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CONCEPTION ET VALIDATION DE PROTOCOLES
by
HISTALIM, forte de 5 ans d’expérience avec un système qualité accrédité COFRAC, offre un
service de mise au point et de validation de protocoles techniques en histologie,
immunohistochimie et hybridation in situ.
Accréditation COFRAC N° 1-1794, Essais, Portée disponible sur www.cofrac.fr
Mise au point et validation de protocoles
sur automate Ventana / Roche Diagnostic
Ventana
Discovery XT
Ventana
Benchmark XT
Vous accompagner du résultat issu de la recherche …
… à la réalisation de vos essais cliniques
→Mise au point de protocoles →Marquages complexes et multiples →Validation de biomarqueurs en phase préclinique
→ Validation analytique → Essais cliniques → Validation ISO 15189, CE-IVD, FDA,…
HISTALIM se positionne comme votre partenaire en immunohistochimie et hybridation in situ, en vous offrant une gamme de services pour chaque étape de votre développement.
Essais de mise au point
Définition du cahier des charges
Caractérisation du protocole
Formalisation du dossier de validation
Archivage
SCHÉMA FONCTIONNEL D’UN PROJET DE VALIDATION
Nous pouvons prendre en charge vos projets de validation de protocoles concernant :
La mise au point de protocoles d’immunomarquages et d’hybridation in situ (preuve de
concept sur un nouvel anticorps / une nouvelle sonde, caractérisation d’un anticorps
diagnostique pour la FDA ou pour le marquage CE,…).
La mise au point et la validation de marquages multiples ou complexes
(ex : immunomarquage + contre-coloration spéciale, immunomarquage multiples, en
chromogénie et en fluorescence,…).
La mise au point de colorations spéciales (à titre expérimental pour cibler certains éléments,
pour caractériser une nouvelle formulation de colorant, tester la stabilité).
La validation de techniques spéciales pour le traitement des tissus (validation de procédures
de fixation, caractérisation de performance d’équipement pour votre dossier CE-IVD et/ou
votre accréditation ISO 15189…).
Les principaux automates utilisés
pour la validation :
Leica Autostainer, pour les colorations par
immersion de lames.
Ventana Discovery XT , pour l’immunohistochimie
et l’hybridation in situ à visée expérimentale.
Ventana Benchmark XT, pour l’immunohistochimie
et l’hybridation in situ à visée diagnostique.
Résultat insatisfaisant
Votre dossier de validation
contiendra :
Un rapport d’essai global faisant
figurer toutes les caractéristiques du
protocole.
Le protocole détaillé (réactifs,
automate utilisé, programme de
l’automate,…).
Les comptes rendus de chaque essai
de mise au point réalisé.
Validation de la spécificité :
Mise au point initiale du protocole : preuve de la faisabilité
Optimisation du protocole pour réduire au maximum le bruit de fond
Validation du marquage de la cible sur des contrôles positifs et négatifs
Validation de la robustesse :
Etude de la robustesse du protocole sur différents organes
Etude de la robustesse aux différents modes de fixation et d’inclusion
Etude de la stabilité des réactifs dans le temps
Validation
clinique :
Cohorte de patients qualifiés
Lecture histopathologique
Preuve de l’intérêt du biomarqueur
Validation de la reproductibilité :
Fiabilité du protocole par différents opérateurs
Fiabilité du protocole sur différents lots de réactifs
Méthodes quantitatives: mesures d’intensité de marquage
Consulter également nos fiches :
Techniques courantes d’histologie
Immunohistochimie/Hybridation In Situ
Numérisation de lame
Analyse d’image
Lecture histopathologique
www.histalim.com — Tel: +33(0)4.67.712.765 — [email protected]
Référentiel Principe de la validation Eléments de la
procédure
Caractéristiques de
performance
a/ Conditions expérimentales
Validation de la spécificité
Spécificité vérifiée sur les organes impliqués
dans les essais expérimentaux
Images illustratives démontrant la spécificité
des marquages
b/ BPL Idem « a » + Validation
de la robustesse Tests pré-analytiques et
de vieillissement
Détermination des conditions de fixation et
de la stabilité
c/ ISO 15189 et ISO 17025
Idem « a + b » + Détermination de
l’incertitude selon le GUM
Tests de répétabilité et de reproductibilité
Incertitude de mesure
d/ Marquage CE IVD (ISO 13458)
Idem « a + b + c » +
Maitrise des variations de production
+ étude clinique
Analyse des risques de production
+ Etude clinique sur tissus qualifiés
provenant de patients consentants.
Incertitude de production
+ Mise en évidence d’un intérêt clinique.
e/ FDA Classe I : Contrôles généraux
Idem « a + b +c +d » +
Validation de la réactivité
Panel de tissus sains FDA (environ 30 tissus provenant de 3 patients
différents)
Etude complète de cross réactivité (distribution du
marquage au sein des tissus et des cellules,…)
f/ FDA Classe IIa : contrôles spéciaux qualitatifs
Idem « a + b +c +d + e » +Validation clinique par comparaison avec une
méthode conventionnelle
Panel de tissus validés cliniquement
Taux de sensibilité et de spécificité et seuil de
détection
f’/ FDA Classe IIb : contrôles spéciaux quantitatifs ou semi-quantitatifs
Idem « a + b +c +d + e » + Validation clinique par comparaison avec une
méthode conventionnelle
Panel de tissus validés cliniquement couvrant
le domaine d’application en terme de scoring
Limites du domaine d’application et marge
d’erreur
g/ FDA Classe III : approbation pré-market
Idem « a +b +c +d +e +f» + Validation clinique de cibles non validées par
des méthodes conventionnelles
+ Etude clinique multicentrique
randomisée sur tissus qualifiés provenant de patients consentants.
Preuve clinique d’amélioration du
processus de diagnostic.
Le degré exigé pour la validation d’un
protocole de coloration, d’immunohistochimie
ou d’hybridation in situ va dépendre de
l’objectif que vous vous êtes fixé .
A CHAQUE RÉFÉRENTIEL SON NIVEAU D’EXIGENCE :