cyran et al. (2003) cell vol 112 pp. 329-341

Gène

Transcription

Inhibition

Traduction

ARNm

Protéine

PeriodTimelessClockCycleDouble-time

(Per)(Tim)(Clk)(Cyc)(Dbt)

Exprimés de façonrythmique

0 12 24 h

ARNm

Per, Tim

Clk

Cytoplasme

Per PER

TIM

PER TIMPER TIM

Tim

Cytoplasme

Per PER

TIM

PER TIMPER TIM

Tim

DBT Protéine Kinase

Dégradation accélérée

PER P

0 12 24 h

ARNm

Protéine

Per, Tim

PER, TIM

DBT

Tim

Per

E-Box

CACGTG

Per TimCLK CYC

++++

PER TIM

CLK CYC

Per Tim- - - -

PER

TIM

PER TIM

DBT

CLK CYC

CLK

CYC

Per TimCLK CYC

++++

Clock

PER TIMPER

P

CLK

Activation

Inhibition?

? Exprimé de façonrythmique

Le niveau des ARNm Clock est faible chez des drosophiles mutantes présentantsoit une protéine PER inactive, soit une protéine TIM inactive.

Glossop N.R.J., Lyons LC., Hardin P.E. Vol 286, p. 766-768.Science, 22 Octobre 1999,

ARNm Clock Drosophiles

Sauvages

Clkjrk

Cyc 0

ARNm Clock

Sauv. Per01 Per01

Clkjrk Cyc0

Per01

ARNm prélevés à

01 heure

13 heures

ARNm Clock

Cyc0Clkjrk

Cyc0

Per01

ARNm prélevés à

01 heure

13 heuresSauv.

1 13

LO OO

TIM

PER TIM

DBT

CLK CYC

CLK

CYC

Per TimCLK CYC

CLK CYC

++++

Clock

PER TIM

PER

PIntermédiaires ?

Cyran et al. (2003) Cell vol 112 pp. 329-341

Cyran et al. (2003) Cell vol 112 pp. 329-341

V3: transgène permettant une forte expression constitutive de VRI

per0 per0

Cyran et al. (2003) Cell vol 112 pp. 329-341

tK: tyrosine kinase du virus HerpèsNon piloté par l’horloge moléculaire

VRI-VP16: Protéine de fusion: répresseur VRI + domaine de recrutement de l’ARN polymérase. Donne un activateur de transcription

Est rapidement dégradée en présence de lumière

Cryptochromes

Per, TimClk Clk Clk Clk ClkClk

Per, TimClk Clk Clk Clk Clk

Per, TimCry Cryb CrybCry

Per, Tim

ObscuritéLumière

20

40

60

80

100

120

Ac

tiv

ati

on

re

lati

ve p

ar

Clo

ck

Cellules embryonnaires S2 transfectées

Construction "Gene-reporter": promoteur TIM + Luciférase

Les Co-transfectants sont indiqués sous les histogrammes

Seriani et al. (1999) Science vol 285 pp. 553-556

Domaine de fixation à l'ADNDomaine

ActivateurCRYPER

PER

TIM

CRYbCRYPER CRYb

TIM

TIM PER

Seriani et al. (1999) Science vol 285 pp. 553-556

Monarque

Migration d’automne

Suivi des éclosions

Dosage de l’ARN per

Froy et al. (2003) Science vol 300 pp. 1303-1305

LD

DDLL

0 12 24

0700-1900

0100-1300

07:00 19:00

Test d’orientation du vol

Froy et al. (2003) Science vol 300 pp. 1303-1305

6 h(115°)

0700-1900

0100-1300

Lumière constante

Per/Tim

Clk/Cyc

Sud Sud

Froy et al. (2003) Science vol 300 pp. 1303-1305

Horloge PER/TIM chez la Drosophile

Horloge PER/TIM chez les Mammifères