recueil des rÉsumÉs
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LES JOURNÉES SCIENTIFIQUES NATIONALES SUR LES ENZYMES À APPLICATIONS
BIOTECHNOLOGIQUES EN ALGÉRIE
21 – 22 Décembre 2020
ENSB – CONSTANTINE
RECUEIL DES RÉSUMÉS
Ministère de l'Enseignement Supérieure de la Recherche ScientifiqueÉcole Nationale Supérieure de Biotechnologie
COMITÉS
Prés ident s
Président d’honneur : Pr. KHELIFI Douadi Directeur de l’ENSB
Présidente des JSNEABA’20 : Dr. BENLOUNISSI Aïcha (MCA/ ENSB) Président du comité Scientifique: Pr. KHELIFI Douadi (Pr/ ENSB)
Président du Comité d’organisation : Dr. MARIR Rafik (MCA/ ENSB)
Comi té d’organi sat ion
AMOURACHE Mounia
BENDAHMANE Ines
BENKARA Houssem
BENLOUNISSI Aïcha
BOUTEBBA Souheila
GUEMMOUR Billel
MARIR Rafik
MEROUANE Fateh
(MAB/ ENSB Constantine)
(ENSB Constantine)
(ENSB Constantine)
(MCA/ ENSB Constantine)
(MCB/ ENSB Constantine)
(Doctorant/ ENSB Constantine)
(MCA/ ENSB Constantine
(MCB/ ENSB Constantine)
Comi té sc ient i f ique
ALYANE Mohamed
BECHKRI Sakina
BELLIL Ines
BENLOUNISSI Aïcha
CHEKROUD Zohra
FEZOUANE Fatiha
KHELIFI Douadi
MARIR Rafik
RHOUATI Amina
SLIMANI Souheila
(MCA/ ENSB Constantine)
(MCA/ ATRBSA)
(MCA/ UFM Constantine)
(MCA/ ENSB Constantine)
(MCA/ Université 20/08/1955 Skikda)
(Pr/ Université de Boumerdes)
(Pr/ ENSB Constantine)
(MCA/ ENSB Constantine)
(MCA/ ENSB Constantine)
(MCA/ Université 20/08/1955 Skikda)
PROGRAMME
Lundi 21 décembre
8.30 Ouverture des journées et mot de bienvenue.
9.00 Plénière P1 GAGAOUA MohammedEnzymes recovery by Three Phase Partitioning: a focus on proteases as milk-clotting and meat tenderizing agents.
9.30 Session Orale 1 Les protéases en agroalimentaire Session Poster 1
•CO1.1 DERARDJA A. Inhibition of apricot polyphenol oxidase by combinations of plant proteases andascorbic acid.
•CO1.2 BENSMAIL S. Production d’une protéase coagulant le lait par Rhizopus stolonifer DIV16/2095-2048-1via SSF : Optimisation par les plans d’expériences.
•CO1.3 BOUMEDIENE F. Purification et caractérisation d’une protéase d’origine microbienne (Mucorcircinelloides SF15) et évaluation des propriétés rhéologiques d’un fromage fondu.
•CP1.1 RAHMANI A.
•CP1.2 KAHLOUCHE A.
•CP1.3 BOUKEROUI Y.
•CP1.4 GHEDJEMIS A.
•CP1.5 MEZIANE N.
•CP1.6 ZATER Z. Y.
•CP1.7 CHENNI F-Z.
10.00
10.30
11.00
11.30 Session Orale 2 De la biotechnologie des enzymes à l’agroalimentaire Session Poster 2
•CO2.1 BOURAS B. Optimisation des conditions de coagulation enzymatique du lait de chèvre avec laprésure caprine par la méthode des surfaces de réponse.
•CO2.2 AIT KAKI A. Production et caractérisation d’α-amylase fongique : Essai d’application en panification.
•CO2.3 DAKHMOUCHE-DJEKRIF S. Etude de la production et la caractérisation d’α-amylase de
Clavispora lustaniae et Pichia guilliermondii isolés de blé des zones arides. •CO2.4 DENDOUGA W. Degradation of Fusarium cell walls by lytic enzymes of potential biocontrol
Trichoderma isolates.
•CP2.1 TAIBI H.
•CP2.2 BACHTARZI N.
•CP2.3 CHEMLAL R.
•CP2.4 HERIZI A.
•CP2.5 KERMANI I.
•CP2.6 ALLOUCHE L.
•CP2.7 KHELALEF H.
12.00
12.30
13.00
13.30
14.00 Session Orale 3 Les enzymes et leur impact environnemental Session Poster 3 •CO3.1 BOUCHERBA N. Rétrospectives des travaux du laboratoire de Microbiologie Appliquée sur les
endoxylanases bactériennes (2005-2020). •CO3.2 BELLEBCIR A. Extraction et purification partielle d’une cellulase d’origine microbienne sur un déchet
de type papier. •CO3.3 JAOUADI B. Les enzymes microbiennes, outils clés de la biotechnologie industrielle et
environnementale : Cas des hydrolases et oxidoréductases. •CO3.4 AZZOUZ Z. Bioconversion of the lignocellulosic biomass residues and biotechnological production of
fungal xylanase in solid-state fermentation. •CO3.5 SAOUDI B. Isolement, purification et caractérisation d’une pectate Lyase thermostable et
alkalophile chez une espèce d’actinomycète thermophile, Actinomadura keratinilytica CPt20…
•CP3.1 BOUFERCHA O.
•CP3.2 BOUTANA W.
•CP3.3 BENAOUAD S.
•CP3.4 LASSOUANE F.
•CP3.5 KERNANI R.
•CP3.6 CHEMLAL R.
14.30
15.00
15.30
PROGRAMME
Mardi 22 décembre
9.00 Plénière P2 DJEGHADER Ahmed Structural biology as a tool to understand and improve enzymes activity.
9.30 Session Orale 4 Vers l’analyse et l’étude des enzymes Session Poster 4
•CO4.1 ALALLA A. Dédoublement cinétique enzymatique des beta-aminoalcools : Acylation et hydrolyse
en milieu organique.
•CO4.2 ALLALA F. Etude de l’α-amylase TfAmy48 pour une application en détergence.
•CO4.3 DJOULLAH A. Transglutaminase et ses applications en microencapsulation.
•CP4.1 BENHOULA M.
•CP4.2 CHAIB I.
•CP4.3 CHERGUI A.
•CP4.4 MANSOURI N.
•CP4.5 MAIBECHE R.
•CP4.6 BENAMEUR Q.
•CP4.7 BENNAMOUN L.
•CP4.8 BOUCHERIT H.
10.00
10.30
11.00
11.30 Session Orale 5 Des microorganismes particuliers pour des enzymes d’exception Session Poster 5
•CO5.1 BENMEBAREK H. Essai de production et dosage de l’activité enzymatique de souches
bactériennes et archéennes halophiles protéolytiques isolées d’environnements hypersalins algériens. •CO5.2 KHEMILI-TALBI S. Caractérisation de lipase, d’α-amylase et de dioxygénases halothermophiles à
partir de deux archées halophiles extrêmes pour des applications industrielles prometteuses. •CO5.3 BOUCHERIT Z. Production of laccase by a halotolerant Penicillium on Olive Pomace under SSF.
•CO5.4 HAMMA S. Caractérisation des potentialités kératinolytiques d’une souche actinomycète isolée
dans la région de Bejaïa.
•CP5.1 HARIR M.
•CP5.2 BENAISSA A.
•CP5.3 SAOUDI B.
•CP5.4 AGUIS H.
•CP5.5 BENHAMICHE H.
•CP5.6 LENCHI N.
•CP5.7 RACHEDI K.
•CP5.8 LEFAIDA C.
12.00
12.30
13.00
13.30
14.00 Session Orale 6 Les enzymes en biotechnologie et santé Session Poster 6
•CO6.1 MEBIROUK R. Probable antitumor activity of serine protease from Helix aspersa Algerian snail.
•CO6.2 ZERIZER H. Étude comparative d’enzymes à activité coagulante de deux souchesd’actinobactéries autochtones.
•CO6.3 MOSBAH A. La xanthine oxydoréductase comme outil promoteur pour le diagnostic despathologies hépatiques.
•CO6.4 BOUICHE C. Activité antioxydante de glucuronoxylanes (UXOS) et arabinoxylanes (AXOS) produitsd’hydrolyse d’endoxylanases de Bacillus safensis CBLMA18.
•CO6.5 HAMOUDI M. Activité anticholinesterase In vitro d’Ephedra nebrodensis contre AchE et BchE.
•CP6.1 LABBANI F-Z. K.
•CP6.2 MERIBAI A.
•CP6.3 MEDJAHED Z.
•CP6.4 KIHELI H.
•CP6.5 ZEGHIR R.
•CP6.6 SAOUD S.
•CP6.7 BENSLAMA O.
•CP6.8 KADI-SACI A.
14.30
15.00
15.30
16.00 Clôture des journées et désignation de la meilleure présentation.
MODÉRATION DES SESSIONS
Lundi 21 décembre
8.30 Ouverture des journées et mot de bienvenue. KHELIFI D. Président d’honneur des JSNEABA’20
BENLOUNISSI A. Présidente des JSNEABA’20 9.00
Plénière P1 BENLOUNISSI A. Membre du comité d’organisation MEROUANE F. Membre du comité d’organisation RHOUATI A. Membre du comité scientifique
9.30 Session Orale 1 Les protéases en agroalimentaire Session Poster 1
BENLOUNISSI A. Membre du comité d’organisation
MEROUANE F. Membre du comité d’organisation
BECHKRI S. Membre du comité scientifique
MARIR R. Membre du comité d’organisation
BELLIL I. Membre du comité scientifique
10.00
10.30
11.00
11.30 Session Orale 2 De la biotechnologie des enzymes à l’agroalimentaire Session Poster 2
BOUTEBA S. Membre du comité d’organisation
MARIR R. Membre du comité d’organisation
BELLIL I. Membre du comité scientifique
MEROUANE F. Membre du comité d’organisation
BECHKRI S. Membre du comité scientifique
12.00
12.30
13.00
13.30
14.00 Session Orale 3 Les enzymes et leur impact environnemental Session Poster 3
AMOURACHE M. Membre du comité d’organisation
GUEMMOUR B. Membre du comité d’organisation
BENLOUNISSI A. Membre du comité scientifique
BOUTEBA S. Membre du comité d’organisation
RHOUATI A. Membre du comité scientifique
14.30
15.00
15.30
MODÉRATION DES SESSIONS
Mardi 22 décembre
9.00
Plénière P2 BOUTEBA S. Membre du comité d’organisation MARIR R. Membre du comité d’organisation ALYANE M. Membre du comité scientifique
9.30 Session Orale 4 Vers l’analyse et l’étude des enzymes Session Poster 4
BOUTEBA S. Membre du comité d’organisation
MARIR R. Membre du comité d’organisation
ALYANE M. Membre du comité scientifique
AMOURACHE M. Membre du comité d’organisation
BENLOUNISSI A. Membre du comité scientifique
10.00
10.30
11.00
11.30 Session Orale 5 Des microorganismes particuliers pour des enzymes d’exception Session Poster 5
GUEMMOUR B. Membre du comité d’organisation
AMOURACHE M. Membre du comité d’organisation
MARIR R. Membre du comité scientifique
BENLOUNISSI A. Membre du comité d’organisation
ALYANE M. Membre du comité scientifique
12.00
12.30
13.00
13.30
14.00 Session Orale 6 Les enzymes en biotechnologie et santé Session Poster 6
MEROUANE F. Membre du comité d’organisation
BENLOUNISSI A. Membre du comité d’organisation
RHOUATI A. Membre du comité scientifique
GUEMMOUR B. Membre du comité d’organisation
MARIR R. Membre du comité scientifique
14.30
15.00
15.30
16.00 Clôture des journées + Désignation de la meilleure présentation
KHELIFI D. Président du comité scientifique des JSNEABA’20 BENLOUNISSI A. Présidente des JSNEABA’20 MARIR R. Président du comité d’organisation des JSNEABA’20
SOMMAIRE
Conférences plénières
P1. Enzymes recovery by Three Phase Partitioning: a focus on proteases as milk-
clotting and meat tenderizing agents
GAGAOUA Mohammed .........................................................................................................1
P2. Structural biology as a tool to understand and improve enzymes activity
DJEGHADER Ahmed ..............................................................................................................2
Communications orales
CO1.1 Inhibition of apricot polyphenol oxidase by combinations of plant proteases
and ascorbic acid
DERARDJA Ala eddine#, BARKAT Malika, ROMPEL Annette ............................................3
CO1.2 Production d’une protéase coagulant le lait par Rhizopus stolonifer DIV16/2095-
2048-1 via SSF: Optimisation par les plans d’expériences
BENSMAIL Souhila#, FAZOUANE-NAIMI Fethia .....................................................................4
CO1.3 Purification et caractérisation d’une protéase d’origine microbienne (Mucor
circinelloides SF15) et évaluation des propriétés rhéologiques d’un fromage
fondu.
BOUMEDIENE Farida#, KAHLOUCHE Amel ...........................................................................5
CO2.1 Optimisation des conditions de coagulation enzymatique du lait de chèvre
avec la présure caprine par la méthode des surfaces de réponse
BOURAS Biya#, Ouarda AISSAOUI ZITOUN , BOUBRIK Fairouz, BENYAHIA Ferial Aziza .....6
CO2.2 Production et caractérisation d’α-amylase fongique : Essai d’application en
panification
AIT KAKI Amel#, BENNAMOUN L., DJEKRIF DAKHMOUCHE S., LABANI FZ K., EL- HADEF
EL-OKKI M., & MERAIHI Z. ........................................................................................................7
CO2.3 Étude de la production et la caractérisation d’α-amylase de Clavispora
lustaniae et Pichia guilliermondii isolés de blé des zones arides.
DAKHMOUCHE-DJEKRIF Scheherazed #, AIT KAKI- EL HADEF ELOKKI Amel ,
BENNAMOUN Leila , LABBANI Fatima Zohra Kenza, CHAIB Ibtissem et NOUADRI Tahar.
..................................................................................................................................................8
CO2.4 Degradation of Fusarium cell walls by lytic enzymes of potential biocontrol
Trichoderma isolates
DENDOUGA Wassila#, GHEDJEMIS Amina , BOUREGHDA Houda ...................................9
CO3.1 Rétrospectives des travaux du laboratoire de Microbiologie Appliquée sur les
endoxylanases bactériennes (2005-2020)
BOUCHERBA Nawel#, BOUICHE Celia, HEBAL Hakim, BETTACHE Azzeddine, AZZOUZ
Zahra, BOUANANE-DARENFED Amel, BOUACEM Khelifa, JAOUADI Bassem. SUSANA V.
Valenzuella, COPINET Estelle , DUCHIRON Francis ...........................................................10
CO3.2 Extraction et purification partielle d’une cellulase d’origine microbienne sur un
déchet de type papier
BELLEBCIR Anfal#, BENAYED Rofida, BENLOUNISSI Aicha .................................................11
CO3.3 Les enzymes microbiennes, outils clés de la biotechnologie industrielle et
environnementale: Cas des hydrolases et oxidoréductases
JAOUADI Bassem#, MECHRI Sondes, ZARAI JAOUADI Nadia, BOUACEM Khelifa ,
ALLALA Fawzi , HACENE Hocine , BOUANANE-DARENFED Amel & ABDELMALEK Badis
................................................................................................................................................12
CO3.4 Bioconversion of the lignocellulosic biomass residues and biotechnological
production of fungal xylanase in solid-state fermentation
AZZOUZ Zahra#, BETTACHE Azzeddine , BOUICHE Celia, MAIBECHE Rima, HAMMA
Samir, AMGHAR Zahir, BEN HOULA Mohammed, ALIANE Wahiba, BOUCHERBA Nawel
, BENALLAOUA Said .............................................................................................................13
CO3.5 Isolement, purification et caractérisation d’une pectate Lyase thermostable et
alkalophile chez une espèce d’actinomycète thermophile, Actinomadura
keratinilytica CPt20, isolée du compost de poulet (région Annaba).
SAOUDI Boudjema#, HABERRA Soumaya, KEROUAZ Bilal , HABBECHE Amina, AYARI
Adel, BEN ROMDHANE ZAMEN, BELGHITH Hafedh, GARGOURI Ali, LADJAMA Ali ........14
CO4.1 Dédoublement cinétique enzymatique des 𝜷-aminoalcools : Acylation et
hydrolyse en milieu organique
ALALLA Affef#, MERABET-KHELASSI M., ARIBI-ZOUIOUECHE L., RIANT O. .........................15
CO4.2 Étude de l’α-amylase TfAmy48 pour une application en détergence
ALLALA Fawzi#, BOUACEM Khelifa#, JAOUADI Bassem et BOUANANE-DARENFED
Amel. ......................................................................................................................................16
CO4.3 Transglutaminase and its applications in microencapsulation
DJOULLAH Attaf# .................................................................................................................17
CO5.1 Essai de production et dosage de l’activité enzymatique de souches
bactériennes et archéennes halophiles protéolytiques isolées
d’environnements hypersalins algériens
BENMEBAREK Hania#,KHARROUB Karima ..........................................................................18
CO5.2 Caractérisation de lipase, d’α-amylase et de dioxygénases halothermophiles
à partir de deux archées halophiles extrêmes pour des applications
industrielles prometteuses
KHEMILI-TALBI Souad#, AKMOUSSI-TOUMI Siham, KEBBOUCHE-GANA Salima, LENCHI-
IZOUINE nesrine, FERRIOUNE Imen, SAYAH Amna, ALOUACHE Lamia, SADAOUI-
SMADHI Nesrine, NAJJARI Affef ..........................................................................................19
CO5.3 Production of laccase by a halotolerant Penicillium on Olive Pomace under
Solid State Fermentation
BOUCHERIT Zeyneb#, MECHAKRA Aicha , AMEDAH Souad ...........................................20
CO5.4 Caractérisation des potentialités kératinolytiques d’une souche actinomycète
isolée dans la région de Bejaïa
HAMMA Samir#, BENHOULA Mohammed, BETTACHE Azzeddine, JAOUADI Bassem, BOUCHERBA Nawel ..............................................................................................................21
CO6.1 Probable antitumor activity of serine protease from Helix aspersa Algerian snail
MEBIROUK Romeila#, NAIMI Dalila, AZARKAN Mohamed ...............................................22
CO6.2 Étude comparative d’enzymes à activité coagulante de deux souches
d’actinobactéries autochtones
ZERIZER Habiba#, BOUGHACHICHE Faiza., RACHEDI Kounouz. ......................................23
CO6.3 La xanthine oxydoréductase comme outil prometteur pour le diagnostic des
pathologies hépatiques
MOSBAH Asma#, KHITHER Hanane, MOSBAH Camélia, BENBOUT Amel .......................24
CO6.4 Activité antioxydante de glucuronoxylanes (UXOS) et arabinoxylanes (AXOS)
produits d’hydrolyse d’endoxylanases de Bacillus safensis CBLMA18
BOUICHE Cilia#, SUSANA V.Valenzuela, JAVIER PASTOR F.I, BETTACHE Azzeddine,
MAIBECHE Rima, AZZOUZ Zahra , HAMA Samir, BENHOULA Mohammed,
BENALLAOUA Said, BOUCHERBA Nawel ............................................................................25
CO6.5 Activité anticholinesterase in vitro d’Ephedra nebrodensis contre AchE et BchE.
HAMOUDI Meriem#, AMROUN Djouher, BENSOUICI Chawki , KHENNOUF Seddik,
DAHAMNA Saliha .................................................................................................................26
Communications par affiche
CP1.1 Recherche des enzymes « bêta-lactamases à spectre élargi » et d’autres
molécules bioactives d’origine microbienne.
RAHMANI Amina#, MERADI Larem, ARHAB Rabah ..........................................................27
CP1.2 Extraction et caractérisation biochimique d’une enzyme coagulant le lait issu
de la caillette de Chevreau. Essai de fabrication d’un fromage frais à base de
lait de chèvre.
KAHLOUCHE amal#, BOUMEDIENE Farida, NOUANI Abdelouahab ...............................28
CP1.3 Application d’enzymes d’intérêt biotechnologique produites par des
microorganismes
BOUKEROUI Yasmina#, AISSAOUI Nadia, KLOUCHE KHELIL Nihel ...................................29
CP1.4 Production d’enzyme fongique coagulante le lait sur un milieu à base de sous-
produit agroalimentaire (peau de tomate)
GHEDJEMIS Amina#, DENDOUGA Wassila .........................................................................30
CP1.5 Criblage de microorganismes producteurs de lipases
MEZIANE Nassim#, MEDJMEDJ Ayoub, OUSAADI Mouna Imene ....................................31
CP1.6 Pouvoir des Protéases Bactériennes à libérer des Peptides Antioxydants par
Caséinolyse
ZATER Zohra Yasmine# , ROUDJ Salima ..............................................................................32
CP1.7 The Effect of Viscozyme-Cellulast Mixture on Oil Extraction Yield
CHENNI Fatima Zohra#, HAMENNI Kahina, KUHNLE Gunter G C ....................................33
CP2.1 A comparison between acid and enzymatic hydrolysis of corn starch for
glucose syrups production
TAIBI Hoiria#, BOUDRIES Nadia , ABDELHAI Moufida and LOUNICI Hakim ...................34
CP2.2 Mise en évidence d’activités enzymatiques à intérêt technologique chez
quelques souches de bactéries lactiques.
BACHTARZI Nadia#, MERADJI Meriem, LEKSIR Dalal, KHARROUB Karima. .....................35
CP2.3 Production et purification des coagulases de Bacillus subtilis S3 et Bacillus
coagulans LC28.2.
CHEMLAL Radia#, DJERDJOURI Bahia , BELLAL Mohand Mouloud ...............................36
CP2.4 Optimization and Immobilization of alpha-amylase from Bacillus Subtilis in
calcium alginate and calcium Alginate –cellulosic residue beads.
HERIZI Abdallah#, SOUILAH Rachid , DJABALI Djaffar , NADJEMI Boubekeur ...............37
CP2.5 Suillus granulatus, un champignon comestible riche en enzymes capables de
dégrader les margines, sous-produits de l’industrie oléicole.
KERMANI Ismahan#, FORTAS Zohra, DIB Soulef .................................................................38
CP2.6 Effet de l’addition des enzymes exogènes dans un régime hypocalorique de
poulets de chair sur les performances et les caractéristiques de la viande
ALLOUCHE L.#, MADANI T., AIT HAMOUDA Z .....................................................................39
CP2.7 Valorisation biotechnologique des sous-produits de l’olivier « Margine» par
fermentation submergée
KHELALEF Hind# et BENLOUNISSI Aicha ..............................................................................40
CP3.1 Étude de quelques aptitudes enzymatiques des actinobactéries isolées à
partir des stations d’épuration des eaux usées
BOUFERCHA Oumeima#, BOUDEMAGH Allaoueddine ...................................................41
CP3.2 Mise en évidence des enzymes protéolytiques d’actinobactéries isolées de
compost
BOUTANA Wissem#, ZERIZER Habiba, KHARROUB Karima ................................................42
CP3.3 Isolation of cellulase producing bacteria using spent coffee grounds as sole
carbon source: potential application in lignocellulose saccharification for
bioethanol production
BENAOUAD Sara#, MERAINI Ibtissem, CHOUBANE Slimane .............................................43
CP3.4 Removal of BPA in aqueous solution by immobilized laccase
LASSOUANE Fatiha#, AIT AMAR Hamid , RODRIGUEZ-COUTO Susana ...........................44
CP3.5 Performance of Commercial Enzymatic Preparation in Lignocellulosic Biomass
Hydrolysis
KERNANI Ridha#, HADIOUCHE Dalila ..................................................................................45
CP3.6 Valorisation des déchets végétaux pour la production de cellulases à partir
d’Aspergillus sp. (PRn) isolé localement.
CHEMLAL Radia#, KHERAT Mohamed , BOUKAF Fatma, MOKHNACHE Meriem, STIHI
Loubna Zakia, MAMERI Nabil .............................................................................................46
CP4.1 Isolement et screening des bactéries lipolytiques
BENHOULA Mohammed#, HAMMA Samir, BENSAAD Mohamed Sabri ,AMGHAR
Zahir , BOUDJELAL Aya, AZZOUZ Zahra ,MAIBECHE Rima, BOUICHE Celia, BETTACHE
Azzeddine,BENALLAOUA Said, BOUCHERBA Nawel .......................................................47
CP4.2 Étude de la bioprospection de levures : criblage des activités enzymatiques
d'intérêt biotechnologique.
CHAIB Ibtissem#, DAKHMOUCHE-DJEKRIF Scheherazed , BENNAMOUN Leila , AIT KAKI-
EL HADEF ELOKKI Amel , LABBANI Fatima Zohra Kenza et NOUADRI Tahar. ................48
CP4.3 Optimization of Extracellular L-asparaginase production by Streptomyces
strain isolated in Algeria, using mathematical Modeling.
CHERGUI Achour#, TITOUCHE Yacine, HOUALI Karim ......................................................49
CP4.4 Optimisation de la production de l’enzyme protéase d’origine actinomycétale
MANSOURI Nedjwa#,BENSLAMA Ouide , ARHAB Rabah ................................................50
CP4.5 Optimisation de la production de peroxydase des souches d’actinomycètes
isolées au niveau de la wilaya de Béjaia
MAIBECHE Rima#, LE ROES-HILL Marilize, BENDJEDDOU Kamel, PRINS Alaric, BOUICHE
Cilia , AZZOUZ Zahra, HAMMA Samir, BEN HOULA Mohammed, AMGHAR Zahir,
BETTACHE Azzeddine, BENALLAOUA Said, BOUCHERBA Nawel .....................................51
CP4.6 Application of Pulsed field gel electrophoresis using XbaI restriction enzyme to
study clonal relatedness of Multidrug-resistant E. coli isolates
BENAMEUR Qada#, BEN-MAHDI Meriem-Hind , GERVASI Teresa ....................................52
CP4.7 Optimisation de la production de la polygalacturonase à intérêt industriel par
la levure Aureobasidium pullulans isolée de sol aride saharien (El-M’gheir).
BENNAMOUN L. #, DAKHMOUCHE S. , AIT-KAKI A. , LABBANI F-Z K. , NOUADRI T. ........53
CP4.8 Recherche in silico de nouveaux inhibiteurs de la 1-désoxy-D-xylulose 5-
phosphate réducto-isomérase (DXR) : des agents antimycobactériens
potentiels
BOUCHERIT Hanane# , MERZOUG Amina , CHIKHI Abdelouahab, BENSEGUENI
Abderrahmane, MOSBAH Asma ........................................................................................54
CP5.1 Isolation and characterization of a novel tyrosinase produced by Saharan soil actinobacteria
HARIR Mohammed#, BENHAMED Nadjia, DIB Soulef , POGNI Rebecca................................................................................................................................................55
CP5.2 Isolation and characterization of bacteria of the genera Pseudomonas and
Bacillus with enzymatic potential from a volcanic soil of Ahaggar.
BENAISSA Asmaa#, OUANKILLA Aicha, BEN BESSIS El-Hadja, HABIBI Zaineb ..................56
CP5.3 Isolement et étude biochimique des enzymes amylolytiques chez des souches
d'actinomycètes telluriques isolées à partir de la région de Souk Ahras
SAOUDI Boudjema#, HABERRA Soumaya, AYARI Adel, LADJAMA Ali ..........................57
CP5.4 Recherche de l’activité antibactérienne et enzymatique chez des isolats
d’Actinomycètes isolées à partir d’écosystème extrême d’El Bayadh
AGUIS Hayat#, BENREGUIEG Mokhtar ................................................................................58
CP5.5 Activité protéolytique des actinomycètes de l’extrême
BENHAMICHE Houria#, ZERIZER Habiba, .............................................................................59
CP5.6 Screening de lacoagulase chez des bactéries isolées d’un lac salé Algerien
LENCHI Nesrine#, KEBBOUCHE-GANA Salima , KHEMILI-TALBI Souad , AKMOUSSI-TOUMI
Sihem ....................................................................................................................................60
CP5.7 Production, activité et stabilité de protéases synthétisées par une souche
thermotolérante d’actinobactérie.
RACHEDI Kounouz #, MERADJI Meriem, MAHDJOUB Nour El Houda, ZERIZER Habiba,
BOUGHACHICHE Faiza, KHARROUB Karima ......................................................................61
CP5.8 Actinobactéries thermophiles isolées à partir d’une eau thermale Algérienne :
une source d’alpha amylase thermostable
LEFAIDA Cherifa#, MEDJMEDJ Maya, BOUDEMAGH Allaoueddine ..............................62
CP6.1 Isolement, Screening et caractérisation de levures productrices d’enzymes à intérêt biotechnologique
LABBANI Fatima-Zohra Kenza#, DAKHMOUCHE Schehrazed, BENNAMOUN Leila, AIT-KAKI Amel, NOUADRI Taher ...............................................................................................63
CP6.2 Highlighting of cellulolytic, saccharolytic, pectinolytic activity and scereening
of antibio-resistants prokaryotic species involved in soft rots of vegetables,
collected from different arid areas in the North-eastern of Algeria. Preliminary
study
MERIBAI Abdelmalek# , DIAFAT Abdelouaha, BACHENE Abderahmane ...................64
CP6.3 Inhibition de l’activité de la xanthine oxydase par les extraits de feuilles et de
l’écorce de Fraxinus angustifolia
MEDJAHED Zineb#, ATMANI –KILANI Dina, ATMANI djebbar ...........................................65
CP6.4 Cc-PDE,new purified phosphodiesterase enzyme from snake venom with
biotechnological impact
KIHELI Hamida#, CHERIFI Fatah , LARABA-DJEBARI Fatima ..............................................66
CP6.5 Rôle potentiel des inhibiteurs de protéases d’Echinococcus granulosus dans
l’action anticancéreuse: apport de l’analyse protéomique
ZEGHIR-BOUTELDJA Razika#, TOUIL-BOUKOFFA Chafia ...................................................67
CP6.6 Cc-5’NTase a promising alternative biomolecule in CD73 lack-related
immunodeficiency
SAOUD Samah#, CHERIFI Fatah, LARABA-DJEBARI Fatima ..............................................68
CP6.7 Étude de l’activité enzymatique bioinsecticide de souches
d’actinomycètes isolées à partir de différents sols contre le Tribolium
Rouge de la farine (Tribolium castaneum)
BENSLAMA Ouided#, MANSOURI Nadjwa, ARHAB Rabah .............................................69
CP6.8 Anti-platelet aggregation activity of a novel phospholipase A2 an
enzyme purified from Vipera lebetina snake venom: New tool with
biotechnological applications
KADI-SACI Amel# , Laraba-Djebari Fatima..........................................................................70
CONFÉRENCES PLÉNIÈRES
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P1. Enzymes recovery by Three Phase Partitioning: a focus on
proteases as milk-clotting and meat tenderizing agents
GAGAOUA Mohammed
Food Quality and Sensory Science Department, Teagasc Ashtown Food Research
Centre, Ashtown, Dublin 15, Ireland
[email protected] & [email protected]
Abstract
Among the aqueous purification systems, three phase partitioning (TPP) is an
alternative and cost-effective non-chromatography bioseparation
technique used for the extraction, concentration and recovery/purification
of macromolecules, including enzymes, from different biological sources
(microorganisms, plants and animals).This presentation will serve as a one-
stop-reference to give a snapshotabout the studies that used over the last
two decades this very simple and effective method to purify enzymes with
high and acceptable purity from several sources with a specific focus on
plant proteases.In food industries, proteases are frequently used in myriad
production steps including milk-clotting and meat tenderization.Most of the
plant proteases are cysteine proteinases, namely ficin,papain, bromelain,
zingibain and actinidin. Unfortunately, the number of plant proteases which
have been isolated and characterized still very low. In addition, endemic
plant proteases are of great interest due to their activity over a wide range
of temperature and pHs. For centuries, numerous of the plant proteases
have been used as milk coagulants in Algeria. Some of them are widely
used as meat tenderizers like ficin from Mediterranean Ficuscarica latex
which is also used as a milk-clotting enzyme in cheese-making. In this
presentation, I will further give an overview of the potential of TPP system to
recover proteases from some Algerianendemic plants such as the latex from
Ficuscarica, leaves from Calotropisprocera, juice from Cucumismelo,
sarcocarpe from Cucumissativus, flowers from Capparisspinosa, etc.
Keywords: Three Phase Partitioning, Enzymes purification, Proteases,
Endemic plants, Milk-clotting;Artificial meat tenderization.
2
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P2. Structural biology as a tool to understand and improve enzymes
activity
DJEGHADER Ahmed
Department of Chemical Sciences and Bernal Institute, University of Limerick,
Ireland
Abstract
Biotechnological application of enzymes relies mainly on their ability to
catalyse complex chemical reactions. While the size of these biocatalysts
can range from few hundreds to thousands of amino acids, their activities
reside in a central part composed only by a limited number of residues, the
active site. Enzyme’s activity can be tuned to improve the reaction yield by
increasing the turnover. Thus, understanding how enzymes work is a key step
in the development of more efficient biocatalysts. Structural biology plays a
central role in this process, whereby it allows for the understanding of the
role of amino acids involved in catalysis. Here, different structural biology
techniques will be discussed with a main focus on X-ray crystallography. An
overview of how a protein structure can be obtained and interpreted will
be given through the example of the sulfite oxidase from the thermophilic
bacteria Thermus thermophilus. This protein belongs to the family of
molybdoenzymes and is responsible for sulfite detoxification in human and
linked to energy conservation in bacteria. In addition to its sulfite oxidase
activity, this protein seems to be endowed with a nitrite reductase activity,
opening the way for potential biotechnological application. The high
resolution structure of this protein has been obtained in two different states,
a product analogue bound state and a free state. Structural comparison
between the two structures allowed for a better understanding of the
catalytic mechanism, which opens the door for protein variants with
improved turnover to be engineered.
Keywords: Structural biology, X-ray crystallography, sulfite oxidase.
COMMUNICATIONS ORALES
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CO1.1 Inhibition of apricot polyphenol oxidase by combinations of
plant proteases and ascorbic acid
DERARDJA Ala eddine#1, BARKAT Malika#1, ROMPEL Annette *2
# Laboratoire de recherche, Biotechnologie et Qualité des Aliments (BIOQUAL), * Laboratoire de chimie biophysique,1 Institut de la Nutrition, de l'Alimentation et des Technologies Agro-Alimentaires
(INATAA), Université Frères Mentouri Constantine1,2 Institut de chimie biophysique, faculté de chimie, Université de Vienne
Abstract
Enzymatic browning is considered to be one of the biggest problems during
apricot handling, storage, preservation and transformation. The browning is
mainly initiated by polyphenol oxidase (PPO). In this context, the main goal
of this research is to evaluate the potential of some plant protease
preparations as inhibitors of enzymatic browning in apricot by studying their
ability to inactivate PPO. In addition, we were also studying the possibility of
a combination between protease preparations and ascorbic acid (AA),
where AA is mainly used to inhibit PPO during the time needed by the
proteases to completely inactivate PPO. Therefore, we selected four plant
cysteine proteases (papain, calotropain, ficin and bromelain), known for
their high proteolytic activity. The proteases were applied in vitro (on purified
PPO), and in situ (on apricot puree) to evaluate their efficiency as PPO
inhibitors. The selected proteases were able to inactivate PPO at pH 4.5,
with the degree of inactivation proportional to incubation time and
protease concentration. The papain was the most effective protease, with
50 μg completely inactivating PPO in less than one hour. AA prevented
browning reactions that occur before or during PPO inactivation by
protease. The combinations AA/proteases were highly effective in vitro,
where 2 mM AA/500 μg proteases inhibited PPO activity completely over 24
h. The combinations AA/proteases were also effective in vivo, as treated
purees preserved their color compared to untreated samples after 10 days
of storage. The results demonstrate that AA/proteases combinations
constitute a promising practical anti-browning method with feasible
application in the food industry.
Keywords: Enzymatic browning, Polyphenol oxidase, Apricot, Plant
proteases, Ascorbic acid.
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CO1.2 Production d’une protéase coagulant le lait par Rhizopus
stolonifer DIV16/2095-2048-1 via SSF: Optimisation par les plans
d’expériences
BENSMAIL Souhila #1, FAZOUANE-NAIMI Fethia*2
#1Département de Biologie, FSNV-ST, Université Akli Mohand Oulhadj, Bouira,
Algérie. *2Laboratoire de Recherche Technologie Alimentaire (LRTA), Université M’Hamed
Bougara, Boumerdès, Algérie.
[email protected] ; [email protected]
Résumé
Les micro-organismes représentent la principale source de protéases utilisées
actuellement dans les différents processus industriels, en raison de leur croissance
rapide, leurs caractéristiques physiologiques et les rendements élevés en produits
élaborés. La principale application des protéases fongiques à acide aspartique
produites naturellement est dans l'industrie laitière comme agents coagulant le lait
pour la fabrication du fromage.
La production d’une protéase coagulant le lait par la souche locale Rhizopus
stolonifer (Ehrenberg) Vuillemin DIV16/2095-2048-1 a été réalisée sous les conditions
SSF (fermentation sur substrat solide). Avant criblage et optimisation statistique, des
expériences préliminaires ont été conduites afin de sélectionner le substrat et sa
quantité, la solution minérale à ajouter au substrat, les effets de certaines sources
supplémentaires de carbone et d'azote. Par la suite, la conception du Plackett et
Burman à 2 niveaux (PBD) a été appliquée dans le but de fixer les facteurs
améliorant de manière significative la production d'enzyme sous les conditions
expérimentales préalablement déterminées.
Le milieu de production a été préparé en utilisant 5 g du son de blé introduits dans
des Erlenmeyers de 250 mL et humidifiés avec la solution minérale M-9 sous les
conditions statiques. L'analyse statistique de la réponse (activité coagulante) par le
logiciel JMP13 Pro® a révélé que les variations du niveau d'humidité (p=0,0030*) et
du temps d'incubation (p=0,0369*) ainsi que l’addition du (NH4)2SO4 (p=0,0318*) et
le CaCl2 (p=0,0382*) au substrat ont un effet significatif sur la production de la
protéase coagulante. La température d’incubation, le pH de la solution minérale,
la taille d’inoculum et l'ajout de xylose, comme autres facteurs du PBD, n'affectent
pas de manière significative l’activité enzymatique. L'analyse de la variance pour
la réponse indique que le modèle est significatif (R2=98,03%, R2adj=92,78%,
pvalue=0,0175*). La production de la protéase a été multipliée par un facteur de
1,53 en utilisant le plan composite centré (CCD) pour atteindre une valeur de
705,9±34,94 US/mL sur la base des résultats obtenus par le PBD.
Mots-clés: Rhizopus stolonifer, protéases, fermentation, plans d’expériences,
activité coagulante.
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CO1.3 Purification et caractérisation d’une protéase d’origine
microbienne (Mucor circinelloides SF15) et évaluation des
propriétés rhéologiques d’un fromage fondu.
BOUMEDIENE Farida#1, KAHLOUCHE Amel*2
#1 Université Dr.YAHIA Fares de MEDEA2 Ecole supérieure de science de l’aliment et des industries agroalimentaires
Résumé
L'obtention de coagulants naturels du lait constitue un défi, car la
disponibilité de la présure est limitée par rapport à la demande croissante
de l'industrie laitière. Ces dernières années, de très nombreux travaux sont
portés sur les protéases d’origine fongique, qui au plan pilote ont donné très
tôt des résultats souvent comparables et parfois supérieurs à ceux obtenus
avec la présure commerciale. C’est dans ce cadre d’investigation que
nous avons entrepris l’étude de protéase coagulant le lait d’origine
fongique (Mucor circinelloides SF15).
Dans un premier temps, un isolement et une identification par biologie
moléculaire ont été réalisés sur une souche fongique dont la séquence
génomique a été enregistrée au niveau de la base NCBI avec un code de
MH368140. Il s’agit de Mucor circinelloides. Les propriétés biochimiques ont
été mises en évidence sur les fromages fabriqués.
La pâte à fromage préparée dans le but de l’intégrer dans la fabrication du
fromage fondu en remplacement partiel du Cheddar en utilisant différents
coupages entre la présure commerciale et l'extrait pré purifié de Mucor
SF15.
La détermination du comportement rhéologique des fromages confirme
leur texture fondue tartinable. En effet, l’échantillon issu du coupage 60/40
est considéré comme le plus visqueux, autrement dit c’est le fromage le plus
mou et facile à tartiner. Toute fois, l’analyse des courbes de contrainte de
cisaillement obtenues montre que le fromage fabriqué à l’échelle de
laboratoire ne manifeste pas réellement un comportement rhéofluidifiant
contrairement à la mesure de la viscosité.
Mots-clés : présure ; protéase ; Mucor circinelloides SF15 ; fromage fondu à
tartiner; Rhéologie.
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CO2.1
Optimisation des conditions de coagulation enzymatique du lait
de chèvre avec la présure caprine par la méthode des surfaces
de réponse
BOURAS Biya*1,2, Ouarda AISSAOUI ZITOUN 2, BOUBRIK Fairouz3, BENYAHIA
Ferial Aziza2
1Université Echahid Hamma Lakhdar, El Oued
2Laboratoire du Génie Agro-Alimentaire (GENIAAL)1-INATAA, université
Frères Mentouri, Constantine1
Résumé
La coagulation du lait est considérée comme la clé de la réussite de toute
fabrication fromagère. Elle consiste à la formation d’un gel suite à des
modifications physico-chimiques intervenant sur les micelles de caséines. La
qualité du gel lactique obtenu dépend du type d’enzyme et des conditions
de coagulation, dont le pH et la température. L’objectif de ce travail est
l’étude de l’activité de la présure caprine extraite selon le protocole de
Wangoh et al. (1993) et l’optimisation de ses conditions de coagulation
dans le lait de chèvre. Les conditions de coagulation : pH et température
sont optimisées par l’application de la méthode des surfaces de réponses
(plan composite central à deux facteurs). Les résultats d’extraction
montrent que la présure caprine présente une activité coagulante
UP, une force coagulante 1/2531,64 US et une teneur en protéine 01ة1,49±0
8,8±0,2 mg/ml. Concernant l’optimisation, notre étude a montré que le pH
a un effet significatif unique et un effet quadratique positif sur le temps de
floculation du lait de chèvre par contre pour le temps de coagulation nous
avons noté un effet linéaire et quadratique (effet positif).
Mots-clés : Présure caprin, coagulation, chèvre, optimisation, surface de
réponse.
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CO2.2 Production et caractérisation d’α-amylase fongique : Essai
d’application en panification
AIT KAKI Amel1,2, BENNAMOUN L.2, DJEKRIF DAKHMOUCHE S.2, LABANI FZ K.2,
EL- HADEF EL-OKKI M.1,3, & MERAIHI Z.2
1 Institut de la Nutrition, de l’Alimentation et des Technologies Agro-Alimentaires,
Université Frères Mentouri-Constantine 1. 2 Laboratoire de Génie Microbiologique et Applications, Université Frères Mentouri-
Constantine 1. 3 Laboratoire de Biologie et Environnement, Université Frères Mentouri-Constantine1
Résumé
Le champ d'application des enzymes ne cesse de s'élargir. Le marché
mondial des enzymes est estimé à 7,4 milliards de dollars, avec une
augmentation de 4 % par an. Les amylases constituent une classe
d'enzymes industrielles occupant environ 25 % du marché des enzymes. En
effet, le marché mondial de l’α amylase utilisée en boulangerie à lui seul
devrait atteindre 320,1 millions de dollars d'ici 2024.
La production d’α-amylase fongique sur un milieu optimisé à base de farine
de dattes déclassées a révélé une production maximale de 11034 UI, au
bout de 28 h d’incubation. La caractérisation de l’enzyme partiellement
purifiée a révélé un pH optimum de 5 et une température optimale de 60°C.
L'enzyme est stable à 80 °C et à 90 °C.
La performance de l’α-amylase produite est testée dans le processus de
fabrication du pain à base de farine et comparé à la même enzyme
importée et utilisée localement dans la fabrication du pain. L’essai
d’incorporation de cette enzyme a induit une augmentation du volume
spécifique et du rapport hauteur / largeur du pain, de 0,72 cm3/g et 0,2
respectivement, par rapport au témoin. Cette augmentation est supérieure
à celle induite par l'α-amylase commerciale importée, qui atteint 0,49
cm3/g et 0,1 respectivement. Ces résultats suggèrent l’intérêt de
l’application de cette enzyme en panification pour remplacer les amylases
importées et les additifs constitués de produits chimiques et d’émulsifiants
classiquement utilisés en panification afin d’améliorer les propriétés
texturales, rhéologiques et la saveur du pain d’une part et d’autre part,
limiter la vitesse de rassissement du pain.
Mots-clés : α-amylase fongique, panification, texture, rhéologie,
rassissement.
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CO2.3 Étude de la production et la caractérisation d’α-amylase de
Clavispora lustaniae et Pichia guilliermondii isolés de blé des
zones arides.
DAKHMOUCHE-DJEKRIF Scheherazed 1*, AIT KAKI- EL HADEF ELOKKI Amel 2,
BENNAMOUN Leila 2, LABBANI Fatima Zohra Kenza2, CHAIB Ibtissem2 et
NOUADRI Tahar2.
1 ENS Assia DJEBAR, Constantine. 2 Laboratoire de Génie Microbiologique et Applications (GMA). Université Frères Mentouri
(UFM), Constantine 1.
Résumé
La production de l'α-amylase extracellulaire thermostable chez les souches locales
de Clavispora lusitaniae et Pichia guilliermondii a été réalisée. Les résultats ont
montré que les deux souches produisent l’α-amylase : 13630 UI pour Clavispora
lusitaniae et 13344,5 UI pour Pichia guilliermondii. La purification de l’enzyme
consiste à l’utilisation de l’acétone qui a permis l’augmentation de l’activité
spécifique de l’α-amylase de 215.60 à 691.28 UI/mg pour Clavispora lusitaniae et
de 271.90 à 677.39 UI/mg pour Pichia guilliermondii. Chez les deux souches, le profil
chromatographique de gel filtration sur sephadex G 75 montre l’existence de deux
fractions protéiques contenant des activités α-amylasiques dont le 2éme pic
renferme les fractions protéiques et les activités enzymatiques les plus élevées.
L’étude des caractéristiques physico-chimiques des α-amylases purifiées a montré
que le pH optimum, la température optimale de l’enzyme de Clavispora lusitaniae
sont de 8 et 70 °C, ceux de l’α-amylase de Pichia guilliermondii sont de 6 et 60°C et
ceux de l’enzyme commerciale sont de 9 ,40°C. L’étude de la thermostabilité des
trois enzymes a révélé une excellente stabilité car après incubation de 120 min à
80°C, l’enzyme de Clavispora lusitaniae garde 99,43% de son activité initiale. Pour
Pichia guilliermondii, l’enzyme maintient 99,21% de son activité. Quant à l’enzyme
commerciale, elle conserve 99,18 de son activité. L’effet des ions métalliques sur
l’activité α-amylasique de Clavispora lusitaniae, Pichia guilliermondii, et l’enzyme
commerciale montre que le MgCl2 est un inhibiteur pour les trois enzymes (99.74%,
99.27% et 99.92% respectivement). Pour le ZnSO4, il augmente l’activité de 120,45%,
120.05 % et 118,86% respectivement). Quant à CaCl2, il augmente l’activité
enzymatique de l’amylase de Pichia guilliermondii (115%) et commerciale (113,86%)
et il diminue légèrement celle de Clavispora lustaniae (99,4%). Les performances
des enzymes amylolytiques de ces deux souches de levure (isolées d'un
environnement saharien aride) les qualifient de souches d'utilité industrielle en
particulier celle de l’amidon, du textile et des détergents pour l’amylase de
Clavispora lusitaniae puisque c’est une enzyme alcalothermostable et dans les
industries agroalimentaires et pharmaceutiques pour l’enzyme de Pichia
guilliermondii car c’est une enzyme acidothermostable.
Mots-clés : α-amylase, Clavispora lusitaniae, Pichia guilliermondii, thermostabilité,
purification.
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CO2.4 Degradation of Fusarium cell walls by lytic enzymes of potential
biocontrol Trichoderma isolates
DENDOUGA Wassila 1, GHEDJEMIS Amina 2, BOUREGHDA Houda 2
1 Laboratory of Biodiversity of Ecosystem and Dynamic Production of Agriculture
System in Arid Regions, University of Biskra, Algeria. 2Laboratory of Phytopathology and Molecular Biology, National High School of
Agronomy (ENSA), El-Harrach, Algiers, Algeria.
Abstract
Trichoderma is one of the most exploited fungal biocontrol agents in
agriculture to manage plant diseases caused by a wide number of fungal
pathogens. Fourteen strains of Trichoderma spp. were isolated from Algerian
desert soils and assessed for their biocontrol potential against Fusarium
crown and root rot of wheat. Identity of Trichoderma spp. was confirmed by
genetic analysis performed by sequencing the ITS1- 5.8S-ITS2 rRNA region. In
vitro tests have been carried to evaluate the sporulation of Trichoderma
spp. and their possible production of diffusible substances. Results obtained
with all Trichoderma spp. isolates showed significant decrease in colony
diameter and sporulation of Fusarium species compared to the control. In
direct confrontation, Trichoderma harzianum and T. viride isolates were able
to overgrow and sporulate above F. culmorum colonies which reflect their
high mycoparasitic potential. The efficiency of all Trichoderma spp. isolates
under greenhouse conditions was evaluated during the first week of
germination and 30 days after sowing. Disease incidence and severity of the
seedlings treated with Trichoderma spp. were significantly less than the
control inoculated only with pathogen. The highest disease index decrease
(>70 %) was obtained with the two isolates of T. harzianum (Thr.4 and Thr.10)
and T. viride Tv.6. Lytic enzymes (CWDE) production by Trichoderma spp.
isolates was tested in liquid cultures containing fungal cell walls of each
pathogen as sole carbon source. Higher levels of chitinase, β-1, 3-glucanase
and protease activities were induced by hyphal cell walls of F. graminearum
than cell walls of F. verticillioides and F. culmorum. T. harzianum Thr.4 was
exhibited the highest enzyme activities with hyphal cell walls of F.
graminearum and F. culmorum. However, in the medium amended with cell
wall of F. verticillioides, maximal lytic activities were recorded for T. viride
Tv.6. Lytic enzymes activities (CWDE) of Trichoderma isolates were positively
correlated with disease reduction potential.
Key words: Lytic enzymes, Trichoderma, biocontrol, Fusarium, wheat.
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CO3.1 Rétrospectives des travaux du laboratoire de Microbiologie
Appliquée sur les endoxylanases bactériennes (2005-2020)
BOUCHERBA Nawel1, BOUICHE Celia1,2, HEBAL Hakim1,3 BETTACHE
Azzeddine1, AZZOUZ Zahra1,4, BOUANANE-DARENFED Amel5, BOUACEM
Khelifa5, JAOUADI Bassem6. SUSANA V. Valenzuella2, COPINET Estelle 7,
DUCHIRON Francis7
1 Laboratoire de Microbiologie appliquée, Faculté des sciences de la nature et de la vie, Université de
Bejaia, Targa Ouzemmour, 06000 Bejaia, Algérie 2 Department of Genetics, Microbiology and Statistics, Faculty of Biology, University of Barcelona, Av.
Diagonal 643, 08028 Barcelona, Spain 3 Department of Chemistry, FI-00014, University of Helsinki, Finland 4 Biotechnology for Lignocellulosic Biomass Group, Centro de Investigaciones Biológicas (CIB-CSIC),
c/Ramiro de Maeztu 9, 28040 Madrid, Spain. 5 Laboratory of Cellular and Molecular Biology (LCMB), Microbiology Team, Faculty of Biological
Sciences, University of Sciences and Technology Houari Boumediene (USTHB), P.O. Box 32, El Alia, Bab
Ezzouar, 16111, Algiers
6 Laboratory of Microbial Biotechnology and Engineering Enzymes (LMBEE), Centre of Biotechnology of
Sfax (CBS), University of Sfax, Road of Sidi Mansour Km 6, P.O. Box 1177, Sfax 3018, Tunisia 7 UMR FARE 614 INRA/URCA, Laboratory of Industrial Microbiology, UFR Sciences, University of Reims
Champagne-Ardenne, Moulin de la Housse, BP 1039, 51687 Reims, France
Résumé
L’Algérie qui est un pays producteur de pétrole vise à relever aussi les défis de promouvoir
de nouvelles sources d’énergie pour contribuer progressivement à la satisfaction de la
demande nationale attendue dans les décennies à venir, tout en préservant les ressources
en hydrocarbures en place, c’est pour cette raison qu’il est primordial d’accompagner les
acteurs de la promotion et du développement des énergies renouvelables. Nous travaillons
depuis 2005 sur les enzymes de la bioconversion de la biomasse végétale en l’occurrence
les endoxylanases qui catalysent la réaction d’hydrolyse du xylane en xylooligosaccharides
et enfin le xylose est transformé en bioéthanol, l’Algérie peut devenir un grand producteur
de pâte à papier à partir de déchets de palmier-dattier (20 000 000 palmiers dattiers), le
papier kraft pourra être blanchis avec des préparations de xylanases produites localement.
Dans ce résume nous donnerons un aperçu général sur les endoxylanases produites par des
souches locales, la première souche est une actinomycète nommé Jonesia denitrificans
BN13 (Boucherba et al., 2011), sa xylanase 4 possède un PM de 42 Kda. Cette dernière est
active à pH 7,0 et à 50°C, son temps de demi-vie est de 9,34 h à 50°C (Boucherba et al.,
2014). Une deuxième souche nommée Bacillus safensis CBLMA18 produit deux xylanases, la
Xyn11A ayant un PM de 22,5 kDa tandis que la seconde xylanase Xyn10B correspond à une
enzyme de 48 kDa. Xyn11A affiche une activité plus élevée sur les glucuronoxylanes, avec
un optimum à pH 8 et 50 ºC, et un Vmax de 5281 U/mg avec le xylane de hêtre, tandis que
la Xyn10B a une spécificité élevée vis-à-vis des arabinoxylanes, avec un optimum de pH à 7
et à une température de 60 ºC, et un Vmax de 50,29 U/mg avec l'arabinoxylane de seigle
(Bouiche et al., 2019), une étude collaborative a été menée sur la purification et la
caractérisation de l’endoxylanase produite par Caldicoprobacter algeriensis (Bouacem et
al., 2014 ; Bouanane-Darnefed et al., 2016).
Mots-clés : endoxylanases, purification, caractérisation, Jonesia denitrificans BN13, Bacillus
safensis CBLMA18.
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CO3.2 Extraction et purification partielle d’une cellulase d’origine
microbienne sur un déchet de type papier
BELLEBCIR Anfal#1, BENAYED Rofida1, BENLOUNISSI Aicha1
1 Laboratoire de recherche en Bioengineering, Ecole Nationale Supérieure de
Biotechnologie (ENSB)
Résumé
Les déchets de papiers sont considérés comme une source
lignocellulosique majeure en raison de leur teneur élevée en cellulose, cette
caractéristique les rend exploitables dans le domaine de la biotechnologie
comme des substrats pour la production des enzymes par les
microorganismes, l’une des moisissures qui possède un pouvoir de
production de cellulases très important est la souche A. niger, pour cette
raison une culture d’A. niger est réalisée par fermentation submergée en
utilisant le carton comme seul substrat pendant 7 jours. Le suivi de la
croissance de la moisissure montre une production maximale de l’enzyme
extracellulaire « la cellulase » après 96 heures d’incubation avec une activité
enzymatique de 8.13U. Une purification de cette dernière par précipitation
au sulfate d’ammonium à 80%, dialyse, chromatographie d’exclusion
moléculaire (gel Sephadex-G50) et chromatographie échangeuse d’ions
(DEAE-Sepharose) est réalisée, ces étapes ont permis d’éliminer 95% de
protéines non actives. Les sous-unités de l’enzyme partiellement purifiée
montrent une bande visible sur gel de polyacrylamide obtenue par SDS-
PAGE dont le poids moléculaire avoisine les 14KDa. L’activité cellulolytique
est mise en évidence par zymographie en présence de la cellulose pure.
Mots-clés : Aspergillus niger, fermentation submergée, carton, cellulase.
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CO3.3 Les enzymes microbiennes, outils clés de la biotechnologie
industrielle et environnementale: Cas des hydrolases et
oxidoréductases
JAOUADI Bassem 1,*, MECHRI Sondes 1, ZARAI JAOUADI Nadia 1, BOUACEM
Khelifa 2, ALLALA Fawzi 2, HACENE Hocine 2, BOUANANE-DARENFED Amel 2 &
ABDELMALEK Badis 2,4
1 Laboratoire de Biotechnologie Microbienne, Enzymatique et de Biomolécules (LBMEB), Centre de
Biotechnologie de Sfax (CBS), Université de Sfax, Route Sidi Mansour Km 6, BP 1177, Sfax 3018, Tunisie. 2 Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Equipe de Microbiologie, Université des Sciences et
Technologie Houari Boumediene (USTHB), BP 32 El Alia, Bab Ezzouar Alger, Algérie. 3Laboratoire de Chimie des Substances Naturelles et de Biomolécules (LCSN-BioM), Faculté des Sciences,
Université de Blida 1, Route de Soumaâ, BP 270, Blida (09000), Algérie. 4 Centre National de Recherche et de Développement de la Pèche et de l’Aquaculture (CNRDPA), 11
Boulevard Colonel Amirouche, Bou Ismail, Tipasa.
Résumé
Le marché mondial des enzymes est en nette progression essentiellement du fait de l’intérêt
que portent ces dernières à l’environnement et aux industries dites propres. Selon Freedonia
Group (www.FreedoniaGroup.com) aux États Unis, la demande en enzymes sera estimée à
7 milliards de dollars en 2017. En effet, l’utilisation des enzymes devient une solution pour
remplacer les produits chimiques polluants et toxiques, traditionnellement utilisés dans
l’industrie. Ces enzymes permettent de développer des bioprocédés plus spécifiques, très
sélectifs et moins polluants et d’effectuer les réactions dans des conditions plus douces. En
plus, leurs actions ne génèrent pratiquement pas de produits secondaires indésirables. Les
enzymes utilisables industriellement doivent catalyser les réactions à des pH et des
températures particuliers, résister aux conditions de formulation et présenter une très grande
spécificité. Actuellement, les protéases représentent le groupe d’enzymes le plus
commercialisé et utilisé en biotechnologie industrielle grâce aux avantages qu’elles
présentent surtout dans la substitution des agents chimiques toxiques. En effet, ce groupe
d’hydrolases couvre 65% du marché total des enzymes. Ainsi, dans le cadre d’une
collaboration scientifique, entre le LBMIE-CBS (Sfax, Tunisie) et le CNRDPA (Bou Ismaïl, Tipaza,
Algérie) et la FS-Université de Blida 1 (Blida, Algérie), soutenue par le projet de recherche
conjoint tuniso-algérien « TNDZ-MicrooZymes 2012-2018_Code TA/04/2012 », nous avons
réalisé des études biochimiques et des essais à l’échelle pilote et industrielle en détergence
et traitement de cuir de plusieurs protéases et kératinases bactériennes issues de souches
isolées de différents biotopes de la Tunisie et de l’Algérie. Les peroxydases sont des enzymes
universelles. Elles sont des hémoprotéines dont le groupement prosthétique est l’hème. Elles
utilisent le peroxyde d’hydrogène comme accepteur d’électrons ou d’autres peroxydes, tels
que les lipides hydroperoxydes, pour catalyser les réactions d’oxydation. Elles catalysent des
réactions d’oxydoréduction impliquant la réduction d’un peroxyde et l’oxydation d’un
substrat, variable d’une classe de peroxydase à une autre. Ainsi, dans le même cadre de
collaboration tuniso-algérienne, nous avons d’écrire pour la première fois quatre
peroxydases à acides humiques (nommées HaP) formant une nouvelle classe de
peroxydases à partir de souches de Streptomycètes non mentionnées dans la littérature
«Actino de classe II type HaP 1/2/3/4».
Mots-clés: Protéases; Kératinases; Peroxydases; Détergence; Traitement de cuir;
Biotechnologie.
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CO3.4 Bioconversion of the lignocellulosic biomass residues and
biotechnological production of fungal xylanase in solid-state
fermentation
AZZOUZ Zahra *1, BETTACHE Azzeddine 1, BOUICHE Celia, MAIBECHE Rima1,
HAMMA Samir1, AMGHAR Zahir1, BEN HOULA Mohammed1, ALIANE Wahiba2,
BOUCHERBA Nawel 1, BENALLAOUA Said 1
1 Laboratoire de Microbiologie Appliquée (LMA), Département de Microbiologie,
Faculté des Sciences de la Nature et de la Vie, Université de Bejaia, 06000, Bejaia,
Algérie 2 Laboratoire de caractérisation, valorisation des ressources naturelles, Université
Mohamed El Bachir El Ibrahimi, Bordj Bou-Arreridj, Algérie
Abstract
Most of the lignocellulosic biomass residues are decomposed and
transformed by a variety of microbes in the natural environment. Along with
the augmentation of green chemistry, the offer of retraining economy and
sustainable development designs, conversion, and research in the
application of lignocellulosic biomass feedstock is highly appreciated and
widely used. Xylan is the central hemicellulosic component in several
lignocellulosic biomass which can be hydrolyzed by xylanolytic enzymes.
The xylanase production from Aspergillus niger strain BG has been produced
approach using wheat bran under solid state fermentation (SSF). Effect of
the incubation period, initial pH, medium moisture content, and cultivation
temperature on the xylanase production has been optimizing using one
factor at a time approach (OFAT). Further, experiments were designed with
a Box–Behnken design (BBD) on the same variables using response surface
methodology (RSM). Analysis of variance was carried out and the xylanase
production was expressed with a mathematical equation depending on the
factors. Maximum xylanase yield after RSM optimization was important
(986.82±0.44U/ml) than optimized with OFAT conditions (695,95 ± 0.03U/ml).
The effects of individual, interaction and square terms on xylanase
production were represented by means of the non-linear regression
equations with significant R2 and P-values. An optimized value was obtained
with a media pH of 2.5 in 66 hours (h) at 37 °C using wheat bran as a
substrate humidified to 84%. Xylanase production from Aspergillus niger
strain BG using RSM is considered advantageous because the rate of
enzyme production is higher than other fungi.
Mots-clés : Conversion, optimization, xylanase, lignocellulosic biomass
residues, solid state fermentation.
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CO3.5 Isolement, purification et caractérisation d’une pectate Lyase
thermostable et alkalophile chez une espèce d’actinomycète
thermophile, Actinomadura keratinilytica CPt20, isolée du
compost de poulet (région Annaba).
SAOUDI Boudjema*1-#2, HABERRA Soumaya#2, KEROUAZ Bilal #2, HABBECHE
Amina#2, AYARI Adel*1, BEN ROMDHANE ZAMEN&3, BELGHITH Hafedh&3,
GARGOURI Ali&3, LADJAMA Ali#2
(*1) Laboratoire des Ecosystèmes Aquatiques et Terrestres (LEAT), Faculté des
Sciences de la Nature et de la Vie, Université Mohamed Cherif Messaadia, Route
de Annaba, BP 1553- Souk Ahras- 41000 Algérie.
(#2) Laboratoire de Biochimie et de Microbiologie Appliquée (LBMA).
Département de Biochimie, Faculté des Sciences, Université Badji Mokhtar BP12-
Annaba-23000 Algérie.
(&3) Laboratoire de Biotechnologie Moléculaire des Eucaryotes (LBME).
Centre de Biotechnologie de Sfax,BP 1177.3018 Sfax- Tunisie.
Résumé
Dans ce travail de recherche, 29 espèces d’actinomycètes thermophiles
secrètent des pectinases extracellulaires ont été isolées. La souche Cpt20
semble être la plus active par sécrétion de pectate lyase (Pel-20), celle-ci a
été choisie pour une étude plus approfondie. L’identification moléculaire
de l’ARNr16S a permis de classer cette espèce comme étant Actinomadura
keratinilytica Cpt20. L’optimisation du milieu de production de la Pel-20 a
permis d’avoir un niveau d’activité de l’ordre de 21101,32 UI/ml. Par la suite
cette enzyme a été purifiée et caractérisée. La Pel-20 s’est révélé un
monomère de masse molaire 34 kDa par SDS-PAGE et 33,12511 kDa par
MALDI-TOF/MS. La séquence de l’extrémité NH2-terminale de la Pel-20
(GFATNQGGTTGGAGGTLS), montre une forte homologie avec la
superfamille des pectate lyases. La Pel-20 a un pH optimum de 10,5 et une
température optimale de 70°C. L’enzyme est inhibée par l'EDTA et activée
par le calcium à 1mM ce qui confirme son appartenance à la superfamille
des pectate lyases. Le substrat préférentiel de cette enzyme est la pectine
faiblement estérifiée (32%). La thermoactivité et la thermostabilité de la Pel-
20 ont été améliorées en présence de 1 mM de Ca2+. En conclusion, les
propriétés d'alcaliphilicité et de thermostabilité de Pel-20 ont permis de dire
que cette enzyme est un candidat potentiel pour des applications futures
dans les bioprocédés industriels.
Mots-clés: Actinomycètes thermophiles; Pectate lyase; Alcalophile;
Purification.
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CO4.1 Dédoublement cinétique enzymatique des 𝜷-aminoalcools :
Acylation et hydrolyse en milieu organique
ALALLA A.1#, MERABET-KHELASSI M.1, ARIBI-ZOUIOUECHE L.1, RIANT O.2
1Laboratoire de Catalyse Asymétrique EcoCompatible. Université Badji Mokhtar
Annaba. B.P 12, 23000 Annaba, Algerie, 2Université Catholique de Louvain, 1348
Louvain La Neuve, Belgique #Ecole Nationale Supérieure de Biotechnologie – Taoufik Khaznadar - Constantine
Résumé
Les aminoalcools, sous leurs formes optiquement actives, jouent un rôle
important en chimie moderne. Leur domaine d’utilisation prédomine en
chimie pharmaceutique. Le développement et la mise au point des modes
d’accès aisés aux dérivés β-aminoalcools énantiomériquement pures est
d’une grande importance dans la synthèse des molécules présentant un
intérêt potentiel en chimie thérapeutique.
Dans ce travail, nous présentons l’étude du dédoublement cinétique par
acylation et hydrolyse enzymatique des β-aminoalcools, nous examinons la
N- et/ou O-acylation ainsi que l’hydrolyse de ces molécules
polyfonctionnelles par catalyse avec des lipases. L'efficacité de ces
biocatalyseurs (activité, chimiosélectivité et stéréosélectivité) en font une
bonne alternative aux processus chimiques pour la synthèse d’amino-
alcools optiquement enrichis.
Nous décrivons ainsi une méthode hautement énantiosélective pour
accéder à quelques β-aminoalcools d’intérêt pharmacologique, et ce, en
combinant deux voix de synthèse obéissants aux critères de chimie verte :
La première, permet d'accéder aux β-aminoalcools racémiques via la
réaction d’Henry modifiée et la seconde, consiste en l’utilisation d'une
réaction d’hydrolyse enzymatique en milieu organique alcalin hautement
énantiosélective avec la CAL-B. Les résultats obtenus montrent une haute
affinité de la CAL-B avec des sélectivités atteignaient E> 200.
Mots-clés : β-aminoalcools, catalyse enzymatique
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CO4.2 Étude de l’α-amylase TfAmy48 pour une application en
détergence
ALLALA Fawzi#1, BOUACEM Khelifa#1, JAOUADI Bassem#2 et BOUANANE-
DARENFED Amel#1.
#1 Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire (LBCM), Equipe de
Microbiologie, Faculté des Sciences Biologiques, Université des Sciences et
Technologies de Houari Boumediene (USTHB), BP 32, El Alia, Bab Ezzouar, 16111
Alger, Algérie. #2 Laboratoire de Biotechnologie Microbienne, Enzymatique et de
Biomolécules (LBMEB), Centre de Biotechnologie de Sfax (CBS), Université de Sfax,
Route de Sidi Mansour Km 6, BP 1177, Sfax 3018, Tunisie.
Résumé
Les enzymes sont utilisées dans les formulations détergentes depuis les années 1960
afin de surmonter l'eutrophisation de l'eau causée par les détergents au phosphore.
Les protéases, les amylases, les lipases et les cellulases ont été utilisées pour
dégrader les taches de protéines, de glucides et de lipides sur les vêtements.
Aujourd’hui, les amylases sont largement utilisées dans les produits de nettoyage,
principalement les lessives et les détergents à vaisselle. La capacité d'hydrolyser
l'amidon dans les taches alimentaires augmente considérablement la capacité du
détergent à éliminer ces taches. Elles sont aussi utilisées pour éliminer les résidus
d'amidon insolubles pendant le lavage de la vaisselle.
Au cours cette étude, une α-amylase bactérienne thermostable (TfAmy48) issue de
Tepidimonas fonticaldi HB23 a été purifiée et caractérisée afin de servir de bio-
composant dans la formulation des détergents liquides et solides à usage
domestique. Pour cela, des tests de compatibilité et de stabilité avec plusieurs
détergents commerciaux (locaux et étrangers) ont été réalisés. Les caractéristiques
de l’enzyme ont montré que l’activité optimale est située à pH8 et à une
température de 70 °C en l'absence de calcium et à 80 °C en présence de CaCl2
à 5 mM. Les résultats ont aussi révélé que TfAmy48 n’était pratiquement pas inhibée
par l’EDTA et l’EGTA. L’analyse des performances de l’α-amylase TfAmy48 (en
comparaison avec l’enzyme commerciale Termamyl® 300L) en présence de divers
détergents ainsi que leurs constituants a montré des résultats d’activité relative et
résiduelle très concluants, souvent meilleurs que celles de l’enzyme commerciale.
Assurant un impact réduit sur l’environnement (biodégradabilité et aucun impact
nocif sur les processus de traitement des eaux usées), moins d'utilisation de polluants
tels que le phosphate, et une efficacité de lavage équivalente ou parfois meilleure,
l’α-amylase TfAmy48 se présente comme un bio-additif détergent très prometteur
et avantageux.
Mots-clés : α-amylase, détergents, thermophile
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CO4.3 Transglutaminase and its applications in microencapsulation
DJOULLAH Attaf#
#Division de Recherche-Développement/CFT, Ministère de la Défense Nationale
Abstract
Microbial transglutaminase (MTGase) is an enzyme widely used in foodstuffs
to improve textural and functional properties of proteins (restructuration of
meat, fish, and seafood products). MTGase catalyses acyl-transfer reactions
between carboxyamide groups (acyl donors) of glutamine residues and ε
amino group of lysines (acyl aceptors) in proteins, leading to the formation
of ε-(γ-glutamyl)-lysine (G-L) crosslinks. The resulting isopeptide bonds
contribute to the formation of a stable protein network via intermolecular
and intramolecular cross-links. Furthermore, it is anticipated that processing
of protein isolates with MTGase, modifying their technofunctional properties,
will open up new areas of applications such as microencapsulation of
bioactive molecules. In this work riboflavin was encapsulated in pea proteins
microparticles prepared by subsequent emulsion-enzymatic gelation
process. Total pea proteins fraction containing 20% albumins and 80%
globulins was prepared from pea flour by alkaline extraction (pH8) and
ultrafiltration process. Treatment of 15% (w/w) pea proteins by
transglutaminase (20 Units/g of protein) at pH 7 and 45°C led to the
formation of strong gel (G’= 2000 Pa) with a good water holding capacity
(95%). These gel properties were exploited to form microparticles (150 µm)
from a water-in-oil emulsion followed by enzymatic gelation. Because of low
emulsifying property of pea proteins, addition of surfactant was required to
form individual spherical microparticles. The produced microparticles were
practically insoluble in gastrointestinal media in the absence of enzymes
and slowly degradable in the presence of enzymes. The encapsulation
yields were satisfactory and depending on the microparticles size and the
amount of charged riboflavin. The release mechanisms of riboflavin in
digestive environments are governed by a diffusion phenomenon in the
absence of enzymes and by support degradation phenomenon in the
presence of enzymes. This study indicates that pea proteins microparticles
prepared by subsequent emulsion-enzymatic gelation process can be used
as nutraceutical delivery systems.
Keywords : transglutaminase, enzymatic gelation, emulsion, pea proteins,
encapsulation.
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CO5.1 Essai de production et dosage de l’activité enzymatique de
souches bactériennes et archéennes halophiles protéolytiques
isolées d’environnements hypersalins algériens
BENMEBAREK Hania1,2,KHARROUB Karima1,2
1Laboratoire de Biotechnologie et Qualité Alimentaire (BIOQUAL) ; 2Institut de la Nutrition de l’Alimentation et des Technologies Agro- Alimentaire
(INATAA) ;
7ème kilomètre, Route de Ain Smara, Constantine 25000, Algérie.
Résumé
Le présent travail a été effectué sur 133 souches halophiles, isolées sur milieu
MGM à 12 et 23% (p/v) de sel. Un criblage des activités protéolytiques
extracellulaires, réalisé sur le même milieu additionné à chaque fois de
caséine ou de gélatine à 1% (p/v), a permis de sélectionner 24 souches
bactériennes et 21 souches archéennes présentant un précipité autour des
colonies pour la caséine et/ou un halo translucide (après addition du réactif
de Frazier) pour la gélatine. L’essai enzymatique a été réalisé sur milieu
liquide en micro- culture sur tube Eppendorf de 2 mL. Le dosage de l’activité
protéolytique en utilisant l’Azocaséine comme substrat, en présence à
chaque fois de témoins positifs et négatifs a démontré des résultats
intéressants pour 10 souches parmi les 45 testées dont 5 bactéries et 5
archées. Ces dernières ont fait l’objet d’une caractérisation
morphologique, physiologique et moléculaire sur la base de l’amplification
et du séquençage du gène de l’ARN ribosomique 16S.
Mots-clés : bactéries halophiles, archées halophiles, protéases,
dosage, environnements salins.
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CO5.2 Caractérisation de lipase, d’α-amylase et de dioxygénases
halothermophiles à partir de deux archées halophiles extrêmes
pour des applications industrielles prometteuses
KHEMILI-TALBI Souad#1, AKMOUSSI-TOUMI Siham1, KEBBOUCHE-GANA
Salima1, LENCHI-IZOUINE nesrine1, FERRIOUNE Imen2, SAYAH Amna2,
ALOUACHE Lamia2, SADAOUI-SMADHI Nesrine1, NAJJARI Affef3
1Laboratoire de Bioinformatique, Microbiologie Appliquée et Biomolécules (BMAB),
Université M'Hamed Bougara, Boumerdès, 35000, Algérie. 2Laboratoire Conservation et Valorisation des Ressources Biologiques (VALCORE),
Université M'Hamed Bougara, Boumerdès, 35000, Algérie. 3Université de Tunis El Manar, Faculté des Sciences de Tunis, LR03ES03 Microorganismes et
Biomolécules Actives, 2092, Tunis, Tunisie.
Résumé
Grâce à leurs propriétés structurales et fonctionnelles, les enzymes des microorganismes
extrêmophiles ont été largement étudiées en vue de leur exploitation industrielle. C’est dans
ce contexte que s’inscrit l’objectif de nos travaux de recherche. Des approches culturales
en combinaison avec des méthodes moléculaires ont été utilisées pour l’isolement et
caractérisation des archaebactéries halophiles à partir d’écosystèmes aquatiques salins et
de leurs enzymes(lipases, α-amylases et dioxygénases) halothermophiles. Les enzymes des
souches Haloferaxmediterranei ATS1 et Haloarculasp.D21 ont montré les meilleurs potentiels
biotechnologiques.
Haloferaxmediterraneiproduit une lipase à sérine monomérique de masse moléculaire
45011,09 Da déterminée par MALDI-TOF/MS. Les valeurs optimales de pH, de salinité et de
température pour l'activité de la lipaseétaient respectivement de 7, 15% NaCl et 60°C.Le
calcium à 2mM améliore considérablement la thermoactivité et la thermostabilité de
l’enzyme. Cette dernièreétait stable dans divers solvants organiques, détergents et
tensioactifs. L’ajout de cette lipase halothermophile à la solution détergente améliore
nettement les performances du détergent iSiS avec une meilleure élimination des taches
d’huile.
L’α-amylase halothermophile isolée à partir de Haloarulasp.D21 a, quant à elle, exhibé un
caractère très halophile tout engardant son activité même en absence du sel. L’enzyme a
montré un optimum d’activité (57,85 U/ml) à pH 8, 4-5M du NaCl et 60°C. L’activité de cette
α-amylase halothermophile est inhibée par l’addition de 5mM de Fe2+et Co2+ mais fortement
stimulée en présence 7mM de Ca2+. Une étude in silico a également été réalisée afin de
comprendre le phénomène d’adaptation des α-amylases à des fortes concentrations en sel.
Dans un autre axe d’application, ces halophiles extrêmes isolées ont montré une très bonne
dégradation du phénol par une voie de clivage ortho par l'intermédiaire de leurs enzymes
catéchol-1,2-dioxygénases révélées par la forte accumulation del’acidecis,cis-muconique.
En plus du potentiel de l’utilisation de ces souches pour la dépollution des environnements
salins et hypersalins pollués par le phénol et ses dérivés, l’acide cis,cis muconique produit
joue un rôle important comme matière première potentiellement utile pour la synthèse et la
production des polyamides, des produits pharmaceutiques, agrochimiques, cosmétiques et
les additifs alimentaires.
Mots-clé : Enzymes halothermophiles, haloadaptation, détergence, biodégradation.
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CO5.3 Production of laccase by a halotolerant Penicillium on Olive
Pomace under Solid State Fermentation
BOUCHERIT Zeyneb #1, MECHAKRA Aicha #2, AMEDAH Souad #3
# Laboratoire de Biologie et Environnement, Faculty of Nature and Life Sciences.
UFMC1
A total of 23 halotolerant fungi isolated from saline soil of Ain Ezzemoul’s
Sebkha (Oum-el-Bouagui Province. Algeria) were screened for laccase
production on agar plate method. The three fungal strains (VS1, GS7 and
GS15) which exhibited an extracellular laccase activity were subjected to
the test of growth and decolourization on olive mill wastewater (OMW). For
that reason, wastes recuperated from a modern olive mill were used for
preparation of 2% agar solid medium with several concentrations (from 10
to 100%). The strains VS1, GS7 and GS15 were capable of growing at OMW
up to 100 %, 50 % and 40 % correspondingly but only the strain GS15 showed
a complete decolourization at 10 and 20 %. This latter was identified
macroscopically and microscopically as Penicillium strain. The production of
laccase, by the efficient strain, under solid culture on 50% humidified olive
pomace showed activities of 2124.52 U/g and 1670.61 U/g on grinded and
un-grinded waste respectively.
Mots-clés: Halotolerant fungi ; Laccase ; Olive pomace ; Olive mill
wastewater
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CO5.4 Caractérisation des potentialités kératinolytiques d’une souche
actinomycète isolée dans la région de Bejaïa
HAMMA Samir#1, BENHOULA Mohammed1, BETTACHE Azzeddine1, JAOUADI Bassem2, BOUCHERBA Nawel1
1 Laboratoire de Microbiologie Appliquée, Université Abderrahmane Mira - Bejaia
2 Laboratoire de Biotechnologie Microbienne, Enzymatique et de Biomolécules (LBMEB),Centre de Biotechnologie de Sfax (CBS), Université de Sfax
Résumé
L'application de moyens biotechnologiques dans le traitement et la valorisation des
plumes de volailles générées par l'industrie avicole en Algérie est une alternative
très intéressante en raison des grandes quantités de ces déchets produites chaque
année.
L’objectif de ce travail est la recherche de bactéries capables de produire des
kératinases thermostables répondants aux exigences des applications industrielles.
Des échantillonnages à base de coproduits de plumes sont effectués sur différents
sites dans la wilaya de Bejaïa. Des isolements, des purifications et un screening des
isolats sont réalisés. La souche la plus performante est confrontée à certains travaux
notamment la cinétique de croissance et de production des enzymes.
Les travaux réalisés ont permis d’obtenir vingt- six isolats bactériens doués de
capacités kératinolytiques et présentant des caractéristiques culturales
d’Actinomycètes ;
- Les souches DZ06, CC06 et YG06 sont de nouvelles souches Actinomycetales douées de capacités kératinolytiques isolées et sélectionnées en utilisant la farine
de plumes de volailles récupérées localement comme coproduits bon marché.
- La souche DZ06 présente un maximum de croissance et de production après 5 jours d’incubation à pH 10, une température de 40 °C et une concentration de 20
% de farine de plumes de volailles.
Les résultats obtenus montrent que les souches sélectionnées, isolées dans la région
de Bejaia sont des Actinomycètes thermophiles et protéolytiques capables de
croître sur un substrat kératinique localement récupéré par production de
kératinases extracellulaires actives.
La souche DZ06 offre des perspectives pour la poursuite des travaux notamment
l’optimisation des paramètres physico- chimiques et nutritionnels par utilisation de
méthodes statistiques, la Purification à homogénéité et caractérisation physico-
chimique de(s) kératinase(s) la/les plus intéressante(s) ;
Des essais d’application de(s) kératinase(s) la/les plus intéressante(s), à petite
échelle sont envisagés, notamment dans le traitement et la valorisation des plumes
de volailles et dans le traitement du cuir.
Mots-clés :
Actinomycètes, Activité kératinolytique, farine de plumes, kératinases,
thermostabilité.
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CO6.1 Probable antitumor activity of serine protease from Helix aspersa
Algerian snail
MEBIROUK Romeila#1, NAIMI Dalila#2, AZARKAN Mohamed*3
# Laboratoire de bioengineering, ENSB Constantine
* Unité de Chimie des protéines, service de chimie générale. ULB-BELGIUM,1 Faculté de Médecine, Université Salah Boubnider, Constantine 32 Ecole Nationale Supérieure de Biotechnologie de Constantine3 Université Libre de Bruxelles, Belgique.
Abstract
The principal aim of our study is to test and discover new activities of Helix
aspersa proteins extract and to identify the responsible of those activities.
For this, soluble protein precipitation is performed with ammonium sulfate
from homogenate of foot gastropods. After that, protein extract is
fractioned using Akta Start system equipped with a pre-cast Hi-Trap Q-
Sepharose anion exchange column, followed by dialysis against distilled
water. The resulting fractions were tested for their enzymatic and anti-
proliferative activities. For enzymatic activity, we used synthetic substrates;
with which each fraction was incubated for 120 min at 37°C. Enzymatic
activity was determined by measuring the emission at 440 nm. The type of
protease found in chromatographic fractions was determined using
protease inhibitors. Finally, anti-proliferative effect was carried out in vitro
using the MTT assay and the inhibition concentration at 50% (IC50) was
estimated against tumor cell lines (A549, Huh7and K562) and against normal
cell line (Mk2). Our results showed serine and cysteine protease activity in
Helix aspersa foot homogenate; with cytotoxic effect against tumor cells.
Keywords: Helix aspersa, enzymatic activity, serine protease, cysteine
protease, anti-proliferative activity, tumor cells.
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CO6.2 Étude comparative d’enzymes à activité coagulante de deux
souches d’actinobactéries autochtones
ZERIZER Habiba#, BOUGHACHICHE Faiza#., RACHEDI Kounouz#.
#Laboratoire de Biotechnologie et Qualité des Aliments (BIOQUAL) ; Institut de la
Nutrition, de l’Alimentation et des Technologies Agro-Alimentaires ;Université Frères
Mentouri, Constantine-1
Résumé
La pénurie mondiale en présure animale, pour des raisons zootechniques et
économiques, suscite les travaux de recherche sur les enzymes
coagulantes d’origine microbienne, ce privilège est dû à la culture facile,
la productivité élevée et la simplicité de manipulation génétique.
Les actinobactéries constituent d’excellentes sources de substances à
propriétés intéressantes. Dans ce travail nous comparons les propriétés
biochimiques et l’activité coagulante d’enzymes protéolytiques produites
par des souches appartenant à deux genres différents d’actinobactéries :
Streptomyces sp. et Nocardiopsis sp. isolées localement. Une purification
partielle est réalisée par fractionnement triphasique, puis l’effet du pH, de
la température, des ions métalliques, des inhibiteurs des solvants organiques
ainsi que la stabilité sont étudiés. L’activité coagulante des extraits des deux
souches est évaluée selon la méthode de Berridge (1952).
Les protéases des deux souches ont des caractères biochimiques
rapprochés, l’extrait de la souche Streptomyces sp. à une température
optimale de 40°C, alors que celui de la souche Nocardiopsis sp. est à 50°C.
Cependant les deux extraits enzymatiques présentent un pH optimum à 9
et une stabilité satisfaisante à différents pH, température, ions métalliques
(Cu2+, Ca2+, Na2+, Fe2+, Mn2+, Mg2+, Zn2+, K+ et Hg2+) inhibiteurs (Triton x100,
H2O2), solvants organiques (l’éthanol, le méthanol, l’acétone-éthanol, le
butanol, le xylène, l’acétone, l’acétate d’éthyle et l’éther de pétrole) mais
ils sont partiellement inhibés en présence du Tween 80, SDS et EDTA. Les
extraits enzymatiques des deux souches ont une activité coagulante
intéressante estimée à 15094,33 U/ml et 11478 U/ml pour Streptomyces sp.
et Nocardiopsis sp. respectivement.
Ces enzymes peuvent trouver des applications en industrie alimentaire
notamment fromagère.
Mots clés : enzymes, actinobactéries, caractères biochimiques, activité
coagulante, industrie alimentaire
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CO6.3 La xanthine oxydoréductase comme outil prometteur pour le
diagnostic des pathologies hépatiques
MOSBAH Asma1, KHITHER Hanane2, MOSBAH Camélia3, BENBOUT Amel3
1Laboratoire de Biochimie Appliquée, Faculté des Sciences de la Nature et de la
Vie, Université les Frères Mentouri- Constantine 1, Algérie. 2Laboratoire de Biochimie Appliquée, Faculté des Sciences de la Nature et de la
Vie, Université Ferhat Abbas Sétif 1, Sétif 19000, Algérie. 3Laboratoire de substances naturelles,molécules bioactives et applications
biotechnologiques, Institut des sciences et des techniques appliquées , Université
Larbi Ben M’hidi, Oum El Bouaghi, Algérie
Résumé
La xanthine oxydoréductase (XOR) est un complexe molybdoflavo enzyme
catalysant l’oxydation de l’hypoxanthine en xanthine et la xanthine en acide
urique tout en produisant des espèces réactives de l’oxygène (ROS) et de l’azote
(RNS). Il ya actuellement un intérêt croissant à l’étude de la XOR sérique circulant
dont le taux augmente dans plusieurs pathologies humaines, en particulier dans
celles mettant en jeu les lésions hépatiques de type ischémie-reperfusion.
Bien que l’ALAT soit parmi les transaminases les plus spécifiques comme indicateur
de lésions hépatiques, les résultats préliminaires réalisés par différentes équipes de
recherche ont montré que la XOR sérique est un meilleur paramètre pour suivre la
fonction hépatique.
Vu l’importance du taux de cette enzyme sérique dans le diagnostic et le pronostic
de pathologies hépatiques, nous nous sommes intéressés au dosage sérique de
cette enzyme chez différentes pathologies hépatiques à travers un test ELISA
sandwich.
Nous avons procédé à la purification et caractérisation de la XOR à partir du lait
humain, la pureté de l’enzyme a été vérifiée à travers le spectre d’activité et
l’électrophorèse sur gel polyacrylamide SDS-PAGE. Par la suite, l’enzyme extraite a
été utilisée pour l’immunisation des lapins afin de produire des anticorps anti-XOR.
L’étape finale consiste à optimiser un test ELISA sandwich pour le dosage de la XOR
dans les sérums des patients atteints de différentes pathologies hépatiques.
Les résultats montrent que le taux de cette l'enzyme est augmenté significativement
chez les sujets atteints des différentes lésions hépatiques (les sujets cirrhotiques 4595
± 4376 ng/ml, les sujets cancéreux 3771 ± 4262 ng/ml, les sujets atteints d’hépatites
virales (HVB et HVC) 6128 ± 6913 ng/ml et les sujets atteints d’intoxications
hépatiques 1529 ± 1713 ng/ml) par rapport aux sujets normaux 91.89 ± 93.06 ng/ml.
Sur la base des résultats obtenus, la XOR peut être utilisée comme un paramètre
clinique aussi efficace que le dosage des transaminases pour un diagnostic
précoce des lésions hépatiques et pour un suivi thérapeutique approprié.
Mots-clés : XOR, Hépatites, Test ELISA sandwich, Transaminases, diagnostic.
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CO6.4 Activité antioxydante de glucuronoxylanes (UXOS) et
arabinoxylanes (AXOS) produits d’hydrolyse d’endoxylanases
de Bacillus safensis CBLMA18
BOUICHE Cilia*1, SUSANA V.Valenzuela2, JAVIER PASTOR F.I 2, BETTACHE
Azzeddine 1, MAIBECHE Rima1, AZZOUZ Zahra 1, HAMA Samir1, BENHOULA
Mohammed1, BENALLAOUA Said1, BOUCHERBA Nawel1
1 Laboratoire de Microbiologie Appliquée, Faculté des Sciences de la Nature et de
la Vie, Université de Bejaia, 06000 Bejaia, Algérie, 2 Laboratoire d’enzymes Microbiennes pour Applications Industrielles, Département
de Génétique, Microbiologie et statistiques, Faculté de Biologie, Université de
Barcelone, Av. Diagonal 643,08028, Espagne,
Résumé
L'utilisation de matériaux renouvelables constitue l’une des alternatives sur
laquelle repose le principe du développement durable, L'hémicellulose est
l'un des polysaccharides les plus courants de la biomasse lignocellulosique
après la cellulose, et n'a pas encore trouvé sa place dans de larges
applications industrielles comme la cellulose. Les Xylooligosaccharides
(XOS) issus de l’hydrolyse d’un hémicellulose nommé xylane sont des
molécules bioactives particulièrement intéressantes vu leur activité
antioxydante. L’espèce Bacillus safensis CBLMA18 est une bactérie
xylanolytique isolée à Béjaia (Bouiche et al., 2020), L'activité antioxydante
du glucuronoxylane et de l’arabinoxylane généré d’une part par l’hydrolyse
de la xylanase11A et celle de la Xylanase 10B des arabinoxylanes est testée
avec la méthode ABTS (acide 2, 2'-azino-bis (3-éthylbenzothiazoline-6-
sulfonique). Le glucuronoxylane a montré une activité antioxydante plus
élevée que l’arabinoxylane (plus de 80% de la capacité antioxydante). La
chromatographie sur couche mince et l'analyse MALDI-TOF MS ont montré
que les glucuronoxylanes comprennent des XOS neutres et acides avec
des ramifications d'acide méthylglucuronique (MeGlcA), tandis que les
arabinoxylanes ne contiennent que des molécules neutres avec des
ramifications d'arabinose. Les ramifications de MeGlcA semblent avoir un
rôle important dans la capacité antioxydante des oligosaccharides. En
outre, l'augmentation de la taille des glucuronoxylanes est proportionnelle
à l’augmentation de leur activité
Mots-clés : xylanase, antioxydant, xylooligosacharide, arabinoxylane,
glucuronoxylane
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CO6.5 Activité anticholinesterase in vitro d’Ephedra nebrodensis contre
AchE et BchE.
HAMOUDI Meriem#1, AMROUN Djouher1, BENSOUICI Chawki 2, KHENNOUF
Seddik1, DAHAMNA Saliha1
1 Laboratory of Phytotherapy Applied to Chronic Diseases, Faculty of Natural and
Life Sciences, University Ferhat Abbas Setif 1, Setif 19000, Algeria. 2 Centre de Recherche en Biotechnologie, Ali Mendjli Nouvelle Ville UV03,
Constantine, Algérie.
Résumé
Les principaux enzymes impliqués dans les pathologies de la maladie
d'Alzheimer sont l'AchE et le BchE, l'inhibition de chaque enzyme augmente
la communication dans les voies cholinergiques et réduire les signes de la
maladie d'Alzheimer. Cependant La consommation de drogues de
synthèse pour le traitement de la maladie d'Alzheimer, comme (la
galantamine et la rivastigmine), a des effets secondaires indésirables,
notamment gastro-intestinaux (les douleurs d'estomac, la diarrhée, les
nausées, les vomissements, la perte de l'appétit…. etc). Ces dernières
années, la recherche sur les produits naturels anti-Alzheimer dans
l'alimentation et les sources végétales s'est intensifiée. Les composés naturels
possèdent de nombreuses propriétés, notamment l'activité anti-
enzymatique vis-à-vis AchE et BchE. L'objectif de cette étude était d'évaluer
les propriétés inhibitrices in vitro des extraits d'Ephedra nebrodensis. Les
extraits EAC et MeOH ont montré la plus forte inhibition de l'AchE avec une
valeur de CI50 (21,56 et 22,50 μg/ml) et des CI50 intéressantes de (8,64 et
10,98 μg/ml) contre la BchE. On peut conclure que la plupart des extraits
d'E. nebrodensis sont actifs et présentent une meilleure inhibition qui aller
jusqu’à 99% contre la BChE que l'AchE. Cette étude montre que cette
plante possède des propriétés anti-Alzheimer in vitro intéressantes.
Mots-clés: Ephedra nebrrodensis, anti-cholinesterase, extraits, maladie
d’Alzheimer.
COMMUNICATIONS PAR AFFICHE
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CP1.1 Recherche des enzymes « bêta-lactamases à spectre élargi » et
d’autres molécules bioactives d’origine microbienne.
RAHMANI Amina#1, MERADI Larem#2, ARHAB Rabah#3
# Université LARBI BEM MHIDI, département des sciences de la nature et de la vie,
Laboratoire de biotechnologie des substances naturelles et applications,
Résumé
L'évolution constante de la résistance bactérienne aux antibiotiques et
l'émergence de nouvelles maladies infectieuses justifient l'urgence de
l’Organisation Mondiale de la Santé (OMS) d’évoquer un plan mondial pour
combattre la résistance aux antimicrobiens pour lutter contre
l’antibiorésistance en soutenant le développement des projets de la
biotechnologie pharmaceutique. Dans cette dernière, la détection de la
résistance bactérienne est un outil ou moyen de diagnostic, ce qui donne
aux biotechnologues les informations nécessaires pour créer un procédé
éliminant cette résistance. Alors, ce travail consiste à isoler à partir de
plusieurs biotopes des souches bactériennes exclusivement Escherichia coli
et quelques souches d’actinomycètes et de caractériser leurs profils de
résistance vis-à-vis de plusieurs familles d’antibiotiques. L’identification des
souches a été réalisée par les méthodes de microbiologie classique, et la
confirmation des E. coli par la galerie d’identification API20Plus. La méthode
de diffusion des disques a été utilisée pour la réalisation de l’antibiogramme
sur gélose Mueller-Hinton selon les normes NCCLS (National Committee of
Clinical Laboratory Standards, 2019). Les résultats révèlent la présence de
souches E. coli productrice de bêta-lactamases à spectre étendu (BLSE)
présentant des phénotypes de résistance assez inquiétants, ainsi que des
souches actinomycétale productrices de molécules bioactives dont les
enzymes de dégradation (amylase, caséinase..etc), l’identification des
molécules bioactives permettra de synthétiser à l’échelle biotechnologique
une quantité assez importante de ces molécules qui peuvent agir comme
des enzymes de coupure des gènes de résistance ,présents au niveau des
souches bactériennes GRAM négatif ou positif, ou bien faciliter à l’échelle
biotechnologique la dégradation des molécules complexes.
Mots-clés : Escherichia coli, Actinomycètes, BLSE, biotechnologie, enzymes.
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CP1.2 Extraction et caractérisation biochimique d’une enzyme
coagulant le lait issu de la caillette de Chevreau. Essai de
fabrication d’un fromage frais à base de lait de chèvre.
KAHLOUCHE amal1, BOUMEDIENE Farida2, NOUANI Abdelouahab3
1Ecole supérieure des sciences de l’aliment et des industries agroalimentaires-ESSAIA-Alger 2Laboratoire de technologie alimentaire –Ecole nationale supérieure agronomique-ENSA-
Alger 3Laboratoiree de technologie Alimentaire -Université de Boumerdès,
Résumé
Dans l’industrie fromagère, la présure est le principal agent coagulant de lait,.
Actuellement, la présure de veau est la plus largement utilisée en fromagerie,
toutefois, elle couvre seulement 20 à 30 % de la demande mondiale en coagulants.
Nous savons que l’indisponibilité des présures de veau associée à des problèmes
d’éthiques ainsi que l’abattage accéléré des jeunes bovins constituaient une
nécessité impérieuse de rechercher d’autres alternatives à la chymosine bovine.
Cependant, malgré plusieurs tentatives de productions d’enzymes microbiennes et
végétales, certains auteurs considèrent que la qualité des fromages et produits
laitiers à base de ces enzymes affectait la qualité des laitages notamment
l’apparition du goût amer produit par certains peptides. Par ailleurs, les travaux
menés sur des mammifères tels que le buffle, le caprin, l’ovin, l’agneau et le lapin
pourraient constituer de bonnes sources de présure. Cependant, très peu
d’informations ont été rapportées sur la purification et la caractérisation sur la
chymosine du chevreau bien que les laitages, particulièrement les fromages à
base de lait de chèvre a forte valeur ajoutée, possèdent une très bonne valeur
nutritionnelle et des propriétés sensorielles très appréciées par le consommateur, il
est digne d’intérêt de s’intéresser aux enzymes gastriques du caprin notamment la
chymosine potentiellement utilisée comme substitut de la présure traditionnelle. Tel
est l’objectif du présent travail.
Une meilleure connaissance des propriétés des protéases extraites à partir de la
caillette de chevreau a été établie pour une meilleure future application en
fromagerie locale. Ainsi, notre étude nous a permis d’évaluer L’étude de la
propriété coagulante et protéolytique de l’enzyme après son extraction et sa
purification par précipitation au sulfate d’ammonium suivie d’une
chromatographie d’exclusion moléculaire. Par ailleurs, une caractérisation
biochimique de l’extrait enzymatique a été réalisée en déterminant les conditions
optimales de son activité coagulante (Température, pH, CaCl2)
En fin, un essai de fabrication de fromage frais de chèvre a été réalisé à partir
d’extrait enzymatique brut de chevreau, et la présure commerciale prise comme
référence. L’analyse comparée a porté sur le rendement fromager.
Mots clés: Enzyme coagulant le lait, extraction, caractérisation, chevreau,
fromage.
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CP1.3
Application d’enzymes d’intérêt biotechnologique produites par
des microorganismes
BOUKEROUI Yasmina 1, AISSAOUI Nadia 1, KLOUCHE KHELIL Nihel 1,2,3
1Laboratoire de Microbiologie appliquée à l’agroalimentaire, au biomédical et à
l’environnement, Université de Tlemcen-Tlemcen-Algérie 2Département de chirurgie dentaire, Faculté de médecine, Université de Tlemcen,
Tlemcen-Algérie 3Laboratoire de chirurgie expérimentale, Faculté de médecine, Université de
Tlemcen, Tlemcen- Algérie
Résumé
Les enzymes sont des protéines aux propriétés catalytiques très utiles dans
de nombreux procédés industriels vu leur spécificité dans la fabrication d'un
produit et leurs avantages comparés aux produits chimiques de synthèse,
ce qui permet de consommer moins d’énergie et de faire de réels progrès
dans la réduction des déchets.
L’utilisation des enzymes en biotechnologie est en augmentation
considérable, parmi ses applications commerciales, on peut citer la
production de détergents, le recyclage du papier, production d'éthanol,
transformation des aliments et des boissons, textiles, cosmétique, produits
pharmaceutiques, synthèse peptidique et production d'énergie.
Dans cette étude, nous mettrons en relief les différentes techniques de
purification utilisées pour les enzymes d’origine microbienne, nous discutons
ensuite les stratégies adoptées pour la découverte de nouvelles enzymes
et enfin nous citerons leurs applications biotechnologiques.
Mots-clés : Microorganismes, bioprospection, ingénierie protéique,
application enzymatique
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CP1.4 Production d’enzyme fongique coagulante le lait sur un milieu à
base de sous-produit agroalimentaire (peau de tomate)
GHEDJEMIS Amina#, DENDOUGA Wassila*
# Laboratoire de caractérisation, valorisation des ressources naturelles, Université
Mohamed El Bachir El Ibrahim, Bordj Bou Arreridj, Algérie *Laboratoire de Biodiversité des Ecosystèmes et de Production Dynamique de
Système Agricole en Régions Arides, Université de Biskra, Algérie.
Résumé
Dans le cadre de produire une enzyme fongique coagulante le lait sur un
milieu bon marché, la farine de la peau de tomate a été préparée
classiquement pour d’une part remplaçant la présure animale et d’une
autre part minimiser le coût de production de biocatalyseurs sur des milieux
synthétiques. Les analyses chimiques de la farine ont montré sa richesse en
particulier en hydrate de carbone, avec les taux dépassant et également
en sels minéraux.
L’activité protéolytique de nos isolats a été testée sur CLM caséine. Le
résultat de cette étape a permis de sélectionner la souche Aspergillus sp.02
comme la plus productrice d’exoprotéase. La production de cette dernière
par la souche Aspergillus sp.02 sélectionnée sur de milieu complexe à base
de farine des tomates aux quatre concentrations (20%, 60%, 80%, 100%) a
révélé que l’isolat donne son optimum de croissance (6.78%) et activité
(129.09 UI) au milieu farine de poudre de tomate à 60%.
Le test de coagulation de lait effectué par l’extrait enzymatique de la
souche Aspergillus sp.02 en présence de Cacl2 (0.01M), est considéré positif
par la formation des premiers flocons après 20 min d’incubation
Mots-clés: le lait, coagulation, moisissures, protéase, Farine de peau de
tomate
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CP1.5
Criblage de microorganismes producteurs de lipases
MEZIANE Nassim#1, MEDJMEDJ Ayoub*2, OUSAADI Mouna Imene#3
# Laboratoire de PFE Microbiologie, Ecole Nationale Supérieure de Biotechnologie,
Résumé
Les sous-produits oléicoles (grignons d’olives), sont pour la plupart peu ou
pas valorisés, ils constituent une source importante de microorganismes
producteurs d'enzymes, tels que les lipases qui peuvent être produites par
des microorganismes à partir de ces milieux grâce à leurs richesses en
substrats lipidiques. Parmi ces microorganismes on trouve, les
actinobactéries qui sont d'excellentes productrices de métabolites à intérêt
biotechnologique.
Dans cette étude, les activités enzymatiques principalement l’activité
lipolytique et les activités antimicrobiennes des actinobactéries isolées ont
été étudiées. Un total de 13 isolats est obtenu à partir de différents
échantillons de sol (12 isolats) de la région de Ain Smara, Constantine et de
grignons d’olives (S11), obtenus d’une huilerie locale située dans la région
d’El Khemis à Jijel.
En effet, six actinobactéries (S1, S2, S7, S8, S10 et S11) sur 13 isolées (soit
46,15%), sont sélectionnés pour leur capacité à développer une activité
lipolytique sur milieu gélosé à base de jaune d'oeuf 10% et sur milieu Tween
80. La majorité des isolats (12 isolats) se sont avérés capables de synthétiser
la lipoproteinase, sur milieu gélosé à base de jaune d'oeuf 10%. Une activité
lécithinase, est mise en évidence pour une seule souche d’actinobactérie
(S8).
L’activité antimicrobienne a été étudiée par la technique des cylindres
d’agar vis-à-vis de cinq souches bactérienne tests Bacillus cereus,
Staphylococcus aureus (ATCC 25923), Escherichia coli (ATCC 25922),
Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853), et Klebsiella Pneumoniae (ATCC
700603), et deux champignons filamenteux Aspergillus niger, Fusarium
oxysporum. Le test de l’activité antibactérienne révèle qu’une seule souche
(S8) parmi les 13 actinobactéries isolées, possède une activité vis-à-vis d’une
bactérie-test Gram positif Bacillus cereus, après 15 et 21 jours d’incubation.
Tandis que pour l’activité antifongique, huit souches se sont révélées actives
contre le champignon Fusarium oxysporum.
Mots-clés: Actinobactéries, valorisation de déchet, grignons d’olives,
lipases, activité antimicrobienne
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CP1.6
Pouvoir des Protéases Bactériennes à libérer des Peptides
Antioxydants par Caséinolyse
ZATER Zohra Yasmine1# , ROUDJ Salima
# Université Oran1, Ahmed Ben Bella/ Laboratoire de biologie des microorganismes
et biotechnologie.
[email protected] / [email protected]
Résumé
Les peptides dérivés des protéines du lait peuvent exercer différentes
activités biologiques bénéfiques, en plus de leurs rôles nutritionnels de base.
Ils peuvent posséder des propriétés antioxydantes, anti-inflammatoires,
antihypertensives, et antimicrobiennes qui pourraient jouer un rôle dans le
maintien ou la préservation de la santé humaine. L’objectif de notre étude
est l’hydrolyse de caséines du lait de deux sources différentes, lait de vache
et lait de chèvre, par des protéases issues de Lactobacilles et la recherche
d’activité antioxydante des hydrolysats générés. On a sélectionné, par
criblage, des lactobacilles à potentiel protéolytique parmi des souches
lactiques autochtones isolées de différentes sources alimentaires. Ces
souches ont montré leurs aptitudes à libérer des protéases dans le milieu de
culture. L’activité des protéases a été examinée sur la caséine totale en
solution et les hydrolysats obtenus ont été quantifiés par méthode
biochimique. L’évaluation de l’activité antioxydante par piégeage de
radical libre diphenylpicrylhydrazyl (DPPH) des hydrolysats obtenus a révélé
un pouvoir antioxydant. Les antioxydants contribuent à la prévention des
maladies chroniques telles que les maladies cardiovasculaires dues au stress
oxydatif. Ainsi, l'ingestion de peptides naturels dérivés des protéines
alimentaires peut retarder l'apparition de ces maladies, tout en réduisant
les dommages oxydatifs.
Mots-clés: Protéases, Lactobacilles, caséines, peptide, activité
antioxydante.
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CP1.7
The Effect of Viscozyme-Cellulast Mixture on Oil Extraction Yield
CHENNI Fatima Zohra #1, HAMENNI Kahina *2, KUHNLE Gunter G C *3
# Laboratoire de Biotoxicologie, Department of Biology, Faculty of Natural
Sciences and Life, BP 89, 22000 Sidi Bel Abbes (Algeria)
* Department of Food & Nutritional Sciences, University of Reading, Reading RG6
6AP, United Kingdom
Abstract
Enzyme incorporation in the process of oil extraction is a good alternative to
the traditional and high temperature solvent extractions as it could get up
their inconvenient such as fewer yields, as described by many researchers
on different species. Through the enzyme-assisted extraction, many
improvements have been reported in the quantity and the quality of oil. The
aim of this research is to provide a new understanding of the effect of
enzymatic mixture on argan kernels oil extraction through the use of two
commercial enzymes : viscozyme and cellulast. To increase the oil extraction
yield, different parameters of the enzymatic processing were studied and
optimized. The two enzymes (1:1) were used within a ratio of 0.25 % E/S
during 3h at 50°C and compared with one enzyme (cellulase) or non –
enzymatic oil extraction process. Enzyme mixtures as a pretreatment in the
process of oil extraction are useful to improve oil extraction and may
enhance bioactive compounds yields.
Keywords: Enzyme ;Cellulast ;Viscozyme ;Extraction ; Argan oil
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CP2.1
A comparison between acid and enzymatic hydrolysis of corn
starch for glucose syrups production
TAIBI Hoiria 1, BOUDRIES Nadia 1, ABDELHAI Moufida 1 and LOUNICI Hakim 2
1 Laboratoire de recherche sur les produits bioactifs et la valorisation de la biomasse,
Ecole Normale Supérieure Cheikh Mohamed El Bachir El Ibrahimi, ENS Kouba, Alger,
Algérie 2 Laboratoire Matériaux et Développement Durable, Université Akli Mohand Oulhadj
, Bouira
Starch is widely used in various bioprocesses in the pharmaceutical and
textile industries, as well as in food applications. Acid and enzymatic
modifications are used to produce many starch-based sweeteners include
corn syrups, high fructose corn syrups (HFCS), dextrose, fructose and
maltodextrin.
In this study, two combinations technics (acid-enzyme and enzyme-
enzyme) of starch hydrolysis were tested to produce glucose syrups.
Commercial corn starch was used for the bioconversion. The optimal
conditions of the two steps of hydrolysis (liquefaction and saccharification)
were determinate. Corn starch at 30, 35 and 40% (w/v) were used as
substrate. After 2h of liquefaction, for starch concentration of 35%,
maximum dextrose equivalent (DE) of 15.43% was obtained using 0.1% (w/v)
of ɑ-amylase from Bacillus subtilis at 90 °C and pH = 6.5. However, the highest
value of DE of 42.08 % was achieved using 1.0 M HCl at 100°C. Optimal
saccharification process occurs at 60°C, pH of 4.5 for 72 h, using 1% (w/v) of
amyloglucosidase. Final values of DE of 97.03% and 94.68% for corn starch
were obtained after enzymatic liquefaction and acid liquefaction,
respectively.
The results indicated that the processing of corn starch to glucose syrups
can be carried out either by acid or enzymatic hydrolysis. However, the use
of enzyme is preferred to acid, because it produces high yields of desired
products and less formation of undesired products such as toxic
compounds.
Keywords: corn starch, glucose syrups, dextrose equivalent, liquefaction,
saccharification.
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CP2.2
Mise en évidence d’activités enzymatiques à intérêt
technologique chez quelques souches de bactéries lactiques.
BACHTARZI Nadia1, MERADJI Meriem1, LEKSIR Dalal1, KHARROUB Karima1.
1Laboratoire de Recherche Biotechnologie et Qualité des Aliments (BIOQUAL).
Institut de la Nutrition, de l’Alimentation et des Technologies Agro Alimentaires
(INATAA), Université Frères Mentouri Constantine 1 (UFMC1), Constantine, Algérie,
Le potentiel enzymatique de 44 souches de bactéries lactiques pré-
identifiées isolées à partir de laits de deux espèces bovine et caprine, a été
testé sur trois milieux gélosés supplémentés de caséines, de tween 80 et sur
milieu amidonné pour l’étude de la protéolyse, la lipolyse et l’amylolyse
respectivement. En effet, la capacité des souches lactiques à hydrolyser les
trois substrats testés contribue efficacement au développement des
attributs sensoriels des matrices alimentaires générées telles que les
fromages, le beurre ou encore les produits de panification. Ainsi, les résultats
du criblage ont montré que 6 isolats présentent une forte activité
protéolytique avec des plages de lyse atteignant 25 mm de diamètre, par
contre les activités lipolytique et amylolytique se sont avérées absentes chez
l’ensemble des isolats testés. Ces résultats peuvent être rattachés à
l’adaptation des souches à leur habitat d’origine, le lait riche en caséines,
en dépit des autres substrats carbonés. De ce fait, l’exploitation
technologique des isolats présentant une activité protéolytique peut être
envisagée dans l’élaboration de nouveaux ferments intéressants pour
l’affinage des fromages.
Mots-clés: Protéolyse, lipolyse, amylolyse, bactéries lactiques.
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CP2.3
Production et purification des coagulases de Bacillus subtilis S3
et Bacillus coagulans LC28.2.
CHEMLAL Radia 1,2,3, DJERDJOURI Bahia 1, BELLAL Mohand Mouloud 3
1 Laboratoire de biologie cellulaire et moléculaire, Département BCM, FSB-USTHB,
BAB EZZOUAR, ALGER. 2 Laboratoire de bioengineering et génie des procédés, Département du Génie de
l’environnement, ENP, ALGER.
3 Département de Technologie alimentaire, ENSA, ALGER.
Résumé
Actuellement l’industrie fromagère, des pays en voie de développement en
particulier, subit une crise de l’approvisionnement en présure traditionnelle.
Cette situation à conduit de nombreux chercheurs à s’intéresser aux
nouvelles sources potentielles d’enzymes de remplacement notamment, les
enzymes d’origine végétale et microbienne.
En dépit de nombreux travaux relatifs aux enzymes de remplacement de la
présure animale, les applications industrielles restent limitées. Les principaux
obstacles à l’utilisation des enzymes d’origine bactérienne ou fongique
restent leur toxicité et leur prix de revient élevé. En revanche, les
inconvénients des enzymes d’origine végétale résident dans leurs
inaptitudes technologiques.
L’objectif de ce travail est de contribuer à une meilleure connaissance des
protéases coagulant le lait, issues de culture des souches locales de Bacillus
sélectionnées. La caractérisation des extraits coagulants bruts issus de deux
souches fait apparaître que l’influence des principaux paramètres sur les
activités coagulantes est similaire pour les deux extraits bruts. Les résultats
montrent des activités coagulantes relativement élevées et stables à 40°C.
En outre, les résultats de l’électrophorèse des différentes fractions
coagulantes, traitées au sulfate d’ammonium et soumises à une filtration
moléculaire, révèlent une seule bande protéique de poids moléculaire
estimée à 40.44KDa. Ceci semble indiquer que les protéases obtenues
correspondent à des protéases neutres caractérisées généralement par
des poids moléculaires compris entre 32.9 et 47.5 KDa. A ce stade de
l’étude, les résultats mettent en évidence la possibilité d’obtention des
coagulases à partir de souches locales de Bacillus.
Mots-clés: Activité coagulante, Bacillus, protéases.
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CP2.4 Optimization and Immobilization of alpha-amylase from Bacillus
Subtilis in calcium alginate and calcium Alginate –cellulosic
residue beads.
HERIZI Abdallah 1,2, SOUILAH Rachid 1,3, DJABALI Djaffar 1, NADJEMI
Boubekeur 1
1Laboratoire d’Etudes et Développement des Techniques d’Epuration et de
Traitement des Eaux et Gestion Environnementale, Département de Chimie, Ecole
Normale Supérieure de Kouba, Alger. 2Faculté de technologie, Université Mohamed Boudiaf M’sila, Algeria 3Département de physique, Ecole Normale Supérieure de Laghouat, Algeria.
Abstract
In this study, Alpha amylase from Bacillus Subtilis was immobilized by
entrapment in Calcium alginate beads. To improve the properties of these
beads, alginate was blended with cellulosic residue (CR) obtained from
sorghum-starch extraction. The conditions of entrapment were optimized for
a maximum immobilization yield (Y %) by mathematical statistics, where the
23 full factorial design of experiments was used. The properties of calcium
alginate beads were improved by comparing the activity of immobilized
enzymes in the hydrolysis of starch. The activity of the immobilized enzyme
by Calcium alginate /cellulosic residue (CA/CR) was found to be higher
than the Calcium alginate method. Zn2+ and Cu2+ have inhibitory effects
on both immobilized enzymes. The Bacillus Subtilis immobilized in alginate
can be reused for 7 cycles with 12.7 μmol of reduced sugars and 6 cycles
for the entrapped enzyme in (CA/CR) with 30 μmol of reduced sugars.
Keywords: Alginate, cellulosic residue, α-amylase, immobilization,
optimization.
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21-22 Décembre 2020, ENSB-CONSTANTINE
CP2.5 Suillus granulatus, un champignon comestible riche en enzymes
capables de dégrader les margines, sous-produits de l’industrie
oléicole.
KERMANI Ismahan#, FORTAS Zohra#, DIB Soulef#
#Laboratoire de Biologie des Microorganismes et Biotechnologie, Département de
Biotechnologie, Faculté des Sciences de la Nature et de la Vie, Université Oran 1
Ahmed Ben Bella(Algérie)
Résumé
Actuellement, le secteur oléicole est considéré comme un élément majeur
de l'économie agricole en Algérie. En effet, avec la promotion des vertus
bénéfiques de l’huile d’olive pour la santé, la demande mondiale ne cesse
d’augmenter et la production doit constamment répondre aux besoins des
consommateurs. L’industrie oléicole engendre, en plus de l’huile comme
produit principal, de grandes quantités de sous- produits liquides appelés
margines qui sont difficilement biodégradables et donc très polluants pour
l’environnement. Les procédés de dépollution classiques sont complexes et
coûteux. La nécessité de trouver des moyens de dépollution bio-
écologiques et économiques s’impose. C’est dans cette perspective que
nous orientons notre étude en essayant d’utiliser un champignon
filamenteux, un Basidiomycète comestible appelé Suillus granulatus, riche
en enzymes, pour dégrader les margines.
En matériel et méthodes, nous avons ensemencé in vitro les implants de la
souche mycélienne de S. granulatus par différentes techniques de culture
en absence et en présence de margine d’olive stérile sur des milieux liquides
et gélosés à base de malt ou PDA et sur cellophane ainsi que sur milieu à
base de céréales.
Les résultats obtenus montrent que la présence de margine favorise
considérablement la croissance mycélienne de Suillus granulatus sur tous les
milieux de culture testés. Ceci prouve que le champignon a bien dégradé
la margine pour croître. Selon la bibliographie, la dégradation est due à
l’activité enzymatique de ces champignons.
En conclusion, l’utilisation du champignon comestible Suillus granulatus
pourrait être un moyen très efficace pour dégrader les margines et éviter la
pollution qu’elles engendrent.
Mots clés : Suillus granulatus, activité enzymatique, margines, souche
mycélienne.
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CP2.6 Effet de l’addition des enzymes exogènes dans un régime
hypocalorique de poulets de chair sur les performances et les
caractéristiques de la viande
ALLOUCHE L.#1, MADANI T.*2, AIT HAMOUDA Z.#3
1Département de Biologie et physiologie Animale. Faculté des Sciences de la
Nature et de la Vie. Université Ferhat Abbas Sétif 1. Algérie. Laboratoire de
valorisation des ressources biologiques et naturelles. 2Département d’agronomie. Faculté des Sciences de la Nature et de la Vie.
Université Ferhat Abbas Sétif 1. Algérie. Laboratoire de valorisation des ressources
biologiques et naturelles 3Entreprise d’Hygiène et de Nutrition Animale (NH2M), Bordj Bou Arreridj. Algérie.
Résumé
Dans les pays en voie de développement, les éleveurs de poulets de chair
utilisent souvent des régimes énergétiques déséquilibrés, c'est pourquoi
notre étude vise à évaluer l'effet de l'ajout des enzymes exogènes
commerciales (EEC) dans un régime à base de farine de maïs/soja à faible
niveau énergétique sur les performances, les caractéristiques de la viande
et le coût de l’alimentation. Un total de 120 poulets de chair de souche
ISA15 âgés d'un jour ont été répartis en deux groupes (60 animaux par
groupe) avec cinq répétitions par groupe.
Le groupe témoin a reçu un régime standard, tandis que le groupe EEC a
reçu le même régime alimentaire complété par des EEC (250 g/tonne). La
période de l’élevage est de 60 jours ; durant cette période, les poulets ont
reçu un régime de démarrage de 1 à 9 jours, de croissance de 10 à 41 jours
et un régime de finition de 42 à 60 jours.
Nos résultats ont montré que l'ajout d'enzymes a réduit significativement la
consommation en aliment (p<0,001) et en eau (p<0,05) comparativement
au groupe témoin ; le taux de conversion alimentaire avait tendance à être
plus faible (p = 0,08) chez les poulets ayant consommés des EEC.
Concernant la qualité de la viande, aucun changement n'a été observé
dans le pH, la teneur en protéines ou en humidité de la viande chez les
poulets de chair des deux sexes entre les groupes EEC et témoins.
Cependant, l'addition des EEC a permis une diminution de 950 g/poulet de
la ration alimentaire pendant toute la période d’élevage, économisant
ainsi 34418 DA/ 1000 poulets. En conclusion, l'utilisation des EEC dans un
régime hypocalorique améliore l'efficacité alimentaire des poulets de chair
et procure un avantage économique aux éleveurs.
Mots-clés : poulet de chair, enzymes exogènes, performances, qualité de
viande, économie.
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CP2.7
Valorisation biotechnologique des sous-produits de l’olivier
« Margine» par fermentation submergée
KHELALEF Hind1 et BENLOUNISSI Aicha2
1 Université 20Août 1955, Skikda 2 Ecole Nationale Supérieure de Biotechnologie, Constantine
Résumé
Les Margines, effluents d’extraction de l’huile d’olive, posent de sérieux
problèmes de pollution pour l’environnement, d’où la nécessité de leur
traitement ou de leur valorisation. Le but de ce travail est de valoriser les
Margines par leur utilisation comme substrat de fermentation, avec une
souche mycélienne, afin de produire des lipases qui permettent de résoudre
plusieurs problèmes. Pour cette raison une culture fongique est réalisée par
fermentation submergée en utilisant les margine comme seul substrat
pendant 8jour. Le suivie de croissance de la moisissure montrent une Activité
maximale de l’enzyme « lipase » après 120 heures d’incubation, avec une
Activité enzymatique de 0.724g/ml/min. En conclusion, la valorisation des
Margines permettant de remédier les effets néfastes engendrés par les rejets
de ces déchets dans l’environnement.
Mots-clés : Valorisation, Fermentation submergée, Margine, Lipase.
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CP3.1 Etude de quelques aptitudes enzymatiques des actinobactéries
isolées à partir des stations d’épuration des eaux usées
BOUFERCHA Oumeima(1,2), BOUDEMAGH Allaoueddine(2)
(1) Laboratoire de génie microbiologique et application, Département de
microbiologie. Faculté des sciences de la nature et de la vie. Université Frères
Mentouri 1, Constantine- Algérie(2) Département de Microbiologie. Faculté des Sciences de la Nature et de la Vie.
Université Frères Mentouri-Constantine 1. Algérie
Résumé
Les actinobactéries sont largement distribuées dans les écosystèmes
terrestres mais aussi aquatiques. Ces bactéries sont connues par leurs
aptitudes à produire plusieurs biomolécules notamment les enzymes. Les
enzymes hydrolytiques des actinobactéries jouent un rôle important dans la
dégradation des différents polymères complexes, permettant ainsi le
recyclage de la matière vivante et des multiples substances. Ces enzymes
ont été depuis longtemps utilisés dans l’environnement, dans l’agriculture,
en médecine et dans la chimie. Les stations d’épuration des eaux usées
constituent un écosystème très pollué, offrant une panoplie de substrats
extraordinairement variés. Par cette composition chimique exceptionnelle,
ces endroits peuvent êtres les précurseurs d’une importante variété
d’enzymes, agissants sur ces substrats. L’objectif de cette étude est la
recherche dans les stations d’épuration des eaux usées, d’actinobactéries
capables de produire certains enzymes hydrolytiques. Au total 45 souches
d’actinobactéries ont été isolées et purifiées à partir des trois stations
d’épuration des eaux usées situées à l’est de l’Algérie. La mise en évidence
de l’aptitude de ces isolats à synthétiser plusieurs enzymes a été testée sur
des milieux gélosés. Les résultats révèlent que la majorité des isolats sont
capables de produire plusieurs enzymes d’importance biotechnologique.
La plus grande majorité des isolats produisent l’amylase et la caseinase
avec respectivement 95,55%, et 82,22%. L’estérase, la lipase, la tyrosinase et
la gélatinase sont quant à elles produites respectivement par environ 60%,
53%, 51% et 51% des isolats d’actinobactéries. Ces résultats intéressants
montrent que ces écosystèmes très pollués sont riches en actinobactéries
présentant des aptitudes à produire des enzymes d’intérêt
biotechnologiques.
Mots-clés: Enzyme, actinobactéries, eaux usées.
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CP3.2
Mise en évidence des enzymes protéolytiques
d’actinobactéries isolées de compost
BOUTANA Wissem#1, ZERIZER Habiba1, KHARROUB Karima1
1 Laboratoire de recherche biotechnologie et qualité des aliments (BIOQUAL),
Institut de Nutrition de l’Alimentation et des Technologie Agro-Alimentaires,
Université des Frères Mentouri, Constantine 1, Route d’Ain-El-Bey, Constantine,
Algérie
Résumé
Les microorganismes occupent une place importante dans notre vie et sont
actuellement à l’origine des exploitations biotechnologiques. Les
actinobactéries sont parmi les microorganismes les plus rencontrés sur les
substrats naturels. Elles sont connues pour leur aptitude à dégrader plusieurs
métabolites grâce à leurs enzymes notamment protéolytiques. Les
protéases occupent une grande part du marché des enzymes industrielles,
notamment dans celle des détergents, des applications analytiques et dans
le domaine biomédical. En industries alimentaires, la protéolyse constitue un
puissant outil pour la modification des propriétés des protéines et des
systèmes protéiques.
Ce travail consiste à réaliser un screening de six échantillons de compost,
l’isolement des souches d’actinobactéries a été effectué par
ensemencement sur quatre différents milieux de culture (ISP2, ISP9, AF et
Olson). L’incubation a été réalisée à différentes températures de 7 jours
jusqu’à 14 jours. La présence d’activité protéolytique extracellulaire a été
prospectée sur le même milieu de culture de base (ISP2, ISP9, et Olson)
additionné de 1% de caséines déshydratées, les souches présentant un halo
clair autour des colonies ont été conservées.
Un total de 173 souches isolées ont fait l’objet d’une sélection après mise en
évidence de leurs capacités de production de protéases, 53 isolats
d’actinobactéries ayant été sélectionnées présentant une zone d’hydrolyse
qui varie de 4 mm jusqu’à 2,5 mm de diamètre. Cette étape a permet de
constituer une collection de souches productrices de protéases
extracellulaires pour la mise en culture liquide.
D’après les résultats obtenus, nous incitons à poursuivre nos efforts de
recherche pour une éventuelle exploitation en bio-industries.
Mots-clés : enzyme, isolement, actinobactéries, protéases.
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CP3.3
Isolation of cellulase producing bacteria using spent coffee
grounds as sole carbon source: potential application in
lignocellulose saccharification for bioethanol production
BENAOUAD Sara 1, MERAINI Ibtissem 1, CHOUBANE Slimane#1
1 Ecole Supérieure en Science Biologiques d’Oran ESSBO # Laboratoire d’Aquaculture et de Bioremédiation – AQUABIOR
Abstract
Enzymes are specific proteins with high catalytic efficiency. Several microorganisms
such as bacteria from various natural habitats are suitable to develop production
pathways for extracellular hydrolytic enzyme systems having synergistic effects for
the conversion of biomass into simpler sugars, such as cellulase. The latter has been
reported as one of the most important industrial enzymes on the world market. It has
several applications in food production, in textiles, in biological detergents and in
biofuels production which are intended to respond to the growing demands for
bioenergy. In this sense, bioethanol is widely recognized as a unique transport
biofuel with powerful economic, environmental and strategic attributes. The
second generation bioethanol is produced from lignocellulosic biomass such as
spent coffee grounds SCG which is a waste produced by millions of tonnes around
the world. There are several modes of enzymatic hydrolysis and fermentation to use
to produce bioethanol including the process of simultaneous saccharification and
fermentation (SSF).
Indeed, going from the overall context of this introduction, our aim was to isolate
bacterial strains capable of degrading crude cellulose to ultimately use the
produced cellulase in the saccharification of lignocellulosic biomass for the
production of bioethanol.
Hence, bacterial isolation was carried out from different samples from various
biotopes and sources (soil, waste and water) from different places in Algeria, to
isolate the best cellulase-producing bacterial strains. In this sense, the coffee
grounds were added to the isolation medium to promote the growth of bacteria
capable of using this waste as the sole source of carbon. Then, the best cellulase-
producing isolate is the one from the wheat bran sample (SON2), followed by the
strain corresponding to the banana peel sample (EB) and finally that from
Mostaganem soil (SM). This result was confirmed by Congo red assay and by
colorimetric assay of cellulase activity by the DNSA method.
The obtained strains would be an excellent source for the production of cellulase
capable of degrading crude SCG, after medium composition and conditions
optimization. This will allow the use of this important and available lignocellulosic
biomass in the production of bioethanol.
Keywords : Lignocellulosic biomass, spent coffee grounds, cellulase, SSF,
bioethanol.
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CP3.4 Removal of BPA in aqueous solution by immobilized laccase
LASSOUANE Fatiha #1,2, AIT AMAR Hamid *2, RODRIGUEZ-COUTO Susana #3,4
1#Centre de Développement des Energies Renouvelables, CDER, 16340 Algiers,
Algeria, 2#Université des Sciences et de la Technologie Houari Boumediene (USTHB), LSGPI,
Faculté GMGP, BP 32, El-Alia 16111, Algiers, Algeria 3#Ceit-IK4, Water and Health Division, Paseo Manuel de Lardizábal 15, 20018
Donostia-San Sebastian, Spain 4#IKERBASQUE, Basque Foundation for Science, María Díaz de Haro 3, 48013 Bilbao,
Spain
Abstract
Enzymatic treatments focused on oxidative enzymes, such as laccases,
have been proposed as an alternative to conventional methods to remove
a contaminant present in wastewater such as endocrine disrupters.
However, the use of enzymes in their soluble form limits their practical
application due to their non-reusability, sensitivity towards denaturing
agents and low stability. To overcome these drawbacks, immobilization of
enzymes is a suitable technique that can increase the stability, facilitate the
separation and reuse of enzymes, thus, enabling their cost-effective use in
continuous processes.
The aim of this work was to study the ability of immobilized crude laccase,
produced under semi-solid state fermentation (SSF) of Trametes pubescens,
to degrade BPA in aqueous solution. This biocatalyst was immobilized by
glutaraldehyde crosslinking prior to entrapment into Ca-alginate beads. At
optimal conditions (i.e. pH 5, 30 °C, 20 mg L−1 BPA and 1500 U L−1 laccase),
a BPA removal higher than 99% in 2 h was achieved. In addition, the
immobilized biocatalyst was able to remove the BPA at 20 mg L-1 in 10
successive catalytic cycles with a removal efficiency greater than 70% at
the end of the last cycle.
Keywords : Laccase, Bisphénol A, immobilisation, crosslinking, alginate
beads
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CP3.5 Performance of Commercial Enzymatic Preparation in
Lignocellulosic Biomass Hydrolysis
KERNANI Ridha#1, HADIOUCHE Dalila*2
#1Département de Génie des Procédés, Facultés des Sciences et Sciences
Appliquées,
Bouira University 2Laboratory of Management and Development of Natural Resources and Quality
Assurance
Bouira University
Abstract:
Enzymatic hydrolysis by a brewing enzyme and subsequent glucose
fermentation by baker’s yeast were evaluated for olive stones from 5 % to
15 % dry matter. Enzymatic hydrolysis resulted in an increase in glucose
concentration, giving final glucose yields near 65%. Fermentation of olive
stones hydrolysate resulted in the maximum ethanol produced (9.8 g/L).
Results showed that enzyme could effectively hydrolyze olive stone
pretreated with sulfuric acid as well as with NaOH without nutriment
addition, and yeast could ferment hydrolysate without nutrient addition.
Finally, results showed that olive stones are a suitable material for producing
ethanol.
Keywords: Enzymatic hydrolysis; Agro-industrial waste; Ethanol
fermentation; Yeast
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CP3.6 Valorisation des déchets végétaux pour la production de
cellulases à partir d’Aspergillus sp. (PRn) isolé localement.
CHEMLAL Radia 1,2, KHERAT Mohamed 2, BOUKAF Fatma1, MOKHNACHE
Meriem1, STIHI Loubna Zakia1, MAMERI Nabil 2
1 Département BCM, FSB-USTHB, BAB EZZOUAR, ALGER. 2 Laboratoire de bioengineering et génie des procédés, Département du Génie de
l’environnement, ENP, ALGER.
Résumé
De nos jours, il est devenu important de réduire notre dépendance aux
combustibles fossiles dont l’utilisation abusive a eu des conséquences
dramatiques sur l’environnement. Pour pallier ce problème, les biocarburants
semblent être une alternative très prometteuse comme une énergie renouvelable,
durable et économiquement rentable. Les déchets végétaux riches en cellulose
sont potentiellement la matière première idéale pour la production de
biocarburant. Ce dernier est produit par la transformation du glucose issu de
l’hydrolyse préalable de la cellulose. Cette hydrolyse peut être réalisée par voie
chimique ou enzymatique. L’hydrolyse chimique nécessite l’utilisation d’acides et
de températures élevées. Alors que l'hydrolyse enzymatique présente les
avantages de nécessiter une consommation énergétique plus faible et possède
un impact environnemental réduit.
C’est pour cette raison que de nombreux chercheurs s’intéressent à la recherche
de nouvelles souches capables de se développer rapidement sur des substrats
peu coûteux tout en produisant de grandes quantités de cellulases. L’objectif de
ce travail est de contribuer à la recherche de nouvelles souches cellulolytiques qui
pourraient être utilisées dans la production de cellulases. Neuf souches fongiques
ont été isolées et identifiées à partir de matériaux cellulosiques en décomposition.
Le criblage sur un milieu ne contenant que de la carboxyméthylcellulose comme
source de carbone a montré que toutes les souches isolées possédaient une
activité cellulolytique. Parmi les souches les plus productrices, Aspergillus sp. (PRn)
a été retenue pour la production de cellulases. Les fermentations sur milieux
solides ont montré que l’utilisation du son de blé comme substrat était préférable
à celui d’un déchet végétal. Nous avons constaté qu’Aspergillus sp. (PRn) produit
des quantités élevées de protéines avec un optimum de production de cellulases
à 40°C.
On conclut que l’utilisation efficace de déchets agricoles résout des problèmes
non seulement de l’environnement, mais aussi contribue à la promotion de la
valeur économique des produits agricoles.
Mots-clés: Cellulases, Aspergillus, valorisation des déchets végétaux.
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CP4.1 Isolement et screening des bactéries lipolytiques
BENHOULA Mohammed1, HAMMA Samir1, BENSAAD Mohamed Sabri2 ,AMGHAR Zahir1 , BOUDJELAL Aya3 ,AZZOUZ Zahra 1,MAIBECHE Rima1,
BOUICHE Celia1, BETTACHE Azzeddine1, BENALLAOUA Said1,
BOUCHERBA Nawel1
1 Laboratoire de microbiologie appliquée, Faculté des sciences de la Nature et de
la Vie Université de Bejaia
2Laboratoire physio-Toxicologie, Pathologie Cellulaire et Moléculaire-Biomolécules
(LPTPCMB), Université de Batna. 3Laboratoire de Biotechnologie Végétales et [email protected]
Résumé
La production d’huile d’olive représente environ 97% de la
production mondiale, cette production s’accompagne de l’apparition
des coproduits peu ou pas valorisés à l’heure actuelle. Un de ces produits
« Les margines » qui sont des effluents d’extraction d’huile d’olive, pose de
sérieux problèmes de pollution par leur concentration élevée en
matière organique et en polyphénols. L’objectif principal de cette
étude est la contribution à la biodégradation des margines via
certaines bactéries susceptibles d’être tolérantes à la toxicité des
polyphénols et productrices des lipases, l'isolement et la purification
des bactéries lipolytiques sont réalisés sur un milieu minimum minérale
additionné de tween 80. Le prélèvement des échantillons s’est fait à
partir de sites différents, effluents de Cevital, la boue du contour d’oued
Soummam et à partir d’un sol contaminé par les margines issu de
différentes huileries. Environ 30 souches sont isolées et ont montré une
activité lipolytique importante qui s’est manifestée par une zone
d'hydrolyse autour des colonies.
Mots-clés : Biodégradation, Margines, Isolement, Lipase
bactérienne, activité lipolytique
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CP4.2 Etude de la bioprospection de levures : criblage des activités
enzymatiques d'intérêt biotechnologique.
CHAIB Ibtissem2, DAKHMOUCHE-DJEKRIF Scheherazed 1, BENNAMOUN Leila2, AIT KAKI- EL HADEF ELOKKI Amel 2 , LABBANI Fatima Zohra Kenza1 et
NOUADRI Tahar2.
1 ENS Assia DJEBAR, Constantine. 2 Laboratoire de Génie Microbiologique et Applications (GMA).Université Frères
Mentouri (UFM), Constantine 1.
Résumé
Dans cette étude, nous nous sommes intéressées à l’étude du patrimoine
enzymatique chez des souches levuriennes locales. L'isolement des levures
productrices d’enzymes à intérêt industriel a été réalisé à partir de trois
échantillons à savoir le yaourt, les pelures de la pomme de terre et lemzeiet.
Ces niches microbiennes ont permis l’isolement de 80 souches. Parmi ces
dernières, 38 souches ont été sélectionnées selon la croissance rapide sur
YPGA à 30°C. Le potentiel enzymatique des isolats étudiés a été évalué pour
produire 09 activités différentes par la croissance des microorganismes sur
différents substrats. Les enzymes étudiées sont α-amylase, pectinase, lipase,
maltase, estérase, cellulase, protéase, laccase et uréase. Les résultats ont
montré que les souches les plus performantes pour chaque enzyme sont :P4
: α-amylase, Y38: cellulase, P28 : maltase , M31 : protéase, M3 : lipase, P5 :
laccase, M34: pectinase, P37: estérase et P4: uréase. L'identification des
cinq souches sélectionnées a été réalisée par l’étude des caractères
morphologiques et physiologiques. Les résultats ont révélé la capacité des
trois souches P5, P10 et Y38 de former le mycélium et à l’exception de P37
et M35, les quatre souches P5 , P10 ,M35 et Y38 ont une reproduction sexuée.
Mots-clés : lipase, maltase, estérase, laccase et uréase
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CP4.3
Optimization of Extracellular L-asparaginase production by
Streptomyces strain isolated in Algeria, using mathematical
Modeling.
CHERGUI Achour#1, TITOUCHE Yacine*2, HOUALI Karim#3
# Laboratoire de Biochimie Analytique et Biotechnologies LABAB. Université Akli
Mohand Oulhadj de Bouira-Université Mouloud MAMMERI de Tizi-Ouzou,
Abstract
L-asparaginase is an enzyme that hydrolyses the amino acid L-Asparagine
into aspartic acid and ammonia. As a medication, L-asparaginase is used
in chemotherapy to treat acute lymphoblastic leukaemia by depleting
circulating Asparagine and depriving tumor cells. Interest in Streptomyces
genus as potential producers of antibiotics and enzymes encouraged us to
investigate an isolated strain (CA01) from soft wheat bran. The Streptomyces
strain was characterized based on its morphological, biochemical and
molecular characteristics and selected due to a proved promising ability to
produce L-Asparaginase optimized in both solid and liquid media cultures.
The conditions of enzyme production were standardized according to a
one-factor-at-a-time (OFAT) experimental design. To obtain optimal
medium combination, a Box-Behnken Response Surface Methodology
(RSM) has been adopted by choosing the most influential factors. The
optimal conditions for the enzyme production were (g/l): L-Asparagine 10.7;
Glucose 2.7; starch 7, in based medium containing (g/l): K2HPO4 0.5; MgSO4,
7H2O 0.1, corresponding to an optimal enzymatic activity of 8.03 IU/ml at
27.83°C. The maximum production of enzyme was reached on the sixth day
of experiment. The ANOVA test (P value ˂ 0.05) and adjusted R2 values close
to the experimental R2 show that the obtained model of the active L-
Asparaginase of CA01 strain production is significant with the following linear
terms: temperature, substrate concentration, Glucose concentration and
their squared.
Mots-clés : L-asparaginase; Streptomyces ; Optimization; Box Behnken
Design; RSM.
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CP4.4 Optimisation de la production de l’enzyme protéase d’origine
actinomycétale
MANSOURI Nedjwa*#,BENSLAMA Ouided# , ARHAB Rabah#
# Laboratoire de Biotechnologie des Substances naturelles et Applications.
Département des sciences de la nature et de la vie, Université Larbi Ben M’Hidi,
Oum El Bouaghi
Résumé
Les protéases constituent l'un des groupes les plus importants d'enzymes
industrielles, représentant au moins 25% de la totalité des ventes d'enzymes,
les deux tiers des protéases produites commercialement étant d'origine
microbienne. Dans cette étude 11 souches d’actinomycètes ont été testées
pour leur activité protéolytique en procédant à un criblage primaire par leur
ensemencement sur les deux milieux gélose au lait et gélose à la gélatine.
Après 24 heures d’incubation à 30°C, le rapport de la zone hydrolysée
(mm)/zone de croissance (mm), a été calculé, les cinq souches SA12S17,
SA12S13, SA1S5, SA12S14 et SA12S18 ont présenté les rapports les plus élevés.
Afin d’optimiser la production de l’enzyme protéase, les cinq souches les
plus performantes ont été utilisées dans une expérience de production de
l’enzyme protéase, dans laquelle des fermentations ont été réalisées dans
trois milieux de composition différente, réglées chacunes à pH différents (pH
4, 7 et 9) et incubés pendant 5 jours à 30°C sous agitation continue à 180
tr/min. La souche SA12S18 donne le meilleur résultat dans le milieu I réglé à
pH 4 avec une valeur de 29,31 U/ml ce qui prouve que son activité
protéolytique est favorisée dans des pH acides, contrairement aux souches
SA12S16, SA12S13 et SA1S5 où la production de l’enzyme est favorisée par
un pH basique. Quant à la souche SA12S17 la meilleure activité
protéolytique a été observée dans le pH 7 dans le milieu II. L’effet de la
température sur la production de l’enzyme protéase a aussi été évalué
après incubation à différentes températures (30-50°C), il s’est avéré de
cette expérience que la production est nettement plus importante dans des
températures élevées pour les cinq souches étudiées.
Mots-clés : Protéase, actinomycètes, effet du milieu, effet du pH, effet de la
température
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CP4.5 Optimisation de la production de peroxydase des souches
d’actinomycètes isolées au niveau de la wilaya de Béjaia
MAIBECHE Rima1,2, LE ROES-HILL Marilize2, BENDJEDDOU Kamel1, PRINS
Alaric2, BOUICHE Cilia1 , AZZOUZ Zahra1, HAMMA Samir1, BEN HOULA
Mohammed1, AMGHAR Zahir1, BETTACHE Azzeddine1, BENALLAOUA Said1,
BOUCHERBA Nawel1*
1Laboratoire de Microbiologie Appliquée (LMA), Département de Microbiologie,
Faculté des Sciences de la Nature et de la Vie, Université de Bejaia, 06000, Bejaia,
Algérie. 2Institut de Biotechnologie et Microbiologie Appliquée, Université de la Péninsule du
Cape, Bellville, Afrique du Sud
Résumé
Les peroxydases sont des oxydoréductases qui catalysent l’oxydation d’une variété
de substrats organiques et inorganiques en utilisant le peroxyde d’hydrogène. Ces
enzymes sont produites par les plantes, les animaux et les microorganismes et
l’aptitude à oxyder plusieurs substrats leur a permis d’être utilisées dans plusieurs
applications biotechnologiques telles que: l’industrie du papier (pour remplacer
certains traitements chimiques, ou encore le blanchiment de papier), la
détoxification des eaux usées (par l’élimination du phénol et décontamination du
sol), la dégradation des colorants synthétique, la dégradation des phénols et des
polluants aromatiques. Dans le présent résumé, nous décrivons des souches
d’actinomycètes isolées à partir de plusieurs échantillons telluriques de la région de
Béjaia, et testées pour leur production de peroxydases. La production
peroxydasique des 5 meilleures souches sélectionnées est optimisée en variant la
période d’incubation (3, 5 et 7 jours), la température d’incubation (30 et 37°C), le
pH du milieu de culture (5.0, 6.0, 7.0 et 8.0) et la présence de différents inducteurs
dans le milieu de culture (bois, papier, alcool vératrique, acide férulique et déchet
de canola). La production maximale de peroxydase de toutes les souches est
enregistrée après 5 jours d'incubation à 37°C pour les souches S04 ; S19 ; S44 et S45
et à 30°C pour la souche S36 et à pH 7 pour les souches S04 ; S19 ; S36 et S44 et à
pH 6 pour la souche S45. La présence de l’acide férulique dans le milieu de culture
a induit la production de peroxydase par les souches S04 ; S44 et S45 tandis que le
papier et l’alcool vératrique ont induit la production peroxydasique des souches
S04 et S45, respectivement. La production peroxydasique des souches est
également induite par la présence du déchet lignocellulosique du canola à
différentes concentrations, les activités peroxydasiques maximales sont obtenues
avec une concentration de 0,5% de canola pour les souches S04 ; S36 et S45, 1% de
canola pour la S44 et 2% de canola pour la souche S19.
Mots-clés: Actinobactérie, peroxydase, optimisation, inducteurs, applications
biotechnologiques.
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CP4.6
Application of Pulsed field gel electrophoresis using XbaI
restriction enzyme to study clonal relatedness of Multidrug-
resistant E. coli isolates
BENAMEUR Qada 1, BEN-MAHDI Meriem-Hind 2, GERVASI Teresa3
1Nursing Department, Faculty of Sciences of Nature and Life, University of
Mostaganem, Algeria. 2Laboratory of Health and Animal Production, Higher National Veterinary School,
Algiers, Algeria. 3Laboratory of Food Microbiology and chemistry, Department of Biomedical and
Dental Sciences and Morphofunctional Imaging, University of Messina, Messina,
Italy.
Abstract
Background: Restriction enzymes are used in biotechnology to cut DNA into smaller
strands in order to study fragments length differences. Pulsed field gel
electrophoresis (PFGE) of DNA fragments obtained using different enzymes is a
powerful technique for identification the clonal origin of the isolates in an infectious
outbreak and for tracking the source, the route of transmission and dissemination
way of infection. There are nine restriction enzymes commercially available with an
8-bp recognition sequence. However, the choice of restriction enzyme to use for
DNA digestion is a critical variable in the PFGE process. This study aimed to
characterize two multidrug-resistant (MDR) E. coli isolates by PFGE method, using
XbaI restriction enzyme.
Material and Methods: Two previously characterized MDR E. coli isolates of poultry origin were
included in this study. The first strain was isolated from a pooled sample of the ovaries of broiler
breeders collected from a broiler breeder farm situated in Chlef province and the second one
was recovered from a sample of internal contents of broiler hatching eggs collected from a
commercial broiler hatchery located in Mostaganem province, which received eggs from
various provinces of western Algeria. Clonal relatedness was determined by PFGE using XbaI
restriction enzyme, isolated from the bacterium Xanthomonas badrii, according to standard
protocols. Plugs containing digested DNA were then loaded on agarose gels and run using
contour-clamped homogenous electric fields.
Results: One DNA banding pattern was obtained, by digestion of DNA with XbaI restriction
enzyme, for the two E. coli isolates. Digestion with XbaI produced DNA fragments with a size
smaller than 50-242 kb.
Conclusion: The implementation of this powerful molecular tool, by using XbaI
restriction enzyme, allowed us to reinforce the hypothesis of vertical transmission of
MDR E. coli from broiler breeders to their offspring.
Keywords: MDR E. coli, clonal relatedness, poultry, PFGE, XbaI restriction enzyme.
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CP4.7
Optimisation de la production de la polygalacturonase à intérêt
industriel par la levure Aureobasidium pullulans isolée de sol
aride saharien (El-M’gheir).
BENNAMOUN L. 1, DAKHMOUCHE S. 1, AIT-KAKI A. 1, LABBANI F-Z K. 1, NOUADRI
T. 1
1 Frères Mentouri University, Research Lab in Enzymatic Engineering, Depart. Of
Biochemestry – BMC, Constantine, Algeria
Résumé
Parmi les nombreuses enzymes, les industries montrent un intérêt grandissant
pour les pectinases qui offrent de nombreuses possibilités d’utilisation dans
différents secteurs industriels (IAA, textile, papeterie, …) et dont les domaines
d’applications ne cessent de s’accroître. Les enzymes pectinolytiques
occupent une position centrale avec 25% du marché global des enzymes.
Novenzymes (Danemark), Novartis (Suisse), Roche (Allemagne) et Biocon
(Inde) sont les principaux producteurs commerciaux de pectinases. En
Algérie, l’industrie des enzymes est totalement absente. Par ailleurs, les
déchets agro-industriels, riches en matières organiques, peuvent être
recyclés et transformés par les procédés biotechnologiques. Parmi ces
derniers, les fermentations en cultures submergées connaissent un regain
d’intérêt à travers le monde, puisqu’elles permettent une production
importante de diverses substances. Ainsi, l’objectif de cette étude est la
valorisation des déchets de tomates pour la production de la
polygalacturonase par la levure Aureobasidium pullulans. Ce substrat est
ciblé par sa richesse en glucides solubles (20.25%), en matière minérale
(5.83%) et en protéines (18.31%). L’étude montre que la levure
Aureobasidium pullulans donne une meilleure production en enzyme avec
une concentration de 4% en déchets de tomates. Le substrat inducteur est
le lactose à 1% entraînant une augmentation de l’enzyme de 642%. La
validation du modèle a permis d’obtenir une activité de la
polygalacturonase de 22.05 UI/ml, soit 5 fois plus élevé que dans les
conditions non optimisées. Ainsi, le milieu optimal permet une production
importante de la polygalacturonase sur un milieu à moindre coût.
Mots clés : Polygalacturonase, Aureobasidium pullulans, Déchets de
tomates, Optimisation.
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CP4.8
Recherche in silico de nouveaux inhibiteurs de la 1-désoxy-D-
xylulose 5-phosphate réducto-isomérase (DXR) : des agents
antimycobactériens potentiels
BOUCHERIT Hanane [a, b]* , MERZOUG Amina [a, b] , CHIKHI Abdelouahab
[a], BENSEGUENI Abderrahmane [a] , MOSBAH Asma[a]
[a] Laboratoire de biochimie appliquée, Département de biochimie et de biologie
moléculaire et cellulaire, Faculté des sciences naturelles et de la vie, Université des Frères
Mentouri, Constantine 1.
[b] Centre universitaire Abdelhafid Boussouf, Mila, Algérie.
Résumé
L’augmentation des cas de tuberculoses pharmaco-résistantes est un phénomène
réel, inquiétant et une préoccupation dans de nombreux pays. Le besoin
permanent de développement de nouveaux antibiotiques qui ciblent des
nouvelles voies est évident. En effet, cette situation encourage les recherches
contre la tuberculose, notamment avec le renforcement des liens entre la biologie
et l’informatique; dont une grande variété de logiciels sont à présent disponibles en
vue de regrouper, analyser et intégrer des données biologiques et médicales. Plus
spécifiquement, ces logiciels permettent de créer des modèles informatiques visant
à faire des prédictions et par là même favoriser les progrès en médecine. Le
docking moléculaire est une approche théorique qui permet la prédiction du mode
d’interaction d’un ligand avec son récepteur en donnant un éclairage
irremplaçable sur les interactions au niveau moléculaire. Dans ce contexte, la 1-
désoxy-D-xylulose 5-phosphate réducto-isomérase (DXR) est une enzyme essentielle
de la voie non-mévalonique de synthèse des isoprénoides, chez la plupart des
microorganismes pathogènes incluant Mycobacterium tuberculosis. Celle-ci est
plus particulièrement étudiée dans le cadre de la mise au point d’agents
antituberculeux.
Notre travail avait pour objectif d’acquérir des compétences en simulation
informatique, notamment le docking moléculaire par FlexX afin de contribuer au
développement in silico de nouveaux inhibiteurs plus puissants de la DXR: cible
thérapeutique potentielle lors de l'infection par Mycobacterium tuberculosis.
Dans cette étude nous avons réalisé un docking moléculaire par le logiciel FlexX sur
la cible 2Y1F, un DXR appartenant à M. tuberculosis, d’une collection des composés
issus de la PubChem, similaires des inhibiteurs référés FOM et FM6. Trois similaires:
CID-73440823, CID-87982598 et CID-14151807 avec des énergies d’interaction
égale à -50.506 Kj/mole, -53.877 Kj/mole et -47.824 Kj/mole respectivement, sont
considérer comme les meilleurs inhibiteurs théoriquement potentiels de la 2Y1F plus
affins et plus sélectifs que la FOM et FM6. Ces résultats aideront probablement au
développement d’un outil thérapeutique efficace pour lutter contre le
développement de la tuberculose.
Mots-clés: Tuberculose, Mycobacterium tuberculosis, Antituberculeux, DXR,
Docking moléculaire.
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CP5.1 Isolation and characterization of a novel tyrosinase produced by
Saharan soil Actinobacteria
HARIR Mohammed 1, 2, BENHAMED Nadjia2, DIB Soulef1, POGNI Rebecca3
# 1 1.Biology of Microorganisms and Biotechnology Laboratory, University of Oran 1
Ahmed Ben Bella, BP1524, Oran El Mnaouer, 31000 Oran, Algeria.
2 Department of Biotechnology, Faculty of Natural and Life Sciences, University of
Sciences and Technology Mohamed Boudiaf, Oran, Algeria. 3Department of Biotechnology, Chemistry and Pharmacy, University of Siena, 53100
Siena, Italy
Abstract
In the present study different actinomycete strains were collected and
isolated from Algerian Sahara soil with the aim to select novel enzymes with
promising features for biotechnological applications. The Ms1 strain was
selected, amongst the others, for its capability to produce melanin in
different solid media. Ms1 chromosomal DNA was sequenced and the strain
assigned to Streptomyces cyaneofuscatus sp. A tyrosinase (MW ∼ 30 kD)
encoding sequence was identified and the corresponding enzyme was
isolated and biochemically characterized. The tyrosinase showed the
highest activity and stability at a neutral and alkaline pH and it was able to
oxidize LDOPA at T = 55 °C and pH 7. The enzyme showed variable stability
in presence of various water-miscible organic solvents, while it was
inactivated by reducing agents. The tyrosinase activity was unaffected by
NaCl and enhanced by different cations. Furthermore, the enzyme showed
a higher specificity for diphenols than monophenols showing a higher
diphenolase than monophenolase activity.. Taken all together, these results
show that the enzyme displays interesting properties for biotechnological
purposes.
Keywords: Bacterial tyrosinase,soils, Biochemical characterization,
organic solvents , Streptomyces cyaneofuscatus ;
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CP5.2 Isolation and characterization of bacteria of the genera
Pseudomonas and Bacillus with enzymatic potential from a
volcanic soil of Ahaggar.
BENAISSA Asmaa#1,2, OUANKILLA Aicha*2, BEN BESSIS El-Hadja*2, HABIBI
Zaineb*2
1) #Laboratory of Plant Physiology, Department of Biology and Physiology of
Organisms, Faculty of Biological Sciences, University of Sciences and
Technologies of Houari Boumediene - El-Alia BP 16011 Bab Ezzouar Algiers,
Algeria2) Department of Biology, Institute of Science and Technology, Universitary Center
of Amine Elokkal ElHadj Moussa Eg. Akhamoukh, 11039 Sersouf, Tamanrasset,
Algeria
Abstract
The soil contains various types of bacteria, which play an important role in
biological functioning, but not only that, they can be a real source of
biomolecules. The work that we present is a bio-prospective study of a
volcanic soil in the region of Tahart (Ahaggar) in Tamanrasset, which aims
to research and characterize bacteria of the genus Bacillus and
Pseudomonas that produce exo-enzymes.
Therefore, different selective culture media were used (Cetrimide, Pseudo
Agar) for the isolation of Pseudomonas and a thermal pre-treatment was
carried out for the isolation of Bacillus on Plat Count Agar. The strains were
studied phenotypically through examination of Gram, catalase, oxidase,
sugar assimilation and identified by API gallery (BioMérieux, France).
Similarly, an enzymatic characterisation of these strains was carried out
according to standardised protocols by searching for amylase, lecithinase,
haemolysin, caseinase, pectinase and gelatinase.
Bacteria belonging to the genus Bacillus represent 30% of our results, while
those belonging to the genus Pseudomonas represent 70%. The results
showed a strong enzymatic activity up to 59% of the strains that could in vitro
produce extracellular enzymes, especially hydrolytic ones. In conclusion,
despite the acidity of our substrate, an interesting strain of enzyme-
producing bacteria has been selected and can be used for further studies
such as the purification of these enzymes and their physicochemical
analysis.
Keywords : Volcanic soil, Bacillus, Pseudomonas, enzymatic activity,
Ahaggar.
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CP5.3
Isolement et étude biochimique des enzymes amylolytiques
chez des souches d'actinomycètes telluriques isolées à partir de
la région de Souk Ahras
SAOUDI Boudjema *1-#2, HABERRA Soumaya#2, AYARI Adel*1, LADJAMA Ali#2
(*1) Laboratoire des Ecosystèmes Aquatiques et Terrestres (LEAT), Faculté des
Sciences de la Nature et de la Vie, Université Mohamed Cherif Messaadia, Route
de Annaba, BP 1553- Souk Ahras- 41000 Algérie.
(#2) Laboratoire de Biochimie et de Microbiologie Appliquée (LBMA).
Département de Biochimie, Faculté des Sciences, Université Badji Mokhtar BP12-
Annaba-23000 Algérie.
Résumé
Les enzymes occupent une place primordiale dans l’industrie alimentaire
particulièrement les amylases qui sont utilisées depuis l’antiquité en
biotechnologie surtout dans la production du jus riche en fructose, glucose
et maltose, ainsi, la panification. Dans ce travail de recherche, plusieurs
souches mésophiles, appartenant au groupe des actinomycètes ont été
isolées, ainsi, le criblage de leurs activités amylolytiques a été effectué. Les
résultats de recherche ont montré que la plupart des souches sont actives
sur l’amidon brut et hydrosoluble en milieu YST solide et liquide,
respectivement, par sécrétion des amylases. Cela a été mis en évidence
par un test semi quantitatif (test de l’iodine). Trois souches semblent être plus
actives par rapport aux autres souches et particulièrement la souche de
référence Streptomyces coelicolor A(3)2, c’est le cas des souches F222, S212
et S215. Cela a été confirmé par un test quantitatif -celui de Miller-
spécifique au réactif de DNS, qui permet la détection et la détermination
des sucres réducteurs issues de la réaction enzymatique du substrat
d’amidon. La souche F222 s’est montrée la plus active, celle-ci a fait l’objet
d’une étude plus approfondie. L’optimisation de la production de l’enzyme
par la souche sélectionnée a été effectuée par la méthode de culture
submergée (SBF) sur un milieu liquide (YST) à base d’amidon de maïs. La
purification des enzymes sécrétées sur milieu liquide a été réalisée par la
méthode de fractionnement par le sulfate d’ammonium. La caractérisation
physico-chimique de l’extrait brut (Température optimale, pH optimum,
thermo-stabilité, effet des sels,…etc) a été également effectuée et la
détermination des produits finaux de la réaction a été également menée
par la méthode de chromatographie sur couche mince (CCM).
Mots-clés: actinomycètes, amylases, purification, fractionnement et
caractérisation.
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CP5.4 Recherche de l’activité antibactérienne et enzymatique chez
des isolats d’Actinomycètes isolées à partir d’écosystème
extrême d’El Bayadh
AGUIS Hayat#1, BENREGUIEG Mokhtar1
#Laboratoire de Biotoxicologie, Pharmacognosie et Valorisation Biologique des
Plantes , Département de biologie, université de Saida Dr. Tahar Moulay, Algérie
Résumé
Les actinomycètes extrêmophiles sont également considérés comme les
meilleurs candidats dans le domaine de production des métabolites à
diverses applications biotechnologiques (la santé, l'alimentation, l’industrie
de détergents, la dépollution etc.). Dans ce travail l’objectif était la
détection de l’activité antibactérienne et enzymatique chez des isolats
d’Actinomycètes originaires des sols arides de la région d’Ain Loarak,
Sebkha de Bougtob et El Bayadh. Pour cela, le test d’activité
antibactérienne a été effectué sur 18 isolats d’actinomycètes envers deux
souches bactériennes (Staphylococcus aureus ATCC 25923, Listeria
monocytogenes ATCC15313). Sur cet ensemble, 14 isolats ont montré un
pouvoir inhibiteur contre Staphylococcus aureus alors que 8 seulement ont
présenté un pouvoir inhibiteur contre Listeria monocytogenes. En outre, le
screening de l’activité enzymatique des isolats a été réalisé par culture sur
des milieux améliorés à base de différents substrats (xylane, amidon,
kératine, caséine, cellulose). L’activité kératinolytique et protéolytique et
Amylolytique ont été remarquées chez tous les isolats, tandis que l’activité
cellulolytique a été remarquée chez 7 isolats. Une attention particulière a
été portée sur la souche A19 qui a montré la meilleure activité
xylanolytique pour produire son extrait. Une fermentation submergée de
l’isolat A19 a été lancée pendant 24h pour suivre la cinétique de la
production de la xylanase. L’activité a été détectée dans le milieu dès la
quatrième heure d’incubation avec un maximum à partir du 6h alors qu’une
diminution progressive de cette activité a été marquée au-delà de cette
période. Alors que l’analyse CCM de l’extrait a révélé l’existence de deux
substances très polaires.
Mots-clés : Actinomycètes extrêmophiles, activité antibactérienne, activité
enzymatique, xylanase, CCM.
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CP5.5 Activité protéolytique des actinomycètes de l’extrême
BENHAMICHE Houria#1, ZERIZER Habiba#2,
#BIOQUAL INATAA-Université Frères Mentouri Constantine 1
Résumé
Les protéases représentent la plus grande partie des enzymes industrielles,
elles trouvent leur application en industries pharmaceutiques, alimentaires,
textiles et en bioremédiation. Deux tiers des protéases produites
industriellement sont d'origine microbienne.
Le choix des actinobactéries comme source de protéases est motivé par
leur abondance dans la nature et leur adaptation à des environnements
extrêmes ce qui leur confère la particularité de produire des métabolites à
des propriétés intéressantes.
Cinquante-quatre souches appartenant aux actinobactéries sont isolées à
partir de sols arides du sud algérien et six de deux de sources thermales aux
températures avoisinant les 60°C: Hammam Silal de Bejaia et Hammam
ksana de Bouira.
L’isolement des actinobactéries est réalisé sur deux milieux : Bennet et ISP2
par la technique de suspensions-dilutions, la purification est effectuée par
la méthode des stries sur les mêmes milieux d’isolement. La morphologie des
souches est examinée par un microscope optique à objectif X40. Après
screening de l'activité protéolytique sur un milieu de gélose au lait écrémé,
27 souches se sont révélées productrices de protéases, leur température
optimale de croissance est à 45°C.
Cette première partie du travail a permis d’isoler des actinobactéries
protéolytiques thermotolérants. L’exploration d’autres environnements sera
une suite pour l’obtention de nouvelles souches extrêmophiles.
Mots-clés : Actinobactéries, Protéases, extrême
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CP5.6 Screening de lacoagulase chez des bactéries isolées d’un lac
salé Algerien
LENCHI Nesrine 1,2, KEBBOUCHE-GANA Salima 2, KHEMILI-TALBI Souad 2,
AKMOUSSI-TOUMI Sihem 2
1Department of Natural and Life Sciences, Faculty of Sciences, University Algiers 1
BenYoucefBenkhedda, Algiers, Algeria 2Bioinformatics, Applied Microbiology and Biomolecules Laboratory, Faculty of
Sciences, University of M'HamedBougara of Boumerdès. Algeria.
[email protected] / [email protected]
Résumé
Les bactéries vivantes dans des milieux extrêmes comme les fortes
concentrations en sel ont une grande importance biotechnologique en
tant que sources d'enzymes halophiles. Les enzymes qui dérivent des
microorganismes halophiles ou halotolérants sont dotées de
caractéristiques structurales et d'un pouvoir catalytique unique et cela dans
des conditions de forte teneur en sel. Certaines de ces enzymes ont été
décrites comme étant actives et stables dans plus d'une condition extrême.
L'est de l'Algérie présente de nombreux écosystèmes, y compris des
environnements aquatiques hypersalins. Parmi eux le Chott Tinsilt, un lac salé
peu profond avec une concentration en sel de plus de 200 g/L.
Le but de ces travaux est d’une part, d’explorer, par méthodes culturales,
la biodiversité bactérienne habitant ce milieu extrême, et d’autre part, de
rechercher l’intérêt biotechnologique et industriel de ces souches isolées
par le biais de l’enzyme coagulase qu’elles produisent.
L'analyse de la séquence d'ADNr 16S a montré que les souches isolées
appartiennent aux genres Halomonas, Staphylococcus, Salinivibrio,
PlanococcusetHalobacillus.
Parmi les sept isolats identifiés, quatre souches A1, A2, A4 et B5 présentaient
des activités enzymatiques de type coagulase. A notre connaissance,
l'activité coagulase n'a jamais été rapportée chez les bactéries halophiles
et cela en présence de 20 et 25% de NaCl tel est le cas dans ce présent
travail.
Ces souches sont, en effet, de bonnes candidates comme sources de
nouvelles enzymes à potentiel biotechnologique car elles peuvent être
utilisées dans différents procédés industriels qui requièrent une forte
concentration en sel.
Mots-clés : Chott, bactéries, enzymes halophiles, coagulase,
biotechnologie.
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CP5.7 Production, activité et stabilité de protéases synthétisées par
une souche thermotolérante d’actinobactérie.
RACHEDI Kounouz1,2, MERADJI Meriem1,2, MAHDJOUB Nour El Houda2,
ZERIZER Habiba1,2, BOUGHACHICHE Faiza1,2, KHARROUB Karima1,2
1. Laboratoire de Recherche de Biotechnologie et Qualité des Aliments (BIOQUAL)2. INATAA, Université Frères Mentouri Constantine 1, Constantine, Algérie
Résumé
Les actinobactéries ; un groupe bactérien ubiquitaire, regroupent des
genres rares, dont le développement de certains, nécessite des conditions
physico-chimiques extrêmes et se distinguent donc par la synthèse de
protéases présentant un profil industriellement pertinent, intéressant les
industriels de divers domaines, notamment celui de l’agro-alimentaire.
Dans ce cadre, une souche actinobactérie (SMNH) est testée pour son
aptitude à produire des protéases sur une gélose au lait écrémé. Les
paramètres de production (température et pH) sont déterminés et l’activité
protéolytique est mesurée sur milieu liquide au lait écrémé, selon la
technique de Tsuchida et al. (1986). La température et le pH d’activité de
l’extrait enzymatique obtenu, ainsi que sa stabilité sous différentes valeurs
de température et de pH, sont déterminés. Par ailleurs, la souche SMNH est
partiellement caractérisée.
La souche SMNH présente une activité protéolytique optimale quand elle
est cultivée à Ph 7 sous une température de 37°C. L’extrait enzymatique
présente un optimum d’activité à 70°C et à pH 12, avec une thermostabilité
dans un intervalle allant de 30 à 80°C pendant une heure, alors que, dans
un intervalle de pH de 7 à 12, l’enzyme garde plus de 50% de son activité,
ceci permet de la classer parmi les protéases alcalines thermostables.
L’observation microscopique de la souche SMNH, par la technique de la
lamelle, révèle des filaments portant des spores séparées disposées en
alternance de part et d’autre des filaments constituant le mycélium aérien.
Cet aspect particulier permet de la rapprocher à deux genres présentant
la même disposition sporale, à savoir Thermoactinomyces et
Micromonospora.
En perspectives, deux axes doivent compléter ce travail ; une
caractérisation chimiotaxonomique et moléculaire de la souche SMNH ;
ainsi qu’une étude approfondie des protéases synthétisées.
Mots-clés : Activité protéolytique, actinobactéries, production et activité
optimales, stabilité.
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CP5.8
Actinobactéries thermophiles isolées à partir d’une eau
thermale Algérienne : une source d’alpha amylase
thermostable
LEFAIDA Cherifa(1,2), MEDJMEDJ Maya(2), BOUDEMAGH Allaoueddine (2)
(1)Laboratoire de génie microbiologique et application, Département de
microbiologie. Faculté des sciences de la nature et de la vie (2) Département de microbiologie. Faculté des sciences de la nature et de la vie
Université des frères Mentouri Constantine1, Constantine-Algérie
Résumé
Les actinobactéries thermophiles isolées à partir des eaux thermales sont
très mal étudiées et nécessitent des investigations approfondies afin de
comprendre leurs aptitudes métaboliques uniques. A cause de l’intérêt
biotechnologique avéré des enzymes thermostables, les chercheurs se sont
orientés ces dernières années, vers l’étude des capacités de production à
partir de ces bactéries thermophiles. L'alpha-amylase est une enzyme
industrielle, qui coupe les bandes alpha 1-4 glycosidiques internes de
l'amidon et d'autres polysaccharides pour produire plusieurs produits tels
que le glucose et le maltose. Cette enzyme commerciale est la plus
largement utilisée. Plusieurs travaux de recherche tentent de manipuler
génétiquement certains microorganismes afin de produire de l'alpha-
amylase avec de nouvelles caractéristiques telles que la thermosabilité.
Cependant certains écosystèmes extrêmes, peuvent offrir des producteurs
microbiens adaptés à différentes conditions comme la chaleur élevée.
Dans ce contexte, cette étude a été consacrée à l’isolement par méthodes
microbiologiques conventionnelles, d’actinobactéries thermophiles à partir
de la source thermale de TLEGHMA située dans l’Est Algérien. Tous les isolats
obtenus ont été caractérisés morphologiquement et par des méthodes
physiologiques. Ces caractères ont permis de les assigner au genre
Streptomyces. Parmi ce lot, deux isolats ont présenté des capacités à
produire une amylase thermostable. Ces deux actinobactéries ont été
identifiées par le séquençage du gène de l’ARN16s comme étant
Streptomyces albidoflavuset Streptomyces fulvissimus à 99% de similarité.
Ces deux souches sont capables de produire de l’amylase thermostable qui
résiste à une température allant jusqu’à 70°C. Cette enzyme est également
résistante à un pH de 11.Ces résultats montrent que les actinobactéries et
spécialement les Streptomyces thermophiles provenant des eaux chaudes,
sont une source d’amylase thermostable.
Mots-clés : Actinobactéries, sources thermales, amylase thermostable.
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CP6.1 Isolement, Screening et caractérisation de levures productrices
d’enzymes à intérêt biotechnologique
LABBANI Fatima-Zohra Kenza1*, DAKHMOUCHE Schehrazed1*, BENNAMOUN
Leila2*, AIT-KAKI Amel3*, NOUADRI Taher2*
(*)Laboratoire de Génie Microbiologique et Applications, Faculté des Sciences de
la Nature et de la Vie, Université des frères Mentouri Constantine 1.
(1) Ecole Normale Supérieure Assia Djebar de Constantine.
(2) Département de Biochimie et Biologie Moléculaire et Cellulaire, Faculté des
Sciences de la Nature et de la Vie, Université des frères Mentouri Constantine 1.
(3) INATAA, Université des frères Mentouri Constantine 1.
Résumé:
Les amylases et les protéases sont parmi les enzymes les plus importantes
en biotechnologie. Elles ont des applications potentielles dans divers
domaines tels que, l’industrie des détergents, l’industrie du textile, la
papeterie, les biocarburants, l’industrie alimentaire et pharmaceutique. Les
levures se sont révélées être une excellente source d’enzymes. Elles sont
généralement considérées comme une microflore importante de
nombreux produits alimentaire, en raison de leur capacité à se développer
sur des substrats riches en protéines, lipides, sucres et acides organiques. Il
est important d’isoler des levures qui produisent des enzymes hydrolytiques
pour développer un nouveau procédé de synthèse des produits d’intérêt
biotechnologique.
Dans le présent travail, 15 souches de levures ont été isolées à partir des
pelures de betteraves achetées d’un marché local à Constantine (Algérie).
Les isolats ont fait l’objet d’une caractérisation morphologique (forme des
cellules et aspect des colonies sur milieu solide) ainsi qu’un séquençage de
la région D1/D2 du gène ARNr 26S. Les activités amylase et protéase ont été
testées sur les milieux AAM (Amylase Activity Medium) et SMA (Skimmed Milk
Agar), respectivement. Parmi les 15 levures isolées, 03 souches ont présenté
la capacité à produire des activités enzymatiques. Les souches actives
appartiennent aux genres : Candida, Hanseniaspora et Pichia. De plus, la
souche de Candida sp. s’est révélée à la fois productrice d’amylase et de
protéase. Par leurs activités enzymatiques, nous pouvons conclure que les
souches de levures Candida sp., Hanseniaspora sp., et Pichia sp. présentent
un intérêt biotechnologique.
Mots-clés: Levures, screening, enzymes, intérêt biotechnologique.
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CP6.2 Highlighting of cellulolytic, saccharolytic, pectinolytic activity
and scereening of antibio-resistants prokaryotic species
involved in soft rots of vegetables, collected from different arid
areas in the North-eastern of Algeria. Preliminary study
MERIBAI Abdelmalek1 , DIAFAT Abdelouaha1, BACHENE Abderahmane2
1 Laboratoire de Caractérisation et de valorisation des Ressources Naturelles
(L.C.V.R.N)
Faculté SNV- STU- Université Al Bachir Al Ibrahimi - Bordj Bou Arreridj – Algerie 2 La Faculté ST- Université Al Bachir Al Ibrahimi - Bordj Bou Arreridj - Algerie boratoire
de Caractérisation et de valorisation des Ressources Naturelles (L.C.V.R.N)
Abstract
Backround: Vegetable harvests, tubers and fruits, by their richness in proteins,
vitamins, mineral and trace elements, provide a balanced diet. They are divided
into leafy vegetables, seed vegetables, fruit vegetables and root vegetables
(tubers). Among these, we find the potato (Solanum tuberosum), carotte), carrot
(Daucus carota), rich in proteins and vitamins respectively, are the most sensitive to
the prokaryotic enzymes attacks responsible for soft rot. Aim: various negative and
positive Gram prokaryotic species, soft rot responsible targeting tubers and fruits,
which causes high economic losses in the fields during harvest and / or during
storage/transportation. Aim Study aimed the Highlighting of enzymes and screening
of bacterial species, most responsible for soft rot of vegetables, from five plant
species, Potato (Solanum tuberosum), Carrots (Daucus carota), Turnip (Brassica
rapa), Beet (Beta vulgaris) and Zucchini (Cucurbita pepo). Collected from local
markets in arid areas (Bordj Bou Arreridj province) North-Eastern of Algeria. Results:
Isolation, purification on five selectifs bacteriological medias: (LPGA, King A, King B,
Citrimide- Agar and nutitritif agar), bacteriological, biochemical characterization
by conventional micro-galleries, and API 20E, API 20NE, API 10S (Bio-Merieux) and
physiological by cultures on extreme-hostile media at various pH, and various media
different concentrations of (NaCl), culture and / or incubation at various
temperatures, allowed the selection of eight prokaryotic species with a Gram
negative, potentially saccharolytic, exhibiting a very pectinolytic/cellulotic power
(in vivo). After Api-Web software identification, these procaryotic species were:
Erwinia sp, Erwinia carotovora, Pseudomonas sp) (carrots), Pseudomons fluorescens,
Enterobacter cloaceae, Ralstonia sp (potatoes), Pasteurella sp (Turnip),
Pseudomonas fluorescens from betterave. Establishment of strains antibiograms
profils showed: 78% were resistant 15% sensitive and 08% intermediate.
Conclusion: Study allowed the establishment, by cryopresesrvation, of a strains bank
collection for most involved in soft rot phenomena (Collection will be used for further
studies). However, the intensity of enzymatic activities in different hostile
environment and the rate of poly-antibiotic-resistant of strains deserves further, more
detailed Enzymatic genetic, para-genetic and molecular investigations.
Keywords: Vegetable, Enzymes, Soft Rot, Procaryot, Antibiogram.
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CP6.3
Inhibition de l’activité de la xanthine oxydase par les extraits de
feuilles et de l’écorce de Fraxinus angustifolia
MEDJAHED Zineb#1, ATMANI –KILANI Dina*2, ATMANI djebbar#3
# Laboratoire de Biochimie appliquée, Université Abd Rahmane Mira Bejaia, Algerie,
Résumé
Fraxinus angustifolia, une plante appartenant à la famille des Oléacées très
répondues dans le bassin méditerranéen est largement utilisée comme anti-
inflammatoire, anti-diarrhéique, et comme un agent favorisant la circulation
sanguine. Notre travail se propose d’évaluer l’effet inhibiteur de l’alpha amylase de
5 extraits des feuilles et de l’écorce de F. angustifolia. L’activité de la xanthine
oxydase est traduite par la mesure de la formation de l’acide urique à 295 nm. La
xanthine déshydrogénase et la xanthine oxydase (XD/XO) catalysent la
transformation de l’hypoxanthine et la xanthine en acide urique, la formation de
l’acide urique a été mesurée par min pendant 6 min, cette réaction a été exprimée
sous forme d’une cinétique linéaire, la réaction a été arrêtée par l’ajout de
l’inhibiteur de la xanthine oxydase (20 µl), suite à cela la concentration minimale
inhibitrice CI50 a été calculée. L’allopurinol, la catéchine, l’acide caféique, l’acide
gallique et la quercetine (50 µg/ml) ont été utilisés comme inhibiteurs de référence.
L’activité de la xanthine oxydoréductase a été calculée à partir de la moyenne
des pentes des spectres des trois essais obtenus. Le pourcentage d’inhibition de la
xanthine oxydase a été calculé pour chaque extrait. Les résultats obtenus montrent
que tous les extraits ont exercé un effet inhibiteur significatif (p < 0,001) sur l’activité
de la XO. Les pourcentages d’inhibition obtenus montrent que l’extrait aqueux
d’acétate d’éthyle de feuilles semble avoir l’effet inhibiteur le plus puissant, parmi
tous les extraits testés, avec un pourcentage de 43,93% ± 3,45, suivi par l’extrait
d’acétate d’éthyle de feuilles, puis l’extrait chloroforme de l’écorce (32,90% ± 5,65
; 30,75% ± 3,38). Ces valeurs restent inférieures à celles rapportées pour les standards
testés (acide caféique 100% ; acide gallique 62,16% ± 8,54 ; quercetine 98,66% ±
5,54), excepté la catéchine qui inhibe la xanthine oxydase de 28,84% ± 6,76. Les
extraits ont étés analysés par HPLC, plusieurs flavonoïdes ont été caractérisés.
D’après les résultats présentés, les feuilles et l’écorce de F. angustifolia peuvent
contenir les composés phénoliques suivants: Oleuropeine, Acide coumarique,
Apegénine, Pinoresinol, Lutoline, Acide sinapique, Tyrosol, Quercetine, Acide
benzoique, Acide cinnamique, 1.3 DHN, et Acide caféique.
Mots-clés : Fraxinus angustifolia, Xanthine oxydase, Allopurinol, HPLC, Quercetine
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CP6.4
Cc-PDE,new purified phosphodiesterase enzyme from snake
venom with biotechnological impact
KIHELI Hamida#1, CHERIFI Fatah *2, LARABA-DJEBARI Fatima#3
#Laboratoire De Biologie Cellulaire Et Moleculaire, Université des sciences et
technologies HOUARI BOUMEDIENNE
Abstract
Blockade of membrane receptors or neutralization of intracellular pathways, are
two primary modes of platelet inhibition. Both of them have proven benefits in the
prevention and resolution of atherothrombotic events. With regard to intracellular
inhibition, phosphodiesterases are fundamental for platelet function.This report
focuses on an exo-nucleotidase isolated from Cerastes cerastes venom acting as
a potent platelet inhibitor and aim to report pharmacological properties of this
phosphodiesterase accentuating the beneficial contribution of the enzyme to
biotechnology
Cc-PDE purification from Cerastes cerastes venom was yielded by three successive
chromatographies; G75-Sephadex size exclusion, DEAE exchange
chromatography and affinity using Sildenafil (PDEs’ specific inhibitor). Molecular
weight was demonstrated by SDS-PAGE.Flow cytometry assay was assessed to
proved inhibition of P-selection secretion inducing platelet aggregation by
Thrombin Receptor Activator Peptide-6 (TRAP-6)agonist . Aggregomtetry test was
also realized by stimulating platelet aggregation by ADP and ATP.
It was revealed that these proteins involve in certain biological pathways as a
regulator of hemostatic disorders by adopting inhibitory effect against blood
coagulation and platelet aggregation.Furthermore, Cc-PDE also showed a potent
anti-platelet effect inhibition of ADP- and ATP-induced aggregation by hydrolyzing
ADP and ATP , due to its ADPase and ATPase activities .This leads to inactivation of
platelets and this blockade may be irreversible. Flow cytometry assay proved further
in addition to platelet clumping-prohibition, Cc-PDE also dose-dependently
reduced the P-Selectin release from platelet α-granules, when the platelet
activation was induced by a positive control TRAP-6 (Thrombin Receptor-Activating
Peptide-6) Functionally, Cc-PDE exhibited both in vivo and in vitro coagulation
blockade.
Taking together, all these pharmaco-biological properties may confer to Cc-PDE
interesting features to be a good therapeutic tool for thromboembolic diseases
according to side effects of synthesized molecules .Furthermore ,identification of
molecules from natural sources, notably snake venoms, affecting platelet
aggregation at specific stage could have potential in developing new drug leads
in the treatment of haemostatic disorders.
Keywords : Cc-PDE,Anticoagulant,Antiplatelet aggregation, ADPase
,biotechnology.
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CP6.5
Rôle potentiel des inhibiteurs de protéases d’Echinococcus
granulosus dans l’action anticancéreuse: apport de l’analyse
protéomique
ZEGHIR-BOUTELDJA Razika #1, TOUIL-BOUKOFFA Chafia #2
# Laboratoire de biologie cellulaire et moléculaire, Faculté des sciences
biologiques, université des sciences et technologies Houari Boumediene, Bab
Ezzouar, Alger, Algérie. 1Faculte des sciences de la nature et de la vie et des sciences de la terre,
Département des sciences biologiques, université Akli Mohand Oulhadj, Bouira,
Algérie. 2 Faculté des sciences biologiques, université des sciences et technologies Houari
Boumediene, Bab Ezzouar, Alger, Algérie.
Résumé
Les inhibiteurs de protéases sont caractérisés par un potentiel thérapeutique
contre le cancer. Il est admis que les protéases sont hautement impliquées
dans les processus de carcinogenèse et la progression du cancer.
Récemment, de nombreux inhibiteurs de protéases d’origine végétale ont
été introduits dans les essais cliniques humains. L’échinococcose kystique
est une parasitose endémique en Algérie, elle est causée par le stade
larvaire d’un cestode. Dans cette optique, plusieurs études ont rapporté
l’action anti-tumorale des éléments constituant le kyste hydatique
notamment le liquide hydatique, les protoscolex, les produits de sécrétion
et d’excrétion du protoscolex. Au cours de cette parasitose, des systèmes
d’interaction sont établis entre la larve hydatique et les tissus de l’hôte. Ces
systèmes impliquent des enzymes d’origine parasitaire sous le contrôle des
inhibiteurs de protéases afin de contrecarrer la réponse immunitaire mise en
jeu par l’hôte. Dans ce contexte, l’analyse du protéome de liquide
hydatique de la larve hydatique a permis d’identifier plusieurs inhibiteurs de
protéases exprimant des propriétés anti-tumorales, nous citons : ‘’Kunitz
type protease inhibitor’’, ‘’Serpin A3-1‘’, ‘’ Serpin A3-3’’, ‘’Serpin A3-5’’,
‘’Serpin A3-6‘’, ‘’Serpin A3-7’’ et l’Ag B. Il en ressort et ce, d’après nos
résultats, que le kyste hydatique pourrait constituer une source importante
de bio-molécules à intérêt thérapeutique. Des études plus approfondies et
analytiques sont nécessaires dans la compréhension des mécanismes
d’action anti-tumorale de de ces bio-molécules.
Mots-clés: Echinococcus granulosus, liquide hydatique,
protéomique, inhibiteurs de protéases, cancer.
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CP6.6
Cc-5’NTase a promising alternative biomolecule in CD73 lack-
related immunodeficiency
SAOUD Samah1,2, CHERIFI Fatah1, LARABA-DJEBARI Fatima1*
1USTHB, Faculty of Biological Sciences; Laboratory of Cellular and Molecular Biology,
BP 32 El Alia, Bab Ezzouar, Algiers, Algeria. 2Faculty of Sciences, Department of Natural and Life Sciences, University of Algiers
1, Algeria
[email protected], [email protected]
Abstract
Background: The ecto-5'-nucleotidase (CD73) is widely expressed in immune cells.
It is involved in the production of immunosuppressive adenosine which can
influence different immune cells through the specific adenosine receptors (1, 2). A
hereditary deficiency of CD73 occurs in a variety of immunodeficiency diseases (3).
“Cc-5’NTase” is a 70 kDa 5’-nucleotidase purified from Cerastes cerastes venom
through three chromatographic steps.
Objectives: This study aimed to characterize the snake venom 5’-nucleotidase Cc-
5’NTase and its comparison with human CD73.
Materials and methods: Nucleotidase activities were determined by assessment of
orthophosphate release from different nucleotides. The docking of Cc-5'NTase and
CD73 with their substrates was achieved using the Glide and SwissDock tools.
Pairwise comparison of Cc-5'NTase and CD73 was performed using Muscle and
Fatcat tools.
Results: As CD73, Cc-5’NTase efficiently hydrolyzes mono-, di- and triphosphate
adenylated nucleotides. Furthermore, molecular docking showed that CD73 and
Cc-5’NTase exhibited similar affinities to adenylated nucleotides appearing in their
similar interaction energies. Additionally, a significant similarity was also observed
when both nucleotidases’ structure was compared. Moreover, sequences’
alignment showed many conserved residues between both enzymes. Blast analysis
confirms and also reveals high similarity between snake venom and human
nucleotidases.
Obtained results also showed that Cc-5’NTase is not toxic even at a high dose of 5
mg/kg body weight, by ip route.
Conclusion: Taken together, obtained results open perspectives to Cc-5’NTase
pharmacological use as alternative diagnostic and/or therapy tool in the case of
immunodeficiency related to CD73 lack.
Keywords: Snake venom, Cc-5’NTase, CD73, molecular docking,
immunodeficiency References:
1. Adam T, Mathes A, Isayev O, Philippov PP, Werner J, Karakhanova S, Bazhin AV (2019) In Vivo Immunological Effects of CD73
Deficiency. Cell Physiol Biochem 52: 1192-1202.
2. Resta R, Yamashita Y, Thompson LF (1998) Ecto-enzyme and signaling functions of lymphocyte CD73. Immunol Rev 161: 95-109.
3. Tomita M (1999) Biochemical background of paroxysmal nocturnal hemoglobinuria. Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Molecular
Basis of Disease 1455: 269-286.
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CP6.7 Etude de l’activité enzymatique bioinsecticide de souches
d’actinomycètes isolées à partir de différents sols contre le
Tribolium Rouge de la farine (Tribolium castaneum)
BENSLAMA Ouided*#, MANSOURI Nadjwa# , ARHAB Rabah#
# Laboratoire de Biotechnologie des Substances naturelles et Applications,
Département des sciences de la nature et de la vie, Université Larbi Ben M’Hidi,
Oum El Bouaghi
[email protected], [email protected]
Résumé
La sécurité alimentaire est devenue un intérêt mondial. Cependant, les
pertes de récolte se produisent chaque année en raison des insectes
nuisibles. Parmi les insectes ravageurs, le tribolium de la farine (Tribolium
castaneum) qui attaque les céréales stockés et d'autres produits
alimentaires causant des pertes économiquement importantes. Les
pesticides chimiques sont très efficaces pour lutter contre les insectes
nuisibles. Cependant, ils polluent l'écosystème et affectent la santé
humaine. Les activités insecticides des microbes ont été largement étudiées
et de nombreux rapports indiquent que les actinomycètes jouent un rôle
important dans la lutte contre les insectes. Dans cette étude 26 souches
d’actinomycètes ont étaient isolées à partir de quatre échantillons de sol
de différentes régions. Les isolats ont fait l’objet d’une étude de leur aptitude
à produire des substances bioinsecticides par l’utilisation de leurs extraits
extracellulaires après une fermentation sous conditions contrôlées. Pour
cela ils ont été soumis à un test préliminaire contre la saumure de crevette
Artemia salina. Les résultats du test d’artémia montrent que sur 26 souches
testées, 09 isolats ont été nettement plus efficaces et sembles être dotés
d’une forte activité insecticide, et ont été pris pour un test ultérieur contre T.
castaneum. Les résultats du test de biocontrôle contre T. castaneum
montrent que la souche SAS13 possède l’activité insecticide la plus
importante suivie par les souches SAS19, SDS16, SBS31 et SDS8 avec des taux
de mortalité de 53,33, 53,33, 53,33 et 40%, respectivement. Pour toutes les
souches, le temps médian de mortalité (LT50) est atteint après 72h de
l’expérience. Par conséquent, ces isolats assignés au genre Streptomyces
peuvent être des bactéries très prometteuses dans le domaine du
biocontrôle contre le ravageur des céréales T. castaneum.
Mots-clés : Actinomycètes, bioinsecticide, biocontrôle, Artemia Salina,
Tribolium castaneum
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CP6.8 Anti-platelet aggregation activity of a novel phospholipase A2
an enzyme purified from Vipera lebetina snake venom: New tool
with biotechnological applications
Kadi-Saci Amel#1 AND Laraba-Djebari Fatima*2
#*USTHB, Faculty of Biological Sciences; Laboratory of Cellular and Molecular
Biology, BP 32 El-Alia, Bab Ezzouar, Algiers, Algeria.
Abstract
Antiplatelet therapy reduces atherothrombotic risk and has therefore become a
cornerstone in the treatment of cardiovascular disease. Aspirin, adenosine
diphosphate P2Y12 receptor antagonists, glycoprotein IIb/IIIa inhibitors, and the
thrombin receptor blocker are effective antiplatelet agents but significantly
increase the risk of bleeding. Advances in the understanding of thrombus formation
and hemostasis, over the last years, led to the discovery of various new receptors
and signaling pathways of platelet activation. Several new antiplatelet agents with
high antithrombotic efficacy with moderate effects on regular hemostasis have
been developed yielding to promising results in preclinical and early clinical studies.
In our study, we focus on new antiplatelet molecules purified from snake venom.
Snake venoms are known to be natural libraries of biomolecules targeting
hemostasis and thrombosis. Some components act directly on factors involved in
blood coagulation. Several active molecules including phospholipase A2, serine
proteinases (SVSPs), metalloproteinases (SVMPs)/disintegrins, snake C-type lectin-
like proteins (snaclecs) were investigated for their pro- and antithrombotic/
coagulant effects. Phospholipases A2 (PLA2s) are important enzymes present in
snake venoms and are related to a wide spectrum of pharmacological effects. The
present study describes the isolation and enzymatic characterization of a new PLA2
from Vipera lebetina snake venom. The enzymatic and biological profiles of this
phospholipase A2 named VLPLA2 were determined using different substrates. Its
anticoagulant as well as platelet aggregation activities were also tested. The
venom was fractionated in three chromatographic steps: gel filtration, ion
exchange and reversed phase. VLPLA2 presents a molecular mass of 14 kDa and
specific activity about 440.36 U/mg. Acting on plasma coagulation, VLPLA2 showed
an anticoagulant activity and was able to inhibit human platelet aggregation
induced by ADP. The antiplatelet effect of VLPLA2 involved the AMP/GMPc
signaling pathway which was modulated by the high level of NO induced by
VLPLA2. Obtained results suggest that VLPLA2 has a potent antiplatelet activity and
may be used not only for the treatment and prevention of thrombosis, but also in
biotechnological applications as research probes and drug leads.
Keywords : Venom, Phospholipase A2, Antiplatelet, Hemostasis
LES JOURNÉES SCIENTIFIQUES NATIONALES SUR LES ENZYMES À APPLICATIONS BIOTECHNOLOGIQUES EN ALGÉRIE
Ecole Nationale Supérieure de Biotechnologie “Toufik Khaznadar”Ville universitaire Ali Mendjeli
Constantine - Algériehttp://ensbiotech.edu.dz/
em@il: [email protected]