3.2.2. l'auxèse et l'histogenèse. on peut tuer les cellules par du méthanol bouillant....
TRANSCRIPT
3.2.2. L'auxèse et l'histogenèse
On peut tuer les cellules par du méthanol bouillant. Cette technique conserve les polysaccharides insolubles dans l'alcool. Associée éventuellement à une action de protéase, elle permet de transformer l'échantillon en un fantôme (ghost) réduit au réseau tridimensionnel de ses parois cellulaires. L'utilisation d'un extensomètre permet alors de mesurer les propriétés des parois soumises à des tensions programmées.
Schéma d'un extensomètre.Celui-ci utilise un capteur de pression (mesure des pressions ou tensions exercées sur l'échantillon) et une vis micrométrique manipulée par un moteur asservi (mesure des déplacements). L'échantillon placé entre 2 pinces peut ainsi être soumis à une tension connue et sa déformation enregistrée.
Extensibilité des parois cellulaires :L'expérience a été réalisée à l'aide de segments de 1cm prélevés dans un hypocotyle de soja vert en croissance, incubés 3 heures avec ou sans auxine. Les échantillons sont tués par du méthanol bouillant puis les fantômes obtenus sont placés dans l'extensomètre et soumis à une tension de 50 grammes puis relâchés. La déformation de l'échantillon est mesurée en continu.
Vitesse d'élongation d'échantillons vivants d'hypocotyles de soja aux mêmes pH
Extensibilité de fantômes de paroi d'hypocotyles de soja à différents pH
Explication de l'élasticité de la paroi : déformation des hémicelluloses sans modification de la structure de la paroi
Intervention de l'expansine dans la réalisation d'une déformation plastique.
Suite à la mise en présence d'auxine, conjointement à l'élongation cellulaire, on observe une baisse de pH (de 0,4 unités) après un temps de latence de 8 à 10 minutes. Expériences réalisées sur des hypocotyles de Soja
La redistribution de l'auxine suite à la géoréception
A droite un mutant pin ne possède plus de gravitropisme.
La protéine pin est une protéine membranaire
Localisation d'aux.1, responsable du transport de l'auxine
Les modifications de l'organisation cellulaire au cours de la croissance(cellules de racine)
Les épaississements de lignine des trachéides et vaisseaux du xylème
Portion d'une cellule élaborant la paroi secondaire : on repère de nombreux dictyosomes, du réticulum développé et des microtubules à proximité de la membrane.
Composition et organisation du réseau non répétitif de la lignine des
parois
Ponctuations et perforations dans des vaisseaux vrais
