etude de l’activité antibactérienne de quelques isolats

REPUBLIQUE ALGERIENNE DEMOCRATIQUE ET POPULAIRE

MINISTERE DE L’ENSEIGNEMENT SUPERIEUR ET DE LA

RECHERCHE SCIENTIFIQUE

UNIVERSITE LARBI BEN M’HIDI– OUM EL-BOUAGHI

FACULTE DES SCIENCES EXACTES ET DES SCIENCES DE LA NATURE ET DE

LA VIE

DEPARTEMENT DES SCIENCES DE LA NATURE ET DE LA VIE

Mémoire présenté pour l’obtention du diplôme de Master en Sciences biologiques

Option : Microbiologie Appliquée

N° d’ordre :…………

N° de série :…………

Thème

Présenté par :

ANANOU Amira

Devant le jury :

Président : Mr DEROUICHE. M.C.B Université Larbi Ben M’hidi Oum El-Bouaghi.

Rapporteur : Mr HAMAMES M. M.A.A Université Larbi Ben M’hidi Oum El-Bouaghi.

Examinateur : Mr DJABALLAH C. M.A.A Université Larbi Ben M’hidi Oum El-Bouaghi.

Année Universitaire: 2017 - 2018

Etude de l’activité antibactérienne de quelques

isolats actinomycétales

Remerciements

Avant tous je remercie ALLAH le tout puissant de m'avoir aidé à

surmonter toute les difficultés lors de mes études et ce ne sont pas ces quelques

mots qui exprime mes sentiments les plus sincères. Je tiens en premier lieu à

exprimer mes sincères remerciements à mon encadreur Mr HAMAMES M

maitre assistante à l’Université LARBI BEN M’HIDI pour avoir dirigé ce travail,

pour son aide, ses précieux conseils, sa compréhension et son soutien moral

lors de la rédaction de ce manuscrit; et mon examinateur Mr DJABALLAH

Maitre assistante à l’Université LARBI BEN M’HIDI pour son aide, ses

orientations et ses corrections sérieuses pour ce travail.

J’exprime à monsieur le Docteur DEROUICH K, maitre de conférence Les toutes

mes reconnaissances, d’avoir accepté précédé ce jury. Je le remercie infiniment

et sincèrement. Ainsi j'adresse mes sincères remerciements aux tous les

enseignants du département des Sciences Biologique; les chefs et les

techniciennes de laboratoire Microbiologique de l'Université LARBI BEN

M’HIDI. Enfin je remercie ma famille : mes parents pour leurs soutiens sans

faille, parfois inquiets mais toujours compréhensifs, tout au long de ces années,

ainsi que mon frère, mes sœurs, oncles, et tantes pour leurs soutiens affectifs et

moraux. Pour tous ceux qui ont contribué à la réalisation de ce mémoire, d’une

manière directe ou indirecte.

Dédicace

Dédicace

Je Dédie ce mémoire

A mes cher parent ma mère et mon père

Pour leur patience, leur amour, leur soutien et leur

Encouragement

A mon cher fiancé nadhir

A mes sœurs chaima, ritadj, arwa

A mon frère amir

A tous mes amies et amie qui sont chers : ilhem,

chahrazed

Sommaire

Liste des figures

Liste des tableaux

Liste des photographiques

Table des matières

Page

Introduction 01

Chapitre 1 : Généralités sur les actinomycètes

1. Généralités 02

2. Caractéristiques 02

2 .1. Caractéristiques morphologiques 02

2.2. Caractéristiques physiologiques 03

3. Ecologie 03

4. Classification 03

5. Cycle de développement 04

6. Formation du mycélium 04

7. Formation des spores 05

7.1. Endospores 05

7.2. Exospores 05

Chapitre 2 : Matériel et méthodes

1. Origine des souches actinomycétales 06

2. La recherche de l’activité antibactérienne (technique des cylindres d’agar) 06

2.1. Repiquage des souches actinomycétales 06

2.2. Préparation des souches tests 06

Chapitre 3 : Résultats et discussion

1. Résultats de la technique des cylindres d’agar 08

Conclusion et perspectives 12

Références bibliographiques 13

Annexes

Résumé

Abstract

Liste des figures

N° Titre Page

01 Cycle de développement des Streptomyces sur milieu solide. 04

02 Schéma représentatif de la technique des cylindres d’agar. 07

03 Représentation graphique des pourcentages des isolats actinomycétales

ayant une activité antibactérienne vis-à-vis des souches tests utilisées. 09

04 Représentation graphique de l’activité des isolats actinomycétales vis-à-vis

de chaque souche test utilisée. 10

Liste des tableaux

N° Titre Page

01 Classification de la classe des Actinobacteria. 03

02 Souches bactériennes utilisées pour le test d’activité. 06

03 Les diamètres des zones d’inhibitions obtenus dans la technique des

cylindres d’agar. 08

Liste des photographiques

N° Titre Page

01 et 02 Activités des souches B7, D1 II et B3 vis-à-vis de Citrobacter freundii

(ATCC 8090). 11

03 et 04 Activités des souches SA2 III et E10 vis-à-vis de Staphylococcus aureus

(ATCC 25923). 11

05 et 06 Activités des souches D1 II, ZC7, A9 et C1 vis-à-vis de Escherichia coli

(ATCC 25922). 11

Introduction

Introduction

1

Le sol héberge différents types de microorganismes. Les actinomycètes sont l'un

des grands groupes de la population du sol. Ils représentent presque 10 à 50% de la

communauté microbienne totale. Numériquement, ils sont moins dominants que les

bactéries et plus dominants que les champignons (Silini, 2012).

Ce sont des bactéries filamenteuses et ramifiées. Ces aspects morphologiques

fondamentaux ont constitué durant de nombreuses années les critères essentiels de

reconnaissance. Ils sont actuellement insuffisants pour définir le groupe des actinomycètes,

très largement diversifié dans ses nombreux genres et espèces (Leclerc et al., 1977).

Les actinomycètes apparaissent comme de précieux auxiliaires de l'environnement

grâce à la variété des biodégradations qu'ils effectuent (Pelmont, 1993). Ils sont aussi la

source de la plupart des antibiotiques utilisés en médecine aujourd’hui (Prescott et al.,

2011).

Dans ce cadre, notre objectif est de déterminer l’activité antibactérienne de

certaines souches d’actinomycètes isolées à partir du sol de la retenue collinaire d’Ourkis.

Généralité sur les

actinomycètes

Généralité sur les actinomycètes

2

1. Généralités

Waksman divise en quatre grandes catégories l’histoire des actinomycètes

(Boudmaghe, 2007) :

La première période de (1874-1890) est celle de la découverte de leur rôle dans la

pathologie ;

La seconde période (1900-1919) se rapporte à la mise en évidence et à l’étude des

actinomycètes du sol, avec les travaux de Kraisky, de Cohn, de Waksman et de

Curtis ;

La troisième période (1919-1940) au cours de laquelle une meilleure connaissance des

germes a été acquise grâce aux recherches de Waksman, de Lieske, de Krassilnikov ;

La dernière époque historique, enfin, est celle des antibiotiques produits par les

actinomycètes. Elle commence en 1940 et le nom de Selman Waksman lui est

indissolublement lié.

Les actinomycètes sont des bactéries à Gram positif qui tendent à former des filaments

ramifiés jusqu’à un véritable mycélium. Les filaments peuvent être très courts ou très

développés. Le diamètre varie de 0,5 µm à 2 µm. La fragmentation des filaments donne

parfois des formes coccoïdes. Les spores peuvent être isolées ou en chainettes. Dans le cas

des Actinoplanaceae les spores mobiles ou non sont dans un sporange (Larpent et Larpent,

1985).

Ils ont une vraie importance pour le domaine de la biotechnologie en tant que

producteurs d'une pléthore de métabolites secondaires bioactifs ayant de vastes applications

industrielles, médicales et agricoles. Les actinomycètes produisent la majorité des

antibiotiques naturels (Barka et al., 2016).

2. Caractéristiques

2 .1. Caractéristiques morphologiques

Les caractères morphologiques principalement utilisés dans la classification des

actinomycètes sont (Silini, 2012):

La présence de l’importance et la disposition des hyphes du mycélium du substrat ou

du mycélium aérien ;

La présence de spores, leur mobilité, leur disposition sur les hyphes et leurs formes.


3

La présence des structures particulières comme les sporanges, les sclérotes ou

synnemata.

2.2. Caractéristiques physiologiques

Les principaux caractères physiologiques utilisés en taxonomie des actinomycètes sont

(Zerizer, 2014) :

Les optimales du pH et de la température de croissance ;

La sensibilité au chlorure de sodium et aux antibiotiques ainsi qu’à certains agents

chimiques; L'utilisation de sources carbonées et azotées ainsi que la dégradation de

certains polymères tels que l'amidon, la caséine et la gélatine ;

La production de mélanine.

3. Ecologie

Les actinomycètes sont des microorganismes ubiquitaires que l’on rencontre dans la

plupart des niches écologiques. La grande majorité est d’origine tellurique et c’est à partir du

sol que ces bactéries peuvent coloniser de nombreux biotopes: air, composts, eaux, fourrages,

fumiers, grains de céréales, systèmes d’air climatisé, poussière de maison, foin et pailles,

résidus fibreux de canne à sucre, pollen des plantes et bien d’autres substrats (Boudjelal,

2012).

4. Classification

Les actinomycètes appartiennent au règne des Procaryotes, à la division des Firmicutes

et à la classe des Actinobacteria, contenant l’ordre des Actinomycetales. La classe des

Actinobacteria se présente dans ce tableau suivant (Loucif, 2011) :

Tableau 01 : Classification de la classe des Actinobacteria.

Sous-classe Ordre Famille

Acidimicrobidae Acidimicrobiales Acidimicrobiaceae

Rubrobacteridae Rubrobacteriales Rubrobacteraceae

Coriobacteridae Coriobacteriales Coriobacteriaceae

Sphaerobacteridae Sphaerobacteriales Sphaerobacteraceae

Actinobacteridae Actinobacteriales


4

5. Cycle de développement

Les actinomycètes ont un cycle de développement complexe (figure 1), il débute par la

germination d’une spore, qui donne naissance à un mycélium primaire formé d’hyphes qui se

ramifie. Le développement du mycélium du substrat vers la partie superficielle donne le

mycélium "secondaire" ou aérien, les extrémités des hyphes aériens se différencient pour

former des spores, qui sont des agents de dissémination (Boudjelal, 2012).

Figure 1: Cycle de développement des Streptomyces sur milieu solide (Boudjelal, 2012).

6. Formation du mycélium

Le mycélium de substrat des actinomycètes varie en taille, en forme et en épaisseur, sa

couleur varie du blanc ou pratiquement incolore au jaune, brun, rouge, rose, orange, vert ou

noir. Généralement, le mycélium aérien est plus épais que le mycélium du substrat.

(Dhanasekaran et Jiang, 2016).


5

7. Formation des spores

Il y’a deux types principales de spores des actinomycètes :

7.1. Endospores

C’est une réorganisation du cytoplasme avec la formation d’une nouvelle paroi dans

l’hyphe. Elles sont caractéristiques du genre Thermoactinomyces (Kitouni, 2007).

7.2. Exospores

Elles naissent de la formation de parois transversales à partir des hyphes existantes.

Une subdivision supplémentaire est également réalisée selon la présence.

Ainsi, la formation d’exospores par fragmentation d’hyphes avec enveloppe est la plus

fréquente et se retrouve notamment chez Actinoplanes et Streptomyces.

La formation d’exospores par fragmentation d’hyphes du substrat sans enveloppe se

rencontre avec Micromonospora. Les conidies peuvent, suivant les groupes, être produites

isolément (Micromonospora), deux à deux longitudinalement (Microbispora), en courtes

chaines (Actinomadura), et en longues chainettes (Streptomyces). Les chainettes de spores

peuvent être ramifiées ou non, droites, sinuées ou en spirales de plus, elles peuvent être

rayonnantes autour d’hyphes sporophores (Streptoverticillium) (Kitouni, 2007).

Matériel et méthodes


6

1. Origine des souches actinomycétales

19 souches d’actinomycètes isolées à partir du sol de la retenue collinaire d’Ourkis ont

été sélectionnées pour le test de l’activité antibactérienne vis-à-vis de 5 souches tests en

utilisant la technique des cylindres d’Agar.

2. La recherche de l’activité antibactérienne (technique des cylindres d’agar)

2.1. Repiquage des souches actinomycétales

Les 19 souches d’actinomycètes ont été repiquées à la surface du milieu ISP5 à 5% de

NaCl par des stries serrés afin d’obtenir un tapis microbien. Les boites sont par la suite

incubées pendant 14 jours à 30°C.

2.2. Préparation des souches tests

L’activité antibactérienne des isolats actinomycétales est recherchée contre les

bactéries tests suivantes (Tableau 02):

Tableau 02 : Souches bactériennes utilisées pour le test d’activité.

Souches bactériennes Gram des souches Code des souches

Salmonella typhimurium Négatif (ATCC 1331101)

Citrobacter freundii Négatif (ATCC 8090)

Pseudomonas aeruginosa Négatif (ATCC 27853)

Escherichia coli Négatif (ATCC 25922)

Staphylococcus aureus Positif (ATCC 25923)

Pour chaque bactérie test, un inoculum est réalisé à partir d’une culture de 24 heures.

Une suspension bactérienne est préparée dans l’eau physiologique stérile puis comparée au

standard (0,5 McFarland) et en fin ensemencée sur une gélose Mueller Hinton par un

écouvillon stérile trempé dans la suspension bactérienne.

La technique des cylindres d’agar consiste à déposer, sur les boites contenant de la

gélose Mueller Hinton déjà ensemencée par les souches tests, des cylindres de gélose de 6mm

de diamètre prélevés à partir des cultures jeunes des souches d’actinomycètes.

Les boites préparées sont placées par la suite au réfrigérateur à 4°C pendant 4 heures

pour permettre une bonne diffusion des substances actives. Les boites sont ensuite incubées à

37°C pendant 24 (Boughachiche et al., 2012).


7

Après l’incubation, un résultat positif ; c’est-à-dire présence d’une activité

antibactérienne, se traduit par l’apparition d’une zone de lyse au tour des cylindre d’Agar. Le

diamètre de la zone d’inhibition est mesuré à l’aide d’une règle graduée.

Figure 02 : Schéma représentatif de la technique des cylindres d’agar.

Zone où la croissance des

bactéries est inhibée Zone où les bactéries se

développent normalement

Boite de

Pétri

Cylindre

d’agar

Culture de la

souche test

sur Muller-

Hinton

Mesure du diamètre de

la zone d’inhibition

Résultats et

discussion

Résultats et discussion

8

1. Résultats de la technique des cylindres d’agar

Les diamètres des zones d’inhibitions vis-à-vis des différentes souches tests sont

regroupés dans le tableau 03 :

Tableau 03 : Les diamètres des zones d’inhibitions obtenus dans la technique des

cylindres d’agar.

Isola

ts

acti

nom

ycéta

les

Souches tests

Cit

robacte

r

freu

ndii

AT

CC

8090

Salm

on

ell

a

typh

imu

riu

m

AT

CC

13311

Pse

udom

on

as

aeru

gin

osa

AT

CC

27853

Esc

heri

ch

ia

coli

AT

CC

25922

Sta

ph

ylo

coccu

s

au

reu

s

AT

CC

25923

Sa2 III - - - - 30mm

A9 15mm - - 35mm -

E9 17mm - - - -

C1 - - - 16mm -

C3 - - - - -

B4 - - - - -

E6 - - - 20mm -

D1 I 35mm - - 55mm -

SA2 II - - - - 30mm

B3 24mm - - - -

B2 - - - - -

C8 - - - - -

E8 - - - 30mm -

B7 14mm - - - -

E10 - - - - 16mm

A10 - - - - -

ZC7 17mm - - 25mm -

D3 - - - - -

D1 II 0,2mm - - 30mm -

À partir de l’ensemble des résultats mentionnés dans le tableau 03, on peut conclure

que :


9

Sur l’ensemble des 19 isolats actinomycétales testés, 13 isolats présentent au moins

une activité antibactérienne vis-à-vis des souches tests utilisées ; soit un taux de

64,42% ;

Parmi les isolats actinomycétales ayant une activité antibactérienne, 4 ont une

double activité ; c’est-à-dire vis-à-vis de deux souches tests utilisé. Ceux sont A9,

D1 I, ZC7 et D1 II ;

Figure 03 : Représentation graphique des pourcentages des isolats actinomycétales ayant

une activité antibactérienne vis-à-vis des souches tests utilisées.

Les souches A9, E9, D1 I, B3, B7, ZC7, D1II présentent une activité

antibactérienne vis-à-vis de la souche Citrobacter freundii (ATCC 8090) dont le

diamètre le plus grand est donné par la souche D1 I (35mm);

Les souches A9, C1, E6, D1 I, E8, ZC7, D1 II présentent une activité

antibactérienne vis-à-vis de la souche Escherichia coli (ATCC 25922) dont le

diamètre le plus important est donné par la souche D1 I (55mm);

Les souches SA2 II, SA2 III et E10 présentent une activité antibactérienne vis-à-vis

de la souche Staphylococcus aureus (ATCC 25923) dont le diamètre le plus

important est donné par les deux souches SA2 II et SA2 III (30mm) ;

64,42%

35,58%

Isolats ayant une activité

antibactérienne

Isolats n'ayant pas une

activité antibactérienne


10

Aucune activité antibactérienne n’a été déterminée vis-à-vis des deux souches

Salmonella typhimurium (ATCC 13311) et Pseudomonas aeruginosa (ATCC

27853).

Figure 04 : Représentation graphique de l’activité des isolats actinomycétales vis-à-vis de

chaque souche test utilisée.

En comparant les diamètres d’inhibition donnés par les 4 souches actinomycétales

ayant une double activité, on peut dire que les molécules antibactériennes produites

par ces souches sont plus efficaces sur la souche Escherichia coli (ATCC 25922)

par rapport à la souche Citrobacter freundii (ATCC 8090). En d’autre terme, ce

résultat montre que la souche Citrobacter freundii (ATCC 8090) résiste mieux aux

molécules antibactériennes produites par rapport à la souche Escherichia coli

(ATCC 25922) ;

Parmi les 19 souches d’actinomycètes testées, 10 montrent une activité vis-à-vis

des bactéries tests à Gram négatif alors que 3 uniquement montrent une activité

vis-à-vis de la souche test à Gram positif. Autrement dit, les isolats actinomycétales

ayant une activité vis-à-vis de la souche Staphylococcus aureus (ATCC 25923) ne

montrent aucune activité vis-à-vis des 4 souches tests Gram négatif utilisées.

0

5

10

15

20

25

30

35

40

Pou

rcen

tage

%

Isolats actinomycétales


11

Photographies 01 et 02 : Activités des souches B7, D1 II et B3 vis-à-vis de Citrobacter

freundii (ATCC 8090).

Photographies 03 et 04 : Activités des souches SA2 III et E10 vis-à-vis de Staphylococcus

aureus (ATCC 25923).

Photographies 05 et 06 : Activités des souches D1 II, ZC7, A9 et C1 vis-à-vis de

Escherichia coli (ATCC 25922).

Conclusion

et

perspectives

Conclusion et perspectives

12

L’étude de l’activité antibactérienne de 19 isolats actinomycétales vis-à-vis de 5

souches tests (Citrobacter freundii (ATCC 8090), Escherichia coli (ATCC 25922),

Salmonella typhimurium (ATCC 13311), Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853)

et Staphylococcus aureus (ATCC 25923)) nous a permis de conclure que :

64,42% des isolats présentent au moins une activité antibactérienne vis-à-vis des

souches tests utilisées. Parmi ces isolats, 4 ont une double activité ; c’est-à-dire vis-à-

vis de deux souches tests utilisé. Ceux sont A9, D1 I, ZC7 et D1 II ;

36,84% des isolats présentent une activité antibactérienne vis-à-vis de la souche

Citrobacter freundii (ATCC 8090);


Escherichia coli (ATCC 25922);


Staphylococcus aureus (ATCC 25923);

Aucune activité antibactérienne n’a été déterminée vis-à-vis des deux souches

Salmonella typhimurium (ATCC 13311) et Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853).

A partir de ces résultats, nous pouvons proposer comme perspectives les points suivants :

Des études supplémentaires pour l’identification des molécules bioactives secrétées

par les souches isolées.

Identification des souches actinomycètes isolées par techniques de biologie

moléculaire.

Optimiser la production des molécules à intérêt.

Références

bibliographiques

Références bibliographiques

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Annexe

Annexes

Annexes :

Les composants des milieux de culture :

Milieu ISP5

Glycérol 10g

L-Asparagine 1g

K2HPO4 1g

Solution saline 1ml

Eau distillée 1000ml

Agar 20g

pH= 7.4

Eau physiologique

Chlorure de sodium 9g


Milieu Muller Hinton

Extrait de viande 38g

Hydrolysat acide de caséine 17,5g

Amidon 1,5g

Agar 16g


pH=7.3

Résumés

Résumé

19 isolats d’actinomycètes ont été utilisées pour étudier leur activité antibactérienne,

vis-à-vis de 5 souches tests (Citrobacter freundii (ATCC 8090), Escherichia coli (ATCC

25922), Salmonella typhimurium (ATCC 13311), Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853)

et Staphylococcus aureus (ATCC 25923)) par la technique des cylindres d’agar. Les résultats

montrent que 64,42% des isolats présentent au moins une activité antibactérienne vis-à-vis

des souches tests utilisées. 36,84% des isolats présentent une activité antibactérienne vis-à-vis

de la souche Citrobacter freundii (ATCC 8090) tandis que 36,84% présentent une activité

antibactérienne vis-à-vis de la souche Escherichia coli (ATCC 25922). Seulement 15,78% des

isolats présentent une activité antibactérienne vis-à-vis de la souche Staphylococcus aureus

(ATCC 25923) alors qu’aucune activité antibactérienne n’a été déterminée vis-à-vis des deux

souches Salmonella typhimurium (ATCC 13311) et Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853).

Mots clés : actinomycètes, activité antibactérienne, molécules bioactives, souches tests.

Abstract

19 isolates of actinomycetes were used to study their antibacterial activity against 5

test strains (Citrobacter freundii (ATCC 8090), Escherichia coli (ATCC 25922), Salmonella

typhimurium (ATCC 13311), Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853) and Staphylococcus

aureus (ATCC 25923)) by the agar roll technique. The results show that 64.42% of the

isolates have at least one antibacterial activity to the test strains used. 36.84% of the isolates

showed antibacterial activity against the strain Citrobacter freundii (ATCC 8090) while

36.84% exhibited antibacterial activity against the strain Escherichia coli (ATCC 25922).

Only 15.78% of the isolates showed antibacterial activity against the Staphylococcus aureus

strain (ATCC 25923) whereas no antibacterial activity was determined for both strains

Salmonella typhimurium (ATCC 13311) and Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853).

Key words: actinomycetes, antibacterial activity, bioactive molecules, test strains.

Nom: Ananou

Prénom: Amira Date de soutenance : 18 / 06 / 2018

Etude de l’activité antibactérienne de quelques isolats actinomycétales

Résumé

19 isolats d’actinomycètes ont été utilisées pour étudier leur activité antibactérienne, vis-à-vis

de 5 souches tests (Citrobacter freundii (ATCC 8090), Escherichia coli (ATCC 25922), Salmonella

typhimurium (ATCC 13311), Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853) et Staphylococcus

aureus (ATCC 25923)) par la technique des cylindres d’agar. Les résultats montrent que 64,42% des

isolats présentent au moins une activité antibactérienne vis-à-vis des souches tests utilisées. 36,84%

des isolats présentent une activité antibactérienne vis-à-vis de la souche Citrobacter freundii (ATCC

8090) tandis que 36,84% présentent une activité antibactérienne vis-à-vis de la souche Escherichia coli

(ATCC 25922). Seulement 15,78% des isolats présentent une activité antibactérienne vis-à-vis de la

souche Staphylococcus aureus (ATCC 25923) alors qu’aucune activité antibactérienne n’a été

déterminée vis-à-vis des deux souches Salmonella typhimurium (ATCC 13311) et Pseudomonas

aeruginosa (ATCC 27853).

Mots clés : actinomycètes, activité antibactérienne, molécules bioactives, souches tests.

Président : Mr DEROUICHE K. M.C.B Université Larbi Ben M’hidi Oum El-Bouaghi.

Rapporteur : Mr HAMAMES M. M.A.A Université Larbi Ben M’hidi Oum El-Bouaghi.

Examinateur : Mr DJABALLAH C. M.A.A Université Larbi Ben M’hidi Oum El-Bouaghi.

etude de l’activité antibactérienne de quelques isolats

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