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LE MEILLEUR DE LA CROI 2013 - VIROLOGIE

Marie Leoz 12 avril 2013

Qu’est-ce que le réservoir?

Caractérisation des cellules réservoirs

Réservoirs, Persistance et Eradication

Caractérisation des cellules réservoirs

Stratégies de traitement précoce

Stratégies de réactivation du provirus latent

Stratégies d’intensification du traitement


� Plusieurs types cellulaires infectés, majoritairement LT

CD4+

� LT CD4+ activé

� Principal type cellulaire infecté en l’absence d’ART

Siliciano, abs 16

� Forte prolifération

� Forte production virale

� Faible durée de vie

� LT CD4+ mémoire

� Peu ou pas d’expression virale

� Durée de vie très longue

� Possibilité de réactivation


� Sous ART, les virions ne peuvent plus infecter de nouvelles cellules, mais les CD4 activées infectées produisent toujours des virions

� La chute de la CV correspond dans un 1er temps à la disparition des cellules CD4 activées infectées,

� ART, Charge Virale et cellules infectées

la disparition des cellules CD4 activées infectées, qui est rapide (demi-vie = 1 jour!)

� Une deuxième phase de réduction de la charge virale, plus lente, correspond à la disparition d’autres types cellulaires infectés

� La présence de LT CD4+ mémoires infectés quiescents empêche la clairance totale du réservoir

� La réactivation occasionnelle de ces cellules entraîne une production virale et une CV résiduelle

Siliciano, abs 16


� Réservoir passif : pas de nouvelles infections, le provirus persiste dans les cellules infectées sous forme infectées sous forme latente

VS� Réservoir actif : un

faible niveau d’expression virale résiduelle entraîne de nouvelles infections à bas bruit

Stevenson, abs 2

Caractérisation des cellules réservoir

� Les CD4 mémoires sont rares parmi les PBMCset ne produisent pas de protéines virales du fait de la latence� Difficile de les identifier!

� Comparaison du profil d’expression de ces cellules par rapport aux mêmes populations non infectéescellules par rapport aux mêmes populations non infectées

� L’expression de nombreux gènes est modifiée dans les cellules infectées de façon latente

� Parmi eux, 33 marqueurs de surface

� En particulier, le récepteur de surface CD2 est surexprimé dans les cellules infectées� Outil potentiel pour cibler ces cellules ou étudier

leur évolution lors de l’évaluation de vaccins ou traitements

Iglesias-Ussel, abs 45


� Buzon, abs 44: Les LT CD4+ Memory Stem Cells(« cellules souches » mémoires) sont une sous-population réservoir majeure

� Sous-population de LT CD4+ mémoires

� La moins différenciée

� Fort potentiel de prolifération

� Permettent la production de

nouvelles cellules mémoires

différenciées après stimulation

antigénique

� Très susceptibles à l’infection VIHTN = Naive Cells

TSCM = Memory Stem Cells

TCM = Central Memory Cells

TEM = Effector Memory CellsBuzon, abs 44


� Les LTSCM représentent une faible portion des LT CD4+ mémoires mais sont plus fréquemment infectées

� Leur contribution au réservoir � Leur contribution au réservoir VIH augmente sous ARV, du fait d’une persistance à long terme de ces cellules comparées aux autres sous-populations de LT CD4+ mémoires

Buzon, abs 44


� Il n’y a pas que les CD4+ mémoires dans le réservoir!!!

� Yukl, abs 372 : A Comparison of MethodsUsed to Measure Rectal HIV Levels SuggestsUsed to Measure Rectal HIV Levels Suggeststhat HIV DNA Resides in Cells Other thatCD4 T Cells, Including CD45+CD13+ Cells

� Cellules de la lignée Granulocyte/Monocye (GM)

� Sans doute d’autres compartiments supplémentaires car

ADNCD4 + ADNGM < ADNtotal


� Soriano-Sarabia, abs 46: Etude du rôle de réservoir des LTγδ et des LT CD4+ mémoire transitionnels (TTM)

� LT γδ = environ 1% des LT� Susceptibles à l’infection par le VIH malgré un

profil principalement CD3+ CD4-profil principalement CD3+ CD4-

� L’expression du CD4 peut être induite chez ces cellules par l’IL-2

� Phénotype « mémoire » : peuvent persister à très long terme

� Très forte proportion de cellules infectées dans ce compartiment comparé aux LT CD4+ mémoires


� LT CD4+ TTM = phénotype intermédiaire entre mémoire centrale et mémoire effective

� Précédemment démontrés comme réservoir majeur (quantification de l’ADN proviral)

� Sorano-Sarabia démontre… le contraire! (production de virus replication-compétent)


�Caractérisation du réservoir: bilan� Extrêmement complexe!

� De nombreux compartiments non suspectés

� Des données contradictoires

� Des outils en cours de développement

Stratégie n°1…

� Empêcher – réduire – l’établissement du réservoir???

� Stratégies de traitement précoce

� Chez le patient en primo-infection

� Dans le cadre de la TME

Traitement précoce

� Ananworanich, abs 47: Traitement précoce chez des patients en phase Fiebig I à III (infection < 3 semaines)

Traitement précoce

� Réduction de l’ADN viral total à un niveau proche de celui des Elite Controllers

� L’ADN intégré devient indétectable chez 93% des patientspatients

� Comme pour les ECs, les cellules T mémoires dans lesquelles on retrouve de l’ADN intégré sont préférentiellement les TTM et TEM (vs TCM dans les infections chroniques habituelles)

Ananworanich, abs 47

TN = Naive Cells

TSCM = Memory Stem Cells

TCM = Central Memory Cells

TTM = Transitional Memory Cells

TEM = Effector Memory Cells

TTM

Traitement précoce

� Luzuriaga, abstract 171LB : Traitement précoce chez des enfants nés de mère VIH (avant l’âge de 2 mois)

Traitement précoce Traitement plus p=Traitement précoce

(n=5)

Traitement plus

tardif (n=4)

p=

Patients avec anticorps anti-HIV et réponse spécifique LT CD8+

1/5 4/4 0,048

Patients avec CV résiduelle détectable (CV médiane en cop/mL)

1/5 (0) 4/4 (8) 0,048

Nb médian de copies d’ADN proviral par million de PBMCs [extrêmes]

7 [0 - 15] 182 [69 - 345] 0,014

Patients présentant VIH compétent pour la réplication dans les LT CD4+

0/5 4/4 0,002

Traitement précoce

� Persaud, abstract 48LB : Traitement à 30 heures de vie chez un bébé né de mère HIV –et cure fonctionnelle (!)

• Enfant né à 35 semaines de gestation par voie naturelle : • Enfant né à 35 semaines de gestation par voie naturelle : – Test rapide de dépistage du VIH réalisé au cours du travail positif chez

la mère (CV = 2 423 c/ml)– Pas d’administration d’ARV pendant la grossesse, ni au cours du travail

• Transfert dans les 30 heures dans un service spécialisé – ARN et ADN VIH positifs (infection confirmée à J2, J7, J12 et J20)– Début des ARV : ZDV/3TC/NVP à la 31e heure jusqu’à 7 jours puis

ZDV/3TC/LPV/r de 7 jours à 18 mois

Traitement précoce

� Enfant perdu de vue à l’âge de 18 mois : arrêt des ARV

� De nouveau pris en charge à 24 mois : � CV indétectable sans ttt

� ELISA négatif

� ADN VIH indétectable

Controverse!� Controverse!� Mère non traitée?

� Faible CV� Atcd inconnus� Pas de dosages d’ARV

� Bébé pdv 6 mois

� Encore peu de recul� Arrêt des ARV depuis 8 mois

Persaud, abs 48LB

Stratégie n°2…

�Réservoir établi… faire sortir le loup du bois???

� Stratégies de réactivation du provirus

latent

Réactivation du provirus latent

� Réactiver l’expression virale pour exposer les cellules infectées au système immunitaire (« shock&kill »)

� La latence du provirus est liée à différents mécanismes, dont la séquestration de facteurs cellulaires de la voie NFκB

� La piste des HDACi: Vorinostat (SAHA) et Romidepsine, qui � La piste des HDACi: Vorinostat (SAHA) et Romidepsine, qui inhibent les Histones Déacétylases (HDAC), régulateurs d’expression génique

Elliott, abs 50B


� Elliott, abs 50LB : The Safety and Effect of Multiple Doses of Vorinostat on HIV Transcription in HIV+ Patients Receiving ART

� Vorinostat induit une augmentation de l’expression des Vorinostat induit une augmentation de l’expression des ARNm viraux mais pas de réduction de l’ADN viral dans les LT CD4+

Elliott, abs 50B


� Wei, abs 376 : Histone Deacetylase InhibitorRomidepsin Induces HIV in CD4 T Cells from ART-suppressed Subjects at Concentrations Achieved by Clinical Dosing

� Efficacité in vitro et ex vivo pour induire une augmentation � Efficacité in vitro et ex vivo pour induire une augmentation de l’expression des ARNm viraux

� Réactiver la transcription des ARNm viraux suffit-il à exprimer les protéines virales? Produire des virions?? Tuer la cellule???


� Cillo, abs 371 : Only a small Fraction of HIV-1 Proviruses in Resting CD4 T CellsCan be Induced to Produce Virions ex vivo with anti-CD3/CD28 or Vorinostat� fPVE= Fractional Provirus Expression (% de

provirus induits par traitement ex-vivo) provirus induits par traitement ex-vivo)

� Ho, abs 43 : Characterization of Non-Induced HIV-1 Proviruses Dampens the Hope for HIV-1 Eradiaction� La majorité des Provirus non-induits est

défective (délétions, hypermutations…)� Mais une fraction est intacte et compétente

pour la réplication


� Qu’est-ce qui bloque l’induction de ces provirus compétents?

� Méthylation des LTR?

� Site d’insertion?

� Pas d’après cette étude… mais encore une fois il y a controverse (abs 375)

Ho, abs 43

Stratégie n°3…

�Cibler le réservoir « actif »

� Stratégies d’intensification du traitement

Intensification du traitement

� Objectifs :

� Bloquer l’infection de nouvelles cellules : action sur le maintien du réservoir

� Réduire les perturbations immunitaires et le risque cardio-vasculaire causés par la présence résiduelle du virus


� Hatano, abs 42: Increase in 2-LTR circles after RAL Intensification in HAART-suppressed Patients with High CD4 T Cell CountsCD4 T Cell Counts

� Malgré la CV indétectable, l’augmentation des formes circulaires à 2 LTR lors de l’intensification du traitement par inhibiteur de l’intégrase confirme l’existence d’infections de novo


� Pas d’effet néanmoins sur:� La quantification ultra-sensible de

la CV� Le niveau d’ADN et d’ARN viral

dans les cellules� La fonction cardio-vasculaire� La fonction cardio-vasculaire� Le niveau d’IL-6 (associé au risque

cardio-vasculaire)

� Mais réduction du niveau de D-dimer (associé au risque cardio-vasculaire, évènements thrombo-emboliques veineux et ostéonécrose)

Hatano, abs 43


� Katlama, abs 170aLB : Impact of IL-7 and RAL+MVC intensification on total HIV DNA reservoir: Resultsfrom ERAMUNE 01� Combiner une stratégie de

réactivation du provirus latent (IL-7) à réactivation du provirus latent (IL-7) à une stratégie d’intensification (inhibiteurs d’entrée et d’intégration)

� Pas de réduction de l’ADN viral par millions de PBMCs (et même une augmentation dans le bras IL-7! A favorisé la prolifération des TCM, réservoir important)

Les réservoirs sont complexes et en cours de caractérisation

Réservoirs, Persistance et Eradication : BILAN

caractérisation

Le traitement précoce peut réduire l’établissement du réservoir

La réactivation du provirus latent est encore peu efficace et les causes restent à explorer

L’intensification du traitement permet de réduire les infections de novo mais pas encore la taille du réservoir

Nouveautés sur les molécules actuelles

Nouvelles molécules

AntiRétroViraux

Nouvelles molécules

Les cibles thérapeutiques du futur!

Nouveautés sur les molécules actuelles

Hépatite C

Contexte

� HIV et HCV : de nombreux points communs au niveau de l’histoire comme du cycle viral

Schooley, abs 5

Contexte

� Genotypes 1a et 1b:

� Les plus répandus aux US et en Europe

� Plus difficiles à traiter par INF et RBV que les génotypes 2 ou 3

Schooley, abs 5

génotypes 2 ou 3

Contexte

Schooley, abs 5

Contexte

� Facteurs d’échec:

� Génotype viral : 1 et 4 vs 2 et 3

� Génotype du patient : IL28B

Schooley, abs 5

Contexte

� DAA : Direct Acting Antiviral

� Ciblent les protéines virales

� Ex d’IP: Telaprevir (TVR)

Schooley, abs 5

Contexte

� DAA sans IFN

� Différentes cibles : combinaisons possibles

� Avec ou sans Ribavirine?

Schooley, abs 5

NS5A +

Protéase

Contexte

� Nouvelles molécules pan-génotypiques

Schooley, abs 5

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