limmunohistochimie khennouf lila, langlais valentin, robin laurie université bordeaux 2 master 1...
Post on 04-Apr-2015
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L’Immunohistochimie
Khennouf Lila, Langlais Valentin, Robin LaurieUniversité Bordeaux 2
Master 1 Neurosciences et Neuropsychopharmacologie
Tissu
Traceur
Anticorps
Antigène
Introduction
La Préparation des Tissus
Fixation
Déshydratants
Agents de pontage chimique
Les composés métalliques
La Préparation des Tissus
Congélation
Congélation à haute pression
Congélation ultra rapide
Congélation par pallier
Inclusion
Cryoprotection
La Préparation des Tissus
Coupe
Coupes à froid
Vibratome
Microtomie à main
La Préparation des Tissus
Les Anticorps
Chaine légère Chaine lourde
Domaines Variables
Domaines constants(espèce-dépendants)
VL
VHCL CH
CH
VHVL
CL
CH
CH
CH
CH
La Production D’Anticorps
Antigène Sang
Préparation de la
Solution
In Vivo Solution d’Anticorps Polyclonaux
La Production d’Anticorps
In Vivo Solution d’Anticorps Monoclonaux
Ganglions/rate
Lymphocytes B Cellules Myélomateuses
FusionClonage In Vitro
In VitroMultiplication
Sélection
Le Système RévélateurLes traceurs fluorescents
Les traceurs enzymatiques
Les traceurs métalliques
Tissu
Immunohistochimie Directe Immunohistochimie Indirecte
Les Méthodes de Marquage
Anticorps Primaire
Anticorps secondaire
Antigène
Traceur
Traceur
Les Méthodes de Marquage
Complexe avidine – biotine (ABC)
Peroxydase
Biotine
Avidine
H2O2
H2O
Diaminobenzidine
Précipité marron
Les Méthodes de MarquageMarquage multiple
Conclusion
Nombreuses étapes intermédiaires: - Perméabilisation - Blocages des sites non spécifiques - Rinçages
Montage
Pas un seul et unique protocole!
Merci de votre attention
Khennouf Lila, Langlais Valentin, Robin Laurie
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