Gène de susceptibilité HLA et Rétinopathie diabétique
Dr. RAACHE R
IPA-USTHB
La rétinopathie représente une des complications les plus fréquentes et
les plus précoces de la micro-angiopathie diabétique. Elle est
caractérisée par deux processus physiopathologiques souvent associés,
ischémie et œdème, secondaires à des altérations de la paroi des
capillaires rétiniens.
Les anomalies histologiques initiales consistent
Epaississement de la membrane basale,
Disparition des péricytes
Modifications des cellules endothéliales.
A B C
FIGURE : Les différentes phases cliniques de la rétinopathie diabétique
R D N P. Rares microanévrymes et
hémorragies rétiniennes ponctuées
R D pré-p. Hémorragies , microanévrysmes , anomalies microvasculaires intrarétiniennes,: ischémie.
R D P . Hémorragies à partir d’un foyer
de néo vascularisation
Mécanisme Physiopathologique de la RD(Lorenzi, 2007)
La rétine normale , cellules endothéliales vasculaires stable, peu d’activité mitotique
Hypoxie ,occlusions capillaires , cellules rétiniennes
secrètent des facteurs biochimiques qui diffusent et induisent la formation de néovaisseaux .
Le développement de la rétinopathie dépend de plusieurs facteurs,
•déséquilibre glycémique et
•la durée du diabète.
Cependant, RD est une affection multifactorielle son développement et
son extension sont influencés par de nombreux facteurs de risque, à
savoir le facteur génétique lié au système HLA (Human Leucocyt
antigen).
Figure: Organisation génomique du système HLA ( Klein et al, 2000)
Le complexe majeur d’histocompatibilité (CMH)
But du travail
Recherche d’une association entre les marqueurs HLA classe I et II
et la rétinopathie diabétique chez la population Algérienne
Matériels et Méthode Population étudiée L’étude a porté sur 52 sujets présentant un diabète auto- immun diagnostiqués selon les critères d’ADA et de l’OMS et recrutés au niveau du service de diabétologie du CHU Mustapha, Alger. Comprenant 27 sujets DT1 avec RD (moyenne d’âge de 24,9±3,9) de sexe (16 hommes 50 et 11 femmes) 25 sujets DT1 sans RD (moyenne d’âge 51 de 44,6±12,8) de sexe (18 hommes et 7 52 femmes). 140 sujets sains non apparentés (moyenne d’âge de 30 ±14 ans) de sexe (87 femmes et 53 hommes) ne présentant aucun antécédent personnel et familial de maladies chroniques ou auto immunes.
Caractéristiques Sujets DT1 avec RD
N= 27
Sujets DT1 sans RD
N= 25
Témoin N= 140
Age (ans) 24,9 ± 3,9 44,6 ± 12,8 30 ±14 ans
Début du diabète (ans) 22 ± 12 23 ± 11 -
Durée du diabète (ans) 17,0 ± 5,1 30,1 ± 9,1 -
l’insuline UI/kg 0,85 ± 0,30 0,7 ± 0.29 m = 7,78
HbA1c (%)
9,9 ± 2,2 8,0 ± 1,6 6 ± 1,006
BMI (kg/m2) 3,2 ± 3,1 23,2 ± 3,1 23,44 ± 9,3
TABLEAU : Les caractéristiques générales des patients DT1 avec et sans rétinopathie
Étude statistique Fréquences phénotypiques des antigènes HLA des témoins et des malades p≤0,05 IC 95 %. L’évaluation du l’odds ratio (OR), Logiciel COMPARE 2.
Plasma CMN MSL GR
Méthode Le typage HLA de classe I et II à été réalisé par la technique sérologique après séparation des cellules mononuclées.
CELLULE
B
Fluorobeads
Billes Immunomagnétiques recouvertes d’anticorps monoclonaux LB
Séparation des cellules mononuclées. Gradient Ficoll LT+LB
2 x 106/ml lymphocytes
1 l de lymphocytes T ou B
10 l de Stain-Fix™ ou 5 l de Fluoroquench™
lecture
Typage HLA classe I et II par la technique
de microlymphocytotoxicité
1 heure incubation
30 minutes incubation
5 l de complément de lapin Classe I ou II
Complément de lapin
Résultats
0,00%
20,00%
40,00%
60,00%
80,00%
A1 A2 A3 A9 A10 A23 A24 A29 A30 A31 A32 A33 A28 A68
0,1887 0,1698
0,1038
0,1792
0,0566
0,1698
0,0472 0,0755
0,0377
0,2264
0,1415 0,12
0,16
0 0,04
0
0,2
0 0 0
0,16 0,2
0,0741 0,0741 0,037
0
0,2963
0,037
59,26
0,0741 0,037 0,0241
0
Fré
qu
en
ces
%
Antigènes classe I A
Témoins (N=106) DT1 sans RD (N=25) DT1 avec RD(N=27)
PC = 7.610-10
Fréquences des antigènes HLA-A (classe I) chez les DT1 avec et sans rétinopathie par rapport aux témoins
HLA-A29:(59,26%, 0% vs 5,66%) ( D1 RD, D1 sans RD /Témoins)
0
10
20
30
40
50
60
70
80
DR1 DR2 DR3 DR4 DR5 DR8 DR9DR11 DR13 DR14 DR15
DQ1 DQ2 DQ4 DQ6 DQ7 DQ8
79,17
70,83
37,5
73,08
Pc= 5.210-5
76,92
57,69
Fré
qu
en
ce (
%)
Antigènes Témoins (N= 140) DT1 sans RD ( N=24) DT1 avec RD (N=26)
TABLEAU : Comparaison des marqueurs HLA de classe II chez les DT1 avec rétinopathie par rapport aux DT1 sans RD
0,00%
5,00%
10,00%
15,00%
20,00%
25,00%
30,00%
35,00%
B7 B8 B14 B12 B17 B18 B21 B27 B35 B51 B58 B65 B40 B49
0,1604
0,2641
0,1698 0,1698
0,066
0,1226
0,2624
0,0566
0,1038 0,1038
0,0283
0,1132
0,0094
22,64
0,04 0,04 0 0 0
0,16
0 0,04
0,08 0,08 0,08 0,12
0,04
28
0,037 fré
qu
en
ces
%
Antigènes
Témoins (N=106) DT1 sans RD(N=25) DT1 avec RD (N=27)
Fréquences des antigènes HLA- B (classe I) chez les DT1 avec et sans rétinopathie par rapport aux témoins
P c= 0.257
HLA-DR9 : (29,63%, 0% vs 4,29%)
0
5
10
15
20
25
30
A1 A2 A3 A9 A10 A23 A24 A29 A30 A31 A32 A33 A28 A68
0,59 0,53 0,48 0 0,2 0 1,14
0 1,54
0 1,07
0 0,65 1,52 2,15 0,22 0,2 0,1 0
3,64
0,18
24,24
0,39 0,78 0,98 0,98 0,27 0
Od
d R
atio
(O
R)
Antigènes
DT1 sans RD (N=25) DT1 avec RD (N=27)
OR des différents antigènes HLA A de classe I chez les sujets DT1 avec et sans rétinopathie
Pc = 4.6 10-7
0
2
4
6
8
10
DR1 DR2 DR3 DR4 DR5 DR8 DR9 DR11 DR13 DR14 DR15 DQ1 DQ2 DQ4 DQ6 DQ7 DQ8
0,38 0,15
8,29
3,29
0,24 0,57 0 0,29 0,57
6,27
0,25 0,04
3,75
0 0,41 0
2,51
0,35 0
5,92
1,74
0 0,52
9,93
0 0,52
0
1,7
0
5,15
0,33 1,5
0,38
5,71
Od
d R
atio
(O
R)
Antigènes
DT1sans RD (N=24) DT1 avec RD (N=26)
Risques Relatifs des différents antigènes HLA de classe II chez les sujets DT1 avec et sans rétinopathie
0
1
2
3
4
5
B7 B8 B14 B12 B17 B18 B21 B27 B35 B51 B58 B65 B40 B49
0,22 0,12 0 0 0
1,36
0
0,69 0,75 0,75
2,99
1,07
4,38
1,33
0 0 0,19 0,19 0,54
0 0,11 0,64
1,96
0 0 0
4,04
0,13 Od
d r
atio
(O
R)
Antigénes
DT1 sans RD (N=25) DT1 avec RD (N=27)
FIGURE : OR des différents antigènes HLA de classe I chez les sujets DT1 avec et sans rétinopathie
Les résultats de notre étude montrent que l’antigène HLA-A29 a un risque 2,56 fois
plus important par rapport au HLA-DR9, ceci suggère que ces marqueurs sont probablement des marqueurs de susceptibilité à la RD et que le marqueur HLA -B49 (21) a probablement un effet protecteur dans la population algérienne.
Plusieurs études ont rapporté des associations HLA de classes I et II avec la RD dans
différentes populations :
• Gray et al, 1982 susceptibilité HLA-DR4 et protecteur HLA-B7 chez la population
britannique.
• Ioannis et al, 1983 susceptibilité HLA-A1 et HLA-B8 chez la population grecque.
• Cisse et al, 1998 susceptibilité HLA-DR9 chez la population sénégalaise
Nos résultats ne montrent aucune différence significative entre les DT1 avec RD et
sans RD pour les marqueurs DR3, DR4, DQ2 et DQ8, ceci confirme que ces
antigènes ne sont pas liés à la RD dans notre population. La fréquence élevée de ces
marqueurs est liée au risque de l’apparition du DT1 dans la population algérienne
(Raache et al, 2010) .
Cependant le système HLA est le plus fort facteur génétique de risque
qui contribue au développe ment de la RD indépendamment des niveaux
de glycémie . Malgré l’identification d’une association, le mécanisme
exact du rôle du système HLA dans la RD est toujours mal connu.
Cependant, des études ont montré que chez les DT1, le nombre de
cellules des îlots résiduels influence sur la qualité du contrôle glycémique
et la destruction complète des îlots de Langerhans est liée à la présence
des marqueurs génétiques du système HLA . Plusieurs travaux ont
rapporté une association du DT1 avec les marqueurs HLA de classe I
(A1, B8) et de classe II (DQ2 et DQ8).
Conclusion
l’antigène HLA-A29 e HLA-DR9 son des marqueurs de susceptibilité à la RD et que
le marqueur HLA -B49 a probablement un effet protecteur chez la population algérienne.
Les complications micro-vasculaires débutent chez le patient diabétique dès le début
de l’exposition à l’hyperglycémie chronique mais ne sont diagnostiquées cliniquement
qu’après une dizaine d’année d’évolution de la pathologie ; ces complications peuvent
être prévenues par la recherche de marqueur génétique de prédisposition.
Perspectives rechercher l’association
• Néphropathie