toxicologie expérimentale « calcul de la dl50 · les buts finaux de l’évaluation...
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Toxicologie expérimentale
« calcul de la DL50 »
Pharmacovigilance
MM
AMM
Essais cliniques (homme)
Toxicologie expérimentale (animale)
Essais près-requis Essais post-requis
Pharmacologie expérimentale (animale)
Etudes physico-chimiques
2
Essais pré-requis
Essais de Mutagenèse Administration unique
Toxicité aigue
Administration réitérée à court terme
Toxicité sub-aigue
Essais post – requis
+
Administration réitérée à long terme
Toxicité chronique
Essais de
cancérogenèse Essais de tératogenèse
Les buts finaux de l’évaluation expérimentale de
la toxicité globale:
la DMT.
les organes, les tissus et les cellules cibles.
Déterminer les fonctions physiologiques altérées.
les risques d’altération génétique et de
cancérogénèse.
les risques de
malformation
congénitale.
Essais de toxicité par
administration unique
TOXICITE AIGUE
Évaluation qualitative et quantitative des
phénomènes toxiques.
Évolution dans le temps.
Dose unique .
symptômes
temps d’apparition
qualitative quantitative
Dose / mort
DMM
DL50
Dose minimale mortelle DMM
Dose minimale / Mort / animal
IV lente et continue (perfusion)
arrêt cardiaque = DMM
But : choix les doses / DL50
Détermination de la dose létale 50 /
DL50 :
Estimation statistique d’une dose unique
capable de tuer la moitié des animaux.
doses croissantes
pourcentage de mortalité 0 et 100%.
Définition
Protocole expérimental
2 espèces de mammifères
Rongeurs (rat et souris) +++
Non rongeur (chien+++)
thérapeutique humaine biodisponibilité absolue
( IV parfois IP)
deux voies
animaux
voies d’administrations
6 doses et +
Rapport / doses successives : 1.2 et 1.5
10 à 20 animaux / lot
Homogènes +++
élevage, espèce, souche, sexe, âge et poids.
Lot témoin : véhicule
Doses administrées
Constitution des lots
14 jours
Heure de la mort
Nombre de morts
Symptômes
Autopsie +++ ( morts et survivants )
examen macroscopique des viscères
examen histopathologique
durée d’observation
Examens
1 . Méthode de Karber et Behrens :
DL50: dose létale 50
DL100 : dose létale 100
a : différence entre deux doses successives.
b : moyenne de mort entre deux doses successives .
n : nombre moyen d’animaux par lot
DL50 = DL100 - (∑ab / n)
Évaluation Relation doses / effets
Calcul de la DL50 :
Probits
Log
dose
Log (dl50)
84
16
2. Méthode de Miller et Tainer : méthode graphique (papier log – probit)
50
Méthode graphique
Pour utiliser les pourcentages 0 et 100 % dont les
probits tendent vers l’infini, ceux-ci sont remplacés par
des valeurs corrigées. :
correction de 0% Y0 = 50 / n
correction du 100% : Y100 = (100n – 50) / n
n est le nombre d’animaux utilisés dans chacun de ces
lots
Résultats:
L’écart type S
S= (DL84% - DL16 %) / 2
L’écart à la moyenne δ :
δ = 2S / √2 n’
n’ : est le nombre total d’animaux dans les lots ayant
donnés des pourcentages de mortalité entre 7% et 93% .
Résultat :
Exprimé en poids du produit (mg) par Kg de poids de
l’animal
DL50= DL50 graphique ± δ écart à la moyenne
Exploitation des résultats :
Évaluation quantitative / dose létale
Nature / effets toxiques aigus
Organes cibles
Signes cliniques / surdosage aigu chez
l’homme
Préparer les protocoles de toxicité par
administration réitérée
Index thérapeutique
Index thérapeutique IT
Marge
De
Sécurité
Zone
thérapeutique
Zone
Toxique
DE50 DL50
50 %
Log
dose
%
Rapport
IT = DL50 / DE50
faible
Toxiques +++
moyen
large
Toxicité
Faible
IT
Molécule
abandonnée
Post- requis
Essais cliniques
Résultats
Pré - requis
Faible
Acceptable Toxicité +++
Merci de votre attention