contribution à l'étude et l'évaluation de la qualité...
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THESE DE DOCTORAT En Biologie
Option : Microbiologie Fondamentale et Appliquée
Présenté par : Bengarnia Benmerine
THEME
Contribution à l'étude et l'évaluation de la qualité physico- chimique et bactériologique des eaux de consommation de la
région d’oued Es-Saoura cas de Béni-Abbès, Ougarta et Zeghamra
Membre du Jury :
Président : HEDDADJI M. Prof. Université d'Oran 1
Examinateur : SAIDI N. MCA. Université d'Oran 1
Examinateur : BEKADA A. Prof. C U deTISSEMSILT
Examinateur : MEDAH B. Prof. Université de MASCARA
Examinateur : KABINE M Prof. Université de Casablanca
Directeur de thèse : KIHAL Mebrouk Prof. Université d'Oran 1
2016
Remerciements
Ces quelques lignes me permettront de remercier les responsables et les personnes qui ont
contribué de près ou de loin à la réalisation de ce travail tant au niveau scientifique qu’au
niveau personnel, et sans leur aide, ce travail n’aurait pas pu aboutir à sa fin.
Je tiens tout d’abord à remercier mon Directeur de thèse, le Professeur KIHAL Mebrouk, qui
a dirigé ce travail, ça ne sera jamais suffisant pour lui exprimer ma grande reconnaissance
pour la confiance qu’il m’a accepté pour faire avancer ce travail, pour sa patience, sa
gentillesse, et son esprit responsable, critique et rigoureux. Malgré ses innombrables
occupations au laboratoire comme ailleurs, il m’a confisqué énormément de temps, il m’a
attribué une grande partie de son savoir de biologiste avec beaucoup de patience et de rigueur.
À mon président de jury, Monsieur le Professeur Heddadji Miloud q ui m’a fait le plus
grand honneur de présider cette thèse. Qu’il trouve ici le témoignage de mon profond
respect et de ma sincère reconnaissance.
Je tiens à remercier Monsieur le Professeur Meddah Boumedien de l’université de Mascara, le
docteur SAIDI Noureddine le professeur Bekada Ahmed du centre universitaire de
Tissemsilt et le professeur Kabine Mostapha de l’université Ain ElChok Casablanca Maroc
pour avoir accepté de participer à mon jury et qui a bien voulu examiner le travail de
recherche de ma thèse
J’adresse également ma reconnaissance aux professeurs Henni Djamel Eddine, Guessas
Bettache et Benmecherene Zineb, pour leur soutient et leur aide durant la réalisation de ma
thèse au niveau du laboratoire de microbiologie appliquée de l’université d’Oran1.
Je tiens à remercier l'ensemble du personnel du laboratoire hospitalier de Béni-Abbès. Merci à
Mr Metahri Abdelhamid, directeur EPSP Béni-Abbès. Merci à tous les citoyens de Béni-
Abbès et aux autorités locaux, Merci au Docteur Bahira Belkacem a qui je souhaite une
Long et heureuse vie et de la santé.
I
Table des matières
Remerciements
Table des matières.................................................................................................................... I
Résumé...................................................................................................................................... III
Summary .................................................................................................................................. IV
V ......................................................................................................................................... يخص
Liste des abréviations ............................................................................................................... VI
Liste des figures........................................................................................................................ VII
Liste des tableaux ..................................................................................................................... VIII
INTRODUCTION .................................................................................................................. 1
Contexte général de l’étude...................................................................................................... 3
I. Généralités sur l’eau ............................................................................................................. 4
I.1. L’usage de l’eau ................................................................................................................. 5
I.1.1. L’usage domestique ........................................................................................................ 5
I.1.2. Les besoins agricoles ...................................................................................................... 5
I.1.3. Les besoins industriels .................................................................................................... 5
I.2. Les ressource en eau ........................................................................................................... 5
I.3. Les types d’eaux douces .................................................................................................... 6
I.3.1. Les eaux souterraines ...................................................................................................... 6
I.3.1 Les eaux de surface .......................................................................................................... 6
I.4. Généralités sur la pollution ................................................................................................ 6
I.4 .1. Les origines de la pollution ............................................................................................ 7
I.5. Les principales causes de la pollution d’origine agricole .................................................. 7
I.5.1. Les principaux contaminants .......................................................................................... 8
I.6. Les effets et les conséquences de la pollution agricole¨ .................................................... 8
I.6.1. L’effet des fertilisants ..................................................................................................... 9
I.6.2. Les engrais chimiques ..................................................................................................... 9
I.6.3. Les phosphates ................................................................................................................ 9
I.6.4. Les métaux lourds ........................................................................................................... 9
I.6.5.Les produits phytosanitaires : .......................................................................................... 9
I.7. Les effets des plastiques et des déchets agricoles .............................................................. 9
I.7.1. Effet et dégagement de la mécanisation........................................................................... 9
I.7.2. Les effets des pesticides ................................................................................................... 10
I.7.3. Les pesticides .................................................................................................................. 10
I.8. Comportement et transfert des pesticides dans l’environnement........................................ 10
I.8.1.Transfert des pesticides vers les milieux aqueux .............................................................. 10
I.8.2.Transfert vers les eaux de surface (ruissellement) ........................................................... 10
I.8.3.Transfert dans le sol vers les eaux profondes (lixiviation et lessivage) ........................... 11
I.9. Effets toxiques des pesticides ............................................................................................ 11
I.9.1. Effets sur la santé humaine ............................................................................................. 11
I.9.2. Impact environnemental : écotoxicologue ...................................................................... 11
I.10. Cadre législatif et réglementaire ...................................................................................... 12
I.11.Qualité bactériologique ...................................................................................................... 13
I.11.I L'eau et la santé .............................................................................................................. 13
I.11.2. Bactéries pathogènes liées aux éclosions des maladies d'origine hydrique .................. 15
I.12. L'eau et les contaminations bactériennes ......................................................................... 17
I.12.1. Cadre réglementaire ...................................................................................................... 17
I.13. L’eau: véhicule d'agents pathogènes................................................................................. 20
I.13.1. L'eau : réserve d'agents pathogènes .............................................................................. 20
I.14. Méthodes de détection ...................................................................................................... 20
I.14.1. La méthode du nombre le plus probable (NPP) ............................................................ 20
II
I.14.1.1. Les indicateurs de contamination fécale.................................................................... 22
I.14.1.2. Les microorganismes clés de la contamination ......................................................... 25
I.14.1.3. Bactéries hétérotrophes aérobie et anaérobies facultatives ........................................ 26
I.14.1.4.Coliformes totaux........................................................................................................ 26
I.14.1.5. Coliformes thermo tolérants....................................................................................... 27
I.14.1.6. Les entérocoques intestinaux ..................................................................................... 28
I.14.1.7. Clostridium perfringens et autres Clostridium sulfito-réducteurs.............................. 28
I.14.1.8. Les coliphages............................................................................................................. 28
II. Matériel et méthodes ............................................................................................................ 31
II.1. Présentation de la zone d’étude ........................................................................................ 31
II.2. Echantillonnage ................................................................................................................. 34
A. Prélèvement d'échantillons d'eau ......................................................................................... 34
B. Transport et conservation au laboratoire ............................................................................. 35
II.3. Analyse physicochimique ................................................................................................. 35
II.3.1. La température ............................................................................................................... 35
II.3.2. Le pH .............................................................................................................................. 35
II.3.3. Détermination résidus secs (RS).................................................................................... 36
II.3.4. La conductivité électrique.............................................................................................. 36
II.3.5.Détermination de l’alcalinité (TA –TAC) : .................................................................... 36
II.3.6.Détermination du titre hydrotimétrique (TH) : ............................................................... 36
II.3.7. Dosage des chlorures (Cl-) :........................................................................................... 36
II.3.8. Dosage des nitrates (NO-3 ) : ........................................................................................ 37
II.4.Analyses bactériologiques ................................................................................................. 42
II.4.I. Recherche et dénombrement des germes totaux ............................................................ 43
II.4.2.Dénombrement des coliformes totaux et fécaux : .......................................................... 44
II.4.3.Recherche et dénombrement des streptocoques fécaux ou Entérocoques ...................... 48
II.4.4.Recherche et dénombrement des spores de bactéries des anaérobies sulfitoréductrice
et de Clostridium sulfitoréducteurs...........................................................................................
50
II.4.4.1.Recherche et dénombrement des Clostridium Sulfito-Réducteurs .............................. 50
II.5. Recherche des germes pathogènes : .................................................................................. 52
II.5.1. Recherche de Salmonella................................................................................................ 52
II.5.2. Recherche de Vibrion cholirérique : .............................................................................. 54
II.5.3.Recherche de Staphylocoques à coagulase positive : ..................................................... 55
Résultats et discussion.............................................................................................................. 59
III.1. Paramètres physico-chimiques ........................................................................................ 59
III.1.1. La température............................................................................................................... 59
III.1.2. Le pH (potentiel hydrogène) ........................................................................................ 59
III.1.3. Conductivité ................................................................................................................. 60
III.1.4. Les résidus secs (RS)..................................................................................................... 60
III.1.5. La turbidité ................................................................................................................... 60
III.2. Résultats des analyses bactériologiques .......................................................................... 65
III.2.1. La microflore totale. ..................................................................................................... 65
III.2.2. Les indicateurs de contamination ................................................................................. 67
Article : 01 .......................................................................................................................................................... 76
Article :02 ............................................................................................................................................................................ 95
Références bibliographiques..................................................................................... 105
Annexe ........................................................................................................................................... 114
III
Résumé Face au déficit hydrique, à la croissance démographique élevée, à l'urbanisation effrénée et
aux taux de croissance économique élevés que connaissent certains pays à climat aride tel
l’Algérie et surtout au sud dans des zones subarides comme Béni Abbes. L’eau jeu un rôle
très important dans la stabilité des citoyens. Avec la rareté des sources d’eaux d’une part et la
vulnérabilité de l’autre part.
Les eaux de consommation sont susceptibles de renfermer et de déplacer une grande diversité
d'agents pathogènes pour l'homme (virus, bactéries et parasites). Les organismes pathogènes
présents dans les eaux de consommation d'une société, en expriment l'état sanitaire. En
Algérie et principalement dans la Wilaya de Béni Abbes. L’objectif de cette étude est de
évaluer les caractéristiques physico-chimiques (pH, conductivité, température et salinité), et
bactériologiques par dénombrement des indicateurs de contamination fécale, ainsi que
l’identification des souches pathogènes tout au long du procédé du traitement des eaux brutes
jusqu’à l’arrivée au consommateur. Tandis que les foggaras sont de propriété privé
sont utilisées pour l’irrigation de leurs jardins et au même temps pour la consommation la
foggara d’Ougarta il peut transmettre des maladies hydriques surtout cette foggara n‘est pas
surveillée ni protégé contre les animaux errants tels que les chiens, les chats et les oiseaux.
dans cette source on aremarqué la détérioration de cette eau et elle est impropre à la
consommation de point de vue la charge microbienne. Mais les analyse physico chimiques
montrent le début de la dégradation des eaux surtout celle de puits communal, suite à son
situation prés de rejet principal des eaux usées de la ville et du cimetière et de quelques
mètres de la bergerie de centre de recherche. Ces dernières années de sécheresse par
conséquent augmentation de taux de salinité.
Pour une meilleure interprétation.de ces résultats et de dresser une base de donnes avec des
spectres de référence permettra d’atteindre une plus grande importance de garder la qualité
des eaux et préserver de la dégradation.
Mots clés: Eaux consommation, eaux souterrain, Bactéries fécales, paramètres Physico-
chimiques, zone subaride, Algerie, Béni Abbés
IV
Summary Facing the water shortage, the high population growth, rapid urbanization and high economic
growth rates experienced by some countries to arid climate as Algeria and especially south in
areas like e sub-arid Beni Abbes. The water play a very important role in the stability of
citizens. With the scarcity of water sources on the one hand and the vulnerability of the other.
consumption of water is likely to contain and convey a wide variety of pathogens to humans
(viruses, bacteria and parasites). Pathogenic organisms in water consumption of a community,
reflected in the health status. In Algeria, mainly in the Wilaya of Beni Abbes. The objective
of this study is to determine the physical and chemical characteristics (pH, conductivity,
temperature and salinity), and bacteriological by counting the indicators of fecal
contamination, and identification of pathogenic strains throughout the process of
processing raw water until the arrival to the consumer. While foggaras are private property
are used for irrigation of their gardens and at the same time for consumption Ougarta’s
foggaras it can transmit waterborne diseases especially this foggaras is not monitored nor
protected against stray animals such as dogs, cats and birds. in this source we noticed the
deterioration of the water and is unfit for consumption of the microbial point of view.
But the physical and chemical analysis show the beginning of the water degradation
especially of communal well, following its rejection principal Meadows waste water
situation of the city and the cemetery and just meters from the fold of the research
center. In recent year’s drought therefore increasing salinity.
For better interpretation. To these results and database drawing with basic reference
spectra will achieve greater importance to keep the water quality and preserve degradation.
Keywords: water consumption, underground water, fecal bacteria, physico-chemical
parameters,sub-arid area , Algeria, Beni Abbes
V
VI
Liste des abréviations BCPL: bouillon lactose au pourpre de bromocrésol.
C°: degré Celsius.
PH potentiel d’hydrogène. mg
Méq/l : milligramme par litre. :
TA : milliéquivalent par litre. titre alcalimétrique simple.
TAC : titre alcalimétrique complet.
TH titre hydrométrique
OMS Organisation Mondiale de la Santé.
J.O.R.A Journal Officiel Algérien
Ca+2
ions de calcium
Mg+2
ions de magnésium.
K+ ions de potassium
Na+2
ions de sodium.
Mn+2
ions de manganèse.
MES : matière en suspension.
NO -3
ions de nitrate.
Zn zinc.
MO : matière organique
. % pourcentage.
NNP Nombre le plus probable.
S/C : simple concentration
D/C double concentration. KIA : milieu de Klugér. VF : friande foie.
EVA : bouillon glucosé à l’éthyle violet et de sodium.
EPA : eau péptonée alcalin
SS : Salmonella-Shigella
TSI three sugar iran.
EVA : Bouillon glucosé àl’éthyle violet et de sodium
EPA Eau péptonée alcaline. SFB Bouillon de Sélénite. GNAB. Gélose Nutritive Biliée TGEA : Gélose Tryptone Glucose d’Extrait Agar. OMS : Organisation mondiale de la santé. (+) : Positif. (-) : Négatif µs/cm : Micro siemens par centimètre.
VII
Liste des figures
Figure N° 01 : stock total d’eau sur la planète 7
Figure N° 02 : Carte géographique de la zone d'étude 36
Figure N° 03 : Positionnement des sites d’étude N° 01, 02,03 et 04 . 37
Figure N° 04 : Positionnement de site d’étude N° 05 37
Figure N° 05 : Positionnement de site d’étude N° 06 38
Figure N° 06 : Recherche et dénombrement des germes totaux dans l’eau 48
Figure N° 07 : Recherche et dénombrement des coliformes totaux et fécaux dans l’eau 53
Figure N° 08 : Recherche et dénombrement des stereptocoques fécaux dans l’eau 53
Figure N° 09 : Recherche et dénombrement des Clostridium sulfito-réducteurs 55
Figure N° 10 : Recherche de Salmonella 58
Figure N° 11 : Recherche de Vibrion cholirérique 59
Figure N° 12 : Recherche de Staphylocoques à coagulase positive 62
Figure N° 13 : variation de la température des eaux des sites d'études 70
Figure N° 14 : variation du pH des eaux des sites d'études 70
Figure N° 15 : La variation des paramètres chimique des eaux de Béni- Abbes 71
Figure N° 16 : variation des la charge microbienne totale des eaux de Béni Abbés 73
Figure N° 17 : Aspect des colonies microbiennes sur milieu de dénombrement dans la
foggara d’Ougarta
73
Figure N° 18 : Aspect de la croissance des coliformes sur milieu BCPL lactose. 75
Figure N° 19 : Croissance des coliformes fécaux sur milieu liquide Shuber indiquant la
production de gaz et l'indole
77
Figure N° 20 : la variation des coliformes totaux, fécaux , E. coli et streptocoques fécaux dans
les eaux de Béni Abbés
77
Figure N° 21 : Croissance des entérocoques sur milieu ROTHE. 79
Figure N° 22 : Aspect des colonies de couleur noir de Clostridium sp. sur milieu VF
incubée à 37°C et à 46°C.
80
Figure N° 23 : Croissance de Vibrion sur milieu Eau peptonée alcalin pH 9. Le
flacon 2 montre la présence d'un film à la surface et l'apparition de l'aspect
des colonies sur GNAB.
80
Figure N° 24 : Identification des isolats par l'utilisation des plaques API 20 E spécifique aux
entérocoques.
81
VIII
Liste des tableaux
Tableau N° 01 : Principaux microorganismes indicateurs et index d'intérêt en santé
publique
25
Tableau N° 02 : Événements marquants de l'histoire de la recherche sur les indicateurs de
Contamination fécale source
26
Tableau N° 03 : Techniques de conservation des échantillons destinés à l’analyse physico-
chimique
46
Tableau N° 04 : Méthode de dénombrement des germes de contamination fécale et
d’efficacité de traitement
54
Tableau N° 05 : Représente la répartition les espèces dominantes dans les différentes
sources d'eau de la ville de Béni-Abbes.
118
Tableau N° 06 : Paramètres physico-chimiques des eaux de consommation de la zone de
Béni Abbes
119
Tableau N° 07 : Les caracteres biochimiques pour les différentes espèces de
staphylocoques
120
Tableau N° 08 : La charge microbienne et les autres paramètres microbiologiques des
différentes sources d'eau de la ville de Beni-Abbes
118
Introduction
1
INTRODUCTION L'eau, c'est la vie, a-t-on l'habitude de dire. C'est en effet « le solvant universel»; il est
composé d'oxygène et d'hydrogène qui, avec le carbone sont indispensables à la formation
cellulaire (Hertig et al., 2006). Dans la nature, l’eau n’est pas toujours source de vie. Elle peut
véhiculer de nombreux micro-organismes, bactéries, virus et protistes de tout genre, qui y
vivent et s’y développent. La bonne qualité de l’eau constitue un élément très important
pour la protection de la santé publique. Dans cet objectif, au cours du temps, les scientifiques
ont inventé des règles protectrices qui vont de la ressource jusqu'au robinet du
consommateur. La m a j o r i t é de ces règles ont été approprié dans les réglementations
sanitaires et s'utilisent spécialement à deux étapes qui sont les risques microbiologiques et
les risques chimiques (WHO, 1996). La menace microbiologique est un risque microbien. La
qualité microbiologique est appropriée à la qualité bactérienne qui ne sont qu'un des éléments
naturel de propagation de micro-organismes, certains d'entre sont pathogènes. Distribuer de
l'eau potable, c'est circuler une eau sans germes pathogènes (Haslay, 1993)
Relatif au risque chimique, la multitude de composants chimiques qui existent, à la fois
d'origines naturelle et anthropique, emportent des analyses nombreuses et complexes, qui
paraissent souvent couteuses. Cependant, de la netteté du résultat analytique résultera la
qualité des eaux et/ou le choix des méthodes de traitement. Ainsi la concordance de l'eau de
distribution est évaluée en comparant les résultats lors de l'analyse d'un échantillon
avec l'ensemble des paramètres qui font l'objet d'une norme ou référence de qualité. Canaliser
de l'eau potable, c'est distribuer une eau conforme aux normes de potabilité (Rodier, 1984).
Les microorganismes pathogènes qui peuvent être présents dans l'eau sont très nombreux et
variés. Leur présence est toujours liée à une pollution fécale de celle-ci. Cependant, il est
difficile de les mettre en évidence, d'une part, parce qu'ils sont trop nombreux pour faire
l'objet d'une recherche spécifique, et d'autre part, parce que leur identification demeure
souvent difficile voire impossible (virus). De plus, leur durée de vie dans l'eau est parfois très
courte.
L'analyse bactériologique est donc une action obligatoire de l’expertise sanitaire, car il permet
de mettre en évidence la pollution fécale de l'eau. Elle permet également de contrôler
l'efficacité des importances de la préservation ou de traitement.
Notre travail contribue à l’identification et la quantification de certains foyers de pollution
d’origine fécale à partir des données rassemblées et traitées.
Ceci acceptera par la suite d’élever le dénombrement du degré de pollution des ressources
en eau souterraine et la préparation d’un plan d’action pour la protection de ses ressources
hydriques.
Pour atteindre cet objectif, notre travail sera subdivisé en trois chapitres :
D a n s un premier chapitre nous présenterons le contexte d’étude et la problématique de la zone fait objet d’étude.
L e deuxième sera consacré à l’étude expérimentale physico-chimiques et
microbiologiques.
Le troisième chapitre nous exposerons les résultats obtenues et leur discussion avec les
travaux comparables réalisés dans d’autres régions.
D a n s le dernier chapitre nous listons les références bibliographiques utilisées dans la
rédaction et la discussion de cette thèse.
Revue bibliographique
3
Contexte général de l’étude
En Algérie a toujours fait du développent du secteur de l'eau un avantage et un choix
stratégique. Ce secteur qui constitue un des principaux clés du développement économique et
social, se trouve connecté à deux défis essentiels: Le stress des ressources en eau en rapport
avec l’augmentation de la demande en eau tous usages associés, avec une tendance à la
pénurie. Et la détérioration des ressources en eau qui amènent différentes formes de pollution.
La disette des ressources en eau, et la forte irrégularité aussi bien spatiale, que temporelle, qui
définissent le contexte algérien, ont déterminé les choix des pouvoirs publics à choisir une
stratégie globale dont les résultats ont démontré son efficacité particulièrement durant les
périodes de sécheresse consécutives. Cette astuce a concerné aussi bien le plan législatif et
réglementaire, que le plan de l’évaluation et de la préservation des ressources en eau.
La politique de signal et de protection des ressources en eau, en particulier souterraine,
nécessite une gestion en collaboration ainsi que le recours à de nouvelles approches et
technologies pour compléter les procédés conventionnelles utilisées jusqu'à présent. Les eaux
souterraines ont une double possession, elles font partie et du cycle de l'eau et du sous sol.
Elles sont liées aux eaux de surfaces et s'interpénètrent continuellement dans l'espace et dans
le temps à la faveur d'infiltration et de drainage. Elles se renouvellent par une partie d'eau
pluviale qui s'infiltre, et sont soumises aux effets de 1'atmosphère ou une partie s'y retourne
par évaporation directe ou indirecte. Elles sont profondément liées au sous-sol dont elles sont
un constituant essentiel et actif. Elles ne peuvent être considérées ni comme une
ressource a part, ni comme une ressource naturelle du sol comparable aux autres. Elles
constituent des réserves d'eau et d’écoulement en circulation comme les eaux superficielles.
Leur renaissance s'effectue par 1'infiltration de 1'eau pluviale, et cette alimentation garde leur
débit d'écoulement.
Leur répartition dans l'espace, beaucoup plus continue que celle des eaux de surface, dépend
des formations géologiques dont la structure enveloppe leur dynamique. Ainsi, l'eau
souterraine s'écoule très lentement et offre une grande relâche. Si, en surface, l'eau s'écoule a
des vitesses de l'ordre de mètre /seconde, dans le sous-sol par contre, la vitesse varie selon les
cas des quelque mètre/jour en perméables, a une dizaine de km/jour en milieux fissurés.
L’espace de la prorogation peut aller de quelques mois pour les nappes à faibles réserves et a
fort débit à plusieurs milliers d'années pour les nappes profondes quasi-fossiles.
Alors qu'une réserve d'eau de surface peut mettre quelques jours ou au plus quelques mois
pour se remplir et/ou se vider, pour une réserve souterraine, ces durées s'expriment en
années, avec au plus quelques «sous-alternances» saisonnières. La prise en compte du flux
de renouveau par rapport a la réserve et du degré de liaison aquifère /eau de surface,
permet d'étudier leur Sollicitation et leur gestion. La ressource en eau souterraine est une
notion a la fois relative et diverse (Castany, 1982) : -Relative a l'échelle de l'espace, de la
durée de référence et aux critères d'évaluation;-Multidimensionnelle car elle s'exprime en
terme de flux, de stock, de régime de reprise, de qualité, de conditions d'accès et de prix de
revient, et de désorienté internes et externes au système. Au plan physique, le premier caractère spécifique aux eaux souterraines est la conjonction du
flux et de stock, et par l a suite, l’approvisionnement entre ressource renouvelable et
non renouvelable propre a l'eau souterraine. Les évaluations respectives de ces deux
4
termes sont soumis à la fois des conditions naturelles et des objectifs socio-économiques
d'utilisation de l'eau. Au plan socio-économique, la contrariété de l'usager se conduit à
la production de ses ouvrages et au mieux a la ressource locale dont la production et la
préservation ont surtout le sens de protection contre ses concurrents. Leur collecte de la
ressource est très proportionnelle. Elle se limite à 1'intérêt particulier. Au plan économique,
les gestionnaires se placent à l'échelle de la ressource régionale. Ils sont munis de moyens
techniques d'étude, de calcul et de gestion, mais démunis des moyens directs d'action sur
1'eau souterraine ( El Hbil, 1995).
Cette différence de collecte de la ressource selon le niveau auquel on se place entraine une
différenciation entre: -La ressource locale relative a un captage ou groupe de captages en tant qu'élément assurant la
continuité de la production avec un risque de défaillance évalué. -La possibilité régionale d'un système perméable en tant que ressource au sens économique. Ces eaux souterraines jouent un rôle important dans le développement socio-économique. Ces
prélèvements sont réalisés de plus en plus par pompage au déterminent des
écoulements gravitaires. Séparément déjà de tout changement climatique, la gestion de l'eau
est l'un des grands problèmes qui conditionne l'avenir en Algérie et à Béni Abbès Le pays et surtout les zones arides et subarides devrait être en situation de stress hydrique, se
retrouver en situation de pénurie d'eau, car des problèmes importants de qualité se placeront
en relation avec l'érosion, la salinisation et la pollution. Les variations climatiques étaient aptes d’augmenter les impacts négatifs de la rareté, de la
différence spatio-temporelle et de la forte dégradation qui caractérise les ressources en eau sur
le développement socio-économique. Toutes les eaux de la nature ne sont pas bonnes à boire. Même une eau d’apparence pure
transporte avec lui toutes sortes de substances inertes et vivantes, dont certaines peuvent être
nocives pour l’organisme humain. Ces substances résultent soit du milieu physique
dans lequel.L’eau a évolué, soit des rejets de certaines activités humaines dont l’eau est
devenue le réservoir. L’eau est ainsi le vecteur de communication possédant de nombreuses
maladies. En effet, chaque année 2,5 millions de personnes meurent d’avoir bu de l’eau
contaminée (Pujals et al., 2006). L'eau est l'élément naturel indispensable à la vie et au bonheur des différents besoins humains
(Bouziani, 2006). I. Généralités sur l’eau
Nom féminin du latin aqua, l’eau est un corps incolore, inodore, insipide, liquide à la
température ordinaire et composé d’hydrogène et d’oxygène (H2O). L’eau était considérée
par les anciens comme l’un des quatre éléments de base avec le feu, l’air et la terre. Elle fait
un élément essentiel à la vie. Elle est le substrat fondamental des activités biologiques et le
constituant le plus important des êtres vivants (70 % de leurs poids en moyenne). L’eau se retrouve dans l’écosphère sous trois états ; solide, liquide, et gazeux dépendant des
conditions particulières de température et de pression. L’eau a des propriétés physico-
chimiques assez remarquables par rapport aux autres liquides car elle est un excellent
5
solvant, elle solubilise de nombreux gaz, corps minéraux et organiques, ionise les
électrolytes et disperse les aloïdes électro chargés (Michard, 2002).
I.1. L’usage de l’eau
I.1.1. L’usage domestique
Les eaux de consommation publique sont utilisées à différentes fins. Un habitant consomme
230 l par jour, n’en utilise que seulement 1 % pour la boisson et 6 % pour la
préparation de la nourriture, les 93 % restant sont consacrés aux bains- douches (39 %), aux
sanitaires (20 %), au lavage de la linge (12 %), de la vaisselle (10 %), à des usages
domestiques divers (6 %) et au lavage des voitures et arrosage du jardin (6 %) (Defrance
Schki, 1996).
I.1.2. Les besoins agricoles
L’agriculture est une grande consommatrice de l’eau pour l’irrigation et l’élevage.
L’irrigation nécessite des volumes élevés. Un hectare de maïs consomme 20.000 m3
d’eau
pendant sa période végétative, et un hectare de riz 40.000 m3
en moyenne ( Bensouilah,
1995).
I.1.3. Les besoins industriels
L’industrie est consommatrice de l’eau. Elle a de multiples fonctions, par exemple celle de
fluides de refroidissement et de substance primaire (dans le domaine de la production) ou de
solvant et de milieu réactionnel (dans l’industrie chimique par exemple) (Gilli et al., 2004).
I.2. Les ressources en eau
La plus grande partie de l'eau sur terre est constitué des océans et mers. La quantité d'eau
douce n'atteint pas 3% dont les 2/3 se trouvent sous forme de glace dans les calottes polaires
et les glaciers. L'eau douce contenue dans le sous sol, les lacs, les rivières, les courants, les
étangs et les marais représente moins de 1% de tout le stock mondial d'eau. (CIR , 1983).
6
L’eau recouvre 72 % de la surface terrestre et représente une réserve totale de 1350 milliards
de km3
dans la biosphère. Cependant l’eau se trouve en constant recyclage. L’eau
douce ne représente que 2,5 % du stock total d’eau sur la planète (les 97,5 % restant étant
salés): or 2/3 de l’eau douce planétaire est concentrée dans les glaciers et la couverture
neigeuse et 1/3 dans les nappes souterraines difficiles d’accès. Il ne reste que 0,3 % de l’eau
douce (soit 0,007 % de la totalité de l'eau de la planète) dans les rivières, les ruisseaux, les
réservoirs et les lacs. Seule cette
infime partie est aisément disponible et se renouvelle relativement rapidement : 16 jours en
moyenne pour une rivière, 17 ans pour un lac (Mebarki, 2005).
I.3. Les types d’eaux douces
Il existe deux types d’eaux douces qui sont les eaux souterraines et les eaux de surface.
I.3.1. Les eaux souterraines
Ce sont les eaux des nappes phréatiques qui correspondent à 22 % des réserves d’eaux
douces, soit environ 1000 milliard de m3.L'eau souterraine provient essentiellement de
l'infiltration des eaux de pluie qui atteint les nappes aquifères en traversant les couches
souterraines (CIR, 1983). La porosité de la structure du sol déterminant le type de la nappe
et le mode de circulation des eaux souterraines. Une nappe peut être libre. Elle est alimentée
directement par l'infiltration des eaux de ruissellement. Le niveau de cette nappe fluctue en
fonction de la qualité d'eau retenue. Elle peut être captive. Elle est alors séparée de la surface
du sol par une couche imperméable. Elle est généralement plus profonde. Un cas exclusif est
présenté par les nappes alluviales: ce sont les
nappes situées dans les terrains alluvionnaires sur lesquels circule un cours d'eau. La qualité
de ses eaux est alors influencée par la qualité de l'eau de la rivière.
La nature géologique du terrain a une base caractéristique sur la composition chimique de
l'eau (OMS, 2000). Ces eaux présentent une faible turbidité, une température et une
composition chimique constante.
I.3.1 Les eaux de surface
Elles regroupent toutes les eaux provenant d’un mélange d'écoulements souterrains et des
eaux de pluie qui coulent ou qui demeurent à la surface du sol. Elles comprennent les eaux
des grands cours d'eau, des étangs et des lacs ainsi que des petits ruisseaux alimentés par des
sources et qui captent eaux de ruissellement des bassins versants. Les ruissellements de
surface constituent la cause essentielle de la turbidité et de la teneur en matières organiques
(M D D E P, 2012), des débris d'origine végétale ou animale, ainsi que des
microorganismes pathogènes des eaux de surface. C'est ainsi que les eaux de surface font
plus objets des pollutions physico-chimiques et microbiennes. En outre, elles assurent un développement important de zooplancton et de phytoplancton qui
se multiplient par photosynthèse grâce aux sels minéraux dissouts dans l'eau. La pollution
organique souvent à l'eutrophisation de ces eaux.
I.4. Généralités sur la pollution
Le terme « pollution » informe la présence d’une substance au- delà d’un seuil pour
lequel des Conséquences négatifs sont susceptibles de se produire (Ramade, 2000.). Polluer signifie étymologiquement : contaminer, souiller, salir, dégrader. Ces vocales ne
prêtent pas à équivoque et nous paraissent tout aussi accordes que les longues définitions
données par les experts. Parmi celles- ci nous retiendrons la suivante, publiée dans un
rapport rédigé en 1965 par le comité scientifique officiel de la maison blanche intitulée :
7
«pour restaurer la qualité de notre environnement » : «La pollution est une modification
opposé du milieu naturel qui apparaît en totalité ou en partie comme un sous- produit de
l’action humaine, au travers d’effets directs ou indirects altérant les critères de répartition du
flux d’énergie, des niveaux de l’interdiction, de la constitution physico- chimique du milieu
naturel et de l’abondance des espèces vivantes. Ces modifications peuvent attribuer à
l’homme directement ou à travers des ressources agricoles, en eau et en autres produits
biologiques. Elles peuvent aussi l’affecter en altérant les objets physiques qu’ils possèdent, les possibilités
réactives du milieu. » (Ramade, 2002). I.4 .1. Les origines de la pollution
Selon Gaujout (1995) l’origine des substances polluantes est divisée en quatre catégories : I.4.1.1. La pollution domestique
Elle résulte des habitations et elle est, en général, transportée par le réseau
d’assainissement jusqu’à la station d’épuration. La pollution domestique se caractérise par la
présence des germes fécaux, de fortes teneurs en matières organique, des sels minéraux et
des nettoyants (Gaujout,
1995). Elle peut être responsable de la détérioration des conditions de clarté et d’oxygénation
de l’eau ainsi que de la croissance de l’eutrophisation dans les rivières (Faurie et al., 2003 ). I.4.1.2. La pollution industrielle
Elle provient des usines et elle est caractérisée par la présence d’une grande diversité
des polluants, selon l’utilisation de l’eau tels que (Calvet et al., 2005):
Les hydrocarbures (raffinerie) ;
Les métaux (traitement de la surface) ;
Les acides, les bases, les produits chimiques divers (industries chimiques) ;
L’eau chaude (circuit de refroidissement des centrales thermiques) ;
Les matières radioactives (centres nucléaires, traitement des déchets radioactifs). Il peut y avoir un effet toxique sur les organismes vivants, par l’assemblage de certains
éléments dans les denrées alimentaires tels que les métaux et les pesticides (Calvet et al.,
2005). II.4.1.3. Pollution naturelle
Certains auteurs considèrent que divers phénomènes naturels sont aussi à l’origine de la
pollution
(ébullition volcaniques, etc.) (Grosclaude, 999). I.4.1.4. La pollution agricole
Elle provient des fermes ou des cultures et elle se caractérise par les fortes teneurs en sels
présence de produits chimiques du traitement (pesticides, minéraux (NO2, P, K,) et la
engrais...) (Grosclaude, 1999). I.5. Les principales causes de la pollution d’origine agricole
La pollution agricole s’est augmentée depuis que l’agriculture est entrée dans un stade de
motorisation. La pollution d’origine agricole peut se présenter sous deux formes diffuse
8
lorsque elle concerne de grandes surfaces et ponctuelle lorsqu’elle est accidentelle ou
chronique sur un espace plus réduit (Grosclaude, 1999).
I.5.1. Les principaux contaminants I.5.1.1. Les fertilisants
Les engrais chimiques sont propagés dans les sols afin de développer les rendements des
végétaux cultivés. Parmi les éléments principaux aux développements des plantes, nous avons
l’azote, le phosphate, le potassium et dans une moindre mesure le souffre, le calcium, le
magnésium et d’autres oligoéléments. L’usage continu de ces produits contamine donc les
eaux superficielles et même les nappes phréatiques (Conrad et al., 1999). I.5.1.2 Les engrais azotés
Parmi les engrais chimiques les plus utilisés nous citons le nitrate d’ammonium, le nitrate de
calcium, le sulfate d’ammonium et l’urée. Les nitrates proviennent essentiellement de la
minéralisation des matières organiques du sol et des apports d’engrais minéraux azotés. La
lixiviation a lieu lorsque la couche du sol atteint l’humidité à la capacité au champ, le
drainage récupère et les pertes vont attacher du stock d’azote minéral présent et de la
pluviométrie hibernale (Conrad et al., 1999). Les dégagements d’ammoniac [NH3] sont issus principalement de l’élevage.
Maintenant, environ 40 % de l’azote ingéré par les animaux sont perdus et rapidement
transformés en ions [NH4+] surtout lors du stockage et l’épandage des déjections
animales. L’utilisation de l’ammoniac anhydre et de l’urée engendre également des pertes
qui peuvent atteindre 15 à 35%, en particulier, lors d’apports superficiels en sol calcaire
(Danish EPA , 1999) . I.5.1.3. Les phosphates
Les phosphates sont surtout propagés sous forme de superphosphates (ortho phosphates
solubles). La majorité du phosphore utilisé comme engrais chimiques est fixé dans les sols à
cause de leur richesse en azote, en aluminium et en fer qui fixent ces éléments (Danish EPA ,
1999) . I.5.1.4. Les pesticides
L’usage des pesticides connaît une extension considérable, non seulement dans les pays
développés et sur les cultures tropicales de commerce, mais aussi dans l’ensemble des
pays du tiers monde où la «révolution verte » a augmenté les exigences en traitements
antiparasitaires car elle a reproduit des variétés moins résistantes aux divers nuisibles des
cultures que les souches indigènes cultivées. Cependant ces pesticides s’accumulent dans les
sols et les nappes phréatiques (Lemercier, 2003).
I.6. Les effets et les conséquences de la pollution agricole I.6.1. L’effet des engrais
Les engrais chimiques tels que le nitrate d’ammonium, de calcium, de sulfate d’ammoniac, le
superphosphate, etc., nécessaires, à la production croissante d’aliments, sont devenus une
source importante de pollution des sols et des eaux (Adriano, 2001). Ils provoquent un
déséquilibre de certains cycles des éléments biogéochimique et la détérioration du sol
(Adriano, 2001). Ils provoquent également l’eutrophisation.
9
I.6.2. Les engrais chimiques
La super fertilisation en nitrates des terres des cultures s’accompagnent d’une augmentation
de leurs taux dans les tissus des végétaux qui croissent dans ces derniers. Le nitrate et le
nitrite aident à l’acidification des eaux de pluies, réagissent avec l’oxygène et produisent de
l’ozone(O3) dans les basses atmosphères. Leur forte consommation dans le domaine
provoque le brouillard photochimique (contribue à l’effet de serre).L’ammoniac est toxique
pour les formes aquatiques. Il exciterait les attaques fongiques et la croissance des épiphytes
contribuant ainsi au abattement forestier (Adriano , 2001). I.6.3. Les phosphates
Les phosphates d’origine agricole représentent 0,3 Mt/an, auxquels il faut ajouter ceux libérés
par les élevages. Les apports massifs des lisiers (0,28 Mt/an) posent d’énormes problèmes. Ils
représentent la première cause d’eutrophisation du milieu aquatique (Domange, 2005). Suite à
l’eutrophisation, les qualités physiques et chimiques de l’eau sont altérées, d’où la diminution
d’oxygène dissous et l’empoisonnement des poissons (Boucher et al. , 2003). I.6.4. Les métaux lourds
Divers métaux et métalloïdes (présents dans les engrais phosphatés) constituent un très
sérieux risque potentiel de contamination des terres cultivées. Ils sont à moins de 1l /1000
chez les êtres vivants. Certains sont essentiels à la vie alors que, leur excèdent (Cd, Hg, Pb,
…) est toxique pour l’homme (Bouchon et al., 2003). I.6.5.Les produits phytosanitaires :
Au sens de la directive européenne 91/414, les produits phytosanitaires désignent les
substances actives et les préparations contenant une ou plusieurs substances actives qui
sont destinées à (Colin, 2000.) :
P r o t é g e r les végétaux contre tous les organismes nuisibles ou à prévenir leur
action,
E x e r c e r une action sur les processus vitaux des végétaux,
G a r a n t i r la conservation des végétaux,
D é g a g e r les végétaux indésirables,
D é b a r r a s s e r des parties des végétaux pour freiner ou prévenir une croissance
indésirable. I.7. Les effets des plastiques et des déchets agricoles
Tous les plastiques présentent de nombreux risques écologiques. Bien que
biodégradables, les films enterrés restent dans le sol sous formes de macro déchets. Les films
plastiques favorisent l’érosion en augmentant le ruissellement, c’est un obstacle à la
pénétration des eaux de pluie (Bouchon et al. , 2003).
I.7.1. Effet et dégagement de la mécanisation
La propagation de polluants par les échappées des machines agricoles a conduit à la pollution
de l’atmosphère et contribuera à la dépression de la couche d’ozone ce, qui engendrera le
problème des rayons ultraviolets qui sont néfastes à la croissance des cultures (Guimont,
2005).
10
I.7.2. Les effets des pesticides
La mission des pesticides sur l’environnement est certaine. Après ruissellement et infiltration,
ces produits se trouvent dans le sol déterminant sa pollution et celle des nappes phréatiques
(Scholtus, 2004). I.7.3. Les pesticides
L’article 2 de la loi algérienne du journal officiel N° 87- 17 du 1 Août 1987 relative à la
protection phytosanitaire désigne par pesticide : « Toute substance ou mélange de substances destiné à repousser, détruire ou combattre les
organismes nuisibles, en vue de la protection ou de l’amélioration de la production végétale ».
Le terme comprend les agents biologiques, les régulateurs de croissance, les correcteurs de
carence, les défoliants, les agents de dessiccation, les agents d’éclaircissage ainsi que les
substances appliquées sur les cultures avant ou après récolte, pour protéger les produits contre
la détérioration durant l’entreposage et le transport (JORA N°32,1987). Plusieurs autres termes et expressions définissent les pesticides. Ainsi, produits
phytosanitaires, produits antiparasitaires à usage agricole, produits agri sanitaires, produits
agro pharmaceutiques, produits phytopharmaceutiques sont les autres dénominations de ce
terme (Aubertot et al., 2005). I.8. Comportement et transfert des pesticides dans l’environnement
Seule une faible partie de ces produits entre en contact avec les organismes concernes. La
plupart des chercheurs l’évalue à moins de 0,3 ٪, ce qui veut dire que 99,7 ٪ de la quantité
versée n’atteignent pas la cible visée. Cette partie se disperse alors dans les trois
compartiments de l’environnement : l’air, le sol et l’eau. Les mécanismes qui dirigent ce
devenir sont nombreux et complexes et encore souvent mal connus. Cependant, suivant un
schéma habituelle, ils peuvent se classer en trois types (Barriuso et al ., 1996 et Calvet et al.,
2005).
La conservation (dans le sol),
La dégradation (abiotique et biotique),
Le transport (vers l’atmosphère, les eaux de surface et les eaux souterraines). I.8.1. Transfert des pesticides vers les milieux aqueux
La pollution des sols propage, en partie plus ou moins importante selon l’environnement
naturel, les ressources en eau. Qui sont vulnérables à cause aussi d’autres types de pollution
auxquels elles se trouvent montrées. L’eau en excédent est susceptible de mobiliser et de faire
partir les produits phytosanitaires vers les ressources en eau, c’est ainsi que le caractère
polluant d’un produit est en pratique associé à l’inaptitude du sol à le retenir ou à le
détériorer, avant qu’il ne soit, sous l’effet de l’eau, versé dans l’environnement (Meyer et al.,
2003). Ce transfert se produit soit latéralement par ruissellement, soit verticalement par
lixiviation (Marinovich et al.,1996).
I.8.2. Transfert vers les eaux de surface (ruissellement)
Le ruissellement peut être défini comme la circulation latérale de l’eau et des matières
qu’elle enferme à la surface du sol (Levine et al., 1999). Ce phénomène est provoqué
soit par une augmentation de la pluie supérieure à la capacité d’infiltration du sol, soit par
satisfaction du sol au- dessus d’un niveau peu perméable. L’importance de l’entraînement par
ruissellement est très variable selon les situations : volume et augmentation des précipitations,
11
pente de terrain, présence ou absence de couvert végétal, le type du sol, les propriétés des
pesticides utilisés ainsi que les quantités appliquées (Munnia et al., 1999). I.8.3. Transfert dans le sol vers les eaux profondes (lixiviation et lessivage)
Le transfert vers les eaux souterraines concerne les molécules en solution et celles
mobilisées par la fuite et la dissolution. Le transport est représenté par le passage des
composés phytosanitaires de la zone non saturée comprenant le sol à la zone saturée ou zone
aquifère. Lorsque les molécules sont en solution, on parle généralement de lixiviation, si les
molécules sont associées à la phase solide, on parle de lessivage (Munnia et al., 1999). I.9. Effets toxiques des pesticides I.9.1. Effets sur la santé humaine
La toxicité d’un pesticide est son potentiel à constituer des effets nocifs sur la santé, à
court ou à long terme (Arias et al., 2008). L’évaluation des effets toxiques des pesticides est
complexe car de nombreux paramètres sont à considérer : la nature du composé, ses
propriétés toxico dynamiques, la durée d’exposition et ses variations, l’effet des mélanges, la
nature libre ou liée des résidus, etc…(Capkin et al., 2006). I.9.1.1. Cancérogenèse
Plusieurs études expérimentales ou épidémiologiques laissent estimer un risque important
d’atteinte par certaines formes de cancer à la suite de l’exposition chronique à certains
pesticides couramment utilisés. Les types de cancers les plus souvent cités sont le cancer de
cerveau, de poumons, de foie et de l’estomac, les sarcomes des tissus mous, les lymphomes
non hodgkiniens et la leucémie (Capkin et al. , 2006). I.9.1.2 Effets sur la reproduction
Les pesticides peuvent affecter la reproduction humaine en exerçant une toxicité directe sur
les organes de reproduction ou en interférant avec la fonction hormonale (Capkin et al. ,
2006) . Les pesticides sont des agents exigeants de porter atteinte au processus de fertilité
masculine via une toxicité testiculaire. Il a été aussi remarqué que chez les femmes exposées à
des pesticides, le risque de mortalité intra- utérin augmentait et que la croissance fœtale
diminuait. Sans oublier les malformations congénitales et les anomalies du système nerveux
central (Cuppen et al., 2000).
I.9.1.3. Perturbation du système endocrinien
Selon l’OMS, un excitateur endocrinien est une substance exogène ou un mélange qui altère
les fonctions du système endocrinien et qui, de ce fait, induit des effets nocifs sur la santé
d’un organisme intact, de ses descendants ou sous population. Certains pesticides attaquent le
développement de la fonction reproductrice et affectent la fertilité masculine en provoquant
une oligospermie ainsi que d’autres effets épidémiologiques (cancer de la prostate, des
testicules, des seins, etc.) (Cuppen et al., 2000). I.9.1.4. Effets sur le système immunitaire
L’exposition à ces produits augmente les risques d’atteinte par des maladies infectieuses en
plus des effets comme la chute de production d’anticorps et des réactions d’hypersensibilité
retardée. D’autre part, plusieurs pesticides communément utilisés pourraient supprimer
12
la réponse normale du système immunitaire humain à l’invasion de virus, de bactéries, de
parasites et de tumeurs(Cuppen et al., 2000). I.9.1.5. Effets neurologiques
Les effets neurologiques constituent l’une des manifestations les plus fréquentes des
intoxications aigues des pesticides. Les effets aiguës manifestent à des doses importantes chez
les hommes (agriculteurs), il s’agit de l’apparition d’un syndrome caractérisé par une
paralysie des nerfs, une faiblesse musculaire proximale et respiratoire et, plus tard, des
troubles neurocomportementaux, troubles neuro- dégénératifs (maladie de parkinson), etc.
(Cuppen et al., 2000). I.9.2. Impact environnemental : écotoxicologie
D’un point de vue écologique, les pesticides ne sont pas des produits bénins. En effet, ils sont
responsables de nombreux effets toxiques secondaires causant des risques potentiels pour
l'environnement (Relyea, 2009). I.9.2.1. Effets nocifs sur la microflore du sol
La microflore est essentielle pour la prestance de la productivité du sol. Or, même si les
traitements sont le plus fréquemment appliqués sur les parties aériennes des plantes, plusieurs
études ont montré que l’emploi massif de pesticides peut avoir des conséquences majeures sur
les autres invertébrés (Relyea, 2009). I.9.2.2. Effets nocifs sur les mammifères
Les animaux absorbent les produits phytosanitaires via la nourriture ou l’eau d’alimentation,
via l’air respiré ou au travers de leur peau. Ayant omis diverses barrières, le toxique atteint les
sites du métabolisme où il est stocké. Cette exposition peut multiplier chez les mammifères
toute une série d’effets toxiques dont des baisses extraordinaires de fertilité souvent
remarquées (Ramade, 2010).
I.9.2.3. Effets nocifs sur la faune aquatique
Les produits phytosanitaires et leurs dérivés peuvent provoquer des dégâts importants sur la
faune aquatique. En effet, même si les mortalités des poissons représentent les effets les plus
étonnantes, les autres composantes de l’écosystème aquatique comme les mollusques,
les insectes, les petits crustacés, les algues et les plantes aquatiques sont aussi affectées par les
effets néfastes des pesticides (Ramade, 2010).
I.10. Cadre législatif et réglementaire
En Algérie, le contrôle des produits phytosanitaires s’est établi peu à peu en fonction
de la politique de développement prônée par le pays et la disponibilité des moyens .Ce
contrôle a connu une évolution dans le temps et la notification de la loi N° 87- 17 de 1987
relative à la protection phytosanitaire et a permis d’édicter les mesures relatives à la
fabrication, l’étiquetage, l’entreposage, la distribution, la commercialisation et l’utilisation des
produits phytosanitaires à usage agricole. Au terme de cette loi, aucun produit phytosanitaire
ne peut être commercialisé, importé ou fabriqué s’il n’a pas fait l’objet d’une homologation. Selon le décret exécutif n°95- 405 du 2 décembre 1995 relatif au contrôle des produits
phytosanitaires à usage agricole modifié et complété par le décret exécutif du 20 juillet 1999;
13
Article 06: les produits phytosanitaires bénéficiant d’une homologation, sont inscrits
sur un registre tenu et mis à jour par le secrétariat technique de la commission des
produits phytosanitaires à usage agricole. Article 08: le retrait de l’homologation d’un produit phytosanitaire intervient lorsqu’un
élément nouveau apparaît mettant en évidence sa nocivité ou mettant en cause son
efficacité. Article 20: les produits phytosanitaires à usage agricole (particulièrement
dangereux) ne peuvent faire l’objet d’une commercialisation ou d’une utilisation que sur
autorisation délivrée, sur demande, par l’autorité phytosanitaire. Les produits phytosanitaires
à usage agricole particulièrement dangereux sont: Bromure de méthyle, phosphore
d’aluminium, strychnine et phosphore de magnésium. I.11.Qualité bactériologique I.11.I L'eau et la santé
L'organisation mondiale de la santé estime en effet que 80% des maladies qui touchent la
population mondiale sont directement associées à l'eau, on retrouve ainsi en permanence 400
millions de personnes atteintes de gastro-entérite, 200 millions, de schistosomiase
(bilharziose), 160 millions de paludisme et 300 millions d'onchocercose. On considère par ailleurs que les eaux polluées sont responsables de 50% des cas de mortalité
infantile. (Desjardins, 1990). La contamination peut se faire de différentes manières:
Par ingestion indirecte d'eau contaminée.
Par ingestion indirecte d'aliments lavés avec une eau souillée (fruit, légume) ou
contaminés
par leur environnement hydrique (élevages, coquillages, cressons…)
Par contact de la peau et des muqueuses avec une contaminée.
Par inhalation d'aérosols produits à partir d'eau souillée. (Anonyme 2, 1987) I.11.1.1. Choléra
Le choléra est une maladie toxi-infectieuse due à des vibrions pathogènes appartenant au
sérotype O1 des vibrions cholériques (vibrio cholerae O) Bezzaoucha, 2004. Sa
pathogénie est liée à l'action d'une entérotoxine thermolabile qui s'exerce au niveau de la
partie initiale du jéjunum (Beytout et al., 2002(. Le choléra classé parmi les maladies qui se
transmettent par l’intermédiaire de l’eau, il pose un problème de santé publique dans les pays
où les conditions de santé et d’hygiène sont insuffisantes. (Khiati, 1998).
I.11.1.2. Bilharziose
Maladie parasitaire, très largement répandue en zone tropicale. La bilharziose est
provoquée par des vers hématogènes du genre schistosomes qui vivent, au stade adulte, dans
le système porto mésentérique de l'homme. (Pilly, 1982) Les bilharzioses (schistosomiases)
font intervenir obligatoirement des hôtes intermédiaires qui sont des mollusques gastéropodes
d'eau douce (escargots). (Bezzaoucha, 2004) Cinq espèces sont pathogènes pour l'homme
Schistosoma haematobium est l'agent de la bilharziose uro-génitale ; Schistosoma mansoni est
responsable d'une bilharziose intestinale et parfois hépato-splénique; Schistosoma japonicum
et Schistosoma mekongi déterminent une redoutable bilharziose intestinale avec complication
14
hépatique; Schistosoma intercalatum provoque une bilharziose rectale et génitale (Gentilini
et al., 1993).
I.11.1.3. Hépatite virale
On réserve le terme d'hépatite virale à l'atteinte du foie par au moins l'un des deux virus : Le type A d'incubation courte est l'hépatite «infectieuse",
Le type B d'incubation longue qui est l'hépatite "sérique". Il existe des hépatites non liées à ces deux virus, on les appelle hépatites non –A, non-B
(hépatite
C) (Azele, 1998) I.11.1.4. Amibiase
Sous le terme d'amibiase, on désigne l'ensemble des troubles causés par Entamoeba
histolytica, seule espèce parasite de l'homme à être réellement pathogène. Très répandues, les infestations latentes sont plus nombreuses que les formes patentes. La
manifestation clinique la plus classiques est dysenterie amibienne, mais il ne faut pas
méconnaître les formes mineures ou atténuées qui ont le même potentiel évolutif (O’fel ,
1987) I.11.1.5. Paludisme
Le paludisme (palus = marais) ou malaria (= mauvais air) et une infection des érythrocytes
due à des hématozoaires du genre Plasmodium transmis par un moustique Anophèles femelle
(Beytout et al., 2002). Des personnes de tous âges peuvent être atteintes de paludisme et tomber malades. Les
nouveau- nés, les petits enfants (de moins de 5 ans) et les femmes enceintes sont les
personnes les plus vulnérables. Ils risquent de mourir s’ils ne sont pas rapidement et
correctement soignés (OMS). Quatre plasmodiums peuvent être agents de paludisme humain : 1. Plasmodium flaciparum, le plus fréquemment rencontré dans les régions tropicales,
agent de la« fièvre tierce maligne » 2. Plasmodium vivax, le plus répandu (zones équatoriales, tropicales, sub-
tropicales, voire tempérées où il tend à disparaître) 3. Plasmodium malariae à répartition beaucoup plus limitée, en foyers (régions tropicales) 4. Plasmodium ovale, très rare (Pilly, 1982). I.11.1.6. Fièvres typhoïdes et paratyphoïdes
La fièvre typhoïde est une septicémie à bacille à Gram négatif à point de départ
lymphatique (Santre, 1999). C'est une toxi-infection spécifique à l'homme due à
des bactéries du Genre salmonelles : bacille d'Ebert (bacilles typhiques) ou un des trois
bacilles paratyphiques (A, B ou C). (Bezzaoucha, 2004). La transmission peut être directe
interhumaine, mais le plus souvent indirecte à partir d'aliments ou d'eau contaminés (Beytout
et al. ,2002). Les salmonelles se multiplient, traversent la paroi intestinale et se fixent au niveau des
ganglions mésentériques. Une fois cette barrière débordée, les germes reçoivent le sang où ils
se multiplient et leur lyse libère une endotoxine responsable des signes cliniques constatés et
des ulcérations des plaques de Peyer caractéristiques de la maladie (Khiati, 1998).
15
I.11.2. Bactéries pathogènes liées aux éclosions des maladies d'origine hydrique I.11.2.1. Escherichia coli
Bacille à Gram négatif appartenant à la famille des Enterobacteriaceae. E.coli produit
habituellement de l'indole, fermente le lactose, mais ne produit pas d'acétone. (Beytout et
al.,2002(.Les colibacilles sont des hôtes normaux de l'intestin : ils représentent prés de 80%
de laflore intestinale aérobie de l'adulte : on peut les retrouver également au niveau de
diverses muqueuses chez l'homme et chez les animaux (Azele, 1979). Elle peut devenir
pathogène si les défenses de l'hôte se trouvent affaiblies ou si elle acquiert des facteurs de
virulence particuliers (Khiati, 1998). Selon Sack, (1975) Escherichia coli est associé à au
moins quatre type de maladies entériques chez être humain: 1. A une diarrhée qui se manifeste surtout chez les enfants de 0 à 2 ans. 2. A une diarrhée accompagnée d’abondantes sécrétions séreuses. 3. A une dysenterie semblable à celle qui est causée par les Shigella. 4. A une colite hémorragique I.11.2.2. Salmonella
Les bactéries du genre Salmonella appartiennent à la famille des Enterobacteriaceae.
Les caractères qui permettent d'identifier une Salmonella sont l'absence de fermentation du
lactose (Beytout et al., 2002). Les Salmonella sont particulièrement des parasites du
tube digestif del'homme et des animaux. Elles peuvent être disséminées dans le milieu
extérieur par les excréta, mais ne s'y multiplient pas (Azele, 1979). Elles sont très répondues
dans la nature, leur réservoir s’étend à tout le règne animal. Présentes dans l’intestin de
l’homme et des animaux et représentent des variations importantes de pathogénicité en
fonction de la nature de l’hôte (Bertrand, 1989). La contamination humaine se fait
habituellement par l'ingestion d'eau ou d'aliments contaminés. C'est derniers sont le plus
souvent d'origine animale (coquillages, viande hachée, œufs). La contamination des aliments
peut aussi être d'origine humaine et liée à des manipulations par un personnel porteur de
salmonelles (Nauciel, 2000).
I.11.2.3. Shigella
Les Shigella sont les agents d'une maladie diarrhéique aiguë dont la forme la plus complète
est représentée par la dysenterie bacillaire (Azele, 1979), se sont des bacilles à Gram négatif,
toujours immobiles, appartenant à la famille des Entérobactéries et caractérisés par leur faible
activité métabolique (Beytout et al., 2002). La transmission de la dysenterie bacillaire
se fait donc d'homme à homme par l'intermédiaire d'aliments ou d'eau de boisson
contaminée par les excréments d'un malade ou d'un porteur. (Azele, 1979). Ce sont des
bactéries spécifiques de l'homme, pouvant s'implanter dans l'intestin. (Nauciel, 2000). Les
quatre espèces des genres Shigella–S. dysenteriae, S. boydii,S. flexneri et S. sonnei sont des
Enterobacteriaceae auxotrophes (Richard, 1996).
I.11.2.4. Legionella
Les Legionella sont des bactéries ubiquistes, dont le biotope est l’eau. On les rencontre dans
les eaux de surface (rivières, lacs), également dans les eaux de condensation des systèmes de
climatisation de l’air, provoquant des aérosols, vecteurs de la contamination par la voie
16
aérienne (Richard, 1996). Leur croissance est lente, elle est améliorée par la présence de CO2.
L’espèce la plus fréquente en pathologie est Legionella pneumophila (Nauciel, 2000). I.11.2.5. Vibrion de cholerae
La bactérie se multiplie dans l'intestin de l'homme (malade ou porteur sain) ainsi que dans les
eaux contaminées par les matières fécales (Nauciel, 2000). L’homme se contamine par
voie orale à partir d’eaux ou d’aliments (poissons, coquillages), souilles par les selles des
malades cholériques ou de porteurs sains : cycle oro-fécale. Il existe deux grands cycles de
transmission :
un cycle court où le vibrion passe de main en main par contact direct ou indirect;
un cycle long correspondant à la contamination des eaux de boisson et des
aliments (en particulier crustacés, « fruits de mer », qui filtrent de très
importants volume d’eau) (Richard ,1996). I.11.2.6. Bactéries sulfito-réducteurs
Les Clostridium sulfito-réducteurs sont des bactéries anaérobies strictes formant des spores de
grande résistance. (Marjarie, 1989). Ces bactéries considérées comme des témoins de
pollution fécale. La forme spore, beaucoup plus résistante que les formes exclusivement
végétatives des coliformes fécaux et des streptocoques fécaux, permettrait ainsi de distinguer
une pollution fécale ancienne. Sans parler de l'intérêt réel d'une telle indication concernant la
date de la pollution, il faut cependant considérer que si les Clostridium sulfito-réducteurs
peuvent être des germes fécaux, ce sont également des germes telluriques et que de ce fait,
aucune spécificité d'origine fécale ne peut être attribuée à leur mise en évidence (Rodier et al.,
1996).
I.11.2.7. Streptocoques fécaux
Ce sont des bactéries cocci Gram positif. Les streptocoques du groupe sérologique D
de Lancefield, rapprochent aux Coliformes fécaux, ils sont de bons indicateurs de pollution.
Par contre, ils sont peu utilisés comme indicateurs d’efficacité de traitement car ils sont
simplement plus résistants aux désinfectants que les Coliformes et les autres entérobactéries
pathogènes du genre Salmonelles ou Shigella. Chez l’être humain, les streptocoques du
groupe D peuvent être inclus dans la bactériémie, les cholécystites et les infections de
blessures. Ils sont responsables d’environ 20% de toutes infection urinaires et d’environ 20%
de touts les cas d’endocardites (Bertrand, 1989). I.11.2.8. Campylobacter
Les Campylobacters sont des bâtonnets minces, tournés en spirale, sporulés, gram
négatif, mobiles avec un mouvement caractéristique en tire bouchon grâce à un flagelle
polaire unique à une ou deux extrémités de la cellule. La plupart des Campylobacters sont
véhiculées aux milieux aquatiques par les résiduaires des abattoirs. (Beisou et al., 1978). Ces
bactéries sont présentes dans l'intestin de nombreuses espèces animales, en particulier
d'animaux domestiques (Nauciel, 2000).
17
I.12. L'eau et les contaminations bactériennes I.12.1. Cadre réglementaire I.12.1.1. Notion de potabilité de l'eau
Les instructions pour la qualité de l'eau de boisson, publiées par l'OMS en 1984, sont des
recommandations à caractère purement consultatif, qu'il ne faut pas confondre avec les
normes légales des Etats membres. La définition de normes pour la qualité de l'eau de
boisson doit procéder d'une démarche très réservée au cours de laquelle le risque pour la
santé est pris en considération au même titre que d'autres facteurs tels que la possibilité
technique et économique. Les directives ont marque à la définition de la base sanitaire et du
risque pour la santé, elle constitue donc une base commune pour la détermination des normes.
Néanmoins, il est admis que dans certains secteurs, il pourrait être nécessaire d'adopter des
normes provisoirement inférieures, tout en œuvrant à la réalisation du but final qui est
d'atteindre les niveaux recommandés par les directives. Les directives mettent d'abord et avant tout l'inflexion sur la sécurité microbiologique de
l'approvisionnement en eau de boisson. En effet, il y a 20 ans, plus de la moitié de la
population mondiale était encore en contact avec une eau contenant des micro-organismes
pathogènes. Les catégories les plus exposées au risque de maladies transmises par l'eau sont
les nourrissons et les jeunes enfants, les sujets affaiblis et les personnes âgées. Pour ces trois
catégories, les doses infectantes sont souvent nettement inférieures à celles valables pour
la population adulte en général. Il est évident que dans certaines régions du monde, les
programmes destinés à garantir la sécurité chimique ou les qualités organoleptiques de l'eau
de boisson occupent un degré de priorité moins élevé. Les pays se fixent naturellement
des priorités différentes dans l'application des valeurs indicatives. Dans les pays
développés, par exemple, où les maladies transmissibles provoquées par l'eau sont rares on
dotera probablement les aspects chimique et organoleptique. Ainsi, en Europe, une eau est déclarée non potable lorsque sa consommation peut être nuisible
à la santé ou lorsqu'elle présente des qualités pouvant présenter des ennuis lors de son
utilisation. Les normes de qualité de l'eau varient en fonction de son usage: eau de boisson,
eau piscicole, eau de baignade. Quelques soient son origine et sa qualité, l'eau de boisson n'est jamais pure. Elle renferme des
micro-organismes et des éléments chimiques.
Les directives CEE (80/778/CEE et 98/83) proposent des normes guides et des concentrations
maximales admissibles pour les eaux destinées à la consommation humaine. En France,
ces normes sont fixées par le décret 89-3 du 03 janvier 1989 modifié par les décrets 90-330 I.12.1.2. Nature des bactéries présentes
L'eau est un habitat pour de nombreux micro-organismes. Elle peut être un fournisseur de
pathologies d'étiologie chimique, bactérienne, virale ou parasitaire lorsqu'elle n'est pas potable
et qu'elle est contaminée par des effluents contenant des matières fécales humaines ou
animales. Cependant, quelle que soit son origine, l'eau n'est jamais stérile, une eau pure
n'existe pas ; elle contient naturellement une flore bactérienne plus ou moins variée et
abondante qui la spécifie.
18
I.12.1.2.1.Les bactéries autochtones (originaires)
Contrairement aux micro-organismes pathogènes ou indicateurs qui peuvent venir la
contaminer dans les nappes souterraines ou dans les réseaux et qui ne peuvent subsister que
transitoirement, ces bactéries peuvent se multiplier car elles n'exigent que peu ou pas du tout
de matière organique (oligotrophes ; autotrophes). Parmi les bactéries autochtones que l'on
trouve dans l'eau, les plus communes sont : les bactéries oxydant le soufre, bactéries ferriques,
bactéries spiralées, certaines espèces pigmentées ou non pigmentées, et quelques formes
sporulées. Dans certaines conditions favorables elles peuvent produire des altérations. I.12.1.2.2. Les bactéries Eaux rouges et ferrugineuses
On désigne sous le nom de "bactéries ferrugineuses" des micro-organismes qui interviennent
dans le processus d'oxydation des ions ferreux en ions ferriques. On en distingue trois groupes
: les bactéries filamenteuses du groupe Sphaerotilus-Leptothrix, les bactéries pédonculées du
genre Gallionella et aussi certains membres du groupe Thiobacillus. Les bactéries du genre Sphaerotilus-Leptothrix sont de loin les plus fréquemment
rencontrées et les plus largement décrites. Elles sont mises en cause non seulement dans
l'oxydation des ions ferreux mais aussi des composée manganeux. Elles font partie de la
famille des Chiamydobacteriaceae. On peut les définir comme des bactéries entourées
d'une gaine, imprégnées ou non d'oxyde de fer ou de manganèse, ne prenant pas la coloration
de gram et ne formant pas de spores. Les gaines peuvent présenter de fausses
ramifications, d'ailleurs très courtes. La reproduction des cellules s'effectue soit à partir de
cellules mobiles, libérées par l'extrémité ouverte de la gaine ou au cours de sa fragmentation,
soit à partir de cellules immobiles ou "conidies". Les eaux distribuées dans les canalisations en renferment fréquemment. Dans les conduites, la
stagnation de l'eau permet un développement anormal de ces bactéries qui, en éliminant
l'oxygène du milieu, créent une atmosphère anaérobie entraînant la putréfaction des matières
organiques, l'apparition d'odeurs et de goûts nauséabonds. Les Sphaerotilus, les Leptothrix et les Crenothrix peuvent être à l'origine des dépôts
mucilagineux et visqueux formés dans les eaux de distribution qui proviennent de source ou
de forages profonds contenant du fer dissous et du gaz carbonique. Ces dépôts peuvent
atteindre une épaisseur de 2 cm dans les canalisations et les citernes ; ils sont imprégnés
d'hydrate ferrique. L'eau devient trouble et colorée : elle dégage une odeur désagréable par
suite de la décomposition des bactéries ; sa saveur est également désagréable. Les ferro-bactéries (Leptothrix, Gallionella et Crenothrix) existent déjà en grande abondance
dans les eaux avant que celles-ci ne pénètrent dans les canalisations. Il suffit pour s'en
convaincre d'examiner de nombreux captages ou forages : les échantillons d'eau en
contiennent fréquemment, sans avoir été en contact avec des métaux ferreux. Elles
trouvent dans les canalisations les conditions favorables à leur développement. Grâce aux
composés du fer, elles s'accumulent aux endroits de contre pente, aux vannes, aux coudes,
bref, partout où un ralentissement du courant permet leur sédimentation.
19
I.12.1.2.3. Corrosion biologique et bactéries sulfitoréductrices
Les bactéries sulfitoréductrices sont les agents biologiques majeurs du processus naturel de
réduction du soufre. Elles sont bien connues en raison des phénomènes de corrosion des
métaux ferreux dont elles sont responsables. Germes ubiquitaires, on les rencontre
pratiquement toujours dans le sol, les eaux douces, les eaux salées et le tube digestif de
l'Homme et des animaux. Il s'agit d'un groupe physiologique rassemblant des bactéries de
morphologie diverse, ayant en commun la propriété d'utiliser comme accepteurs d'électrons
les sulfates et les sulfures. Les premiers comprennent les genres Desuljuromonas. La corrosion se présente comme un changement ou une décomposition des matériaux. Elle
peut s'expliquer par un retour du métal préparé industriellement à son état naturel sous forme
d'oxydes, de sulfures et de carbonates, formes primitives et stables. La corrosion est un
phénomène qui s'amplifie au niveau des canalisations métalliques qui transportent l'eau ou au
niveau des appareils producteurs d'eau chaude (échangeurs). Elle donne naissance sur le
matériel en fer ou en fonte à des oxydes de fer, des sels de fers à différents niveaux
d'oxydation qui sedéposent avec des carbonates ; elle forme souvent des clous ou des nœuds
très caractéristiques. Bien que la corrosion soit le plus souvent la résultante d'interactions complexes, la théorie la
plus fréquemment admise repose sur la dépolarisation d'un système électrochimique. Un
couple électrochimique est créé à la suite d'une hétérogénéité du milieu : l'eau d'une part
et un dépôt d'autre part, constitué par des sédiments argileux ou un développement de
bactéries ferrugineuses (Gallionella, Leptothrix). Sur la surface anodique le fer est mis en
solution tandis qu'un film d'hydrogène se forme au niveau de la cathode. Le processus
tendrait normalement vers un état d'équilibre. Pour que l'électrolyse se poursuive il nuit que la
pile soit dépolarisée, c'est à dire que l'hydrogène soit consommé au fur et à mesure de son
apparition. Il est bien difficile d'admettre un tel phénomène sans l'intervention d'un
mécanisme biologique. De là provient sans aucun doute la faveur que connaît la théorie de
Von Wolzogen Kühr dite de « la dépolarisation cathodique ». Des observations minutieuses
ont amené cet auteur à déceler un certain nombre de traits communs à tous les phénomènes de
corrosion du fer au contact de l'eau : les produits de la corrosion sont exclusivement des sels
ferreux et ferriques Fe(OH)2, Fe(OH3), Fe2(S04)3, Fe(C03H)2 ; les sulfates sont réduits en
sulfures ;la zone optimale de pH est comprise entre 7 et 7,6 ; c'est elle qui est la plus
favorable à la croissance des germes ;les conditions d'anaérobiose sont créées à la suite de la
formation de dépôts sur les parois métalliques ;lors des expériences au laboratoire, la
corrosion est stoppée par la stérilisation. Ces remarques lui permettent d'émettre l'hypothèse selon laquelle la corrosion en milieu
anaérobie est entretenue par les bactéries réduisant les sulfates grâce à une action
dépolarisante au niveau des surfaces métalliques jouant le rôle de cathode. Le fait essentiel
est instauration d'un véritable courant de corrosion par dépolarisation cathodique. Il en résulte
la formation d'un certain nombre de sous-produits du métabolisme : sulfure de fer, hydroxyde
ferreux, hydroxyde ferrique. Ces produits d'oxydation localisés au niveau de l'anode et
associés ou non avec des dépôts de bactéries ferrugineuses vont tendre à former des nodules
durs et compacts. Dans certains cas, lorsque l'eau est entartrante, une couche mixte de rouille
et de carbonates peut former une protection naturelle.
20
Des problèmes de goûts et d'odeurs désagréables sont quelquefois rencontrés dans les eaux de
distribution. Des micro-organismes peuvent en être responsables. Ces odeurs et goûts de
terre et de moisi peuvent provenir des actinomycètes qui souvent prolifèrent dans les
réservoirs de stockage avant le traitement. Certains métabolites responsables ont été
extraits et identifiés. Il s'agit de la géosmine, de la mucidone et du 2-méthyl-isobornéol.
L'eau est le constituant essentiel et principal des organismes vivants. Elle est indispensable
aux besoins physiologiques et peut jouer le rôle de vecteur de microbes pathogènes de
façon directe par les larmes, la salive, l'urine, mais aussi de façon indirecte en assurant
la survie, voire la multiplication de l'agent pathogène. Les maladies sont dans ce cas
appelées hydrotelluriques, ce qui indique le rôle de l'eau et du sol. Les échanges d'eau entre l'environnement et l'Homme se font donc dans les deux sens :
l'Homme consomme de l'eau, et excrète des exsudais plus ou moins aqueux et pouvant
contenir une flore microbienne pathogène. L'Homme et les animaux sont contaminés généralement par voie digestive lors d'ingestion
d'eau de boisson ou d'aliment souillés. Les germes peuvent également pénétrer dans
l'organisme en franchissant les muqueuses des premières voies digestives, respiratoires,
génitales, auriculo oculaires et, enfin, la peau indemne ou traumatisée. I.13. L’eau: véhicule d'agents pathogènes
Les eaux douces sont capables de véhiculer un grand nombre d'agents pathogènes, parasites
stricts de l'Homme et des animaux. Ils peuvent être introduits occasionnellement dans l'eau et
parfois tossérninés loin par l'eau. Une survie temporaire dans un nouveau milieu est
nécessaire dans ce cas. Dans le nouvel environnement, les bactéries d'origine intestinale
humaine (entérobactéries) persistent très longtemps. Mais elles ne se développent pas dans
l'eau contaminée. L'eau peut véhiculer des toxines comme la toxine botulinique de type D
lorsqu'elle est contaminée par un cadavre.
I.13.1. L'eau : réserve d'agents pathogènes
Certaines bactéries contaminent et vivent à l'état naturel dans l'eau. Elles s'y multiplient et y
demeurent très longtemps surtout lorsqu'elles sont spondées : Clostridium botulinum,
Clostridium tetani, Bacillus anthracis, bacille de Whitemore, Pasteurella, salmonella,
Erysipelothrix insidosa et les leptospires.
I.14. Méthodes de détection I.14.1. La méthode du nombre le plus probable (NPP)
En1914, le service de santé publique américain (USPublic Health Service Drinking
Water Standard ) a désigné la première norme sur l'eau de consommation (Wolf, 1972).Celle-
ci Spécifiait qu'il ne devait pas y avoir plus d'une portion de 10 ml sur cinq d'échantillon d'eau
contaminée par une ou des bactéries du groupe E. coli lors de la procédure de fermentation en
tubes multiples. Cette méthode es t désignée aujourd'hui comme la Méthode du nombre le
plus probable (NPP; Most Probable Number ou MPN procedure); (McCrady, 1915). La méthode comporte à inoculer une série de tubes avec les dilutions appropriées d'un
Echantillon d'eau. La production de gaz, la formation d'acide ou encore une très forte
Croissance après 48 heures à 35°C constitue une réaction positive présomptive. Bien que
Cette méthode soit facile à appliquer, l'examen complet, comprenant les tests de
Confirmation, exige quatre jours d'incubation et de transfert (Prescott et al., 2003).De
21
plus, il existe un grand nombre de milieu d'isolement différents (bouillon lactose, bouillon
lauryl tryptose, etc.) tous imparfaits et non spécifiques (Rompre et al., 2002). De ce point de vue, les coliformes totaux ont alors être détermines comme étant des bactéries
appartenant à la famille des Enterobacteriaceae dont les espèces détectées varient en fonction
de la composition du milieu d'isolement utilisé. A noter qu'il peut y avoir interaction avec le
bouillon lactose s'il y a trop de bactéries non coliformes dans l'eau (Seidler et al., 1981;
Evans et al., 1981).Une fois obtenus des résultats indiquant la Présence possible de
coliformes totaux dans l'échantillon d'eau avec la méthode de Fermentation en tubes
multiples, d'autres tests sont nécessaire pour confirmer les résultats. La Formation de gaz dans
le bouillon lactose au vert brillant et sels biliaires en moins de 48 heures à 35°C constitue un
test de confirmation positif. Le test des coliformes fécaux peut être utilisé pour déterminer si les coliformes totaux sont
des coliformes fécaux (Apha et al., 1998).La production de gaz après 24 heures d'incubation à
44,5° C dans du milieu EC (pour «bouillon Escherichia coli») est considéré comme un
résultat positif (Prescott et al., 2003). Puis que les résultats du test de fermentation en tubes
multiples sont exprimés en nombre le plus probable de microorganismes présents, cette
technique est semi quantitative. Ce pendant, la précision des estimations est faible et dépend
directement du nombre d'échantillons utilisés pour l'analyse (Rompre et al., 2002). L'intervention par un nombre élevé de bactéries non coliformes (Seidler et al., 1981; Evans
et al.,
1981; Means et al., 1981) et la nature inhibitrice des milieux utilisés Affectent ladétection des
coliformes. Cette technique manque donc de précision au tant Quantitativement que
qualitativement. Le temps requis pour obtenir le résultat est également plus long que celui
requis pour la technique de la filtration sur membrane. Ce pendant, cette technique
demeure utile, particulièrement lors que les conditions ne permettent pas d'utiliser la méthode
de filtration sur membrane (ex: eaux turbides ou colorées (Rompre et al., 2002). En résumé, la technique de fermentation en tubes multiples est facile à implanter et peut Etre
effectuée par un technicien possédant un apprentissage de base en microbiologie .Elle peut ce
pendant devenir laborieuse lors que plusieurs dilutions doivent être réalisées pour analyser
plusieurs échantillons d'eau. Elle n'est pas précieuse et ne demande pas d'équipement
compliqué. Toute fois, cette méthode est très longue (48 heures pour l'obtention des résultats,
suivies de 48 heures supplémentaires pour la confirmation des résultats positifs présomptifs). Il existe également une technique modifiée du NPP par la détection des coliformes totaux Et
thermotolérants. Pour appliquer cette méthode, on incube un échantillon d'eau de 100 ml dans
un seul flacon de culture avec un bouillon trois fois concentré (3X) contenant du lactose, du
sulfate de lauryle et du violet de bromocrésol. Ce test, appelé test de présence/absence (P/A),
est basé sur le postulat qu'aucun coliforme ne devrait être présent Dans100 ml d'eau potable.
La production d'acide (couleur jaune) constitue un test présomptif positif nécessitant une
confirmation (Clark, 1968). Plusieurs études ont montré l'équivalence de la méthode de présence/absence avec la filtration
sur membrane et la méthode du NPP (Jacobs et al., 1986; Pipes et al.; 1986; Bancroft et
al., 1989; Rice et al., 1989). Cette technique a été formellement approuvée par l'Agence de
22
protection environnementale américaine (USEPA) en1990 pour la détermination de
la qualité microbiologique de l'eau potable (USEPA, 1990). I.14.1.1. Les indicateurs de contamination fécale
Depuis l'époque des grandes épidémies de choléra, l'eau potable est sujette à des Campagnes et des programmes de surveillance afin de protéger la santé publique des risques
associés à la présence de microorganismes pathogènes. La détection systématique de tous ces
pathogènes est ce pendant hors d'atteinte du domaine de la surveillance publique. Ces
microorganismes sont habituellement retrouvés en faible concentration dans
l'environnement cequi rend difficile leur détection et leur identification. De plus, les
techniques disponibles pour leur découverte sont trop coûteuses pour être utilisées de façon
routinière. Sachant que les microorganismes pathogènes transmis par l'eau sont en grande
majorité d'origine fécale, les méthodes d'estimation de la qualité microbiologique de l'eau
potable ont depuis le début été conçues pour détecter des microorganismes qui justifieraient la
présence de matières fécales dans l'eau. Ces microorganismes sont nommés les indicateurs de
contamination fécale. L’OMS fait à l'avenir la distinction entre trois groupes de
microorganismes indicateurs.
Tableau 01: Principaux microorganismes indicateurs et index d'intérêt en santé
publique
(Pearson, 1926)
Groupe Définition Exemple
Indicateurs de Un groupe d'organismes qui
Les bactéries hétérotrophes
Procédé Démontrent l'efficacité d'un
procédé de traitement
Aérobies et anaérobies, Facultatives ou
les coliformes, Totaux pour la
désinfection au Chlore
Indicateurs
fécaux
Un groupe d'organismes
qui indiquent la présence
de contamination fécale
Les coliformes Thermotolérants ou
les Escherichia coli suggèrent, tout au
plus, la présence de microorganismes
pathogènes
Microorganisme
s
Index
Un groupe d'organismes
qui indiquent la présence et
l'état d'organismes
pathogènes
Escherichia coli comme Index des
Salmonella et les coliphages comme
index des virus entériques humains
23
Tableau 02: Événements marquants de l'histoire de la recherche sur les
indicateurs deContamination fécale source (Clesceri et al., 1998; WHO, 2004; Pearson,1926
et Higgins et al., 2003)
Année Événements
1854 John Snow associe une épidémie de choléra à la fontaine à eau de Broad Street
1881
Robert Koch démontre l'effet bactéricide des hypochlorites sur des cultures de bactéries
1882 Friedlânder observe le premier coliforme (Klebsiella pneumoniae)
1885
Robert Koch isole la bactérie Vibrio cholerae de la rivière Elbe en territoire allemand.
Utilisation par Frankland de milieu en gélatine pour effectuer les premières.
Observations de routine de l'eau de distribution publique à Londres
1890
Koch publie son manifeste Germ theory of disease qui expose le lien entre l'épidémie
du choléra et l'éclosion de V. cholerae dans l'eau
1891
Percy et Grâce Frankland décrivent le concept d'indicateur en se basant sur la
Présomption que les fèces des gens malades contiennent des pathogènes. Ils Concluent
que les organismes retrouvés dans les égouts doivent être la cible de Plus amples
recherche sa fin de mieux évaluer le risque associé à la consommation d'eau
1892
Schardinger suggère l'utilisation de B. coli comme indicateur pour la Surveillance de la
qualité de l'eau en Australie
1893
Blachstein décrit les coliformes. Première utilisation de l'ozone comme désinfectant de
l'eau (Hollande)
1895
Smith introduit l'utilisation de B. coli comme indicateur pour la surveillance de la
qualité de l'eau en Australie
1904 Eijkman découvre la thermotolérance de B. coli (45°C)
1905
Mac Conkey élabore le milieu permettant de sélectionner les coliformes selon Leur
habileté à fermenter le lactose en produisant de l'acide
1907
Winslow et Walker rapportent que B. coli est plus souvent d'origine fécale que les
autres coliformes connus
1914
Le service de santé publique des États-Unis émet une première réglementation
Concernant la qualité microbiologique de l'eau : moins de deux échantillons de 10 ml
sur 5 peuvent être positif pour B. coli pour considérer l'eau propre à la Consommation
1915
Le service de santé publique des États-Unis délaisse la détection de B. coli pour Celle
des coliformes sous prétexte qu'ils sont des indicateurs Equivalents
1919 Castellani et Chalmers renomment la bactérie B. coli, Escherichia coli, en l'honneur de
son premier observateur
1938
1938 Élaboration du test IMViC (Indole, Methyl red, Voges-Proskauer and Citrate)
Pour différentier les coliformes fécaux des coliformes Environnementaux
24
1948 – 50
L'Angleterre utilise le test de l'indole pour identifier E. coli alors que les États-Unis
identifient les coliformes thermotolérants sur la base de la production de Gaz et
d'acide à 44°C lors de la fermentation du lactose
1930-50
La plupart des pays développés utilisent la chloration comme traitement de l'eau De
consommation
1953 Watson et Crick déterminent la structure en double hélice de l'ADN
1974
L'United States Environmental Protection Agency met en place sa réforme Drinking
water Act décrivant une série de normes concernant la qualité de l'eau De
consommation
1975 Première épidémie d'origine hydrique impliquant entérotoxigène
1980 L'Union Européenne établit ses propres standards (80/778/EEC) s'appliquant à l'eau
de
Consummation
1983
Invention de la réaction de polymérisation en chaîne (PCR) Première présentation à
la conférence Water Quality Treatment d'une méthode Moléculaire pour la détection
de pathogènes transmis par l'eau (hybridation par dot-blot)
1986
Première utilisation de la technique de séparation immuno-magnétique pour la
récupération des pathogènes d'origine hydrique. 'US EPA adopte E. coli comme
indicateur de contamination fécale
1988 Développement de la méthode Colilert® pour la détection des coliformes totaux et
d'E.
Coli 1990 Première utilisation du PCR pour la détection des pathogènes transmissible par l'eau
1993 Épidémie de Cryptosporidium sp .à Mil waukee, Wisconsin, États-Unis
1995 Seule épidémie de Toxoplasma gondii répertoriée dans un pays développé (Canada)
1996 Démonstration de la grande résistance des adénovirus aux rayons UV
1998
L'Union Européenne adoptent E. coli et les entérocoques comme indicateurs de La
qualité microbiologique de l'eau de consommation
2000 Épidémie d'E. coli à Walkerton, Ontario, Canada
2001 Première utilisation de la technologie des microarray ciblant des pathogènes
d'origine
Hydrique 2003
L'Organisation Mondiale de la Santé recommande l'utilisation d'E. coli entant Que
meilleur indicateur de contamination fécale
25
I.14.1.2. Les microorganismes clés de la contamination De nombreux microorganismes ou groupe de microorganismes sont retrouvés dans la matière
fécale mais seules quelques espèces ont le potentiel de servir d'indicateur .Les caractéristiques
de l'indicateur idéal ont été décrit il y a quarante ans par Bonde (MacNaughton et al. , 1999 )
et améliorés plus tard par Toranzos et Mc Feters (Blackstock, 2001 ).Ces derniers stipulent
que l'indicateur de contamination fécale idéal doit être:
Uniquement associé à la présence d'organismes pathogènes;
Absent naturellement dans l'environnement;
Autant résistant à l'environnement (transport et survie) et à la désinfection que les
autres microorganismes pathogènes;
Facilement isolable (cultivable) et identifiable;
Ne doit pas se multiplier dans l'environnement;
Doit pouvoir être détecté par des tests simples et robustes;
Présent en quantité proportionnelle au degré de contamination, à la concentration de
microorganismes pathogènes et de risque sur la santé. L'attribut le plus important est sans doute la relation quantitative entre la concentration de
l'indicateur et le degré de risque attiré par la santé publique. Deux méthodes soustraient
quand vient le temps d'évaluer cette relation, les études épidémiologiques d'exposition
récréatives l'évaluation de l’histoire entre la concentration des indicateurs et de différents
microorganismes pathogènes. L'agence états-unienne USEPA privilégie la première de ces
méthodes. La seconde est utilisée moins fréquemment étant donné que la détection spécifique
d'un organisme pathogène dans un Echantillon ne permet pas d'assurer la présence d'autres
pathogènes ni leurs effets respectifs Sur la santé humaine .Certaines études démontrent
cependant que de telles corrélations Peuvent être assez robustes, telles coliphages F+comme
index des entérovirus dans des eaux environnementales, démontré en Hollande (Whitman et
al., 2003). Trois autres attributs importants sont les doses minimales infectantes, les corrélations de
Survie et de transport entre l'indicateur évalué et les pathogènes d'intérêt (Byappanahalli,
2000). La dose minimale infectante (DMI) pourEscherichia colise chiffre entre1million et
100million unités formatrices de colonie (UFC), alors que celle pour E. coli 0157:H7 est de
moins de 100 et celle de Campylobacter jejuni est d'environ 500 UFC. En ce qui a trait aux
protozoaires, Giardia lamblia présente une DMI de10 à100 cystes et Cryptosporidium en
présente une d'environ 10 oocystes. Quand à lui, le virus de l'Hépatite A a une DMI de 1 à 10
unités formatrices de plaque (pfu) (Hardina et al., 1991.).Contrairement aux indicateurs
bactériens, les Virus peuvent se rendre dans les sources souterraines et ainsi contaminer les
nappes phréatiques (Byappanahalli et al., 2006). Aussi, l'indicateur Clostridium perfringens
forme des spores qui résistent longtemps dans l'environnement, plus long temps que les virus
et les parasites pathogènes, faussant ainsi le degré de risque associé à la consommation de
l'eau analysée. D'autre part, les paramètres abiotiques et biotiques influençant la sur vie des
microorganismes indicateurs et pathogènes sont nombreux (Griffîn et al., 2003):les rayons
UV (Jones, 2001) , la température(Madore et al., 1987), la salinité (Malakoff, 2002), la
prédationpar la flore autochtone et sur tout par les protozoaires (Geldreich et al., 1972 ), la
dessiccation (USEPA, 2002)ainsi que la capacité de ces microorganismes à sporuler,
s'enkyster, atteindre un état viable mais non cultivable(VBNC)ou à résister aux produits de
dés infection. Un autre attribut important est la relation de représentation quantitative entre
26
l'indicateur et Les pathogènes d'intérêt (Munster et al., 1998). L'indicateur idéal doit
finalement être spécifique à la source d'où proviennent les pathogènes, dans ce cas-ci des
fèces animales (Higgins et al., 2003) I.14.1.3. Bactéries hétérotrophes aérobie et anaérobies facultatives
Les méthodes de détection des bactéries hétérotrophes aérobie et anaérobies facultatives
(BHAA) visent à estimer la population bactérienne générale dans l'eau potable. Ce
Regroupement de microorganismes possède un large spectre de capacités métaboliques et de
besoins de croissance mais ne constituent probablement pas de risque réel sur la
santé (Furgal, 1999). Le microbiologiste allemand Robert Koch en 1893, proposa le
paramètre de 100 UFC deBHAA /ml afin d'évaluer la qualité microbiologique de l'eau
(Furgal, 1999).Ses observations Epidémiologiques lui avaient permis d'établir un lien entre
les événements de maladies d'origine hydrique et le taux élevé de BHAA. Le compte de
BHAA devint rapidement et reste aujourd'hui un des standards d'évaluation de la qualité
microbiologique de l'eau (Furgal, 1999). N’existe incidemment pas de méthodes universelles
pour la détection des BHAA. de nombreux milieux de cultures ont aujourd'hui disponibles,
les températures d'incubation variant de 20° C à 37°C et les périodes d'incubation de quelques
heures à au de là de7 jours(Dworzanski et al., 1997 ).Les méthodes utilisant l'incubation sur
gélose pendant 48 h à 35°C semblent ce pendant les plus propices à la croissance des
bactéries potentiellement pathogènes.L'utilité des décomptes des BHAA pour l'étude ci-
présente réside dans leur capacité à endommager et à réduire la population de coliformes
détectée par les méthodes Classiques ce qui causerait une sous-estimation de la contamination
fécale et potentiellement de la présence de pathogènes. I.14.1.4.Coliformes totaux
Le terme coliforme est utilisé depuis longtemps par les bactériologistes pour désigner un
Groupe de bactéries qui peuvent être employées comme indicateurs de contamination fécale
(Sibille et al., 1998, Pearson, 1926).Ce groupe d'indicateur a ce pendant été employé
enremplacement d'E. coli, de là Le nom coliforme, pour évaluer la présence de
contamination fécale (Medema et al., 1997).Ceci est du à trois raisons principales:
1) les coliformes totaux sont facilement isolables des fèces humaines et de l'eau contaminée
par la matière fécale; la plupart (50-100%) des coliformes totaux isolés de la matière fécale
sont des E. coli (Neu et al. , 1997.) et il était donc admis que la détection des coliformes
totaux reflétait la presence d’E. coli; et que les technologies disponibles au début du 20
ième siècle ne permettaient pas la discrimination des E. coli avec les autres coliformes
totaux sur une base routinièren (Medema et al., 1997).
Ce groupe de bactéries est aujourd'hui définit par l'OMS comme étant des bâtonnets à Gram
négatif, positifs pour la catalase et négatifs pour l'oxydase, capable de croître en présence de
sels biliaires et de fermenter le lactose à 35-37°C en produisant de l'acide, du gaz et de
l'aldéhyde en 24-48heures (Dworzanski et al. , 1997 ). Aussi compris dans ce groupe sont les
bactéries de la famille des Enterobacteriaceae qui Sont positifs pour la β-galactosidase.
Plusieurs coliformes, telles que celles appartenant aux genres Citrobacter
Enterobacter,Escherichia, Hafnia, Klebsiella, Kluyvera, Morganella et Proteus, sont non
pathogènes pour lagrande majorité et font partie de la flore normale du Tractus gastro-
intestinal, alors que d'autres sont des pathogènes opportunistes, telles les espèces du genre
Salmonella, Shigella, l'espèce Yersinia pestis, ainsi que les sérotypes entérotoxigènes,
27
entéroinvasifs et entéropathogènes detype 0157:H7 d'E.coli. Plusieurs études démontrent la
présence de conformes totaux dans des échantillons environnement aux composés de matières
provenant de plantes, d'insectes, de l'eau et du sol (Pearson, 1926).Les coliformes totaux
sont aujourd'hui utilisés comme indicateur de procédé des Systèmes de traitement de
l'eau et de moins en moins entant qu'indicateur de contamination fécale. Ils permettent
aussi d'indiquer la présence potentielle de biofilms. Les BHAA sont ce pendant considérés
comme de meilleurs indicateurs pour ces deux utilisations. Selon des données
recueillies durant les 20 dernières années, les coliformes thermotolérants, E. coli et les
entérocoques sont des indicateurs de contamination fécale plus valides que les coliformes
totaux (Carrillo et al., 1985 ).
I.14.1.5. Coliformes thermotolérants
Les bactéries formant ce sous-groupe des coliformes totaux se distinguent de ces dernières
Par leur capacité à fermenter le lactose et à produire du gaz et de l'acide à des températures
de44.5±0.2°C en 24±2 heures. On croyait d'abord que les bactéries ayant la capacité de
croître à des températures élevées étaient nécessairement d'origine fécale, on les appelait
donc les coliformes fécaux. De nombreuses études ont par la suite démontrées que certains
de ces coliformes thermotolérants (CT) étaient retrouvés dans l'environnement en absence de
contamination fécale (Davies et al., 1995 ). On remplaça donc le terme «coliformes
fécaux» par «coliformes thermotolérants».Ce dernier sera d'ailleurs privilégié dans ce
mémoire, Malgré que le terme de microbiologie le plus adéquat pour désigner ce groupe
d'indicateurs est «coliformes thermotrophes». Les CT forment le groupe de microorganismes
le plus communément utilisé en tant qu'indicateur de contamination fécale et ce malgré que
certains de ses membres soient parfois retrouvés dans l’environnement. Escherichia coli
représente 94% des CT alors que les autres espèces, telles les Klebsiella, Enterobacter et
Citrobacter ne représentent que3.2à7.4% (OMS,2004). E. coli se distinguent des Autres CT
par sa capacité à produire de l'indole à partir du tryptophane et aussi par son Activité β-
glucuronidase. Cette espèce bactérienne estconsidérée comme le meilleur indicateur de
contamination fécale (Clesceri et al., 1998).Ceci est principalement du à sa faible
prévalence dans l'environnement comparativement à celles des autres CT. En effet,
Escherichia coli est rarement présent en absence de contamination fécale, quoique l'on en a
retrouvé dans les écosystèmes tropicaux et subtropicaux (Fujioka, 1981), tempéré, ainsi
que dans des Ecosystèmes spécifiques fermés comme dans la sarracenie pourpre, une
plante herbacée Carnivore et emblème floral de la province de Terre-Neuve (Conroy et al.,
1996). Les méthodes classiques de détection d'E. Coli sont relativement simples à réaliser, sensibles
et abordables. E. Coli n'est ce pendant pas considéré comme un index de la présence de
pathogènes entériques Viraux ou parasitaires. Cette bactérie est sensible aux produits de
désinfection et survit Relativement mal dans l'environnement comparativement aux
pathogènes sus mentionnés (Oates et al., 2003). Il est généralement admis que de plus, amples recherches devraient porter sur la Corrélation
de la présence d'E. coli avec celle des pathogènes a fin de déterminer la nécessité de
développer de nouveaux indicateurs et que la détection des pathogènes viraux et
parasitaires nécessite une analyse directe et indépendante. I.14.1.6. Les entérocoques intestinaux
28
Les bactéries regroupées sous l'appellation générale des «Streptocoques fécaux» sont des
Coques à Gram-positif et sont négatifs pour la catalase. De plus, ils hydrolysent l'esculine, ne
sont pas inhibés par les sels biliaires et tolèrent les environnements au pH basique. Ils sont
anaérobies facultatifs et croissent seuls, en paires ou en chaînettes. Ils appartiennent aux
genres Enterococcus et Streptococcus et possèdent l'antigène groupe D de Lancefield
(Higgins et al., 2003). Les entérocoques de la flore intestinale peuvent être discriminés des
streptocoquesFécaux par leur capacité à croître à 10°C et à 45°C, à pH 9.6 et dans un milieu
contenant 6,5% NaCl. Ces bactéries ont d'ailleurs commencé à être utilisées comme indicateur
de Contamination fécale de l'eau de mer aux États-Unis dans les années1940-1950 (Wright et
al., 2004).
Quoique certaines études démontrent la présence des entérocoques intestinaux dans le sol et
Dans l'eau en absence de contamination fécale, ce groupe est considéré comme ayant
une grande spécificité pour la contamination fécale. Les entérocoques intestinaux sont ce
pendant retrouvés en plus faible quantité dans la matière fécale que les E. coli. Une
caractéristique avantageuse des entérocoques intestinaux réside dans leur capacité de survie
dans l’eau, leur résistance à la dessiccation, au pH élevé, à la chloration (Byappanahalli,
2000) et au traitement de l'eau en aérobie comparativement aux E. coli. Selon l'OMS, ils
servent à complémenter la détection des E. coli. I.14.1.7. Clostridium perfringens et autres Clostridium sulfito-réducteurs
Ces bactéries sont des anaérobies stricts qui réduisent les sulfites (S04-) en hydroxyde de
souffre (H2S) .Elles sont à Gram positif, sporulées, non-motiles, en forme de bâtonnet et ont
d'abord été rapportées par Welchet Nutall en1892 comme agent causal de la gangrène. Ces
microorganismes sont utilisés principalement en Europe pour évaluer la qualité
Microbiologique de l'eau potable (Higgins et al., 2003) sont exceptionnellement résistants aux
Conditions environnementales défavorables telles les radiations UV, des valeurs de pH et de
températures extrêmes et la présence d'agents de désinfection. Ils sont ainsi considérés comme
étant les meilleurs indicateurs de la présence des pathogènes entériques viraux et parasitaires,
qui survivent plus long temps dans l'environnement que les indicateurs bactériens de type
coliforme (LeChevallier et al., 1996).Cette grande résistance du C. perfringens dans
l'environnement dépasse ce pendant celle des pathogènes viraux et parasitaires et fausse
potentiellement la perception quand à la qualité microbiologique réelle de l'eau testée (Struck,
1988). Tout comme la plupart des E. coli et des entérocoques intestinaux, C. perfringens ne se
multiplie normalement pas dans l'environnement tempéré. La complexité et le coût élevé
des méthodes de détection sont les principaux inconvénients de l'utilisation de ce groupe
d'indicateur (Struck, 1988). I.14.1.8. Les coliphages
Les coliphages sont des bactériophages qui infectent spécifiquement E. coli ainsi que d'autres
espèces liées (Shigella sp.) et qui les utilisent comme hôte a fin de se répliquer. Ils sont
ainsi assez spécifiques aux E. coli et se répondent donc dans les fèces humaines ou animales
mais aussi dans l'environnement dans la mesure obligatoire ou les hôtes bactériens y sont
présents. On dénombre deux groupes de coliphages utilisés comme indicateur de
contamination fécale: les coliphages somatiques et les coliphages F-ARN. La grande
différence entre ces deux groupes est leur voie d'infection. Les coliphages F-ARN sont
potentiellement de bons indicateurs de contamination fécale Virale étant donné leur similarité
29
de comportement, de morphologie et de structure avec les virus entériques humains. La
similarité entre les capacités de sur vie dans l'eau des coliphages et des virus entérique sa
d'ailleurs été démontrée. De plus, les coliphages Sont résistants aux désinfectants utilisés pour
le traitement de l'eau tel que le chlore (Ashbot, 2004 ; Binsztein et al., 2004) .Par contre, ils
ne nuisent pas tous les critères correspondant à l'organisme indicateur absolu (Higgins et al.,
2003).
En effet, Grabow et al en 2000 ont détecté des virus entériques à partir d'échantillons d'eau
qui étaient négatifs pour les coliphages (Higgins et al., 2003).
Matériel et méthodes
31
II. Matériel et méthodes
II.1. Présentation de la zone d’étude
ville de Béni Abbés, fondée sur le bord de l’oued Es-Saoura, est située au Sud-ouest du
Sahara algérien (Fg. 1). Dans le passé, l’eau originale d’une source locale d’origine
souterraine (nappes phréatiques) été estimée comme potable pour la ville. Elle était
abordable , à tous les citoyens, à l’aide d’un réseau de distribution local (Rames, 1941).
L’oasis de Béni Abbés, c’est une partie de la Saoura, prend comme coordonnées (2°1'5'' O,
30°8'7'' N). Elle se situe dans le Sahara occidental de l’Algérie, à environ 240 km au Sud-
Ouest du chef- lieu département de Bechar et à 880 Km au Sud-Ouest d’Alger (fig.02). La
vallée de la Saoura résultant de la conjonction des oueds Guir et la Zouzfana, représente
un principal cours d’eau du Sahara Nord. Cette région est connue par un climat aride à
semi-aride. La température moyenne est 19,5°C en hiver et 48°C en été. La pluviométrie
moyenne annuelle très faible. Les ressources en eau certaines de la région sont
principalement souterraines. Absence des ressources superficielles qui sont inexistantes
(Merzougui et al. , 2007).
La production des eaux potables annuelle été estimée à 1 040 688 m3/an. Les quantités
d’eau consommées étaient variables selon les saisons ; la quantité fournie aux citoyens
atteignait 693 500 m3/an, et, la palmeraie été irriguée par 347188 m
3 /an, 33.36% de
l’eau totale produite (Bennadji et al. , 1998).
Actuellement, suite au développement démographique, la population de la ville s’élève à
13.000 habitants (Deuerlein et al., 2004), le service n’est assuré que deux heures environ par
jour. Cet état a encouragé les services publics à fouiller d’autres sources hydriques par le
forage de nouveaux puits afin d’accentuer la source principale de Sidi Othmane qui a un
débit de 26 litres par seconde. Ainsi, actuellement 2 puits sont mis en service (puits
communal et forage1), ayant chacun un débit de 4 litres par seconde, et représentant 20% de
la production totale (Deuerlein et al., 2004).
Généralement, plusieurs types de microorganismes contaminent l’eau et décadent sa
qualité sanitaire. Cette contamination est souvent résulte de rejet de matières fécales
d’origine humaine ou animale. Certains de ces microorganismes peuvent déclencher des
maladies hydriques graves (Taras et al., 1971). D’autre part, l’implantation d’usine de la
limonaderie de proximité (Deuerlein et al., 2004), qui rejettent des résidus proche du puits
communal, peut être aussi un facteur de dégradation de la qualité sanitaire des eaux. Les
systèmes du réseau d’eau potable, celui qui possède de multiples conduits en parallèle et
celui des foggaras d’irrigation de palmeraie, sont exposés à la contamination croisée
(Bennadji et al., 1998). Les données sur le fonctionnement des deux réseaux n’ont pas fait
l’objet d’étude et sont toujours méconnues (Deuerlein et al., 2004)
32
Fig. N°02 : Carte géographique de la zone d'étude
Site 1 : Ain Sidi Otmane :
Il est situé dans la zone Est de la ville de Béni Abbés (30°07’2.68’’N 2°09’56.63’’O). ce site
est menace par les rejets des décharges illégales et suite à l’extension de l’urbanismeIl Reçoit
des infiltrations des fausses septiques des habitants de quartier chaaba
Site 2 : Puits Communal : Il est situé dans la zone sud de la ville de Béni Abbés il
se situe à 300 mètres d’oued ou il ya rejet principale des eaux usées de Béni
Abbés et à 450 mètres du cimetière Sidi Otmane
Site 3 : Foggara de Béni Abbés : Il est situé dans la zone Ouest de la ville de Béni
Abbés elle sesitue dans un quartier populaire entoure par des habitats en toube et dans
ces maisons il ya élevage des animaux et des jardins.
Site 4 : Forage de Béni Abbés : Il est situé dans la zone Nord de la ville de Béni Abbés il est
situe au pied de la dune
33
Fig. 03 : Positionnement des sites d’étude N° 01, 02,03 et 04 (Google, 2016 modifiée).
Fig. 04 : Positionnement de site d’étude N° 05 (Google, 2016 modifiée).
34
Figure 05 : Positionnement de site d’étude N° 06 (Google, 2016 modifiée).
Site 5 : Foggara d’Ougarta : Il est situé dans une localité à 40 km Sud Est de la ville
de BéniAbbés.La foggara se situe dans le village non protégé il ya rejet des déchets
par les habitants en plus des fausses perdus elle est fréquenté par des oiseaux et même
les animaux errants
II.2. Echantillonnage
A. Prélèvement d'échantillons d'eau
L'eau est peut-être le principal élément à prélever dans une usine alimentaire,
puisqu'elle est utilisée pour le nettoyage, qui est l'un des fondamentaux agents de diminution
de la contamination bactérienne.
Pour prélever des échantillons d'eau en vue d'un examen microbiologique, procéder comme
suit:
- Utiliser des bouteilles stériles fournies par le laboratoire. Si l'eau est chlorée, il faut
équilibrer le chlore. Dans ce cas, le laboratoire verse dans les bouteilles, avant la stérilisation,
une quantité de thiosulfate de sodium correspondant à100mg/1 d'échantillon .Lorsque
l'échantillon est pour chercher des micro- organismes (bactéries) pendant le transport de
l'échantillon jusqu'au laboratoire, de sorte que la charge microbiologique, au moment de
l'examen, est la même qu'au moment du prélèvement. - Inspecter soigneusement l'extérieur du
robinet au quel l'échantillon va être prélevé. Si le robinet perd par la poignée, prélever si
possible l'échantillon à un autre robinet; si non, signaler la fuite au laboratoire.
-Nettoyer et sécher1'extérieur du robinet. Il n'est pas nécessaire de le flamber.
-Laisser couler l'eau du robinet grand ouvert pendant au moins 30 secondes avant de prélever
l'échantillon, ou pendant deux ou trois minutes, selon la longueur de la conduite d'eau.
35
-Refermer partiellement le robinet pour pouvoir prélever l'échantillon sans éclaboussures.
Ouvrir avec précaution la bouteille pour éviter la contamination, comme pour tout autre
prélèvement aseptique, en veillant à ce que rien d'autre que l'eau ne touche l'intérieur
de la bouteille ou l'intérieur du bouchon. Ne pas rincer la bouteille.
-Remplir soigneusement la bouteille sans éclaboussures et prendre soin que l'eau passée sur
les mains de 1'échantillonner ou sur des objets.
Extérieurs ne pénètre pas dans la bouteille. Ne remplir la bouteille qu'aux trois quarts.
-Sauf indications contraires, le volume minimal nécessaire pour un examen microbiologique
est de 100ml.
-Remettre ou envoyer l'échantillon rapidement au laboratoire. Si l'échantillon n'est pas
analysé dans les 24 heures qui suivent le prélèvement, les résultats risquent d'être faussés.
Transporter l'échantillon dans une caisse isotherme à température de réfrigération. Il peut
aussi être nécessaire de prélever des échantillons d'eau dans des réservoirs ouverts et des
cuves .Il faut veiller à ne pas contaminer les réservoirs et le récipient qui va recevoir
l'échantillon. Frotter l'intérieur et l'extérieur d'un récipient gradué en acier inoxydable à
l'aide d'un-gros tampon de coton imprégné d'éthanol à 95 pour cent ou d'isopropanol à 70
pour cent. Chauffer ce récipient à la flamme pour enflammer l'alcool et laisser celui-ci
flamber complètement. Refroidir le récipient d'acier en le plongeant dans l'eau à
échantillonner et en le vidant deux fois. Prélever l'échantillon d'eau et le verser
immédiatement dans un récipient stérile (FAO, 1989).
B. Transport et conservation au laboratoire
La quantité originale en germes des eaux, risque d’avoir des modifications dans le flacon,
après le prélèvement. C’est pour cela que toute analyse doit être effectuée le plus rapidement
possible. La durée du transport ne dépasse pas 01 heure, et la température extérieures et
inférieure ou égale à 10 °C. Même dans les conditions convenables, l’analyse
bactériologique doit débuter dans un délai maximal de 06 heures, après la prise de
l’échantillon (Rodier et al., 1996).
II.3. Analyse physicochimique
Les prélèvements pour les analyses physico-chimiques ont été effectués dans des flacons en
polyéthylène propres et conservé dans une glacière avec un délai de transport ne dépassant
pas 2 h. Les dosages sont réalisés au laboratoire du contrôle de qualité de Béchar en
suivant les protocoles cités, dont les paramètres sont :
II.3.1. La température
La mesure est effectuée sur le terrain par un thermomètre gradué au 1/10 °C. Il y a lieu de
déterminer la température de l’air au même endroit et au même moment (Rodier et al., 1996).
II.3.2. Le pH
La mesure est effectuée par un pH-métre portable. (Mettler Toledo MX 300).
36
II.3.3. Détermination résidus secs (RS)
Principe : l’eau est filtrée et le poids de matières retenus par le filtre est déterminé par
peséedifférentielle (Rodier et al., 1996). Les MES s’obtiennent soit par filtration des effluents
peu chargés soit par centrifugation des solutions puis séchage jusqu’à l’obtention d’un résidu
sec constant.
Mode opération :
Laver le disque de filtration à l’eau distillés, le sécher (105°C) jusqu'à masse
constante, puis le peser à 0,1mg prés après passage au dessiccateur .le mettre en place
sur l’équipement de filtration (Rodier et al., 1996).
Mettre en service le dispositif d’aspiration ou de pression. Verser l’échantillon (V) sur
le filtre. Rincer la fiole ayant continu l’eau à analyser avec 10ml d’eau distillé. Faire
passer sur le filtre cette eau de lavage (Rodier et al., 1996).
Laisser essorer le filtre, sécher à 105°C. Laisser refroidir au dessiccateur et peser à
0,1mg prés jusqu'à poids constant (Rodier et al., 1996).
II.3.4. La conductivité électrique
La mesure est réalisée par un conductimètre portable (Mettler Toledo MX 300) et exprimée
en µS/cm
II.3.5.Détermination de l’alcalinité (TA –TAC) :
La détermination du TA-TAC par la méthode titrimétrie est basée sur la neutralisation d’un
certain volume d’eau par un acide minéral dilué en présence d’un indicateur coloré comme le
montre le protocole en annexes (Rodier et al., 1996).
II.3.6.Détermination du titre hydrotimétrique (TH) :
La détermination par la méthode complexométrique se base sur le fait que les alcalinoterreux
présents dans l’eau sont amenés à former un complexe avec le sel EDTA. La disparition des
dernières traces d’éléments libres à doser est décelée par le virage d’un indicateur spécifique
comme c’est décrit dans les annexes (Rodier et al., 1996).
II.3.7. Dosage des chlorures (Cl-) :
Dans la méthode de Mohr, les chlorures sont dosés en milieu neutre par une solution titrée de
nitrate d’argent en présence de chromate de potassium, la fin de la réaction est indiquée par
l’apparition de la teinte rouge (Rodier et al., 1996).
37
3 II.3.8. Dosage des nitrates (NO-
) :
Le dosage par spectrophotométrie d’absorption se base sur le fait qu’en présence de salicylate
de sodium ; les nitrates donnent du paranitrosalicylate de sodium coloré en jaune et
susceptible d’un dosage spectrophotométrie (Rodier et al., 1996).
Dosage de Chlorures par méthode de Mohr
Réactifs : - Acide nitrique concentré.
- Carbonate de calcium Pure.
- Solution de chromate de potassium à 10%
- Solution de nitrate d’argent 0,1 N.
Mode opératoire :
Introduire 100 ml d’eau à analyser dans un erlenmeyer de 250 ml, ajouter 3 gouttes
d’acide nitrique concentré puis une pincée de carbonate de chaux et 3 gouttes de chromate de
potassium à 10%. Verser au moyen d’une burette la solution de nitrate d’argent jusqu'à
apparition d’une teinte rougeâtre.
Résultat :
La teneur en chlorures en mg/l =V×35,5
Avec V = volume de nitrate d’argent utilisé en ml.
Dosage des nitrates par spectrophotométrie d’absorption moléculaire
Réactifs: - Acide sulfurique (d = 1,84).
- Solution de salicylate de sodium à 1 %.
- Solution d’azoture de sodium :
Azoture de Na 50 mg
Eau distillée qsp 100 ml
- Solution d-hydroxyde de sodium :
Hydroxyde de sodium 200 g Sel disodique de EDTA 50 g Eau
distillée qsp 1 l
- Solution étalon de nitrate à 100 mg/l
Mode opératoire :
Introduire dans trois erlenmeyer
Blanc Etalon Echantillon
Eau distillée 10 ml - -
Etalon (5 mg/l) - 10 ml -
Eau à analyser - - 10 ml
Solution d’azoture 0,5 ml 0,5 ml 0,5 ml
Acide acétique 0,2 ml 0,2 ml 0,2 ml
Mélanger et incuber 5 min puis évaporer à sec dans une étuve à 80 °C, ajouter 1 ml de
salicylate de Na, mélanger et évaporer, laisser refroidir.
Reprendre le résidu par 1 ml d’acide sulfurique concentré, attendre 10 min.
38
Ajouter 15 ml d’eau distillée puis 10 ml de solution d’hydroxyde de Na qui
développe une couleur jaune, lire à la longueur d’onde de 415 nm.
Résultats : donnés en mg/l.
N.B: la loi de Beer est observée pour des concentrations de 0 à 10 mg/l, il faut donc procéder
à des dilutions convenables de l’échantillon à analyser.
Courbe d’Etalonnage pour dosage des nitrates :
Dans une série de capsules de 60; introduire successivement :
Numéro des capsules T I II III IV
Solution Etalon d’azote nitrique 5 mg/l (ml) 0 1 2 5 10 Eau distillée (ml) 10 9 8 5 0 Correspondance en mg/l d’azote nitrique 0 0,5 1 2,5 5 Solution d’azoture de sodium (ml) 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 Acide acétique (ml) 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2
Attendre 5 min puis évaporer à sec au bain marie ou dans une étuve portée à 75 –80°C (ne pas
surchauffer ni chauffer trop longtemps). Ajouter 1 ml de solution de salicylate de
sodium, mélangé puis évaporer, laisser refroidir.
Reprendre le résidu pour 1 ml d’acide sulfurique concentré ayant soin de l’humecter
complètement. Attendre 10 min, ajouter 15 ml d’eau permutée puis 10 ml de solution
d’hydroxyde de sodium qui développe la couleur jaune. Effectuer les lectures au
spectrophotomètre à la longueur d’onde de 451 nm. Soustraire des unités d’absorbance, lues
pour les étalons, la valeur relevée pour le témoin.
Construire la courbe d’étalonnage.
39
Courbe d’Etalonnage pour dosage des sulfates:
Dans une série de tubes numérotés, introduire successivement :
Numéro des tubes T I II III IV V VI
2-Solution Etalon de SO4 (ml) 0 1 3 5 7 9 10
Eau distillée (ml) 50 49 47 45 43 41 40
Acide chlorhydrique au 1/10 (ml) 1 1 1 1 1 1 1
Solution de chlorures de baryum stabilisée (ml) 5 5 5 5 5 5 5 5
2- Correspondance en mg/l de SO4 0 3 9 15 21 27 30
Agiter 2 ou 3 fois énergiquement. Après 15 min de repos, agiter à nouveau et faire La lecture
au spectrophotomètre à la longueur d’onde de 650 nm. Construire la courbe d’étalonnage.
40
Etalonnage des réactifs utilisés dans les dosages titrimétriques Etalonnage d’une
solution d’Hcl 1 N :
Réactif : - Carbonate de sodium pur et anhydre.
- Solution d’hélianthine.
Mode opératoire:
peser 1,06 g de Na2CO3, le dissoudre dans 100 ml d’eau distillée, ajouter deux gouttes
d’hélianthine puis verser l’acide contenu dans la burette jusqu’au virage du jaune au rose.
Calculs: 1,06 de Na2CO3correspondent à 0,68 g de HCl.
o Etalonnage d’une solution de nitrate d’argent 0,1 N :
Réactif : - Solution d’acide chlorhydrique 0,1 N.
- Carbonate de Calcium.
- Solution d’hélianthine.
- Solution à 10 % de chromate de potassium.
41
Mode opératoire:
Introduire la solution de nitrate d’argent dans la burette, placer dans un erlenmeyer 10 ml
d’HCl 0,1 N puis ajouter 1 goutte d’hélianthine et une pincée de carbonate de calcium, agiter
jusqu’au virage de l’hélianthine au jaune orangé, ajouter alors 5 gouttes de solution de
chromate, verser le nitrate d’Argent en agitant jusqu’au virage rouge brique.
Calculs: le titre de la solution.
Avec V : volume versé d AgNO3.
Etalonnage d’une solution d EDTA (0,01 M)
Réactif : - Solution étalon de calcium à 0,4 g/l.
Carbonate de calcium déshydraté 1 g.
Acide chlorhydrique dilué au 1/4 qsp dissoudre
Rouge de méthyle (0.3 %) quelques gouttes
Ammoniaque diluée au 1/10 p virage de l’indicateur
Eau distillée qsp 1 l
Mode opératoire:
Prélever 20 ml de solution étalon de calcium, les diluer à 50 ml et procéder au dosage comme
décrit dans le mode opératoire de la dureté totale.
Calculs: la concentration de la solution EDTA en mol/l
V1 : volume en ml de la solution étalon
V2 : volume en ml de la solution EDTA
Correction du titre d’une solution :
Lorsqu’une solution contient une masse de substance supérieure à celle qui correspond à la
normalité, on peut ramener le titre de cette solution à sa valeur normale de la façon suivante :
Soient m la masse au litre de substance correspondant à une liqueur normale.
m’ la masse au litre de cette substance dans la solution à réajuster.
Compléter ensuite jusqu’au trait de jauge avec la solution à réajuster.
42
Tableau N° 03: Techniques de conservation des échantillons destinés à l’analyse physico-
chimique (ISO 5667/3–1985)
Paramètre à
étudier
Technique de conservation Durée de conservation maximale
recommandée avant analyse
Conductivité Réfrigération entre 2 et 5 °C 24 h
Chlorures Plusieurs mois
Dureté totale Acidification avec HNO3 à pH <2 1 à 3 jours
Nitrates
Acidification à pH <2 avec H2SO4
et Réfrigération entre 2 et 5 °C
24 h
Azote ammoniacal
Acidification à pH <2 avec H2SO4
et Réfrigération entre 2 et 5 °C
24 h
pH TA – TAC
Réfrigération entre 2 et 5°C 24 h
réfrigération entre 2 et 5°C 24 h
Oxydabilité au Réfrigération entre 2 et 5°C 24 h
KMnO4
Sulfates Réfrigération entre 2 et 5°C Une semaine
NB : la nature du récipient soit du verre soit du polyéthylène.
II.4.Analyses bactériologiques
L’analyse bactériologique a pour but la recherche et le dénombrement des germes existant
dans les échantillons d’eau à analyser.
Il faut déclarer qu’un examen bactériologique ne peut être interpréter que s’il est effectué sur
un échantillon correctement prélevé dans un récipient stérile, selon un mode opératoire précis
évitant toutes les contaminations accidentelles, correctement transporté au laboratoire et
analysé sans délai ou après une courte durée de conservation dans des conditions
satisfaisantes (Rodier et al., 2005).
En raison de la variété des espèces bactériennes, virales et parasitaire, des germes test vont
être analysés qui désigneront l’aspect microbiologique de ces eaux. Une analyse complète de
l’eau brute a été effectuée en se basant sur la recherche et le dénombrement des paramètres
suivants :
Germes totaux ;
Coliformes totaux et fécaux ;
Streptocoques fécaux ;
Clostridium sulfito-réducteurs.
43
II.4.I. Recherche et dénombrement des germes totaux
Définition : Bactéries, Levures, Moisissures se développant en aérobiose, lorsque
l’essai est pratiqué selon la méthode précise. Le principe comporte à mettre en évidence les
bactéries qui se développent à 20°C facilitant ainsi les germes spécifiques de l’eau Et celles
qui se développent à 37°C a idant ainsi les germes issus de l’homme et des animaux à sang
chaud.
Intérêt :
Le dénombrement des germes revivifiables est utilisé comme indicateur de pollution :
dans les milieux de très bonne qualité microbiologique pour contrôler une éventuel
contamination bactérienne. Ce sont essentiellement des eaux souterraines des nappes
profondes qui seront contrôlées.
Dans l’usine de potabilisation, il permet de contrôler l’efficacité des différentes étapes du
traitement.
Dans les réseaux : une augmentation de la concentration bactérienne après la station de
traitement peut être le signe d’une multiplication bactérienne dans le réseau ou d’une
pénétration de bactéries à l’intérieur de celui-ci.
Dans les réservoirs et châteaux d’eau, on suit les effets du stockage et de la stagnation sur la
qualité de l’eau et sur la reviviscence des germes Selon les normes internationales, les
micro-organismes reviviscibles se définissent comme étant la totalité des bactéries, levures et
moisissures capables de former des colonies dans ou sur le milieu de culture spécifié dans les
conditions d’essai décrites.
Mode opératoire
A partir de l’eau à analyser, on met 2 fois 1 ml dans deux boites de Pétri vides préparées à cet
usage et numérotées (figure 7).
Compléter ensuite chacune des boites avec environ 15ml de gélose PCA et mélanger avec
précaution en mouvement rotatoire puis laisser solidifier.
Incubation et lecture
Retourner les boites et incuber à une température de 37 °C pendant 24 h à 48 h, l’autre à
22 °C pendant 72 h. La lecture se fait après chaque 24h. On calcule le nombre de
colonies formées présentes dans un millilitre d’échantillon.
Expression des résultats
Les résultats sont traduits en nombre de germes par 1 ml (germes/1ml).
Tous les isolats sont identifies par des galeries biochimique (API 20 E) puis les résultats sont
portés sur une feuille de calcul pour l'identification microbienne Réalisées par J-Noël JOFFIN
à partir du travail de Michel CAVALLA, des observations de Jean CAU
44
Fig 06 : Recherche et dénombrement des germes totauxdans l’eau
II.4.2.Dénombrement des coliformes totaux et fécaux : A.Définitions :
Les coliformes totaux : sont à des bacilles Gram négatif, non sporulé, oxydase négatif,
aérobie et anaérobie facultatifs, capables de se multiplier en présence de sels biliaires et de
fermenter le lactose avec production de d’acide et de gaz en 48h à une température de 35-
37°C. Ils se divisent en deux catégories :
Les germes d’origine fécale stricte : Escherichia coli, Citrobacter, Klebsiella , serratia.
45
Les germes provenant d’autre sources environnementales (aquatique et tellurique) :
Enterobacter intermedium et Amnigenus, Klebsiella terrigena.
Les coliformes fécaux ou thermo tolérants : présentent les mêmes propriétés mais qu’ils
S’accroissent à 44°C dont l’origine fécale est plus nette.
Escherichia coli présumé: correspond à des coliformes thermo tolérants qui produisent de
l’indole à partir du tryptophane à 44°C.cet indicateur est le plus spécifique d’une
contamination fécale.
Intérêt :
Dans l’eau, ils lèsent leur viabilité plus lentement que la majorité des bactéries pathogènes et
intestinales et forment donc un bon marqueur de contamination fécale de l’eau de premier
ordre. De plus, leur résistance aux agents désinfectants, et notamment au chlore, est voisine
de la résistance des bactéries pathogènes ; ils vont donc constituer de bons indicateurs
d’efficacité de traitement.
Examen est intéressant pour juger de l’efficacité de la désinfection d’une eau est d’un intérêt
moindre pour prouver une contamination fécale sure
La recherche et le dénombrement des coliformes thermotolérants ou fécaux à 44°C : la
présence de coliformes thermotolérants signe l’existence quasi certaine de la contamination
fécale.
La recherche et le dénombrement des seules Escherichia coli ou présumés : parmi les
coliformes thermotolérants, Escherichia coli est l’espèce la plus représentée dans la flore
intestinale de l’homme et des animaux.
II.4.2.1.Recherche et dénombrement des coliformes totaux en milieux liquides (Méthode
de NPP)
Principe :
Cette méthode est une évaluation statistique du nombre de micro-organisme supposés
subsistés dans l’eau de manière parfaitement aléatoire. L’estimation de la densité bactérienne
est obtenue par application du principe de vrai semblance, à partir de réponses
positives observées pour une ou plusieurs dilutions successives de la suspension bactérienne
originelle. Il s’agit d’une méthode quantique et non pas énumératif.
46
A-Test de présomption :
A partir de l’eau à analyser, porter aseptiquement :
- 3 fois 10 ml dans 3 tubes contenant 10 ml de milieu BCPL D/C muni d’une cloche de
Durham.
- 3 fois 1ml dans 3 tubes contenant 10 ml de milieu BCPL S/C muni d’une cloche de
Durham.
- 3 fois 0,1ml dans 3 tubes contenant 10 ml de milieu BCPL S/C muni d’une cloche de
Durham.
Chassez le gaz présent éventuellement dans les cloche et bien mélanger le milieu, l’incubation
se fait à 37 °C pendant 24 à 48 heures.
Seront considérés comme positif + ; les tubes présentant à la fois :
Un dégagement du gaz (supérieur au 1/10 de la hauteur de la cloche).
Un trouble microbien accompagné d’un virage du milieu au jaune (ce qui constitue le témoin
de la fermentation du lactose présent dans le milieu).
La lecture finale se fait selon les prescriptions de la table de Mac Grady NPP.
B- Test de confirmation
Le test de confirmation ou test de Marc Kenzie est basé sur la recherche de coliformes fécaux
parmi lesquels on appréhende surtout la présence d’Escherichia coli.
Les tubes de BCPL positifs, après l’agitation, prélever de chacun d’eux quelques gouttes à
l’aide d’une pipette Pasteur pour faire le repiquage dans un tube contenant le milieu Schubert
muni d’une cloche (figure 7). Chassez le gaz présent éventuellement dans les cloche et bien
mélanger le milieu. L’incubation se fait à 44 °C pendant 24 h.
Lecture
Seront considérés comme positif ; les tubes présentant à la fois :
Un dégagement du gaz (supérieur au 1/10 de la hauteur de la cloche).
Un anneau rouge ou rose en surface, témoin de la production d’Indole par Escherichia coli
après addition de 2 à 3 gouttes du réactif de Kovacs.
La lecture finale se fait selon les déterminations de la table de Mac Grady NPP.
à en tenant compte du fait qu’Escherichia coli est à la fois producteur de gaz et d’indole 44
°C.
Utilisation d’un seul tube confirmatif (Dénombrement d’E. coli).
47
Fig N° : 07 : Recherche et dénombrement des coliformes totaux et fécaux dans l’eau
48
II.4.3.Recherche et dénombrement des streptocoques fécaux ou Entérocoques
II.4.3.1.Recherche des Streptocoques fécaux en milieu liquide
•Définition : bactéries Gram positif, sphériques ou ovoïdes, formant des chainettes, non
sporulées, catalase négative, possédant l’antigène D, croissant en anaérobiose à 44°C, et à pH
9.6, et capables d’hydrolyser l’esculine en présence de bile. Ils se divisent en deux genres
Streptococcus et Enterococcus.
Intérêt :
L’apport des entéroques par rapport aux coliformes repose en leur plus grande résistance dans
les eaux naturelles ; leur présence serait donc le signe d’une contamination fécale de l’eau
plus ancienne.
La résistance des entérocoques aux agents désinfectant est également plus importante,
apparemment du fait de leur mode groupement en chainettes, et est comparable à celle des
entérovirus. Cette propriété pourrait permettre aux entérocoques de mieux représenter la
contamination virale d’une eau.
Par contre une partie des espèces est peu spécifiques des contaminations fécales. On
retrouve par exemple Streptococcus feacalis var. liquefaciens dans l’environnement, sur les
végétaux ou sur des sols non contaminés.
A.Test de présomption :
A partir de l’eau à analyser, porter aseptiquement :
3 fois 10 ml dans 3 tubes contenant 10 ml de milieu Rothe D/C(double concentration);
3 fois 1 ml dans 3 tubes contenant 10 ml de milieu Rothe S/C (simple concentration),
3 fois 0.1ml dans 3 tubes contenant 10 ml de milieu Rothe S/C (figure 8) :
- Bien mélanger le milieu et l’inoculum.
- L’incubation se fait à 37 °C pendant 24 à 48 heures.
Lecture
Seront considérés comme positifs, les tubes présentant à la fois :
Un trouble microbien accompagné d’un virage du milieu pendant cette période est
présumé contenir un streptocoque fécal.
La lecture finale se fait selon les prescriptions de la table du NPP.
A. Test de confirmation
Le test de confirmation est basé sur l’affirmation des Streptocoque fécaux éventuellement
présents dans le test de présomption. Les tubes de Rothe positifs, après l’agitation, prélevée de
chacun d’eux quelques gouttes à l’aide d’une pipette Pasteur donc faire l’objet d’un repiquage
dans un tube contenant le milieu Litsky Eva (Figure 9). Bien mélanger le milieu et l’inoculum
et l’incubation se fait à 37°C pendant 24 heures.
Lecture
Seront considérés comme positifs, les tubes présentant à la fois : Un trouble microbien.
Une pastille violette (blanchâtre) au fond des tubes.
La lecture finale se fait selon les règles de la table du NPP, le nombre de
streptocoque fécaux sont par 100 ml de l’eau analysé.
49
Fig 08 : Recherche et dénombrement des stereptocoques fécaux dans l’eau
50
4.4.Recherche et dénombrement des spores de bactéries des anaérobies sulfitoréductrice
et de Clostridium sulfitoréducteurs.
Définitions : Spores de bactéries anaérobies sulfitoréductrices : formes de résistance de
micro-organismes se multipliant en anaérobiose à 37°C ± 1 en 24h et ou 48h en gélose
viande foie et donnant des colonies typiques réduisant le sulfite de sodium.
Spores de Clostridium sulfitoréducteurs : même définition que la précédente pour des
bacilles à Gram positif, ne possédant pas de catalase et ayant l’aspect morphologique des
Clostridia.
Intérêt :
Les bactéries anaérobies sulfito-réductrices ou les clostridia sulfito-réducteur voire encore
Clostridium perfringens ne sont pas tous des indicateurs de contamination fécale.
Clostridium perfringens bien que réellement présent dans les matières fécales, est un germe
assez ubiquiste.
L’intérêt de la recherche de tels indicateurs réside dans la propriété qu'ils sporuler, ce qui
les rend particulièrement résistant aux traitements de désinfection.
Ils sont actuellement considérés comme de bons indicateurs de l’efficacité des traitements
vis-à-vis des parasites et en particulier de Cryptosporidium.
Tableau 04. Méthode de dénombrement des germes de contamination fécale et d’efficacité de
traitement :
Analyse Technique Volume de PE Milieu utilisé T°
d’incubation
confirmatio
n
Microorganism
es revivifiables
Incorporation
en milieu
solide
1ml Gélose à
l’extrait
de levure
37°C ET
20°C
-
Coliformes
totaux
filtration 100ml Gélose
lactosée au
TTC
37°C Colonies
typique OX-
Coliformes
fécaux
filtration 100 ml Gélose
lactosée au
TTC
44°C Colonies
typiques
Streptocoques
fécaux
filtration 100 ml Gélose
Slanertz et
Bartely
37°C Colonies
typiques
+Litsky
Colstridium
sulfitoréducteu
rs
Incorporation
en milieu
solide
20 ml Gélose
tryptone
sulfite au
cyclosérine
37°C Colonies
typiques
II.4.4.1.Recherche et dénombrement des Clostridium Sulfito-Réducteurs
Porter dans deux tubes de 1 ml de l’échantillon à analyser (Fig. 09) ;
Préparer pour les deux tubes un chauffage à 80°C, pendant 10 minutes; puis un
refroidissement brutal sous l’eau de robinet (choc thermique qui à pour but
51
d’éliminer la forme végétative et reste seulement la forme sporulée des bactéries
Sulfito-Réducteurs).
complémenter ensuite chacune des tubes avec environ 15 ml de gélose TSN (TSN+
Alun de Fer et Sulfite de Sodium) et mélanger avec précaution.
Laisser solidifier, puis incuber à 37°C pendant 48 heures avec une première lecture
après 16 heures d’incubation.
Lecture
Après la période d’incubation sera considère comme positif, les tubes contenant de grosses
colonies noires, qui s'accorde au Clostridium sulfito-réducteur. Le résultat est exprimé par le
nombre des Clostridium sulfito-réducteurs par 1 ml de l’échantillon à analyser.
Remarque :
Le dénombrement après 24 heures d’incubation est effectué parfois après 48 heures, le tube
devient complètement noir et devient donc indénombrable.
Fig 09 : Recherche et dénombrement des Clostridium sulfito-réducteurs
52
II.5. Recherche des germes pathogènes :
II.5.1. Recherche de Salmonella
Définition :
L’espèce Salmonella est composée de bâtonnet Gram -qui sont semblables
A la définition de la famille des Entérobacteriacées. Ce sont des germes de lactose
et oxydase négatif, catalase positif. La plupart des souches sont mobiles (Lebres et
al.,2002).
se multiplient à la température de 36 ± 2°C en 24 à 48 h, sur milieu Hektoen,
formant de petites colonies, lisses à contours réguliers, pigmentées en vert ou en bleu
vert à centre noir.
L e s Salmonelles se divisent en deux grands groupes : les typhoidiques
(Hautement pathogènes) et les non typhoidiques.
Principe :
La recherche des salmonella comporte plusieurs étapes dont la première et même,
exceptionnellement, la deuxième, peuvent être supprimées : un pré-enrichissement, un
enrichissement, un isolement et identification (Lebres et al., 2002).
Mode opératoire :
*L’enrichissement : Ensemencement d’un milieu liquide sélectif (milieu au sélénite SFB)
àpartir de l’échantillon à analyser puis incuber à 37C° pendant 24 heures.
*L’isolement: A partir du bouillon d’enrichissement, effectuer des isolements sur 2
Milieux différents. Deux séries d’isolement au moins doivent être pratiquées : l’une après 18
-24 heures d’incubation, l’autre après 48 heures Les géloses d’isolement sont incubées à 37°C
pendent 24 à 48 heures. Au bout de 24 heures il est souvent possible de différencier
les colonies à lactose positif et au bout de 36 à 48 heures, toutes les colonies ont généralement
leurs aspects caractéristiques. Selon le milieu d’isolement choisi, ces aspects sont les suivant :
-Sur gélose Salmonella- Shigella :
Des colonies incolores à centre noir : Salmonella à H2S+
*L'identification :
Des colonies présumées Salmonella ou suspectées, se fait à l'aide de : tests biochimiques, test
antigéniques
53
II.5.2. Recherche de Vibrion cholirérique : Définition :
Les Vibrionacae sont :
Bacille Gram négatif droits ou incurvés,
Très mobiles,
Oxydase (+),
AAF,
Fermentant le glucose sans production de gaz ni d'H2S, Hautement pathogènes.
Méthode recherche :(voir schémas)
Enrichissement
Bouillon SFB
Incubation 37°C
pendant 18 à 24 H
Isolement
Hektoen
S.S
Incubation 37°C pendant 24 à 48 H
Identification si il y’a des colonies on fait des tests biochimiques
Sur le milieu S.S
Les colonies caractéristiques de Salmonella (lactose négatif) sont opaques, translucides ou
transparentes et généralement avec un centre noir (H2S positif).
Sur le milieu Hektoen
-Colonies vertes à centre noir: P. mirabilis, Salmonella
Gram, Etat frais ,TSI , Urée Indole, TDA , ONPG ,Oxydase
LDC , ODC , ADH ,GN inclinée, API 20 E ,Agglutination (OMA, OMB …)
les tests de confirmation
Fig 10 Recherche de Salmonella
54
Fig 11 : Recherche de Vibrion cholirérique
Jour 2 . Deuxième enrichissement et Isolement.
Ce flacon fera l’objet :
d’une part, d’un deuxième enrichissement sur milieu EPA en tubes à raison de 1
ml
d’autre part, d’un isolement sur gélose GNAB 1. L’incubation se fait donc à 37°C
pendant 24 h.
Jour 3 . Lecture des boites et Identification.
D’une part, le tube d’EPA fera l’objet d’un isolement sur GNAB 2,
D’autre part, la boite de gélose GNAB 1 subira une lecture en tenant compte du
fait que les Vibrions se présentent le plus souvent sous forme de grosses colonies
lisses et transparentes caractéristiques.
Identification morphologique et biochimique.
Cinq colonies caractéristiques et distinctes feront l’objet d’une identification morphologique
et biochimique qui se déroulent comme suit :
Etat frais (bacilles, mobilité),
Coloration de Gram (bacilles Gram négatifs),
Oxydase (+),
Ensemencement d’un tube de KIA qui sera incubé à 37°C, 24 h (Saccharose, Glucose,
Gaz et H2S ),
55
Ensemencement d’un tube de gélose nutritive inclinée qui sera incubé à 37°C, 24 h qui
servira à l’agglutination sur lame,
Si l'agglutination avec l'eau physiologique et au sérum polyvalent O1 est négative,
faire une mini galerie basée sur l'étude des acides aminés en vue de différencier entre
les Vibrions, les Pleisiomonas et les Aeromonas selon le tableau suivant :
LDC ODC ADH
Vibrion + + -
Aeromonas - - +
Pleisiomonas + + +
Il s'agit du genre Vibrion, répondre : Vibrion NON Agglutinable (NAG).
Si l'agglutination avec l'eau physiologique et au sérum polyvalent O1 est positive, il s'agit
d'un vibrion rough (auto-agglutinable).
Si l'agglutination avec l'eau physiologique est négative et positive au sérum polyvalent
O1, répondre : Vibrion cholérique.
Lecture et interprétation :
dépister les colonies caractéristiques.
Faire une identification biochimique basée essentiellement sur ONPG, TSI, Urée -
Indole, LDC…
Si nécessaire faire une identification antigénique basée essentiellement
sur l’agglutination à l’aide des sérums de groupe OMA et OMB ou bien demander au
laboratoire de référence.
II.5.3.Recherche de Staphylocoques à coagulase positive : Définition :
On entend par Staphylocoques à coagulase (+):
Cocci à Gram (+)
Isolées ou en grappes de raisin,
Catalase (+) et coagulase (+)
se multiplier en 24 à 48 h à 36 ± 2°C sur un milieu sélectif Chapman au mannitol.
L’espèce type du genre est Staphylococcus aureus. Elle est pathogène et très
appréhendée Staphylococcus aureus se présente sous forme de cocci, en grappe de raisin,
Gram +, possédant une catalase et une coagulase.
Selon la disponibilité des milieux de culture, trois techniques différentes sont recommandées
pour la recherche de Staphylococcus aureus à savoir :
méthode de Baird Parker
méthode d’enrichissement sur milieu de Giolliti Cantonii
méthode d’enrichissement sur milieu de Chapman.
Dans le cas des poissons, la recherche de Staphylococcus aureus par la méthode
d'enrichissement sur milieu de Giolliti Cantonii est recommandée.
Méthode d’enrichissement au milieu de Giolliti Cantonii.
Préparation du milieu d’enrichissement.
56
Au moment de l’emploi, ouvrir aseptiquement le flacon contenant le milieu de Giolliti
Cantonii pour y ajouter 15 ml d’une solution de Téllurite de Potassium. Mélanger
soigneusement. Le milieu est alors prêt à l’emploi.
Ensemencement.
A partir des eaux, porter aseptiquement 1 ml par dans un tube à vis stérile. Ajouter par la suite
environ 15 ml du milieu d’enrichissement Bien mélangé le milieu et l’inoculum.
Incubation.
L’incubation se fait à 37°C pendant 24 à 48 heures.
Lecture.
Seront présumés positifs, les tubes ayant virés au noir.
Pour se garantir qu’il s’agit bien d’une croissance de Staphylococcus aureus, ces tubes
feront l’objet d’une approbation par isolement sur gélose Chapman préalablement fondue,
coulée en boites de pétri et bien séchées.
Les boites de Chapman ainsi ensemencées seront incubées à leur tour à 37°C pendant 24 à
48 heures.
Après ce délai, déterminer les colonies suspectes à savoir les colonies de taille moyenne,
lisses, brillantes, pigmentées en jaune et pourvues d’une catalase et d’une coagulase.
57
Eau à analyser
Fig N°12 : Recherche de Staphylocoques à coagulase positive
Expression des résultats.
Si le tube a noirci au bout de 24 heures d’incubation, et à l’isolement sur
Chapman, il ya pas de colonies caractéristiques ; ce tube est considéré comme positif
Pour chaque boite des tests biochimiques rapides à savoir :
Une épreuve à la catalase (à l’aide de l’eau oxygénée),
Une épreuve à la coagulase (à l’aide de plasma de lapin).
Quelques caractères biochimiques de différentes espèces de staphylocoques sont résumés
dans le tableau ci - après (Lebres et al., 2002).
Tableau 7: Les caractères biochimiques pour les différentes espèces de staphylocoques
Staphylocoque aureus intermédius Saprophyticus pidermitis
Catalase + + + +
Coagulase + + - -
Mannitol en anaérobie + - - -
Résistance à la Novobiocine (5 µg) S S R S
Résultats et discussion
59
Résultats et discussion
L'eau, élément vital peut aussi être agent efficace de transport et de dissémination de la
pollution et des maladies (Lamy, 1995). La composition physicochimique de l'eau reflète le
milieu géologique dans lequel elle circule. Les minéraux, tels que le calcium, le fer, le soufre
et le manganèse, bien qu’ils ne soient pas dangereux pour la santé humaine, peuvent modifier
la dureté, le goût, l'odeur et la couleur de l'eau, lorsqu'ils sont présents en quantité excessive.
C'est pourquoi nous devons prendre garde avec un soin extrême et une vigilance constante de
sa qualité chimique et de sa potabilité (Salamon, 2003). La qualité de l'eau potable destiné a
l'alimentation suscitent des inquiétudes pour la santé humaine dans tous les pays. L’eau de
consommation devrait être exempte des impuretés et des agents pathogènes (Alexander,
2008).
Les résultats des analyses de l'eau pour les 06 sources étudiées, sont présentés dans le
TableauI.
Dans ce dernier les résultats de l’analyse de quatorze paramètres physicochimiques sont
reportés.
III.1. Paramètres physico-chimiques
III.1.1. La température
La température de l'eau joue un rôle important dans la solubilité des sels et des gaz, en autres,
l'oxygène nécessaire à l'équilibre de la vie aquatique. Par ailleurs la température accroit les
vitesses des réactions chimiques et biochimiques d'un facteur 2 à 3 pour une augmentation de
la température de 10 °C. L'activité métabolique des organismes aquatiques et donc accélérée
lorsque la température de l'eau s'accroit. La valeur de ce paramètre est influencée par la
température ambiante mais également par d'éventuels rejets d’eau résiduaire chaude. Des
changements brusques de température de plus de 3° C s'avèrent souvent néfastes.
La température de l'eau est un paramètre de confort pour les usagers. Elle permit également de
corriger les paramètres d'analyse dont les valeurs sont liées à la température (la conductivité
notamment). De plus en mettant en évidence des contrastes de température de l'eau sur un
milieu, il est possible d'obtenir des indications sur l'origine et l'écoulement de l'eau. Les
valeurs moyennes de la température des eaux de sources pour les prélèvements sont entre 30,7
enregistre à foggara d'Ougarta et 21,3 à la foggara Béni Abbes Les normes Algériennes de
l'eau potable, la température est fixé 25°C (JORA, 2011), les valeurs moyennes des eaux des
sources dépassent légèrement cette norme dans trois sources d'eau les cas forage Zeghamra
(25,3), puits communal (25,02) et celle de la foggara d'Ougarta (30,7).
III.1.2. Le pH (potentiel hydrogène)
Le potentiel hydrogène (pH) c'est un paramètre chimique caractérisant l'acidité d'un milieu, il
est lié à la concentration d'ions H+
en solution. Le pH d'un lac ou d'un étang dépend de
son âge et des déchets déversés. Lors de sa formation, un lac à un pH basique (ou alcalin) et
progressivement il s'acidifie par la formation de matériaux organiques, dissolution de dioxyde
de carbone CO2 avec formation d'ions bicarbonates HCO3-
(Aminot et Kerouel, 2004).
Le pH est l'un des paramètres chimiques importants lorsqu'il s'agit de déterminer la qualité
d'une eau. Les valeurs moyennes du pH des eaux enregistrés sont les suivants 6,96; 6,88;
7,22; 7,98 ; 7,88 et 8,12 pour les sources d’eau F1, F2, F3, F4, F5 et F6 respectivement (Tab.
6). Les normesAlgériennes de l'eau potable, le pH est fixé entre 6,5 et 9,00, les valeurs
moyennes des eaux des sources restent dans cet intervalle (JORA, 2011).
60
Les matières en suspension désignent les fines particules dissoutes dans l'eau (sable, argile,
produits organiques, particules de produits polluant, micro-organismes,...) qui donnent un
aspect trouble à l'eau et s'opposent à la pénétration de la lumière nécessaire à la vie aquatique.
Des grandes quantités constituent donc une pollution solide des eaux. La quantité de matière
en suspension totale se mesure par filtration d'un litre d'eau et pesage des résidus séchés. Le
résultat s'exprime en mg/l. Les RS oscillent entre 387 mg/l et 1939 mg/l. La valeur la plus
élevée est enregistrée pour les eaux du puits communal et la plus faible pour les eaux du
forage de Béni Abbes (Tab. I). La norme algérienne de l'eau potable, des RS est fixée à
1500mg/l (JORA, 2011).
III.1.3. Conductivité
La conductivité électrique d'une eau est l'aptitude que possède cette eau à laisser passer le
courant électrique. Le transport des charges se faisant par l'intermédiaire des ions contenus
dans l'eau, il est logique d'admettre que la conductivité d'une eau sera d'autant plus importante
que sa minéralisation sera élevée. Il existe donc une relation entre la conductivité d'une eau et
sa minéralisation, d’où l'intérêt que présente la mesure de la conductivité. Une eau douce
évaluera généralement une conductivité basse et bien au contraire une eau dite dure
enregistrera une conductivité élevée (Bremaude et al., 2006).
Les valeurs moyennes de la conductivité pour les prélèvements varient d'une source à une
autre et varie entre 558 µs/cm et 2766 µs/cm (Tab. I). La valeur la plus élevé est observé au
niveau Foggara Béni-Abbés qui tend vers la valeur maximale fixé par la norme algérienne.
Toutes les autres valeurs ne dépassent pas cette norme qui est fixée à 2800,00 µS/cm.
Concernant la minéralisation de l'eau, toutes les sources présentent une minéralisation élevée
(conductivité > 1000 us/cm) sauf pour la source Ain Sidi Othmane et la Forage de Béni-
Abbés, il a une minéralisation moyenne (conductivité entre 600 et 1000 us/cm) (Vierling,
2008)
III.1.4. Les résidus secs (RS)
On appelle matières en suspension les très fines particules dissoutes dans l'eau (sable, argile,
produits organiques, particules de produits polluant, micro-organismes,...) qui donnent un
aspect trouble à l'eau et s'opposent à la pénétration de la lumière nécessaire à la vie aquatique.
Des grandes quantités constituent donc une pollution solide des eaux. La quantité de matière
en suspension totale se mesure par filtration d'un litre d'eau et pesage des résidus séchés. Le
résultat s'exprime en mg/l. Les RS oscillent entre 387 mg/l et 1939 mg/l. La valeur la plus
élevée est enregistrée pour les eaux du puits communal et la plus faible pour les eaux du
forage de Béni Abbes . Les normes Algériennes de l'eau potable, des RS est fixé à 1500mg/l
(JORA, 2011).
III.1.5. La turbidité
Une eau turbide est trouble. Cette caractérisation vient de la teneur de l'eau en particules en
suspension, associées au transport de l'eau. Au cours de ce parcours, l'eau se charge d'une
quantité énorme de particules, qui troublent l'eau. Les matières mêlées à l'eau sont de natures
très diverses: matières d'origine minérale (argile, limon, sable,…), micro particules
microorganismes. La turbidité joue un rôle très important dans les traitements d'eau. En effet:
Elle indique une probabilité plus grande de présence d'éléments pathogènes.
La turbidité perturbe la désinfection. Le traitement par ultraviolets est inefficace et le
traitement par chlore perd son efficacité.
61
La matière organique associée à la turbidité favorise la formation de biofilms dans le
réseau et par conséquent, le développement de bactéries insensibles au chlore notamment.
(Rodieret al., 2005; Hade, 2007).
Les valeurs moyennes de la turbidité pour les prélèvements varient entre 2,820 U la valeur la
plus élevé est observée au niveau de puits communal et la valeur la plus faible est de 0,327
NTU pour le forage de Béni Abbes (Tab. I). Toutes ses valeurs de la turbidité sont en dessous
de la norme Algérienne de l'eau potable fixée à 5,00 N.T.U (JORA, 2011)
III.1.5.1. Les paramètres de pollution
III.1.5.1.2. Les sulfate
Leur présence dans les eaux est en général liée à la présence de gypse dans les sols ou proches
de mines de fer. Hydrogène sulfuré ou sulfure d'hydrogène, gaz nauséabond et toxique à forte
odeur d'œuf pourri, produit par la fermentation anaérobie quand l'eau est trop riche en
matières organiques. C'est aussi un indice de présence de microorganismes (Queneau et
Habert, 2009). Les valeurs moyennes des sulfates pour les différents prélèvements sont :
309,78 mg/l ; 427,7 mg/l ; 489,75 mg/l ; 89,7 mg/l ; 170,8 mg/l et 109,24 mg/l pour les
sources d’eau : F1, F2, F3, F4, F5 et F7 respectivement (Tab. I). Selon les normes
Algériennes de l'eau potable le taux des sulfates sont fixées à 400,00 mg/l (JORA, 2011). Les
valeurs moyennes des eaux de sources étudiées ne dépassent pas cette norme sauf pour les
eaux de la foggara d’Ougarta et celle du puits communal.
III.1.5.1.3. Les nitrate
III.1.5.1.3. L'azote
Cet élément peut être présent sous trois formes: l'ammonium (NH4+
) obtenu par
minéralisation de matière organique (oxydation par bactéries nitrifiantes), sera responsable de
laformation des nitrates NO3-et des nitrites NO2. Les nitrites NO2 sont généralement
absents (ou peine mesurables). Leur présence est indicatrice d'une pollution due à des rejets
d'eau non épurée ou à un ralentissement du processus de nitrification. Ils sont toxiques à
faibles doses (dose létale pour les poissons 3-5 mg/l) (Queneau et Habert, 2009)
III.1.5.1.4. L'ammonium
NH4+
provient des processus de décomposition microbiologique des protéines animales et
végétales. Il peut être réutilisé directement par les plantes et utilisé dans les engrais
commerciaux. Lorsque le pH est élevé l'ammonium se transforme en ammoniac NH3
toxique (dose létale pour certains poissons 1 mg/l) (Queneau et Habert, 2009).
Les valeurs moyennes des nitrates pour les prélèvements varient entre 41 ± 1,33 mg/l et
5,98±1,95 mg/l (Tab. I). Selon les normes Algériennes le taux des nitrates dans l'eau potable
est fixé à 50 mg/l (JORA, 2011). Les valeurs moyennes obtenues dans les différents
prélèvements ne dépassent pas cette norme. Des concentrations élevées de nitrates dans l'eau
de consommation constituent la cause la plus probable de méthémoglobinémie qui se
manifeste par un manque d'oxygénation des tissus, s'interprétant par des difficultés
respiratoires et des vertiges (Galvez-cloutier et Arsenault, 2002).
62
III.1.5.2. Minéralisation globale
III.1.5.2.1. La dureté (TH)
La dureté d'une eau résulte de la présence de cations bivalents (surtout le calcium Ca2+
, le
magnésium Mg2+
, le baryum Ba2+
et le strontium Sr2+
) dont certains sels sont
particulièrement peu solubles. Au point de vue écologique, une eau douce est plus sensible
aux phénomènes biologiques et chimiques. De plus une eau dure est responsable du dépôt de
calcaire dans les canalisations et les dispositifs industriels et ménagers utilisant l'eau
chaude. Une eau douce assure une meilleure solubilisation des métaux lourds toxiques. Les
taux moyens de TH pour les prélèvements varient entre 69,88 mg/l et 337,52 mg/l. Le taux le
plus faible est enregistré pour les eaux d’Ain Sidi Otmane et le taux le plus élevé est
enregistré pour les eaux du puits communaux.
Suivant les normes Algériennes de l'eau potable pour le TH est fixée à 200 mg/l (ADE,
2006). Les taux moyens dépassent la norme uniquement pour les eaux du puits communal
(Tab. I).
III.1.5.2.2. Les Chlorure
Ils ne sont pas nocifs, mais constituent un important indicateur de pollution. Ils ne sont pas
éliminés par les stations d'épuration. Dans la nature ils sont souvent indicateurs d'arrivée
d'effluents urbains. A titre indicatif, dans l'eau de robinet le maximum admis est de 200 mg/l
de chlorures. La concentration en chlorures dans une eau dépend de l'origine de celle-ci
(proximité d'eau salée, rejets domestiques ou industriels) ainsi que de la nature du terrain
qu'elle traverse. En général, la présence de chlorures dans une eau est fréquente à des teneurs
inférieures à 20 mg/l. ils donnent une bonne indication du degré d'eutrophisation des cours
d'eau et un excès de chlorures est généralement dû à une pollution urbaine (station
d'épuration) ou industrielle particulière (agroalimentaire) Sachant que les normes Algériennes
de l'eau potable pour les chlorures sont fixées à 500,00 mg/l (JORA, 2011) et les valeurs
moyennes des prélèvements pour ce paramètre dans les eaux de consommation de Béni Abbes
balancent entre 869,75 et 78 mg/l (Tab. I). Toutes ses valeurs ne dépassent pas cette norme
sauf pour les eaux du puits communal qui enregistre une valeur très élevée. (Ghebouli et
Bencheikh ElHocine, 2008) ont étudié les eaux souterraines de la région deSétif et ont
constaté que les eaux de l’aquifère superficiel de la zone d’étude présentent une salinité
moyennement à assez élevée. Cette dernière a même révélé une mauvaise potabilité.
III.1.5.2.3. Le Calcium
C'est un métal alcalin terreux; composant majeur de la dureté de l'eau (TH). Sa teneur varie
essentiellement selon la nature des terrains traversés (Rodieret al., 2005). Le calcium est
trouvé dans les eaux qui ont traversé des roches calcaires. Avec le magnésium, il est
responsable de la dureté de l'eau. Cette dureté de l'eau est exprimée par le titre
hydrotimétrique en degrés français ou en mg/l (20°F = 4 mg/L de calcium) (Queneau et
Habert, 2009). Les valeurs moyennes decalcium obtenues dans nos échantillons varient entre
246 mg/l pour le puits communal et 52 mg/l dans les eaux de consommation d'Ain Sidi
Othmane. En revanche pour les eaux du puits communal on remarque un taux élevé qui
dépasse les normes. Contrairement à ce qui est souvent affirmé, la présence d'ions de calcium
dans l'eau aurait même tendance à diminuer le risque de formation de calcules rénaux
(Bremaudeet al.2006).
63
III.1.5.2.4. Le Magnésium
C'est un des éléments les plus répandus dans la nature ; il constitue un élément significatif de
la dureté de l'eau et donne un gout désagréable (Rodieret al., 2005). Les valeurs moyennes de
magnésium obtenues varient entre 91,12 mg/l et 15,55 mg/l. La valeur la plus faible et
observée pour les eaux du forage de Béni Abbes et la plus élevée pour le puits communal
(Tab. I). Selon les normes Algériennes de l'eau potable, les valeurs moyennes des eaux de
Béni Abbes obtenues ne dépassent pas les normes. Selon Queneau et Habert, (2009) des
apports excessifs de magnésium en cas d'insuffisance rénale peuvent entraîner des troubles
cardio-respiratoires.
III.1.5.2.5 . L'alcalinité
Caractérise la possibilité qu'a une eau à maintenir son pH constant. Ainsi un ajout d'une petite
quantité d'acide faible dans une eau pure provoque automatiquement une baisse sensible du
pH. Une eau alcaline sera capable de neutraliser cet acide et donc de maintenir son pH plus ou
moins constant. On parle aussi du pouvoir tampon d'un tel milieu. Une eau alcaline protège
donc la vie aquatique. Lorsqu'une eau se charge en carbonates, bicarbonates (en traversant des
roches calcareuse par exemple), hydroxydes, phosphates, silicates elles augmentent son
alcalinité (Rodieret al., 2005). Les bicarbonates sont d'origines diverses. Ils n'interviennent
pas directement sur la santé. En revanche, ils ont un rôle par les cations auxquels ils sont liés
(sodium, calcium) (Rodieret al., 2005). Les valeurs moyennes de l'alcalinité pour les
prélèvements sont entre 359,9 mg/l et 144,4 mg/l (Tab. I). Les normes algériennes des eaux
potables fixées à 500 mg/l.
III.1.5.3. Eléments indésirables
III.1.5.3.1. Le Fer :
Provient du sous sol ou de l'industrie, mais il n'est pas nocif. Le sulfate de fer peut provenir
des stations de traitement des eaux où il est utilisé comme floculant. La présence de fer dans
les eaux souterraines à des multiples origines: le fer sous forme de pyrite (FeS2), est
couramment associé aux roches sédimentaires déposées en milieu réducteur (marnes, argiles)
et aux roches métamorphiques. Il se retrouve souvent à de fortes concentrations dans les eaux
des cuirasses d'altération de socle. Présent sous forme réduite (Fe2+
), le fer est oxydé par
l'oxygène de l'air et précipite sous forme ferrique lorsque l'eau est pompée
Fe2+
===========> Fe3+
+ e-
Les valeurs moyennes du fer pour les 10 mois de prélèvements sont entre 0,004 mg/l et 0,262
mg/l (Tab. I). Les normes Algériennes de l'eau potable pour le fer, fixée à 0,30 mg/l (JORA,
2011).
64
Fig N° 13 : Variation de la température des eaux des differentes sites d'études de region
Saoura
Fig N°14 : variation du pH des eaux des differentes sites d'études de la region de la Saoura
65
Fig N° 15 : La variation des paramètres chimiques des eaux de la ville de Béni- Abbes
III.2. Résultats des analyses bactériologiques
Notre objectif consiste à se préoccuper d’identifier et de dénombrer les germes indicateurs de
contamination fécale et de chercher à identifier les bactéries dominantes qui peuvent se
trouver dans cette écosystème aquatique dans une région semi aride. Le contrôle
bactériologique consiste à vérifier la présence de différents types de bactéries dans l'eau du
réseau de distribution publique notamment celle des indicateurs de contamination fécale. Les
résultats de l'analyse microbiologique des différentes sources d'eau potable de la ville de
Béni-Abbes sont portés dans le tableau N°1 dans l’artcile1.
III.2.1. La microflore totale.
La numération des bactéries hétérotrophes reflète la charge totale en bactéries aérobies du
réseau d’eau. Bien qu’elle fut utilisée pour évaluer la « pureté » des sources d’eau dès la fin
du 19e
siècle (Bartram et al., ,2003) Numération des bactéries hétérotrophes (NBH) , ne
s’emploie plus comme indicateur sanitaire(Edberg,1988) . De nos jours, les variations
importantes de la NBH servent à indiquer une détérioration possible de la qualité de l’eau
nécessitant des analyses plus approfondies (Health Canada, 2012). L’augmentation de la
NBH de l’eau traitée peut indiquer un problème dans le traitement ou un changement de
qualité à la source, avant même le traitement. Quand les concentrations en bactéries
hétérotrophes sont acceptables à la sortie de la station de traitement mais dépassent les valeurs
de référence dans le réseau de distribution, il pourrait y avoir une recolonisation bactérienne
dans ce dernier (Bartram et al., 2003).
Le dénombrement de la microflore totale cultivable des différentes sources d'eaux de la ville
de Béni-Abbes montre une charge microbienne qui varie de 00 à 140 105
ufc/ml. Les
principales sources destinées à la consommation publique, La source de Sidi Othmane
contient 65 105
ufc/ml, le puit communale 140 105
ufc/ml et le Forage 38 105
ufc/ml.
Les foggaras source d'eau classique privé sont exploitées essentiellement pour l'irrigation
66
sont aussi utilisées comme eau de boisson pour les agriculteurs. Ces Foggara ont une densité
microbienne qui varie de 35 à 140 105
ufc/ml. Nos résultats montrent aussi l'absence totale
de toutes sortes de microorganismes dans la Foggara 10. Kihal et al., (2002) ont montré
que 71,42 % des échantillons analysés des eaux de Foggaras d'Adrar représentent une eau non
potable.
La flore bactérienne identifiée par les techniques classiques de comptage sur gélose n'est pas
forcément représentative des bactéries effectivement présentes dans l'eau produite. Il est ainsi
possible que des bactéries blessées ou stressées au sortir des traitements de filtration et de
désinfection soient rendues temporairement inaptes à la croissance sur des milieux de culture
standard suivant les conditions types fixés. La numération de la microflore totale (bactéries
hétérotrophes) peut être utilisée en tant qu'une des nombreuses méthodes disponibles pour
surveiller la qualité globale de l'eau, elle n'indique pas sa salubrité ni par conséquent la
présence possible de germes pathogènes pour les consommateurs de cette eau. L'augmentation
importante des concentrations de bactéries hétérotrophe au dessus des concentrations
normales des eaux traitées (20 ufc/ml), (JORA 35, 1998), indiquent des changements au
niveau de la qualité de l'eau brute, du traitement ou de la désinfection, une recroissance, une
conception inadéquate ou un mauvais entretien du réseau de distribution (Bartram et
al., 2003).
Les micro-organismes sont non seulement les organismes les plus abondants dans les
systèmes d'eau douce normaux, mais sont également les acteurs principaux dans des
processus écologiques, gérant aussi la purification et la qualité de l'eau. La connaissance
détaillée de la diversité et de la fonction des micro-organismes dans les écosystèmes
aquatiques d'eau douce est un pré requis essentiel à la gestion acceptable des ressources d'eau
douce (Hahn, 2006). Les écosystèmes d'eau douce sont souvent colonisés par des
communautés microbiennes indigènes qui ne se produisent pas dans les systèmes aquatiques
et terrestres qu’en présence des éléments nutritifs et des conditions physicochimiques
optimales. En dépit des études récentes sur la caractérisation de la diversité des
micro- organismes d'eau douce, la connaissance essentielle pour une compréhension
holistique de leurs rôles écologiques manque toujours. Plusieurs études ont démontré que la
composition bactérienne de la communauté (BCC) des eaux change temporairement dans
l'espace, les habitats, et aussi bien entre les habitats (Vaerewijck et al., 2005).
67
Fig N°16 : variation des la charge microbienne totale des eaux de Béni Abbés
Fig N° 17 : Aspect des colonies microbiennes sur milieu de dénombrementdans la foggara
d’Ougarta
III.2.2. Les indicateurs de contamination
III.2.2.1.Les coliformes totaux.
Les coliformes totaux ne s’utilisent plus comme indicateur de contamination fécale, car les
progrès de la taxonomie montrent qu’ils ne sont pas spécifiques de l’intestin des humains ou
des autres mammifères à sang chaud et qu’ils peuvent également se trouver dans
l’environnement (Leclerc et al., 2001 ; Tallon et al., 2005) . Comme les coliformes totaux
sont sensibles au chlore, leur présence dans les échantillons d’eau peut indiquer l’existence
d’un biofilm ou un manque d’efficacité du traitement (Health Canada, 2012). La présence de
CT peut aussi indiquer une détérioration de la qualité de l’eau, due au système de distribution
(formation de biofilm, infiltration de sol)( Ainsworth, 2004).Mais pour ces types de
problèmes, la numération des bactéries hétérotrophes (NBH) est un meilleur indicateur, car
elle englobe un plus large éventail de bactéries( Ainsworth, 2004)
68
Le taux des coliformes totaux dans les différentes sources d'eau de Béni-Abbes varie de 00
à 140 104
ufc/ml. La source principale, Ain Sidi Othmane, d'approvisionnement en eau
potable de la ville de Béni-Abbes contient un taux de 4 104
ufc/ml. En revanche, le puits
communal le taux de coliforme totaux est de 140 104
ufc/ml, et 16 104
ufc/ml ont été
observé dans le forage.
L’analyse des bactéries coliformes totales est utilisée pour le contrôle de l’eau potable depuis
plus d'un siècle. Son faible coût d’analyse, sa reproductibilité et son omniprésence dans les
eaux de surface en font un indicateur universel pour juger de la qualité d’une eau. Ce groupe
hétérogène appartient à la famille des entérobactéries et comprend plusieurs genres bactériens
se retrouvant dans la flore intestinale normale. Cependant, la plupart des espèces se retrouvent
aussi naturellement dans le sol, la végétation et aussi dans l’eau. De ce fait, cette analyse n’est
pas considérée comme un indicateur de contamination fécale ou de risque sanitaire. La
présence de coliformes totaux dans un système de distribution d’eau potable peut avoir
plusieurs significations:
La recroissance bactérienne, une perte d’étanchéité du réseau, une déficience ou une absence
de traitement.
Les coliformes totaux sont un constituant normal du biofilm qui se forme inévitablement à
l’intérieur des conduites. Une eau potable contenant des coliformes totaux peut indiquer une
incapacité à maintenir un résiduel de chlore suffisant dans le système de distribution. En effet,
plusieurs bactéries de ce groupe ont la capacité de recroître dans le réseau lorsque certaines
conditions y sont favorables (chlore libre insuffisant, eau stagnante, température élevée et
présence de nutriments). En période estivale, cette situation est aussi favorisée par la
croissance et le décollement de couches de biofilm entraînées par un débit d’eau plus élevé.
Les coliformes totaux peuvent signaler la présence d’une pollution de surface à cause d’une
perte de l’intégrité du réseau (réparations, contaminations croisées, siphons dus à la présence
de fissures etc.). Cette situation peut être associée à une baisse subite de la pression et de la
concentration de chlore libre ainsi qu’à une augmentation du dénombrement des BHAA. Elle
nécessite alors une investigation plus poussée.
Pour conclure à une déficience du traitement associée à une détection de coliformes totaux
dans le réseau, il est recommandé d’effectuer des analyses à la sortie du traitement. De même,
dans le cas d’une eau souterraine non désinfectée, des analyses complémentaires peuvent être
faites dans l’eau brute (voir algorithme décisionnel).
Il faut toujours porter une attention particulière à la présence récurrente de coliformes totaux
dans un réseau ou un secteur du réseau. Ces situations doivent être investiguées et
documentées, pour en connaître la cause, et éventuellement corrigées pour prévenir un risque
sanitaire éventuel.
L’analyse des bactéries entérocoques, plus résistantes que E. coli, peut être effectuée pour
détecter la présence de contamination fécale, a survie dans l’eau et la résistance au chlore des
bactéries coliformes totales sont plus faibles que celles des virus et des parasites. Ce ne sont
donc pas de bons indicateurs de la présence ou de l’efficacité du traitement pour ces micro-
organismes. Pour cette raison, les algorithmes décisionnels des sections qui suivent tiennent
compte d’un ensemble de facteurs (p. ex. maintien du chlore résiduel ou efficacité de la
filtration) qui viennent compléter la connaissance indispensable à la prise de décision.
69
Fig N° 18 : Aspect de la croissance des coliformes sur milieu BCPL.
L’analyse des coliformes totaux se fait habituellement par filtration sur membrane. On peut
ensuite dénombrer les colonies typiques rouges à reflet vert métallique après incubation de
cette membrane dans un milieu spécifique durant 24 heures à 35°C. Les colonies atypiques
sont celles qui ne présentent pas les caractères typiques.
III.2.2.2. Les coliformes fécaux.
Ils s’utilisent encore comme indicateurs microbiens, mais les. Le terme indicateur de
coliformes thermotolérants a remplacé l’indicateur coliformes fécaux en raison du manque de
spécificité du test de recherche des coliformes fécaux (Caplenas et al., 1984) . Ce test détecte
les bactéries qui fermentent le lactose avec production d’acide et de gaz à 44-44.5°C. Bien
que la majorité des bactéries présentant ces caratéristiques soit d’origine fécale, plusieurs
coliformes fécaux proviennent de l’environnement. Pour cette raison, le terme générique
coliforme thermotolérant remplace progressivement celui de coliformes fécaux (Health
Canada, 2012). La bactérie E. coli fait partie du sous-groupe des coliformes thermotolérants,
dont elle est le seul membre à ne se trouver que dans l’intestin des animaux à sang chaud.
Comme mentionné plus haut, les coliformes fécaux sont un sous-groupe des coliformes totaux
et comptent parmi leurs membres des espèces de bactéries comme Escherichia coli et
Klebsiella pneumoniae. Ils s’utilisent encore comme indicateurs microbiens, mais les
publications montrent depuis longtemps un manque de spécificité de la numération des
coliformes quant à l’origine fécale d’une pollution de l’eau potable (Knittel, 1975). On a par
exemple associé des numérations élevées d’entérobactéries du genre Klebsiella à la présence
d’effluents d’usines de pâte à papier et de végétation en l’absence de toute contamination
fécale (Leclerc et al., 2001, Figueras et al., 2010). C'est pourquoi toute détection de
coliformes fécaux doit être interprétéeavec précaution (Figueras et al, 2010) et aucun avis
d’ébullition ne doit être émis seulement à cause d’échantillons positifs pour les coliformes
thermotolérants (USEPA, 2010). Bien que parfois encore utilisé dans certaines juridictions, le
test de recherche des coliformes thermotolérants est obsolète et n’ajoute aucune valeur aux
tests de recherche de E. coli et coliformes totaux (Health Canada, 2012).
Seulement certaines souches d’E. coli sont capables de causer une maladie (Tallon et al.,
2005; Hunter, 2003; Hrudey, 2011) , et seulement sous certaines conditions (comme E.coli
O157 : H7). Lorsque les résultats de laboratoire indiquent la présence de l’indicateur E. coli,
il s’agit le plus souvent de souches non pathogènes. La détection de l’indicateur E. coli est
une preuve incontestable de l’occurrence d’une contamination fécale récente et indique la
70
présence potentielle de pathogènes entériques (Payment et al. , 2003; Wade et al., 2003) .
Ceci ne s’applique cependant pas aux eaux tropicales dans lesquelles E.coli peuvent être
détectés et se multiplier en l’absence de contamination fécale (Rivera et al., 1988) . Au
Canada, la présence d’E. coli dans l’eau de boisson n’est pas tolérée comme le témoigne la
Concentration maximale admissible (CMA) qui est de Aucune UFC détectable dans 100 m l
(Health Canada, 2012).
Les coliformes fécaux suit la même allure que les coliforme totaux voir tableau N° 4 Le taux
des coliformes fécaux dans les différents sources d'eau de Béni-Abbes varie de 00 à 140 104
ufc/ml. La source principale d'approvisionnement en eau potable de la ville de Béni-Abbes
contient un taux de 4 104
ufc/ml. En revanche, le puits communal le taux de coliforme totaux
est de 140 104
ufc/ml, et 16 104
ufc/ml ont été observé dans le forage.
Les méthodes de détection dont on dispose à l’heure actuelle ne permettent pas l’analyse
régulière de tous les micro-organismes qui pourraient être présents dans une eau potable
inadéquatement traitée. Elles consistent plutôt à déterminer la qualité microbiologique en
analysant l’eau potable afin d’y détecter Escherichia coli, une bactérie qui se trouve en
permanence dans les intestins des humains et des animaux et dont la présence dans l’eau
indique une contamination par des matières fécales. La concentration maximale acceptable
d’E. coli dans l’eau potable a été établie à « aucun micro-organisme détectable par volume de
100 ml » (Squinazi, 2000).
Les coliformes fécaux sont un sous-groupe de bactéries faisant partie des coliformes totaux.
La méthode d’analyse est optimisée pour sélectionner la croissance des bactéries d’origine
fécale. E.coli est la première espèce bactérienne prise en compte comme indicateur depuis
1893, pourtémoigner une contamination fécale. En suite, en 1907 des chercheurs ont observé
qu'E. coli est la bactérie dominante de la matière fécale humaine tandis que les autres espèces
de coliformes peuvent avoir une autre source (Ashbolt et al., 2001).
E. coli est une espèce de coliformes thermotolerantes capable de dégrader le tryptophane
enindole. Elle est aussi définie comme coliforme par la possession de l'enzyme β-
glucuronidase. E.coli est considérée comme germe dominant de la flore intestinal des
animaux à sang chaud et enparticulier les humains, et représente 1% de la biomasse
microbienne totale (Leclerc et al., 2001). Dans la matière fécale, le nombre d'E. coli est
hautement supérieur à l'ensemble des coliformes notamment Citrobacter, Klebsiella, et
Enterobacter. L’incubation se fait à 44,5°C durant 24 heures dans un milieu spécifique
favorisant la croissance de colonies typiques bleutées. Cette température de croissance élevée
confère à ce groupe le terme plus judicieux de coliformes thermotolérants..
71
Fig N° 19: Croissance des coliformes fécaux sur milieu liquide Shuber indiquant la
production degaz et l'indole
Fig N°20 : La variation des coliformes totaux, fécaux , E. coli et streptocoques fécaux dans
leseaux de Béni Abbés.
Si, en plus des bactéries coliformes totales, des bactéries coliformes fécales sont présentes,
une contamination d’origine fécale est fortement soupçonnée et un avis d’ébullition doit être
émis immédiatement pour protéger la population.
L’analyse des bactéries E. coli, qui représentent environ 90% des bactéries coliformes fécales,
confirme sans aucun doute que cette contamination est d’origine fécale. En effet, E. coli est la
seule espèce bactérienne faisant partie du groupe des coliformes totaux (et des coliformes
fécaux) qui soit strictement d’origine fécale humaine ou animale. Elle est très abondante dans
la flore intestinale à des dénombrements de 1 million de bactéries par gramme. En outre, les
bactéries E. coli représentent environ 95% de toutes les bactéries coliformes de la flore
intestinale.
72
C’est une bactérie qui est particulièrement sensible à la désinfection. L’absence de détection
d’E. coli ne garantit pas que l’eau peut être bue sans danger, parce que d’une part un
échantillon ne constitue qu’un instantané (Hrudey et al., 2004; Allen et al., 2012)
III.2.2.3. Les Streptocoques fécaux.
Le taux des Streptocoques fécaux dans les différentes sources d'eau de Béni-Abbes varie
de 00 à 140 104
ufc/ml. La source principale, Ain Sidi Othmane, d'approvisionnement en
eau potable de la ville de Béni-Abbes contient un taux de 6 104
ufc/ml. En revanche, le
puit communal le taux de coliforme totaux est de 15 104
ufc/ml, et 00 ufc/ml ont été observé
dans le forage. En étudiant la qualité sanitaire des eaux de consommation en Suisse, Pruss
(1998) a confirmé la corrélation étroite entre la présence des Enterococcus et
Escherichia coli et l'apparition des maladies d'origine hydrique.
L’expression "streptocoques fécaux " désigne les streptocoques fortement présents dans les
fèces de l'homme et des animaux. Tous possèdent antigène du groupe D de Lancefield. Du
point de vue taxonomique, ils appartiennent aux genres Enterococcus et Streptococcus.
Récemment, la taxonomie des entérocoques a été profondément modifiée et la connaissance
de l'écologie de nombreuses espèces présente encore des lacunes. Le genre Enterococcus
comprend maintenant tous les streptocoques qui se caractérisent par certaines propriétés
biochimiques communes et une large tolérance à des conditions de croissance défavorables,
notamment les espèces E. avium, E. casseliflavus, E. cecorum, E. aurons, E. faecalis, E.
gallinarum, E. hirae, E. malodoratus, E. mundtii et E. solitarus. La plus part de ces espèces
sont d'origines fécale et peuventgénéralement être considérées en pratique comme des
indicateurs spécifiques d'une pollution fécale humaine. Toutefois, on peut aussi les isoler à
partir de fèces d'animaux, et certaines espèces et sous-espèces, comme E. casseliflavus, E.
faecalis var .liquefaciens, E. malodoratus et E. solitarusse rencontrent principalement sur des
végétaux (OMS, 1994).
En ce qui caractérise le genre Streptococcus, seuls S. bovis et S. equinus possèdent l'antigène
du groupe D et font partie des streptocoques fécaux. On les recontre en premier lieu dans les
excréments d'animaux. Les streptocoques fécaux se multiplient rarement dans l'eau polluée et
leur continuité n'est pas supérieure à celle de la E. coli et des coliformes (Leclerc et al.,
1996).
Les bactéries du genre Enterococcus appartiennent au groupe de bactéries qu’on appelait
précédemment streptocoques fécaux. Comme les bactéries E. coli, les bactéries
entérocoques se retrouvent en quantité considérable mais moins abondante que ces dernières
dans les matières fécales humaines et animales. Toutefois, certaines variétés ne sont pas
d’origine fécale et sont présentes naturellement dans les végétaux et le sol. Ces bactéries sont
plus résistantes à la chloration que les coliformes et subsistent généralement plus longtemps
dans l’environnement.
En outre, contrairement aux coliformes, elles recroissent très difficilement dans le réseau.
Leur grande résistance à la sécheresse permet d’utiliser aussi les entérocoques comme
contrôle pratique lors de l’installation ou de la réfection de conduites d’un réseau de
distribution.
L’analyse des bactéries entérocoques est souvent réalisée pour évaluer la contamination fécale
des eaux de baignade. L’analyse se fait habituellement par membrane filtrante sur un milieu
spécifique. Dans le contexte du RQEP, les bactéries entérocoques doivent être contrôlées dans
l’eau brute des puits vulnérables (art. 13) et des réseaux ayant démontré une contamination
73
fécale lors du contrôle bactériologique (art. 37). Elles sont donc utilisées comme indicateur de
contamination fécale dans une eau souterraine non désinfectée
Fig N° 21: Croissance des entérocoques sur milieu ROTHE
III.2.2.4. Les bactéries pathogènes
Nos résultats indiquent l'absence totale des bactéries suivantes, Vibrion cholérique,
Clostridium, Salmonella et Shigella dans les différentes sources d'eau de Béni-Abbes.
Cesbactéries sont des agents provocants de maladies gastro-intestinales et sont donc présents
dans les matières fécales des animaux et des humains. La présence de l’un de ces micro-
organismes dans l'eau découle en général d’une contamination fécale. Des travaux ont
signalé de nombreuses éclosions en relation avec l’eau de robinet contaminée (Angulo et al.,
1997; Alamanos et al., 2000; Taylor et al., 2000; Chen et al., 2001). Dans la plupart des cas,
on les trouve dans l’eau du réseau de distribution contaminé qui n’était pas traitée
convenablement avant la consommation.
Des études réalisées par Zambeze (2004) sur des échantillons d’eau de consommation vendue
en sachet à Lubumbashi (République du Congo), ont révélé des contaminations soit par les
streptocoques soit par une association de streptocoques et des staphylocoques dorés. Les
concentrations obtenues étaient respectivement de 32 102
ufc/ml et 22 102
ufc/ml.
Fig N° 22 : Aspect des colonies de couleur noir deClostridiumsp. sur milieu VF incubée à
37°Cet à 46°C.
74
Fig N° 23 : Croissance de Vibrion sur milieu Eau peptonée alcalin pH 9. Le flacon 2 montre
laprésence d'un film à la surface et l'apparition de l'aspect des colonies sur GNAB.
Le risque bactérien d'origine hydrique a été historiquement le plus grave et le plus fréquent.
Au 19ème
siècle, plusieurs épidémies mortelles dans le monde ont été transmises par l'eau
(typhoïde, choléra). L'eau est un milieu favorable au développement des bactéries et des
parasites. Les déjections animales ou les rejets des matières fécales d'origine humaine ont été
les principales sources de contamination bactérienne de l'eau. Ce risque a été
considérablement réduit par la mise en place de procédés de désinfection des eaux et des
installations de traitement des eaux usées, mais il n'a pas disparu.
L'eau reste aujourd'hui à l'origine de la mort de 3 à 10 millions de personnes dans le monde,
contaminées par des bactéries d'origine hydrique (Miquel. 2003). Le contrôle de la qualité
microbiologique de l'eau repose sur la recherche d'indicateurs de contamination fécale, qui est
la contamination bactérienne la plus répandue. Elle peut être aisément suivie par la présence
d'une bactérie témoin : l'Escherichia coli, germe habituel de la flore intestinale des animaux et
des hommes, qui se répand dans les matières fécales. La présence d'E coli dans l'eau révèle
une contamination fécale. Les contaminations de ce type se traduisent par des diarrhées, ou
des gastro-entérites (diarrhées + vomissements + fièvre) plus ou moins graves, mais
susceptibles d'engager le pronostic vital pour les personnes les plus fragiles (Miquel. 2003).
III.2.2.4.1.Caractérisation des espèces dominantes.
Suite aux résultats de dénombrement des différents groupes microbiennes des eaux de Béni-
Abbes, Il nous apparu intéressant d'identifier les bactéries les plus dominant en particulier les
indicateur de contamination des eaux. Sur la base des caractères phénotypique morphologique
nous avons choisi des isolats représentatifs de chaque source d'échantillon d'eau.
L'identification du genre est orientée par la croissance des isolats retenu et pure sur des
milieux spécifiques qui sont suivis par l'observation microscopique et la coloration de gram.
Les différents caractères étudiés sont portés dans le tableau N° A. A l'aide d'un logiciel de
taxonomie (Joffin, 2005) sur feuille Excel nous avons pu classer nos isolat en espèces
correspondantes (Tableau N°). Les espèces identifiées appartiennent au E. coli 1,
Enterobacter gergoviae, Salmonella arizonae,Salmonella Paratyphi A, E. coli 2, Citrobacter
freundii, Vibrio vulnificus et Serratia liquefaciens.Cette identification a été vérifiée aussi avec
d'autres sources bibliographiques de taxonomie (Leclercet al.,1996).
75
Fig N° 24 : Identification des isolats par l'utilisation des plaques API 20 E spécifique
auxentérocoques.
Les espèces d'Escherichia coli des membres de la famille des Enterobacteriacées dominante
qui se caractérisent par la possession deux enzymes spécifiques la β-galactosidase et la β-
glucuronidase. Elles se développent à 44-45°C sur des milieux complexe, provoquent la
fermentation du lactose et du mannitol avec formation d'acide et de gaz et produisent de
l'indole à partir du tryptophane. Certaines souches peuvent se développer à 37°C mais non à
44°C et certaines ne produisent pas de gaz. E coli ne produit pas d'oxydase et n'hydrolyse pas
l'urée. Son identification complète est trop complexe pour pouvoir être pratiqué en routine,
mais des épreuves ont été mise au point pour l'identifier rapidement avec un haut degré de
certitude. Certaines de ces méthodes ont été normalisé à l'échelon international et national et
accepté pour les analyses de routines, Tandis que d'autres sont encore au stade la mise au
point ou de l'évaluation.
III.2.2.5 Représente des espèces microbiennes.
Le tableau N°5 indique la répartition des différentes bactéries dominantes su niveau des
sources d'eau. L’espèce d'Escherichia coli est présente dans la totalité des sources. En
revanche, les sources principales d'eau destinée à la consommation humaine (Ain Sidi
Othmane 80%, puits communal 15% et le forage 5%) ne contiennent pas de germes
potentiellement pathogènes tels que Salmonella, Vibrion et Clostridium.
En outre nous remarquons que l'eau de la foggara 10 est il ya presence des E.coli tandis
qu’elle a été stérile et aucun microorganisme ne supporte cette eau mais très faible la
majourite ces des germes coliformes de l’environnement (Leclerc et al., 2001, Figueras et
al., 2010) C'est pourquoi toute détection de coliformes fécaux doit être interprétée avec
précaution (Figueras et al., 2010)
Géographie et Aménagement Bulletin de l' A.G.A.T N 13 : 67. 2008
76
Evaluation de la Qualité Sanitaire des Eaux Brutes de Consommation : cas de la
Ville de Béni-Abbès du Sud Ouest Algérien
BENGARNIA Benmerine, HENNI Jamal Eddine, AL ABOUDI Abdul Kadhum et
*KIHAL Mebrouk Laboratoire de Microbiologie Appliquée, Département de Biologie.
Faculté des Sciences. Université d’Oran. BP 16 Es-Senia, Oran 31100 Algérie.
Résumé
Le développement de la ville de Béni-Abbès, sous le poids de la démographie et des
activités administratives et commerciales, a entraîné le détournement des eaux réservées à
l’irrigation des sols de la palmeraie. L’analyse physico- chimique et microbiologique des
ressources d’eau Ain Sidi Othmane, des deux puits (communal, forage1) et les
anciennes foggaras ont fait l’objet de cette étude. Les résultats montrent en évidence que la
source principale de Ain Sidi Othmane reste une source eaux de qualité sanitaire et
hygiénique irréprochables avec un taux de résidus secs le plus faible. Les nouveaux puits
communal et forage 1 présentent aussi une eau contenant un taux faible de sel par rapport à
celui cité dans la bibliographie. En revanche les eaux de toutes les Foggaras sont inaptes à la
consommation humaine par la présence de Clostridium. Par ailleurs, la foggara 1 contient la
concentration la plus élevée en résidus secs qui est de 2,325 g/l. L’absence de germes dans
la foggara 10 nous nous incite à approfondir les analyses physico-chimiques. Les sources
destinées aux réseaux de distribution doivent être surveillées.
Mot clés : Zones arides, eau de consommation, qualité de l’eau, Foggara, puits, Béni-Abbès.
Abstract
The urban development of Béni-Abbès, under the weight of demography, the administrative
and commercial activities,
involved the diversion of the water reserved for the irrigation of the palm plantation grounds.
The physicochemical and microbiological analysis of the water resources of Ain Sidi
Othmane, communal well, forage1 and the old foggaras were the subject of this study. The
results show clearly that the principal water source of Ain Sidi Othmane remains a water
source of irreproachable quality with a less rate of dry residues. Also the water of the new
communal well and Forage 1, contains a low concentration of mineral salt compared to that
sited in the bibliography. Whereas, the water of the foggara
10 countain a high concentration of dry matter (2.325g/l). The microbiological quality
analysis showed that clostridium was found in all foggeras water wherefore all foggaras water
is inapt for human consumption. No microbial was detected in the water of the foggara 10
which require other physics and chemical analysis. All drinking water sources must be
supervised.
Key words. Béni-Abbes, Drinking water, microbial analysis, wells, Foggara, dry land.
:الملخص
% اىب اىىجهخ ىيز إى 00ىذخ ث عجبس إى تىاجذ سجخ أدي اىتطىر اىعزا، و اىى اىذغزاف
1هذ اىذراسخ إى تق اىىعخ اىصحخ ىصبدر اىب األسبسخ وه ع سذ عثب، اىجئز االستهالك اىسنب، تهذف
ومذىل اىصبدر اىقذخ مبىفقبراد.
أظهزد تبئج اىتحيو اىنبئ أ ىع ب سذ عثب تحى عي سجخ جذ خفضخ اىزواست اىصيجخ و اىعبد،
غ/ه. 2.3.2 سجخ تحتى عي أعي 1ثب اىفقبرح
، وا Colstridiumمب أظهزد اىتحبىو اىنزوثىىىجخ أ ب اىفقبراد غز صبىحخ ىيشزة الحتىائهب عي ثنتزح
تتز ثعذ وجىد مبئبد دققخ ف بههب. 10اىفقبرح
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77
ىجهخ ىالستهالك اىى.زاقجخ ستزح ىتتجع اىىعخ اىصحخ ىيب اى 1تتطيت ب سذ عثب، اىجئز اىجيذ
: ث عجبس ، ىعخ اىب، اىبطق اىجبفخ ، ب اىشزة، فقبرح، ثئز. كلمات مفتاحية
INTRODUCTION
La ville de Béni-Abbes, fondée sur le bord de l’oued Es-Saoura, est située au sud ouest du
Sahara algérien (Fg. 1). Dans le passé, l’eau native d’une source locale d’origine souterraine
de très bonne qualité (nappes phréatiques) été considérée
comme potable pour la ville. Elle était accessible, à tous les citoyens, par l’intermédiaire d’un
réseau de distribution local
(Rames, 941).
Figure 1. Montre la position géographique de la ville de Béni-Abbes dans l'Algérie.
La production annuelle été estimée à 1 040 688 m3/an. Les quantités d’eau consommées
étaient variables selon les saisons ; la quantité fournie aux citoyens atteignait 693 500
m3/an, et, la palmeraie été irriguée par 347188 m3 /an,
33.36% de l’eau totale produite (Bennadji e t a l . , 1998).
Actuellement, suite à la croissance démographique, la population de la ville s’élève à 13.000
habitants (Deuerlein et Klingel, 2004), le service n’est garanti que deux heures environ par
jour. Cette nouvelle situation a incité les services publics à explorer d’autres sources
hydriques par le forage de nouveaux puits afin de renforcer la source principale de Sidi
Othmane qui a un débit de 26 litres par seconde. Ainsi, 2 récents puits sont mis en service
(puits communal et forage1), ayant chacun un débit de 4 litres par seconde, et
représentant 20% de la production totale (Deuerlein et Klingel, 2004).
Généralement, plusieurs types de microorganismes contaminent l’eau et dégradent sa
qualité sanitaire. Cette contamination est souvent le résultat de matières fécales d’origine
humaine ou animale. Certains de ces microorganismes peuvent provoquer des maladies
hydriques graves (Taras et al, 1971). D’autre part, l’implantation d’usines de proximité
(Deuerlein et Klingel, 2004), qui rejettent des résidus proche du puits communal, peut
être aussi un facteur de dégradation de la qualité sanitaire des eaux. Les systèmes du
réseau d’eau potable, celui qui possède de multiples conduits en parallèle et celui des
Géographie et Aménagement Bulletin de l' A.G.A.T N 13 : 67. 2008
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foggaras d’irrigation de palmeraie, sont exposés à la contamination croisée (Bennadji e t a l . ,
1998). Les données sur le fonctionnement des deux réseaux n’ont pas fait l’objet d’étude et
sont toujours méconnues (Deuerlein et Klingel, 2004).
Actuellement, l’évaluation des risques microbiologiques et chimiques est un instrument très
important pour évaluer la qualité sanitaire de l’eau.
Notre travail consiste à l'évaluation de la qualité sanitaire des sources des eaux souterraines
destinées à alimenter les réseaux de distribution de l’eau de la ville de Béni-Abbes. La
comparaison de la composition chimique et microbiologique des différentes sources nous
oriente sur les procédés à utiliser pour le contrôle de la qualité des eaux de consommation de
la ville de Béni-Abbès.
MATERIEL ET METHODES Echantillonnage
Les analyses microbiologique et physico-chimique ont porté sur 35 échantillons d’eau
prélevés aux endroits suivants:
source de Sidi Othmane, puit communale, forage1 et douze foggaras. Le choix de ces sites
s’est réalisé dans le souci de couvrir l’ensemble du territoire de la ville de Béni-Abbes et
d’inclure les différents types de quartiers et les différentes sources d’eau (Fig. 2). Les
échantillons d’eaux analysés ont été prélevés à la source en respectant les conditions
d’asepsie et la stérilisation du matériel de prélèvement (Taras et al., 1971 ; Baudart et al.,
2002 et El Bakouri et al.,2008).
Analyses physico-chimiques
Toutes les analyses chimiques sont réalisées au laboratoire du contrôle de qualité de
Béchar. Les paramètres physico-
chimiques (la température, la dureté, les résidus secs, la conductivité, le taux de calcium, de
magnésium, de sodium, de chlore et de nitrate) sont déterminés selon les techniques
standards d’analyse de (Rodier, 1984 ; Sidney, 1984 ; et Clescerl et al., 1998).
Figure 2. Le plan global de la ville de Béni-Abbes montrant le réseau de distribution d’eau et
les points de prélèvements des échantillons d’eau.
Légendes : CH : château d'eau; PC : puit communal; ASO : Ain Sidi Othmane, For : forage
Analyses microbiologiques
La qualité bactériologique d’une eau n’est pas un paramètre stable et nécessitent des contrôles
permanents afin de
Géographie et Aménagement Bulletin de l' A.G.A.T N 13 : 67. 2008
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détecter rapidement les agents microbiens les plus fréquents de la non potabilité de
l’eau. Le dénombrement des différents groupes microbiens nécessite la réalisation des
suspensions de dilutions et des milieux de culture variés et spécifiques. Pour ce faire, on
prépare des dilutions décimales dans l'eau physiologique stérile. Les échantillons d'eau à
analyser sont dilués de 10-1 à 10-5
Le Dénombrement des groupes microbiens tels que la microflore totale, des coliformes totaux
et fécaux, des Salmonelles et Shigelles, des streptocoques totaux et fécaux, des vibrions, des
Sulfito-reducteurs Clostridium, et des Staphylocoques ont été réalisé selon le protocole de
Taras et al., (1971) ; OMS/PNUE, (1994) ; Spellman (2003) et de Clescerl et al., (1998). Le
tableau I résume les donnés sur les milieux de culture et les conditions utilisés pour le
dénombrement des différents groupes microbiens.
Identification des espèces.
L'identification des espèces, des différents genres bactériens isolés à partir des
échantillons d'eau de consommation de Béni-Abbès, a été réalisée selon les procédures
spécifiques pour chaque genre. Après purifications, on réalise les observations
morphologiques (macroscopiques et microscopiques) et les études physiologiques. La
caractérisation de certaines espèces d’enterobactériacées est faite sur la base des galeries
API 20E. Les résultats des identifications ont été confrontés avec la description des espèces
exposées notamment dans la taxonomie numérique de Kaper et al., (1982).
Géographie et Aménagement Bulletin de l' A.G.A.T N 13 : 67. 2008
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Tableau I. Techniques de dénombrement des bactéries recherchées dans les eaux de consommations
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81
RESULTAT ET DISCUSSION
Résultats des analyses physico-chimiques
La température des eaux de Béni-abbès se situe entre 18 et 19.8 °C (Tab II). Ces valeurs
sont largement inférieures à la température maximale (25°C) qui indique la limite de la
bonne qualité de l'eau selon les normes internationales (OMS, 1994). La température de
l'eau affecte énormément la diversité microbienne de l'écosystème aquatique. Les espèces
psychrophiles, mésophiles dont certaines résistent à des hautes températures peuvent
survivre à la température basse de l'eau de consommation (Vaerewijck et a l. , 2005). Les
valeurs de pH des eaux de consommation de Béni-Abbes se situent entre 7.42 et 8.20. Le
pH de la source principale de Sidi Othmane est de 7.52. Tous les échantillons d’eau ont un
pH conforme aux normes de qualité ; il s’agit dans 100 % des cas de l’eau brute souterraine.
Les valeurs de la dureté des différents échantillons se situent entre 180 et 420 mg/l. On
note aussi que ces valeurs sont inférieures à la limite de concentration maximale admissible
(500 mg/l) (OMS, 1994).
La conductivité mesurée dans les différentes eaux peut atteindre 308 µS/cm dans la foggara
1, en revanche celle de la source est de 143,5 µS/cm. Les résidus secs enregistrés dans la
foggara 1 sont largement supérieurs aux autres sources et donnent une valeur de 2325 mg/l.
La source d'eau principale de Béni-Abbes contient une proportion de résidus secs d'environ
3.83 fois inférieure à la foggara1.
Les résultats de l'analyse chimique des ions sont illustrés dans le tableau II. Les valeurs
obtenues de Calcium, de Magnésium, de Sodium, de Potassium et de Chlore se situent
respectivement entre (52,7 et 146,6 mg/l), (12 et 18 µg/l), (109 et 180 mg/l), (11 et 26
mg/l) et (55,2 et 176,40 mg/l.) Les valeurs des nitrites observées se situent entre (0 et 140
µg/l).
Selon le tableau II, les eaux de consommation de la ville de Béni-Abbes contiennent, des
éléments minéraux dissous sous forme ioniques principalement, les ions Calcium,
Magnésium, Sodium, Potassium, Chlorure et Nitrite. Des concentrations différentes
ont été enregistrées. Cette différence dans les valeurs provient pour l'essentiel du lessivage
des sols. Les valeurs de sels minéraux obtenues dans les eaux de Béni-Abbès sont largement
inférieures à celles enregistrées par Tabet-Helal et Ghellai, (2006) dans les eaux du barrage
de Hammam Boughrara en 2004.
Nos résultats montrent clairement que certaines sources d'eaux de consommation de la ville
de Béni-Abbes, telles que le puits communale, la foggara 1 sont les plus probablement
exposées à une contamination chimique externe.
Djellouli et al., (2005) ont déterminé la composition chimique des eaux destinées à la
consommation humaine dans quelques régions du Sud algérien, les résultats de l’analyse
chimique de ces eaux de consommation révèlent qu’elles sont majoritairement sulfatées,
magnésiennes, calciques et fluorées et les valeurs signalées sont largement supérieures à
celles trouvées dans les eaux de la source de Sidi Othmane.
Les eaux de consommation de la ville de Béni-Abbes contiennent généralement des
concentrations en sels minéraux similaires à celles trouvées par Bagh et al., (2004) dans
les eaux de consommation de Denmark, Kumar et Kumar (2005) dans les eaux potables
conditionnées (en bouteille) en Inde. Azoulay et al., (2001) ont réalisé une étude
comparative des eaux mises en bouteilles de différents pays entre autres (la France, la
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Suisse, le Portugal, le Canada, les USA, l'Italie, l'Irlande, l'Angleterre, l'Espagne, l'Australie,
la Finlande, la Belgique ect..) et ont obtenu les valeurs très proches de nos résultats.
Les analyses physico-chimiques de l’eau de la source de Béni-Abbès, réalisées en juin
1939 à l’hôpital militaire de Bechar donnent les résultats suivants : température 22°C,
limpide sans dépôt, sans couleur, sans odeur et sans saveur. Les concentrations de l’azote
ammoniacal, organique, nitreux et nitrique sont de 70µg/l, 1 µg/l, 00µg/l et 2 µg/l
respectivement. L’eau de la source de Sidi Othmane, au point de vu potabilité, est une eau
potable avec une assez forte proportion de chlorure (64 µg/l) probablement d’origine
géologique ; très peu d’ammoniaque et pas de nitrite, faible proportion de nitrate et de
matière organique (Rames 1941).
La composition physico-chimique, des eaux de distribution de Béni-Abbès, est
légèrement différente d'une source à l'autre, ce qui entraîne une installation d'une
microflore résidente différente. Ce qui nous a poussé à procéder à une étude
microbiologique détaillée afin d'évaluer et de préciser la nature des microorganismes
qui colonisent cette eau de distribution.
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Tableau II. Les propriétés chimiques des eaux de consommation provenant de différentes sources souterraines de la région de Beni-Abbes
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Résultats des analyses microbiologiques.
Le contrôle microbiologique consiste à vérifier la présence de différents types de
bactéries dans l'eau du réseau de distribution publique notamment celle des indicateurs de
contamination fécale. Les résultats de l'analyse microbiologique des différentes sources d'eau
de la ville de Béni-Abbes sont portés dans le tableau III.
La microflore totale.
Le résultat de dénombrement de la microflore totale cultivable des différentes sources
d'eaux de la ville de Béni-Abbes montre une charge microbienne qui varie de 00 à 140 105
ufc/ml. Les principales sources destinées à la consommation publique, la source de Sidi
Othmane contient 65 105 ufc/ml, le puit communale 140 105 ufc/ml et le Forage1 38 105
ufc/ml. Les foggaras source d'eau classique privé sont exploitées essentiellement pour
l'irrigation sont aussi utilisées comme eau de boisson pour les agriculteurs. Ces Foggaras ont
une densité microbienne qui varie de 35 à 140 105 ufc/ml. Nos résultats montrent aussi
l'absence totale de toutes sorte de microorganismes dans la Foggara 10. Kihal et al., (2002)
ont montré que 71,42 % des échantillons analysés des eaux de Foggaras d'Adrar représentent
une eau non potable.
La flore bactérienne identifiée par les techniques classiques de comptage sur gélose n'est
pas forcément représentative des bactéries effectivement présentes dans l'eau produite.
La numération de la microflore totale (bactéries hétérotrophes) peut être utilisée en tant que
l'une des nombreuses méthodes disponibles pour surveiller la qualité globale de l'eau, elle
n'indique pas sa salubrité ni par conséquent la présence possible de germes pathogènes pour
les consommateurs de cette eau. L'augmentation importante des concentrations de bactéries
hétérotrophes au dessus des concentrations normales des eaux traitées (20 ufc/ml), (JORA
35, 1998), indiquent des changements au niveau de la qualité de l'eau brute, du traitement
ou de la désinfection, une excroissance, une conception inadéquate ou un mauvais entretien
du réseau de distribution (Martiny et al., 2003, Zeng et al., 2005).
Les micro-organismes sont non seulement les organismes les plus abondants dans les
systèmes d'eau douce normaux, mais sont également les acteurs principaux dans des
processus écologiques, gérant aussi la purification et la qualité de l'eau. La connaissance
détaillée de la diversité et de la fonction des micro-organismes dans les écosystèmes
aquatiques d'eau douce est un prérequis essentiel à la gestion acceptable des ressources
d'eau douce ( Kell et a l. , 1 9 9 8 et Hahn, 2 0 0 6 ) . Plusieurs études ont démontré que la
composition bactérienne de la communauté (BCC) des eaux change temporairement dans
l'espace, les habitats, et aussi bien entre les habitats (Wadhwa et al., 2002 et Vaerewijck
et al., 2005).
Les indicateurs de contamination
Les coliformes totaux.
Le taux des coliformes totaux dans les différentes sources d'eau de Béni-Abbes varie de 00
à 140 104 ufc/ml. La source principale, Ain Sidi Othmane, contient un taux de 4 104
ufc/ml. Le taux de coliformes fécaux dans les deux puits,
communal et forage 1, est de 140 104 ufc/ml, et 160 103 ufc/ml respectivement.
Ce groupe hétérogène de coliforme appartient à la famille des entérobactéries et comprend
plusieurs genres bactériens qui représentent la flore intestinale normale. Cependant, la
plupart des espèces se retrouvent aussi naturellement dans le sol, la végétation et aussi dans
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l’eau (Williams et al., 2004 et Pozos et al., 2004). De ce fait, cette analyse n’est pas
considérée comme un indicateur de contamination fécale ou de risque sanitaire. La présence
de coliformes totaux dans un système de distribution d’eau potable peut avoir plusieurs
significations dont la recroissance bactérienne, une perte d’étanchéité du réseau, une
déficience ou une absence de traitement.
Une eau potable contenant des Entérobactéries totaux peut indiquer une incapacité à
maintenir un résiduel de chlore suffisant dans le système de distribution.
Les coliformes fécaux.
Le taux de coliformes fécaux suit la même allure que les coliformes totaux (Tab. III). Le
taux des coliformes fécaux dans les différents sources d'eau de Béni-Abbes varie de 00 à 140
104 ufc/ml. La source principale d'approvisionnement en eau potable de la ville de Béni-
Abbes contient un taux de 4 104 ufc/ml. En revanche, le puit communal son taux de
coliformes totaux est de 140 104 ufc/ml, et 16 104 ufc/ml ont été observé dans le forage1.
Les coliformes fécaux sont un sous-groupe de bactéries faisant partie des Entérobactéries.
La méthode d’analyse est optimisée pour sélectionner la croissance des bactéries d’origine
fécale. Escherichia coli est la première espèce bactérienne prise en compte comme
indicateur depuis 1893, pour témoigner une contamination fécale. En suite, en 1907 des
chercheurs ont observé qu'E. coli est la bactérie dominante de la matière fécale humaine
tandis que les autres espèces de Entérobactéries peuvent avoir une autre source (Davies et
al.,1995 ; Rompre et al., 2002).
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Tableau III . La charge microbienne et les autres paramètres microbiologiques des différentes sources d'eau de la ville de Beni-Abbes.
Point du prélèvement Flore
total
(x105)
Coliformes
totaux (x104)
Coliformes
fécaux (x104)
Streptocoques
fécaux (x104)
Vibrion
cholérique
Clostridium Salmonella Staphylococcus
Ain Sidi Othmane 65 ± 3,30 4 ± 0,20 4 ± 0.14 3 ± 0.15 Absence Absence Absence Absence
Puit communal 140 ± 7,50 140 ± 2.30 140 ± 6.02 15 ± 0.92 Absence Absence Absence Absence
Forage1 38 ± 2,30 1.6 ± 0,30 16 ±0.11 00 Absence Absence Absence Absence
Foggara 1 111 ± 6,60 140 ± 2.5 140 ± 6.63 15 ± 0.89 Absence Présence Présence Absence
Foggara 2 135 ± 6,30 110 ± 4.5 40 ±0.52 115 ± 3.01 Absence Présence Présence Absence
Foggara 3 67 ± 4,10 4 ± 0.44 3 ±0.11 3 ± 0.10 Absence Présence Présence Absence
Foggara 4 102 ± 7,50 4 ± 0.56 3 ±0.10 3 ±0.20 Absence Présence Présence Absence
Foggara 5 120 ± 8.40 140 ±3.10 40 ±0.67 30 ±1.84 Absence Présence Présence Absence
Foggara 6 140 ±11.30 140 ± 7.10 140 ±5.23 140 ± 3.21 suspecte Présence Présence Absence
Foggara 7 72 ± 5.50 40 ± 1.40 40 ±1.37 140 ±5.04 Absence Présence Présence Absence
Foggara 8 55 ± 5.40 16 ± 0.35 6 ±0.25 30 ±0.15 Absence Absence Présence Absence
Foggara 9 35 ± 0,45 30 ± 0.23 30 ±0.19 140 ±6.20 Absence Présence Présence Absence
Foggara10 00 00 00 00 Absence Absence Absence Absence
Foggara 11 100 ± 5.80 4 ± 0.12 6 ±0.21 20 ±0.12 Absence Présence Présence Absence
Foggara 12 86 ± 4.36 4 ± 0.22 110 ±4.42 140 ± 7.01 Absence Présence Présence Absence
NB Tous les prélèvements des robinets sont totalement négatifs
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E. coli est une espèce de Entérobactéries thermotolérantes capable de dégrader le
tryptophane en indole. E. coli est considérée comme germe dominant de la flore intestinal
des animaux à sang chaud et en particulier les humains, et représente 1% de la biomasse
microbienne totale (Larpent et Larpent-Gouraud, 1997 ; Rompre et al., 2002 et Leclerc
2003). Dans la matière fécale, le nombre d'E. coli est hautement supérieur à l'ensemble des
Entérobactéries.
Les Streptocoques fécaux.
Le taux des Streptocoques fécaux dans les différentes sources d'eau de Béni-Abbes varie de
00 à 140 104 ufc/ml. La source principale, Ain Sidi Othmane, contient un taux de 6 104
ufc/ml. En revanche, le puit communal le taux de Entérocoques totaux est de 15 104
ufc/ml, et 00 ufc/ml ont été observé dans le forage1. En étudiant la qualité sanitaire des
eaux de consommation de la suisse, Pruss (1998) a confirmé la corrélation étroite entre la
présence des Enterococcus et Escherichia coli et l'apparition des maladies d'origine
hydrique.
Les streptocoques fécaux se multiplient rarement dans l'eau polluée et leur persistance n'est
pas supérieure à celle d’E. coli et des Entérobactéries (Rompre et al., 2002 ; Emmanuel et
al., 2004; Leclerc 2003)..
Les bactéries pathogènes
Nos résultats indiquent l'absence totale des bactéries suivantes, Vibrion cholérique,
Clostridium,Salmonella et Shigella dans les différentes sources d'eau de Béni-Abbes. Ces
bactéries sont des agents provoquant de maladies gastro-intestinales et sont donc présents
dans les matières fécales des animaux et des humains. La présence de l’un de ces micro-
organismes dans l'eau découle en général d’une contamination fécale. Des travaux ont
signalé de nombreuses éclosions en relation avec l’eau de robinet contaminée. Dans la
plupart des cas, on les trouve dans l’eau du réseau de distribution contaminé qui n’était
pas traitée convenablement avant la consommation.
Des études réalisées sur des échantillons d’eau de consommation vendue en sachet à
Lubumbashi (République du Congo), ont révélé des contaminations soit par les
streptocoques soit par une association de streptocoques et des staphylocoques dorés (Mc
Killip et al., 1998). Les concentrations obtenues étaient respectivement de 32 102 ufc/ml et
22 102 ufc/ml.
Le risque bactérien d'origine hydrique a été historiquement le plus grave et le plus
fréquent. Au 19ème siècle, plusieurs épidémies mortelles dans le monde ont été transmises
par l'eau (typhoïde, choléra).
L'eau reste aujourd'hui à l'origine de la mort de 3 à 10 millions de personnes dans le monde,
contaminées par des bactéries d'origine hydrique (Miquel. 2003).
Le contrôle de la qualité microbiologique de l'eau repose sur la recherche d'indicateurs de
contamination fécale, qui est la contamination bactérienne la plus répandue. Les
contaminations de ce type se traduisent par des diarrhées, ou des gastro-entérites (diarrhées
+ vomissements + fièvre) plus ou moins graves, mais susceptibles d'engager le pronostic
vital pour les personnes les plus fragiles (Miquel. 2003).
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Identification des espèces dominantes.
Suite au résultats du dénombrement des différents groupes microbiennes des eaux de Béni-
Abbes, Il nous est apparu intéressant d'identifier les bactéries les plus dominantes en
particulier les indicateur de contamination des eaux. Sur la base des caractères
phénotypiques, les isolats représentatifs de chaque échantillon d’eau ont été choisis.
L'identification du genre est orientée par la croissance des isolats retenus et purs sur des
milieux spécifiques et suivis d’une observation microscopique par la coloration de gram
(Tab IV). A l'aide d'un logiciel de taxonomie sur feuille Excel nous avons pu classer nos
isolats en espèces correspondantes. Les espèces identifiées appartiennent au E. coli 1,
Enterobacter gergoviae, Salmonella arizonae, Salmonella paratyphi A, E. coli 2,
Citrobacter freundii, Vibrio vulnificus et Serratia liquefaciens (Tab. IV). Cette
identification a été vérifiée aussi avec d'autres sources bibliographiques de taxonomie
(Hahn, 2006, Ultee et al., 2004).
Répartition des espèces microbiennes.
Le tableau V indique la répartition des différentes bactéries dominantes au niveau des
sources d'eau.
L’espèce d'Escherichia coli est présente dans la totalité des sources excepté la foggara 10.
En revanche, les sources principales d'eau destinée à la consommation humaine (Ain Sidi
Othmane 80%, puit communal
15% et le forage 5%) ne contiennent pas de germes potentiellement pathogènes tels que
Salmonella, Vibrion et Clostridium.
En outre nous remarquons que l'eau de la foggara 10 est stérile et aucun microorganisme ne
supporte cette eau.
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Tableau IV . Illustre les caractères biochimiques, des espèces des entérobactéries dominantes des eaux de Béni-Abbes. Les plaques de galeries API 20
E sont utilisées pour leur identification.
E. coli 1 Enterobacter
gergoviae
Salmonella
arizonae
Salmonella
Paratyphi A
E. coli 2
Citrobacter
freundii
Vibrio
vulnificus
Serratia
liquefaciens ONPG + + + - - + + +
ADH - - + - - d - -
LDC + - + - + - + +
ODC - + + + - - + +
CIT - + + - - + - +
H2S - - + - - + - -
URE - + - - - - - -
TDA - - - - - - - -
IND + - - - + - + -
VP - + - - - - - +
GEL - - - - - - + +
GLU + + + + + + + +
MAN + + + + + + + +
INO - - - - - + - +
SOR + - + + + + - +
RHA + + + + + + - -
SAC - + - - - - - +
MEL + + + + - + - -
AMY - + - - - + + +
ARA d + + + - + - +
OX - - - - + - + +
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Tableau V. Représente la répartition les espèces bactériennes dominantes dans les différentes sources d'eau de la ville de Béni-Abbes.
E.coli 1
Enterobacter
gergoviae
Salmonella
arizonae
Salmonella
Paratyphi A
E.coli 2
Citrobacter
freundii
Vibrio
vulnificus
Serratia liquefaciens
Closteridium
Ain sidi Othmane X X X X
Puit communal X X X X X
Forage X X
Foggara 1 X X X X X X X
Foggara 2 X X X X X X X X
Foggara 3 X X X X X
Foggara 4 X X X X X X X
Foggara 5 X X X X X X X
Foggara 6 X X X X X
Foggara 7 X X X X X X X X
Foggara 8 X X X X
Foggara 9 X X X X X X
Foggara 10
Foggara 11 X X X X X X X
Foggara 12 X X X X X X X
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Néanmoins, de nombreux exemple dans le monde ont prouvé que les eaux
souterraines peuvent devenir rapidement souillées si les mesures de sauvegarde au
moment de la captation ne sont pas bien mainten ues.
Les données prouvent que la confiance accordée aux eaux souterraines change
considérablement d’un pays à l’autre; par exemple, la Norvège prend seulement 13% de
son eau potable des sources d'eaux souterraines, tandis que l'Autriche et le Danemark
dépendent presque totalement des ressources d'eaux souterraines (Christen, et al., 2006).
La présence relative des différents microbes pathogènes dans un réservoir spécifique
d’eau est déterminée par une combinaison de facteurs: le niveau de contamination de la
source, l'importance de cette source, la capacité de transport d’une source à une autre, la
résistance aux processus de traitement (El Garouani et Merzouk, 2004).
Les mesures préventives sont des techniques, des actions ou des activités qui sont utilisées
pour prévenir un danger microbiologique identifie, l'éliminer ou réduire sa gravite ou sa
probabilité d'apparition à un niveau acceptable. La qualité microbiologique de l'eau
distribuée, adaptée à l'usage de l'eau et au degré de risque du patient, repose sur une
maîtrise permanente du réseau de distribution d'eau, c'est-à-dire sur une conception
réfléchie, un entretien soigneux du réseau et une maintenance régulière des équipements
de distribution d'eau. Les mesures techniques ont pour but de concevoir, traiter,
nettoyer, rincer, désinfecter les composants du réseau de distribution d'eau afin de limiter
la prolifération microbienne et ainsi de réduire notablement la quantité de micro-
organismes véhiculée par l'eau (Squinazi et Gandré, 2006).
Bien que, les progrès accomplis en matière d’hygiène publique ont permis le recul des
grandes épidémies d’origine hydrique, toutefois, la maîtrise du risque microbiologique lié à
la consommation d’eau demeure une priorité universelle.
La plupart des non-conformités relevées au niveau des réseaux d’eau demeure d’origine
microbiologique, et des cas de gastroentérites sont encore actuellement imputables à
l’eau de boisson, en raison de traitements insuffisants ou absents, ou à la suite d’entrées
d’eaux parasites dans les réseaux de distribution.
Le contrôle de la conformité de la qualité de l’eau porte, dans le présent document, sur la
vérification de l’absence de coliformes thermotolérants ou d’Escherichia coli et de
streptocoques fécaux dans un échantillon de 100 mL d’eau prélevé dans le cadre du contrôle
sanitaire courant.
Les caractères biochimiques des espèces de bactéries dominantes dans les eaux de Béni-
Abbès sont présentés dans le tableau IV qui regroupe les genres suivants, Escherichia,
Enterobacter ; Salmonella, Citrobacter, Vibrio, Clostridium et Serratia. La répartition
des espèces microbienne indique que les analyses d’eau du forage1 ont révélé qu’une
seule espèce qui est Escherichia coli. L’absence totale des germes pathogènes tels que
Vibrio, Clostridium, Salmonella dans les eaux du Ain Sidi Othmane, Forage1 et le puit
municipale. Clostridium sp. a été révélé dans toute les eaux de Foggara excepté la foggara
10 qui a une eaux dépourvu de germes détectables. La foggara 10 doit être étudiée avec
beaucoup d’attention car l’absence de germes nous conduit à chercher l’élément
stérilisateurs.
La source de Ain sidi Othmane est caractérisée un taux faible de résidu secs, de sels
minéraux et l’absence totale des nitrates. En revanche la foggara1 représente le taux le plus
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élevé en résidus secs et en sels minéraux avec une concentration de nitrate de 26,1 µg/l. Le
puits communal et le forage1 leur eau contient des valeurs intermédiaires de sels minéraux.
CONCLUSION.
Cet étude de la qualité des eaux de consommation de la ville de Béni-Abbès rentre dans le
cadre de suivre et de comparer la qualité des la source principale de Ain Sidi Othmane avec
les nouveaux puits destinées à la consommation humaine. L’analyse physico-chimique et
microbiologique de sources d’eau principale de Ain Sidi Othmane, puits communal, forage1
et les eaux de foggara ont permis de clarifier la qualité de leurs eaux. Les résultats montrent
clairement que la source principale de Ain Sidi Othmane reste une source eaux de qualité
appréciable avec un taux de résidus secs le plus faible. Les nouveaux puits communal et
forage 1 présente aussi une eau contenant un taux de sel faible par rapport aux eaux
des Foggaras et aussi à celui cité dans la bibliographie. Les eaux de la Foggara 1
contiennent une concentration élevée en résidus secs qui est de 2,325 g/l. L’analyse de la
qualité microbiologique révèle que l’eau des Foggaras contient Clostridium, et elle est inapte
à la consommation
REMERCIEMENTS
Les remerciements des auteurs s’adressent aux responsables de la commune et de la Daira
de Béni-Abbès, ainsi
qu’au Directeur de l’hôpital de Béni-Abbès qui a autorisé la réalisation d’une partie de ce
travail dans le laboratoire d’analyse de l’hôpital.
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99
Géographie et Aménagement Bulletin de l' A.G.A.T N 13 : 67. 2008
100
Conclusion générale
102
Conclusion générale
Les eaux souterraines représentent une ressource précieuse très sollicitée par la
population urbaine et périurbaine de la région de Béni Abbés. Ce travail de thèse qui entre
dans le cadre de l’étude de la qualité microbiologique des eaux de consommation brute de la
région de Béni Abbes avait plusieurs objectifs.
Le premier était l’étude de l’évolution des différents paramètres de qualité physico-
chimique et microbiologique au niveau des six sources d’approvisionnement d’eaux
potables dans cette ville.
Les résultats démontrent que les eaux brutes des cinq sources ne sont pas trop chargées en
bactéries en particulier pour la source Ain Sidi Otmane , Foggara de Béni Abbés , Forage de
Béni Abbés et Forage de Zeghamra qui sont de l’ordre de 0,02x105
UFC/ml et 140
x105UFC/ml pour les coliformes totaux. Ce pendant pour les entérocoques oscillent entre
2x 104
et 15 x 104
UFC/ml. Tandis que la foggara d’Ougarta est la source la plus
charger en enregistre 140 x105
UFC/ml pour les coliformes totaux et de l’ordre de 160 x
104
UFC/ml.
Le second objectif de notre étude était l’isolement, l’identification des souches isolées
qui nous a amené a déterminé l’existence de sept genres de bactéries les plus dominant
parmi les 300 souches isolées des eaux brutes de Béni Abbés.(E.coli , Enterobacter,
Salmonella, Citrobacte, Serratia, Aéromonas, Closteridium ). La foggara d’Ougarta
exprime la présence des sept genres de bactéries identifier .ces résultats reflètent la situation
dégradé de la foggara est coïncide avec les résultats car le périmètre de protection des eaux
souterraines n’est pas respecte dans trois sources le puits communal, la source d’Ougarta
et la foggara de Béni Abbes peut être délimité autour de sources non captées présentant un
intérêt pour l’approvisionnement futur. L’utilisation du sol et les autres activités exécutées
dans ce périmètre doivent satisfaire à la quasi-totalité des exigences fixées pour la zone de
protection rapprochée. Une proposition de d’élimination du périmètre de protection (JORA
80/2007)
103
Perspectives
Pour mieux protéger les eaux dans une zone subaride comme la région de Béni Abbés. Ou
l’eau jeu un rôle très important pour la stabilité des citoyens et pour préserver la qualité des
eaux il faut :
- Préconiser une zone de protection des sources d’eaux.
- Faire un suivi de contrôle de qualité continuellement pour relever le début de la
contamination, et son évolution dans le temps pour permettre de trouver des solutions
d’intervention afin de préserver la source d’eau.
- il est certain que les techniques de culture bactérienne traditionnelles ne suffisent pas
pour étudier les populations bactériennes complexes. Depuis une vingtaine d’années, une
quantité importante d’études ont démontré que la plupart des espèces ne sont pas
cultivables sur des milieux traditionnels et dans un même temps, ont approuvé l’utilisation
de la biologie moléculaire pour l’étude de ces populations complexes, qu’elles soient
digestives, aquatiques, des sols… Ces techniques sont nombreuses mais comprennent en
général un canevas semblable. Tout d’abord, l’ADN doit être extrait, puis amplifié, parfois
traité et enfin visualisé ou séquencé. la biomoléculaire est une méthode d’évaluation plus
récente, plus rapide, plus fiable et avec un prix bas.
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Tech d'Oran-Algérie,
ANNEXE
115
1-Recherche des germes totaux:
Gélose tryptophane glucose de levure agar (TGEA):
-Tryptone……………………………………………….5g
-Extrait de levure……………………………………….5g
-Glucose………………………………………………..1g
-Gélose…………………………………………………15g
2-Recherche des coliformes totaux:
Bouillon lactose au pourpre de bromocrésol (BCPL):
A-Double concentration:
-Extrait de viande de bœuf…………………………...6g
-Peptone……………………………………………...10g
-Lactose………………………………………………10g
-Pourpre de bromocrésol…………………………….0,06g
-Eau distillé…………………………………………1000 ml
B- Simple concentration:
-Extrait de viande de bœuf……………………..........3g
-Peptone……………………………………………...5g
-Lactose………………………………………………5g
-Pourpre de bromocrésol…………………………….0,03g
-Eau distillée……………………………………….1000 ml
3-Recherche d'Escherchia coli:
Milieu de mannitol (Schubert):
-Tryptophane……………………………………0,2g
-Acide glutamique………………………………0,2g
-Sulfate de magnésium…………………………0,7g
-Sulfate d'ammonium…………………………...0,4g
-Citrate de sodium………………………………0,5g
-Chlorure de sodium…………………………….2g
116
-Tryptone………………………………………..10g
-Mannitol……………………………………….7,5g
-Tampon phosphate…………………………….500ml
-Eau distillée……………………………………1000 ml
4-Recherche de streptocoques fécaux:
Bouillon glucosé à l'azide de sodium (Rothe):
A-Double concentration:
-Tryptone………………………………………..40g
-Glucose…………………………………………10g
-Chlorure de sodium…………………………….10g
-Phosphate bipotassique………………………...5,4g
-Phosphate monopotassique…………………….5,4g
-Azide de sodium……………………………….0,4g
-Eau distillée…………………………...............1000 ml
-Ph: 6,8-7
B- Simple concentration:
-Tryptone……………………………………….20g
-Glucose………………………………………..5g
-Chlorure de sodium…………………………...5g
-Phosphate bipotassique……………………….2,7g
-Phosphate monopotassique…………………...2,7g
-Azide de sodium…………………...................0,2g
-Eau distillée………………………………….1000ml
-Ph: 6,8-7
Bouillon glucosé à l'éthyle violet et azide de sodium:
-Tryptone……………………………………….20g
-Glucose…………………………………………5g
-Chlorure de sodium……………….....................5g
-Phosphate bipotassique…………………………2,7g
-Phosphate monopotassique……………………..2,7g
-Azide de sodium………………………………...0,3g
-Éthyle violet …………………………………..0,0005g
117
-Eau distillée………………………………………1000ml
4-Recherche de Salmonella :
Milieu SFB :
-Peptone de viande………………………………………5g
-Lactose………………………………………………….4g
-Sélénite de sodium………………………………………4g
-Phosphate dipotassique………………………………….3,5g
-Phosphate monopotassique…………………………..…6,5 g
Milieu de Salmonella-Shigella :
-Peptone………………………………………………10g
-Extrait de viande………………………………………5g
-Lactose………………………………………………...10g
-Citrate de sodium………………………………………8,5g
-Citrate de fer ammoniacal……………………………...1g
-Thiosulfate de sodium………………………………….8,5g
-Rouge neutre……………………………………………0,025g
-Vert brillant…………………………………………….0,0033g
- Eau distillée……………………………………………1000ml
Milieu d'Hecktoen:
-Peptone pepsique de viande……………………………..12g
-Extrait de levure…………………………………………3g
-Sels biliares………………………………………………9g
-Lactose…………………………………………………...12g
-Saccharose……………………………………………….12g
-Salicine……………………………………………………2g
-Chlorure de sodium……………………………………….5g
-Hyposulfite de sodium……………………………………5g
-Citrate de fer ammoniacal……………………………….1,5g
-Bleu de bromothymol……………………………………0,064g
-Fushine acide…………………………………………….0,04g
-Gélose……………………………………………………15g
118
5-Recherche de clostridium sulfito-réducteur:
Gélose viande-foie (VF):
-Extrait viande-foie……………………………………...30g
-Glucose………………………………………………….2g
-Amidon…………………………………………………2g
-Gélose………………………………………………….12g
6-Recherche de vibrion cholérique :
Milieu eau peptonée alcaline ( EPA) :
-Bacto-protéose peptone…………………………………5g
-Bactapeptone……………………………………………5g
-Chlorure de sodium…………………………………….5g
-Eau distillée……………………………………………10ml
Milieu gélose nutritive alcaline biliée (GNAB) :
-Bactapeptone………………………………………….10g
-Extrait de viande………………………………………3g
-Chlorure de sodium……………………………………5g
-Agar…………………………………………………..20g
-Eau distillée…………………………………………1000ml
7-Recherche de Staphylococcus aureus:
Bouillon de Giolitti et Cantoni:
-Peptone de caséine…………………………………..10g
-Extrait de viande……………………………………..5g
-Extrait de levure……………………………………..5g
-Chlorure de lithium………………………………….5g
-Manitol………………………………………………..20g
-Chlorure de sodium…………………………………….5g
-Glycine…………………………………………………1,2g
-Pyruvate de sodium…………………………................3g
-Eau distillée………………………………………….1000ml
119
Milieu de Baird Parker:
-Extrait de viande…………………………………..5g
-Peptone de caséine………………………………..10g
-Extrait de levure…………………………………..1g
-Pyruvate de sodium……………………………….10g
-Glycine……………………………………………12g
-Chlorure de lithium……………………………….5g
-Agar-agar…………………………………………15g
-A ajouter: 50 ml d'une émulsion de jaune d'œuf (elle est obtenue en diluant 5 ml de
jaune d'œuf prélévé aseptiquement dans 95 ml d'eau salée à 8,5%0); 0,105g de
tellurite de potassium; si besoin: 0,05 g de sulfaméthazine.
120
121
122