
A
A
B
B
OO AB AB
donneuruniversel
receveuruniversel
compatibilité
compatibilité
identité
identité
Règles de compatibilité ABO
POUR LE PLASMA
A
B
OAB
Le système RH (Rhésus)
� Système complexe de groupe sanguin
� On compte 52 antigènes appartenant à ce système
� En pratique courante seuls 5 sont à connaître :
D, C, c, E, e
� La présence de l’antigène D défini le groupe Rhésus positif (85%)
� son absence le groupe Rhésus négatif
� Le phénotype Rhésus est déterminé par la présence ou l’absence des 5 antigènes : D, C/c, E/e
Le système Rhésus comprend 52 antigènes situés sur la membrane du GR
Les antigènes
98%e (RH5)
80%c (RH4)
30%E (RH3)
70%C (RH2)
85%D (RH1)
Fréquence en FranceANTIGENES
D-C-E-c+e+ (RH : -1, -2, -3, 4, 5)D-C-E-c+e+ (RH : -1, -2, -3, 4, 5)
(0,15)
D+C-E+c+e- (RH : 1, -2, 3, 4, -5)D+C-E+c+e- (RH : 1, -2, 3, 4, -5)
(0,01)
D+C-E-c+e+ (RH : 1, -2, -3, 4, 5)
D-C-E-c+e+ (RH : -1, -2, -3, 4, 5)
D+C-E-c+e+ (RH : 1, -2, -3, 4, 5)
(0,02)
D+C+E+c-e+ (RH : 1, 2, 3, -4, 5)
D+C+E-c-e+ (RH : 1, 2, -3, -4, 5)
D+C+E+c-e+ (RH : 1, 2, 3, -4, 5)
(0,04)
D+C+E+c+e+ (RH : 1, 2, 3, 4, 5)
D+C+E-c+e+ (RH : 1, 2, -3, 4, 5)
D+C+E-c-e+ (RH : 1, 2, -3, -4, 5)
D+C-E+c+e+ (RH : 1, -2, 3, 4, 5)
D+C-E-c+e+ (RH : 1, -2, -3, 4, 5)
D+C-E+c+e- (RH : 1, -2, 3, 4, -5)
D-C-E-c+e+ (RH : -1, -2, -3, 4, 5)
D+C+E+c+e+ (RH : 1, 2, 3, 4, 5)
(0,12)
D+C-E+c+e+ (RH : 1, -2, 3, 4, 5)
D+C-E-c+e+ (RH : 1, -2, -3, 4, 5)
D+C-E+c+e- (RH : 1, -2, 3, 4, -5)
D-C-E-c+e+ (RH : -1, -2, -3, 4, 5)
D+C-E+c+e+ (RH : 1, -2, 3, 4, 5)
(0,12)
D+C+E-c-e+ (RH : 1, 2, -3, -4, 5)D+C+E-c-e+ (RH : 1, 2, -3, -4, 5)
(0,20)
D+C+E-c+e+ (RH : 1, 2, -3, 4, 5)
D+C+E-c-e+ (RH : 1, 2, -3, -4, 5)
D+C-E-c+e+ (RH : 1, -2, -3, 4, 5)
D-C-E-c+e+ (RH : -1, -2, -3, 4, 5)
D+C+E-c+e+ (RH : 1, 2, -3, 4, 5)
(0,34)
Phénotype Rhésus (RH) du CGR à transfuser par ordre
prioritaire
Phénotype Rhésus (RH) du receveur
(fréquence en France)
Les Anticorps du système Rhésus
� Toujours acquis, secondaires à une allo-immunisation, lors d’une transfusion ou d’une grossesse
� Probabilité d’apparition fonction de l’immunogénicité
� L’antigène Rh standard (D) est le plus immunogène puis dans l’ordre E, c et e
� de classe IgG, hémolysants, capables de traverser le placenta, responsables de la symptomatologie présentée par un nouveau-né Rhésus + né de mère Rhésus - : maladie hémolytique du nouveau-né
Règles de compatibilité Rhésus
POUR LES GLOBULES ROUGES
Rh + = Ag D+Rh -
Les autres systèmes érythrocytaires
� Importance transfusionnelle car certains de leurs antigènes sont fortement immunisants
� Système KELL: l’Antigène K est un puissant immunogène pour les sujets K- (91% de la population K-)
� Système Duffy : antigène Fya et Fyb
� Système MNS : antigène S et s
� Système Kidd : antigène Jka et JKb
Les autres systèmes érythrocytaires
L’absence d’un Antigène dans l ’un de ces systèmes ne s’accompagne pas d’anticorps naturels, comme dans le système ABO, mais une transfusion ou une grossesse peuvent provoquer la formation d’anticorps immuns (allo-immunisation) responsables ultérieurement d’accidents transfusionnels ou de MHNN
Les examens immunohématologiques
� Groupage ABO RH1 (RhD)
� Phénotypage RH et Kell
� Phénotypage étendu
� Recherche d’anticorps irréguliers (RAI)
� Epreuve de compatibilité au laboratoire
� Tests de Coombs
� Exigences relatives aux échantillons : Qualité et quantité :
5Test de Coombs Direct (TCD)
1010AHAI : TCD–Elution–Hémolysine–AF-RAI
5Bilan de maladie hémolytique du nouveau-né
55Bilan de réaction transfusionnelle
5Test de Kleihauer
15Titrage et dosage pondéral anti-RH1
5ABO.RH1 et RH.K et RAI chez le nouveau-né
5RAI chez le nouveau-né
5ABO.RH1 et RH.K et RAI chez l’adulte
5RAI chez l’adulte
5Groupe ABO.RH1 et phénotype RH.KEL1
Nombre de ml sur tube sec ou
anticoagulant
Nombre de ml sur anticoagulantType d’analyse
-Identification du patient : Nom patronymique / Nom marital / Prénom(s) / Date de naissance / Sexe.
� Exigences relatives aux documents accompagnateurs :-Etablissement de soins : service demandeur / ligne téléphonique directe
-Prescripteur : nom, signature du médecin prescripteur, date de prescription
-Préleveur : nom et qualité du préleveur, signature, date et heure du prélèvement
-Identification du patient : nom patronymique, nom marital, sexe et date de naissance
-Nature des analyses demandées-Renseignements cliniques éventuels
-Si une transfusion est envisagée, date et heure prévues, niveau d’urgence.
Les examens immunohématologiques
Groupage ABO RH1
� correspond à la détermination du groupe ABO indissociable de la recherche du Rhésus standard D
� le groupage est considéré comme définitif si les résultats sont concordants sur deux déterminations sur 2 prélèvements différents
� Contexte pré-transfusionnel avéré ou potentiel et contexte périnatal
� La transmission électronique des résultats est la règle pour la délivrance des PSL
Phénotype Rhésus Kell
� Recherche grâce à l’utilisation de sérums tests anti-C, anti-E, anti-c, anti-e et anti-K la présence ou l’absence à la surface des hématies des 5 antigènes suivants : C (RH2), E (RH3), c (RH4), e (RH5) et K (KEL1)
� Contexte prétransfusionnel avéré ou potentiel
� Contexte pré et périnatal
� Validation de l’identification d’anticorps anti-érythrocytaires
Phénotype étendu
� Recherche de la présence ou l’absence des antigènes : Jka, Jkb (système Kidd), Fya, Fyb(système Duffy), S, s (système MNS)
� Champ d’application :
- patient présentant un anticorps irrégulier dans l’un des systèmes concernés
- à titre préventif chez patients devant recevoir des transfusions itératives
- patients en instance de greffe
Recherche d’Anticorps Irréguliers (RAI)
NB : Les anticorps immuns sont décelables avec un maximum de probabilité du 7ème au 15ème jour après la transfusion
� Examen consistant à dépister et identifier les anticorps dirigés contre les antigènes érythrocytaires autres que A et B dans le sérum à étudier grâce à une gamme d’hématies tests
� Délai de réalisation de 45 mn à plusieurs heures
� Validité 72H
Recherche d’Anticorps Irréguliers (RAI)
Champ d’application :
� Obligatoire chez tout patient susceptible d’être transfusé
� Contexte de greffe ou de transplantation
� Contexte pré ou périnatal
� Chez le patient transfusé itératif en bonne place au cours des séries de transfusion
� Chez le patient transfusé dans le cadre du suivi post-transfusionnel (dans un délai de 1 mois après le dernier épisode transfusionnel)
CAT en cas d’urgence hémorragique
Urgence vitale immédiate : distribution sans délai
Prélèvement 2 déterminations groupe + RAI
pas de groupe ni de RAI si non disponibles
CGR O sans hémolysines
Urgence vitale : délai de distribution inférieur à 30 minutes
Prélèvement 2 déterminations groupe + RAI
pas de RAI si non disponible
nécessité de groupe ABO conforme
Urgence « relative » : délai de distribution de 2 - 3 heures
Prélèvement 2 déterminations groupe + RAI
nécessité de groupe et RAI conformes
CHOIX DES CGR EN URGENCE VITALE
Dans le cadre d’un dépôt d’urgence ayant en stock des CGR :
O- (D-C-E-c+e+K-) non réservé à la transfusion isogroupe
O+ (D+C+E-c-e+K-) non réservé à la transfusion isogroupe
En fonction de D et Rhésus-Kell
O-D-C-E-c+e+K-connu : C-D positif
O+D+C+E-c-e+K-connu : C+D positif
O+D+C+E-c-e+K-non connuD positif
O-D-C-E-c+e+K-connu ou nonD négatif
O-D-C-E-c+e+K-non connuD non connu
Rhésus KellD
CGR à transfuserPatient
Epreuve directe de compatibilité au laboratoire EDCL
� Qualification biologique du don� Consiste à tester le sérum du receveur vis-à-vis du CGR à transfuser (l’objectif étant de détecter certains Ac masqués par la présence d’autres Ac, ou des Ac rares)
� Validité 72H� Champ d’application :Receveur présentant ou ayant présenté un ou plusieurs allo-anticorps anti-érythrocytairesNouveau-né présentant un test de Coombs positif ou né de mère allo-immunisée
Test de Coombs
� Permet la mise en évidence de la sensibilisation in vivo des hématies humaines par des anticorps grâce à l’utilisation d’un réactif appelé antiglobuline humaine
� Champ d’application :
Maladie hémolytique du nouveau-né
Incident transfusionnel
Anémie hémolytique autoimmune
Recherche d'anticorps fixés sur les hématiesRecherche d'anticorps fixés sur les hématies
Ac non spontanémentagglutinables
Hématies fœtalesayant fixé l'Ac
complexe agglutinant
+ anti-gammaglobulines humaines