Hépatites ViralesPuissance Antivirale &
Résistance aux Inhibiteurs Spécifiques
Stéphane Chevaliez
Centre National de RéférenceDes Hépatites B, C et delta
Laboratoire de Virologie & INSERM U955Hôpital Henri Mondor
Université Paris-EstCréteil
• Analogues Nucléos(t)idiques– Lamivudine (Zeffix)– Adefovir (Hepsera)– Entecavir (Baraclude)– Telbivudine (Sebivo)– Tenofovir (Viread)
• Direct Acting Antivirals (DAAs)– Antiprotéases
. Boceprevir
. Telaprevir
– Antipolymérase
– Anti-NS5A
– Inhibiteurs de cyclophilline
Hépatites Virales : puissance antivirale & résistance aux inhibiteurs spécifiques
Molécules Disponibles en 2010 ou en Développement
ATU
Antiprotéases VHC
Raney et al., J Biol Chem 2010, 285(30): 22725-731.
Hépatites Virales : puissance antivirale & résistance aux inhibiteurs spécifiques
Rehermann and Nascimbeni, Nat Rev Immunol. 2005, 5(3): 215-29.
Cibles d’Action des InhibiteursHépatites Virales : puissance antivirale & résistance aux inhibiteurs spécifiques
±
Réduction de l’ADN du VHB après 1 an de Traitement par Analogues*
-8
-7
-6
-5
-4
-3
-2
-1
0
ADV1
10 mgADV2
30 mgLAM3 LdT3 ETV4 TDF5
-3,5
-4,8-5,5
-6,5 -6,9-6,4
*Données issues d’études indépendantes, ne permettant pas de comparaisons(populations différentes, valeurs initiales de charges virales et méthodes de quantifications de l’ADN du VHB différentes)
Patents AgHBe-positfs
1Hepsera [RCP]; 2Marcellin et al., N Engl J Med 2003, 348: 808-16; 3Sebivio [RCP]; 4Baraclude [RCP]. 5Heathcote et al., AASLD 2007, abstract LB6; Fontana R.J., Gastroenterology 2009, 136(2):389-92.
Rédu
cton
de
l’AD
N d
u V
HB
(Log
10)
Hépatites Virales : puissance antivirale & résistance aux inhibiteurs spécifiques
Réduction de l’ADN du VHB après 1 an de Traitement par Analogues*
-8
-7
-6
-5
-4
-3
-2
-1
0
ADV1
10 mgLAM2 LdT3 ETV4 TDF5
-3,7
-4,0
-5,2 -5,0-4,7
*Données issues d’études indépendantes, ne permettant pas de comparaisons(populations différentes, valeurs initiales de charges virales et méthodes de quantifications de l’ADN du VHB différentes)
Patents AgHBe-négatfs
1Hepsera [RCP]; 2Sebivio [RCP]; 3Baraclude [RCP]. 4Marcellin et al., AASLD 2007, abstract LB2; Fontana R.J., Gastroenterology 2009, 136(2):389-92.
Hépatites Virales : puissance antivirale & résistance aux inhibiteurs spécifiques
Rédu
cton
de
l’AD
N d
u V
HB
(Log
10)
Réduction de l’ADN du VHB après 1 an de Traitement par Analogues*
-8
-7
-6
-5
-4
-3
-2
-1
0
ADV1
10 mgLAM2 LdT3 ETV4 TDF5
-3,7
-4,0
-5,2 -5,0-4,7
*Données issues d’études indépendantes, ne permettant pas de comparaisons(populations différentes, valeurs initiales de charges virales et méthodes de quantifications de l’ADN du VHB différentes)
Patents AgHBe-négatfs
1Hepsera [RCP]; 2Sebivio [RCP]; 3Baraclude [RCP]. 4Marcellin et al., AASLD 2007, abstract LB2; Fontana R.J., Gastroenterology 2009, 136(2):389-92; Woo et al., Gastroenterology 2010, 139(4):1218-29.
Hépatites Virales : puissance antivirale & résistance aux inhibiteurs spécifiques
Rédu
cton
de
l’AD
N d
u V
HB
(Log
10)
Molécule Phase Dose DuréeMédiane/moyenne de
diminuton de l’ARN VHC (Log10)
Telaprevir III 750 mg q8h 14 jours -4.4
Boceprevir III 400 mg td 7 jours -1,6
TMC435 II 200 mg qd 7 jours -4,1
Danoprevir (RG7227) II 200 mg q8h 14 jours -3,8
Vaniprevir (MK-7009) II 700 mg bid 8 jours -4.7
BI201335 II 240 mg qd 14 jours -4,0
Narlaprevir II 400 mg bid 7 jours -4,2
BMS-650032 Ib 300 mg bid 3 jours -3,3
ACH-1625 Ib 600 mg bid 4,5 jours -3,9
GS-9256 Ib 200 mg bid 3 jours -2,8
Efficacité Antivirale des Anti-NS3Hépatites Virales : puissance antivirale & résistance aux inhibiteurs spécifiques
Molécule Phase Dose DuréeMédiane/moyenne de
diminuton de l’ARN VHC (Log10)
Inhibiteurs Nucléosidiques
R7128 II 1500 mg bid 14 jours -2,7
IDX184 II 100 mg qd 3 jours -0,7
Inhibiteurs non-nucléosidiques
GS-9190 II 40 mg bid 8 jours -1,4
Filibuvir II 300 mg bid 8 jours -2,1
ANA598 II 800 mg bid 3 jours -2,9
BI207127 II 800 mg q8h 3 jours -3,1
VCH-759 II 400 mg td 10 jours -1,7
ABT-333 II 600 mg bid 2 jours -1,5
VX-222 Ib 750 mg bid 3 jours -3,2
MK-3281 Ib 800 mg bid 7 jours -1,3 (1a), -3,8 (1b)
Efficacité Antivirale des Anti-NS5BHépatites Virales : puissance antivirale & résistance aux inhibiteurs spécifiques
Molécule Phase Dose DuréeMédiane/moyenne de
diminuton de l’ARN VHC (Log10)
Inhibiteurs de NS5A
BMS 790052 II 100 mg qd 1 jour -3,3
AZD7295 Ib 233 mg q8h 5 jours -2,1 (G1b)
Inhibiteurs de Cyclophiline
Alisporivir (DEBIO-025) II 1200 mg bid 14 jours -3,6
SCY-465 Ib 900 mg qd 15 jours -2,2
NIM 811 II 600 mg bid 14 jours None
Efficacité Antivirale des Anti-NS5A et des Inhibiteurs de Cyclophiline
Hépatites Virales : puissance antivirale & résistance aux inhibiteurs spécifiques
• Définition– Sélection de variants viraux portant des
substitutions amino acidiques responsables d’une diminution d’efficacité antivirale de la molécule par altération de sa cible
• Conséquences– Echecs thérapeutiques
. Primaires (non-réponse)
. Secondaires (échappements virologiques)
RésistanceHépatites Virales : puissance antivirale & résistance aux inhibiteurs spécifiques
Pawlotsky et al., Gastroenterology 2008, 134: 405-15.
Traduction de la RésistanceHépatites Virales : puissance antivirale & résistance aux inhibiteurs spécifiques
Pawlotsky et al., Gastroenterology 2008, 134: 405-15.
Durée du traitement
Cha
rge
Vira
le (L
og10
UI/m
L)
0
1
2
3
4
5
6
ALAT (UI/L )
1 Log10
20
100
180
260
Inhibiteurs spécifiques
RésistanceGénotypique
Echap
pemen
t Viro
logiqu
e
Echap
pemen
t Bioc
himiqu
e
Ré-ascension de la charge virale
Augmentaton de l’actvité sérique
des transaminases
Emergence d’une résistance génotypique
Temps sous traitement
Idéal
Bon
Mauvais
Quand doit Intervenir le Clinicien ?Hépatites Virales : puissance antivirale & résistance aux inhibiteurs spécifiques
Emergence de la Resistance au Cours du Traitement
Rép
licat
ion
vir
ale
Temps
Début du traitement
Variants résistants
Variants viraux sensibles (sauvages)
Zoulim & Locarnini., Gastroenterology 2009, 1371593-1608.
Hépatites Virales : puissance antivirale & résistance aux inhibiteurs spécifiques
Variants viraux sensibles (sauvages)
Début du traitement
Zoulim & Locarnini., Gastroenterology 2009, 1371593-1608.
Variants résistants
Emergence de la Resistance au Cours du Traitement
Hépatites Virales : puissance antivirale & résistance aux inhibiteurs spécifiques
Rép
licat
ion
vir
ale
Temps
Substtutons présentes avant traitement chez des patents naïfs de tout traitement ayant développé une résistance à l’ADV (%)*
rtV173L rtL180M rtM204V/I rtA181V/T rtN236T rtT184S/A/I/L rtS202G
Pt-1 ND 0,05 0,31 0,47 0,25 ND 0,11
Pt-2 ND ND 0,07 0,18 0,12 ND ND
Pt-3 ND ND 0,32 0,22 0,05 ND ND
Pt-4 ND ND 0,16 ND 0,10 0,17 ND
Pt-5 ND 0,12 ND 0,33 ND ND ND
Pt-6 ND* ND* ND* ND* ND* ND* ND*
Pt-7 ND ND 0,20 0,33 ND ND ND
*Pourcentages par rapport au nombre de séquences présentes à la positon (seuil de signifcatvité 0,05%)Méthodes de séquençage haut débit technologie GS FLX 454 (Life Science/Roche)ND: non détectée
Pré-existence de Variants Viraux Résistants (UDS)
Rodriguez et al., Hepatology 2010; 52 (suppl.): 441A
Hépatites Virales : puissance antivirale & résistance aux inhibiteurs spécifiques
Chevaliez et al., Internatonal HIV&HEPATITIS VIRUS drug resistance workshop & curatve strategies 2010, Abstract 23.
Substtutons présentes avant traitement chez des patents naïfs de tout traitement (%) 1,*
GroupV36A/
MT54A V55A R155K/T/Q A156S/T/V
D168A/V/T/H
V170A/T
Pt-1 SOC 13 ND ND ND 0.07 0.02 ND
Pt-2 SOC 1 ND ND 0,5 0.3 0.08 ND
Pt-3 T12/PR24 3 ND 1 0.5 ND 0.2 ND
Pt-4 T12/PR24 ND ND 2 0.5 ND 0.04 ND
Pt-5 T12/PR12 ND 1 1 0.6 5 ND ND
Pt-6 T12/P12 19 ND 0.4 0.5 0.6 0.03 ND
Pt-7 T12/P12 ND 0.8 ND ND 4 ND ND1Patents inclus dans l’étude PROVE-2 (Phase II)*Pourcentages par rapport au nombre de séquences présentes à la positon (seuil de signifcatvité 0,05%)Méthodes de séquençage haut débit technologie GS FLX 454 (Life Science/Roche)ND: non détectée
Hépatites Virales : puissance antivirale & résistance aux inhibiteurs spécifiques
Pré-existence de Variants Viraux Résistants (UDS)
Facteurs Affectant la Résistance
Facteurs Viraux
Niveau de réplicationImpact des mutations sur le “fitness”
Quasi-espèce viraleDemi-vie des hépatocytes infectés
Facteurs d’Hôte
ObservanceSystème immunitaireEspace de réplication
Activité des protéines kinasesTransporteurs de nucléosides
Facteurs Pharmacologiques
Efficacité antiviraleBarrière génétiquePharmacocinétique
RésistanceRésistance
Zoulim F., Antviral Res 2004, 64(1): 1-15; Soriano et al., J Antmicrob Chemother 2008, 62(1): 1-4.
Hépatites Virales : puissance antivirale & résistance aux inhibiteurs spécifiques
Non- ou Faible Observance Thérapeutique
• Une des principales causes d’échecs thérapeutiques secondaires
• Responsable de 30% à 50% des échappement virologiques chez les patients traités par analogues nucléos(t)idiques dans les essais cliniques
• Joue probablement un rôle dans les thérapies avec DDAs
Degertekin and Lok., J Hepatol 2008, 48: 892-894; Weiss et al., Aliment Pharmacol Ther 2009, 30: 14-27.
Hépatites Virales : puissance antivirale & résistance aux inhibiteurs spécifiques
Observance aux Analogues Dans la “Vraie Vie”
Sogni et al., J Hepatol 2010, EASL, Abstract 1023.
61% (116)
39% (74)
32% (60)
7% (14)
Obs. totale Non-observanceObs. modérée
Hépatites Virales : puissance antivirale & résistance aux inhibiteurs spécifiques
Barrière Génétique
• Définition (stricto sensu)– Nombre de substitutions amino acidiques nécessaires
pour conférer une résistance au médicament
• Classification– Molécules à faible barrière génétique
– Molécules à haute barrière génétique
Hépatites Virales : puissance antivirale & résistance aux inhibiteurs spécifiques
Barrière Génétique des Analogues Nucléos(t)idiques
Virus sauvage (sensible)
Virus ADV-résistant
Virus ETV-résistant
Virus LAM- ou LdT-résistant
TDF ???
204 ± 180LAM1
236 +/or 181ADV3
204 ± 80LdT2
1Locarnini et al. J Hepatology. 2006;44:422–31; 3Hepasera [RCP] 3. Lee Y-S, et al. Hepatology. 2006;43:1385–91; 4Guo et al., Antviral Res 2008, 81(2):180-3; 5Baraclude® [RCP]; Zoulim and Locarnini, Gastroenterology 2009, 137: 1593-1608.
ETV4, 5 204 ± 180 184 or 202 or 250
Hépatites Virales : puissance antivirale & résistance aux inhibiteurs spécifiques
Fitness Viral
• Définition– Capacité d’une souche virale à se propager dans son environnement
• Résulte de plusieurs facteurs– Capacité intrinsèque du virus de se répliquer– Capacité du virus d’échapper aux défenses de l’hôte– Espace de réplication (hépatocytes)
Ghany and Doo., Hepatology 2009, 49(5): S174-S184.
Hépatites Virales : puissance antivirale & résistance aux inhibiteurs spécifiques
Impact des Mutations sur le Fitness du VHB
Virus sauvage
Virus LAM-résistant (V173L, L180M, M204V)
Virus ETV-résistant(I169T, V173L, L180M, M204V, M250V)
2 3 4 5 60
1
2
3
4
5
pg
AD
N d
u V
HB
/RL
U (
106)
Jours post-transfection
Tenney et al., Antmicrob Agents Chemother. 2004; 48:3498–507.
Hépatites Virales : puissance antivirale & résistance aux inhibiteurs spécifiques
Fitness Relatif des Variants Résistants au TVR
Hépatites Virales : puissance antivirale & résistance aux inhibiteurs spécifiques
Sarrazin et al., Gastroenterology 2007, 132: 1767-1777.
Profils de Résistance
Résistance à la LAM
Résistance à l’ETV
Résistance à l’ADV rtA181V/T rtN236T
rtV173L rtM204V/I/S
rtM250I/VrtT184S/A/I/LrtL180M
rtS202G/CrtM204V/I
Résistance à la LdT rtL180M rtM204I/V
rtL80V/I
rtL80V/I
rtL180M
Résistance au TDF rtA181V/T ? rtN236T ?
845 a.a.
Protéine terminale TRANSCRIPTASE INVERSE RNAse H
A B C ED
1 183 349 (rt1) 692 (rt344)
YMDDGVGLSPFLLA
I(G) II(F)
Espaceur
2571 37 47 75 91 163 189 200 210 230 241 24724
rtA181V/T
rtA181V/T
Allen et al. Hepatology. 1998;27:1670-1677. Qi et al. J Hepatol. 2004;40(suppl 1):20-21. Tenney et al. Antmicrob Agents Chemother. 2004;48:3498-3507. Telbivudine product insert. Lai et al. Gastroenterology. 2005;129:528-536. Schildgen et al. N Engl J Med. 2006;354:1807-1812.
Hépatites Virales : puissance antivirale & résistance aux inhibiteurs spécifiques
Incidences Cumulées
0
10
20
30
40
50
60
70
80
1 2 3 4 5
Lai et al., N Eng J Med 1998, 339: 61-68; Lok et al., Gastroenterology 2003, 125: 1714-1722; Zoulim and Locarnini, Gastroenterology 2009, 1593-1608; Marcellin P et al., AASLD 2009 & 2010, Abstract 476; Heathcote et al., AASLD 2009 & 2010, Abstract 477.
23%
46%
55%
71%80%
0
10
20
30
40
50
60
70
80
1 2
4%
17%
0
10
20
30
40
50
60
70
80
1 2 3 4 5
0% 3%
11%18%
29%
0
10
20
30
40
50
60
70
80
1 2 3 4
0% 0%
0
10
20
30
40
50
60
70
80
1 2 3 4 5 6
0,26%
0,5
15%
1,2
46%
1,2
36%
1,2
51%57%
1,2
Patients AgHBe-positifs LAM-R
Po
urc
enta
ge
de
pat
ien
ts
Patients LdT-R Patients AgHBe-négatifs ADV-R
Patients TDF-R Patients ETV-R
Patients naïfsPatients LAM-R
Po
urc
enta
ge
de
pat
ien
ts
0%0%
Hépatites Virales : puissance antivirale & résistance aux inhibiteurs spécifiques
Résistances Croisées in vitro
LAM LdT ETV ADV TDF
Virus sauvage S S S S S
L180M + M204V R R I S S
M204I R R I S S
A181T/V I/R R S R I
N236T S S S R I
L180M + M204V/I ± T184G ± S202I/G ± M250V R R R S S
EASL CPG, J Hepatol. 2009, 50(2):227-42; Gastroenterol Clin Biol 2009, 33(6-7):539-54; Zoulim & Locarnini., Gastroenterology 2009, 137: 1593-1608.
Hépatites Virales : puissance antivirale & résistance aux inhibiteurs spécifiques
Mutations de Résistance aux Antiprotéases
Macrocyclic Linear
BILN 2061
(Ciluprevir)
R7227
(ITMN-191)TMC435
VX-950
(Telaprevir)
SCH503034
(Boceprevir)SCH 900518 (Narlaprevir)
A156V/T, D168A/V,
R155Q
A156S/V, D168A, Q41R, F43S, S138T,
S489L
F43S, Q80R, R155K,
D168A/V, A156T/G
A156S/T/VA156S/T, T54A,
V170AT54A/S,
A156S/T/V
No data No data No dataA156S/T/V,
T54A, V36A/MV36M/A, T54A/S, R
No data
In v
itro
In v
ivo
Kwong et al., Curr Opin Pharmacol, 2008, 8: 522-531; Susser et al., J Hepatol 2009, 50(Suppl.1): S7; Lenz et al., Antmicrob Agents Chemother. 2010, 54(5): 1878-87; Tong et al., Antmicrob Agents Chemother. 2010, 54(6): 2365-70.
Hépatites Virales : puissance antivirale & résistance aux inhibiteurs spécifiques
Fréquence des Variants Résistants au BOC (Etude SPRINT-1)
Verling et al. AASLD 2010, Abstract 801.
• 109 patients ont sélectionné des variants viraux au cours du traitement par BOC + PEG-IFN + RBV– 2 répondeurs– 107 échecs thérapeutiques (non-réponse, échappement, rechute)
Variants Fréquence de présence (%)*G1a (n = 78) G1b (n = 30)
R155K 77V36M 68T54S 37 57T54A 37A156S 43I170A 43
Hépatites Virales : puissance antivirale & résistance aux inhibiteurs spécifiques
466 7811 3.5 9 12 71
36/156A156V/T36/155T54AR155K/TV36M/AWTIC50 foldchange
Sarrazin et al., Gastroenterology 2007, 132: 1767-1777.
Dynamique des Variants selon la Réponse Virologique au TVR
Hépatites Virales : puissance antivirale & résistance aux inhibiteurs spécifiques
Dynamiques des Variants TVR-Résistants*
0
1
2
3
4
5
6
7
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
HCV
RN
A (L
og10
IU/m
L)
Weeks
WT
AB C D
E F
A B C
D ER155K/NV36L/MWT
A40TV36L/M + A40TR155K/N + A40TV36L/M + R155K/NV36L/M + R155K/N + A40T
TVR-Peg-IFN
*Analyse de la quasi-espèce virale par clonage-séquençage
Chevaliez et al., Internatonal HIV&HEPATITIS VIRUS drug resistance workshop & curatve strategies 2010, Abstract 23.
Hépatites Virales : puissance antivirale & résistance aux inhibiteurs spécifiques
Dynamiques des Variants TVR-Résistants*
*Analyse de la quasi-espèce virale par clonage-séquençage
Chevaliez et al., Internatonal HIV&HEPATITIS VIRUS drug resistance workshop & curatve strategies 2010, Abstract 23.
Hépatites Virales : puissance antivirale & résistance aux inhibiteurs spécifiquesH
CV R
NA
(Log
10 IU
/mL)
Weeks
WT
AB
C
D
E
R155K/E + T42SWT
A BWT
C D E
TVR-Peg-IFN
SOC
0
1
2
3
4
5
6
7
0 8 16 24 32 40 48 56 64 72
Estimation du Temps Nécessaire à la Perte des Variants TVR-Résistants
1,0
0,8
0,6
0,4
0,2
0,0
Prob
abili
té c
umul
atve
de
per
dre
la d
étec
ton
du
vari
ant
0
Médiane
10 20 30 40 50 60 70Temps (semaines)
NS3*36NS3*54NS3*155NS3*156V36M+R155K
Variant*
Patents ayant perdu la détecton
du variant avant la fn d’étude
Temps médian de perte
de détectabilité
V36A/M 69 % (37/54) 36 semaines
T54A 86 % (12/14) 13 semaines
R155K/T 60 % (36/60) 44 semaines
A156S/T/V 80 % (4/5) 24 semaines
V36M+R155K 54 % (22/41) 46 semaines
* Variatons non mutuellement exclusives.
Etude de phase III ADVANCE (1088 patients naïfs de traitement G1)
Kiefer et al., AASLD 2010, Abstract LB11.
Hépatites Virales : puissance antivirale & résistance aux inhibiteurs spécifiques
Copyright © 2006 Merck & Co., Inc., Whitehouse Station, New Jersey, USA.
Site A (Thumb/fingertips)(JTK-109)
Mutants: 495, 496, 499
Site B (Thumb)(HCV-371)
Mutants: 419, 423, 482
Site C (Palm) (A-837093)
Mutants: 411, 414, 448
Site Actif(R7128)
Mutants: 282
Site D (Palm)(HCV796)
Mutants: 316
AA
BBCC
DD
EE
Site E (Finger, hypothetical)(GS-9190)
Mutants: 445,448,452
Allosteric Actve site
HCV-796
A-782759,
A-837093,
GS-9190
HCV-371,
AG-02154,
VCH-759
NM283, R7128,
MK-0608R1626
C316F/N/S/Y
S365A/T, M414I/V
H95Q/R, N411S, M414L/T, Y448H,
C451R,G558R
L419M, M423T/V, I482L
S282T S96T, N142T
C316YC316Y, Y448H, G554D, D559G
No data S282T No data
In v
itro
In v
ivo
Kwong et al., Curr Opin Pharmacol, 2008, 8: 522-531.
Mutations de Résistance aux Antipolymérases
Hépatites Virales : puissance antivirale & résistance aux inhibiteurs spécifiques
EC50 fold-change Replicaton capacity (%)
WT 1 100
1b replicon
L31F/V 5/23 146±44/145 ±44
P32L 17 18±6
Y93H/N 19/28 20±7/21±6
1a replicon
M28T 695 31 ±23
Q30H/R 1,475/1,237 75 ±31/41±16
L31M/V 356/3,390 117±29/11 ±7
P32L 233 18 ±5
Y93C 1,864 11±7
Gao et al., Nature 2010, 465(7294):96-100; Fridell et al., Antmicrob Agents Chemother. 2010 Sep;54(9):3641-50.
Profil de Résistance au BMS-790052
Hépatites Virales : puissance antivirale & résistance aux inhibiteurs spécifiques
Coelmont et al., 4th Int. Workshop on HCV resistance and new compounds 2009.
*observed in 2 patients receiving DEBIO-025 in monotherapy
*
Résistance au DEBIO-025Hépatites Virales : puissance antivirale & résistance aux inhibiteurs spécifiques
Prévention de la Résistance aux DAAs
• Toute Monothérapie doit être proscrite
• Une combinaison thérapeutiques incluant au moins trois molécules doit être envisagée – Effet antiviral additif voire synergique– Molécules sans résistances croisées– Fortes puissances antivirales– Barrières génétiques à la résistance élevées
Pawlotsky J-M, Ther Adv Gastroenterol 2009, 2(4): 205-219; Thompson and McHutchison, J Viral Hepatts 2009, 16: 377-387.
Hépatites Virales : puissance antivirale & résistance aux inhibiteurs spécifiques
• Mesures répétées de la charge virale– Cas du VHB
. À la semaine 12 puis
. Toutes les 12 semaines jusqu’à indétectabilité de l’ADN
. Puis toutes les 12 à 24 semaines
– Cas du VHC. Aux semaines 4, 12, 24, 48, 72 et 24 semaines après l’arrêt du
traitement
– À l’aide d’une méthode de PCR en temps réel (seuil de détection < 10 à 20 UI/mL)
Evaluation de la Réponse au Traitement
Hépatites Virales : puissance antivirale & résistance aux inhibiteurs spécifiques
• Indications éventuelles– Cas du VHB
. Patients ayant une réponse virologique partielle
. Patients ayant un échappement virologique
. Patients avant la mise sous traitement ?
– Cas du VHC. Patients ayant un échappement virologique ?. Patients avant la mise sous traitement ?
Test de Résistance GénotypiqueHépatites Virales : puissance antivirale & résistance aux inhibiteurs spécifiques
Techniques Moléculaires de Détection des Mutations
"Méthodes commerciales" "Recherche"
Séquençage directHybridation Inverse
(INNO-LiPA)
– Sensibilité +– Détection des variants
représentant au moins 20% à 25% de la population virale
– Nécessaire pour détecter les substitutions non encore décrites
– Sensibilité ++– Détection des
variants représentant au moins 5% à 10% de la population virale
– Détection exclusive des substitutions décrites
P y r o-s é q uenç
age Haut
Débit ( UDS ) *
MALDI-TOF
– Détection de variants représentant 1% à 5% de la population, voire 0,1%*
– Détection exclusive des substitutions décrites, excepté pour le pyroséquençage
DNA Chips
PCR en temps réel
RFLP
Hépatites Virales : puissance antivirale & résistance aux inhibiteurs spécifiques