tp n°1 _ mise en évidence de bactéries - tpe - bactérie et antibiotique

8/19/2019 TP n°1 _ mise en évidence de bactéries - TPE - Bactérie et Antibiotique

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16/2/2016 T P n°1 : m ise en évidence de bactér ies - TPE - Bactér ie et Antibiotique

https://sites.google.com/site/tpebacterieantibiotique/annexes/manipulations/tp-n-1-mise-en-evidence-de-bacteries 1/6

Le but de cette manipulation est de mettre en évidences les bactéries dansdifférents milieux. Elle va permettre de répondre à 2 questions :

Où trouve-t-on les bactéries?Y a-t-il différents types de bactéries?

Principes de la manipulation :

La gélose contient tout les nutriments nécessaire au développement des bactéries. On meten contact les milieux/objets avec la gélose, et les bactéries se déposent sur la gélose et sedéveloppent. Pour accélérer le développement, on place les boites de pétri dans une étuve.

Après 48h, on bloque le développement bactérien en plaçant les boites de pétri auréfrigérateur, car les bactéries ne peuvent pas se développer à une température < 6°C. Onobserve ensuite les résultats.

Les milieux testés sont au nombre de 10 :

1. L'eau du robinet2. un cheveux3. un clavier

4. l'air 5. un portable6. le doigt : avant le nettoyage des mains7. le doigt : après le nettoyage des mains8. de la salive9. le sol d'un couloir très fréquenté

10. la lunette des toilettes

Protocole :Matériels nécessaires :

1 boite à pétri rempli de gélose par milieux/objets à tester un scalpel stérilisé pour la manipulation des boites de pétriune étuveun réfrigérateur

2 techniques sont utilisés ici, suivant que c'est un milieu ou un objets qui est testé:

1. Si c'est un objets qui est testé :

ouvrir la boite de pétri

poser l'objet à la surface de la géloserefermer la boite de pétriplacer dans l'étuveRecommencer ces étapes pour chaque objets.

Il faut effectuer cette opération au plus vite, pour éviter une contamination trop importante dela gélose par l'air.

2. Si c'est un milieux qui est testé :

Il faut normalement utiliser des boites de pétri de contact. N'ayant pas ces boites, voici lamanière dont nous avons procédé :

ouvrir la boite de pétrisortir la gélose à l'aide d'un scalpel stérilisé et la déposer sur le milieu à tester attendre quelque secondes et remettre la gélose dans la boite de pétrirefermer la boite de pétriplacer dans l'étuve


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Recommencer ces étapes pour chaque milieu testé

Voici la manipulation en image, avec les informations précise pour chaque tests :

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Résultats :

Les boites de pétri sont placées 48h dans une étuve pour développer la flore bactérienne. Après ce laps de temps, on observe le développement des bactéries à la surface de lagélose :

Bactéries dans l'eau Bactéries sur un cheveux Bactéries sur un clavier

Bactéries dans l'air Bactéries sur un portable Bactéries sur des toilettes

Bactéries sur un doigt avant et après nettoyage Bactéries dans la salive Bactéries sur le sol

http://www.hostingpics.net/thumbs/63/80/12/mini_638012clavier.jpghttp://www.hostingpics.net/thumbs/22/25/46/mini_222546P1020416.jpghttp://www.hostingpics.net/thumbs/65/46/36/mini_654636P1020417.jpghttp://www.hostingpics.net/thumbs/63/80/12/mini_638012clavier.jpghttp://www.hostingpics.net/thumbs/65/46/36/mini_654636P1020417.jpghttp://www.hostingpics.net/thumbs/22/25/46/mini_222546P1020416.jpghttp://www.hostingpics.net/thumbs/63/80/12/mini_638012clavier.jpghttp://www.hostingpics.net/thumbs/17/20/13/mini_172013air.jpghttp://www.hostingpics.net/thumbs/50/60/32/mini_506032cheveux.jpghttp://www.hostingpics.net/thumbs/57/17/39/mini_571739P1020460.jpghttp://www.youtube.com/watch?v=wp5QkjHtbyA


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http://www.hostingpics.net/thumbs/97/90/65/mini_979065sol.jpg

Chaque tâche sur la gélose correspond a une bactérie souche déposée au départ et quis'est par la suite développée pour former une colonie. Ainsi, plus il y a de colonies, et plusles bactéries étaient nombreuses au départ.

Plusieurs constats sont possibles :

Toutes les boites de pétri contiennent des bactéries. Ici en exemple, l'air, un cheveu et de la salive.

-On remarque que tout les milieux testés présentent un développement de bactérie. Ainsi, on en déduit que tout les milieux contenaient des bactéries au départ, et par conséquent que les bactéries sont partout (plus d'information dansRepères - les bactéries);

https://sites.google.com/site/tpebacterieantibiotique/annexes/a-bacteriehttp://img15.hostingpics.net/pics/517475Salive.jpghttp://img15.hostingpics.net/pics/506032cheveux.jpghttp://img15.hostingpics.net/pics/172013air.jpghttp://www.hostingpics.net/thumbs/97/90/65/mini_979065sol.jpghttp://www.hostingpics.net/thumbs/51/74/75/mini_517475Salive.jpghttp://www.hostingpics.net/thumbs/65/76/23/mini_657623mainapnettoyage.jpghttp://www.hostingpics.net/thumbs/84/44/41/mini_844441mainavnettoyage.jpg


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On les trouve sur nos cheveux, dans notre salive, et même dans l'air! C'est justement àcause de ces bactéries présentent dans l'air qu'il faut faire attention à l'interprétation desrésultats : en effet, les boites de pétri ont été contaminé par l'objet à tester, mais aussi par l'air. Il faut donc ignorer les colonies de bactéries issues de l'air pour analyser les résultats.Un bon exemple de ce phénomène est la boite de pétri avec le cheveu : On remarque undéveloppement de bactéries autour du cheveu, mais aussi sur le reste de la gélose : cesdernières sont dues au contact de l'air.

Parmi tout les milieux testés, un

est très particulier : c'est l'eau durobinet. En effet, on ne remarquequ'une très petite colonie debactéries à la surface de lagélose. L'absence de bactériesdans l'eau s'explique par desrègles d'hygiène à respecter :L'eau du robinet subi un contrôle

continu pour assurer la sécuritédes foyers qui l'utilisent et réduirele risque d'épidémie dû à unemauvaise qualité de l'eau.(plus de détail dans Lesalternatives au antibiotiques -l'hygiène)

La mise en évidence des bactéries dans l'eau du robinet.En rouge, la seul colonie de bactéries visible à la surface de la gélose.

-Différentes tâches sont visible : elles représentent différents type de bactéries. On lesdifférencie par leur forme, leur couleur, mais on ne peux pas les identifier seulement grâce àça. (ci-dessous) en bleu, des bactéries se développant sous forme de ramification, etressemblant quelque peu à des racines. En mauve, de bactéries jaune/orange translucide.(ci-dessus) En rouge, une colonie ronde issue d'une bactérie d'un jaune vif, peut être unestaphylocoque dorée, facilement reconnaissable par sa couleur jaune, proche de la couleur de l'or. en vert, quelques exemple d'une bactéries très courantes, au vu de la quantitéimportante de ces bactéries sur chaque boites de pétri. On peut supposer que ce sont desbactéries Escherichia Coli, car c'est une des bactéries les plus présente dans notre milieu devie. On peut ainsi affirmer qu'il existe des bactéries différentes, avec sûrement desfonctionnements différents, et par conséquent des antibiotique associé varié, ainsi que leur mode d'action. (plus d'informations dansRepères - les antibiotiques)

https://sites.google.com/site/tpebacterieantibiotique/system/errors/NodeNotFound?suri=wuid:gx:7f529a4662de6d57https://sites.google.com/site/tpebacterieantibiotique/les-alternatives-aux-antibiotiqueshttp://img15.hostingpics.net/pics/482003eau.jpg


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http://img15.hostingpics.net/pics/806258diffrentesbactries.jpghttp://img15.hostingpics.net/pics/980938diffrentesbactries1.jpg


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-Sur le schéma ci-dessus, les zones entourées en rouge sont les zones touchées par ledoigt. Autour de l'empreinte, un développement bactérien est visible; Pourtant, aucun objet

n'a touché ces zones. Ainsi, seul l'air a pu contaminer la gélose. Il ne faut donc pas tenir compte de ces zones et ne s'intéresser qu'aux zones touchées par le doigt pour analyser les

résultats. On remarque qu'après un lavage des mains, le nombre de bactéries visible estbien inférieur aux bactéries visibles sur la boite de pétri contenant une emprunte de doigt

avant lavage.

Le nombre de bactéries peut donc être réduit par un entretien de l'hygiène de vie. L'expérience ne permet pas de savoir pourquoi les bactéries sont moins importantes

après un nettoyage des mains. Ont-elles été tuées par l'un des composants de l'eau? Leur développement a-t-il été stoppé? Ou bien sont-elles simplement évacuées avec les eauxusées? Ces questions seront étudiées dans la partie : "Les alternatives aux antibiotiques -l'hygiène"
https://sites.google.com/site/tpebacterieantibiotique/les-alternatives-aux-antibiotiqueshttp://img4.hostingpics.net/pics/621542impactdelhygine.jpg

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