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SARCOSPORIDIOSE BOVINE ET PORCINE AU SÉNÉGAL:

PRÉVALENCE ET IDENTIFICATION MOLÉCULAIRE SUR LES

CARCASSE D’ANIMAUX ABATTUS AUX ABATTOIRS DE DAKAR

O. B. GBATI1, P. S. KONE1, M. KOFFI2, A.R. KAMGA WALADJO1, B. MUSABYERMARIYA1, D.L. DAHOUROU1, C.D. EKOU1, C. DIATTA1, J.-B. ASSAMOI2, B.N. KESSE2, S.N. BAKOU1,

B. BONFOH2, L.J. PANGUI1

1 Ecole Inter-Etats des Sciences et Médecine Vétérinaires (EISMV) - Dakar

2 Centre Suisse de Recherches Scientifiques (CSRS) - Abidjan

9ème Congrès International Francophone de la Société de Pathologie Exotique

En Partenariat avec le Société Médicale d’Afrique Noire de Langue Française

12, 13 & 14 novembre 2013 - UCAD 2 Dakar (Sénégal)

• INTRODUCTION

Généralités

Objectifs

• MATERIELS ET METHODES

• RESULTATS ET DISCUSSION

• CONCLUSION

PLAN

Hôtes

intermédiaires

Espèces parasites

Hôtes

définitifs

Bovins

S. bovicanis ou S. cruzi

S. bovifelis ou S. hirsuta

S. bovihominis

Chien

Chat

homme

Porc

S. porcicanis ou S. miescheriana

S. porcifelis

S. porcihominis ou S. suihominis

Chien

Chat

Homme

Protozoose due à un protozoaire kystogène du genre Sarcocystis

Espèces affectées : vertébrés domestiques et sauvages; Homme

INTRODUCTION

Espèces de Sarcocystis impliquées chez les bovins et les porcs

Animaux de boucherie s’infestent en ingérant des ookystes sporulés

par phytophagie, géophagie, ou hydropinie

Caractérisée chez les animaux de boucherie par la présence de kystes

dans les tissus musculaires ;

Rend impropre la viande à la consommation humaine (présence

d’espèces zoonosiques de Sarcocystis)

Importance :

- Médicale: possibilité d’avortements

- Économique: pertes estimées à plusieurs de milliards

- Sanitaire : Zoonose négligée (Sarcocystis hominis, S. suihominis)

INTRODUCTION

INTRODUCTION

Leur détection requiert l’histologie et la biologie moléculaire

La plupart des études ont été réalisées en Europe, Asie, Amérique

Très peu d’études réalisées en Afrique:

• Petits Ruminants: Sénégal (Vercruysse et Van Marck, 1981),

Nigéria (Kudi et al, 1991), Egypte (Morsy et al, 2011)

• Bovins: Shaba-RDC (Mathieu et Mboyo, 1986);

Sénégal (Gbati et al, 2004); Nigéria (Obijiaku et al. 2013)

• Aucune donnée sur les porcs

Objectifs

Objectif général

Contribuer à la sécurité sanitaire des denrées alimentaires d’origine animale au

Sénégal

Objectifs spécifiques

• Rechercher, grâce à l’histologie, les kystes de Sarcocystis dans les muscles

des carcasses de bovins et porcins abattus aux abattoirs de Dakar;

• Déterminer la prévalence de la maladie;

• Identifier les espèces de Sarcocystis en cause par les techniques de

biologie moléculaire (RFLP-PCR);

MATÉRIELS ET METHODE

Lieu de l’étude

Prélèvements de muscles: Abattoirs de Dakar

Analyses histologiques: EISMV de Dakar

• Laboratoire d’Histologie et d’Histopathologie Vétérinaires

• Laboratoire d’ Imagerie Microscopique

• Laboratoire de Parasitologie et Mycologie

Analyses moléculaires au Laboratoire de Biologie Moléculaire du

Centre Suisse de Recherches Scientifiques (CSRS) d’Abidjan - RCI

Matériel animal

Pour l’histologie

400 carcasses de bovins et de 300 carcasses de porcs abattus dans aux

abattoirs de Dakar

Muscles prélevés: Masséter, Diaphragme, Œsophage, Myocarde,

Fessier

Pour la biologie moléculaire

Echantillons de myocarde positifs à l’histologie

MATÉRIELS ET METHODE

Méthode

Réalisation de coupes histologiques et coloration des lames à

l’Hémalun -Eosine

Observation des lames histologique au microscope photonique

• Recherche et dénombrement des kystes au microscope

MATÉRIELS ET METHODE

Porc

sarco F 5’ : CCATATTTTATGGTGGTGGTGA-3’

sarco R 5’ :AGTCTGTGGCAATGCTTTC-3’

• Sarcocystis miescheriana

Electrophorèse sur gel d’agarose

1,5% pendant 2 h30 min à 60 volts.

Taille attendue = 800pb

Kia et al, 2011 ; Yang et al. 2013

Bovin

sarco F 5’ : CGCAAATTACCCAATCCTGA-3’

sarco R 5’ : ATTTCTCATAAGGTGCAGGAG-3’

• Sarcocystis sp

Electrophorèse sur gel d’agarose 1,5% pendant 2 h30 min à 60 volts. Taille attendue = 700pb • Espèces de Sarcocystis Digestion enzymatique: BCl1 et Rsa1 S. cruzi: 300pb, 400pb et 700pb

Yang et al. , 2002 ; Moré et al., 2011 Kalantari et al. , 2013

MATÉRIELS ET METHODE

Kyste de Sarcocystis sp. (Myocarde du bovin)

(X400)

Kyste de Sarcocystis sp. (Fessier du Porc)

(X1000)

RESULTATS ET DISCUSSION

Dubey et al., 2006 ; Jehle et al. 2009 ; Moré et al., 2011; Yan et al. 2013

91,0%

9,0 % Positifs

Négatifs

Chez les Porcs (273/300)

82,00%

18,00% Positifs

Négatifs

Chez les Bovins (328/400)

Prévalence de la Sarcosporidiose

RESULTATS ET DISCUSSION

42,5 % à Zaria au Nigéria (Obijiaku et al. 2013) 78,1 % au Zaire (RDC) –(Mathieu et Mboyo, 1986)

18,2% Perreira et Bermejo, 1988 (Espagne) 73,6 %Avapal et al., 2003 (Inde) 99,5 %Yan et al, 2013 (Chine)

800 pb

1 pm

Sarcocystis miescheriana

2 3 4 5 7 6 8 9 10 NC 11 12

RESULTATS ET DISCUSSION

Electrophorèse de la PCR de Sarcocystis miescheriana isolé chez porc

Yang et al., 2002 (Chine) ; Kia et al. (Iran) , 2011; Yan et al, 2013 (Chine)

pm 1 2 3 4 5 6 7 8 10 9 11 12 13 14 16 15 NC

700 pb 500 pb

300 pb

100 pb

Sarcocystis sp. Sarcocystis sp.

RESULTATS ET DISCUSSION

Electrophorèse du produit PCR de Sarcocystis isolé chez le bovin Avant l’action de l’enzyme de restriction Rsa 1 et Bcl1

Yang et al. (Chine), 2002 ; Moré et al., 2011 (Argentine) ; Kalantari et al. , 2013 (Iran)

pm

Sarcocystis cruzi

pm

1

2

3

4

5

6

7

8

9

S. cruzi

700 pb

400 pb

300 pb

Sarcocystis cruzi

10

RESULTATS ET DISCUSSION

Electrophorèse du produit PCR de Sarcocystis isolé chez le bovin après l’action des enzymes de restriction Rsa 1 et Bcl1

Yang et al. (Chine), 2002 ; Moré et al. 2011 (Argentine) ; Kalantari et al. 2013 (Iran)

La sarcosporidiose existe au Sénégal chez les porcs et les bovins. Sarcocystis cruzi (Bovin) et Sarcocystis miescheriana (Porc) ont été identifiés. Néanmoins, la suspicion de la présence éventuelle d’espèces zoonosiques, S. bovihominis et S. suihominis, nous interpelle. La mise au point de techniques de détection rapide lors l’inspection des viandes doit être envisagé en vue de permettre aux population d’avoir accès à des viandes plus saines.

CONCLUSION

• Consortium AfriqueOne (WELCOME THRUST - Glasgow)

• Centre Suisse de Recherches Scientifiques (Abidjan – RCI)

• Agence Universitaire de la Francophonie (AUF)

• Union Economique et Monétaire Ouest-Africaine (UEMOA)

REMERCIEMENTS

JE VOUS

REMERCIE