groupes sanguins examens ih v3 - extranet.chu-nice.fr · des groupes sanguins : le système abo...

TRANSFUSION

Groupes sanguins érythrocytaires

(système ABO, système RH et système KELL

Les examens en immuno-hématologie

� 1900 Landsteiner découvre le 1er système des groupes sanguins : le système ABO

� 1940 valide le système Rhésus

� 1952 Dausset met en évidence le système HLA des GB

Les groupes sanguins érythrocytaires

� Les groupes sanguins érythrocytaires sont déterminés pas des antigènes présents (ou non) à la surface des globules rouges

� Certains antigènes sont situés dans la Mb lipidique (Rhésus), d’autres dans les glycolipides sur la face externe de la Mb du GR (ABO)

Les groupes sanguins érythrocytaires

� Génétiquement induits et déterminés

indépendants les uns des autres

� Antigènes allotypiques cad caractères propres à un groupe d’individus dans une espèce donnée

� 29 systèmes de groupes sanguins liés au globule rouge

� Le plus connu et le plus ancien : le système ABO,

le plus important du fait de son implication en transfusion sanguine et pour la transplantation d’organe

--RHAG030RHAG

--GIL029GIL

--P028GLOB

--I027I

--JMH026JMH

11p15.5MER2MER2025RAPH

19p13.3CD147OK024OK

11p13CD44IN023Indian

1q32CR1KN022Knops

1q32DAFCROM021Cromer

2q14-q21GYPCGE020Gerbich

Xp21.1XKXK019Kx

19q13.3FUT1H018H

6p21.3C4A, C4BCH/RG017Chido Rodger

19p13.3LWLW016Landsteiner Wiener

7p14AQP1CO015Colton

12p12.3DODO014Dombrock

1p34SCSC013Scianna

Xp22.32XGXG012Xg

7q22.1ACHEYT011Yt

17q21-q22SLC4A1DI010Diego

18q11-q12SLC14A1JK009Kidd

1q22-q23DARCFY008Duffy

19q13.3FUT3LE007Lewis

7q33KELKEL006Kell

19q13.2LULU005Lutheran

1q36.13-q34.3RHD, RHCERH004Rh

22q11.2-qterP1P003P

4q28.2-q31.1GYPA, GYPB, GYPEMNS002MNS

9q34.2ABOABO001ABO

Localisation du gèneGène(s)SymboleNuméroSystème

Jk3JkbJkaJK09

Fy3FybFyaFY08

LebLeaLE07

KpbKpakKKEL06

LubLuaLU05

CwCeceecECDRH04

P1P103

UsSNMMNS02

A1A,BBAABO01

87654321N°

Antigènes

Tableau de concordance entre nomenclature internationale (ISBT) Tableau de concordance entre nomenclature internationale (ISBT) et et

nomenclature utilisée en France (Fischer et Race)nomenclature utilisée en France (Fischer et Race)

Le système ABO

� Le système ABO présente deux caractéristiques qui sont à l’origine des méthodes de groupage et expliquent son rôle important en transfusion et lors des transplantations :

� La présence ou l’absence des antigènes A et/ou B à la surface des GR

� La présence ou l’absence des anticorps naturels anti-A et/ou anti-B dans le plasma correspondants aux antigènes absents sur les GR

Les antigènes du système ABO

Les antigènes du système ABO

3%aucunA et BAB

43%anti-A et anti-BHO

9%anti-ABB

45%anti-BAA

Fréquence

en France

Anticorps

sériques

Antigènes

membranaires

Groupe

sanguin

Répartition des Ag ABH dans l’organisme

� à la surface des GR, PN, lymphocytes, monocytes et des plaquettes

� présents sur de nombreuses cellules de l’organisme (cellules épithéliales, endothélium vasculaire, secrétions salivaires, cellules rénales) à l’exception de l’os, des neurones et de la cornée

Les anticorps naturels,réguliers

� Naturels : Présents dans le plasma d’un sujet en dehors de toute stimulation antigénique reconnue (transfusion ou grossesse)

� Sont dirigés contre les antigènes que le sujet ne possèdent pas sur leur GR

� Réguliers : existent constamment chez les individus ne possédant pas l’antigène correspondant

� Apparaissent chez l’enfant entre 0 et 6 mois (suite à l’hétéro immunisation par les bactéries de la flore intestinale)

� Intérêt primordial en transfusion sanguine en raison du risque d’incident dès la 1ère transfusion incompatible

Les anticorps immuns, irréguliers

� N’existent pas à l’état naturel

� Apparaissent à la suite d’une immunisation préalable : grossesse ABO incompatible

Détermination du groupe ABO

Le groupage ABO repose sur deux épreuves qui doivent être concordantes :

Epreuve globulaire dite de Beth-Vincent

consiste à rechercher par une technique d’agglutination les antigènes présents sur les hématies

GR à tester (antigènes à déterminer) + sérums tests connus (anticorps monoclonaux anti-A et anti-B)

Réaction d’agglutination

Formation d’un réseau

Agglutination

Absence d’agglutination

Agglutination

Interprétation difficile :

Double population avec le sérum test anti-A

- Patient A transfusé en O

- Patient ayant subi une allogreffe de moelle (A/O ou O/A)

Détermination du groupe ABO

Epreuve sérique dite de Simonin

Consiste à identifier les anticorps naturels réguliers dirigés contre les antigènes absents

Plasma à tester (anticorps naturels) + GR tests connus

Le groupe ne sera définitif qu’à la suite de 2 déterminations réalisées à partir de 2 prélèvements sanguins différents

Groupage ABO

__++++++AB

_++++++_B

+++__+++A

++++++__O

BETH VINCENT

anti-A anti-B

SIMONIN

GR A GR B

Règles de compatibilité ABO

POUR LES GLOBULES ROUGES

� SYSTEME ABO

Ac anti-AAc anti-B

Ac anti-B

Ac anti-A pas d'Ac

A

A

B

B

OO AB AB

donneuruniversel

receveuruniversel

compatibilité

compatibilité

identité

identité

Règles de compatibilité ABO

POUR LE PLASMA

A

B

OAB

Le système RH (Rhésus)

� Système complexe de groupe sanguin

� On compte 52 antigènes appartenant à ce système

� En pratique courante seuls 5 sont à connaître :

D, C, c, E, e

� La présence de l’antigène D défini le groupe Rhésus positif (85%)

� son absence le groupe Rhésus négatif

� Le phénotype Rhésus est déterminé par la présence ou l’absence des 5 antigènes : D, C/c, E/e

Le système Rhésus comprend 52 antigènes situés sur la membrane du GR

Les antigènes

98%e (RH5)

80%c (RH4)

30%E (RH3)

70%C (RH2)

85%D (RH1)

Fréquence en FranceANTIGENES

D-C-E-c+e+ (RH : -1, -2, -3, 4, 5)D-C-E-c+e+ (RH : -1, -2, -3, 4, 5)

(0,15)

D+C-E+c+e- (RH : 1, -2, 3, 4, -5)D+C-E+c+e- (RH : 1, -2, 3, 4, -5)

(0,01)

D+C-E-c+e+ (RH : 1, -2, -3, 4, 5)

D-C-E-c+e+ (RH : -1, -2, -3, 4, 5)

D+C-E-c+e+ (RH : 1, -2, -3, 4, 5)

(0,02)

D+C+E+c-e+ (RH : 1, 2, 3, -4, 5)

D+C+E-c-e+ (RH : 1, 2, -3, -4, 5)

D+C+E+c-e+ (RH : 1, 2, 3, -4, 5)

(0,04)

D+C+E+c+e+ (RH : 1, 2, 3, 4, 5)

D+C+E-c+e+ (RH : 1, 2, -3, 4, 5)

D+C+E-c-e+ (RH : 1, 2, -3, -4, 5)

D+C-E+c+e+ (RH : 1, -2, 3, 4, 5)

D+C-E-c+e+ (RH : 1, -2, -3, 4, 5)

D+C-E+c+e- (RH : 1, -2, 3, 4, -5)

D-C-E-c+e+ (RH : -1, -2, -3, 4, 5)

D+C+E+c+e+ (RH : 1, 2, 3, 4, 5)

(0,12)

D+C-E+c+e+ (RH : 1, -2, 3, 4, 5)

D+C-E-c+e+ (RH : 1, -2, -3, 4, 5)

D+C-E+c+e- (RH : 1, -2, 3, 4, -5)

D-C-E-c+e+ (RH : -1, -2, -3, 4, 5)

D+C-E+c+e+ (RH : 1, -2, 3, 4, 5)

(0,12)

D+C+E-c-e+ (RH : 1, 2, -3, -4, 5)D+C+E-c-e+ (RH : 1, 2, -3, -4, 5)

(0,20)

D+C+E-c+e+ (RH : 1, 2, -3, 4, 5)

D+C+E-c-e+ (RH : 1, 2, -3, -4, 5)

D+C-E-c+e+ (RH : 1, -2, -3, 4, 5)

D-C-E-c+e+ (RH : -1, -2, -3, 4, 5)

D+C+E-c+e+ (RH : 1, 2, -3, 4, 5)

(0,34)

Phénotype Rhésus (RH) du CGR à transfuser par ordre

prioritaire

Phénotype Rhésus (RH) du receveur

(fréquence en France)

Les Anticorps du système Rhésus

� Toujours acquis, secondaires à une allo-immunisation, lors d’une transfusion ou d’une grossesse

� Probabilité d’apparition fonction de l’immunogénicité

� L’antigène Rh standard (D) est le plus immunogène puis dans l’ordre E, c et e

� de classe IgG, hémolysants, capables de traverser le placenta, responsables de la symptomatologie présentée par un nouveau-né Rhésus + né de mère Rhésus - : maladie hémolytique du nouveau-né

Règles de compatibilité Rhésus

POUR LES GLOBULES ROUGES

Rh + = Ag D+Rh -

Les autres systèmes érythrocytaires

� Importance transfusionnelle car certains de leurs antigènes sont fortement immunisants

� Système KELL: l’Antigène K est un puissant immunogène pour les sujets K- (91% de la population K-)

� Système Duffy : antigène Fya et Fyb

� Système MNS : antigène S et s

� Système Kidd : antigène Jka et JKb

Les autres systèmes érythrocytaires

L’absence d’un Antigène dans l ’un de ces systèmes ne s’accompagne pas d’anticorps naturels, comme dans le système ABO, mais une transfusion ou une grossesse peuvent provoquer la formation d’anticorps immuns (allo-immunisation) responsables ultérieurement d’accidents transfusionnels ou de MHNN

Les examens immunohématologiques

� Groupage ABO RH1 (RhD)

� Phénotypage RH et Kell

� Phénotypage étendu

� Recherche d’anticorps irréguliers (RAI)

� Epreuve de compatibilité au laboratoire

� Tests de Coombs

� Exigences relatives aux échantillons : Qualité et quantité :

5Test de Coombs Direct (TCD)

1010AHAI : TCD–Elution–Hémolysine–AF-RAI

5Bilan de maladie hémolytique du nouveau-né

55Bilan de réaction transfusionnelle

5Test de Kleihauer

15Titrage et dosage pondéral anti-RH1

5ABO.RH1 et RH.K et RAI chez le nouveau-né

5RAI chez le nouveau-né

5ABO.RH1 et RH.K et RAI chez l’adulte

5RAI chez l’adulte

5Groupe ABO.RH1 et phénotype RH.KEL1

Nombre de ml sur tube sec ou

anticoagulant

Nombre de ml sur anticoagulantType d’analyse

-Identification du patient : Nom patronymique / Nom marital / Prénom(s) / Date de naissance / Sexe.

� Exigences relatives aux documents accompagnateurs :-Etablissement de soins : service demandeur / ligne téléphonique directe

-Prescripteur : nom, signature du médecin prescripteur, date de prescription

-Préleveur : nom et qualité du préleveur, signature, date et heure du prélèvement

-Identification du patient : nom patronymique, nom marital, sexe et date de naissance

-Nature des analyses demandées-Renseignements cliniques éventuels

-Si une transfusion est envisagée, date et heure prévues, niveau d’urgence.

Les examens immunohématologiques

Groupage ABO RH1

� correspond à la détermination du groupe ABO indissociable de la recherche du Rhésus standard D

� le groupage est considéré comme définitif si les résultats sont concordants sur deux déterminations sur 2 prélèvements différents

� Contexte pré-transfusionnel avéré ou potentiel et contexte périnatal

� La transmission électronique des résultats est la règle pour la délivrance des PSL

Phénotype Rhésus Kell

� Recherche grâce à l’utilisation de sérums tests anti-C, anti-E, anti-c, anti-e et anti-K la présence ou l’absence à la surface des hématies des 5 antigènes suivants : C (RH2), E (RH3), c (RH4), e (RH5) et K (KEL1)

� Contexte prétransfusionnel avéré ou potentiel

� Contexte pré et périnatal

� Validation de l’identification d’anticorps anti-érythrocytaires

Phénotype étendu

� Recherche de la présence ou l’absence des antigènes : Jka, Jkb (système Kidd), Fya, Fyb(système Duffy), S, s (système MNS)

� Champ d’application :

- patient présentant un anticorps irrégulier dans l’un des systèmes concernés

- à titre préventif chez patients devant recevoir des transfusions itératives

- patients en instance de greffe

Recherche d’Anticorps Irréguliers (RAI)

NB : Les anticorps immuns sont décelables avec un maximum de probabilité du 7ème au 15ème jour après la transfusion

� Examen consistant à dépister et identifier les anticorps dirigés contre les antigènes érythrocytaires autres que A et B dans le sérum à étudier grâce à une gamme d’hématies tests

� Délai de réalisation de 45 mn à plusieurs heures

� Validité 72H

Recherche d’Anticorps Irréguliers (RAI)

Champ d’application :

� Obligatoire chez tout patient susceptible d’être transfusé

� Contexte de greffe ou de transplantation

� Contexte pré ou périnatal

� Chez le patient transfusé itératif en bonne place au cours des séries de transfusion

� Chez le patient transfusé dans le cadre du suivi post-transfusionnel (dans un délai de 1 mois après le dernier épisode transfusionnel)

CAT en cas d’urgence hémorragique

Urgence vitale immédiate : distribution sans délai

Prélèvement 2 déterminations groupe + RAI

pas de groupe ni de RAI si non disponibles

CGR O sans hémolysines

Urgence vitale : délai de distribution inférieur à 30 minutes

Prélèvement 2 déterminations groupe + RAI

pas de RAI si non disponible

nécessité de groupe ABO conforme

Urgence « relative » : délai de distribution de 2 - 3 heures

Prélèvement 2 déterminations groupe + RAI

nécessité de groupe et RAI conformes

CHOIX DES CGR EN URGENCE VITALE

Dans le cadre d’un dépôt d’urgence ayant en stock des CGR :

O- (D-C-E-c+e+K-) non réservé à la transfusion isogroupe

O+ (D+C+E-c-e+K-) non réservé à la transfusion isogroupe

En fonction de D et Rhésus-Kell

O-D-C-E-c+e+K-connu : C-D positif

O+D+C+E-c-e+K-connu : C+D positif

O+D+C+E-c-e+K-non connuD positif

O-D-C-E-c+e+K-connu ou nonD négatif

O-D-C-E-c+e+K-non connuD non connu

Rhésus KellD

CGR à transfuserPatient

Epreuve directe de compatibilité au laboratoire EDCL

� Qualification biologique du don� Consiste à tester le sérum du receveur vis-à-vis du CGR à transfuser (l’objectif étant de détecter certains Ac masqués par la présence d’autres Ac, ou des Ac rares)

� Validité 72H� Champ d’application :Receveur présentant ou ayant présenté un ou plusieurs allo-anticorps anti-érythrocytairesNouveau-né présentant un test de Coombs positif ou né de mère allo-immunisée

Test de Coombs

� Permet la mise en évidence de la sensibilisation in vivo des hématies humaines par des anticorps grâce à l’utilisation d’un réactif appelé antiglobuline humaine

� Champ d’application :

Maladie hémolytique du nouveau-né

Incident transfusionnel

Anémie hémolytique autoimmune

Recherche d'anticorps fixés sur les hématiesRecherche d'anticorps fixés sur les hématies

Ac non spontanémentagglutinables

Hématies fœtalesayant fixé l'Ac

complexe agglutinant

+ anti-gammaglobulines humaines