Pr.S.ABDENNOUR2021-2022

1

ANALYSETOXICOLOGIQUEI.Objectifdelatoxicologieanalytique:Miseenœuvredemoyenstechniquespourisoler,identifieretdoserunxénobiotiqueàpartird’unematrice(leplussouventbiologique…)Cen’estpasuniquementlanatured’unproduitquidéterminesatoxicitémaisaussisaconcentration!II.Typesdeprélèvements:

• Biologiques:Sang,Urines,Bile,Cheveux,Salive,Sueur,Viscères…• Nonbiologiques:Eau,Air,Sol,Autres

III.Matriceseloncinétique:

• Sang:quelquesheures(24àmax.48)• Urines:quelquesjours(3àmax.6)• Cheveux:dessemaines,desmois

IV.Prélèvementsbiologiquesavantages/inconvénients:

V.Classificationdestoxiques:

• Toxiquesminéraux:Métalliques(Pb,Hg,Cd…)ouNon-métaux(As,Se,Sb…)Nécessitentuneminéralisation

• Toxiquesgazeux:Ex:CO,HCN,NO,HCl…• Volatilsouentrainables:Isoléspardistillation,parentrainementàlavapeur

d’eauouàl’airchaud.Ex:alcools,phénols,dérivésaminésaromatiques…• Extractiblesparsolvants:Toxiquesorganiques

Pr.S.ABDENNOUR2021-2022

2

VI.Isolementdestoxiquesminéraux«minéralisation»:VI.1.Voiesèche:CALCINATION

- four(450°C)- fouràmicroondes(1000°C)Ø Avantage:analysedequantitésimportantesd’échantillonØ Inconvénient:pertesparvolatilisation

VI.2.Voiehumide:-parlesacides+++HNO3-chauffésdefaçonconventionnelleouaumoyendelatechniquemicro-ondes.

Ø Systèmefermé:souspressionØ Systèmeouvert:pressionatmosphérique

VII.Isolementdestoxiquesgazeux:VII.1.Atmosphère:VII.1.1.Analysessurleterrain:TubesindicateursDräger,ProcédésphysiquesinstrumentauxVII.1.2.Analysesenlaboratoire:Sacsourécipients,CollecteursactifsoupassifsVII.2.Sang:microdiffusion.Ex:COVIII.Isolementdestoxiquesvolatilsouentrainables:Distillation,Entrainementàlavapeurd’eau,autresIX.Isolementdestoxiquesextractiblesparsolvants:Extractionliquide-liquide,Extractionsolide-liquideIX.1.Extractionliquide-liquide

Pr.S.ABDENNOUR2021-2022

3

IX.2.Extractionenphasesolide(SPE):

Techniquesanalytiques:qualitatives/quantitatives.avantages/inconvénients:rapidité,sensibilité,spécificité,coût,reproductibilité,précisionI.RéactionscoloréesII.Spectroscopievisibleetultraviolette:qualitative/quantitativeIII.Immunochimie:bonnesensibilite,automatisation,sansphasepreliminaired’extraction

• Deuxtechniquesdequantification:

• III.1.Enphasehétérogène:PasdedifférencesentrelessignauxproduitsparlesformeslibresouliéesdesanalytesdoncNECESSITEDESEPARERdesdeuxformesavanttoutemesure!(RADIO-IMMUNODOSAGE)

• III.2.Enphasehomogène:DifférencedecomportemententrelaformeliéeetlaformelibredoncPASNECESSAIREDESEPARERlesdeuxformes(IMMUNODOSAGESOPTIQUES)

• III.1.Radio-Immunodosage:Laséparationdesformeslibresetliéesestdélicate.Réservéauxlaboratoireshabilitésàdéteniretmanipulerdessourcesradioactives

• III.2.ImmunodosagesOptiques:EMIT(enzymemultipliedimmunoassaytechnique),FPIA(Immunopolarisationdefluorescence)

• III.2.1.EMIT(enzymemultipliedimmunoassaytechnique):

Pr.S.ABDENNOUR2021-2022

4

III.2.2.FPIA(Immunopolarisationdefluorescence)

IV. MéthodesChromatographiques/TechniquesSéparatives:

IV.1.CCM(CHROMATOGRAPHIESURCOUCHEMINCE)Permetdesépareretdecaractériserungrandnombredecomposésorganiquesgrâceàladifférencedeleurvitessedemigrationsurunecouched’unproduitadsorbantsousl’actiond’unmélangedesolvant(éluant).Ø plaquerecouverted’unephasestationnaire(geldesilice)Ø l’extraitestdéposésurlaplaqueØ migrationparcapillaritéascendantedansunechambreàdéveloppementau

moyend’unmélangedesolvantsappropriésØ RévélationdesmoléculessouslaformedetachescoloréesØ RfIV.2.HPLC:Mode:gradient/isocratique

Phasestationnaire:normale/inverse

Immunopolarisa,ondefluorescence

Pr.S.ABDENNOUR2021-2022

5

Détecteurs:UV/visible;Masse

Pr.S.ABDENNOUR2021-2022

6

IV.3.CPG:

Ø Gazvecteur:hélium,hydrogène,azoteetargonØ Colonne:remplie(maximum2mètres)oucapillaire(de15à100mètres).Ø Détecteur:FID,ECD,MS…

V.MÉTHODESSPECTROMETRIQUESD’ABSORPTIONETD’EMISSIONATOMIQUEV.1.SAA:

Ø SAA:analysedesélémentsmétalliquesØ Source:lampeàcathodecreuse(élémentàdoser)Ø Atomiseur:produitdesatomesàl’étatfondamental

Flamme/Fourgraphite

Pr.S.ABDENNOUR2021-2022

7

V.2.ICP-AES:

Ø analysesimultanée+++