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Anthony Malkassian - PhD student Laboratoire LMGEM UMR 6117, Centre d’Océanologie de Marseille, Université de la Méditerranée Directeurs de thèse: Gerald Grégori, Claude Manté & David Nérini [email protected] Suivi automatisé et à haute fréquence de la dynamique des populations phytoplanctoniques dans l’étang de Berre.

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Page 1: Anthony Malkassian - PhD student Laboratoire LMGEM UMR 6117, Centre dOcéanologie de Marseille, Université de la Méditerranée Directeurs de thèse: Gerald

Anthony Malkassian - PhD student

Laboratoire LMGEM UMR 6117, Centre d’Océanologie de Marseille, Université de la Méditerranée

Directeurs de thèse: Gerald Grégori, Claude Manté & David Nérini

[email protected]

Suivi automatisé et à haute fréquence de la dynamique des populations phytoplanctoniques dans l’étang de Berre.

Page 2: Anthony Malkassian - PhD student Laboratoire LMGEM UMR 6117, Centre dOcéanologie de Marseille, Université de la Méditerranée Directeurs de thèse: Gerald

Suivi basse fréquence (échantillonnage mensuel)

Relevés mensuels d’Octobre 2000 à Décembre 2005 :• Variables environnementales (surface et fond): Température, Salinité, NO3, PO4, Oxygène dissous, Chlorophylle a.

• Phytoplancton de surface: comptage par microscopie (méthode Utermöhl, Becker B.)

(Travaux de thèse d’Emma Gouze, 2008)

Page 3: Anthony Malkassian - PhD student Laboratoire LMGEM UMR 6117, Centre dOcéanologie de Marseille, Université de la Méditerranée Directeurs de thèse: Gerald

ACP sur les variables environnementales des stations H4 et H16 mélangés:

d = 2

temp

sal

no3

po4

o2diss

chla

automne ete

hiver

printemps

Axe principal 1 (37.51 % d’inertie)

Axe

prin

cipa

l 2 (

25.2

% d

’iner

tie)

date temp sal no3 po4 o2diss chla saison

09/08/2003 26,85 19,3 0,01 0,246 15,28 ete

23/08/2003 25 20,95 0,14 0,52 81,3 17,33 ete

06/09/2003 22,6 22,1 0,08 0,358 88,3 13,87 ete

20/09/2003 17,15 22,35 2,991 0,3 97,1 31,46 ete

Interprétation : Il y a fort signal de saisonalité

• En été augmentation de la température et de la salinité (corrélation positive).

• En hiver diminution de la température /salinité et augmentation des nitrates (corrélation négative).

• Indépendance entre les variables Chl a/O2dissous/PO4 et température/salinité/NO3

Page 4: Anthony Malkassian - PhD student Laboratoire LMGEM UMR 6117, Centre dOcéanologie de Marseille, Université de la Méditerranée Directeurs de thèse: Gerald

ACP sur les proportions de phytoplancton (phylum) des stations h4 et h16 mélangés:Points extrêmes éliminés: 4,61,54,84,93

d = 1

1

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Chloro

Crypto

Cyano

Diatom

Dino

Autres

Eigenvalues d = 1

Chloro

Crypto

Cyano

Diatom

Dino

Autres

Interprétation : • Il y a une forte proportion de diatomées pour H4. • H4 H16 contiennent des proportions importantes de dinoflagellés et chlorophycées. • Les cyanobactéries se retrouvent seulement dans H16 (cf. axe principal 3).

Axe principal 1 (25.83 % d’inertie)

Axe

prin

cipa

l 2(2

0.30

% d

’iner

tie)

H4H16

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0 5 10 15 20 25 30

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0010

000

Time (days)

Abun

danc

e /

Bio

mas

s

Échantillonnages ponctuels et comptages par microscopieou cytométrie en flux classique

Interpolations possibles

Véritable dynamique du taxon d’intérêt

Problématique = Accéder à la dynamique des assemblages phytoplanctoniques et étudier leurs réponses aux forçages du milieu (exemple de forçage naturels : le Mistral) .

Quels organismes sont présents? quand? et pourquoi?Une question d’échelle de mesure…

Échelle spatiale Echelle temporelle

Microscopie +++ - - - Information taxonomique très précise mais possible seulement à basse fréquence (analyse couteuse en temps)

HPLC ou fluorimétrie - - - +/- Mesure globale = Bulk measure (pas à l’échelle de la particule)

Cytométrie en flux automatisée +++ +++ Mesure haute fréquence et à l’échelle de la particule

Page 6: Anthony Malkassian - PhD student Laboratoire LMGEM UMR 6117, Centre dOcéanologie de Marseille, Université de la Méditerranée Directeurs de thèse: Gerald

Analyse In situ jusqu’a 200m de profondeur (version submersible)

Durée maximale d’immersion = plusieurs semaines

Analyse d’une large gamme de taille de phytoplancton de qques microns jusqu’a plusieurs mm de longueur (chaines de cellules)

CYTOSENSE / CYTOSUB © in situ FLOW CYTOMETER = instruments dédiés à l’analyse automatisé du phytoplancton.

Dubelaar, G.B.J. ans P.L. Gerritzen (2000)www.cytobuoy.comwww.cytobuoy.com

Fréquence d’échantillonnage maximale d’une acquisition toute les 10 min (version submersible) ou même en continu pour la version de paillasse.

Module de prise d’image: Image in flow

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Temps

Flux

Signature optique

complète

Faisceau laser

Tube de quartz

Intensité du signal (mV)

Acquisition des profils optiques:

0 5 10 15 20 25 30

-40

0-2

00

02

00

40

0

recorded points

sig

na

l in

ten

sity

mV

Tetraselmis tetrathele Aphanizomenon

FWSSWSFLRFLOFLY

- Deux variables dites de diffusion des photons du laser :+ Aux petits angles (FWS : forward scatter) Taille des particules. + A 90° (SWS : sideward scatter) Morphologie de la cellule (forme, granularité, paroi cellulaire, composition interne,...).

- Trois variables d’émission de fluorescence (autofluorescence):+ Rouge centrée sur 734-668nm carotène et chlorophylle a.+ Orange centrée sur 601-668nm phycobilines (spécifiques aux Cyanobactéries et Cryptophytes)+ Jaune centrée sur 536-601nm phycoérythrine.

- Profil des signaux le long des particules (signature optique du phytoplancton)

- Module de prise d’image (module Image in flow)

(Mélilotus Thyssen, modifié)

Page 8: Anthony Malkassian - PhD student Laboratoire LMGEM UMR 6117, Centre dOcéanologie de Marseille, Université de la Méditerranée Directeurs de thèse: Gerald

Automatisation du traitement des données issues du Cytosub par des méthodes d’analyse fonctionnelles et de classification :

Problème : Identifier des groupes au sein d’un échantillon naturel sur la base de leurs signatures optique.Hypothèse : Information discriminante dans la forme que prennent les profils.

Page 9: Anthony Malkassian - PhD student Laboratoire LMGEM UMR 6117, Centre dOcéanologie de Marseille, Université de la Méditerranée Directeurs de thèse: Gerald

Qui se trouve au sein de chaque groupe?Tester l’homogénéité grâce au module de prise d’image Image

in flow: Un pas vers l’analyse taxonomique…

Page 10: Anthony Malkassian - PhD student Laboratoire LMGEM UMR 6117, Centre dOcéanologie de Marseille, Université de la Méditerranée Directeurs de thèse: Gerald

Suivi haute fréquence (Etang de Vaine)

Page 11: Anthony Malkassian - PhD student Laboratoire LMGEM UMR 6117, Centre dOcéanologie de Marseille, Université de la Méditerranée Directeurs de thèse: Gerald

Local GIPREB

Echantillonneur automatique d’eau

• PC (poste de contrôle)• Pompe / Échantillonneur d’eau automatique• CytoSense (mode paillasse)• Sonde CTD + fluorimètre

Env. 250m.

SCHEMA DU DISPOSITIF EXPERIMENTAL

Bouées du chenal

2,5 m.2,5 m.

Suivi à haute fréquence du phytoplancton et des variables environnementales en un point de l’étang (étang de Vaïne).

Réponse face aux forçages environnementaux (notions de groupes fonctionnels)

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Merci de votre attention !

Henri Fabre - Premier vol d’hydravion au monde avec amerrissage réussi … sur l’étang de Berre le 28 mars 1910.

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Page 14: Anthony Malkassian - PhD student Laboratoire LMGEM UMR 6117, Centre dOcéanologie de Marseille, Université de la Méditerranée Directeurs de thèse: Gerald
Page 15: Anthony Malkassian - PhD student Laboratoire LMGEM UMR 6117, Centre dOcéanologie de Marseille, Université de la Méditerranée Directeurs de thèse: Gerald

ACP sur les variables environnementales des stations H4 et H16 mélangés:

d = 2

temp

sal

no3

po4

o2diss

chla

automne ete

hiver

printemps

Axe principal 1 (37.51 % d’inertie)

Axe

prin

cipa

l 2 (

25.2

% d

’iner

tie)

date temp sal no3 po4 o2diss chla saison

09/08/2003 26,85 19,3 0,01 0,246 15,28 ete

23/08/2003 25 20,95 0,14 0,52 81,3 17,33 ete

06/09/2003 22,6 22,1 0,08 0,358 88,3 13,87 ete

20/09/2003 17,15 22,35 2,991 0,3 97,1 31,46 ete

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ACP sur les variables environnementales stations h4 et h16 mélangés

d = 2

1 2

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temp

sal

no3

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o2diss

chla

Eigenvalues

d = 2

temp

sal

no3

po4

o2diss

chla

H16

H4

> inertienv3 = 100 * (acpenv3$eig/sum(acpenv3$eig))> cumsum (inertienv3)[1] 37.50920 62.71256 80.91127 88.34645 95.16856 100.00000

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d = 2

temp

sal no3

po4

o2diss

chla automne

ete hiver

printemps

Saisonnalité…

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ACP sur les variables environnementales stations h4 et h16 mélangés

d = 2

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195 temp

sal no3

po4

o2diss

chla

Eigenvalues d = 2

temp

sal no3

po4

o2diss

chla H16 H4

> inertienv3 = 100 * (acpenv3$eig/sum(acpenv3$eig))> cumsum (inertienv3)[1] 37.50920 62.71256 80.91127 88.34645 95.16856 100.00000

Page 19: Anthony Malkassian - PhD student Laboratoire LMGEM UMR 6117, Centre dOcéanologie de Marseille, Université de la Méditerranée Directeurs de thèse: Gerald

d = 2

temp

sal no3

po4

o2diss

chla automne

ete hiver

printemps

Saisonnalité…

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ACP sur les variables environnementales stations h4 et h16 mélangés

d = 2

1 2 3

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195 temp

sal no3

po4

o2diss

chla

Eigenvalues

d = 2

temp

sal no3

po4

o2diss

chla H16 H4

> inertienv3 = 100 * (acpenv3$eig/sum(acpenv3$eig))> cumsum (inertienv3)[1] 37.50920 62.71256 80.91127 88.34645 95.16856 100.00000

Page 21: Anthony Malkassian - PhD student Laboratoire LMGEM UMR 6117, Centre dOcéanologie de Marseille, Université de la Méditerranée Directeurs de thèse: Gerald

ACP sur les proportions de phytoplancton (phylum) des stations h4 et h16 mélangés:Points extrêmes éliminés: 4,61,54,84,93

d = 1

1

2 3

5 6 7

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Chloro

Crypto

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Autres

Eigenvalues

inertiep = 100 * (acpp$eig/sum(acpp$eig))> cumsum (inertiep) #pas bon...[1] 25.83695 46.13015 64.99503 82.41927 99.57007 100.00000

d = 1

Chloro

Crypto

Cyano

Diatom

Dino

Autres

interpretation : forte prop de diatom et autres pour h4 ce qui la rend diffferent de h16 qui contient des prop importantes de dino et chloro (mais attention axe 1 seult 25pourcent d'inertie) axe 2 et 3 on voit l effet des efflorescences de dino et chloro dans les deux stations??? et cyano slt dans h16

Axe principal 1 (25.83 % d’inertie)

Axe

prin

cipa

l 2(2

0.30

% d

’iner

tie)

H4H16

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ACP sur les proportions de phytoplancton (phylum) des stations h4 et h16 mélangésPoints extrêmes 4,61,54,84,93

d = 1

1

2 3

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100

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Chloro

Crypto

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Autres

Eigenvalues

inertiep = 100 * (acpp$eig/sum(acpp$eig))> cumsum (inertiep) #pas bon...[1] 25.83695 46.13015 64.99503 82.41927 99.57007 100.00000

d = 1

Chloro

Crypto

Cyano

Diatom

Dino

Autres

interpretation : forte prop de diatom et autres pour h4 ce qui la rend diffferent de h16 qui contient des prop importantes de dino et chloro (mais attention axe 1 seult 25pourcent d'inertie) axe 2 et 3 on voit l effet des efflorescences de dino et chloro dans les deux stations??? et cyano slt dans h16

Axe principal 1 versus axe principal 3

Page 23: Anthony Malkassian - PhD student Laboratoire LMGEM UMR 6117, Centre dOcéanologie de Marseille, Université de la Méditerranée Directeurs de thèse: Gerald

ACP sur les proportions de phytoplancton (phylum) des stations h4 et h16 mélangésPoints extrêmes 4,61,54,84,93 inertiep = 100 * (acpp$eig/sum(acpp$eig))> cumsum (inertiep) #pas bon...[1] 25.83695 46.13015 64.99503 82.41927 99.57007 100.00000

d = 1

1

2 3

5

6 7

8

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92

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96

97

98 99

100

101

102

Chloro

Crypto

Cyano

Diatom

Dino

Autres

Eigenvalues d = 1

Chloro

Crypto

Cyano

Diatom

Dino

Autres

interpretation : forte prop de diatom et autres pour h4 ce qui la rend diffferent de h16 qui contient des prop importantes de dino et chloro (mais attention axe 1 seult 25pourcent d'inertie) axe 2 et 3 on voit l effet des efflorescences de dino et chloro dans les deux stations??? et cyano slt dans h16

Axe principal 2 versus axe principal 3

Page 24: Anthony Malkassian - PhD student Laboratoire LMGEM UMR 6117, Centre dOcéanologie de Marseille, Université de la Méditerranée Directeurs de thèse: Gerald

510

1520

2530

tem

p. (

°C)

1995 1996 1997 1998 1999 2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010

510

2030

40

sal.

(SI)

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050

100

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200

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dis

sous

(%

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050

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200

Chl

o.a

1995 1996 1997 1998 1999 2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010

020

4060

8010

0

Pha

eo

1995 1996 1997 1998 1999 2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010

010

2030

4050

NO

3

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02

46

810

PO

4

1995 1996 1997 1998 1999 2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010

Résultats séries temporelles en H12…