1
Contrôle Qualité : Diagnostics moléculaires
Contrôle de qualité des diagnostics moléculaires - Module 8 22
Vue générale Prélèvement, transport, et traitement de l’échantillon maintenir l’intégrité des acides nucléique à travers tous le processus
Contrôle de la contamination établir un circuit unidirectionnel de la zone de préparation des réactifs (ADN free) à la zone de traitement de l’échantillon, à la zone d’amplification et de détection
Contrôles positif et négatif Référence: CLSI MM3-A (Méthode de diagnostic moléculaire pour les maladies infectieuses)
Contrôle de qualité des diagnostics moléculaires - Module 8 33
Contrôle Qualité: diagnostics moléculaires
Contrôle de qualité des diagnostics moléculaires - Module 8 55
Real Time-PCR (temps réel)
ECHANTILLON
PRIMER
Taq polymeraseCible AN
amplifiée
SYBR Green
Fluorescence Quantitative
+ - In
Contrôle de qualité des diagnostics moléculaires - Module 8 66
Réactions d’amplification
Amplification / Temps
POSITIVE
PAS d’ AMPLIFICATION
Contrôle de qualité des diagnostics moléculaires - Module 8 77
Real Time-PCR (temps réel)
Contrôle de qualité des diagnostics moléculaires - Module 8 88
A/H3
Contrôle de qualité des diagnostics moléculaires - Module 8 99
A/H5
Contrôle de qualité des diagnostics moléculaires - Module 8 1111
Risques avec la PCR
La plupart des RT-PCR sont faîtes « sur place » les primers ne sont pas nécessairement optimisés pour le test
les contrôles positifs sont « maison »les contrôles négatifs sont « maison »
L’interprétation des tests a besoin d’être faite prudemment