Spectrophotométrie

Par: A. SIDI MOUSSA

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Département de physique Département de physique

L’absorption de la lumière

• C’est le phénomène par lequel l’énergie d’un photon, est prise par une autre particule.

• Cette énergie absorbée peut par la suite être retransformée en énergie électromagnétique l’émission de photon(s).

Spectrophotométrie

• La spectrophotométrie est une méthode analytique quantitative qui mesure l’absorbance d’une substance chimique donnée.

• Un spectrophotomètre est un appareil qui permet de mesurer l'absorbance d'une solution homogène à une longueur d'onde donnée.

Loi de Beer-Lambert

• C’est une relation empirique reliant l’absorption de la lumière aux propriétés des milieux qu’elle traverse. I(λ,x) = I0λ e-α x

Avec:I0 λ: intensité initiale

α : coefficient d’absorption x : longueur de trajet optique

L’absorbance

• La loi de Beer-Lambert peut s’exprimer aussi sous la forme:

I(λ,x) = I0λ e-ε C L ou Aλ = - Log( )= ε C L Aλ,T= ε C L : La transmittance (T) de la solution.Aλ : l’absorbance.ε : coefficient d’absorption molaire (L.mol-1.cm-1)C : concentration (mol/L ou g/cm3)L : longueur de trajet optique (cm ou m)

I(λ,x)I0λ

I(λ,x)I0λ

L’absorbance

• L’absorbance mesure la capacité d’un milieu à absorber la lumière qui le traverse.

• L’absorption molaire ε en fonction de λ, T, et C. on peut calculer ε a partir de la perte d’intensité I a travers une épaisseur L.

LC

A

.

Applications

• Détermination d’une concentration inconnue.• Suivi de la cinétique d’une réaction chimique.• Colorimétrie.• Oxymétrie.

Manipulation

• SPID-HR

• Jenway

Visible

Visible + UV

Manipulation avec SPID-HR

Manipulation avec SPID-HR

Manipulation avec Jenway

Manipulation avec Jenway

Absorbance

Transmittance

Longueur d’onde

Etalonnage