accréditation de l'ecbu

Dr Frédérique Canis

CH Valenciennes

Paris 19 juin 2015

ACNBH

ODPC N

1495

DECLARATION D’INTERET DANS LE CADRE DE MISSIONS DE FORMATION

REALISEES POUR L’ACNBH

XXème Journée du COL.BVH Les infections urinaires

Paris 19 juin 2015

Aucun conflit d’Intérêt

Pré analytique Critique

Processus Analytique Complexe

Ensemencement manuel– ensemenceur

Cytologie microscope -automatisée

Examen microscopique coloration manuelle - colorateur

Lecture des milieux de culture (24h, 48h)

Dénombrement bactérien

Identification : galerie- automate milieu liquide-SM

Antibiogramme: milieu liquide-milieu solide

Post analytique Compétence d’un biologiste qualifié

Résultat validé,

interprété communiqué

Patient

Processus ECBU

SH INF 50

ECBU=BA1+BA2+BA3+BA5+BA6

Domaine Biologie Médicale Sous domaine Microbiologie Famille Bactériologie BACTH

Examen de biologie Médicale (EBM)

et NABM

Code 5201: ECBU

Code 0219: Cytologie urinaire

Code 0214 : Identification d’une bactérie

Code 0269: Antibiogramme d’une bactérie

Accréditation Microbiologie 1 Les référentiels et les outils

La norme ISO EN 15189, les SH REF 02, 04, 08 (opposables)

SH GTA 04, SH GT 06

SH FORM 43

SH INF 50

Publications - documents fournisseurs

Matière première

Respect des conditions préanalytiques

(Prescription, recueil, délai d’ acheminement , conservation,

critères d’acceptation, renseignements

Cliniques) Enregistrement

Conservation des souches

Matériel

Raccordement métrologique

Vérifications / Validations Réactifs et consommables,

PSM, microscope, automates, colorateur

Connexions automates-SIL Gestion du SIL

Méthode

Respect des Instructions Inoculum standardisé

Durée d’incubation Dénombrement

Identification Interface J0/J1/J2 CIQ/EEQ

Réalisation et interprétation des d’antibiogrammes

Echantillon primaire Rapport d’analyse

Satisfaction du client Milieu

Consignes de sécurité, Environnement de travail

(température d’ambiance

Stockage des réactifs)

Main d’œuvre

Qualification, Formation Habilitation

Réhabilitation Evaluation

Maintien des compétences Communication- Conseil

2 ANALYSE DES RISQUES EN MICROBIOLOGIE

Préanalytique Analytique Post analytique

Indice de criticité (Ic) A chaque risque identifié: attribution d’un indice de criticité Ic permettant de prioriser les actions à réaliser en fonction de la valeur Ic.

Fréquence (F) = 1 < 1 an, 2 2x/an, 3 >3/an

Gravité (G)= 1 (sans incidence), 2 (incidence probable), ou 3 (incidence certaine)

Détectabilité (D)= 1 (facilement détectable), 2 (détection possible), ou 3 (indétectable)

Ic= F x G x D

3) Phase Pré analytique: CRITIQUE 1)Prescriptions

Identito-vigilance, grossesse en cours, TT ATB ou ATF

Signes cliniques d’infection urinaire: fièvre, frissons, douleurs fosses lombaires

Notion d’hospitalisation récente, vie en institution, anomalie fonctionnelle ou anatomique (sonde de Bricker, ID,..)

Patient ambulatoire: grille de questions pertinentes, confiées au patient

Mode de recueil: miction de 1er jet, milieu de jet, SAD, sondage, dispositif collecteur (poche collecteur, collecteur pénien, urétérostomie, KT sus pubien à demeure)

Urgence

Phase Pré analytique 2)Prélèvements

Méthode et dispositif adapté à l’âge et au patient

Désinfection adaptée

Tube de prélèvement(s) avec ou sans conservateur/ niveau remplissage

manuel de prélèvement, fiches d’instructions préleveurs, fiches d’informations aux patients, bon de prescription

Traçabilité des RC obtenus

Phase Pré analytique: 3)Conservation -Transport au laboratoire

Respecter les délais et températures de conservation avant analyse

Heure de prélèvement

2 h Température ambiante (15-25°C) et 24h entre 2-8°C (SC)

48 h sur conservateur (AB) ?

Niveau de remplissage (AB)

Prestation Conseil

Maitrise et Evaluation des récipients

4) Phase analytique Cytologie urinaire M/A

Examen microscopique après coloration Gram

Ensemencement M/A sur gélose chromogène, BCP, GS, durée incubation-Dénombrement bactérien

Identification bactérienne

Antibiogramme D/A

Dossier de Vérification des méthodes (Portée A)

Bon sens Utiles

Réfléchis

Pertinents

Argumentés

Dossier de Vérification de Méthode

DEFINIR CES OBJECTIFS Cytologie automatisée (MA):

Vérifier les données fournisseurs, standardisation , résultats plus reproductible qu’une technique manuelle

Absence de différence d’interprétation de l’ECBU entre les méthodes utilisées (surtout autour du seuil décisionnel 10 GB/µL)

Concordance clinique (méthodes avec des seuils ≠) Cytologie microscope (MM)

Variation cliniquement non significative des résultats inter opérateur

Evaluation des discordances inter opérateurs autour de la valeur seuil décisionnelle

Sous-processus

Cytologie Modalités de vérification :

Eléments à vérifier (argumentation)

Cytologie automatisée:

Hématies et

Leucocytes

Quantitatif

Répétabilité E Essai sur site

Fidélité intermédiaire E CIQ fournisseur / commercialisé

Variabilité inter-opérateurs Non Adapté

Justesse Non adapté sauf si (CIQ externalisé)

Exactitude E Résultat EEQ

Sensibilité et spécificité

analytique B Bibliographie

Incertitudes E A évaluer autour du seuil ou à

calculer CIQ+EEQ

Etendue de mesure B Qualification (données fournisseurs)

Comparaison de méthodes E

Méthode précédente /miroir/ Back up

+ analyse des discordances et

interprétation avec la culture

Interférences E Essai sur site

Contamination E Essai sur site

Robustesse et fiabilité des

réactifs Non pertinent portée A

Intervalle de référence B Valeurs seuils automate

SH FORM 43

Sous-processus

Cytologie Modalités de vérification :


Cytologie

automatisée: Cylindres,

cellules,

cristaux, ,

bactéries

Qualitatif

Répétabilité Non pertinent (sauf qualification de

l’automate)

Fidélité intermédiaire Pas de CIQ

Variabilité inter-opérateurs Non Adapté

Justesse Non adapté

Exactitude Pas d’ EEQ



Incertitudes Analyse de la Maitrise des risques

Etendue de mesure B Qualification (données

fournisseurs)

Comparaison de méthodes E Méthode précédente /miroir/ Back

up + analyse des discordances

Interférences E Essais sur site

Contamination E Essais sur site


réactifs Non pertinent

Intervalle de référence B Valeurs seuils automate

SH FORM 43

Sous-processus

Cytologie Modalités de

vérification :


Cytologie

Microscope

Répétabilité

Fidélité intermédiaire

Variabilité inter-

opérateurs E

Essai sur échantillons, CIQ

commercialisé





Incertitudes E Evaluation Inter opérateur autour de la

valeur seuil

Etendue de mesure Non pertinent portée A

Comparaison de

méthodes E

Méthode précédente /miroir/ Back up +

analyse des discordances et

interprétation avec la culture et SC

Interférences Non adapté

Contamination X Instruction -Habilitation Personnel



Intervalle de référence Non pertinent

QUAMIC:

Qualitatif

n

échantillons

Opérateur 1

GB/µl POS >10 NEG <10 Total

Opérateur 2 POS > 10 a b n1.

NEG < 10 c d n2.

Total n.1 n.2 n

Qualitatif: Comparaison 2 opérateurs

Vérification des concordances

Sous-processus

Cytologie Modalités de

vérification : Eléments à vérifier (argumentation)

Cytologie

Microscope

Répétabilité E GR et GB


Variabilité inter-opérateurs E Echantillons, CIQ commercialisé





Incertitudes E Evaluation Inter opérateur autour

de la valeur seuil

Etendue de mesure Non pertinent portée A

Comparaison de méthodes E

Méthode précédente /miroir/ Back

up + analyse des discordances et

interprétation avec la culture et SC


Contamination +/- Habilitation Personnel



Intervalle de référence Non pertinent

CH

Valenciennes

Quantitatif: GR/GB

Quantitatif : Variabilité Inter-opérateurs

SHGTA04

Comparaison de la variabilité inter opérateurs (CV) et celui d’un référent (CV de la répétabilité) Un rapport proche de 1= bonne concordance entre les opérateurs (robustesse)

Analyse de la variance appliquée aux résultats obtenus par n opérateurs (test Anova)

40 échantillons sélectionnés GB situés entre 8 et 15 éléments/µl -Comparaison technique 1 et 2 -Comparaison opérateur 1 et 2

Technique Manuelle

GB<10/µl GB≥10/µl Echantillons

Méthode

automatisée

GB<10/µl

20 7 27

GB≥10/µl

5 12 17

Echantillons

25 19 44

Discordance inter techniques = 27% Discordance Interopérateurs = 26%

Zone d’incertitude (zone grise) entre 8 et 10 GB/µL

Détermination d’une zone d’incertitude autour de la valeur seuil 10 GB/µL CHV

Dossier de Vérification de Méthode

DEFINIR CES OBJECTIFS Ensemencement et culture

Utilisation des milieux de culture : adaptés au patient, cytologie (gélose chromogène, BCP, GS),

Respects des durées et atmosphère d’incubation Obtention de colonies bien différenciées Variation non significative du dénombrement inter opérateur

(log)

Identification et Antibiogramme Inoculum mono microbien et standardiser Absence de discordances dans l’Interprétation des ATBg

(S,I,R)

Sous-processus Modalités de vérification :


Ensemencement

et culture

Méthode

manuelle

Qualitatif

Répétabilité


Variabilité inter-opérateurs XXX Essai sur site (dénombrement

Log)




analytique B

Doc fournisseurs, bibliographie,

REMIC


Etendue de mesure Non pertinent

Comparaison de méthodes E si ensemenceur


Contamination X Habilitation Personnel PSM



Intervalle de référence B Seuils cliniques REMIC



Identification (Automate,

galeries, SM..)

Qualitatif

Répétabilité Non pertinent (sauf qualification)

Fidélité intermédiaire E CIQ Souches ATCC

Variabilité inter-opérateurs Non pertinent






Etendue de mesure Non adapté

Comparaison de méthodes E Autre méthode /Back up


Contamination xx Pureté de la culture


réactifs E

Essai sur site (milieux, âge des

cultures)

Intervalle de référence

Non adapté



Antibiogramme

Méthode

Diffusion

Répétabilité Non pertinent

Fidélité intermédiaire E CIQ souches ATCC

Variabilité inter-opérateurs E Essai sur site





Incertitudes Maitrise des risques: Inoculum,

harmonisation des Interprétations

Etendue de mesure Non adapté en diffusion

Comparaison de méthodes E Technique automate ou CMI/

interprétation des discordances et

CAT


Contamination X Pureté de la culture


réactifs E Essai sur site (âge des cultures)

Intervalle de référence B CASFM EUCAST de l’année

5) Phase post analytique

Vérification des données saisies en mode manuel Validation biologique de tous les résultats avant diffusion (partiels et

complets)

Interprétation des résultats en fonction: Terrain, âge, Signes cliniques Non-conformité pré analytique (délai d’acheminement) Leucocyturie /bactériurie/microorganismes (« zone grise») Antibiogramme CASFM- EUCAST 2014 : amox-clav cystite Cc =32 mg/l,

BMR Harmonisation des interprétations par les biologistes habilités

Prestation Conseil Maîtrise de la diffusion des CR: Papier- Serveur-Fax-Tel

Contrôle de coloration (Gram) lames préparées ou commercialisées G+/G-/

Cytologie urinaire Automatisée (fournisseurs, CIQ externalisé): encadrer les séries/ période

probatoire/av et ap maintenance (aiguille/calibration) Microscope :CIQ, comparaison inter opérateur Comparaison MA/MM sur échantillon avec des critères de concordance cliniques

Ensemenceur CIQ fournisseur ou CIQ externe (à 10

3 UFC/ml )

Milieux de culture Certificat de conformité des lots/fiches de stress

Identification et antibiogramme Souches ATCC ou de référence (E coli, S Saprophyticus a minima)

Préconisation fournisseur, adapter à l’ensemble des méthodes Intégrer test d’orientation CIQ du système d‘ajustement de l’inoculum Souches phénotypes sauvages et résistants, BLSE+

CAT en cas de CIQ Non Conforme/ ré analysé/ Etude d’impact/ courrier clinicien etc ..

6) Contrôles Internes de qualité

7) Evaluation Externe de la Qualité

Choisir un OCIL adapté aux techniques utilisées (groupe des pairs) Un EEQ peut contrôler plusieurs méthodes partageant le même point critique

Un EEQ peut partager plusieurs points critiques

AGLAE ASSOCIATION BIOLOGIE PRATICIENNE ASQUALAB BIOLOGIE PROSPECTIVE CTCB COLBVH EUROCELL ONERBA PROTOCOLES NATIONAUX

Utiliser les EEQ dans le suivi et le maintien des compétences

CAT en cas d’anomalie des résultats des EEQ (Formaliser et tracer les mesures prises en cas de résultats discordants).

CONCLUSION Identifier et maîtriser les risques à chaque étape du

processus

DV: Définir des objectifs simples, pertinents et utiles

Méthode automatisée: maitrise de l’automate, en connaitre ces limites et définir des CAT adaptées.

Méthode manuelle: variabilité inter opérateur

Prioriser l’interprétation et le conseil clinique en fonction des résultats analytiques ET des conditions Préanalytiques

Merci de votre attention

accréditation de l'ecbu

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