m2 recherche mbvb atelier sécrétion de facteurs de virulence s. bleves et r. voulhoux année...

M2 Recherche MBVBAtelier “Sécrétion de facteurs de virulence”

S. Bleves et R. VoulhouxAnnée 2010-2011

Durée de l’épreuve: 3 heures

• Analyser synthétiquement les résultats de chaque expérience en vous aidant des questions posées.• Construire le résumé de l’article (15 lignes max).• Donner un titre à l’article.• Etablir une liste de 5 mots-clé.

Question 1: Conséquences de la mutation pcrV sur:la sécrétion de type III (exp 1a)la cytotoxicité sur macrophages infectés (exp 1d)la survie de souris infectées (exp 1b)Que concluez-vous?

Question 2: Rôle de PcrV dans la translocation de ExoY (exp 2 «left»)? Donnez le principe d’une autre approche expérimentale pour étudier la

translocation d’un effecteur.Pourquoi les auteurs ont-ils préincubé les macrophages J774 avec ces différents

anticorps avant l’infection (exp 2 «right»)? Que concluez-vous?

Question 3: Effets des anticorps anti PcrV dans les essais d’immunisation de souris (exp 3b & 3c) et sur l’état de l’épithélium respiratoire (3d)?

Question 4: Effet des anticorps anti PcrV sur la cytotoxicité de P. aeruginosa envers les macrophages J774 (exp 4a)?

Question 5: Effet des anticorps anti PcrV sur la dissémination de P. aeruginosa (poumons et sang) et sur la survie des macrophages in vivo?

Le matériel et méthodes est inclus en annexe à titre indicatif, MAIS n’a pas à être lu. Ne perdez pas de temps!

Titre

Résumé

Expérience 1

Voir légende figure 1aLe NTA est un chélateur d’ions divalents, la déplétion en ions Ca2+ du milieu de culture activant, en absence de cellules hôtes, le T3SS

de P. aeruginosa.

ExsA est l’activateur transcriptionnel du SST3 de P. aeruginosa.

Voir légende figure 1d

Voir légende figure 1b

Expérience 2

Voir légende figure 2 “left” (6 1ères colonnes)

Voir légende figure 2 “right” (5 dernières colonnes)

Expérience 3

Voir légende figure 3b, 3c & 3d

Expérience 4

Voir légende figure 4a

Voir légende figure 5

Expérience 5

Annexe: Matériel et Méthodes